ANTIMICROBIANAS OBTENIDO A PARTIR DE ALMIDN Y EL PROCESO DE OBTENCIN DEL MISMO
RESUMEN DE LA INVENCIN 5 La presente invencin est relacionada con un material polimrico biodegradable con propiedades antimicrobianas que comprende almidn termoplstico, policaprolactona, cido polilctico y capsaicina. Asimismo, la invencin hace referencia a un mtodo para la produccin por extrusin del material polimrico biodegradable. 10
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MATERIAL POLIMRICO BIODEGRADABLE CON PROPIEDADES ANTIMICROBIANAS OBTENIDO A PARTIR DE ALMIDN Y EL PROCESO DE OBTENCIN DEL MISMO
CAMPO DE LA INVENCIN 5 La presente invencin est relacionada con una pelcula flexible biodegradable novedosa con propiedades antimicrobianas, obtenida a partir de almidn y con el mtodo para la obtencin de la misma.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIN 10 La funcin principal de los empaques es la preservacin y proteccin de todo tipo de productos, siendo los alimentos y las materias primas el campo de mayor prioridad. Estos productos requieren atencin debido a la contaminacin que generan los microorganismos (bacterias, esporas, hongos, etc.) durante la manipulacin de los alimentos (Tharanathan, 2003). Tradicionalmente, la 15 proteccin de los alimentos se realiza por medio de la seleccin de los envases y empaques, los cuales, generalmente se elaboran a partir de polmeros sintticos. No obstante, el uso indiscriminado de empaques sintticos ha generado serios problemas para el medio ambiente y para el desarrollo sostenible, debido a que esta clase de residuos slidos contribuye en un alto porcentaje a la contaminacin 20 provocada por desechos slidos no biodegradables, lo que ha impulsado a la bsqueda de biopolmeros naturales con doble propsito: i) contribuyan a la proteccin y conservacin de los alimentos y ii) facilidad en el tratamiento de los residuos slidos derivados de los envases y empaques utilizados para facilitar la manipulacin y transporte de los alimentos. 25 En el campo tcnico del diseo y desarrollo de envases y empaques que incluyen agentes antimicrobianos se encuentran los que presentan pelculas de recubrimiento sobre el material celulsico, por ejemplo el documento de patente US5985772 divulga materiales celulsicos no entretejidos que presentan membranas de recubrimiento de tipo ciclodextrinas en la forma de lmina bicapa o 30 lmina multicapa que sirve de barrera y evita la permeabilidad de agentes contaminantes y que han sido empleados para la fabricacin de empaques resistentes, tambin se encuentra la patente US5776842 que utiliza la misma tecnologa pero aplicada a la manipulacin y transporte de comestibles. Sin embargo, no existe informacin tcnica que conduzca a la inclusin de capsaicina 35 para la fabricacin de pelculas flexibles biodegradables y con excelentes propiedades antimicrobianas, obtenidas a partir de almidn.
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De otra parte, a pesar de los grandes avances en el desarrollo de agentes antimicrobianos sintticos aplicados al diseo de pelculas permanece la preocupacin por los efectos secundarios asociados a su toxicidad crnica y al hecho de que su actividad no es selectiva, por lo que pueden ocasionar la muerte de otros microrganismos que resultan benficos para el ser humano. Adems, 5 para la incorporacin de aditivos antibacteriales, antifngicos, insecticidas y biocidas en general, dentro de los materiales de empaque destinados a la proteccin de alimentos contina recurrindose al uso de pelculas plsticas de tipo polmero o copolmero de olefinas como material de soporte, tal es el caso de la solicitud de patente US20090208685. En algunos casos se ha recurrido a la 10 utilizacin de polmeros naturales de tipo polisacrido para la fabricacin de pelculas de empaque y/o preservacin de alimentos como en el caso de la solicitud de patente US20090076168, que divulga quitosan, alginato, agarosa, celulosas sustituidas con grupos amino y funcionalizadas con aldehdos aromticos como cinamaldehdo o cuminaldehdo que presentan actividad 15 biolgica como antioxidante y pesticida. En este orden de ideas, en el estado de la tcnica no existe informacin relacionada con el diseo de pelculas flexibles biodegradables y con excelentes propiedades antimicrobianas, obtenidas a partir de almidn y que incluyan productos naturales con actividad biocida, an cuando se conoce que los 20 productos naturales ofrecen una amplia gama de compuestos que poseen propiedades antimicrobianas de baja toxicidad, entre ellos la capsaicina, la cual causa la disrupcin de la membrana de diferentes microorganismos, tales como: Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Clostridium sporogenes, Clostridium tetani y Streptococcus pyogenes (Cichewicz RH et al., 1996). 25 De hecho, en el campo de los empaques biodegradables a partir de almidn y otros polmeros naturales, no existe ninguna divulgacin referente a la incorporacin de agentes antimicrobianos de origen natural que generen un valor agregado a estas pelculas y permitan ampliar su espectro de uso en alimentos frescos y procesados, material vegetal y otros productos que requieran de la 30 proteccin fsica y microbiolgica del producto. De esta manera, la presente invencin divulga un material polimrico biodegradable novedoso elaborado a partir de almidn y con excelentes propiedades antimicrobianas gracias a la incorporacin de la capsaicina y el proceso para la obtencin del mismo. 35 Y dado que el aprovechamiento de los recursos naturales como fuente de conservacin y como una opcin prctica para el manejo de residuos no contaminantes para el medio ambiente se convierte en una excelente opcin e innovacin en el desarrollo de nuevos productos biodegradables. Su total
