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Determinacin de parsitos gastrointestinales en la

colonia de ratas Wistar (Rattus norvegicus) del bioterio


del Laboratorio de Neurociencias y Comportamiento de
la Universidad Industrial de Santander (UIS)
Abstract. Biomedical research still depends on the use of living
laboratory animal models. Mice and rats are the most common
laboratory animals used in research and testing. Experimental re-
sults from research performed with living laboratory animals may
be aected by environmental conditions provided to breeding and
maintaining of these animals and by infectious agents. A parasi-
tological study was undertaken to determine the health status of
Wistar/UIS rats maintained in the laboratory of Neurociencias y
Comportamiento ; three parasitological methods were used for
diagnosis: direct exam, and otation and McMaster camera. Te
animals for this study were randomly distributed from each cage,
the sample sizes was according to the size of the colony. Te pa-
rasites detected were: Syphacia muris, Aspiculuris tetraptera, Giardia
muris, Strongyloides sp., Heterakis sp., Balantidium sp., y Toxocara sp.;
the prevalences of parasites detected in the investigated rat were:
Syphacia muris: 86.06%, Aspiculuris tetraptera: 77.88%, Giardia muris:
21.15%, Strongyloides sp.: 6.73%, Heterakis sp.: 6.25%, Balantidium
sp.: 1.44%, and Toxocara sp.: 0.96%. Endoparasite infections are wi-
despread in the colony and multiple infections were common.
Key words: parasitological methods, direct exam, otation, Mc-
Master, prevalences.
Resumen. Para la realizacin de este trabajo se utilizaron 208 ratas
Wistar/UIS holoxnicas (Rattus norvegicus), 100 machos y 108 hembras
mantenidas en el bioterio del Laboratorio de Neurociencias y Compor-
tamiento de la adscrito a la Facultad de Salud de la Universidad
Industrial de Santander. Para cada sujeto de estudio se registraron
fechas de nacimiento y procesamiento de la muestra, peso del animal,
consistencia y peso de la materia fecal y el sexo. A los animales de
los sujetos de este estudio se les realiz la toma de muestra de la
materia fecal realizando una leve presin sobre le regin perianal.
La muestra de materia fecal recolectada fue pesada y, posterior-
mente, se realiz el procedimiento de anlisis que incluy un examen
directo para la determinacin de huevos y larvas por observacin en
el microscopio ptico, examen de otacin por el mtodo de Sloss y
recuento de huevos en la cmara de McMaster. Los datos obtenidos
en el coproanlisis de cada sujeto de la investigacin fueron registrados
en tablas de datos de Excel y, posteriormente, fueron analizados como
parte del estudio descriptivo-objetivo de este trabajo. Por medio de los
anlisis coprolgicos realizados mediante las tcnicas de examen directo,
otacin y cmara de McMaster, se pudo determinar la presencia de
los siguientes parsitos gastrointestinales en la materia fecal de las ratas
Wistar/UIS albergadas en el bioterio del Laboratorio de Neurociencias
y Comportamiento de la Facultad de Salud de la : Syphacia muris,
Erwing Alexander Muoz Castellanos*
*
Universidad Cooperativa de Colombia. Trabajo de grado. Comit de Investigaciones en Ciencias Animales. Correo
electrnico: cica01.mvz.bga@gmail.com
Luis Gabriel Urrea Naranjo**
**
Universidad Cooperativa de Colombia. Trabajo de grado. Comit de Investigaciones en Ciencias Animales. Correo
electrnico: cica01.mvz.bga@gmail.com
Vctor Arcila Quiceno***
***
Docente-investigador. Comit de Investigaciones en Ciencias Animales. Grupo de Investigacin en Ciencias Animales.
Universidad Cooperativa de Colombia. Correo electrnico: cica01.mvz.bga@gmail.com
Carlos Arturo Conde Cote****
****
Docente-investigador de la Universidad Industrial de Santander (UIS). Director del Bioterio (UIS). Director del Grupo Neurociencias y
Comportamiento (UIS). Correo electrnico: cconde@uis.edu.co.
