Introduccin

Eduard Buchner

Al igual que las disciplinas experimentales que han surgido como rama comn
que es la biologa, tiene una historia propia construida a travs de
observaciones, experiencias, pruebas y teoras. Se inici con el estudio de los
procesos de fermentacin y de putrefaccin y Antoine-Laurent Lavoiser (17431794) fue el primero en plantear sobre bases cuantitativas el proceso de la
fermentacin alcohlica al observar una relacin entre cantidad de azcar
presente y productos formados durante el proceso. Sostuvo que la
fermentacin poda ser considerada como una reaccin qumica cualquiera. No
obstante Pasteur demostr pronto que los procesos de putrefaccin y
fermentacin eran provocados por la presencia de bacterias y levadura

Enzimas
Las enzimas

La Enzima Como Unidad Fundamental De Vida

Cada clula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que comporta continuos
cambios en su estado bioqumico, en la base de la cual estn las enzimas, que
tienen el poder de catalizar, facilitar, y agilizar determinados procesos sintticos
y analticos. Los propios genes son reguladores de la produccin de las
enzimas; por tanto, genes y enzimas pueden considerados como las unidades
fundamentales de la vida.
Este concepto poco difundido casi hasta el siglo XX, se ha desarrollado y
concretado cada vez mas, y constituye un componente esencial de diversas
disciplinas: la microbiologa, la fisiologa, la bioqumica, la inmunologa y la
taxonoma, formando adems parte del campo aplicado, en gran variedad de
industrias. El rasgo particular de las enzimas es que pueden catalizar procesos
qumicos a baja temperatura, compatible con la propia vida, sin el empleo de
sustancias lesivas para los tejidos. La vida es, en sntesis, una cadena de
procesos enzimticos, desde aquellos que tienen por sustratos los materiales
mas simples, como el agua (H2O) y el anhdrido carbnico (CO2), presentes en
los vegetales para la formacin de hidratos de carbono, hasta los mas
complicados que utilizan sustratos muy complejos.
La formacin de los prtidos, los glcidos y los lpidos es un ejemplo tpico: Son
a la vez degradados y reconstruidos por otras reacciones enzimticas,
produciendo energa a una velocidad adecuada para el organismo, sin el gasto
energtico que exigen los mtodos qumicos de laboratorio.

Importancia
Sin enzimas, no sera posible la vida que conocemos. Igual que la biocatlisis
que regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiolgicos, las
enzimas llevan a cabo funciones definitivos relacionadas con salud y la
enfermedad. En tanto que, en la salud todos los procesos fisiolgicos ocurren
de una manera ordenada y se conserva la homeostasis, durante los estados
patolgicos, esta ltima puede ser perturbada de manera profunda. Por
ejemplo, el dao tisular grave que caracteriza a la cirrosis heptica pueden
deteriorar de manera notable la propiedad de las clulas para producir enzimas
que catalizan procesos metablicos claves como la sntesis de urea. La
incapacidad celular para convertir el amoniaco txico a urea no txica es
seguida por intoxicacin con amoniaco y por ultimo coma heptico. Un conjunto
de enfermedades genticas raras, pero con frecuencia debilitantes y a menudo
mortales, proporciona otros ejemplos dramticos de las drsticas
consecuencias fisiolgicas que pueden seguir al deterioro de la actividad
enzimtica, inclusive de una sola enzima.
Despus del dao tisular grave (por ejemplo, infarto del miocardio o pulmonar,
trituracin de un miembro) o siguiendo a multiplicacin celular descontrolada
(por ejemplo, carcionoma prostatico), las enzimas propias de tejidos
especficos pasan a la sangre. Por lo tanto, la determinacion de estas enzimas
intracelulares en el suero sanguineo proporciona a los medicos informacion
valiosa para el diagnostico y el pronostico.

