Gluconeognesis.

Introduccin
La gluconeognesis es la sntesis de glucosa nueva (glucosa que no viene del
glucgeno). La produccin de glucosa a partir de otros metabolitos es necesaria para el uso
como fuente de energa por el cerebro, testculos, eritrocitos, y medula renal debido a que la
glucosa es la nica fuente de energa para estos rganos. Durante ayunos prolongados, sin
embargo, el cerebro puede obtener energa a partir de cuerpos cetnicos, que se convierten
en acetil-CoA. Los esqueletos de carbono primarios utilizados para la gluconeognesis se
derivan de piruvato, lactato, glicerol y la alanina amino cidos y la glutamina. El hgado es
el sitio principal de la gluconeognesis, sin embargo, como veremos a continuacin, el rin
tambin se ha un papel importante que desempear en esta va.
La sntesis de glucosa a partir de precursores de tres o cuatro carbonos es
esencialmente el reverso de la gluclisis. Las caractersticas ms importantes de la va de la
gluconeognesis se diagraman a continuacin.

Reacciones de la gluconeognesis.
Las reacciones de "bypass" se indican en verde al igual que la de la fosfoglicerato
quinasa. Se incluye esta ltima reaccin debido a que cuando esta es parte de la
gluconeognesis se consume energa. La gluconeognesis de dos moles de piruvato a 2
moles de 1,3-bifosfoglicerato consume 6 moles de ATP. Esto hace que el proceso de la
gluconeognesis sea muy costoso desde el punto de vista energtico considerando que la
gluclisis del piruvato solamente produce 2 moles de ATP. Note que se necesitan varios
pasos para ir de 2 moles de 1,3-bifosfoglicerato a 1 mole de fructosa-1.6-bifosfato. Primero,
existe una reversin de la reaccin de la gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa que
requiere NADH. Cuando el lactato es el sustrato de la gluconeognesis el NADH se obtiene
de la reaccin de la lactato deshidrogenasa, y cuando el sustrato es el piruvato el NADH se
obtiene de la reaccin de la malato deshidrogenasa. Segundo, 1 mol de gliceraldehido-3-
fosfato debe ser isomerizada a DHAP y luego un mol de DHAP puede condensarse a una
mol de gliceraldehido-3-fosfato para formar 1 mol de fructosa-1,6-bifosfato en una reaccin
reversa de la aldolasa. La mayora de tejidos, no el hgado, no tienen la enzima glucosa-6-
fosfatasa y por tanto la glucosa-6-fosfato que se genera en estos tejidos seria un sustrato
para la sntesis de glucgeno. En los hepatocitos las reacciones de la glucosa-6-fosfatasa
permiten al hgado proveer a la sangre con glucosa libre. Recuerde que debido al alto Km de
la glucoquinasa heptica la mayora de la glucosa no ser fosforilada y se mover siguiendo
su gradiente de concentracin fuera de los hepatocitos a la sangre.
Las tres reacciones de la gluclisis que proceden con una gran carga de energa libre
negativa son evitadas "bypassed" en la gluconeognesis utilizando diferentes enzimas. Estas
son las reacciones de la piruvato quinasa, fosfofructoquinasa-1 (PFK1) y
hexoquinasa/glucoquinasa. En el hgado o en la corteza renal y en algunos casos en el
msculo esqueltico, la glucosa-6-fosfato (G6P) que se produce en la gluconeognesis
puede ser incorporada al glucgeno. En este caso el tercer "bypass" a la altura de la reaccin
catalizada por la glucgeno fosforilasa. Debido a que el msculo esqueltico no tiene
glucosa-6-fosfatasa este no puede secretar glucosa a la sangre por lo que la gluconeognesis
en este tejido es un mecanismo para generar glucosa para almacenamiento en forma de
glucgeno.
De Piruvato a Fosfoenolpiruvato (PEP), "Bypass"
La conversin de piruvato a PEP requiere la accin de dos enzimas mitocondriales.
La primera reaccin requiere de ATP y es catalizada por la piruvato carboxilasa (PC). Como
implica el nombre de la enzima, el piruvato es carboxilado para formar oxaloacetato (OAA).
El CO2 de esta reaccin esta en la forma de bicarbonato (HCO3-). Esta es una reaccin
anapletrica ya que puede ser utilizada para llenar el ciclo tricarboxlico o ciclo de Krebs. La
segunda enzima en la conversin de piruvato a PEP es la PEP carboxiquinasa (PEPCK). La
PEPCK requiere de GTP en la descarboxilacin de OAA para formar PEP. Debido a que la
PC incorpora CO2 al piruvato y subsecuentemente este es liberado en la reaccin de la
PEPCK, no existe una fijacin neta de carbono.
Para que la gluconeognesis prosiga, el OAA producido por la PC necesita ser
transportado desde la mitocondria al citosol. Sin embargo, no existe un mecanismo de
transporte para su transferencia directa y el OAA no se difunde libremente. El OAA
mitocondrial puede llegar al citosol por reduccin a malato.
El OAA mitocondrial es reducido a malato por una reaccin reversa a la que se
sucede en el ciclo de Krebs que es catalizada por la enzima malato deshidrogenasa (MDH).
La reduccin del OAA a malato requiere de NADH, que se acumular en la mitocondria
cuando la carga energtica aumenta. Este incremento en energa permitir a la clula llevar
a cabo el proceso de gluconeognesis que es costoso en ATP. El malato resultante es
transportado al citosol en donde es oxidado a OAA por la enzima citoslica MDH que
requiere NAD+ y produce NADH. El NADH producido durante la oxidacin citoslica del
malato a OAA es utilizado durante la reaccin catalizada por la gliceraldehido-3-fosfato
deshidrogenasa de la gluclisis. El acoplamiento de estas dos reacciones de oxidacin-
reduccin es necesario para mantener la gluconeognesis funcionando cuando el piruvato
es la principal fuente de tomos de carbono. La conversin de OAA a malato predomina
cuando el piruvato (derivado de la gluclisis o del metabolismo de los aminocidos) es la
fuente de los tomos de carbono para la gluconeognesis. Cuando est en el citoplasma el
OAA, este es convertido a PEP por la enzima PEPCK citoplasmtica. Seales hormonales
controlan el nivel de la enzima PEPCK para regular el flujo de la gluconeognesis.
El resultado neto de las reacciones PC y PEPCK es:

La conversin de fructosa-1,6-bifosfato (F1,6BP) a fructosa-6-bifosfato (F6P) es el
reverso de la reaccin limitante de la gluclisis. Esta reaccin, una simple hidrlisis, es
catalizada por la enzima fructosa-1,6-bifosfatasa (F1,6BFasa). Similar a lo que ocurre en la
regulacin de la gluclisis en la enzima PFK1, en la gluconeognesis la reaccin de la
F1,6BPasa es el principal punto de control de esta va.
Glucosa-6-Fosfato (G6P) a glucosa (o Glicgeno), "Bypass" 3
La glucosa-6-fosfato es convertida a glucosa por accin de la glucosa-6-fosfatasa
(G6Pasa). Esta tambin es una reaccin de hidrlisis simple similar a la de la F1,6BPasa.
Debido a que el cerebro, el msculo esqueltico, as como tambin otros tejidos no
hepticos, carecen de G6Pasa, cualquier gluconeognesis que ocurra en estos tejidos no se
utiliza para dar glucosa a la sangre. En el hgado, msculo y especialmente el hgado, la G6
P es dirigida a glucgeno si los niveles de azcar en la sangre son adecuados.
La fosforlisis del glucgeno se lleva a cabo por la glucgeno fosforilasa, mientras
que, la sntesis de glucgeno es catalizada por la glucgeno sintasa. La G6P producida en la
gluconeognesis puede ser convertida a glucosa-1-fosfato (G1P) por la fosfoglucosa mutasa
(PGM). Luego la G1P es convertida a UDP-glucosa (el sustrato para la sntesis de
glucgeno) por la UDP-glucosa fosforilasa, una reaccin que requiere la hidrlisis de UTP.