Recibido: 15 de noviembre de 2008
Aceptado: 25 de noviembre de 2008
Survey of gastrointestinal parasites in the Wistar/UIS rats colony
(Rattus norvegicus) maintained in the animal housin of the
laboratory of Neurociencias y Comportamiento Universidad
Industrial de Santander (UIS)
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Determinacin de parsitos gastrointestinales en la colonia de ratas Wistar (Rattus norvegicus) del bioterio del Laboratorio de Neurociencias y Comportamiento de la Universidad
Industrial de Santander (UIS)
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Aspiculuris tetraptera, Giardia muris, Strongyloides sp., Heterakis sp., Ba-
lantidium sp. y Toxocara sp. Posteriormente, se determin la prevalencia
de estos parsitos, encontrando as: Syphacia muris: 86,06%; Aspiculuris
tetraptera: 77,88%; Giardia muris: 21,15%; huevos sin identicar: 8,65%;
Strongyloides sp.: 6,73%; huevos de Heterakis sp.: 6,25%; larvas sin iden-
ticar: 2,88%; Balantidium sp.: 1,44%, y huevos de Toxocara sp.: 0,96%.
Este estudio describe tambin la prevalencia de cada uno de estos par-
sitos por rango de edad, el poliparasitismo, la comorbilidad y un anlisis
de la sensibilidad y especicidad de las pruebas diagnsticas utilizadas.
Por otra parte, se realiz una matriz de correlacin de Pearson entre las
variables involucradas en esta investigacin, que se ver ms detallada-
mente en el anlisis de los resultados.
Palabras clave: coproanlisis, examen directo, otacin, cmara de
McMaster, prevalencia.
a inuencias triviales, endgenas o exgenas. As, la
sensibilidad biolgica de ratones y ratas, comprendiendo
el 90% de los animales experimentales usados en todo
el mundo, puede ser cambiada por factores genticos y
numerosas inuencias ambientales, incluyendo factores
fsicos, qumicos y microbianos (virus, bacterias, hongos,
parsitos). La prevencin de infecciones naturales (fac-
tores microbianos) en ratones, ratas y dems especies
de biomodelos, tiene una importancia crucial para poder
lograr una amplia gama de objetivos cientcos para los
cuales estas especies son usadas.
El desarrollo de animales libres de contaminacin
microbiana ha permitido explorar las funciones sio-
lgicas de la ora normal y los complejos mecanismos
de su interaccin con el animal hospedador y con otros
agentes microbianos. En este sentido, los animales de
experimentacin denidos han sido un modelo para
el estudio de enfermedades de origen microbiolgico y
procesos relacionados con el sistema inmunolgico.
El estado de salud de los biomodelos puede
ejercer una profunda inuencia en los resultados
experimentales. La nica manera de evitar los efectos
negativos de las infecciones naturales, es mediante la
erradicacin selectiva de agentes infecciosos para
lograr un animal de calidad microbiolgica denida.
Introduccin
El progreso en las ciencias biomdicas ha conducido
obligatoriamente a mayores y grandes renamientos
en las tcnicas y metodologas cientcas. En los lti-
mos aos, se ha hecho evidente que el renamiento es
necesario para garantizar la calidad de los animales de
laboratorio. La comunidad cientca ha reconocido cada
vez ms que las enfermedades infecciosas en estas espe-
cies cambian muchos resultados de las investigaciones.
Lamentablemente, la literatura sobre este tema es bas-
tante voluminosa, dispersa y a menudo muy confusa,
como consecuencia de ello ha tenido un uso prctico
muy pobre.
Las investigaciones con animales de laboratorio
en cualquier campo de la ciencia (biomdica principal-
mente) dependen en ltima instancia de la aplicacin
rgida de los principios del mtodo cientco y de los
principios de control sanitario. La prctica apropiada
de estos principios permite tomar datos conables y re-
producibles, siendo estos objetivos clave para todos
los experimentos con biomodelos, que permiten a la
larga el progreso en las ciencias biomdicas.
Los sistemas de vida de los biomodelos son no-
tablemente complejos y, a menudo, estn sujetos a
desviaciones grandes en la respuesta biolgica, debido
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Estos animales deben ser protegidos sistemticamente
del riesgo de infeccin. Por este motivo, las instalaciones
modernas se disean como una compleja barrera fsica
manejada con estrictos principios sanitarios, cuyo principal
objetivo es el de la prevencin e identicacin de cualquier
fuente de contaminacin (1).
El efecto de los parsitos sobre el animal de
experimentacin va desde muy leve hasta muy
grave, dependiendo esto de la carga parasitaria del
hospedador y el estado inmunitario del animal. Diversos
estudios han demostrado el efecto de los parsitos y su in-
uencia sobre los procesos experimentales, por ejemplo los
nematodos afectan los estudios sobre nutricin, inducen
la proliferacin de linfocitos T y B en bazo y ganglios
linfticos; los animales parasitados no se pueden uti-
lizar para establecer curvas de crecimiento ni pueden
ser utilizados en estudios de comportamiento, entre
otros. Para Spironucleus muris se demostr que altera la
actividad de los macrfagos, altera la respuesta intrainmu-
nitaria y convierte infecciones inaparentes en activas; para
Giardia muris, incrementa la morbilidad de infecciones
inaparentes por otros agentes infecciosos, interviene en todos
los estudios en los que participe el sistema gastrointes-
tinal. Como se mencion, todas estas interferencias han
sido demostradas con procesos experimentales a lo largo
de muchos aos (2).