Caractersticas
Desde el punto de vista qumico, las enzimas estn formadas de carbono (C),
Hidrgeno (H), oxigeno (O), Nitrgeno (Ni), y Azufre (S) combinados, pero
siempre con peso molecular bastante elevado y comn propiedades catlicas
especificas. Su importancia es tal que puede considerarse la vida como un
"orden sistemtico de enzimas funcionales". Cuando este orden y su sistema
funcional son alterados de algn modo, cada organismo sufre mas o menos
gravemente y el trastorno puede ser motivado tanto por la falta de accin como
por un exceso de actividad de enzima.
Las enzimas son catalizadores de naturaleza protenica que regulan la
velocidad a la cual se realizan los procesos fisiologicos, producidos por los
organismos vivos. En consecuencia, las deficiencias en la funcion enzimatica
causan patologias.
Las enzimas, en los sistemas biolgicos constituyen las bases de las complejas
y variadas reacciones que caracterizan los fenmenos vitales. La fijacin de la
energa solar y la sntesis de sustancias alimenticias llevadas a cabo por los
vegetales dependen de las enzimas presentes en las plantas. Los animales, a
su vez, estn dotados de las enzimas que les permiten aprovechar los
alimentos con fines energticos o estructurales; las funciones del metabolismo
interno y de la vida de relacin, como la locomocin, la excitabilidad, la

irritabilidad, la divisin celular, la reproduccin, etc. Estn regidas por la

actividad de innumerables enzimas responsables de que las reacciones se
lleven a cabo en condiciones favorables para el individuo, sin liberaciones
bruscas de energa a temperaturas fijas en un medio de pH, concentracin
salina, etc.; prcticamente constante.
A diferencia de un catalizador inorgnico que interviene en numerosas
reacciones las enzimas producidas por los organismos vivos habitualmente
solo catalizan un tipo de reaccin o solo una reaccin determinada; la
especificidad de las enzimas es tan marcadas que en general actan
exclusivamente sobre sustancias que tienen una configuracin precisa; por
ejemplo, si solo atacan a los aminocidos que tienen su carbono ,
asimtrico, con estructura L-, no muestran la menor actividad sobre formas
idnticas de dichos aminocidos, pero que sean del tipo D-.
En los sistemas biolgicos se llevan a cabo diversas reacciones a partir de la
misma sustancia; por ejemplo algunos microorganismos convierten la glucosa
en alcohol y bixido de carbono, al paso que otros grmenes la convierten en
cido lctico o cido pirvico o acetaldehido. Esto quiere decir que la glucosa
puede descomponerse en distintos productos y aunque todas las posibilidades
son tericas y prcticamente posibles la presencia de ciertas enzimas favorece
uno de los caminos que llevan a la acumulacin de determinados compuestos.
Las enzimas, por lo tanto, se consideran como catalizadores altamente
especficos que:

Modifican la velocidad de los cambios promovidos por ellas.

Determinan que sustancias particulares, de preferencia a otras distintas
son las que van a sufrir los cambios.
Impulsan dentro de los distintos cambios posibles que pueda seguir una
sustancia, cual de ellos en especial, ser el utilizado.

Las enzimas representan las sustancias encargadas de graduar la velocidad de

una reaccin determinada en el interior de las clulas; como en las diversas
clulas se realizan infinidad de reacciones, ya que en una de ellas se
encuentran varios miles de sustancias, se deduce, tambin, la presencia de
varios miles de enzimas. Es posible, por lo tanto, que la mayor parte de esta
estructura protenica celular est formada por enzimas, encargadas de las
diversas funciones de sntesis, degradacin, oxidacin, etc. caractersticas de
la actividad vital de los distintos organismos.