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biodegradacin en productos como CO2, agua y posteriormente en abono orgnico es una gran ventaja frente a los empaques sintticos (Bastioli, 2001). El reemplazo total de los plsticos sintticos por materiales biodegradables para la elaboracin de empaques no se ha logrado hasta el presente, no obstante si se han sustituido algunos polmeros sintticos por otros naturales, en aplicaciones 5 especficas. Estos reemplazos han permitido el desarrollo de productos con caractersticas especficas relacionadas con las propiedades de barrera, mecnicas y trmicas en determinados empaques como pelculas, protectores, espumas, envolturas, platos, tasas, cucharas, bolsas, etc., (Avrous y Boquillon, 2004; Wang et al., 2003). 10 Los biopolmeros naturales provienen de cuatro grandes fuentes: origen animal (colgeno/gelatina), origen marino (quitina/quitosan), origen agrcola (lpidos y grasas e hidrocoloides: protenas y polisacridos) y origen microbiano (cido polilctico (PLA) y polihidroxialcanoatos (PHA)) (Tharanathan, 2003). Los polisacridos son conocidos por su estructura compleja y diversidad funcional 15 (Stawaski y Jantas, 2003). La estructura lineal presente en la celulosa (1,4-b-D glucano), la amilosa (un componente del almidn 1, 4-a-Dglucano) y el quitosan (1, 4-b-D polmero de glcidos), le proporcionan a las pelculas dureza, flexibilidad y transparencia. Adems, las pelculas resultan resistentes a las grasas y aceites. 20 El almidn es un polmero natural cuyos grnulos consisten en estructuras macromoleculares ordenadas en capas y cuyas caractersticas en cuanto a composicin, cantidad y forma varan de acuerdo con el tipo de fuente de la que provenga. Los grnulos de almidn estn compuestos por capas externas de amilopectina y capas internas de amilosa, cuya proporcin es variable 25 dependiendo de la fuente del almidn. Su composicin qumica es la de un polisacrido formado nicamente por unidades glucosdicas, es decir, es una macromolcula formada por gran cantidad de molculas de glucosa que se repiten (Meneses, 2007) y la mezcla de amilosa (lineal) y amilopectina (ramificada) vara dependiendo de la fuente de almidn. La amilosa se encuentra en una menor 30 proporcin (20 a 30 %) en el almidn, mientras que la amilopectina consiste en cadenas altamente ramificadas en forma de hlices dobles y es la responsable de las propiedades cristalinas del almidn (Dean et al., 2011). Si bien, el almidn es una materia prima abundante, especficamente el que proviene del maz y presenta propiedades termoplsticas cuando se realiza la 35 disrupcin estructural a nivel molecular (Tharanathan, 2003), la presencia de amilosa en un 70% en almidones de amilo-maz da una estructura fuerte y ms flexible a la pelcula, mientras que la estructura ramificada de la amilopectina generalmente le da a la pelcula propiedades mecnicas pobres.
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La tecnologa para el tratamiento del almidn de maz se basa en la incorporacin del grnulo de almidn o almidn en forma gelatinizada a las formulaciones de las pelculas fabricadas en procesos de compresin, extrusin soplado, extrusin de un slo tornillo o doble tornillo y moldeo por inyeccin (Blacido et al., 2005; Parra et al., 2004). Y para poder desarrollar pelculas a partir de almidn o reforzadas 5 con ste, es necesaria la plastificacin del grnulo de almidn nativo o almidn hidrolizado, la cual se obtiene por la disrupcin estructural que resulta de una disminucin de los cristales del almidn durante el proceso de extrusin, emergiendo un nuevo tipo de material conocido como almidn termoplstico (TPS), el cual, se logra al procesar el almidn con un bajo contenido de agua y la 10 accin de fuerzas trmicas y mecnicas en presencia de plastificantes que no se evaporan fcilmente durante el procesamiento (Bastioli, 2001; Acosta et al., 2005; Villada, 2005). El TPS presenta varias ventajas adems de su biodegradabilidad, por ejemplo: es un material renovable, flexible y se puede acondicionar muy fcilmente a diferentes procesos de termoplastificacin usando 15 equipos estndar utilizados en la fabricacin de polmeros sintticos, tales como inyeccin por moldeo, extrusin por soplado, moldeo por inyeccin, moldeo por compresin, extrusin de pelcula plana y radiacin por moldeo (Van Soest et al., 1996b; Zhai et al., 2003). Igualmente, se han realizado estudios en TPS hechos a partir de amilosa y 20 amilopectina. En los estudios se analizaron las propiedades de barrera que muestran una alta permeabilidad al O 2 y disminucin al vapor de agua en TPS de amilosa comparados con los empaques elaborados a partir de amilopectinas (Forssell et al., 2002; Dole et al., 2004; Jansson y Thuvander, 2004; Blacido et al., 2005). 25 Sin embargo, continan existiendo problemas asociados a las pelculas de almidn porque son quebradizas y muy sensibles al agua, por lo que el desarrollo de almidones termoplsticos incluye la incorporacin de aditivos y plastificantes en el proceso, con el fin de generar propiedades mecnicas deseables en el producto final (Chaudhay et al., 2008). De esta manera, se encuentra que la adicin de 30 polmeros naturales como el almidn al interior del polietileno (polmero sinttico), en forma granular entre un 6 y el 30%, es otra aproximacin a la fabricacin de los empaques biodegradables. Las pelculas de almidn y polietileno de baja densidad (LDPE) contienen hasta un 30% de almidn, mostrndose como un material parcialmente biodegradable. Otra aplicacin del almidn es la combinacin, en 35 forma gelatinizada y en proporciones entre el 30 y el 70%, con polmeros sintticos igualmente gelatinizados tal es el caso de polivinilalcohol en proporciones que varan entre el 10% y 20% (Muratore et al., 2005). Otra alternativa para reducir la sensibilidad a la humedad consiste en utilizar polivinilalcohol (PVA), glicerina, sorbitol, bases nitrogenadas, etc en las formulaciones. (Shamekin et al., 2002; 40 Smits et al., 2003; Finkenstadt y Willett, 2004; Yu, 2004; Acosta et al., 2006).