Los animales de la colonia del Bioterio del
Laboratorio de Neurociencias y Comportamiento de
la , se han mantenido durante muchos aos bajo
ciertas condiciones de barrera y control sanitario, pero
no se conoce si estos estn exentos de una carga parasitaria;
como es sabido la infeccin no es sinnimo de enfermedad,
sta simplemente indica la presencia de microorganismos
que pueden ser patgenos, oportunistas o comensales, y es
importante que los investigadores sepan que no es necesario
que se presente la manifestacin clnica de una enfermedad
causada por microorganismos para que se afecten los re-
sultados experimentales y, dado que estos biomodelos
son utilizados para procesos de investigacin cientca
biomdica en el campo de la neurociencia y el compor-
tamiento, se quiere estudiar cul es la carga parasitaria y
qu especies de parsitos estn presentes en esta colonia
y, posiblemente, dilucidar si ha habido interferencia en
los resultados experimentales debido a estas (3).
Materiales y metodologa
Se tomaron muestras de materia fecal de 208 ratas
Wistar/UIS (Rattus norvegicus), 100 machos y 108
hembras, provenientes del bioterio de la Facultad
de Salud de la Universidad Industrial de Santander.
Los animales fueron mantenidos bajo ciclos de luz/
oscuridad controlada (12 horas c/u, luz encendida a
las 7 a. m. y apagada a las 7 p. m.) y en todos los casos
se suministraron 15 gramos de alimento/animal/da,
temperatura controlada 21 2 C, humedad relativa
promedio 65-75%. La toma de muestra en todos los
casos se realiz directamente del ano del animal.
Las muestras fueron procesadas en el Laboratorio
del Centro Mdico Quirrgico Veterinario de la
Universidad Cooperativa de Colombia ( - )
ubicado en el kilmetro 2 va al mar nmero 1-63
y el Laboratorio de Neurociencias y Comportamiento
de la adscrito al Departamento de Ciencias Bsicas
de la Facultad de Salud de la Universidad Industrial
de Santander, en la ciudad de Bucaramanga, direccin
carrera 32 nmero 29-31, ocina 203.
Las muestras fueron recolectadas de los animales
de cada caja por medio de manipulacin directa, lo que
permiti hacer la recoleccin de las heces directamente
del ano impidiendo algn tipo de contaminacin con
el lecho. Las muestras tomadas se recogieron en tubos
de ensayo debidamente rotulados y se analizaron
mediante tres mtodos:
Examen directo
Flotacin (Sloss)
Cmara de McMaster
Resultados
Por medio de los anlisis coprolgicos (examen
directo, flotacin, cmara de McMaster) realizados, se
logr determinar la presencia de parsitos gastrointesti-
nales presentes en la materia fecal de las ratas Wistar/
UIS albergadas en el Bioterio de la Facultad de Salud
de la . Asimismo, se demostr que la infeccin
parasitaria estuvo presente en la mayora de los
animales investigados, hallando: Syphacia muris,
Aspiculuris tetraptera, Giardia muris, Strongyloides
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Determinacin de parsitos gastrointestinales en la colonia de ratas Wistar (Rattus norvegicus) del bioterio del Laboratorio de Neurociencias y Comportamiento de la Universidad
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sp., Heterakis sp., Balantidium sp. y Toxocara sp.;
de igual forma, se pudo establecer la prevalencia,
el nivel de poliparasitismo y la comorbilidad, y se
estim la sensibilidad, especificidad y valores pre-
dictivos positivos y negativos de cada mtodo utilizado
como gold standard.
El resultado de las tres pruebas. Finalmente, se reali-
z una descripcin comparativa por gnero y rangos de
edad para la prevalencia de cada parsito.
Parsitos gastrointestinales encontrados en ratas
wistar/uis
Figura. 1. Huevos de Aspiculuris tetraptera
Figura. 2. Huevos de Syphacia muris
Figura. 3. Larva de Syphacia muris eclosionando
El anlisis de los datos mostr que la prevalencia de los
parsitos en esta colonia es: Syphacia muris: 86,06%; Aspiculuris
tetraptera: 77,88%; Giardia muris: 21,15%; huevos sin identi-
car: 8,65%; Strongyloides sp.: 6,73%; huevos de Heterakis
sp.: 6,25%; larvas sin identicar: 2,88%; Balantidium sp.:
1,44%, y huevos de Toxocara sp.: 0,96%.