Estructura
Por su estructura y composicin qumica puede afirmarse que el origen de las
enzimas esta vinculando al origen de las sustancias proteicas. Al hablar del
origen de la vida se ha citado el xito de los experimentos realizados en el
laboratorio para la produccin de aminocidos; estos aminocidos son los que
precisamente constituyen la base del edificio proteico. Tambin en el
laboratorio se ha intentado la sntesis de protenas a partir de aminocidos.
La sede de las enzimas es el citoplasma. Los cloroplastos vegetales contienen
una amplia gama enzimas encargadas de la funcin cloroflica, proceso que a
travs de reacciones qumicas complejas y encadenadas transforman
compuestos inorgnicos, como el agua, y el anhdrido carbnico, en sustancias
complejas adecuadas para ser entre otras cosas el alimento fundamental de los
animales.
En las mitocondrias existe un sistema de transporte de electrones que
determinan importantes fenmenos de oxidorreduccin, durante los cuales se
forman notables cantidades de ATP, que es un compuesto altamente energtico
del que depende la mayor parte de metabolismo, y coma, por tanto el trabajo
de las clulas; en las mitocondrias se produce el metabolismo enzimtico de
los cidos grasos, los cuales son en parte elaborados tambin en el citoplasma.
En los ribosomas tiene lugar concretamente todas la s sntesis de las
sustancias proteicas, mientras que en los lisosomas se producen enzimas
hidrolticos cuya misin escindir, con la intervencin del agua, molculas
grandes en otras menores, que pueden a su vez ser utilizadas por las clulas;
en cambio, las enzimas glucolticos estn difundidos en el citoplasma.
La localizacin de las sedes de las distintas operaciones enzimticas antes
mencionadas ha sido posible a travs del sistema de ruptura de las clulas y de
la separacin de los distintos componentes mediante centrifugacin diferencial
del homogeneizado de estas la ruptura celular y la subdivisin de los
componentes subcelulares se realizan actualmente utilizando los tejidos, por
ejemplo con saltos bruscos desde temperaturas inferiores a 0 C hasta
temperaturas mas elevadas con cambios de presin osmtica o mediante
ultrasonidos.

Naturaleza qumica
Existen numerosas razones para afirmar que las enzimas son proteinas. La
ms importantes son las siguientes:
a.
b.

c.

d.
e.

El anlisis de las enzimas obtenidas en forma ms pura, criatalizada,

demuestra que son protenas.
Las enzimas son inactivadas a altas temperaturas y, en geeral, la
cintica de la desnaturalizacin trmica de las enzimas da resultados muy
parecidos a los de la desnaturalizacin trmica de las protenas; por
ejemplo el Q10 de la mayora de las reacciones qumicas es de 2 a 3, y, en
el casod e las enzimas, a temperaturas elevadas, alrededor de 60 a 70
C, la actividad neta aumeta varios cientos, como sucede con la velocidad
de la desnaturalizacin trmica de las protenas.
Las enzimas son activadas en unas zona muy restringida de pH, y
presenta un punto ptimo de ph donde su actividad es mayor. Las
protenas en su punto isoelctrico, muestran propiedades parecidas desde
el punto de vista de viscosidad, solubilidad, difucin, etc., que resulta del
todo similares a las propiedades de este tipo que muestran las enzimas.
Todos los agentes que desnaturalizan a las protenas tambin destruyen
o inactivan a las enzimas, ya sea el calor, los cidos fuertes, o los metales
pesados que puedesn combinarse con ellas.
Los problemas de solubilidad y de precipitacin son comunes a las
protenas y las enzimas; en general, son solubles en agua o soluciones
salinas, insolubles en alcohol, precipitan con determinadas
concentraciones de sales neutras, etc.

Composicin qumica de las enzimas

Los conocimientos sobre la composicin qumica de las enzimas constituyeron
materia de numerosas controversias hasta 1926, cuando J.B Sumner (18871955) consigui cristalizar la ureasa, enzima que transforma la urea en
anhdrido carbonico y amoniaco, y demostrar que era una sustancia proteica.
A, partir de entonces fueron aisladas otras enzimas en forma pura, cristalina, y
el anlisis demostraba siempre la presencia de una proteina, simple o
conjugada. Cuando los analisi qumicos demuestran que la enzima es una
protena conjugada, pueden distinguirse en el dos partes bien diferenciadas:

El grupo prosteico (Coenzima)

La proteina (Apoenzima)

En algunas enzimas oxidantes fue observada la presencia de la

promoporteinas, en las cuales el grupo prosptico esta representado por un
compuesto que contiene Fe y otro elemento, el cual desmpea un papel
importante en la combinacin de la proteina con el sustrato; otras veces este
grupo prosttico es derivada de vitaminas (como la vitamina B); 4en muchos

casos resulta facil de separar de la molcula proteica. No obstante una vez

separadas, las dos unidades no muestran actividad enzimtico; por tanto el
grupo proteico (coenzima) y el grupo proteico (apoenzima) han de estar
ntimamente ligados entre si para ser operativos. Por consiguiente, de las
enzimas pueden distinguirse los formados por:

Solo protenas, que difieren entre si por la secuencia con que los
aminocidos estn combinados, como la ureasa y las enzimas digestivas (la
pepsina y la tripsina)
Los conjugados, separados en dos entidades qumicas bien definidas: la
coenzima y la apoenzima.

