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Microscopio

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son


demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el
primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento
ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por refraccin. Cualquier microscopio
requiere de una fuente (como un haz de fotones o de electrones), una
muestra sobre la que acta dicha fuente, un receptor de la informacin
proporcionada por la interaccin de la fuente con la muestra, y un
procesador de esta informacin (en general, un ordenador).
Tipos de microscopios:
Microscopio electrnico de barrido.
Microscopio ptico
Microscopio simple
Microscopio compuesto
Microscopio de luz ultravioleta
Microscopio de fluorescencia
Microscopio petrogrfico
Microscopio en campo oscuro
Microscopio de contraste de fase
Microscopio de luz polarizada
Microscopio con focal
Microscopio electrnico
Microscopio electrnico de transmisin
Microscopio electrnico de barrido
Microscopio de iones en campo
Microscopio de sonda de barrido
Microscopio de efecto tnel
Microscopio de fuerza atmica
Microscopio virtual
Microscopio de antimateria
Microscopio rectal
Microscopio nuclear



Partes:
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen
del objetivo.
El TUBO PTICO: se puede acercar o alejar de la preparacin mediante
un TORNILLO MACROMTRICO o de grandes movimientos que sirve para
realizar un primer enfoque.
BRAZO: Es una pieza metlica de forma curvada que puede girar;
sostiene por su extremo superior al Tubo ptico y en el inferior lleva
varias piezas importantes.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de
sta.
PINZAS DE SUJECION: Parte mecnica que sirve para sujetar la
preparacin. La mayora de los microscopios modernos tienen las pinzas
adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance
longitudinal y transversal de la preparacin.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin. El condensador de la parte de abajo tambin se llama
FOCO y es el que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Micromtrico que aproxima el enfoque y
micromtrico que consigue el enfoque correcto.
BASE: Sujecin de todo el microscopio.
Sobre la PLATINA se coloca la preparacin que se va a observar con un
Orificio central por el que pasa la Luz procedente del Espejo. El ESPEJO con
una cara plana y otra cncava, est montado sobre un eje giratorio
ubicado en la zona ms inferior del brazo por debajo de la Platina.

El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como
lo es el microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:
MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y
objetivos) para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las
muestras apropiadas para su observacin sern aquellas que dejen pasar
luz a travs de ellas, debern de ser monoculares.
MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene
por reflexin de la luz que incide sobre la muestra, posee un inversor que
permite observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de
conjunto, debido a su gran campo; por ejemplo: se puede observar una
mosca completa, mientras que en microscopio compuesto, slo sera
posible ver las alas y stas por ser muy transparentes. La visin
estereoscpica o sensacin de relieve se obtiene cuando cada ojo recibe
una imagen por separado captada por cada sistema ptico
prcticamente cada ocular constituye un microscopio compuesto
independiente.
Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos
considerar que bsicamente estn constituidos por 3 sistemas:
a) Sistema mecnico;
b) Sistema de iluminacin;
c) Sistema ptico.

a) SISTEMA MECNICO
Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la
fuerza de luz.
Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos
macromtricos y micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el
microscopio.
Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el
orden de centmetros.
Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de
milmetros.
Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al
condensador y al diafragma
Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos.
Revlver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X)

b) SISTEMA DE ILUMINACION
CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que
puede subir o bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos
provenientes de la fuente luminosa situada en la base del microscopio a fin
de iluminar el campo visual.
Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una
abertura regulable por medio de una placa lateral que va a controlar la
cantidad de luz que saldr hacia el condensador.
Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es
generalmente una lmpara integrada a la base.

c) SISTEMA OPTICO
Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta
en diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e
Inversin (100 X).
NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque
para su utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y
la preparacin.
La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X
en aceite de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra.
Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est
localizada en la parte superior del tubo del microscopio.
NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente,
significa que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el
aumento de la lente ocular, para as obtener el aumento total alcanzado
por el juego de lentes.