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Por otra parte, el almidn nativo presenta baja resistencia al esfuerzo de corte, baja descomposicin, alta retrogradacin y sinresis, por lo que una alternativa para obtener pelculas a partir de almidn cuyas propiedades mecnicas y de barrera sean cada vez mejores consiste en modificar el almidn, con lo cual se logran desarrollar diversas propiedades funcionales para diversas aplicaciones 5 industriales (Yoo y Lee, 2010). As, el almidn oxidado se usa generalmente en las industrias papelera, textil y de alimentos para proveer propiedades de cubierta y su aplicacin en la industria de alimentos ha venido en aumento debido a su baja viscosidad, alta estabilidad, propiedades enlazantes y de formacin de pelculas (Zamudio-Flores et al., 2007). 10 Dentro de los mtodos de modificacin del almidn se encuentran la hidroxipropilacin que consiste en su transformacin qumica por reemplazo de grupos y sustituyentes a lo largo de las cadenas polimricas del almidn. Normalmente se preparan por eterificacin de almidn nativo con xido de propileno en presencia de un catalizador alcalino. Los grupos hidroxiproplicos son 15 de naturaleza hidroflica y cuando son introducidos al grnulo de almidn, stos interrumpen o logran hacer disrupcin de los enlaces de la estructura interna que mantiene a los grnulos unidos, influyendo as en las propiedades fisicoqumicas del almidn de acuerdo con la fuente de donde provenga, las condiciones de reaccin y el tipo de sustituyentes empleados (Yoo y Lee, 2010). La 20 hidroxipropilacin se aplica principalmente para inhibir la retrodegradacin de las cadenas de amilosa y amilopectina (Pal et al., 1999), fenmeno que se presenta cuando las molculas forman puentes de hidrgeno y generan la expulsin de molculas de agua y de otros solventes (Dean et al., 2011). Los almidones hidroxipropilados permiten incrementar la claridad y flexibilidad de las pelculas y 25 mejoran las propiedades de transmisin de agua (Dean et al., 2011). En el campo de las patentes se encuentran diferentes publicaciones relacionadas con mezclas plsticas biodegradables que incorporan almidn en su composicin, por ejemplo la patente US586141 revela una composicin plstica biodegradable que comprende una matriz de polietileno y un polister aliftico biodegradable, 30 almidn nativo de maz, papa, arroz y mezclas de los mismos o modificado, un plastificante de almidn, un agente desestructurante del almidn, un agente de acoplamiento, un radical iniciador y un agente antioxidante. Asimismo, la patente divulga un procedimiento para la elaboracin de la composicin plstica biodegradable que comprende las etapas de: (i) Alimentar una mezcla de 35 polietileno y un polister aliftico biodegradable en proporciones 1:1 a 1:30, el agente de acoplamiento y un radical iniciador a travs de la tolva de una extrusora de doble tornillo y una mezcla de: almidn, plastificante, agente desestructurante y antioxidante, a travs de la tolva lateral de una extrusora de dobla tornillo; (ii) Mezclar la matriz y la mezcla de almidn y (iii) Someter la mezcla a extrusin 40
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reactiva a una temperatura de 150 a 220 C una velocidad de tornillo de 50 a 300 r.p.m. La patente US6235816 ensea un mtodo para la manufactura de una mezcla termoplstica biodegradable que comprende las siguientes etapas: (i) Combinar almidn pre secado y un agente plastificante para formar un almidn termoplstico 5 fundido con un contenido de agua inferior al 1%; (ii) Combinar al menos un polmero seleccionado del grupo que comprende: polisteres aromticos, copolmeros de polister de bloques aromticos y alifticos, polister amidas, polmeros de xido de polietileno, poliglicoles y polister uretanos con el almidn termoplstico fundido y un polister aliftico (PLA, PCL, cido polihidroxibutirico o 10 copolmero de cido polihidroxibutirico e hidroxivalerico), donde el almidn termoplstico comprende entre el 10 y el 95% en peso de la mezcla almidn/polmero y la etapa se realiza a una o ms temperaturas en el rango entre 120 a 260C, preferiblemente entre 140 y 160C; y (iii) Solidificar la mezcla en agua y permitir que la mezcla reabsorba agua hasta lograr que presente un 15 contenido en el rango de 1 a 6% en peso. Asimismo, frente al desarrollo de empaques biodegradables a partir