Introduccin

Las funciones normales del organismo dependen de la recepcin de estmulos

provenientes del ambiente externo o del proprio organismo, nuestros movimientos, las
percepciones sensoriales de lo que ocurre a nuestro alrededor y la generacin de una
respuesta a ellas dependen de una compleja red de neuronas en nuestro sistema nervioso
central y perifrico. Santiago Ramn y Cajal fue el primero en postular la existencia de
la neurona como una unidad bsica de funcionamiento del cerebro. Adems, propuso en
su ley de polarizacin dinmica que la transmisin del movimiento nervioso se produce
siempre desde las ramas protoplsmicas y cuerpo celular, al axn o expansin funcional,
y que toda neurona posee, pues, un aparato de recepcin, el soma y las prolongaciones
protoplsmicas (dendritas), un aparato de emisin, el axn, y un aparato de distribucin,
la arborizacin nerviosa terminal. Con esta idea, Ramn y Cajal abri dos cuestiones
que estn plenamente de actualidad, cmo se adquiere la morfologa de una neurona y
cules son los mecanismos celulares y moleculares que permiten la transmisin del
impulso nervioso de una neurona a otra. Esta revisin pretende abordar algunos de los
avances ms importantes que se han producido en el campo de la polaridad neuronal en
estos ltimos aos.
Diversos avances tcnicos, entre ellos, modelos de cultivo de neuronas han
permitido estudiar de una forma ms precisa la morfognesis neuronal. En la actualidad,
conocemos con una mayor precisin que el primer fenmeno en el establecimiento de la

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

polaridad neuronal es la formacin de un axn, antes incluso que se desarrollen las otras
neuritas como dendritas. En dicha formacin estn implicadas al menos dos rutas de
sealizacin, la ruta de PI3-quinasa y una ruta menos conocida en la que juega un papel
importante la protena LKB1 (tumor suppressor kinase Lkb1). Estas rutas regulan la
dinmica del citoesqueleto de actina y microtbulos, el cual juega un papel esencial
tanto en el crecimiento del axn como en el transporte al axn de las protenas de
membrana que van a permitir la conduccin del impulso nervioso. Dicho impulso se
genera en respuesta a las seales recibidas por las dendritas, se integra en el segmento
inicial del axn, generando el potencial de accin y se transmite a lo largo del axn
hasta llegar a la regin presinptica. Para que esta maquinaria funcione correctamente
cada dominio de la neurona (somatodendrtico, segmento inicial del axn y axn) debe
cumplir su funcin especfica y para ello necesita un conjunto propio y especfico de
protenas funcionales (receptores de neurotransmisores, canales inicos y protenas
capaces de anclar las anteriores en una posicin concreta). Por tanto, la desregulacin a
cualquier nivel de sealizacin del citoesqueleto, la ausencia o falta de funcin de las
protenas anteriormente mencionadas, as como una localizacin imprecisa de estas
protenas puede generar una disfuncin de la red de neuronas, generando enfermedades
neurodegenerativas o mentales.

Consideraciones generales

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

La recepcin de estmulos provenientes del ambiente externo o del proprio

organismo, de estos estmulos empieza la generacin de reacciones integradas dirigidas
en respuesta. Existen en el organismo animal dos tipos de sistemas coordinadores o
integrados responsables por esa actividad entre estimulo y respuesta, entre el rgano
receptor e el rgano efector que son el sistema nervioso y el sistema endocrino.
El sistema endocrino por lo general hace un control de reacciones ms difusas y
prolongadas, en cambio el sistema nervioso representa la base estructural para las
reacciones precisas, rpidas y casi siempre ms cortas.
La unidad estructural y funcional del sistema nervioso es la neurona, esta clulas
nerviosas estn formadas por un cuerpo o soma, una prolongacin corta, las dendritas y
una prolongacin larga, el axn. Las neuronas reciben informacin a travs de sus
dendritas, esta informacin se procesa en el soma y se conduce a lo largo del axn hasta
la siguiente sinapsis con otra neurona.
Los axones tienen muchas terminaciones nerviosas, transmiten la informacin de
manera centrifuga a otras neuronas o a clulas efectoras: transporte de protenas entre
las clulas y las sinapsis.

Composicin del tejido nervioso

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Celularmente el tejido nervioso en el sistema nervioso central est compuesto

principalmente por neuronas mayoritariamente multipolares, (en el cerebro humano
aprox. 100.000.000) y clulas de sostn. La neurona o clula nerviosa es la unidad
funcional del tejido nervioso y se les reconoce en su estructura bsica por estar
compuestas centralmente por un ncleo celular y un citoplasma asociado llamado
pericarin, este ncleo y citoplasma asociado, es a menudo llamado soma neuronal. Del
soma neuronal salen miles de prolongaciones citoplasmticas delgadas llamadas
dendritas que contiene bsicamente neurotbulos estas dendritas ampliamente
ramificadas en conjunto de llaman dendroplasma; tambin del soma neuronal sale una
prolongacin nica y gruesa llamada axn que termina ramificndose en numerosas
ramas finalizadas en expansiones llamadas pie axnico y contiene bulbos terminales.
Estn especializadas en recibir estmulos nerviosos y conducir impulsos elctricos a
otras partes del tejido a travs del axn. Estn organizadas como una red de
comunicaciones integrada, los contactos especializados entre una neurona y otra reciben
el nombre de sinapsis. Se llama Axoplasma al citoplasma neuronal relacionado con l
axon y contiene microtbulos, microfilamentos intermedio tipo neurofilamentos,
mitocondrias y retculo endoplamatico liso. Las clulas de sostn que acompaan a las
neuronas en el sistema nervioso central son llamadas genricamente clulas de Glia,
Neuroglia o gliocitos ; constituyen el 90% de todas las clulas del SN., esto es en la
practica por cada clula neurona 9 clulas de glia: Los subtipos son: Astrocitos
Protoplasmticos y astrocitos fibrosos, oligodendrocitos y microgliocitos. Todas estas
clulas caractersticamente tienen citoplasmas ramificados cuyas prolongaciones
citoplasmticas genricamente llamados glioplasmas.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 1: Composicin de la sustancia gris y blanca en sistema nervioso central. En

el sistema nervioso central hay regiones nicas donde los somas neuronales forman
verdaderos centros o ncleos donde se asocian los somas neuronales con sus
dendroplasmas y axoplasmas junto con glioplasmas; en histologa eso se llama sustancia
gris. (zona A) Tambin hay en regiones del sistema nervioso central donde solo hay
dendroplasmas, axoplasmas y glioplasmas asociados sin somas neuronales. En
histologa eso se llama sustancia blanca (zona B).
Fuente: http://biology.ucsc.edu/classes/bio125
Es inconcebible pensar que en la organizacin histolgica de la sustancia gris con
millones de neuronas no se toquen axoplasmas, dendroplasmas (mas abundantes), con
los glioplasmas de las clulas de glia que son 9 veces mas abundantes. Esa mezcla de
citoplasmas se reconoce como neuropilo, y es adems en sustancia gris por donde pasa
la vasculatura que irriga a la misma sustancia gris.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

La neurona
Los componentes funcionales de una neurona comprenden el cuerpo celular (soma),
el axn, las dendritas y los contactos sinpticos.

