GUA PARA LA TOMA DE HEMOCULTIVOS

Mara del Pilar Cuervo Polanco*, Clara Luz Rico Villegas**

Revisores
Juan Manuel Gmez, MD. Infectlogo Fundacin Santa Fe de Bogot .
Sandra Beltrn, MD. Infectloga Fundacin Santa Fe de Bogot Nohora Villegas de Merino, MD. Jefe del
Departamento de Patologa y Laboratorios. Fundacin Santa Fe de Bogot
PROPSITOS GENERALES
Esta gua est diseada para proporcionar recomendaciones generales basadas en la evidencia y evitar
falsos positivos en la toma de hemocultivos que puedan comprometer los resultados y por ende el tratamiento
del paciente.
Las recomendaciones estn categorizadas de acuerdo con la evidencia existente, racionalizacin terica,
aplicabilidad e impacto econmico, de acuerdo con el planteamiento realizado por el Center for Disease
Control (CDC) de Atlanta.
Categora IA. Fuertemente recomendada por hospitales y soportada por estudios experimentales y
epidemiolgicamente bien diseados.
Categora IB. Fuertemente recomendada por hospitales y aceptada como efectiva por expertos y por el
consenso del Hospital Infection Control Practice Advisor y
Committee (HICPAC), basada en evidencia sugestiva y racional, aun cuando no se han realizado estudios
cientficos .
Categora II. Su implementacin ha sido sugerida por muchos hospitales. Las recomendaciones pueden ser
respaldadas por estudios epidemiolgicos o clnicos, un fuerte racionamiento terico, o estudios definitivos
aplicables a algunos, pero no a todos los hospitales.
Sin recomendacin. No existe evidencia ni consenso suficientes.

