M. Ximena. Yara A., Jesika A. Guaracas G., Edwin F. Murcia D., Bacteriloga docente, Paola Andrea Garca Rincn. Universidad de la Amazona Avd. Circunvalar, Barrio el Porvenir, Florencia, Caquet, Colombia. Recibido 17 de Septiembre de 2014 RESUMEN Se tom 10gr de cereales ideal, fue macerada y homogenizada con agua peptonada, posteriormente con ayuda de una pipeta se realizaron diluciones en base 10 desde 10 -1 hasta 10 -4 , se realizo siembra por profundidad y 20 das despus se comprob el crecimiento de bacterias y hongos. Palabras claves: Disolucin en base 10. CEREALES IDEAL Toma de MX Llega al laboratorio Fecha 22/08/14 Fecha 22/08/14 Hora 11:25 am Hora 11:00 am Marca del producto Cereales ideal Sitio de toma Doa Mara Remitente Doa Mara Descripcin de la muestra Tienda barrio Abbas Turbay Tipo de empaque Bolsa lote:07 Vence: jul/ 31 /2015 Tcnica de anlisis Recuento de Mohos y Levaduras Medio de cultivo PDA Tiempo de incubacin 5 das // 10 das Temperatura C 22C Resultado obtenido Crecimiento de bacterias y hongos
INTRODUCCION Los hongos y levaduras pueden encontrarse como flora normal de un alimento, o como contaminantes en equipos. Algunas de estas especies son tiles en la elaboracin de algunos alimentos, sin embargo tambin pueden ser causantes de la descomposicin de otros alimentos. Debido a su crecimiento lento y a su baja competitividad, los hongos y levaduras se manifiestan en los alimentos donde el crecimiento bacteriano es menos favorable. Por lo tanto pueden ser un problema potencial en alimentos lcteos fermentados, frutas, bebidas de frutas, especias, oleaginosas, granos, cereales y sus derivados y alimentos de humedad intermedia como las mermeladas, cajetas, especias, etc. (Camacho, A., M.Giles, A.Ortegn, M.Palao, B.Serrano y O.Velzquez. 2009. La contaminacin microbiana de alimentos es un problema serio para la industria alimentaria por las grandes prdidas econmicas que trae.Este fenmeno es mixto por la participacin de bacterias, hongos filamentosos y levaduras que han sido estudiados por su protagonismo en el dao. (Alexa 0824) Recuento de mohos y levaduras, es la determinacin del nmero de colonias tpicas de levaduras y mohos que se desarrollan a partir de un gramo o centmetro cbico de muestra, en un medio adecuado e incubado entre 22C y 25C. (Norma tcnica ecuatoriana NTE INEN 1 529-10:98.) OBJETIVOS General Realizar recuento de mohos y levaduras presentes en un alimento de consumo cotidiano. Especficos Identificar la presencia de bacterias mohos y levaduras presentes en los carales Determinar el nivel de contaminacin de un cereal. METODOLOGIA Macerar 10g de cereal hasta diluir, agregar 90ml de agua peptonada al 0.1%. Con una pipeta estril tomar 10ml de la disolucin y adicionarla a un tubo de ensayo con 9ml de agua peptonada al 0.1%, homogenizar. Repetir el procedimiento hasta conseguir una dilucin de 10 -4
Posteriormente usando la pipeta respectiva para no contaminar la muestra se toma 1ml de cada dilucin y se adiciona a una caja de petri con agar PDA (aun en estado liquido), se homogeniza, se espera hasta que se solidifique. Incubar 5 - 10- 20 das a 22C aprox. Realizar microscopia. MARCO TEORICO Los Mohos son filamentosos, cuyo crecimiento en los alimentos se conoce fcilmente por su aspecto algodonoso. Estn constituidos por filamentos ramificados y entrecruzados, llamados "hifas", el conjunto de esta forma el llamado "micelio" a este puede aplicrsele tincin o no. Los mohos pueden formar mico toxinas que provocan la alteracin de productos alimenticios, especialmente los cidos: yogur, jugos, frutas, etc. Las levaduras, son hongos cuya forma de crecimiento habitual es unicelular. Poseen una morfologa muy variable: esfrica, ovoidea, piriforme, cilndrica, triangular o, incluso, alargada, en forma de micelio verdadero o falso. Su tamao supera al de las bacterias. Al igual que los mohos, causan alteraciones de los productos alimenticios, especialmente los cidos. (Norma tcnica ecuatoriana NTE INEN 1 529-10:98.)
