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Composio qumica e atividade

antibacteriana dos leos essenciais de
cinco espcies de eucalyptus cultivadas
em Gois
Estanislau, A.A.1; Barros, F.A.S.1; Pea, A.P.2; Santos, S.C.3; Ferri, P. H. 3; Paula, J.R.4 *
2

1
Instituto de Cincias Biolgicas;
Estao Florestal Experimental do IBAMA EFLEX;
3
Instituto de Qumica;
4
Faculdade de Farmcia;
Universidade Federal de Gois

RESUMO: Neste trabalho foi realizado um estudo da composio qumica e da atividade

antibacteriana dos leos essenciais extrados por hidrodestilao, em aparelho de Clevenger
modificado, das folhas dessecadas e trituradas de Eucalyptus cloeziana F. Mueller, E.
citriodora Hook, E. saligna Smith, E. grandis Hill ex Maiden, E. microcorys F. Mueller. A
anlise da composio qumica foi realizada por CG/EM e a atividade antibacteriana foi
avaliada por difuso em gar contra os microrganismos Escherichia coli 0:158, E. coli ATCC
8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Salmonella choleraeseus ATCC 10708. Os
leos essenciais de E. citriodora e E. grandis apresentaram maior efeito inibitrio contra
bactrias Gram negativas.
Unitermos: Eucalyptus spp; leos essenciais; atividade antibacteriana.
ABSTRACT: Chemical and biological investigation of Eucalyptus cloeziana, E. citriodora, E.
saligna, E. grandis and E. microcorys essential oils were evaluated. The essential oils analysis
were performed by GC/MS and the antibacterial activity was assayed in vitro by using the
agar diffusion method against Escherichia coli O:158, E. coli ATCC 8739, Staphylococcus
aureus ATCC 6538 and Salmonella choleraeseus ATCC 10708. The essential oils of E.
citriodora and E. grandis showed a major inhibitory activity against Gran negative bacteria.
Keywords: Eucalyptus species; essential oils; antibacterial activity.

INTRODUO
Em diversas partes do mundo, vrias espcies de Eucalyptus vm sendo cultivados e
explorados em grande escala h muitos anos. No Brasil, ele encontrado em todas as regies,
sendo conhecidas cerca de 400 espcies, das quais so utilizadas desde o caule, de onde se
extrai a celulose para a indstria do papel, at as folhas, de onde so retirados os leos essenciais
de diferentes composies qumicas.
Revista Brasileira de Farmacognosia, V. 11, n. 2, p. 95-100, 2001.

Estanislau, A.A.; Barros, F.A.S.; Pea, A.P.; Santos, S.C.; Ferri, P. H.; Paula, J.R.

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O eucalipto tem sido considerado til em vrias reas tais como: ambiental, econmica,
medicinal e farmacutica. O gnero Eucalyptus apresenta as seguintes propriedades teraputicas:
antifngica, antissptica, adstringente, antiinflamatria, antibacteriana, cicatrizante e um
desinfetante de grande potencialidade. (GRA et al., 1990; ALVES, 1992; CU et al., 1993;
RODRIGUEZ, 1994; MATOS, 1997; SIMES et al., 1999).
As infeces bacterianas esto disseminadas pelo mundo, principalmente nos pases
subdesenvolvidos e, por isso os estudos sobre a atividade antimicrobiana de plantas representam
um grande desafio para a descoberta e a identificao de novos frmacos.
Este trabalho teve por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana e analisar a composio
qumica dos leos essenciais das folhas de algumas espcies de Eucalyptus, cultivadas na
Estao Florestal Experimental do IBAMA EFLEX, localizada em Silvnia, Gois.

MATERIAIS E MTODOS
Material Botnico
As folhas de Eucalyptus cloeziana F. Mueller, E. citriodora Hook, E. saligna Smith, E. grandis
Hill ex Maiden e E. microcorys F. Mueller foram coletadas na Estao Florestal Experimental do
IBAMA- EFLEX de Silvnia, em junho de 2000 e dessecadas temperatura ambiente.

Extrao
Os leos essenciais das folhas dessecadas e modas das diferentes espcies de Eucalyptus
foram extrados por hidrodestilao em aparelho de Clevenger modificado por 4 a 5 horas. Os
leos essenciais obtidos foram acondicionados em frascos de vidro e armazenados na temperatura
de -10C at serem usados.

Avaliao da composio qumica

As amostras dos leos essenciais obtidos foram analisadas por cromatografia gasosa,
acoplada a espectrometria de massas (CG/EM), no aparelho Shimadzu QP5050A, utilizando uma
coluna capilar de slica fundida (CBP-5; 30m x 0,25mm x 0,25m), mantendo-se um fluxo de 1 ml/
min de Hlio, como gs de arraste, e aquecimento com temperatura programada ( 60C/2min;
3oC min 1/ 240oC; 10oC min 1 /280oC; 280oC/10min), e energia de ionizao de 70 eV. Volume de
injeo de 1ml das amostras diludas em CH2Cl2 no modo Split com uma razo de 1:5. A
identificao dos componentes dos leos essenciais foi realizada por comparao dos espectros
de massas e ndices de reteno com os valores de literatura dos componentes mais comuns de
leos essenciais (ADAMS, 1995). Os ndices de reteno foram calculados atravs da coinjeo
de uma mistura de hidrocarbonetos, C 9 C 22, e com aplicao da equao de Van Den Dool e
Kratz (DOOL e KRATZ, 1963; FERRACINI, 1995).

