Cromatografia Gasosa

Gases ou substncias volatilizveis podem ser separados utilizando-se a tcnica denominada

cromatografia gasosa. A separao baseia-se na diferente distribuio das substncias da
amostra entre uma fase estacionria (slida ou lquida) e uma fase mvel (gasosa).
A amostra, por meio de um sistema de injeo, introduzida em uma coluna contendo a fase
estacionria. O uso de temperaturas convenientes no local de injeo da amostra e na coluna
possibilita a vaporizao dessas substncias que, de acordo com suas propriedades e as da fase
estacionria, so retidas por tempos determinados e chegam sada da coluna em tempos
diferentes. O uso de um detector adequado na sada da coluna torna possvel a deteco e
quantificao dessas substncias.
A cromatografia gasosa uma tcnica com um poder de resoluo excelente, tornando
possvel, muitas vezes, a anlise de dezenas de substncias de uma mesma amostra. O uso
bastante acentuado da cromatografia gasosa se deve tambm aos baixos limites de deteco
que podem ser conseguidos. Dependendo do tipo de substncia analisada e do detector
empregado, consegue-se detectar cerca de 10^-12 g ou at menos. Essa caracterstica faz que
haja necessidade de apenas pequenas quantidades de amostra, o que, em certos casos, um
fator crtico e limita a utilizao de outras tcnicas. importante salientar ainda que a
cromatografia gasosa excelente como tcnica quantitativa, sendo possvel a obteno de
resultados quantitativos em concentraes que variam de pictogramas a miligramas.
Se, de um lado, a cromatografia gasosa apresenta todas essas vantagens, de outro, apresenta
alguns inconvenientes. Essa tcnica pode ser empregada na anlise de substncias volteis e
estveis termicamente; caso contrrio, h necessidade de se formar um derivado com essas
caractersticas, o que nem sempre vivel. A anlise cromatogrfica, isoladamente, rpida,
podendo ser efetuada em minutos, ou at mesmo segundos. No entanto, na maioria das
vezes h necessidade de etapas de preparao da amostra, antes que ela possa ser analisada,
para que no haja interferncias durante a anlise e contaminao da coluna cromatogrfica.
s vezes, essa etapa de preparao longa e complexa, aumentando em muito o tempo e o
custo da anlise. Alm disso, a cromatografia gasosa no uma tcnica qualitativa eficiente,
necessitando, muitas vezes, de tcnicas auxiliares para a identificao segura das substncias
presentes na amostra. Outro fator negativo refere-se dificuldade de utilizao da
cromatografia gasosa como tcnica preparativa. Nesse caso, necessrio utilizar colunas
recheadas com maior dimetro interno, para possibilitar separaes na faixa de microgramas a
miligramas.








Tcnicas Usadas em Cromatografia Gasosa
A tcnica de desenvolvimento usada em cromatografia gasosa a eluio. Uma corrente de
gs passa continuamente pela coluna e, quando a amostra vaporizada introduzida
rapidamente nessa corrente de gs, ela arrastada atravs da coluna. As substncias
presentes na amostra, depois de separadas, chegam ao detector, que gera um sinal para um
sistema de registro e tratamento dos dados.