Grca 1. Prevalencia de parsitos en la colonia de ratas
Wistar/UIS
Fuente: Muoz y Urrea (2008)
Grca 2. Prevalencia de parsitos por edades
40,00%
2,50%
31,25%
2,50% 2,50%
1,25% 1,25% 1,25%
7,50%
2,50%
7,50%
0,00%
5,00%
10,00%
15,00%
20,00%
25,00%
30,00%
35,00%
40,00%
45,00%
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Fuente: Muoz y Urrea (2008)
Tabla 1. Prevalencia de parsitos por edades
Parsito
Edad
3 meses 5 meses 10 meses
Giardia muris 4,33 12,02 4,81
Syphacia muris 23,08 39,42 23,56
Aspiculares tretaptera 15,38 42,79 19,71
Toxocara sp. 0,00 0,48 0,48
Balantidium sp. 0,00 0,48 0,96
Heterakis sp. 0,00 0,00 6,73
Strongyloides sp. 0,00 0,00 6,73
Huevos no identicados 0,00 4,81 3,85
Larvas no identicadas 0,00 1,92 0,96
Fuente: Muoz y Urrea, 2008
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
%
G
iardia
m
uris
Syphacia m
uris
Aspicula
ris tet rapt era
H
uevos d
e To
xocora sp.
Balantidium
sp.
H
uevos d
e H
eterakis sp.
Strongylo
ides sp.
H
uevos n
o Identicados
Larva
s no I dentica
das
PARASITO
PREVALENCIA %
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Es importante resaltar que la mayor prevalencia
est dada por los parsitos Syphacia muris, Aspiculuris
tetraptera, Giardia muris; asimismo, puede verse que la
prevalencia de parsitos es mayor en el rango de edad
de cinco meses.
Grca 3. Porcentaje de poliparasitismo en la colonia de ratas
Wistar/UIS

Fuente: Muoz y Urrea (2008)
Tabla 2. Porcentaje de poliparasitismo en la colonia de ratas
Wistar/ UIS
POLIPARASITISMO
Nmero de
individuos
%
P0 4 0.02
P1 44 0.23
P2 99 0.48
P3 37 0.18
P4 17 0.08
P5 2 0.01
P6 1 0.005
Fuente: Muoz y Urrea (2008)
Por medio del anlisis descriptivo realizado, se
pudo determinar el poliparasitismo, encontrando que la
relacin entre dos parsitos fue la ms comn reportada
en el 48% de los casos.
El anlisis de los datos determin tambin el
porcentaje de coexistencia de un parsito especco con
otros parsitos.
Tabla 3. Poliparasitismo y porcentaje de coexistencia
parasitaria
PARSITO %P0 %P1 %P2 %P3 %P4 %P5
Giardia muris 0,023 0,205 0,477 0,250 0,023 0,023
Syphacia muris 0,168 0,525 0,196 0,095 0,011 0,006
Aspiculares tretaptera 0,099 0,556 0,222 0,105 0,012 0,006
Huevos de Toxocara
sp.
0,0 0,0 0,500 0,500 0,0 0,0
Balantidium sp. 0,0 0,0 0,33 0,667 0,0 0,0
Huevos Heterakis sp. 0,077 0,0 0,231 0,538 0,077 0,077
Strongyloides sp. 0,0 0,071 0,357 0,357 0,143 0,071
Huevos no
identicados
0,0 0,167 0,33 0,389 0,056 0,026
Larvas no
identicadas
0,0 0,167 0,50 0,167 0,167 0,00
Fuente: Muoz y Urrea (2008)
Tabla 4. Nmero de casos de comorbilidad entre los diferentes
parsitos reportados por el examen coprolgico
Giardia
muris
Syphacia
muris
Aspicularis
tetraptera
Toxocara
sp.
Giardia muris 44 41 35 1
Syphacia muris 41 179 139 2
Aspicularis tetraptera 35 139 162 2
Toxocara sp. 1 2 2 2
Balantidium sp. 1 3 3 0
Heterakis sp. 4 10 12 0
Strongyloides sp. 3 11 14 0
Tabla 5. Porcentaje de casos de comorbilidad entre los
diferentes parsitos reportados por el examen coprolgico
Balantidium sp. Heterakis sp. Strongyloides sp.