1. INTRODUCCIN
La invasin de microorganismos en la sangre conlleva un considerable aumento de la morbi-mortalidad,
representando as mismo una de las ms severas causas de infeccin.
Los hemocultivos han llegado a considerarse un elemento importante para el diagnstico de las bacteremias.
El problema es de considerable magnitud, cerca de 200.000 pacientes desarrollan bacteremia o fungemia
anualmente en los Estados Unidos lo que se asocia con mortalidad en 20-50% de los casos. Muchos de estos
episodios son nosocomiales y en algunas instituciones representan la mayora de los casos; as mismo el
aumento de la resistencia bacteriana est asociado con una gran morbilidad de los episodios adquiridos en la
comunidad.(1)
La invasin de microorganismos ocurre por uno de dos mecanismos: drenaje desde un foco primario de la va
linftica al sistema vascular o directamente por el uso de agujas o materiales intravasculares contaminados
(catteres u otros dispositivos). Posteriormente el sistema inmune responde prontamente mediante los
fagocitos y macrfagos que limpian el torrente sanguneo en minutos u horas o por medio de los anticuerpos
especficos contra el germen.(1)
La presencia de microorganismos en sangre puede representar una falla en el sistema de defensa del
husped para controlar la infeccin en su sitio original o la imposibilidad del mdico para erradicar, drenar o
remover el foco infeccioso.(2)
Los hemocultivos falsos positivos son muy frecuentes; por lo general, esto sucede porque la zona donde se
toma la muestra est contaminada por la flora cutnea normal.(3)
2. DEFINICIN
El hemocultivo es un medio diagnstico que se realiza para la deteccin e identificacin de microorganismos
en la sangre utilizando el examen directo y cultivo, y definir los patrones de susceptibilidad de las bacterias
por medio del antibiograma.(1,4-5)
3. RECOMENDACIONES
3.1 Generales
Se requiere personal altamente calificado, utilizacin de tcnica asptica estricta e instrucciones detalladas
para su manejo, adems de polticas institucionales que garanticen las medidas para prevenir las
infecciones.(6-13) Categora IA .
Obtener la muestra antes de iniciar la terapia antimicrobiana .
Tomar 2 3 muestras en episodios spticos (14-16).
Evitar la contaminacin externa .
Obtener la muestra en cantidad suficiente (8-10 mL por botella en adultos y de 1-3 mL en pacientes
peditricos)(1,4,5,17,18)
Identificar los frascos con el nombre del paciente, inmediatamente antes de la toma de la muestra.(3,17)
Enviar rpidamente el material en recipiente bien sellado al laboratorio. El tiempo de transporte de las
muestras no debe exceder los 30 minutos. (1-3,14)
Tomar muestras sanguneas a travs del CVC (catter venoso central) nicamente en los siguientes
casos:(6)
- Paciente sin va de acceso venoso perifrico disponible .
- Pacientes en tratamiento con quimioterapia y difcil acceso venoso perifrico .
- Pacientes con coagulopatas .
- Paciente con eutermia o hipertermia .(6)
- Orden mdica del infectlogo .
3.2 Informacin al paciente
Antes del procedimiento explique claramente el objetivo del examen y el procedimiento que va a seguir.
3.3 Alistamiento de equipos
Verificar que el equipo est completo: mascarilla con visera o tapabocas con gafas, gorro, guantes
estriles,(3) paquetes de gasa estril,(2) jabn y solucin a base de yodo o clorhexidina, blusa o bata
estril,(1) torniquete,(1) esparadrapo, jeringas de aguja fija o punta luerlock(2) de 20 mL (para adultos) y de 3-5
mL para pacientes peditricos, pericraneal con adaptador para muestras al vaco o camisa para toma de
muestras al vaco.(1) Categora II
Dos o tres frascos con medio de cultivo (caldo de soya y casena TSA),(18) teniendo en cuenta lo siguiente:
- Para hemocultivos de rutina: un frasco para cultivo anaerbico (frasco tapa amarilla) y dos frascos para
cultivo aerbico (frasco tapa azul)
- Para pacientes que estn recibiendo terapia antimicrobiana: un frasco para cultivo anaerbico (frasco tapa
amarilla), un frasco para cultivo aerbico (bacterias y levaduras) (frasco tapa azul) y un frasco con resina para
absorber antibiticos (frasco tapa gris).
- Para cultivos de hongos: dos frascos para hongos (frasco tapa verde).
- Para cultivos de micobacterias: dos frascos para micobacterias (frasco tapa blanca).
Identificar los frascos teniendo la precaucin de no marcar o colocar la cinta de identificacin del paciente
sobre el cdigo de barras presente en cada frasco. Los datos de identificacin son: el nombre completo del
paciente, fecha, nmero de historia clnica, hora de toma y nmero de secuencia (#1, #2, #3) Marque los
frascos en la habitacin del paciente.(1,2,4,18) Categora II
3.4 Procedimiento
3.4.1 Preparacin de la piel
3.4.1.1 Utilizar gorro, mascarilla con visera, bata, guantes y campos estriles.(6,7,19-24) Categora IB
3.4.1.2 Seleccionar el sitio de venopuncin para las dos tomas, venas de grueso calibre, preferiblemente la
ceflica o baslica.(1,3)
3.4.1.3 Colocar una cinta adhesiva en la tapa protectora de los frascos y levantar con la cinta, volviendo a
tapar ligeramente.
3.4.1.4 Realizar lavado de manos con yodopovidona al 10% o clorhexidina al 2% antes y despus de realizar
el procedimiento.(6,7,25,26) Teniendo en cuenta el protocolo institucional Categora IA
3.4.1.5 Limpiar la piel en el rea de insercin de la aguja hacindo un crculo de 3 a 5 cm de dimetro con
jabn yodado iniciando del centro a la periferia sin devolverse, luego aplicar solucin yodada en el rea y
dejarla actuar durante dos minutos. Categora IA(4,7,27-30)
3.4.1.6 Colocar el torniquete (o solicitar a la circulante ) 5 a 8 cm arriba del sitio por puncionar.(3)
Nota: cuando hay circulante en el procedimiento, sta debe portar gorro y mascarilla.
3.4.2 Toma de muestra
3.4.2.1 Colocarse los guantes estriles manteniendo la tcnica asptica.
3.4.2.2 Insertar la aguja sin tocar o palpar el sitio de la venopuncin. Utilizar sistema al vaco que consta de
una camisa que se adapta al cuello del frasco del hemocultivo teniendo la precaucin de mantener siempre el
frasco en posicin vertical con relacin a las venas del paciente, para evitar que el lquido refluya a la vena.
De lo contrario utilice jeringa con un pericraneal para darle extensin y posibilidad de inocular la sangre en
dos botellas.(18)
3.4.2.3 Extraer la cantidad de sangre que se menciona a continuacin y distribuirla en los frascos (previa
asepsia del tapn con alcohol), as:(1,2,18)
Para hemocultivos de rutina: extraer 15 mL de sangre en el paciente adulto, introduzca 10 mL en el frasco
#1 (tapa amarilla) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (uno de los frascos tapa azul)
Para pacientes que estn recibiendo terapia antimicrobiana: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto,
inocule 5 mL en el frasco #1 (tapa amarilla) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (frasco tapa azul)
Para cultivos de hongos: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inoclelo en el frasco #1 tapa verde.
Para cultivo de micobacterias: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inocule 5 mL en el frasco #1
(frasco tapa blanca) y los 5 mL restantes en el frasco #2 (frasco tapa blanca).
3.4.2.4 Mezclar suavemente los frascos utilizando la tcnica de inversin.
3.4.2.5 Cambiar de guantes manteniendo la tcnica asptica y repetir el mismo procedimiento con la segunda
venopuncin (segundo sitio identificado) y distribuir de la siguiente manera.
Para hemocultivos de rutina: extraer 15 mL de sangre y adicionar 5 mL en el frasco #2 (tapa azul,
anteriormente inoculado) completando 10 mL de volumen final y los otros 10 mL restantes inoclelos en el
frasco #3 (otro de los frascos tapa azul)
Para pacientes que estn recibiendo terapia antimicrobiana: extraer 15 mL y adicionar 5 mL en el frasco #2
(tapa azul, anteriormente inoculado) completando 10mL de volumen final y los 10 mL restantes inoclelos en
el frasco #3 (frasco tapa gris)
Para cultivos de hongos: extraer 10 mL de sangre en el paciente adulto, inoclelo en el frasco #2 (frasco
tapa verde).
3.4.10 Realice la disposicin final de residuos hospitalarios y material cortopunzante teniendo en cuenta las
normas de bioseguridad y el protocolo institucional.(31)
3.4.11 Coloque los frascos en una bolsa para transporte de muestras (bolsa transparente),(31) sllela y
envilas rpidamente al laboratorio clnico. El tiempo no debe exceder los 30 minutos.(1-3,14).
