Em um cromatograma ideal, os picos apresentam-se separados e simtricos; na prtica, pode
haver sobreposio parcial devido a uma separao deficiente na coluna, ou a presena de
picos com assimetria frontal ou caudas. A assimetria frontal est, frequentemente, relacionada
com um excesso de amostra injetada ou com o uso de colunas em uma temperatura abaixo do
ideal para uma determinada anlise. As caudas aparecem devido s falhas na tcnica de
injeo da amostra, ou devido adsoro excessiva na fase estacionria ou suporte.
Durante a anlise, a temperatura da coluna pode permanecer constante (cromatografia gasosa
isotrmica), ou sofrer uma variao, linear ou no (cromatografia gasosa com temperatura
programada). A programao da temperatura significativamente importante em
cromatografia gasosa, j que melhora a separao e diminui o tempo de anlise. Ela consiste
em comear a anlise com a coluna em uma temperatura mais baixa, para que solutos de
baixo ponto de ebulio possam eluir como picos separados. Durante a anlise, a temperatura
da coluna aumentada com o objetivo de se diminuir a reteno de substncias de maior
ponto de ebulio. Alm das vantagens citadas, a programao de temperatura faz que haja
uma maior simetria nos picos e uma melhor detectabilidade para aqueles picos com tempos
de reteno excessivamente longos sob condies isotrmicas. A programao de temperatura
bastante til quando a amostra composta de substncias com uma grande diferena em
seus pontos de ebulio.
A cromatografia gasosa pode ser realizada empregando-se colunas recheadas ou capilares. As
colunas recheadas so constitudas por tubos de vidro, ao inox, ou, mais raramente, cobre,
com dimetros internos de 1 a 4 mm e recheadas com uma fase estacionria slida ou lquida,
nesse ltimo caso, dispersa em um suporte slido. As colunas capilares so preparadas com
capilares de slica fundida de dimetro interno de 0,10 a 0,75 mm, com a fase estacionria
espalhada, ou imobilizada na parede interna do capilar.
De acordo com o tipo de fase estacionria usada, a cromatografia gasosa pode ser classificada
em cromatografia gs-slido e cromatografia gs-lquido. As fases imobilizadas e fases
especiais, como as empregadas na separao de enantimeros, tambm sero consideradas
lquidas e, consequentemente, classificadas como cromatografia gs-lquido.
Na cromatografia gs-slido, a fase estacionria um slido com uma grande rea superficial e
a separao baseia-se em mecanismos de adsoro das substncias nesse slido. A
cromatografia gs-slido usada principalmente na anlise de gases permanentes e
compostos apolares de massa molar baixa.
Na cromatografia gs-lquido, a fase estacionria um lquido pouco voltil, espalhado ou
imobilizado a um suporte slido ou s paredes das colunas capilares. A separao baseia-se em
mecanismos de partio das substncias entre a fase lquida e a fase gasosa. A utilizao da
cromatografia gs-lquido corresponde a cerca de 95% do total de aplicaes.

Equipamento para Cromatografia Gasosa






1) Fonte do gs de arraste
A fase mvel, sendo gasosa, torna possvel um equilbrio rpido entre ela e a fase estacionria,
fazendo da cromatografia gasosa um sistema altamente eficiente. Um cilindro contendo o gs
sob alta presso serve como fonte do gs de arraste (fase mvel), que levar as substncias
presentes na amostra para fora da coluna, quando elas no estiverem interagindo com a fase
estacionria. Os gases mais usados como fases mveis so Nitrognio, Hlio, Hidrognio e
Argnio. O gs de arraste no deve interagir com o recheio da coluna, deve ser barato,
disponvel e compatvel com o detector usado. Por exemplo, Hlio e Hidrognio so os gases
preferidos quando se emprega o detector por condutividade trmica, enquanto, para o
detector por captura de eltrons, prefervel usar nitrognio ultrapuro ou argnio contendo
5% de metano. O gs de arraste deve tambm apresentar alta pureza (> 99, 999%), sendo
aconselhvel o uso de filtros contendo slica gel ou peneira molecular, entre o cilindro e o
instrumento, para eliminar traos de gua e hidrocarbonetos. A eliminao de oxignio mais
difcil; no entanto, existem filtros especiais com essa finalidade, disponveis comercialmente. A
presena de impurezas no gs de arraste no afeta a separao cromatogrfica de maneira
significativa, mas sim a estabilidade e resposta dos detectores. A magnitude desse problema
aumenta com limites de deteco mais baixos. Quando se utiliza a programao de
temperatura, a pureza do gs de arraste tambm crtica; as impurezas podem ficar retidas no
topo da coluna e, com o aumento da temperatura, so eludas junto com as demais
substncias da amostra.

