Partes del microscopio ptico y sus funciones

Tubo.


Ocular.


Tornillos macro y micromtrico.


Objetivo.


Diafragma - Condensador.


Platina.


Revlver.
1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen
formada en los objetivos.
2 * Objetivo: lente situada cerca del revolver. Ampla la imagen, es un elemento vital
que permite ver a travs de los oculares
3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
6 * Tubo: es una cmara oscura unida al brazo mediante una cremallera.
7 * Revlver: Es un sistema que agarra los objetivos, y que rota para utilizar un
objetivo u otro

8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina
hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida y el micromtrico
de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una
determinada altura.
9 * Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca
la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin
situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un
sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la
preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa.
10 * Base: Es la parte inferior del microscopio que permite el sostn del mismo.



Microscopa

Microscopa (o tambin sin tilde microscopia)
1
es el conjunto de tcnicas y mtodos
destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeez estn fuera del
rango de resolucin del ojo normal.
Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopa, el uso del mismo
requiere para producir las imgenes adecuadas, de todo un conjunto de mtodos y
tcnicas afines pero extrnsecas al aparato. Algunas de ellas son, tcnicas de preparacin
y manejo de los objetos de estudio, tcnicas de salida, procesamiento, interpretacin y
registro de imgenes, etc.
Exceptuando tcnicas especiales como las utilizadas en microscopio de fuerza atmica,
microscopio de iones en campo y microscopio de efecto tnel, la microscopa
generalmente implica la difraccin, reflexin o refraccin de algn tipo de radiacin
incidente en el sujeto de estudio.
Microscopa ptica

Microscopa ptica (microscopa de luz clsica), consiste en hacer pasar luz visible de
una fuente (difractada, reflejada o refactada en el sujeto de estudio) a travs de lentes
pticos simples o mltiples, para lograr una vista ampliada de la muestra.
2
La imagen
resultante puede ser detectada directamente por el ojo humano, impresa en una placa
fotogrfica o registrada y mostrada digitalmente (y eventualmente almacenada en algn
soporte digital). En la fig. mo1 puede verse un microscopio estereoscpico (adecuado
principalmente para una visin binocular directa).
Tinciones
Las tinciones son combinaciones de colorantes cidos y bsicos que permiten obtener
suficiente contraste de color en los cortes histolgicos comunes. Existe una amplia gama de
tinciones, desde la ms comn que es la mezcla de Hematoxilina y Eosina hasta las ms
especficas, que slo se utilizan en contadas ocasiones, como son las tinciones de Golgi.

A continuacin presentaremos una lista de las tinciones ms comunes dentro de los
laboratorios universitarios, con el fin de que puedan identificarlas rpidamente.
Hematoxilina y Eosina: La hematoxilina al ser bsica tie cidos de color morado (ncleos con
DNA y RNA), mientras que la eosina es un cido y tie bases de color rosado (citoplasma).
PAS (cido Perydico de Schiff): Tie carbohidratos (mucopolisacridos) de color rojo, por
ejemplo las clulas caliciformes en el intestino.
Tricrmico de Masson: Tie de color azul la colgena, de rojo la queratina, y de morado los
ncleos (muy utilizada para los cortes de piel).
Reyes Mota: Tie la colgena de color verde, y de amarillo la elastina.
Pentacrmico de Movat: Tie de amarillo la colgena, los msculos de color rojo, de azul
mucopolisacridos, la elastina de color negro, y los ncleos de morado.
Nissl: Tie de color morado el retculo endoplsmico rugoso y los corpsculos de Nissl en las
neuronas.
Wright: utilizado en frotis sanguneos, permite observar todas las clulas sanguneas,
coloreando los eritrocitos de color rosado, con un centro claro.
Reyes Mota: Tie la elastina de color morado.
Luxol Fast Blue: Tie la mielina de color azul, utilizada en cortes de sistema nervioso.

Tricrmica de Gomori
Se trata de una solucin actica estabilizada que contiene Chromotrope 2R, Azul de Anilina y
Acido Fosfotngstico. Listo para usar. No requiere dilucin.
Colorante Histolgico. Tie citoplasma y fibras musculares de rojo, mientras que el colgeno
toma un color azulado.