Avaliao da atividade antibacteriana

Microrganismos utilizados
Foram utilizadas as seguintes cepas de bactrias: Escherichia coli enteropatognica
clssica monovalente 0:158, isolada de fezes diarricas de crianas no IPTSP/UFG; Escherichia
coli ATCC 8739;Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Salmonella choleraeseus ATCC 10708.

Composio qumica e atividade antibacteriana dos leos essenciais de cinco espcies de Eucalyptus cultivadas em Gois

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As culturas bacterianas foram repicadas mensalmente e conservadas em geladeira. A

padronizao do inculo empregado nos experimentos foi feita da seguinte maneira: as culturas
foram ativadas em Caldo Casoy por 15 h a 37C, obtendo-se assim 108 clulas/mL, estimadas
por comparao ao tubo 0,5 da Escala de Mc Farland, e estas foram inoculadas em meios de
cultura para avaliao da atividade antibacteriana.

Avaliao da atividade antimicrobiana por difuso em gar

Os microrganismos foram ativados em Caldo Casoy por 15h a 37C e inoculados
diretamente em placas de Petri contendo gar de Mueller Hinton, nas quais foram colocados
discos de papis de 6mm de dimetro (Discos Blank estreis/ CECON) impregnados com 5l de
cada leo essencial em estudo. Um controle positivo foi realizado com discos impregnados com
30mcg de loranfenicol (Sensibiodisc/ CECON). Aps a montagem do experimento, as culturas
foram incubadas a 37C por 24h. Os resultados foram obtidos atravs da observao da presena
de halos de inibio e medio de seus dimetros em milmetros (KONEMAN et al., 1997; IROBI
et al., 1994).

RESULTADOS
Avaliao da atividade antibacteriana
A Tabela 1 apresenta os valores dos halos de inibio (mm) observados para as amostras
dos leos essenciais extrados das diferentes espcies de Eucalyptus frente aos microrganismos
Escherichia coli enteropatognica clssica monovalente 0:158, Escherichia coli ATCC 8739,
Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Salmonella choleraeseus ATCC 10708. Discos impregnados
com 30 mcg de cloranfenicol (Sensibiodisc/ CECON) foram utilizados como controle positivo.
Tabela 1. Atividade antibacteriana dos leos essenciais de vrias espcies de Eucalyptus frente
a diferentes microrganismos.

AMOSTRAS

(FORH]LDQD
(FLWULRGRUD
(JUDQGLV
(PLFURFRU\V
(VDOLJQD
Cloranfenicol

6WDSK\ORFRFFXV
DXUHXV
ATCC 6538

(VFKHULFKLDFROL
ATCC 8739

(VFKHULFKLDFROL
0:158

6DOPRQHOOD
FKROHUDHVHXV
ATCC 10708

20

20

(-)

(-)

10

10

14

10

20

10

10

10

08

(-)

(-)

(-)

14

15

15

15

25

25

25

25

Os resultados representam o dimetro do halo de inibio em milmetros; (-) No houve inibio de

crescimento.

Estanislau, A.A.; Barros, F.A.S.; Pea, A.P.; Santos, S.C.; Ferri, P. H.; Paula, J.R.

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Composio qumica dos leos essenciais

A Tabela 2 apresenta os resultados da anlise da composio qumica, feita por CG/EM,
dos leos essenciais obtidos por hidrodestilao, em aparelho de Clevenger modificado, das folhas
das cinco espcies estudadas de eucalipto, bem como os rendimentos dos processos de extrao.
Tabela 2. Rendimentos e componentes
majoritrios
dos leos
essenciais
extrados
por
a
b
c
d
e
(
F
LWULR
G
R
UD
(

s a li g n a  ( P LF UR F R U\ V
(
J
UD
Q
G
LV
(
F
OR
H
]LD
Q
D
C o m p o n e n te s
hidrodestilao das folhas de diferentes espcies de Eucalyptus.
- p in e n o
-2 -c a re n o