Figura

2:

Imagen

histolgica

de

una

neurona.

fuente:

http://enzocards.blogspot.com.br/2012/02/n-e-u-r-o-n.html
El cuerpo celular o soma est compuesto por el ncleo rodeado por cantidades
variables de citoplasma, esta se denomina pericarion. Contiene el ncleo y los orgnulos
que mantienen la clula. Las prolongaciones que se extienden desde el soma constituyen
la nica caracterstica estructural comn a todas las neuronas. Las dendritas son las
prolongaciones ms cortas, transmiten los impulsos desde el medio hasta el soma
neuronal. El axn, la nica prolongacin de la neurona caracterstica que transmite el

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

impulso nervioso del soma neuronal hacia una terminacin especializada (sinapsis) que
entra en contacto con otra neurona o una clula efectora.

Figura 3: Diagrama de una neurona del sistema nervioso perifrico. El soma

neuronal con el ncleo y citoplasma, las dendritas y el axn con la clula de Schwann,
su vaina de mielina y su terminacin en las fibras musculares. Fuente:
http://www.infovisual.info/03/0

La neurona es la unidad funcional y estructural del tejido nervioso. El sistema

nervioso humano contiene ms de 10 000 millones de neuronas, su tamao y forma
varan mas que los de cualquier otro grupo celular del organismo. Las neuronas pueden
clasificarse en tres categoras generales:

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Neuronas sensitivas que transmiten los impulsos desde los receptores hasta el
sistema nervioso central. Las prolongaciones de estas neuronas estn incluidas en las
fibras nerviosas aferentes somticas, que transmiten las sensaciones de dolor,
temperatura, tacto y presin desde la superficie corporal. Adems estas fibras la
sensacin de dolor y propiocepcin (percepcin de los movimientos y la posicin del
cuerpo) desde rganos internos para promover al encfalo informacin relaciona con la
orientacin del tronco y los miembros. Tambin estn incluyas en las prolongaciones de
estas neuronas las fibras aferentes viscerales que transmiten los impulsos de dolor y
otras sensaciones desde los rganos internos, las membranas mucosas, las glndulas y
los vasos sanguneos.
Neuronas motoras que transmiten impulsos desde el sistema nervioso central o los
ganglios hacia las clulas efectoras. Las prolongaciones de estas neuronas estn
incluidas en las fibras nerviosas eferentes somticas y eferentes viscerales. Las
neuronas eferentes somticas envan impulsos voluntarios a los msculos esquelticos.
Las neuronas eferentes viscerales transmiten impulsos involuntarios al musculo liso, a
las clulas del sistema cardionector (fibras de Purkinje) y a las glndulas.
Las interneuronas forman una red integrada de comunicacin entre las neuronas
sensitivas y las neuronas motoras. Se calcula que ms de 99,9% de todas las neuronas
pertenece a esta red de integracin.
Adems, las neuronas se clasifican segn la disposicin y cantidad de
prolongaciones que se extienden desde el soma neuronal.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

En las neuronas multipolares, el soma emite una sola prolongacin de axn y dos o
varias dendritas. La disposicin de los impulsos es desde las dendritas hacia el soma, y
desde el soma al axn. Las membranas plasmticas de cada segmento de este tipo de
neurona estn adaptadas a captar o transmitir los impulsos nerviosos, con la ayuda de
los neurotransmisores. Las neuronas motoras y las interneuronas constituyen la mayor
parte de las neuronas multipolares del sistema nervioso.
Las neuronas bipolares son aquellas que tienen un solo axn y una sola dendrita.
Son infrecuentes, lo ms comn es que se asocien con receptores de los sentidos
especiales (gusto, olfato, odo, vista y equilibrio). En general se encuentran en la retina
del ojo y en los ganglios del nervio vestibulococlear (nervio craneal VIII) del odo.
Neuronas seudounipolares son las que tienen una prolongacin, el axn, que se
divide cerca del soma neuronal en dos largas prolongaciones. Una rama axnica se
extiende a la periferia y otra hacia el sistema nervioso central. Se desarrolla a partir de
una neurona bipolar conforme su axn y su dendrita migran alrededor del soma
neuronal y se fusionan en una prolongacin nica. La mayor parte de las neuronas
seudounipolares son neuronas sensitivas. Los impulsos se generan en las arborizaciones
perifricas de la neurona que son la porcin receptora de la clula. Estn situados en los
ganglios espinales y en los ganglios de los nervios craneales.
Las neuronas unipolares que originalmente tienen una sola prolongacin y son
tpicas de los ganglios de los invertebrados.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

ADQUISICIN DE LA POLARIDAD NEURONAL: FORMACIN DEL AXN

La neurona es una de las clulas con una mayor complejidad morfolgica y

funcional. La adquisicin de esta complejidad comienza con la especificacin de una de
las neuritas como axn y su crecimiento. De este modo, la neurona adquiere su
polaridad morfolgica, diferenciando un dominio somatodendrtico (postsinptico) y un
dominio axonal (presinptico). Los mecanismos intracelulares que regulan la
especificacin del axn y su posterior crecimiento son an poco conocidos. A pesar de
los datos conocidos sobre la morfognesis neuronal in situ, la comprensin de los
mecanismos intracelulares que regulan la neuritognesis y la formacin del axn
requieren sistemas experimentales donde las neuronas puedan ser manipuladas durante
su diferenciacin. La generacin de un modelo estandarizado de cultivo de neuronas
de hipocampo, con estadios definidos, ha permitido avanzar en el estudio de los
mecanismos moleculares responsables de la formacin del axn y su elongacin (Figura
4). En este modelo las neuronas reproducen los cambios morfolgicos y funcionales que
se observan en las neuronas in situ y su contribucin a la investigacin de la funcin
neuronal ha sido de gran importancia.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 4: Modelo de adquisicin de la polaridad neuronal. (A) Esquema

representativo de los estadios de diferenciacin neuronal en el modelo de neuronas de
hipocampo en cultivo. (B) En el panel inferior se muestran ejemplos de estas neuronas
en estadio 2 (a) y estadio 3 (b y c). En el estadio 2 (a), el axn an no ha comenzado a
crecer y se distinguen varias neuritas que crecen a partir del soma, con conos de
crecimiento marcados con Faloidina-Alexa 594 (rojo), mientras que los microtbulos
se marcaron con anti- -tubulina y un anticuerpo secundario Alexa-488 (verde). En el
estadio 3, se observa como el axn ha comenzado a crecer a un mayor ritmo que el
resto de neuritas. El patrn del citoesqueleto de microtbulos y actina se marc como
en a. En c se muestra la diferenciacin del citoesqueleto de microtbulos entre el
dominio somatodendrtico (MAP2, rojo) y el dominio axonal (MAP1B fosforilada (SMI31, verde).