de almidn que incluyen el uso de polmeros de alto peso molecular (100000 a 400000) para la formacin del polmero moldeado, se encuentra la patente US20070276317 que ensea un polmero moldeado biodegradable que comprende: 50 a 85% (p/p) de 20 almidn; 4 a 13% (p/p) de un polmero soluble en agua; 10 a 35% (p/p) de sorbitol y otros polioles como plastificante; 0,5 a 10% (p/p) de xido de polietileno o PEG; 0,25 a 3% (p/p) de un emulsificante grado alimenticio con un HLB en el rango comprendido entre 2 y 10 y cido esterico entre 0 y 1,5% (p/p). De otra parte, la patente US7067651 divulga un proceso para la preparacin de 25 una composicin biodegradable que comprende las etapas de mezclar almidn, agua, un agente plastificante, un agente de relleno y un compactante en presencia de lcali o sal hasta obtener una mezcla uniforme e inyectar o comprimir esta mezcla en un molde cerrado a una temperatura entre 150 y 300C hasta que se alcance la gelatinizacin del almidn. La composicin se caracteriza porque 30 comprende: (i) almidn en un porcentaje entre 30 y 70% (p/p), preparado a partir de yuca, arroz, papa, maz, sorgo o sag solos o en mezclas en la forma nativa o modificada; (ii) un agente plastificante en un porcentaje superior al 10% seleccionado a partir de: glicerol, sorbitol, glucosa, fructosa, jarabe, miel, cidos grasos, esteres de cidos grasos, mono glicridos, diglicridos o fosfolpidos solos 35 o en mezclas; (iii) un agente de relleno seleccionado de tierra de diatomceas, bentonita, pulpa de yuca, fibras naturales solas o en mezclas en un porcentaje superior al 30%; (iv) un compactante seleccionado entre: alginato, goma guar, carragenan, konjak, protena de soya, protenas de origen animal y vegetal y (v) un lcali o sal seleccionado entre CaOH, NaOH, KOH, CaCO 3 , Na 2 CO 3 , K 2 CO 3 , 40
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Na 2 HCO 3 , (NH 4 ) 2 HCO 3 solas o en mezclas, para ajustar el pH de la mezcla hasta un valor neutro o ligeramente alcalino. Dentro de los documentos de patente que divulgan el diseo y desarrollo de pelculas para la proteccin y empaque de alimentos se encuentran la publicacin US5906825 que ensea una composicin de un material polimrico seleccionado 5 a partir de polialquilenos, poliolefinas, polivinilos, caucho sinttico, fibra de ltex, fibra sinttica y sus mezclas o polmeros como polietilenos, polipropilenos, poliestirenos, poliacrilatos, cloruro de polivinilenos, poliuretanos y sus mezclas e incluso homopolmeros y copolmeros, cuya seleccin depende en exclusiva de su aplicacin, y que incluyen una cantidad de un agente biocida seleccionado entre: 10 capsaicina, extracto de semilla de uva, cido ctrico, BIOCIDIN, aceite de rbol de t, vitamina E o compuestos de amonio cuaternario. La seleccin del agente biocida depende de algunos factores como: el uso o destinacin de la pelcula o empaque, los microorganismos que se van a inhibir, el tiempo de uso o duracin requerida del empaque, el contenido que se desea proteger y el tiempo de 15 consumo, la concentracin permitida del agente antimicrobiano, entre otros. Sin embargo, en ningn caso Seabrooke et. al. (US5906825) recurren a la utilizacin de materiales polimricos biodegradables como en el caso de la invencin y si bien, aplica capsaicinoides de tipo comercial para inhibir el crecimiento y destruir bacterias, virus y hongos de los empaques, no logran disear y estabilizar una 20 formulacin de un polmero biodegradable y de origen natural como es el caso del almidn y sus modificaciones estructurales de tipo TPS. En general, se conoce que la capsaicina [IUPAC (E)-N-[(4-hidroxi-3- metoxifenil)metil]-8-metilnon-6-enamida] figura 1 - es un alcaloide que se encuentra en las Solanceas del gnero Capsicum, por ejemplo, los chiles y 25 habaneros, siendo el componente activo que determina el sabor picante de estas especias. Es un slido rojo oscuro prcticamente insoluble en agua fra, ligeramente soluble en cido clorhdrico concentrado y soluble en ter de petrleo; presenta un olor pungente altamente voltil (presin de vapor 1,3X10-8 mm Hg a 25C), un sabor ardiente detectable en una parte en 100000 y punto de fusin 30 65C. El extracto obtenido de los pimientos del gnero Capsicum contiene una mezcla de alcaloides, tpicamente, del 80% al 90% de la mezcla corresponde a capsaicina (69%) y dihidrocapsaicina (22%).