2) Controladores de vazo e de presso
O controle da vazo do gs de arraste efetuado por reguladores de presso e/ou
controladores de fluxo. Os reguladores de presso efetuam uma constrio manual do fluxo de
gs para manter constante a presso na entrada do sistema cromatogrfico. Quando a
temperatura da coluna e a presso na sada desta, ou do detector, so mantidas constantes,
esse tipo de regulador eficiente. Com a mudana da temperatura durante a anlise
(programao de temperatura), ou quando se deseja adaptar um sistema na sada da coluna
ou detector com a finalidade de coleta do efluente (fins preparativos), a presso de entrada
mantida constante, mas a vazo alterada. Nesses casos, h necessidade de controladores de
fluxo para se obter repetibilidade nos tempos de reteno.

3) Sistemas de Injeo da amostra (Injeo em colunas recheadas)
A injeo da amostra deve ser feita de tal maneira que se obtenha uma banda nica e estreita,
j que falhas na tcnica de injeo podem causar assimetria nos picos. A quantidade de
amostra injetada no deve ultrapassar a capacidade da coluna, determinada pela quantidade
de fase estacionria. A eficincia de uma coluna influenciada pelo volume de amostra
injetada; uma diminuio no volume injetado provoca um aumento na eficincia da coluna.
Quando os picos so assimtricos, o volume da amostra influencia nos tempos de reteno.
Assim, picos com assimetria frontal tero um maior tempo de reteno medida que o
volume da amostra injetada aumenta; o inverso ocorre para picos com caudas. O sistema de
injeo deve ser aquecido em uma temperatura suficiente para que ocorra a vaporizao total
da amostra (20-50 C acima da temperatura da coluna), mas cuidados devem ser tomados
para evitar decomposio dos compostos analisados.
A injeo de gases comumente feita atravs de uma seringa ou de vlvulas. s vezes, usa-se
a injeo de gases em soluo. O emprego de vlvulas resulta em excelente repetibilidade
(0,5%). No entanto, h a necessidade de balancear a presso e a vazo. Essas vlvulas so mais
facilmente danificadas com o uso prolongado. As seringas utilizadas para a injeo de gases
so construdas de modo a evitar vazamentos. A injeo feita introduzindo-se a agulha
atravs de um septo. Essa tcnica de injeo simples e utiliza o mesmo sistema empregado
na injeo de lquidos. A repetibilidade na injeo de gases por esse sistema de + ou 1%.
A injeo de amostras lquidas pode ser feita usando-se microsseringas e, mais raramente,
vlvulas. A injeo atravs de um septo, com o emprego de microsseringas, apresenta
repetibilidade de + ou 1%. O septo, construdo de silicone e/ou PTFE (politetrafluoretileno),
pode apresentar dois tipos de problemas: vazamentos, devido a injees repetidas, o que faz
que haja a necessidade de trocas peridicas deste, e sangria, causando instabilidades na linha
de base e aparecimento de picos fantasmas, quando se utiliza a programao de temperatura.
Substncias slidas so geralmente dissolvidas em um solvente adequado e analisadas sob a
forma de soluo; porm, tambm existem dispositivos para a vaporizao e injeo direta do
slido.

4) Injeo em Colunas Capilares
A quantidade de fase estacionria presente em colunas capilares muito menor que nas
colunas recheadas e, dessa forma, cuidados especiais devem ser tomados para que a
quantidade injetada no ultrapasse o limite da capacidade da coluna. Sendo assim, a injeo
da amostra em colunas capilares pode ser feita, principalmente, empregando o injetor com
divisor/sem divisor, vaporizador com programao de temperatura, ou injeo em coluna fria.
No injetor tipo com divisor/sem divisor, a amostra introduzida de forma semelhante usada
em colunas recheadas em um tubo de vidro aquecido, cuja finalidade