Ruptura de la neuroesfera y crecimiento de neuritas

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Tras la ltima divisin, la neurona postmittica presenta una forma redondeada. En

las fases ms tempranas, en cultivo, genera un lamelipodio de actina polimerizada a su
alrededor (estadio1). El primer paso en la ruptura de esta simetra es la concentracin,
en uno o varios puntos, de receptores de factores y protenas que regulan la
polimerizacin de actina. Se ha descrito que la deteccin de una seal positiva de
crecimiento a travs de receptores de membrana transforma RhoA-GTP a su forma
inactiva, RhoA-GDP. Esta inactivacin rompe el complejo de RhoA-ROCK-Profilina e
induce la despolimerizacin de actina en este punto concreto. Otra protena asociada a
actina que participa en la despolimerizacin de la actina es la cofilina. Esta ruptura de la
barrera de actina es utilizada entonces por los microtbulos para crecer y generar las
neuritas (estadio 2, Figura 5). La regulacin del citoesqueleto de actina durante el
crecimiento neurtico y axonal es an poco conocida. Adems de la regulacin de la
dinmica de ensamblaje de los filamentos de actina, su nucleacin tambin juega un
papel importante en los mecanismos de crecimiento y motilidad neuronal. Quizs el
factor de nucleacin ms conocido es Arp2/3, que necesita de la colaboracin de otros
factores como WASP (Wiskott-Aldrich syndrome protein) y cuya actividad es regulada
por miembros de la familia de Rho-GTPasas.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 5: La ruptura de la barrera de actina es necesaria para el crecimiento de

neuritas y el
axn. (A) El crecimiento de las neuritas a partir del estadio de neuroesfera y su
posterior elongacin requieren de la despolimerizacin de los microfilamentos de
actina (rojo) y la ruptura de la barrera de actina. Esto es aprovechado por los
microtbulos (verde) para invadir esta regin y promover el crecimiento de las
neuritas. (B) Inmunofluorescencia de un cono de crecimiento axonal en sus primeras
etapas donde se observa la barrera de actina con su estructura de lamelipodio y
filopodios (rojo) y el citoesqueleto de microtbulos (verde). En comparacin con el
crecimiento de las neuronas control (C), la estabilizacin del citoesqueleto de actina
mediante el uso de jasplakinolide (D) impide el crecimiento de las neuritas, mientras

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

que su despolimerizacin con cytochalasina D permite el crecimiento de multiples

neuritas (axon-like).

Rho-GTPasas y su relacin con el crecimiento de neuritas

Los miembros ms conocidos de la familia de Rho-GTPasas son RhoA

(Rashomologous member A), Rac1 (Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1) y
Cdc42 (cell-division cycle 42). Las Rho-GTPasas son protenas que se expresan de
forma ubicua y estn presentes a lo largo de toda la filogenia. La microinyeccin de
formas constitutivamente activas o dominantes negativos de estas GTPasas ha permitido
conocer sus funciones en el control del citoesqueleto de actina. Estas protenas
presentan una forma activa, unida a GTP, y una forma inactiva, unida a GDP. El
intercambio de GDP a GTP, y viceversa, est regulado por otras familias de protenas,
GAPs, GEFs y GDIs que regulan este intercambio o lo inhiben. Como se ha
mencionado anteriormente, el crecimiento de neuritas y con posterioridad del axn
depende de la inactivacin de RhoA, siendo adems esencial la actividad de Rac1. Las
Rho-GTPasas regulan el citoesqueleto de actina unindose a protenas asociadas a
actina (forminas, WASP,
profilina, cofilina, etc.) en funcin de su estado de actividad y regulando de esta
forma la generacin de filamentos de actina, su despolimerizacin y la orientacin de
estos microfilamentos de actina. Existe una clara relacin entre los citoesqueletos de

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

actina y microtbulos durante el crecimiento y movimiento celular, aunque no existen

muchos
datos sobre ello. Un trabajo ha propuesto que RhoA tiene un papel dual en la
estabilizacin y desestabilizacin de microtbulos, que Rac1 incrementa el crecimiento
de microtbulos y Cdc42, adems de cooperar con Rac1, est implicado en la
reorientacin del centrosoma hacia la direccin de migracin.

Formacin del axn y elongacin axonal

La adquisicin de la polaridad neuronal comienza con la formacin de un axn a

partir de una de las neuritas generadas (estadio 3). El crecimiento del axn a un mayor
ritmo que el resto de neuritas requiere la concentracin de mecanismos de regulacin
del citoesqueleto de actina y microtbulos, as como de mecanismos de transporte
especficos del axn. Se ha descrito que el punto de crecimiento del axn depende de la
posicin del centrosoma tras la ltima divisin, lo que supondra un apoyo a la
organizacin de los microtbulos, su crecimiento y el transporte de protenas axonales.
Sin embargo, el estudio del crecimiento del axn en el modelo de cultivo de neuronas
de hipocampo no muestra una relacin entre la posicin del centrosoma y el punto de
crecimiento del axn. Recientemente, un trabajo sugiere que el axn se forma a partir de
una de las dos primeras neuritas generadas. Si bien, este punto an necesita de nuevos

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

estudios para determinar con claridad dnde se forma el axn, los mecanismos que lo
generan y las protenas asociadas con la formacin del axn son un poco ms
conocidos.

