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Q.F.Mariela Medina
Asistente Qumica Analtica
Qumica Analtica II - 2014
Cromatografa planar
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Cromatografa
Cromatografa planar
Cromatografa lquida (LC, HPLC)
Cromatografa de gases (GC)
Cromatografa en columna
Cromatografa en capa fina (TLC)
Cromatografa en papel
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Cromatografa planar
En papel En capa fina
Cromatografa
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La fase mvil se desplaza a
travs de la fase
estacionaria por
capilaridad.
La fase estacionaria est
sostenida sobre una placa
plana o en los poros de un
papel.
Cromatografa
planar
La diferencia de afinidad
del compuesto entre la fase
mvil o la fase estacionaria
determina su
desplazamiento.
Mecanismo de separacin
cromatogrfica.
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Cromatografa
planar
Mecanismo de separacin
cromatogrfica planar.
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Es un proceso fsico o qumico por el cual una especie
qumica (tomos, iones o molculas) es retenida en
puntos activos de la superficie de un material.
El fenmeno queda limitado a la superficie que separa las
fases (superficie interfacial) y es aumentado por la
formacin de puentes de H.
Cromatografa
planar
Adsorcin.
A t
1
A t
2
7
Absorcin.
Es un proceso fsico (absorcin pura) o qumico
(absorcin con reaccin qumica) en el cual una especie
qumica se traslada de una primera fase a otra,
incorporndose a la masa de la segunda fase.
A t
2
A t
1
Cromatografa
planar
8
Fase estacionaria.
Cromatografa
planar
Adsorcin
Slica Gel (xido de Silicio).
Almina (xido de Aluminio).
Celulosa.
Fluorisil (Silicato de Magnesio).
Sulfato de Calcio.
Absorcin
Particin
Agua (Fase Normal)
Hidrocarburo (Inversa o reversa)
La fase estacionaria
es lquida, sobre un
soporte slido inerte
La fase
estacionaria es
un slido
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Fase estacionaria en Papel.
Cromatografa
planar
Agua retenida en el
en el papel, el
papel puede
contener un 20
% de agua
Fase estacionaria
Cromatografa
planar
absorcin
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Fase estacionaria en Placas.
Cromatografa
planar
Agua retenida en el
soporte slido
slido
Placa de slica gel
NO activada.
Fase estacionaria
Soporte slido de
silicagel
Placa de slica gel
ACTIVADA.
Cromatografa
planar
absorcin
Cromatografa
planar
adsorcin
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Fase estacionaria en Placas.
Cromatografa
planar
Los adsorbentes ms
utilizados son gel de slice
(SiO
2
) y almina (Al
2
O
3
).
La fase estacionaria se fija a
un soporte (vidrio, plstico o
aluminio).
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Fase estacionaria en Placas.
Cromatografa
planar
Ejemplo: Placas de slica gel
POLIGRAMSILG/UV254
Adsorbente: slica (SiO2).
G: posee sulfato de calcio como
ligante.
UV254: posee una sustancia
fluorescente (sulfuro de zinc) que
permite visualizar los
componentes bajo una longitud
de onda de 254 nm
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Fase Mvil.
Cromatografa
planar
cidos carboxlicos
Alcoholes
Aminas
Tioles
Aldehdos
Cetonas
Esteres
teres
Alta
Baja
Polaridad
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Fase Mvil.
Agua
Metanol
Etanol
Acetona
Piridina
ter dietil.
Cloroformo
Benceno
Tetracloruro
de Carbono
Ciclohexano
ter de
petrleo
Polaridad
Compuesto a
separar
Tcnica
Compuestos inicos
cidos
Fenoles
Alcoholes
Aminas
Esteres
Aldehdos
Cetonas
Nitro derivados
Halgeno derivados
Hidrocarburos
alifticos
Solventes
A
d
s
o
r
c
i

n
P
a
r
t
i
c
i

n
Cromatografa
planar
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Cromatografa
planar
Pasos para realizar cromatografa
planar.