Giardia muris 1 4 3
Syphacia muris 3 10 11
Aspicularis tetraptera 3 12 14
Toxocara sp. 0 0 0
Balantidium sp. 3 1 0
Heterakis sp. 1 13 6
Strongyloides sp. 0 6 14
Fuente: Muoz y Urrea, 2008
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0.50
%
P0 P1 P2 P3 P4 P5 P6
NUMERO DE PARASITOS
POLIPARASITISMOS %
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Se aprecia en las tablas 4 y 5 la comorbilidad entre
los diferentes parsitos reportados por el examen copro-
lgico con distintas tcnicas (examen directo, otacin y
cmara de McMaster). En la tabla 4, se reporta el nmero
de casos y en la 5, su correspondiente porcentaje.
La comorbilidad que ms se destaca, teniendo en
cuenta el nmero de casos reportados (casillas amarillas
tabla 4), es la presentada por los parsitos Giardia muris,
Syphacia muris y Aspiculuris tetraptera, donde:
Tabla 6. Porcentaje de comorbilidad entre diferentes grupos
de parsitos encontrados en los animales muestreados
Giardia
muris
Syphacia
muris
Aspicularis
tetraptera
Toxocara sp.
Giardia muris 1,00 0,23 0,22 0,50
Syphacia muris 0.93 1,00 0,86 1,00
Aspicularis tetraptera 0,80 0,78 1,00 1,00
Toxocara sp. 0,02 0,01 0,01 1,00
Balantidium sp. 0,02 0,02 0,02 0.00
Heterakis sp. 0,09 0,06 0,07 0,00
Strongyloides sp. 0,07 0,06 0,09 0,00
Balantidium sp. Heterakis sp. Strongyloides sp.
Giardia muris 0,33 0,31 0,21
Syphacia muris 1,00 0,77 0,79
Aspicularis tetraptera 1,00 0,72 1,00
Toxocara sp. 0,00 0,00 0,00
Balantidium sp. 1,00 0,08 0,00
Heterakis sp. 0,33 1,00 0,43
Strongyloides sp. 0,00 0,46 1,00
Fuente: Muoz y Urrea (2008)
En el 93% de los casos en que se reportaba Giardia
muris estaba acompaada de Syphacia muris. En el 78%
de los casos que se report Syphacia muris estaba acom-
paada de Aspiculuris tetraptera. En el 86% de los casos
que se report Aspiculuris tetraptera estaba acompaada
de Syphacia muris. Otro anlisis de los datos pretendi
evaluar la sensibilidad y especicidad de las pruebas
diagnsticas utilizadas.
Discusin
En relacin con los resultados arrojados por este estu-
dio se puede mencionar que solo podran compararse
con estudios de otros investigadores en lo que respecta a
la prevalencia, ya que los otros anlisis descriptivos aqu
realizados no se encuentran reportados en los artculos
citados y revisados para la elaboracin de este estudio
(4). En este sentido, los parsitos y las prevalencias de
cada uno de ellos son similares a los reportados en otras
investigaciones, en especial las altas prevalencias de los
parsitos Syphacia muris y Aspiculuris tetraptera, hecho
que puede ser debido a que los Nematodos tienen un
ciclo de vida corto, lo que puede inducir la infeccin
en un gran nmero de animales en breves perodos, en
especial en las colonias mantenidas bajo condiciones
convencionales (5).
La dominancia y presencia de los parsitos depende
de cmo coexistan en el interior de la rata, de modo que se
favorezcan y benecien, generando un ambiente ptimo.
Por esta razn, en escala de importancia, prevalencia
y comorbilidad del parsito, Syphacia muris, Giardia
muris y Aspiculuris tetraptera, cohabitan en mayora y
en conjunto plenamente, a excepcin de Giardia muris.
En menor escala se encuentran el Toxocara sp. (50%),
Balantidium sp. (33,3%) y Heterakis sp. (61,5%), que se
presentan tambin en escala baja en un 27%, llegando
a ser parte, junto con los anteriormente nombrados, del
control principal y riguroso de parsitos, por su apari-
cin e importancia a diferente escala, dejando: Toxocora
sp., Strongylodes sp. y Balantidum sp. como parte del control
general (6).
Por medio del anlisis descriptivo realizado, se
puede determinar el poliparasitismo, encontrando que
la relacin entre dos parsitos fue la ms comn repor-
tada en el 48% de los casos de poliparasitismo.
El anlisis de los datos determin tambin el porcentaje
de coexistencia de un parsito especco con otros parsitos.
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