. Funcin de PI3-quinasa en la formacin del axn

Utilizando el modelo de neuronas de hipocampo en cultivo se ha descrito que la

actividad de PI3-quinasa es esencial para formar un axn. Dicha actividad genera PI3P
fosfo-inostidos que regulan la localizacin polarizada, en el extremo de la neurita que
se especifica como axn, de protenas como mPar3 y mPar6. Adems, la actividad de
PI3-quinasa activa otras protenas (p. ej. PKCz, Akt, GSK3, Rap1b, Rac1 y Cdc42)
relacionadas con el citoesqueleto de actina y microtbulos que permiten la elongacin
del axn. La actividad coordinada de estas protenas y sus vas de sealizacin permiten
una mayor despolimerizacin del citoesqueleto de actina en el punto de crecimiento del
axn y la polimerizacin de microtbulos que elongan el axn. La importancia de la
despolimerizacin localizada de actina para permitir el crecimiento del axn fue
demostrada por el grupo de Carlos Dotti. Tratando neuronas de hipocampo en cultivo
con cytochalasina D observaron que su aplicacin local, en otra neurita diferente a la
que haba generado el axn, permita el crecimiento de un segundo axn (Figura 5).
Posteriormente, se ha demostrado que protenas asociadas a la actina, como la profilina,
actan conjuntamente con las protenas de la familia de Rho-GTPasas, regulando el
estado de polimerizacin de la actina en el punto de crecimiento del axn. En general, el
Universitaria Fernanda Cassia Paludo

crecimiento del axn depende de un balance a favor de una mayor cantidad de Rac-GTP
y una mayor inactividad de Rho (Rho-GDP).

. Otras protenas relacionadas con la formacin del axn

La importancia de la va de PI3-quinasa en la formacin del axn no slo se refiere a

la actividad de PI3-quinasa. Recientemente, se ha descrito que otras quinasas reguladas
por esta activad son esenciales para la formacin o especificacin del axn. La
inhibicin de la actividad de GSK3 impide la formacin del axn. Aunque durante
mucho tiempo se ha puesto nfasis en GSK3, mediante el uso de ARNs de
interferencia se ha podido demostrar que adems de GSK3, GSK3 tambin es
necesaria para la formacin del axn en neuronas de hipocampo durante su desarrollo
in vitro. Sin embargo, la elongacin posterior del axn es acentuada por la inhibicin
de la actividad de GSK3. Algunos artculos han descrito que la inhibicin de SK3
tambin genera mltiples axones, pero dada la compleja regulacin de esta protena y su
participacin en diferentes procesos celulares, harn falta ms estudios para entender de
una forma ms concreta su participacin en la formacin del axn. La regulacin de la
actividad de GSK3 es bastante compleja y se conoce mejor su actuacin fosforilando
protenas asociadas al citoesqueleto. La fosforilacin de protenas asociadas a
microtbulos como tau o MAP1B regula la estabilidad y polimerizacin de
microtbulos, participando de esta forma en la regulacin del crecimiento axonal. De
hecho, las neuronas de hipocampo de ratones con una expresin muy reducida de
Universitaria Fernanda Cassia Paludo

MAP1B presentan un retraso importante en el crecimiento inicial del axn. MAP1B

fosforilada por GSK3 se localiza esprecificamente en el axn y es un marcador
temprano durante la formacin del axn. Con posterioridad, la forma de tau no
fosforilada por GSK3, tau-1, se localiza especficamente en el axn. Por tanto, GSK3
tiene un papel diferente dependiendo del momento de desarrollo del axn
(especificacin o elongacin). CRMP-2 es una protena regulada por GSK3 y que acta
polimerizando microtbulos y permitiendo el crecimiento del axn. CRMP-2 se une a
monmeros de tubulina que va incorporando al extremo positivo de los polmeros de
tubulina. Su sobreexpresin en neuronas genera mltiples axones. GSK3 tambin
fosforila a beta-catenina, la cual participa en el crecimiento axonal asociada a APC y al
citoesqueleto. La regulacin de la fosforilacin de beta-catenina por GSK3 tambin
juega un papel importante en el transporte de beta-catenina al ncleo y su participacin
en la transcripcin de genes. Como posteriormente se tratar, un tipo de receptores
capaces de interactuar con la actividad de GSK3 y regular la elongacin del axn y su
arborizacin, son los receptores purinrgicos. Otros receptores que regulan la actividad
de GSK3 y que han sido ms estudiados son los receptores de insulina e IGF-I, cuya
supresin mediante ARN de interferencia impide la formacin del axn. Adems de
GSK3, la actividad de KK/IKK

(Quinasa del inhibidor de NF- B, I B ) es

necesaria para formar un axn. Recientemente, hemos demostrado que la supresin de

la actividad de IKKs impide la formacin del axn. Sin embargo, al igual que ocurre
con GSK3, una vez establecido el axn, la actividad de IKKs no es necesaria para
elongar el axn, aunque si juega un papel muy importante en la formacin y maduracin
del segmento inicial del axn. Esta regin aloja una importante concentracin de

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

canales de sodio dependientes de voltaje (Nav1.2 y Nav1.6) y es responsable de la

generacin del potencial de accin. Diferentes trabajos han mostrado que existe una
interrelacin entre la actividad de GSK3 y la ruta de sealizacin de NF B, pero la
forma en que interaccionan en las neuronas no es an conocida. Otra va de sealizacin
implicada en la formacin del axn, y por el momento no asociada con la actividad de
PI3-quinasa, implica a la protena LKB1. Se ha demostrado que la fosforilacin en la
serina 431 de LKB1 por PKA es necesaria para que se forme un axn. Asimismo, otras
protenas reguladas por diferentes vas estn implicadas en los mecanismos
responsables de formar el axn. Por ejemplo, la forma fosforilada de JNK2 est presente
en la regin distal del axn y dicha fosforilacin es necesaria para formar el axn.
Recientemente, se ha propuesto que Rit, perteneciente a la familia de Ras GTPasas est
implicada en el crecimiento del axn y su actividad adems de promover el crecimiento
axonal, puede actuar como un factor inhibidor del crecimiento de las dendritas (36).
Otras protenas relacionadas previamente con el transporte de protenas hacia el axn se
han identificado en las primeras fases de especificacin y crecimiento axonal. Una de
ellas es una subunidad de la kinesina-1, cuya localizacin en la neurita que va a formar
axn determina su crecimiento. Esta subunidad de la kinesina-1 se localiza con
posterioridad en el segmento inicial del axn y su asociacin con microtbulos estables
en este dominio determina el transporte y localizacin axonal de protenas como la
protena precursora del amiloide (APP).

Formacin del segmento inicial del axn

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

El segmento inicial del axn (AIS) fue identificado en los aos 60 como una
estructura que se diferenciaba estructuralmente del resto del axn y del dominio
somatodendrtico. Sus principales caractersticas son:
a) una capa densa granular e intracelular
b) la presencia de algunos grupos de ribosomas, y
c) la presencia de fascculos de microtbulos. Esta estructura se asemeja a la de los
nodos de Ranvier. Durante muchos aos, algunos estudios aislados han seguido
describiendo la estructura del segmento inicial del axn en diferentes tipos de neuronas
y en diferentes especies. Sin embargo, este dominio axonal slo ha adquirido una
relevancia especial en la funcionalidad neuronal durante los ltimos 10 aos (Figura 6).