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Figura 1
La capsaicina se ha utilizado como herramienta experimental debido a su accin selectiva sobre las fibras nerviosas aferentes, o fibras C, las que se cree median 5 el dolor. A partir de estudios en animales se ha concluido que la capsaicina activa la despolarizacin de la membrana de la fibra C abriendo canales catinicos selectivos para el calcio y el sodio. Aunque los mecanismos detallados no se conocen, los efectos mediados por la capsaicina incluyen: (i) la activacin de nocirreceptores en los tejidos perifricos; (ii) la eventual desensibilizacin de los 10 nocirreceptores perifricos en una o ms modalidades de estimulo; (iii) la degeneracin celular de las fibras C aferentes sensibles desmielinizadas; (iv) la activacin de las proteasas neuronales; (v) el bloqueo del transporte axnico; y (vi) la disminucin del nmero absoluto de fibras C sin afectar el nmero de fibras mielinizadas. 15 La capsaicina se ha utilizado como potenciador de la penetracin para la administracin transdrmica de ingredientes farmacuticos activos (Kansa Bykasar et tal, Kocatepe Tip Dergisi (2003), 1, 29-37). La presencia de una cadena aliftica en las molculas de capsaicinoides les confiere una capacidad intrnseca para penetrar en los tejidos, tales como la piel o las membranas 20 mucosas. La patente francesa FR-A-2721213 describe la preparacin de un extracto de guindilla (Capsicum) mediante un procedimiento que produce un 5% p/p de capsaicina en alcohol cetlico, sin embargo, no menciona nada frente a su potencial utilizacin como agente antibacterial o destinacin para el diseo y desarrollo de empaques, envases o embalajes para alimentos. 25 Asimismo, debido a sus propiedades irritantes, la capsaicina se ha empleado en "sprays de pimienta", como alternativa de uso comn a la sustancia de defensa personal. En este caso, el spray de pimienta es efectivo para inmovilizar a un presunto agresor durante un perodo de tiempo suficiente para escapar. Por otra parte, extractos de Capsicum han sido utilizados como repelentes de 30 microorganismos en pinturas marinas, la patente US5226380 divulga una pintura
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antiincrustante que contiene partculas de pimienta de cayena o un derivado de oleorresina capsicum como agente activo y en pinturas anti incrustantes, patente US5397385, que contiene como ingrediente activo capsaicina en polvo fino, una solucin lquida de una oleorresina de capsaicina o una capsaicina cristalizada. La patente US5629045 describe una pintura anti-incrustante que contiene como 5 ingrediente activo, entre otros, capsaicina y derivados de la vanillilamida con sustituyentes alquilo obtenidos a partir de extractos de capsaicina.
OBJETOS DE LA INVENCIN En un primer aspecto, la invencin est relacionada con un mtodo para la 10 produccin por extrusin de un material polimrico biodegradable elaborado a partir de mezclas de almidn, agente antimicrobiano, cido polilctico (PLA) y policaprolactona (PCL). En un segundo aspecto, la invencin ensea un material polimrico biodegradable elaborado a partir de mezclas de almidn, plastificante, capsaicina, PLA y PCL. 15
DESCRIPCIN DETALLADA DE LA INVENCIN La presente invencin reclama en un primer objeto un proceso para la produccin por extrusin de pelculas flexibles biodegradables con propiedades antimicrobianas elaboradas a partir de mezclas de almidn, plastificante, agente 20 antimicrobiano, PLA y PCL, que comprende las etapas de: 1. Tamizar en malla 60 el almidn con la relacin de amilosa/amilopectina de 0,31 a 0,33 en peso para obtener un tamao de partcula inferior a 0.250 micras. 2. Hidroxipropilacin del almidn. Para modificar el almidn se mide una cantidad de agua equivalente al peso del almidn y se incrementa su temperatura 25 hasta 50 C la cual debe mantenerse constante. Se disuelve en sta Na 2 SO 4 en una cantidad igual al 20 % del peso del almidn. Cuando la sal agregada se ha disuelto por completo, se dispersa el almidn en el agua (relacin agua - almidn 1 a 1) y se ajusta el pH hasta 11,3 mediante la adicin de una solucin de NaOH 0.5 N con agitacin constante a 140 rpm. Luego se incrementa la presin hasta 25 30 psig y manteniendo la presin constante se adiciona xido de propileno en un volumen equivalente a un valor entre 13 y 19 % del peso del agua original. A continuacin la presin de trabajo y la temperatura se incrementan hasta 25-35 psig y 55-65 C respectivamente, permaneciendo constantes durante una hora al cabo de la cual la reaccin finaliza. Posteriormente, se disminuye la temperatura 35 de la mezcla hasta 25 C y se ajusta el pH hasta un valor de 5.5 mediante la adicin de solucin de HCl 0.1 N.
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3. El almidn modificado se lava en un lienzo mediante la adicin de agua destilada y se filtra. La masa obtenida se somete a secado a temperatura de 45 C hasta que el porcentaje de humedad del almidn sea menor a 1 % en base hmeda. Una vez est seco el almidn se macera y se tamiza nuevamente usando el tamiz nmero 60. Finalmente, se humedece el almidn hasta 16 % de 5 humedad en base hmeda. 4. Mezclar el almidn con el agente plastificante y el agente antimicrobiano. Para plastificar el almidn se utiliza glicerol el cual se adiciona en un rango del 20 a 30% con respecto a la mezcla total que ste forma con el almidn. Como agente antimicrobiano se utiliza un extracto de capsaicina en estado lquido; ste se 10 adiciona al glicerol antes de mezclarlo con almidn. Se diluye el agente antimicrobiano en el glicerol y posteriormente sta mezcla se agrega al almidn previamente humedecido. Se hace la mezcla hasta obtener una pasta homognea y se procede a extrur el material obtenido. La cantidad de agente antimicrobiano equivale a un valor entre 0,2 y 0,8% de la mezcla total. 