Gentica y Evolucin 2013 - Universidad Nacional San Juan Bosco

76
Apndice 1: Drosophila melanogaster. Caracterizacin, ciclo de vida y
manipulacion de cepas
El estudio de los mecanismos que rigen el patrn gentico de los seres vivos, constituye el
rea del conocimiento que presenta el desarrollo ms acelerado en el campo de las ciencias
biolgicas, en el ltimo siglo. En particular, el desarrollo de la Gentica se ha basado
fundamentalmente en la aplicacin de diferentes metodologas de investigacin que comprenden: el
anlisis molecular, el anlisis estadstico y el cultivo experimental de organismos.
Probablemente Drosophila melanogaster es el eucarionte ms estudiado y mejor conocido
desde el punto de vista gentico. Fue introducido en la investigacin gentica por Tomas H. Morgan
en 1909 y por sus caractersticas biolgicas, es el sujeto experimental por excelencia en el estudio
de la herencia de los organismos eucariontes.
Drosophila melanogaster, es una mosca de pequeo tamao, cosmopolita y abundante en
los frutales, por lo que es llamada mosca de la fruta. Su utilidad para los estudios genticos se debe
a las siguientes caractersticas que presenta:
1. Mtodo sencillo y poco costoso de crianza.
2. Ciclo biolgico corto y termorregulable (10 a 12 das a 25C).
3. Muy prolficas (cada hembra puede dar una descendencia de 30 a 500 individuos).
4. Se han descripto ms de 1000 mutaciones espontneas o inducidas que han permitido
hacer un estudio gentico y citogentico muy completo.
5. Las larvas presentan cromosomas gigantes (politnicos) en sus glndulas salivales, que
permiten estudiar la morfologa cromosmica y evolucin del cariotipo.
6. El nmero cromosmico bajo (2n=8).
7. El tipo de reproduccin se adapta especialmente para realizar cruzamientos controlados.
!"#$%&'$"()
Phylum: Arthropoda
Clase: Insecta
Orden: Diptera
Familia: Drosphilidae
Gnero. Drosophila
Especie: D. melanogaster

*+,-+.+/0) 2%. )23.$+
Para los propsitos de la Ctedra, se considera conveniente describir las caractersticas
morfolgicas externas del fenotipo salvaje (tipo, forma y/o disposicin de sus estructuras), para
poder distinguirlas de aquellos individuos portadores de mutaciones, denominados mutantes.
Cabeza: se distingue un aparato bucal de tipo chupador, un par de antenas cercanas entre s
y bulbosas con una arista plumosa; tres ocelos u ojos simples sobre la parte superior de la cabeza y
un par de ojos compuestos constituidos por cientos de omatidios colocados en hileras y filas; los
ojos son grandes y redondeados, su superficie es mate y de color rojo oscuro.
Gentica y Evolucin 2013 - Universidad Nacional San Juan Bosco


77
Trax: se encuentra dividido en tres segmentos: protrax, mesotrax y metatorax, los
mismos estn fusionados, y en cada uno de los cuales se inserta un par de patas. Como prolongacin
triangular del trax sobresale una estructura tpica llamada escutelo.
Abdomen: se distinguen una serie de bandas claras que se alternan con bandas oscuras. El
color del cuerpo es amarillo grisceo.
Patas: constan de las siguientes piezas: coxa, trocnter, fmur, tibia y tarso, este ltimo
con varios artejos.
Alas: presenta un par de alas funcionales, las alas posteriores estn reducidas a
balancines, que funcionan como estabilizadores de vuelo. Las alas funcionales son de borde
redondeado y sobrepasan el abdomen en una tercera parte de su longitud. Presentan cinco venas
longitudinales sobre su superficie y dos venillas transversales, con lo que el ala queda dividida en
siete regiones principales llamadas celdas. La superficie es plana, son transparentes y casi incoloras.
Repartidas por la cabeza y trax se encuentran una serie de cerdas o quetas que tienen
funcin de rganos de los sentidos, y de acuerdo a su tamao se dividen en macroquetas (las ms
largas) y microquetas (tres veces ms cortas que las anteriores).
4"(.+ 5"+.6/"(+
Drosophila melanogaster tiene una metamorfosis complicada. Su ciclo biolgico, desde la
fecundacin hasta el adulto, pasa por los estados de huevo larva pupa - imago. El desarrollo
embrionario tiene lugar en el huevo, despus de la fecundacin y formacin del cigoto. La duracin
de los estados vara con un gran nmero de factores, siendo el principal la temperatura. El ciclo
completo es de 9.5 a 10 das en condiciones controladas de temperatura y humedad, 25C y 60%.
En el siguiente cuadro se indica la duracin de los diferentes estados y del ciclo completo para
varias temperaturas (Morgan, Bridges y Stutervant, 1925).
Temp. C das huevo-larva das pupa das ciclo completo
11 57 13,7 70-71
15 18 8 26
20 8 6,3 14-15
25 5 4,2 9-10
27,5 4 3,2 7-8
30 4 3,4 7-8
Gentica y Evolucin 2013 - Universidad Nacional San Juan Bosco