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 6: El segmento inicial del axn. (A) Neurona de hipocampo en cultivo (6

DIV). El dominio somato-dendrtico se identific mediante el marcaje con anticuerpos
dirigidos contra la protena asociada a microtbulos, MAP2a+b (rojo), y el segmento
inicial del axn utilizando anticuerpos dirigidos contra losa canales de sodio
dependientes de voltaje (PanNaCh, verde). (B) Esquema representativo de la estructura
proteica del segmento inicial del axn. Sobre un citoesqueleto denso de actina
submembranoso se anclan protenas como la

IV-espectrina y la ankirina G, que a su

vez ancla protenas integrales de membrana como los canales de sodio, canales de
potasio, neurofascina o L1/NCAM. Esta densidad de protenas acta como barrera de
difusin en la membrana, controlando el trfico de protenas hacia el axn.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

El segmento inicial del axn es la estructura responsable de la generacin del

potencial de accin y acta tambin como una barrera de difusin que controla el trfico
de protenas hacia el axn . La generacin del potencial de accin es posible gracias a la
concentracin de canales de sodio dependientes de voltaje en este dominio axonal.
Dicha concentracin es posible gracias a su anclaje a ankirina G en el segmento inicial
del axn a travs de la secuencia AIS de aminocidos presente en el canal de sodio. El
AIS acta tambin como una barrera que impide el trfico hacia el axn de protenas
que no van a formar parte del axn. Ello es posible gracias a una fuerte concentracin
de protenas en la membrana del AIS que limita la difusin de protenas. Dada la
importancia del segmento inicial del axn en la adquisicin de la polaridad funcional de
las neuronas, diversos grupos han estudiado como se forma su estructura. Estudios en
secciones de cerebro de ratones salvajes y ratones knock-out para ankirina G y IVespectrina han mostrado que la concentracin de canales de sodio en el AIS depende de
la llegada con anterioridad de ankirina G y IV-espectrina. Dos estudios han mostrado
que existe una secuencia de aminocidos en el canal de sodio neuronal dependiente de
voltaje que es responsable de concentrar estos canales en el segmento inicial del axn y
que dicha secuencia une estas protenas a la ankirina G. Esta secuencia ha sido con
posterioridad identificada en otros canales inicos, como los canales de potasio
KCNQ2/3 (Kv7.2 y Kv7.3), que estn relacionados con epilepsias neonatales. Adems,
la mutacin de un glutmico en esta secuencia de aminocidos impide la concentracin
de protenas, su anclaje a ankirina G y cuando la mutacin est presente en el canal de
sodio dependiente de voltaje de msculo cardiaco, entonces se produce la
cardiomiopata conocida como el sndrome de Brugada. El anclaje de ankirina G y IV-

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

espectrina necesita a su vez de una estructura de citoesqueleto diferenciada del resto del
axn. As, el segmento inicial del axn se caracteriza por una densidad elevada de actina
bajo su membrana plasmtica. El uso de agentes despolimerizantes de actina reduce la
amplitud del potencial de accin. Asimismo, observaciones de nuestro laboratorio y de
otro grupo muestran que los microtbulos del segmento inicial del axn presentan
isoformas de tubulina ms estables (tubulina acetilada) y su organizacin es diferente a
la del resto del axn o el dominio somatodendrtico. Estos microtbulos ms estables
juegan un papel esencial en el transporte de protenas hacia el axn, al permitir la unin
de la subunidad KIF5B de la kinesina- 1 que acta como protena de transporte hacia el
axn. Otra subunidad de la kinesina-1, KIF5C, se une de forma diferencial a
microtbulos tirosinados (ms dinmicos) y a microtbulos detirosinados (ms
estables), siendo la velocidad de transporte ms lenta en estos ltimos. Esta diferencia
permitira al segmento inicial del axn cumplir su funcin de control de trfico de las
protenas axonales.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 7: La formacin del segmento inicial del axn est asociada a la formacin
inicial del axn. (A) Neuronas de hipocampo cultivadas durante 36, 48 72 horas y
marcadas con anticuerpos dirigidos contra el marcador axonal SMI-31 (MAP1B-P,
rojo) y pIkBa (verde). (B) Como se observa en la cuantificacin de fluorescencia de
ambos marcadores colocalizan en el axn desde su inicio y posteriormente pI B

se

concentra en el segmento inicial del axn (48 y 72 horas).

Recientemente, hemos demostrado que la formacin del segmento inicial del axn
es un evento mucho ms temprano de lo que se pensaba y no es necesaria una previa
maduracin dendrtica. La forma fosforilada del inhibidor de NF-, pI, se localiza
en el segmento inicial del axn de todas las neuronas e interneuronas en el sistema
nervioso central. Cuando estudiamos la formacin del axn en el modelo de neuronas
de hipocampo en cultivo, se observ que desde el primer momento que el axn puede

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

ser identificado como tal, la localizacin de pI est restringida al incipiente axn.

Segn el axn comienza a elongar pI se comienza a concentrar prximo al axn
(Figura 7) y unas 24 horas tras la iniciacin del axn, el segmento inicial del axn se ha
formado. Aunque los mecanismos que regulan el transporte de protenas hacia el
segmento inicial del axn son poco conocidos y se ha propuesto que la ankirina G es la
primera protena en llegar al segmento inicial del axn, nuestro estudio ha mostrado que
la fosforilacin de pIes necesaria para el transporte de ankirina G y canales de sodio
dependientes de voltaje hacia el axn. pI se asocia a microtbulos y podra de esta
forma regular el transporte de protenas hacia el axn. Esto supone la implicacin de
una ruta de sealizacin tanto en el control de la transcripcin de genes como el
transporte de las protenas que estos codifican, siendo de esta forma un mecanismo de
coordinacin a nivel intracelular de los mecanismos que regulan la morfognesis y la
sntesis de protenas. Futuros estudios en esta direccin podran ser tiles para
comprender enfermedades del sistema nervioso relacionadas con la prdida de
estructuras en las neuronas.

