MICROSCOPIA

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Indice de refraccin: Medida de la velocidad relativa a la cual la luz pasa a travs de un material.



MICROSCOPIA

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Indice de refraccin: Medida de la velocidad relativa a la cual la luz pasa a travs de un material.
MICROSCOPIO COMPUESTO FOTNICO
Utiliza como fuente de iluminacin la luz y cuenta con dos grupos de lentes: OBJETIVO y
OCULAR.
Se pueden examinar muestras muy pequeas, as como detalles finos y en algunos casos
microestructuras.
ACTIVIDAD. Ilustre con una imagen el microscopio compuesto fotnico, seale la posicin de los grupos de lentes
referidos en el texto. Escriba la funcin de dichos lentes, segn su experiencia en el laboratorio.
AMPLIFICACIN DE LA IMAGEN
La amplificacin se lleva a cabo cuando el haz de luz de la fuente de iluminacin pasa a
travs del condensador que compacta los rayos de luz y atraviesa la muestra de donde se
dirige al lente objetivo, ocular y de estos al ojo del observador.
ACTIVIDAD: De acuerdo al texto Amplificacin de la imagen copie y complete el siguiente diagrama en su cuaderno.
Fuente Objetivo
Emite luz Atravesada por
la luz
Reconoce la
imagen
aumentada

Cmo calcular la amplificacin total de la imagen?
Se multiplica el aumento del objetivo por el aumento del lente ocular.
Los objetivos comunes en microscopios escolares son: 10X (Seco dbil), 40X (Seco
fuerte) y 100X (objetivo de inmersin).
Algunos datos que pueden encontrar en el objetivo se muestran en la siguiente imagen
(Obtenida de Manual de Aparatos, Metodologa Cientfica I, UNAM Campus Iztacala).

Cmo obtener imgenes claras y detalladas en microscopio compuesto?
Las muestras se colocan en un contraste claro en relacin a su medio. Para lograr
esto se cambia el ndice de refraccin
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de los materiales a observar mediante
tincin.
Despus de la tincin, cuando el rayo de luz pasa a travs de la muestra y el
medio, con ndices de refraccin diferentes, la direccin del rayo cambia entre los
dos materiales y aumenta el contraste de las imgenes entre la muestra y el
medio.
ACTIVIDAD: Elabore una lista que incluya todas las soluciones para tincin que ha utilizado en el laboratorio durante el mdulo.

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Indice de refraccin: Medida de la velocidad relativa a la cual la luz pasa a travs de un material.
MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
Es una modificacin del microscopio ordinario.
Utiliza un condensador adicionado con un pequeo disco opaco en el centro de una de las
lentes frontales que bloquea la luz e impide que sta entre directamente en el objetivo.
Slo llega al objetivo la luz que se difracta sobre el espcimen, por lo que se observa la
muestra iluminada en su superficie con un campo oscuro de fondo.
Se utiliza para examinar sin teir microorganismos suspendidos en lquidos.
ACTIVIDAD: Ilustre con una imagen al M. de Campo Oscuro y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
Permite el examen detallado de estructuras internas en organismos vivos.
Los organismos pueden observarse in vivo, por lo que no requiere de fijadores o tinciones.
Usa un condensador especial que contiene un diafragma anular (un anillo claro dentro de
un fondo opaco) que slo deja pasar la luz a travs del anillo, enfocndola sobre el
espcimen y hacindola llegar a un anillo en el lente frontal del objetivo; de manera que la
luz que llega al ojo del observador presenta ligeras diferencias de fase junto con luz
difractadas sin cambios.
ACTIVIDAD: Ilustre con una imagen al M. de Contraste de Fases y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
Se basa en el uso de sustancias fluorescentes que absorben luz en longiudes de onda corta
(luz UV) emitiendo luz de longitudes de onda larga (luz visible)
Las sustancias usadas son conocidas como Fluorocromos, Fluorescena, Rodamina y
algunos antibiticos.
Es utilizado en la tcnica de anticuerpo fluorescente o inmunocitolocalizacin
ACTIVIDADES:
Ilustre con una imagen al M. de Fluorescencia y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.
Investigue y elabore una lista de algunos antibiticos utilizados para este tipo de microscopa.
MICROSCOPIO ELECTRNICO
Posee mayor poder de resolucin que cualquier microscopio.
Presenta la misma disposicin que el microscopio fotnico pero utiliza un can de
electrones en lugar de una fuente de luz
Puede presentarse en distintas modalidades, p.e.

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE TRANSMISIN
En ste, un fino chorro de electrones pasan desde un filamento (fuente) a travs
de un corte ultrafino del espcimen especialmente preparado (fijado y teido
mediante solucin con metales pesados como plomo, osmio, tungsteno y uranio
que permiten observar al ejemplar por su opacidad a los electrones) y dispuesto
en un pequeo portaobjetos circular de cobre (rejilla). El haz de electrones se
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Indice de refraccin: Medida de la velocidad relativa a la cual la luz pasa a travs de un material.
enfoca en una pequea rea del espcimen mediante un condensador
electromagntico, que cumple la misma funcin que el condensador del
microscopio de luz, e incide en la lente objetivo donde la imagen sufre una primer
amplificacin y despus pasa por la lente proyectora donde se amplifica
finalmente y se proyecta sobre la placa fluorescente para permitir la seleccin de
imagen y registrarla en una placa fotogrfica que aparece en blanco y negro con
tonos intermedios.
Requiere de alto vaco.
No provee imgenes tridimensionales.
ACTIVIDAD: Ilustre con una imagen al M. de Fluorescencia y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE BARRIDO
Permite observaciones tridimensionales.
ACTIVIDAD:
Investigue y redacte el principio del microscopio electrnico de barrido.
Ilustre con una imagen al M. electrnico de barrido y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.
MICROSCOPIO ESTEREOSCPICO
Es utilizado ampliamente en las ciencias biolgicas
Observa detalles finos completos, sin que el espcimen se encuentre delgado
otransparente, muerto o seccionado
Proporciona una imagen tridimensional con una iluminacin que puede ser proporcionada
desde la parte superior del espcimen (luz incidente) o por la parte inferior del mismo (luz
transmitida).
Posee el mismo poder de resolucin o aumento que el microscopio compuesto (Rango de
5X a 100X)
Utilizado para identificar pequeos organismos, contar ciertas estructuras finas en
organismos vivos, diseccin de organismos pequeos, implantacin de microelectrodos en
clulas o grupos de clulas.
ACTIVIDAD:
Ilustre con una imagen al M. Estereoscpico y muestre con otra un espcimen visto mediante dicho equipo.
REFERENCIAS
Aguilar Ayala, I.; et. all.. 2001. METODOLOGIA CIENTFICA I. MANUAL DE APARATOS. 5. ed. UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTNOMA DE MXICO. Campus IZTACALA.52-64 pp.