78
Una exposicin continua de los individuos a temperaturas superiores a los 27-30C, puede
conducir a la esterilidad o muerte de los mismos, adems de producir efectos sobre el fenotipo o
variaciones en la penetracin o expresividad de determinados genes. A temperaturas bajas la
viabilidad se reduce y el ciclo se alarga (por ejemplo a 10C, el estado larvario requiere alrededor de
57 das, y a 15C, 18 das).
7#$)20+#
Huevo: una hembra puede comenzar a depositar huevos dos das despus de emerger y
durante unos diez das, y al cabo de ese tiempo pone entre 400-500 huevos. La fecundacin tiene
lugar dentro de tero. El huevo depositado es de forma ovoide, cubierto por una membrana
quitinosa y tiene un tamao aproximado de 0.5 mm.
Larva: del huevo emerge una larva de gran movilidad, blanca y segmentada con dos piezas
negras en su regin anterior que son las mandbulas. La larva sufre dos mudas hasta alcanzar el
tamao del adulto, que definen tres estados larvarios, que se distinguen por el tamao de la larva y
el nmero de piezas mandibulares.
Pupa: se producen los cambios histolgicos que dan origen a los tejidos del adulto. Los
tejidos localizados en el preadulto se llaman discos imaginales que debido a la facilidad de su
aislamiento se han empleado mucho en Gentica del Desarrollo.
Adulto: si el cultivo se mantiene a 25 C entre el cuarto y quinto da del estado pupal,
surge el individuo adulto. La mosca recin emergida es de color claro y su vida media puede
alcanzar un mes o incluso ms.
8"&+,-"#&+ !%93).
La distincin entre machos y hembras de D. melanogaster, puede hacerse desde el tercer
estadio larvario, en la pupa y en el adulto. En el tercer estadio larvario las gnadas masculinas son
mayores que las femeninas, pudindose observar la diferencia por transparencia en una lupa de
diseccin. En el estado de pupa, el macho posee un peine sexual de cerdas negras en el primer
artejo tarsal del primer par de patas. Dicho peine ya es visible en pupas de ms de tres das de edad.
En el adulto las diferencias morfolgicas externas son las siguientes:
Tamao: la hembra es ligeramente ms grande que el macho.
Forma: el abdomen de la hembra es ms ancho que el del macho y terminado en
punta, mientras que el del macho termina redondeado.
Color: la hembra posee sobre la parte dorsal del abdomen una serie de bandas de
pigmentacin oscuras alternando con bandas claras, mientras que el macho tiene un
manchn negro en el extremo del abdomen por la fusin de varias bandas.
Nmero de segmentos abdominales: la hembra posee 7 mientras que el macho slo
tiene 5.
Aparato genital: las hembras tienen el abdomen de color claro y solo una placa
vaginal de la misma coloracin que el resto; los machos tienen un arco genital de
color pardo.
Estas caractersticas son suficientes para el sexado. Sin embargo en las moscas recin
emergidas, la coloracin tpica an no est bien definida, haciendo confusa la diferenciacin del
sexo por este mtodo.