ELONGACIN Y ARBORIZACIN AXONAL

El axn, una vez formado, debe elongar y alcanzar dianas especficas para generar
contactos sinpticos con otras neuronas o clulas especializadas en diferentes tejidos (p.
ej. musculares o sensoriales). Esta elongacin est regulada por seales externas
positivas y negativas que regulan el crecimiento y guan al axn hacia su diana.
Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Diversos estudios han mostrado que la ramificacin axonal est ligada al

comportamiento del cono de crecimiento. Por ejemplo, la semaforina 3A repele los
axones corticales in situ e in vitro y reduce la arborizacin axonal. Por otro lado, esta
misma molcula repele los conos de crecimiento de las neuronas de retina pero induce
la ramificacin de estos axones una vez que el cono de crecimiento se ha recuperado de
su colapso. Para ello el cono de crecimiento axonal cuenta con receptores de estas
seales que estn acoplados a mecanismos de regulacin del citoesqueleto de actina y
microtbulos, tales como las neuropilinas, plexinas o integrinas. Estos factores pueden
regular la dinmica de los microfilamentos de actina o microtbulos en zonas
especficas del cono de crecimiento, permitiendo su giro hacia una u otra direccin o
incluso el colapso del cono de crecimiento. La neurona, a travs del conjunto de
receptores y sensores en su cono de crecimiento, realiza exploraciones y crece en la
direccin permitida o colapsa ese cono de crecimiento si el ambiente no permite el
crecimiento, impidiendo de esta forma la generacin de ramificaciones axonales. En
ciertas condiciones, el axn puede ramificarse y generar multiples ramificaciones
(arborizacin axonal) con mltiples contactos sinpticos. La formacin de
ramificaciones axonales es necesaria para el desarrollo del sistema nervioso y a su vez,
el tamao y complejidad de las ramificaciones est determinado por la actividad neural.
Para que estas ramificaciones se produzcan el citoesqueleto debe remodelarse. As, el
axn a partir del cual se generan las ramificaciones est formado por largos
microtbulos que deben cortarse y moverse hacia la ramificacin en formacin. Esto es
posible gracias a protenas como la katanina o la spastina que rompen estos
microtbulos en fragmentos ms pequeos y mviles. La regulacin del crecimiento de

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

estas ramificaciones y su extensin con respecto al axn principal depende de diferentes

seales. Sin embargo, las bases moleculares que regulan la arborizacin axonal son
poco conocidas. Recientemente se ha descrito, que modificaciones localizadas
transitorias de los niveles de calcio intracelular pueden estar implicadas en la toma de
esta decisin. Estas variaciones en los niveles de calcio, junto con las vas de
sealizacin dirigidas por otros factores externos pueden regular ese crecimiento y
arborizacin axonal. Recientemente se ha descrito que NGF potencia el crecimiento
axonal en neuronas de ganglio de la raz dorsal (DRG) e induce la inhibicin de GSK3.
Adems, la inhibicin de GSK3, en neuronas de hipocampo en cultivo, induce el
crecimiento y la arborizacin axonal. Adems de GSK-3, tanto RhoA como FAK
(focal adhesion kinase) juegan un papel esencial en la regulacin de la formacin de
ramificaciones axonales. Adems de las seales que inducen el crecimiento y la
arborizacin axonal, otras seales, como el ATP, pueden impedir o restringir el
crecimiento del axn. Como se discute a continuacin, los receptores purinrgicos
pueden jugar un papel importante en la regulacin de la elongacin y arborizacin del
axn, aunque su papel en el desarrollo de los circuitos neuronales es an muy poco
conocido.
FUNCIN

DE

LOS

RECEPTORES

PURINRGICOS

EN

LA

DIFERENCIACIN NEURONAL

Una de las familias de molculas que ms importancia est adquiriendo en los

ltimos aos por el papel que desempean en la diferenciacin y supervivencia neuronal

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

son los nucletidos de adenina. Estos compuestos, que presentan una amplia
distribucin en todo el organismo, ejercen un efecto trfico directo en el desarrollo y
mantenimiento del sistema nervioso central y juegan un papel fundamental en el las
respuestas frente a enfermedades y traumatismos. Como ya se ha mencionado en
captulos anteriores los nucletidos de adenina, y en particular el ATP, ejercen un papel
como neurotransmisor rpido en el sistema nervioso central, ya que solo no activa
canales inicos especficos denominados receptores P2X, sino que adems, las
ectonucleotidasas presentes en la membrana plasmtica lo degradan rpidamente a
adenosina. Los receptores P2X, estn formados por la combinacin de al menos 7
subunidades diferentes denominadas P2X1 al P2X7, y conforman un canal funcional
cuando se combinan al menos 3 de estas subunidades iguales o diferentes. La activacin
de estos receptores induce la entrada de calcio al interior de la neurona independiente de
la activacin de los canales de calcio dependientes de voltaje. Como consecuencia de
esta entrada de calcio, el ATP, es capaz de inducir la liberacin de ms
neurotransmisores, participando as en la propagacin del impulso nervioso. Adems,
estos receptores, al inhibir la induccin de la potenciacin a largo plazo en el
hipocampo, participan en los procesos de plasticidad neuronal, fundamentales en el
funcionamiento de los circuitos neuronales implicados en los procesos de memoria. Es
precisamente durante el desarrollo del hipocampo donde los receptores P2X juegan un
papel importante en la formacin de las redes neurales. As, en estudios realizados en
rodajas de hipocampo de ratones neonatos, se observ que la activacin de los
receptores P2X1, 2 y 4 inducen la formacin de fibras nerviosas en el giro dentado. Por

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

el contrario, en explantes neuronales se ha descrito que la activacin de receptores P2X3

desencadena una disminucin
de la elongacin axonal. La importancia que los nucletidos de adenina desempean
en la diferenciacin neuronal no solo se limita a los efectos que estos compuestos
ejercen sobre la morfologa neuronal. As, otro de los papeles importante que
desempeen los nucletidos de adenina se centra en el control que clulas progenitoras
poseen para controlar la recepcin de las seales procedentes de su entorno. Uno de
estos mecanismos de control consiste en la alta expresin de ectonucleotidasas en su
membrana plasmtica, impidiendo de esta manera la llegada de seales que las induzca
a diferenciarse. El control que los nucletidos ejercen sobre los sistemas en crecimiento
parece no limitarse al reino animal. As, recientemente se ha descrito como el ATP y la
ectonucleotidasas presentes en la raz de la planta Arabinopsis thaliana ejercen una
fuerte regulacin sobre su crecimiento y ramificacin.
Calcio y crecimiento axonal