Sustratos de la Gluconeognesis
Lactato
El lactato es una fuente predominante de tomos de carbonos para la sntesis de
glucosa por la gluconeognesis. Durante la gluclisis anaerobia en el msculo esqueltico, el
piruvato es reducido a lactato por la lactato deshidrogenasa (LDH). Esta reaccin tiene dos
funciones crticas durante la gluclisis anaerobia. Primero, en la direccin de la formacin
de lactato la reaccin de la LDH requiere de NADH y produce NAD+ que entonces esta
disponible para ser utilizada en la reaccin de la gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa de
la gluclisis. Estas dos reacciones estn por tanto ntimamente relacionadas en la gluclisis
anaerobia. Segundo, el lactato producido por la reaccin de la LDH es liberado a la sangre y
transportado al hgado en donde es convertido a glucosa. La glucosa producida entonces
regresa a la sangre para ser utilizada por el msculo como fuente de energa y para llenar
las reservas de glicgeno. Este ciclo se llama ciclo de Cori.

El ciclo de Cori involucra la utilizacin de lactato, producido en la gluclisis en
tejidos no-hepticos, (como el msculo y los eritrocitos) como una fuente de carbono para
la gluconeognesis heptica. En esta forma el hgado puede convertir el producto de la
gluclisis anaerobia, lactato, otra vez en glucosa para su re-utilizacin por parte de tejidos
no-hepticos. Note que parte de la gluconeognesis del ciclo (en si mismo) consume
energa, lo que le cuesta al organismo 4 moles de ATP que es ms de lo que se produce en la
gluclisis. Por tanto, el ciclo no puede mantenerse indefinidamente.

Piruvato
El piruvato que se genera en el msculo y otros tejidos perifricos, puede ser
transaminado a alanina que es llevada al hgado para la gluconeognesis. La reaccin de
transaminacin requiere de un aminocido como donador del grupo amino, generndose
un cetocido en el proceso. Esta va se denomina el ciclo de la glucosa-alanina. Aunque la
mayora de aminocidos se degradan en el hgado algunos son desaminados en el msculo.
El ciclo de la glucosa-alanina es, por tanto, un mecanismo indirecto del msculo para
eliminar nitrgeno y a la vez para llenar su reserva de energa. Sin embargo, la funcin mas
importante del ciclo glucosa-alanina es permitir a los tejidos no-hepticos entregar la
porcin amino de los amino aminocidos metabolizados al hgado para que sea excretada
como urea. En el hgado la alanina se vuelve a convertir en piruvato que es utilizado como
sustrato de la gluconeognesis (si ese es el requerimiento heptico) o es oxidado en ciclo de
Krebs. El nitrgeno amino es convertido a urea en el ciclo de la urea que es excretada por
los riones.


El ciclo glucosa-alanina es utilizado primariamente como mecanismo para que el
msculo esqueltico elimine nitrgeno al mismo tiempo que permite su llenado de energa.
La oxidacin de la glucosa produce piruvato que puede ser transaminado a alanina. Esta
reaccin es catalizada por la alanino transaminasa, ALT (ALT se la sola llamar
transaminasa glutamato-piruvato srica, SGPT). Adicionalmente, durante periodos de
ayuno, la protena del msculo esqueltico se degrada por el valor energtico de los
carbonos de los aminocidos y la alanina es el principal aminocido de esa protena. La
alanina entonces ingresa al torrente sanguneo y es transportado al hgado. En el hgado la
alanina es convertida a piruvato que entonces es utilizado como fuente de carbono para la
gluconeognesis. La glucosa nueva que ha sido formada puede entonces entrar a la sangre
para regresar al msculo. El grupo amino transportado desde el msculo al hgado en la
forma de alanina se convierte en urea en el ciclo de la urea y es excretado.