0 ,9 3
-

6 ,1 7
0 ,7 9
-

8 6 ,7 2
-

1 1 ,5 4
0 ,2 0
1 6 ,6 6
7 ,7 4
1 6 ,8 4
0 ,7 7

2 9 ,5 3
-

0 ,4 5
9 ,2 5
0 ,1 8
-

3 ,9 0
-

0 ,7 0
1 ,5 6
3 ,0 9
0 ,2 3
4 ,0 7
0 ,3 8
2 ,9 8
0 ,4 3

0 ,2 9
1 ,9 3
-

6 ,7 8
8 2 ,3 3
0 ,4 3
7 ,8 0
0 ,4 3
-

0 ,1 6
0 ,3 0
2 ,0 5
-

0 ,8 1
1 ,8 4
1 ,7 6
-

0 ,1 8
0 ,1 7
1 ,9 5
0 ,8 5
0 ,4 7
-

3 ,9 7
6 ,5 9
0 ,2 7
3 1 ,8 2

-b is o b o le n o
p -c im e n o

2 5 ,6 1

2 ,8 2

0 ,7 7
1 ,2 1

B o rn e o l
-c a d in e n o
-e u d e s m o l
-e u d e s m o l
K u s in o l
-p in e n o
n -b u tira to d e is o p e n tila
L im o n e n o

4 ,7 0
-

1 ,3 4
-

0 ,3 6
0 ,6 1
0 ,7 2

0 ,2 7
1 ,1 3
1 ,9 1

0 ,4 2
-

--

1 ,5 1
2 ,3 9
7 ,9 5
5 ,7 6
0 ,2 7
1 ,5 7
3 ,7 7
0 ,6 8
0 ,3 9
0 ,1 9
0 ,2 1
0 ,4 1
1 ,7 8

O - c im e n o
1 ,8 - c in e o l
- T e r p in e n o
T e r p in o le n o
- fe n c h o l
Is o b o n e o l
4 - T e r p in o l
8 - p - c im e n o l
- T e r p in e o l
T im o l
- c a r io file n o
- h u m u le n o
S e ic h e le n o
- m u u r o le n o
6 ,1 1 - x id o d e 4 - a c o r e n o
-a c o re n o l
C ubenol
3 - n e o tu ja m o l
C itr o n e la l
Is o d iid r o c a r v e o l
F o r m a to d e c itr o n e lila
9 - e p ic a r io file n o
Is o b u tir a to d e p e n tila
T r a n s - p in o c a r b e o l
P in o c a r v o n a
S a b in e n o
M ir c e n o

C a n fe n o l
E n d o fe n c h o l
-c a n fo le n a l
C is -p in o c a rv e o l
H id ra to d e c a n fe n o
P in o c a n fo n a
T ra n s -c a rv e o l
C is -c a rv e o l
C a rv o n a
C a rv o ta n a c e to n a
7 -h id ro x i-p -c im e n to
C a rv a c ro l
E s p a tu le n o l

Rendimentos: a 4,0%;

0,5%; c 2,5%; d 2,0%;

0,75%.

Composio qumica e atividade antibacteriana dos leos essenciais de cinco espcies de Eucalyptus cultivadas em Gois

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DISCUSSO
Atravs da avaliao da atividade antibacteriana, observou-se que todos os leos essenciais
testados foram ativos contra Staphylococcus aureus ATCC 6538. O leo essencial de E.
mycrocorys foi o nico que no apresentou atividade inibitria sobre E. coli ATCC 8739. Todos os
outros exerceram considervel atividade sobre este microrganismo.
Com respeito a E. coli 0:158 foi observado que os leos essenciais do E. gloeziania e E.
mycrocorys no apresentaram atividade sobre esse microrganismo. Os leos de E. cytriodora,
E. grandis e E. saligna exerceram atividade inibitria.
Os leos essenciais de E. gloeziania e E. mycrocorys no apresentaram atividade
antimicrobiana para S. choleraeseus ATCC 10708. Os leos essenciais de E. cytriodora, E. grandis
e E. saligna apresentaram resultados satisfatrios de inibio desse microrganismo.
Na anlise da composio qumica observou-se um predomnio de monoterpenos em todos
os leos essenciais analisados. Foi observado, tambm, um alto teor de citronelal (82,33%) no
leo essencial de E. citriodora. Por ser esta, uma substncia irritante da mucosa do trato respiratrio,
preparaes feitas com esta planta no devem ser utilizadas em inalaes, corroborando as
informaes de Matos (1997).
Foi observado um alto teor de 1,8-cineol (86,72%) no leo essencial de E. mycrocorys, o
que indica que essa espcie pode ser uma importante fonte desta substncia, responsvel pelas
propriedades expectorantes e antisspticas das vias respiratrias de E. globulus Labill. Essa ltima
espcie de difcil cultivo em regies de clima quente, como o caso do Estado de Gois.

AGRADECIMENTOS
Ao CNPq, PADCT III/MCT/CNPq e Fundao de Apoio Pesquisa-FUNAPE/UFG pelo
apoio financeiro.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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100

Estanislau, A.A.; Barros, F.A.S.; Pea, A.P.; Santos, S.C.; Ferri, P. H.; Paula, J.R.

KONEMAN, E.; ALLEN, S. D.; JAND, W. M.; SCHERECKENBERGER, P. C.; WIN, Jr. W. C. Color
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*Autor para correspondncia:

Prof. Jos Realino de Paula
Laboratrio de Farmacognosia
Faculdade de Farmcia
Universidade Federal de Gois
Caixa Postal 131
74605-220 - Goinia - GO
E-mail: jrealino@farmacia.ufg.br