Hace unos aos, se report por primera vez la influencia que el calcio ejerca en los
proceso de elongacin y ramificacin axonal. As se observ que los incrementos de
calcio espontneos (por lo tanto, producidos por agentes desconocidos) que se producen
en el cono de crecimiento estn inversamente relacionados con la capacidad que tiene el
axn de migrar y crecer. Al analizar en profundidad este fenmeno, se determin que
nicamente los incrementos de calcio de baja frecuencia son capaces de inducir la
parada del crecimiento y arborizacin axnica. No debemos olvidar que el efecto
Universitaria Fernanda Cassia Paludo

primario que inducen los nucletidos de adenina, al activar sus receptores P2X, es
incrementar el calcio intracelular en un punto muy concreto de la neurona. De tal
manera, que si estos receptores estuvieran presentes en los conos de crecimiento seran
unos excelentes candidatos para ser los agentes causantes de desencadenar los
incrementos de calcio espontneos antes descritos. Si bien existe poca literatura al
respecto, no debemos olvidar que los conos de crecimiento son las estructuras
primigenias que constituirn el componente presinptico de los contactos sinpticos que
se establezcan en los circuitos
neurales del cerebro en un animal adulto. Es precisamente en esta localizacin
donde se ha descrito ampliamente la presencia de los receptores de nucletidos y
establecido que su activacin no solo induce la entrada de calcio a la terminal nerviosa,
sino que tambin, inducen la liberacin de los neurotransmisores almacenados en las
vesculas sinpticas. De todas las subunidades P2X encontradas a nivel presinptico, la
que presenta una mayor abundancia en el SNC es la subunidad P2X7.

Los receptores P2X y su funcin en la regulacin del crecimiento axonal

Llegados a este punto, la principal pregunta que queda por esclarecer es si los
receptores P2X regulan el crecimiento axonal. Para contestarla, el primer punto que
debamos establecer es la presencia de receptores ionotrpicos funcionales de ATP en
los conos de crecimiento. Gracias a la utilizacin de un sistema de videoimagen que nos

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

permite registrar pequeas variaciones en la concentracin de calcio intracelular en

puntos muy concretos de la neurona, observamos que la estimulacin de las neuronas de
hipocampo en cultivo con pulsos de ATP, produca una entrada de calcio en el cono de
crecimiento. Adems, pudimos constatar que la onda de calcio generada se quedaba
restringida a la zona ms distal del axn, sin llegar a afectar ni siquiera a la zona del
segmento inicial del axn (Figura 5). Tambin constatamos como la activacin de los
receptores P2X presentes en el cono de crecimiento provocan una disminucin de la
elongacin del axn (Figura 11). Estas observaciones no solo identifican al ATP como
uno de los agentes causantes de los incrementos de calcio espontneos registrados en los
conos de crecimiento de las neuronas en cultivo, sino que adems, constituyen las
primeras evidencias funcionales que demuestran que los receptores P2X ejercen un
control negativo de la elongacin axonal.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 8: El ATP induce corrientes de calcio en el cono de crecimiento de neuronas

de hipocampo en cultivo a travs de receptores P2X: A, Imagen de fluorescencia de una
neurona hippocampal en cultivo cargada con la sonda fluorescente fura-2. Adems se
muestran las diferentes reas analizadas tanto a lo largo del axn (regiones 2 y 3)
como en el compartimiento somato-dendrtico (regin 1). Las grficas representan el
ratio de los cambios temporales en las longitudes de onda emitidas por el fura-2 al ser
este excitado a 340 (F340) o a 380 (F380) nm. La neurona fue estimulada con un pulso
de ATP 1mM en el punto b, y con otro de KCl 60 mM en el punto d. Los paneles que se
muestran en la derecha se corresponden con las imgenes de fura registradas para la
neurona analiza en los puntos temporales indicados como a al d, que se muestran en
las grficas de la izquierda. Los tiempos de estimulacin se representan con lneas

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

slidas y corresponden a 50 segundos. B, Neuronas hipocampales en su tercer da de

cultivo en presencia o ausencia de ATP 1 mM. Las neuronas fueron teidas con
anticuerpos frente a la tubulina (verde) y con la actina (rojo). Escala (50

m).

Papel del receptor P2X7 en la regulacin del crecimiento axonal

El siguiente paso a analizar era determinar que tipo de receptores P2X estaban
involucrados en el control de la elongacin del axn. Para contestar esta pregunta, se
opt por realizar un estudio farmacolgico, empleando diferentes antagonistas de los
receptores P2X. Mediante este abordaje experimental no solo conoceramos la
naturaleza del receptor, sino que tambin determinaramos si el bloqueo de estos
receptores induce la elongacin del axn. De todos los antagonistas utilizados,
solamente aquellos que inhiben al receptor P2X7, como son el BBG, el KN62 y el A438079 indujeron una elongacin y ramificacin del axn mayor a la observada en las
neuronas no tratadas (Figura 6). Confirmamos de la participacin del receptor P2X7
mediante el empleo de tcnicas de biologa molecular, gracias a las cuales pudimos
observar la evolucin del crecimiento y ramificacin axonal en neuronas que carecan o
sobre-expresaban el receptor P2X7. Como se observa en la Figura 6, la supresin del
receptor P2X7 indujo una elongacin y ramificacin axonal similar a la obtenida
mediante los tratamientos farmacolgicos en los que se emplearon antagonistas

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

selectivos del receptor P2X7. Por el contrario, la sobre-expresin de dicho receptor

indujo una disminucin en la longitud y nmero de ramificaciones del axn, el mismo
efecto observado al activar el receptor P2X7 con ATP (Figura 9).

Figura 9: El receptor P2X7 regula el crecimiento y arborizacin axonal. A, Se

muestran neuronas de hipocampo en su tercer da de cultivo tratadas en presencia de
diferentes antagonistas de los receptores P2X; BBG (5

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

M), PPADS (50

M) e Ip5I (1

M). Las neuronas fueron teidas con anticuerpos frente a la tubulina para observar
su morfologa. Escala (100

m). B, Se muestran neuronas hipocampales en cultivo

transfectadas con GFP, un RNA de interferencia del receptor P2X7 (shRNA-P2X7)

fusionado a GFP (P2X7-GFP). Escala (50

m).