HEMOCULTIVO
Muestra: Sangre entera
Indicaciones para la toma de la muestra:
Desinfectar la piel a punzar con alcohol de 70 %
Dejar secar
Pasar solucin de yodo al 2 % con un algodn o gasa dejando actuar no menos de 1 minuto.
Descontaminar el tapn de la botella con alcohol solamente, pudiendo cambiarse o no la aguja antes de inocular la sangre.
En adultos recolectar no menos de 10 ml de sangre, en nios de 1-5 ml.
En adultos es conveniente tomar 3 muestras con un intervalo de 20-30 minutos.
Las muestras deben obtenerse antes del inicio de la medicacin antibitica. Si el paciente recibe antibiticos extraer la sangre en el
momento de menor concentracin del antimicrobiano.
Mtodo: Cultivo:
Frascos convencionales
Bifsicos
Lisis-centrifugacin
Automatizados

Significado clnico:
Microorganismos Patologas
S. aureus Infecciones por catteres, endocarditis, infecciones osteoarticulares,
partes blandas
Estafilococos coagulasa-negativa Infecciones por catteres, vlvulas cardacas protsicas, shunts,
infecciones de prtesis osteoarticulares, septicemia en neonatos e
inmunosuprimidos
Streptococcus beta hemoltico grupo A Piel y partes blandas, neumona, infecciones osteoarticulares y
genitourinarias
E. beta hemoltico grupo B Genitourinarios, meningitis y sepsis neonatal
E. beta hemoltico grupo C y G Endocarditis aguda, neoplasias, celulitis, alcoholismo, cirrosis
Enterococcus spp Endocarditis, infecciones genitourinarias y del tracto biliar, heridas
quirrgicas
Estreptococos grupo viridans Endocarditis, abscesos profundos
S. pneumoniae Meningitis, neumonas, peritonitis bacteriana espontnea
Corynebacterium JK Infeccin asociada a catteres vasculares en neutropnicos
Erysipelothrix spp Endocarditis, infeccin de herida, celulitis
Lactobacillus spp Endocarditis, abscesos profundos
C. septicum, E. bovis Carcinoma de colon
H. influenzae tipo B Meningitis, epiglotitis, neumonas, celulitis, osteoartritis
Grupo HACEK, H. parainfluenzae Endocarditis
Campylobacter spp Endocarditis, celulitis en pacientes inmunosuprimidos
Anaerobios Infeccin intraabdominal, infecciones genitourinaria y necrotizantes
de partes blandas
Enterobacterias Infecciones del tracto biliar, genitourinarias, heridas quirrgicas,
meningitis y sepsis neonatal, neumonas intrahospitalarias
Salmonella spp Anemia drepanoctica
Salmonella spp, Shigella spp, Rhodococcusspp,
C. neoformans, H. capsulatum,micobacterias
Infeccin por VIH
P. stuartii Obstrucin del tracto urinario o parapleja en gerontes
Aeromonas spp, Plesiomonas spp,
Vibrio spp
Gsatroenteritis, celulitis, cirrosis, alcoholismo, neoplasias
Bacilos gram negativos no fermentadores Infeccin de catteres, lquidos de infusin, infeccin urinaria,
neumonas intrahospitalarias, heridas quirrgicas
Malassezia furfur Infeccin asociada a catter de alimentacin parenteral
El hemocultivo se utiliza para el diagnstico de endocarditis infecciosa (EI).
Las bacterias que ms frecuentemente se aslan son: St. aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Neisseria
gonorrhoeae, Estreptococos del grupo viridans.
La EI se produce principalmente en los drogadictos endovenosos, en pacientes con reemplazos valvulares, en la bacteriemia
hospitalaria y en los mayores de 60 aos.
Los grmenes mas frecuentemente aislados son:
Streptococcus spp 60-80 %
Estreptococos grupo viridans 30-40 %
Enterococcus spp 5-18 %
Otros estreptococos 15-25 %
Staphylococcus spp 20-35 %
Estafilococos coagulasa positivos 10-27 %
Estafilococos coagulasa negativos 1-3 %
Bacilos aerobios Gram negativos 1.5-13 %
Hongos 2-4 %
Otros grmenes <5 %
Infecciones mixtas 1-2 %
Cultivo negativo 2.5-31 %
Streptococcus spp causa el mayor porcentaje de EI, especialmente las EI nosocomiales
Enterococcus spp se asla en drogadictos endovenosos, en hombres mayores de 60 aos que tuvieron alguna instrumentacin
genitourinaria, mujeres jvenes que fueron sometidas a procedimientos obsttricos.
Streptococcus pneumoniae tiene a menudo una evolucin fulminante y se asocia a formacin de abscesos perivalvular, pericarditis,
existiendo predileccin por la vlvula artica. Es frecuente en pacientes alcohlicos, puede presentarse tambin meningitis.
Abiotrophia spp (Estreptococos con variante nutricional) es la causa de EI en pacientes con cardiopata previa e infectan la vlvula
nativa.