15 5. Obtencin del almidn termoplstico (TPS) por extrusin. La extrusin se realiza usando un equipo con tres zonas de calentamiento independientes y con calentamiento en el dado. La temperatura de procesamiento para obtener el TPS es 110-130 C en la zona 1, 120-130 C en la zona 2, 120-130 C en la zona 3 y 90-110 C en el dado, a una velocidad de tornillo constante de 40 a 60 rpm. Para 20 controlar el dimetro del material se utiliza una boquilla de 1 mm de dimetro a la salida del dado. 6. Secar el TPS a una temperatura entre 40 y 50C durante 8 a 16h horas y se procede a cortarlo en forma de pellets con una longitud final menor a 0,5 cm. 7. Obtener la mezcla binaria de PLA y PCL. Para la formacin de la pelcula a 25 partir de almidn, ste debe mezclarse con otras sustancias que pueden ser polimricas o no, las cuales permitirn generar un material continuo y de propiedades mecnicas aceptables. Para esto, se elabora una mezcla polimrica binaria a partir de PLA y PLC; el primero de stos se agrega en un porcentaje entre el 65-75 % del peso de la mezcla binaria total y el segundo debe agregarse 30 en un porcentaje entre el 25-35%. sta mezcla debe incluir un agente acoplante que permita la unin entre componentes que no son compatibles ni qumica ni termodinmicamente; en este caso, debe usarse debido a que el almidn es una sustancia que no es compatible con los polmeros mencionados y por tanto no existen posibilidades de formacin de enlaces entre stos. Se necesita entonces 35 un agente mediador entre las sustancias utilizadas el cual forma enlaces con cada uno de los polmeros empleados. Se utiliza cido anhdrido maleico, el cal tiene peso molecular cercano a 98 g/mol, temperatura de fusin cercana a 52 C y gravedad especfica aproximada de 1,43; se agrega en un porcentaje entre 1,5 y 3,5 % de la mezcla binaria total. Para que la reaccin acoplante del anhdrido 40
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maleico se logre, debe utilizarse un agente iniciador de la reaccin, el cual acta como un tipo de catalizador. La sustancia que se utiliza en este caso es perxido de benzoilo, de peso molecular aproximado a 242 g/mol, temperatura de fusin cercana a los 103 C y gravedad especfica de 1,3; ste se agrega en un porcentaje entre el 0,1 y 0,5% de la mezcla binaria total. Adicionalmente, se puede 5 dar color al material incluyendo un colorante, por ejemplo ftalocianina, en un rango equivalente al 0,5-1,5 % del peso de la mezcla compuesta por el TPS y la mezcla binaria. Los polmeros, el agente acoplante, el agente iniciador y el colorante son mezclados y agitados en un recipiente hasta que haya una distribucin uniforme. 10 8. Obtener los pellets de la mezcla binaria por extrusin a una velocidad de tornillo de 40 a 60 r.p.m con un perfil de temperatura 120-130/140-150/145-155 y 130-150 C en el dado de moldeo. El material se recibe y se corta en pellets con una longitud final inferior a 0,5 cm. 9. Obtener la pelcula flexible por extrusin a partir de la mezcla de los pellets 15 de TPS y de la mezcla binaria. Para obtener el material que dar forma al empaque, debe hacerse una extrusin adicional en la cual el TPS se procesa junto con la mezcla binaria. Para lograr esto, el TPS se incluye en un porcentaje entre el 60 y 80 % y la mezcla binaria entre el 20 y 40% de la mezcla formadora de pelcula. Se realiza la extrusin por soplado empleando las siguientes 20 temperaturas de procesamiento: 150-160 C en la zona 1, 150-170 C en la zona 2, 150-170 C en la zona 3 y 140-160 C en el dado de soplado. La velocidad de tornillo se mantiene constante entre 60-100 rpm. Una vez el material sale del extrusor se aplica aire para formar el tubular, el cual se recibe en el embobinador del equipo. 25 10. Por ltimo, se obtiene un rollo de material el cual es cortado para formar bolsas o empaques susceptibles de ser usados en diversas aplicaciones. En un segundo objeto la invencin revela un material polimrico biodegradable elaborado por extrusin de una mezcla de almidn termoplstico, capsaicina, cido polilctico, policaprolactona, anhdrido malico y perxido de benzoilo, en 30 las siguientes proporciones: Almidn TPS 60 a 80 % p/p que comprende: almidn hidroxipropilado 70- 80% p/p, glicerol 20-30%, capsaicina 0,2-0,8% p/p (en relacin a la mezcla total) Mezcla binaria 20 a 40% p/p que comprende: cido polilctico 65-75%, 35 policaprolactona 25-35%, anhdrido malico 1,5-3,5%, colorante 0,5-1,5 % y perxido de benzoilo el 0,1-0,5%.
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EJEMPLO 1. Elaboracin de la pelcula flexible antimicrobiana partir de almidn y una mezcla binaria de PLA + PCL. Se obtuvo TPS con almidn modificado de yuca con humedad del 16 % usando en el extrusor temperaturas 120 C en la zona 1, 125 C en la zona 2, 125 C en la zona 3 y 100 C en el dado, a una velocidad de tornillo constante de 40 rpm. El 5 material obtenido se cort en pellets. Se obtuvo una mezcla binaria a partir de la mezcla compuesta por cido polilctico (68,63 %) policaprolactona (29,41 %), anhdrido maleico (1,96 %), colorante (1 %) y perxido de benzoilo (0,25 %). El material se cort en pellets. Posteriormente, los materiales se mezclaron en una proporcin 70:30 de TPS y mezcla binaria los cuales fueron procesados por 10 extrusin por soplado, usando temperaturas de 155 C en la zona 1, 160 C en la zona 2, 160 C en la zona 3 y 150 en el dado de soplado. El material polimrico biodegradable obtenido fue caracterizado fisicoqumicamente para determinar sus propiedades trmicas, fuerza de tensin, resistencia al impacto, resistencia al rasgado, sellado, permeabilidad, color y brillo, 15 las cuales se presentan a continuacin:
Propiedades trmicas El material posee una entalpa de fusin (T m ) entre 106,7 J/g y 130,7 J/g, por lo tanto su temperatura de fusin se encuentra entre 156,79 C y 182,46 C. 20
Fuerza de tensin La fuerza de tensin promedio para el material fue de 6,86 MPa.