Una vez determinada la participacin del receptor P2X7 en el crecimiento y

ramificacin axonal solo quedaba determinar el mecanismo molecular por el cual dicho
receptor regula negativamente la elongacin y ramificacin axonal. Al analizar en
detalle la morfologa que presentaban los conos de crecimiento despus de activar o
inhibir el receptor P2X7 observamos que si bien la activacin del receptor promova un
colapso de los mismos, su inhibicin induca
el efecto opuesto (Figura 10). Este hecho correlacion con una activacin la protena
FAK (quinasa de los puntos focales de adhesin) mediada por la inhibicin de la
protena quinasa dependiente de calcio CaMKII. No debemos olvidar que uno de las
protenas dianas del receptor P2X7 es la CaMKII, de tal manera que se ha descrito como
la activacin de P2X7 induce una fuerte y rpida activacin de la quinasa dependiente
de calcio CaMKII. Como se ha mencionado anteriormente, una de las quinasa claves en
los procesos de elongacin y arborizacin del axn, es GSK3. As, se ha descrito que la
inhibicin sostenida de GSK3 es capaz de inducir una mayor elongacin y arborizacin
axonal, una vez que el axn ya esta formado. Como cabra esperar, cuando se analiz el
estado de activacin de la GSK3 despus de inducir una inhibicin sostenida del
receptor P2X7, se observ una clara disminucin en la actividad de la quinasa GSK3.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Esta disminucin de la actividad de GSK3 no solo correlaciona con la elongacin y

arborizacin axonal inducidas por la inhibicin del receptor P2X7, sino que ambos
fenmenos comparten una secuencia temporal. As, sabemos que la inhibicin del
receptor P2X7 desencadena una activacin de la quinasa FAK. Dado que un sustrato de
FAK es la PI3-quinasa.
Esta secuencia de acontecimientos la pudimos constatar en nuestro modelo de
neuronas de hipocampo, al observar como la arborizacin y elongacin axonal inducida
por el BBG eran revertidas en presencia de un inhibidor de la PI3-quinasa (LY-294002)
(Figura 10). Como se ha mencionado con anterioridad, la activacin de PI3-quinasa
desencadena la fosforilacin e inhibicin de GSK3, de tal manera que el receptor P2X7
desencadena finalmente una regulacin de la actividad de la quinasa GSK3. El hecho de
que la inhibicin de GSK3 promueve el crecimiento y arborizacin axonal en axones
lesionados in vivo, abre nuevas perspectiva teraputica para la utilizacin de inhibidores
del receptor P2X7 en lesiones medulares.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

Figura 10: La inhibicin del receptor P2X7 modifica la morfologa del cono de
crecimiento de las neuronas de hipocampo mediante la inhibicin de la PI3- quinasa.
A, Se muestran la morfologa de los conos de crecimiento de las neuronas de
hipocampo tratadas durante 3 das en presencia o ausenta del antagonista del receptor
purinrgico P2X7 BBG (5 M). Mientras los conos de las neuronas control mostraron
una morfologa mixta de lamedipodio y filopodio, los conos tratados con BBG solo
presentan una morfologa de lamedipodio. Escala (10

m). B, Se muestran neuronas de

hipocampo en su tercer da de cultivo tratadas en presencia y ausencia de BBG (5

y/ del inhibidor de PI3-quinasa LY-294002 (50

M). El BBG y el inhibidor de la IP3-

quinasa fueron aadidos despus del primer da de cultivo. Escala (50

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

M)

m).

MECANISMOS CELULARES Y MOLECULARES QUE REGULAN LA

LOCALIZACIN POLARIZADA DE PROTENAS AXONALES

Simultneamente a la estructuracin morfolgica del axn, en la membrana axonal

se van localizando protenas (canales inicos, receptores o protenas de adhesin) que
guan el axn, regulan su crecimiento y permiten la generacin de potenciales de accin.
Como se ha indicado con anterioridad, esta localizacin polarizada de diferentes
protenas en el axn, depende del citoesqueleto de actina y microtbulos, as como de
las protenas de transporte (kinesinas, dineinas o miosinas). En los ltimos 10 aos el
estudio de las secuencias aminocidicas de protenas axonales ha permitido demostrar
que existen diversos motivos de aminocidos capaces de localizar protenas
especficamente en el axn. Se ha propuesto que algunas de estas protenas pueden ser
transportadas directamente hacia el axn, como es el caso de NgCAM. Sin embargo, la
distribucin especficamente axonal de muchas de las protenas estudiadas depende de
su eliminacin, mediante endocitosis, de la membrana somatodendrtica. Este es el caso
del canal de sodio neuronal dependiente de voltaje o de la protena VAMP-2. Una vez
transportadas hacia el axn, estas protenas deben anclarse en un dominio especfico
para cumplir su funcin. Si bien en el dominio somatodendrtico, las protenas con
dominios PDZ, tales como la PSD-95, cumplen la funcin de anclaje de protenas
funcionales de membrana; en el caso del axn y del segmento inicial del axn, esta
funcin est representada por la ankirina B y ankirina G. Protenas que actan como

Universitaria Fernanda Cassia Paludo

adaptadores entre las protenas de membrana y el citoesqueleto de actina y

microtbulos. La protena de adhesin L1 contiene una secuencia de aminocidos
(FIGQY) que la permite unirse a las ankirinas y estabilizarse en la membrana axonal.
Dicho anclaje est regulado por mecanismos de fosforilacin y una secuencia de
aminocidos (RSLE) que permite su endocitosis. Otro ejemplo son los canales de sodio
y potasio dependientes de voltaje, Nav1.2, Nav1.6 o KCNQ2/3, que se unen a la
ankirina G a travs del motivo AIS descrito en los canales de sodio. Recientemente, se
ha descrito que una protena de densidades postsinpticas, PSD-93, es capaz de anclar
canales de potasio y localizarlos en el axn. Durante los ltimos 10 aos se han descrito
motivos aminoacdicos que regulan la localizacin y anclaje de protenas en el axn, lo
que ha permitido entender las bases estructurales que permiten desarrollar la funcin del
axn en la transmisin de seales.

CONCLUSIN

La complejidad funcional del sistema nervioso tiene como unidad bsica funcional a
la neurona, junto con otras clulas que le sirven de apoyo y con las que intercambia
informacin. A pesar de que ya hace alrededor de un siglo que Santiago Ramn y Cajal
propuso la teora neuronal, solamente durante los ltimos 25 aos hemos sido capaces
de obtener bastante, pero an no suficiente, informacin sobre cmo se forma una
neurona y que mecanismos intracelulares permiten crear la arquitectura morfolgica y
funcional de las neuronas. Sabemos cmo se inicia un axn, cmo se forma el
Universitaria Fernanda Cassia Paludo

citoesqueleto

neuronal

y cules son

las

causas de

algunas

enfermedades

neurodegenerativas. Para su tratamiento, as como el tratamiento de lesiones axonales,

debemos conocer los factores, receptores y vas de sealizacin que regulan el
crecimiento axonal, as como los mecanismos que regulan su posicin y que son
responsables de que un receptor cumpla su funcin en un momento concreto y en una
localizacin especfica de la neurona. De esta forma, podremos encontrar dianas
farmacolgicas adaptadas que permitan regular vas de sealizacin en dominios
especficos de las neuronas. Por ltimo, un mayor conocimiento de los mecanismos que
regulan el crecimiento axonal tambin ser til en un futuro para intentar regenerar
axones lesionados, junto con otras estrategias centradas en las clulas de gla.

Universitaria Fernanda Cassia Paludo