La determinacin de mohos y levaduras en productos alimenticios, es necesaria, ya que tambin nos da idea del grado de contaminacin comparado con estndares especficos. Los hongos y levaduras pueden utilizar ciertos sustratos como pectinas, carbohidratos como polisacridos, cidos orgnicos, protenas y lpidos. Tambin pueden causar problemas a travs de: (a) mico toxinas, (b) resistencia al calor, congelamiento, antibiticos o irradiacin y (c) habilidad para alterar sustratos no favorables permitiendo el crecimiento de bacterias patgenas. Pueden tambin causar malos olores y sabores y la decoloracin de las superficies de alimentos. (Julio Csar Arreola Navarrete 2012.) RESULTADOS Y DISCUSION
Imagen 1 cereal ideal
Imagen 2 dilucin 10 -1
Imagen 3 diluciones de 10 -2 a 10 -4
En las imgenes 1 2 3 se muestra el producto listo para analizarlo, la dilucin madre y las diluciones en base 10 respetivamente.
Imagen 4 dilucin 10 -3 Macroscpicamente se pueden observar hongos filamentosos con un micelio reproductivo de aprox. 2 mm, varias levaduras blancas, cremosas y redondas dispersas por el medio de cultivo.
Imagen 5 dilucin 10 -3 10X
Imagen 6 dilucin 10 -3 40X En las imgenes 5 y 6 se ve claramente la presencia de levaduras por su forma redonda, indicando de esta manera que el alimento analizado est contaminado y que no es apto para el consumo. Debe llevar un tiempo amplio a la hora de prepararlo, para asegurarse de eliminar todas las levaduras presentes que puedan afectar la salud de las personas. El alimento no maneja las condiciones de higiene necesarias para ser un producto de buena calidad microbiolgica. CONCLUSIONES El alimento cereal ideal no es un alimento saludable para el consumo, su contaminacin es relativamente alta, y requiere un tratamiento especial de preparacin para que no sea perjudicial para la salud del consumidor. Es recomendable utilizar otro tipo de cereal a la hora de preparar comidas. BIBLIOGRAFA Camacho, A., M.Giles, A.Ortegn, M.Palao, B.Serrano y O.Velzquez. 2009. Mtodo para la cuenta de mohos y levaduras en alimentos. Tcnicas para el Anlisis Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de Qumica, UNAM. Mxico. Disponible en: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/arc hivero/TecnicBasicas-Cuenta- mohos-levaduras_6530.pdf Alexa 0824. Recuento de esporas clostridium sulfito reductor. Recuento de mohos y levaduras. Disponible en: http://es.scribd.com/doc/21561682/ Recuento-de-Mohos-y-Levaduras Norma tcnica ecuatoriana NTE INEN 1 529-10:98. Control microbiolgico de los alimentos. Mohos y levaduras viables. Recuentos en placa por siembra en profundidad. Instituto ecuatoriano de normalizacin. Primera Edicin. Disponible en: https://law.resource.org/pub/ec/ibr/e c.nte.1529.10.1998.pdf Julio Csar Arreola Navarrete 2012. Determinacin de Mohos y Levaduras en alimentos. NORMA Oficial Mexicana NOM-213-SSA1- 2002, Productos y servicios. Productos crnicos procesados. Especificaciones sanitarias. Mtodos de prueba. Disponible en: http://carnestercerparcial.blogspot.c om/ CUESTIONARIO 1. Qu medios son utilizados para el cultivo de mohos y levaduras, cules son los componentes que los hacen selectivos para este tipo de microorganismos? Agar Sabouraud: Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionedos Agar Yeast extract-malt extract- glucose Agar Diamalt (para levaduras)
2. Nombre y describa 3 de los mohos implicados en la alteracin del productoque usted analiz. Rhizopus stolonifer: ocasiona ablandamiento Penicillium: ocasiona ablandamiento Aspergillus: ocasiona ablandamiento 3. Si usted quisiera determinar gnero y especie de los microorganismos encontrados, que metodologa usara.
Microscopia. BIBLIOGRAFA Alexa 0824. Recuento de esporas clostridium sulfito reductor. Recuento de mohos y levaduras. Disponible en: http://es.scribd.com/doc/21561682/ Recuento-de-Mohos-y-Levaduras Julio Csar Arreola Navarrete 2012. Determinacin de Mohos y Levaduras en alimentos. NORMA Oficial Mexicana NOM-213-SSA1- 2002, Productos y servicios. Productos crnicos procesados. Especificaciones sanitarias. Mtodos de prueba. Disponible en: http://carnestercerparcial.blogspot.c om/