Streptococcus agalactiae (Estreptococos del grupo B) es frecuente en pacientes con alguna enfermedad de base como diabetes,
carcinoma, alcoholismo, insuficiencia heptica, uso de drogas endovenosas.
Gemella haemolysans es otro microorganismo que se puede aislar en EI.
Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa se aslan generalmente en adictos intravenosos.
Staphylococcus epidermidis es causante de EI en vlvulas protsicas. Tambin se lo asla en lactantes con catteres venosos
umbilicales en las unidades de cuidados intensivos.
Salmonella spp, Escherichia coli, Serratia marcescens se asocian a pacientes con vlvula protsica, drogadictos endovenosos y a
cirrosis.
Listeria spp, Lactobacillus spp y Corynebacterium spp tambin pueden encontrarse en EI.
Las EI micticas ocurren en drogadictos endovenosos, luego de una ciruga cardiovascular y de tratamiento prolongado a
antibiticos.
Candida parapsylosis y C. tropicalis predominan en adictos.
C. albicans y Aspergillus spp se hallan en las personas no adictas.
Otros hongos como Histoplasma spp, Blastomyces spp y Cryptococcus spp pueden producir EI.
Utilidad clnica: El hemocultivo sirve para:
Confirma la sospecha clnica de la presencia de un foco infeccioso en algn lugar del organismo.
El diagnstico etiolgico de la endocarditis infecciosa.
Monitoreo de la terapia antimicrobiana.
Evolucin de la infeccin.
Limitaciones: Factores que hacen que se obtengan hemocultivos negativos en EI:
Tratamiento previo con antibiticos
Cultivos obtenidos al final de un proceso crnico (ms de 3 meses)
Endocarditis causada por microorganismos de difcil desarrollo
Endocarditis mictica
Endocarditis causada por Chlamydia spp, virus, Rickettsia spp, Coxiella burnetti, Legionella pneumophila
Endocarditis no infecciosa
Endocarditis mural
Endocarditis derecha
Diagnstico no correcto

Bibliografa:
1. Mandel, Bennett and Dolin. Enfermedades infecciosas principios y prcticas. Editorial Panamericana, 4 edicin; Madrid, Espaa.
Ao 1997.
2. Tokumoto Marta, Soloaga Rolando, Procopio Adriana, Vern Mara. Bacteriemias e infecciones de dispositivos intravasculares.
Curso de Microbiologa Clnica. Asociacin Argentina de Microbiologa. Colegio de Bioqumicos de la Provincia de Entre Ros.
Facultad de Bioqumica y Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional del Litoral. Mdulo 14. Febrero de 1999.
3. Isenberg H.D., Essential procedures for clinical microbiology. 1998. American Society for Microbiology. Library of Congress. ASM,
Press.
4. Ravel Richard. Clinical Laboratory Medicine. Clinical Application of Laboratory Data. Sixth Edition.1995
5. Tietz N. W. Clinical Guide to Laboratory test, edited by W.B. Saunders Company, third edition, United States of America ,1995.













































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