Tricrmica de Masson
Soluciones colorantes destinadas a la tincin segn tcnica de Masson y sus modificaciones
(Lillie). Los colorantes se presentan listos para usar. No requieren diluciones.
Para su empleo pueden combinarse de acuerdo a las necesidades del usuario para lograr la
tincin deseada.
A diferencia de otros productos comerciales que poseen slo 2 colorantes, Biopur dispone de
los 4 colorantes desarrollados para la tcnica. La ventaja principal de poder realizar estas
combinaciones radica en la posibilidad de teir con colores diferentes de acuerdo a los tipos de
tejidos en estudio.
Se dispone de soluciones de:
Fucsina Acida - Punz de Xilidina
Fucsina Acida - Escarlata de Biebrich
Azul de Anilina
Fast Green FCF

Verde de Metilo - Pironina
Se trata de una solucin de Verde de Metilo asociada con Pironina G segn Tarf-Kurnick.
Colorante Histolgico.
Empleado para la investigacin histolgica del cido nucleico contenido en los tejidos, as como
para demostrar la presencia de clulas de la serie linftica y clulas plasmticas.
Tambin es til en la identificacin de clulas plasmticas y RNA en secciones de tejidos y
preparaciones citolgicas.

Carbohidratos

PAS
Se trata de un kit compuesto por soluciones de:
Acido Peridico al 1% (Conservar en Refrigerador 2-10C)
Reactivo de Schiff Biopur (Conservar en Refrigerador 2-10C)
Para la demostracin histoqumica de componentes celulares que contienen Glicoles, tales
como Carbohidratos, Glicoprotenas, etc.
Permite la observacin de Membranas Basales y algunas Mucinas

Mucicarmn
Se trata de un kit que contiene soluciones de:
Mucicarmn Concentrada Biopur
Actica de Tartrazina Biopur
Colorante Histolgico.
Usado en la identificacin de sitios de tumores primarios, ayudando a la distincin de clulas
escamosas indiferenciadas mucina-negativas de los adenocarcinomas mucina-positivos.
La cpsula de los criptococos (hongos) se tie de rosa oscuro.
La tartrazina tie el citoplasma de amarillo.

Rojo Congo
Se trata de un kit que contiene soluciones de:
Rojo Congo (Alcohlica Clorurada) (Stock)
Alcohlica al 80%, clorurada (Stock)
Hidrxido de Sodio 0.25 M
Colorante Histolgico (Bennhold-Puchtler).
Destinado a la determinacin de protena amiloide en secciones de tejidos con el empleo de
microscopios de luz comn o polarizada.

Bacterias

Gram
Se trata de un kit para la coloracin de bacterias con la tincin segn Gram
Se dispone de soluciones de:
Violeta Cristal
Solucin Concentrada de Iodo
Decolorante
Safranina
La tincin de Gram fue desarrollada en el ao 1884 por Christian Gram. La tincin hoy en da
es aplicada para la clasificacin como paso inicial en la identificacin de las bacterias.
Tambin, como consecuencia de la tincin, las bacterias muestran su forma, tamao, etc., lo
que ayuda significativamente al diagnstico.

Ziehl
Se trata de un kit compuesto por colorantes y decolorante.
Se dispone de soluciones de:
Fucsina Bsica
Decolorante
Azul de Metileno
Mtodo tradicional para la deteccin del bacilo tuberculoso. Para empleo con esputo,
concentrado o por extensin directa, lquido cefalorraqudeo u otros fluidos corporales,
incluyendo orina cateterizada y material homogeneizado de tejidos.