Resistencia al impacto Gardner 25 Luego que el material fue expuesto a una humedad relativa de 50 + 2% y temperatura de 23 + 2 C el material resultante presenta una resistencia al impacto entre 106 y 112 g.
Resistencia al rasgado 30 La resistencia al rasgado se midi en dos sentidos, en sentido longitudinal (en direccin al flujo del soplado) y en sentido transversal (en contraflujo al flujo de soplado), obtenindose los siguientes resultados: o Fuerza de rasgado promedio en sentido longitudinal: 24,36 gf. o Fuerza de rasgado promedio en sentido transversal: 26,07 gf. 35
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Sellado Al hacer un sellado a 100 C por un tiempo de 4 segundos y al determinar el esfuerzo necesario para romper el sello, se obtuvo una fuerza del sello del material de 3,2845 N y un esfuerzo de 0,1559 N/mm 2 . 5 Permeabilidad al vapor de agua Luego que el material fue expuesto a una humedad relativa de 50 + 2% y temperatura de 23 + 2 C, la permeabilidad al vapor de agua del material es de 1,72643 x 10 -12 g/m*s*Pa. 10 Permeabilidad al oxgeno Luego que las muestras se expusieran a una humedad relativa de 50 + 2% y temperatura de 23 + 2 C, se obtuvo una permeabilidad al oxgeno del material de 1,99002x10 -08 cm 3 /m*d*Pa. 15 Color y brillo Se determinaron el color y el brillo del material encontrando como resultado los siguientes parmetros que se indican a continuacin: o L* = luminosidad o a y b = ejes que representan la dimensin del tono de color, donde a 20 representa la relacin rojo-verde y b representa la relacin amarillo- azul. o c* = intensidad del color o h = tono real. Los resultados para color fueron: 25 o L* = 64,4 o a* = -56,77 o b* = 7,04 o C* = 57,2 o h = 172,92 30
Los resultados para brillo fueron: o L* = 52,34 o a* = 36,84 o b* = 0,063 35 o C* = 36,84 o h = 180,04
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EJEMPLO 2. Evaluacin de la pelcula flexible antimicrobiana biodegradable en el desarrollo de cultivos de pltano. A partir de la pelcula flexible obtenida y caracterizada en el ejemplo 1 se elaboraron empaques biodegradables que fueron empleados para recubrir pltanos en cultivo. El sitio de evaluacin se localiza a una altura promedio de 5 1780 msnm, precipitacin de 2010 mm anuales, temperatura de 18 o C, humedad relativa promedio de 78 % y 1800 horas de brillo solar ao que presenta suelos francos arenosos con buena permeabilidad. Se escogi un lote con pltano Hartn y Dominico de 710 m 2 , con edad aproximada de 6 aos y manejo convencional, donde se dispuso de 50 unidades de pltano a los que se midieron las 10 propiedades fsicas de los racimos. Se estim la tasa y desarrollo de los racimos, mediante la evaluacin de variables como: i) longitud del nudo a mano final y ii) longitud y dimetro del quinto y sexto dedo de la tercera mano, en plantas que presentaron diferente estado de fructificacin y que fueron embolsadas con empaque plstico convencional, 15 empaque biodegradable de la invencin y un control correspondiente a las plantas sin embolsar. Se determin el desarrollo de los racimos mediante las variables ya mencionadas a partir de plantas que iniciaron proceso de fructificacin y que fueron rotuladas mediante un diseo completamente al azar 4 x 3, donde cuatro fueron los 20 tratamientos y tres la repeticiones, por lo tanto, se emplearon 12 plantas de pltano cuyos racimos fueron embolsados con empaque plstico convencional (3) y con el empaque biodegradable de la invencin con y sin capsaicina (3) y no embolsados (3). Para aquellos racimos con 110 das cumplidos despus de la floracin (DDF), se 25 evaluaron propiedades mecnicas como comprensin (Kg/F/cm 2 ) y firmeza (Kg/F/cm 2 ). Los pltanos para estas pruebas se seleccionaron en tamao, forma y maduracin aparente. Las pruebas mecnicas se realizaron haciendo uso del analizador universal (Klower Academic/Plenum, Publihers, Nueva York, 2003) y usando el software Trapezium 2, v. 2.3. 30
En cuanto al desarrollo general de los racimos de pltano, stos desarrollaron en promedio 7,3 manos efectivas, 11 dedos por mano efectiva, una longitud promedio de 50,4 cm desde el nudo hasta la mano final, entre 18 y 24,7 cm de longitud mxima en el quinto y entre 13 y 27 cm para el sexto dedo de la tercera 35 mano y un dimetro mximo que oscil entre 3 y 4 cm para los mismos dedos respectivamente, mientras que los pesos obtenidos de los racimos oscilaron entre 8 y 16 kg.
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Al someter los datos obtenidos durante tres mediciones, se estableci que en la primera evaluacin no se presentaron diferencias significativas entre los tratamientos, sin embargo, para la segunda y la tercera medicin se encontraron diferencias significativas en la longitud y dimetro del quinto y sexto dedo de la tercera mano. De acuerdo con la prueba de Duncan (5%), los mayores promedios 5 tanto de longitud como de dimetro se alcanzaron en los tratamientos con el empaque biodegradable de la invencin con o sin capsaicina (Tabla 1), con lo cual, se demuestran las propiedades antimicrobianas de las pelculas obtenidas por el mtodo de la invencin y aplicadas en composiciones para la fabricacin de empaques biodegradables a partir de almidn. 10
Tabla 1. Promedios obtenidos para el 5to y 6to dedo durante el tercer muestreo.