Aminocidos
Todos los 20 aminocidos, excepto leucina y lisina, pueden ser degradados a
intermediarios del ciclo de Krebs como vamos a ver en el metabolismo de los aminocidos.
Esto permite que los esqueletos de carbono de los aminocidos se conviertan al esqueleto
del oxaloacetato y luego a piruvato. El piruvato as formado puede utilizarse en la va de la
gluconeognesis. Cuando las reservas de glucgeno estn vacas, en el msculo durante el
ejercicio y en el hgado durante el ayuno, el catabolismo de las protenas del msculo a
aminocidos contribuye como la principal fuente de carbonos para el mantenimiento de los
niveles de glucosa.

Glicerol
La oxidacin de los cidos grasos produce cantidades enormes de energa en moles,
sin embargo, los carbonos de los cidos grasos no pueden utilizarse para la sntesis de
glucosa. La unidad de dos carbonos de acetil CoA que se deriva de la -oxidacin de los
cidos grasos puede incorporarse en el ciclo de Krebs, sin embargo, durante el ciclo de
Krebs se pierden 2 carbonos como CO2. As se explica por que los cidos grasos no sufren
una conversin neta a carbohidratos.
El esqueleto de glicerol de los lpidos puede ser utilizado para la gluconeognesis.
Esto requiere la fosforilacin de glicerol-3-fosfato-cinasa de glicerol y de deshidrogenacin
dihidroxiacetona fosfato (DHAP) por gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa (G3PDH).
G3PDH la reaccin es la misma que la utilizada en el transporte citoslico de la reduccin
de equivalentes en la mitocondria para su uso en la fosforilacin oxidativa. Esta va de
transporte es el glicerol-fosfato lanzadera.

La lanzadera glicerol fosfato es un mecanismo para el transporte de electrones de
NADH citoslico a los transportes de la fosforilacin oxidativa mitocondrial. La principal
lanzadera NADH citoplsmica de electrones es la lanzadera malato-aspartato. Dos son las
enzimas que participan en esta va, una de ellas es la versin de la citoslico enzima
glicerol-3-fosfato deshidrogenasa (glicerol-3-PDH) que tiene como un sustrato, NADH. La
segunda es la forma mitocondrial de la enzima que tiene como uno de sus sustratos, FAD+.
El esqueleto de glicerol del tejido adiposo almacenado como triacilgliceroles asegura que
se utilicen como un sustrato gluconeognico ya que en las clulas adiposas falta de glicerol
quinasa. Los adipocitos, de hecho, requieren un nivel basal de la gliclisis, a fin de dotarlos
de DHAP como producto intermedio en la sntesis de triacilgliceroles.

Propionato
La oxidacin de cidos grasos con un nmero impar de tomos de carbono y la
oxidacin de algunos aminocidos genera como producto final de la oxidacin propionil-
CoA. La propionil-CoA se convierte en el intermediario del ciclo de Krebs, succinil-CoA.
Esta conversin se lleva a cabo por la enzima dependiente de ATP, propionil-CoA
carboxilasa, la metilmalonil-CoA epimerasa y finalmente por la enzima que requiere
vitamina B12, la metilmalonil-CoA mutasa. La utilizacin del propionato en la
gluconeognesis solamente tiene una significancia cuantitativa en los animales
policavitarios, por la produccin del cido graso voltil propinico por las bacterias
ruminales.