CUIDADO
1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con
la mano izquierda la base.
2. El cordn se deber enrollar sobre s mismo, no alrededor del cuerpo del
microscopio.
3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.
4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la
observacin de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras
no se observe, se disminuir la intensidad luminosa.
5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier
movimiento brusco.
6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.
7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el
objeto de menor aumento.
8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los
dedos.
9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.
10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao
suave o con un papel higinico.
11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con
cubreobjetos.
MANTENIMIENTO GENERAL DEL MICROSCOPIO
El mantenimiento del microscopio implica mucho cuidado, paciencia y
dedicacin.
Procedimientos de limpieza.
La limpieza del microscopio es una de las rutinas ms importantes y debe
considerarse un procedimiento rutinario. Para realizar la rutina de limpieza
se requiere lo siguiente:
Materiales:
1. Una pieza de tela limpia, de textura similar a la de los pauelos.
2. Una botella de lquido para limpieza de lentes. Se consigue en las
pticas. Normalmente no afecta los recubrimientos de los lentes y
tampoco afecta los pegantes o cementos utilizados para el montaje de los
mismos. Entre los lquidos de limpieza ms utilizados se encuentran el etil
ter, el xileno y la gasolina blanca.
3. Papel para limpieza de lentes. Se consigue normalmente en las pticas.
Si no es posible conseguir este material, se puede sustituir con papel
absorbente suave o con algodn tipo medicinal. Tambin puede utilizarse
un trozo de seda suave.
4. Una pieza de gamuza muy fina. Se puede conseguir en peleteras.
5. Una pera de caucho para soplar aire. Se puede fabricar en el
laboratorio un dispositivo con este propsito, acoplando una pipeta tipo
Pasteur, con la pera de caucho.
6. Una cubierta plstica. Se utiliza para proteger el microscopio del
ambiente externo cuando no est en uso. Tambin podra utilizarse una
bolsa de tela de textura similar a la de los pauelos.
7. Un pincel suave de pelo de camello o un pincel fino para pintura. Lo
importante es que el pelo del pincel sea natural, de longitud uniforme,
textura muy suave, est seco y libre de grasa. En los almacenes que
distribuyen artculos de fotografa, es posible conseguir este accesorio.
Tambin es posible encontrar un equivalente en tiendas especializadas en
suministro de cosmticos.
8. Un paquete 250 g de material desecante (silica gel). Este material se
utiliza para mantener controlada la humedad en la caja de
almacenamiento del microscopio, si la misma es hermtica. Este material
cambia de color cuando se encuentra saturado de humedad, aspecto
que permite detectar si requiere ser sustituido o renovado.
Cuando est en buen estado, por lo general, es de color azul; cuando se
encuentra saturado de humedad, es de color rosado.
9. Bombillos y fusibles de repuesto. De la clase instalada por el fabricante o
un equivalente de las mismas caractersticas del original.
Precaucin: Algunos fabricantes recomiendan no utilizar alcoholes o
acetonas, debido a que pueden afectar disolver los cementos o
pegantes utilizados para fijar los lentes.

