INFORME DE MESOFILOS, PSICROFILOS, TERMOFILOS

PRESENTADO POR: CATTERINE CUTIVA REINA

FICHA: 583801

























SENA
CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA Y TURISMO
TECNOLOGO EN CONTROL DE CALIDAD DE ALIMENTOS
BOGOTA
MARCO TEORICO
Son todas aquellas bacterias aerobias o anaerobias facultativas, mesfilas o
psicrfilas capaces de crecer en agar nutritivo. Se investigan por el mtodo de
recuento en placa con siembra en profundidad, los microorganismos mesfilos son
aquellos que se desarrollan entre 15 y 35 C y que tienen una temperatura ptima
decrecimiento y proliferacin en un ambiente o medio que tenga una temperatura
de 37C. En este grupo se encuentran los microorganismos patgenos es decir los
causantes de enfermedades. El intervalo de temperaturas en el que crecen los
microorganismos es muy amplio: de 34 C a > 90 C. En funcin de esto se
encuadra a los microorganismos en tres grupos:
a) Los que crecen bien a 7 C o por debajo de esta temperatura cuya temperatura:
psicrfilos.
b) Llos que crecen entre 20 30 C, con una temperatura ptima de crecimiento
est entre 30 40C: mesfilos
c) los que crecen por encima de los 45 C: termfilos.
El hbitat de los organismos mesfilos incluye el suelo, el cuerpo de un animal,
etc. Su temperatura ptima de crecimiento se encuentra en los 37 C, la
temperatura normal de un cuerpo humano.
OBJETIVOS
Identificar los tipos de microorganismos que puedan estar presentes en la
muestra a analizar
Cuantificar los microorganismos los presentes en la muestra.
Establecer el procedimiento para el anlisis y recuento de microorganismos
aerobios mesfilos en placa.
MATERIALES Y EQUIPOS
Cajas de Petri plstica o de vidrio
Agar Plate count (mtodos estndar) autoclavar a 121C por 15 min
Agua bufferada 0.1%
Pipetas 1, 5 y 10 ml, graduada en 0,1 ml unidades
Esptula
Autoclave
Balanza
Gradillas
Mechero
Tubos de rosca
Puntas esteriles
Frasco schott
PROCEDIMIENTO
Despus de la toma de muestras, se debe comenzar a trabajar tan pronto
como sea posible.
Si la muestra puede ser cortada y dispersada fcilmente, proceder.
Pesar en el recipiente de vidrio, previamente tarado, pesar 10 g
representativos de la muestra total.
Aadir un volumen de diluyente igual a 9 veces la muestra. As se obtiene
una dilucin 10-1.
Homogenizar la muestra durante, el tiempo suficiente 2.5 minutos.
Mezclar el contenido del vaso por agitacin y pipetear, por duplicado,
alcuotas de 1 mL en tubos distintos conteniendo 9 mL de diluyente, agua
bufferada.
Con cada una de las dos series de diluciones llevar a cabo los siguientes
dos pasos que se sealan a continuacin.
Pipetear por duplicado, en placas de Petri, alcuotas de 1mL de las
diluciones 10-1,10-2,10-3
Fundir el agar para recuento en placa
Mantener el medio a 44-46C y controlar cuidadosamente su temperatura
para que al mezclarlo con la dilucin del alimento no sean inactivados los
microorganismos.
Verter inmediatamente en las cajas de Petri 10-15mL de medio fundido. El
periodo de tiempo transcurrido entre la realizacin de las diluciones y el
vertido del medio no debe superar los 20 minutos y es preferible que sea
inferior a 10 minutos.
Mezclar el inoculo con el medio fundido, inclinando y girando las placas. La
forma adecuada de llevar a cabo esta operacin sera la siguiente:
a) realizar movimientos de vaivn 5 veces en una direccin,
b) hacerla girar 5 veces en el sentido de la agujas del reloj,
c) volver a girar la caja en una direccin que forme un ngulo recto con la
primera,
d) hacerla girar en sentido contrario a las agujas del reloj.
Una vez solidificado el agar, invertir las placas e incubarlas a 29-31C
durante 48+/- 3 horas.



LECTURA DE RESULTADOS
Elegir las dos placas correspondientes a una dilucin, que presenten entre
30 y 300 colonias. Contar todas las colonias de cada placa utilizando el
contador de colonias Hallar la medio aritmtica de los dos valores y
multiplicarla por el factor de dilucin
Si una de las placas de la dilucin elegida presenta algo menos de 30
colonias o algo ms de 300, deben contarse tambin todas las colonias de
ambas y como en el caso anterior, hallar la media aritmtica y multiplicarla
por el factor de dilucin. El valor obtenido se dar como el recuento
estndar en placa.
Cuando las cajas de dos diluciones consecutivas presentan entre 30 y 300
colonias, deben hallarse los recuentos estndar en placa de cada dilucin
tal como se ha sealado anteriormente y se dar como resultado la media
de los dos valores obtenidos, a menos que uno de ellos sea superior al
doble del otro, en cuyo caso se dar como recuento estndar en placa el
valor ms bajo.
Si ninguna de las placas tiene entre 30 y 300 colonias el valor calculado se
da como el recuento estndar en placa estimado y el clculo del nmero de
microorganismos presentes en el alimento se lleva a cabo en los distintos
casos en la forma como se indica en los numerales anteriores.
Si todas las placas presentan ms de 300 colonias, dividir las dos placas
correspondientes a la dilucin ms elevada en secciones radiales (2,4 u 8)
y contar todas las colonias que se hallan en una o ms secciones.
Multiplicar el total de colonias obtenidas en cada caso por el factor
adecuado, con el fin de conseguir una estimacin del nmero total de
colonias presentes en la caja. Hallar la media del valor estimado por las
dos placas y multiplicar por el factor de dilucin correspondiente. El valor
obtenido se da como el recuento estndar en placa estimado.