Conversin de propionil-CoA a Succinil-Co A


Papel de la Gluconeognesis Renal
Aunque el hgado tiene la funcin fundamental de mantener la glucosa en la sangre
la homeostasis y por lo tanto, es el sitio principal de la gluconeognesis, el rin desempea
un papel importante. Durante los perodos de hipoglucemia grave que se produzcan en
condiciones de insuficiencia heptica, el rin puede proporcionar glucosa a la sangre a
travs de gluconeognesis renal. En la corteza renal, la glutamina es la sustancia preferida
para la gluconeognesis.
La glutamina es producida en grandes cantidades en el msculo esqueltico durante
los periodos de ayuno como un medio para la exportacin de nitrgeno residuos resultantes
del catabolismo de los aminocidos. A travs de las acciones de las transaminasas, los
residuos de amonaco se transfieren al cetoglutarato por el glutamato a travs de la reaccin
catalizada por la glutamato deshidrogenasa. El glutamato es entonces un sustrato de
glutamina sintetasa, que incorpora otro lugar a la generacin de residuos de amoniaco
glutamina. La glutamina es luego transportada a los riones, donde la reaccin inversa
produce la liberacin del amoniaco y la produccin de cetoglutarato que puede entrar en el
ciclo de Krebs y entrando a la gluconeognesis a travs del oxalacetato. Este proceso tiene
dos funciones importantes. El amoniaco (NH3) que se libera espontneamente se disocia en
ion amonio (NH4+) y se excreta en la orina eficacia de amortiguacin de los cidos en la
orina. Adems, la glucosa que se producida a travs de la gluconeognesis puede
proporcionar al cerebro la energa tan necesaria.
Regulacin de la Gluconeognesis
Obviamente la regulacin de la gluconeognesis estar en contraste directo a la
regulacin de la gluclisis. En general, los efectores negativos de la gluclisis son efectores
positivos de la gluconeognesis. La regulacin de la actividad de la PFK1 y F1,6BPasa es el
sitio ms significativo para controlar el flujo hacia la oxidacin de la glucosa o la sntesis de
glucosa. Como se describi en el control de la gluclisis, esta es controlada
predominantemente por la fructosa-2,6-bifosfato, F2,6BF que es un efector alostrico
negativo poderoso de la actividad de la F1,6BPasa.

Regulacin de la gluclisis y gluconeognesis por la fructosa-2,6-bifosfato (F2,6BF).
Los sitios ms importantes de la regulacin de la gluclisis y de la gluconeognesis
son las reacciones catalizadas por la PFK1 y la F1,6BPasa. El nivel de la F2,6BP disminuir
en los hepatocitos en respuesta a la estimulacin del glucagn as como tambin por la
estimulacin de las catecolaminas. Cada una de estas seales se hace por medio de la
activacin de la PKA dependiente (PKA: proteina quinasa) del cAMP. Uno de los sustratos
de la PKA es la PFK-2/F-2,6-BPasa, la enzima bifuncional responsable de la sntesis e
hidrlisis de la F2,6BP. Cuando la PFK-2 es fosforilada por la PKA acta como fosfatasa
llevando a la defosforilacin de la F2,6BP con el concomitante incremento de la actividad
de la F-2,6-BPasa y una disminucin en la actividad de la PFK-1. De manera secundaria, la
actividad de la F-2,6-BPasa se regula por la relacin ATP/ADP. Cuando este radio es alto, la
gluconeognesis puede proceder a su nivel mximo.
La glugoneognesis tambin se controla en el "bypass" piruvato PEP. Las seales
hepticas provocadas por el glucagn o la epinefrina llevan a la fosforilacin e inactivacin
de la piruvato quinasa (PK) lo que permitir un incremento en el flujo a travs de la
gluconeognesis. La PK es tambin inhibida alostricamente por el ATP y la alanina. La
primera indica la presencia de energa y la segunda de sustrato suficiente para la
gluconeognesis. Contrariamente, una reduccin de los niveles de energa evidenciada por
un incremento en la concentracin de ADP llevan a una inhibicin tanto de la PK como de
la PEPCK. La activacin alostrica de la PK ocurre por medio de la acetil-CoA. Cada una de
estas regulaciones ocurre en un periodo corto de tiempo, mientras que la regulacin a largo
plazo puede afectar a la PEPCK. La cantidad de esta enzima se incrementa en respuesta a la
estimulacin prolongada del glucagn. Esta situacin ocurrira en un individuo en ayuno
prolongado o en alguna persona con una dieta inadecuada.