Tinciones Nucleares
Se trata de soluciones de Hematoxilina a diferentes concentraciones y con aplicaciones
especficas.
Hematoxilina Biopur est basada en la frmula de Gill #1 conteniendo 2g/L de Hematoxilina. Se
trata de una solucin acuosa preparada por va qumica en fro, evitando de esta manera la
perjudicial ebullicin.
No precipita. No requiere filtrado para su empleo. Posee cido actico en su frmula,
permitiendo su empleo inmediato, sin necesidad de aditivo alguno. Por esto, no requiere el
agregado de cidos ni de mordientes. Lista para usar.
Hematoxilina Biopur encuentra aplicacin en tcnicas citolgicas fundamentalmente.
Hematoxilina "Activada" Biopur est basada en la frmula de Gill #2 conteniendo 4g/L de
Hematoxilina. Se trata de una solucin acuosa preparada por va qumica en fro, evitando de
esta manera la perjudicial ebullicin.
No precipita. No requiere filtrado para su empleo. Posee cido actico en su frmula,
permitiendo su empleo inmediato, sin necesidad de aditivo alguno. Por esto, no requiere el
agregado de cidos ni de mordientes. Lista para usar.
Hematoxilina Activada Biopur encuentra aplicacin en tcnicas histolgicas fundamentalmente.
Hematoxilina Frrica de Weigert Biopur se compone de 2 soluciones para la preparacin de la
misma. Una Solucin de Hematoxilina Alcohlica y una Solucin de Cloruro Frrico.
Hematoxilina Frrica de Weigert Biopur encuentra aplicacin especfica en coloraciones
especiales que requieren hematoxilina (Mucicarmn, Tricrmica de Masson, Tricrmica de
Gomori)
Clsicas

May Grunwald - Giemsa
Se trata de productos que se complementan para la tcnica de tincin segn May-Grnwald y
Giemsa. Los colorantes segn May-Grnwald y Giemsa son combinaciones de azul y azures
de metileno asociados con eosina.
Estabilizador es un buffer fosfatos pH 6.5 regulador del pH del agua a ser utilizada en tinciones
hematolgicas.
Estabilizador Biopur asegura la tincin salmn de los hemates, descartndose los accidentes
de las tonalidades rojo fucsia, que dificultan la tincin de los leucocitos, y de las azuladas, que
entorpecen la metacromasia.

Wright
Se trata de una solucin May-Grnwald-Giemsa compuesta.
Tincin panptica diferencial en un solo paso.

Tincin 15
Se trata de un kit de tincin diferencial rpida compuesto por 3 soluciones:
Fijador
Solucin 1 (Xantnicos)
Solucin 2 (Tiaznicos)
Coloracin de extendidos. Tincin diferencial rpida (15 segundos) Puncin aspirativa Tejidos
Biopsias por congelacin Muestras hematolgicas Recuento leucocitario diferencial

Shorr
En contraste con la tincin de Papanicolaou, la tincin de Shorr se usa solamente en
citodiagnstico hormonal en el cual es superior.
Permite lograr la diferenciacin neta de las clulas del epitelio vaginal. Tincin nuclear intensa y
coloracin citoplasmtica homognea.

Coloracin Hematoxilina & Eosina
Hematoxilina
Si bien tanto Hematoxilina Biopur como Hematoxilina Activada Biopur pueden ser usadas para
la tcnica de coloracin Hematoxilina-Eosina, recomendamos el uso de Hematoxilina Activada
Biopur dada su doble concentracin que permite lograr resultados en tiempos menores.
Eosina
Se trata de una solucin de eosina.
Colorante cido. Utilizado como colorante de contraste de la hematoxilina en la tincin
Hematoxilina-Eosina.

Coloracin de Papanicolaou
Se trata de una tcnica citolgica compuesta por 3 soluciones:
Hematoxilina Biopur
OG Biopur
EA Biopur
Hematoxilina Biopur
Colorante nuclear. Las caractersticas y recomendaciones para el uso de Hematoxilina Biopur
fueron expuestas en la seccin anterior. Rogamos referirse a la misma para informacin
adicional.
OG Biopur
Se trata de una solucin alcohlica de cido fosfotngstico y Orange G. El cido fosfotngstico
acidifica la solucin y aumenta la unin del Orange G a zonas citoplasmticas densas.
EA Biopur
Se trata de una solucin alcohlica, fotoestable que elimina los problemas causados por las
tradicionales e inestables frmulas numeradas EA-36/50/65/etc. No requiere filtracin. Listo
para usar. Tie selectivamente el citoplasma de clulas que tuvieron actividad metablica poco
antes de la recoleccin de la muestra. Tie de rosa a rojo las clulas escamosas superficiales,
cilios, nucleolo y eritrocitos.