En cuanto a las propiedades fsicas de los pltanos, fueron medidas la 15 penetrometra y la resistencia, mediante las variables mxima fuerza (N) y mximo desplazamiento (mm), una sola vez y en momento de cosecha establecindose por anlisis de varianza para un diseo completamente al azar y prueba de promedios, las diferencias entre los tratamientos. 20 Respecto de los resultados, la fuerza mxima en resistencia oscil entre 210 y 501 N y en penetrometra entre 26,03 y 39,5 N, mientras que el desplazamiento oscil entre 12,7 y 17,3 mm para resistencia y 6,04 y 8,14 mm para penetrometra. Al aplicar el anlisis de varianza no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos para la variable mximo desplazamiento (mm) tanto en resistencia 25 y penetrometra. Sin embargo, para la variable mxima fuerza (N), si se encontraron diferencias significativas entre tratamientos, indicando que los pltanos desarrollados bajo influencia de los empaques biodegradables de la invencin generaron un fruto con dureza inferior, lo cual podra hacerlos un poco ms susceptibles de manejo durante la poscosecha. 30
Aunque la presente invencin ha quedado descrita con las realizaciones preferentes mostradas, queda entendido que las modificaciones y variaciones que conserven el contenido y el alcance de su divulgacin, tales como el empaque de alimentos frescos y procesados, material vegetal y otros se encuentra dentro del 35 alcance de las reivindicaciones que a continuacin se presentan. Tratamientos Long. 5to dedo (cm) Long. 6to dedo (cm) Dimetro 5to dedo (cm) Dimetro 6to dedo (cm) Sin empaque 17,90 12,9 3,14 3,28 Con empaque convencional 18,03 18,9 3,23 3,28 Empaque de la invencin con capsaicina 24,60 25,7 3,84 3,58 Empaque de la invencin sin capsaicina 24,73 25,1 3,88 3,83
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REIVINDICACIONES
1. Un proceso para la produccin por extrusin de pelculas flexibles biodegradables, que comprende las etapas de: 5 (a) Tamizar en malla 60 el almidn con la relacin de amilosa/amilopectina de 0,31 a 0,33 en peso para obtener un tamao de partcula inferior a 0.250 micras. (b) Modificar el almidn por tratamiento en medio bsico con xido de propileno durante 1h a una presin entre 25-35 psig y 55-65 C con 10 un volumen de xido de propileno equivalente a un valor entre 13 y 19 % del volumen del almidn. (c) Lavar y secar a 45 C el almidn modificado hasta que el porcentaje de humedad del almidn sea inferior a 1 % en base hmeda. (d) Tamizar en malla 60 y humedecer el almidn hasta 16 % de 15 humedad en base hmeda. (e) Mezclar el almidn (70-80% p/p) con glicerol (20-30% p/p) previamente mezclado con un extracto de capsaicina (entre 0,2 y 0,8% p/p de la mezcla total) y almacenar durante 12-36h a una temperatura entre 15-25 C. 20 (d) Obtener el almidn termoplstico por extrusin de la mezcla a una temperatura de procesamiento de 110-130 C en la zona 1, 120-130 C en la zona 2, 120-130 C en la zona 3 y 90-110 C en el dado, a una velocidad de tornillo constante de 40 a 60 r.p.m. (d) Secar el almidn termoplstico a una temperatura entre 40 y 50C 25 durante 8 a 16h horas y cortarlo en forma de pellets con una longitud final menor a 0,5 cm. (e) Realizar la mezcla de PLA 65-75%, PCL policaprolactona 25-35%, anhdrido malico 1,5-3,5%, colorante 0,5-1,5 % y perxido de benzoilo el 0,1-0,5%. 30 (f) Obtener los pellets de la mezcla binaria por extrusin a una velocidad de tornillo de 40 a 60 r.p.m con un perfil de temperatura 120-130/140- 150/145-155 y 130-150 C en el dado de moldeo y cortar en pellets con una longitud final inferior a 0,5 cm.. (g) Obtener el material polimrico biodegradable por extrusin por 35 soplado de la mezcla de los pellets del almidn termoplstico (60- 80% p/p) y de la mezcla binaria (20-40% p/p) empleando las siguientes temperaturas de procesamiento: 150-160 C en la zona 1, 150-170 C en la zona 2, 150-170 C en la zona 3 y 140-160 C en el dado de soplado a una velocidad de tornillo constante entre 60-100 40 rpm.
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(h) Aplicar aire para formar el tubular, el cual se recibe en el embobinador del equipo.
2. Material polimrico biodegradable con propiedades biodegradables obtenido por el procedimiento de la reivindicacin 1 que comprende: 5
(a) Almidn TPS 60 a 80 % p/p que contiene: almidn hidroxipropilado 70-80% p/p, glicerol 20-30%, capsaicina 0,2-0,8% p/p (en relacin a la mezcla total), y (b) Mezcla binaria 20 a 40% p/p que contiene: cido polilctico 65-75%, 10 policaprolactona 25-35%, anhdrido malico 1,5-3,5%, colorante 0,5- 1,5 % y perxido de benzoilo el 0,1-0,5%.