Nota: Todos los materiales requeridos para efectuar la limpieza deben
mantenerse limpios y guardados en recipientes que los protejan del
entorno externo.
Limpieza de los elementos pticos.
En un microscopio se encuentran dos tipos de elementos pticos: los
externos, que estn en contacto con el ambiente que rodea el equipo, y
los internos, que se encuentran dentro del cuerpo del microscopio las
partes internas de los objetivos, oculares, espejos, prismas, condensador,
iluminador, etc. y que no tienen un contacto directo con el ambiente que
rodea el equipo. Los procedimientos de limpieza, aunque similares, difieren
en cuanto al cuidado y precauciones que deben preverse.
1. Los elementos pticos externos de los oculares, los objetivos, el
condensador y el iluminador se limpian frotando suavemente la superficie
de los mismos, con el pincel de pelo de camello. Esto remueve las
partculas de polvo que hayan podido encontrarse depositadas sobre la
superficie de los mismos. A continuacin, se utiliza la pera para soplar
chorros de aire sobre la superficie de los lentes y asegurar que los mismos
quedan libres de polvo. Si el polvo se encuentra adherido a la superficie
ptica, se utiliza la pieza de tela limpia y de forma muy suave se efecta
un pequeo movimiento circular, sin ejercer mayor presin sobre la
superficie del lente. Con la pera se sopla nuevamente la superficie del
lente. Esto retira las partculas adheridas. Podra tambin utilizarse una pieza
de gamuza fina. En este caso se instala la pieza de gamuza en la punta de
un pequeo cilindro de dimetro ligeramente inferior al del lente y, sin
ejercer mayor presin, se efecta una rotacin de la misma sobre la
superficie del lente. Finalmente, con la pera, se sopla aire sobre la
superficie del lente. Esto basta para limpiar las superficies externas. La pieza
de gamuza puede humedecerse con agua destilada.
2. En condiciones adecuadas de instalacin, las superficies interiores de los
elementos pticos no deben resultar afectadas por la presencia de polvo
o partculas. Si por alguna circunstancia aparecen partculas sobre la
superficie interior de los lentes, se necesita abrirlos para efectuar la
limpieza. Nunca debe abrirse un ocular u objetivo, si no se cuenta con un
ambiente limpio en el cual realizar el procedimiento de limpieza.
Las superficies pticas interiores se limpian con el pincel de pelo de
camello y con la pera para soplar aire, siguiendo un procedimiento
anlogo al anteriormente explicado; se recomienda no desmontar por
ningn motivo los elementos pticos para no alterar las tolerancias de
ensamble del fabricante. Si se desmontan, sera necesario alinear
nuevamente los elementos y esto solo es factible siguiendo instrucciones
precisas del fabricante. La limpieza de los objetivos se limitar a conservar
limpios los lentes frontal y posterior.
3. Si se detectan residuos de aceite de inmersin en la superficie de los
lentes, este debe removerse utilizando papel especial para limpieza de
lentes o algodn tipo medicinal. A continuacin, la superficie del lente
debe limpiarse con una solucin compuesta de 80 % ter petroleum y 20 %
2-Propanol2.
Limpieza del cuerpo del microscopio
1. El cuerpo del microscopio puede ser limpiado con una solucin
jabonosa que resulta til para remover la suciedad externa. La solucin
jabonosa corta la grasa y el aceite. La misma puede aplicarse con un
cepillo pequeo. Despus de que la grasa y la suciedad hayan sido
removidas, debe limpiarse el cuerpo del microscopio con una solucin
50/50 de agua destilada y etanol al 95 %.
2. Las partes mecnicas, integradas por los mecanismos de ajuste
macro/micromtrico ajuste grueso y fino, el mecanismo de ajuste del
condensador y los mecanismos del carro portamuestras o plataforma,
deben ser lubricados de forma peridica con aceite fino de mquina,
para permitir su desplazamiento suave.
Mantenimiento del microscopio.
Entre las rutinas ms importantes para mantener un microscopio en
condiciones adecuadas de operacin, se encuentran las siguientes:
1. Verificar el ajuste de la plataforma mecnica. La misma debe
desplazarse suavemente, en todas las direcciones (X-Y) y debe mantener
la posicin que selecciona o define el microscopista.
2. Comprobar el ajuste del mecanismo de enfoque. El enfoque que
selecciona el microscopista debe mantenerse. No debe variar la altura
asignada por el microscopista.
3. Verificar el funcionamiento del diafragma.
4. Limpiar todos los componentes mecnicos.
5. Lubricar el microscopio de acuerdo con las recomendaciones del
fabricante.
6. Confirmar el ajuste de la ua fijalminas.
7. Verificar el alineamiento ptico.
Remocin de la pelcula de hongos.
1. Revisar y limpiar con frecuencia el microscopio, utilizando los
procedimientos mencionados en el presente captulo. Controlar las
condiciones de humedad donde se usa y almacena el microscopio. Si se
mantiene una ventilacin adecuada, disminuye la posibilidad de que se
inicie la formacin de hongos en el microscopio.
2. Si se detecta un crecimiento de hongos, utilizar una mota de algodn
humedecida en una solucin limpiadora de hongos que normalmente es
ter o xilol. Frotar suavemente siguiendo un movimiento circular, a lo largo
de toda la superficie del lente.
Tambin puede realizar un movimiento oscilatorio, hacia adelante y hacia
atrs o izquierda-derecha-izquierda, ejerciendo sobre la superficie del lente
una presin muy moderada. Si es necesario, repetir el procedimiento con
una nueva mota de algodn.
3. Cuando se termine la remocin de la pelcula de hongos, limpiar con
una mota de algodn limpio.
Nota: Los hongos solo pueden ser removidos cuando su crecimiento se
limita a la superficie de los lentes. Si dicho crecimiento no se atiende a
tiempo, el hongo puede penetrar el cuerpo del lente. Si este es el caso, el
lente se pierde, all ya es imposible removerlo.
Atencin: Si el microscopio se utiliza con elementos potencialmente
contaminados, debe ser limpiado con mayor frecuencia.