Siembra
Secado
Desarrollo
Revelado
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Cromatografa
planar
Siembra.
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Cromatografa
planar
Puntiforme Banda
Siembra.
Formas de siembra
Con qu se siembra?
Capilares
Jeringas
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Cromatografa
planar
Desarrollo.
Desarrollo
Simple
Mltiple
Descendente
Ascendente
Circular
Horizontal
Comn
Bidimensional
Continuo
Es el proceso por el cual una
muestra migra a lo largo de la
fase estacionaria por accin
de la fase mvil.
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Cromatografa
planar
Desarrollo.
Cmara
cromatogrfica
Fase mvil: pequeo
volumen que cubre el fondo
y llega a una altura de 0.5cm
Cmara cromatogrfica
saturada
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Desarrollo ascendente.
Desarrollo.
Cromatografa
planar
Desarrollo descendente.
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Desarrollo.
Cromatografa
planar
Desarrollo bidimensional.
22
Desarrollo.
Cromatografa
planar
A medida que se est desarrollando la cromatografa se da la
separacin por migracin diferencial:
la fase mvil arrastra a las sustancias que tienen mayor afinidad
por ella y aquellas menos afines son retenidas por la fase
estacionaria dando lugar a la separacin.
Se aprecia el avance del solvente y de las sustancias que son
visibles.
Frente del solvente
Punto de siembra
Nivel del solvente
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Secado.
Cromatografa
planar
La placa se retira de la cmara cromatogrfica e
inmediatamente se seca por corriente de aire caliente
usando secador en campana con extraccin
encendida.
La fase mvil se evapora.
Las sustancias pueden verse o podemos necesitar
revelarlas.
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Revelado.
Cromatografa
planar
El revelado provocar que se haga visible un mancha.
El revelado puede realizarse mediante proceso
qumico o fsico.
Generales H
2
SO
4
Luz ultravioleta
Selectivos I
2
Especficos Ninhidrina (aminocidos)
Resorcina (cetonas)
Fsicos Luz ultravioleta
Qumicos I
2
No destructivo Luz ultravioleta
Destructivo H
2
SO
4
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Cromatografa
planar
Formas de realizar el revelado.
Por Inmersin
Dentro de una cmara
Por rociado
UV
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Cromatografa
planar
Cualitativa
x x x x
x x
Identificacin Pureza Ausencia
Aplicaciones.
Muestra
puede contener A
A M A M B M
Muestra
esta impurifica
Muestra
no contiene B
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Cromatografa
planar
x x
Clculo de Relacin de frente (R
f
).
A B
Solucin
patrn
de A
Solucin
patrn
de B
d
B
d
A
d
s
d
S
: distancia recorrida por la fase mvil
d
B
: distancia recorrida por B
d
A
: distancia recorrida por A
d
s
d
A
Rf
A
=
x
Muestra
M
d
s
d
B
Rf
B
=
Cualitativa
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Cromatografa
planar
Anlisis e interpretacin de placas.
Cualitativa
Patrones y muestra.
Comparacin de color
Comparacin de R
f
.
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Cromatografa
planar
Anlisis e interpretacin de placas.
Semicuantitativa
x x x x x x
P1 P2 P3 P4 P5 M
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Cromatografa
planar
Anlisis e interpretacin de placas.
Cuantitativa
Detector
Fuente de luz
Placa
cromatogrfica
Estimacin del rea de la mancha (por medida o masa)
Determinacin indirecta (raspado y valoracin)
Determinacin directa (Densitmetro)
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Cromatografa
planar
Difusin de manchas y formacin
de colas.
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Cromatografa
planar
Difusin de manchas y formacin
de colas.
Difusin ordinaria
Difusin de Eddy
Difusin por
transferencia de masa
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Cromatografa
planar
Difusin de manchas y formacin
de colas.