Despus del descubrimiento de Sumner, el numero de la enzimas y el estudio

de sus actividades qumicas proporcionaron un notable impulso en la
enzimologa, y la gran cantidad de las enzimas que rpidamente se
acumulaban determinaron la necesidad de utilizar una clasificacin o
nomenclatura para evitar errores y facilitar la comprensin de futuros
investigadores.

Nomenclatura y clasificacion
Cien aos atrs solo se conocian enzimas, muchas de estas, catalizaban la
hidrlisis de enlaces covalentes. Algunas enzimas, de manera especial las que
fueron descubiertas en un principio, recibieron nombres ligados mas bien a su
sitio de procedencia anatmica que no siguen ninguna regla ni sistema; tal es
el caso de la ptialina de la saliva, que ataca al almidn de la pepsina del
estmago y de la tripsina del pncreas, que atacan protenas; de la renina, que
cuagula la leche; de la papaina, enzima proteoltica que se encuentra en la
papaya y de las catepsinas, tambin proteasas, que se encuentran en las
clulas. Las enzimas relacionadas con la cuagulacin de la sangre, como son
la trombina, la plasmina, el plasmingeno, etc. reciben tambin nombres
sistematizados.
Al descrubir nuevas enzimas y proceder a su caracterizacin estricta se
aplicaron reglas de nomenclatura basadas en el nombre del sustrato atacado, o
en el tipo general de sustrato, o en la reaccin catalizada y se ha aadido
convencionalmente, la terminacin -asa. Por ejemplo: las lipasas (hidrolizan
lipidos o grasas), las amilasas (hidrolizan almidon), las proteasas (hidrolizan
proteinas), las esterasas (basado en la unin general de tipo ster presentes en
muchas sustancias), colesterol estrerasa (si la esterasa es especfica de los
esteres de colesterol) y acetilcolina esterasa (si la estersa de la acetilcolina).
Otros ejemplos: Las fosfatasas son enzimas que atacan las uniones ster, pero
en este caso, toman su nombre del grupo vecino a la unin que van a atacar,
de manera que se denominan fosfatasas (cuando quitan una molcula de
monofosfato), pirofosfatasas (cuando quitan el cido fosfrico como esteres
dobles (pirofosfatos), o triples, etc.) De la misma manera, las carbohidrasas se
denominan as genericamente, pero pueden comprender enzimas con nombres
proveniente del sustrato particular sobre el que actuan como la amilasa que
ataca al almidn y la celulasa que acta sobre la celulosa y, en otras

ocaciones, se denominan de acuerdo con la unin atacada, como la

-glucosidasa que acta sobre las uniones -glucosdicas. Los ejemplos se
pueden extender a todos los terrenos de la actividad enzimtica, como en las
enzimas proteolticas, las fosforilasas, las nucleasas, etc.
Esta manera de llamarlas, se demostro que era inadecuada porque al
descubrirse varias enzimas, notaron que varias enzimas catalizaban reacciones
diferentes del mismo sustrato, por ejemplo, oxidacion o reduccion de la funcion
alcohol de un azucar.
Aunque el sufijo asa continua en uso; actualmente, al nombrar a las enzimas,
se enfatiza el tipo de reaccion catalizada. Por ejemplo: las hidrogenasas
catalizan la eliminacion de hidrogeno y las transferasas, reacciones de
transferencia de grupo. Con el descubrimiento de mas y mas enzimas,
surgieron ambiguedades y con frecuencia no estaba claro cual era la enzima
que un investigador deseaba estudiar. Para remediar esta deficiencia, la
Comisin para el estudio de las enzimas, que constituye con respecto a los
sistemas anteriores un punto de vista ms uniforme, preciso y descriptivo; esta
formada por la Union Internacional de Bioquimica (IUB) adopto, en 1964, un
sistema complejo pero inequivoco de la nomenglatura enzimatica basado en el
mecanismo de reaccion.
El sistema se basa en la reaccin qumica catalizada que es la propiedad
especfica que caracteriza a cada enzima las cuales se agrupan en clases,
porque catalizan procesos semejantes, y en subclases que especifican con
mayor exactitud la reaccin particular considerada. En general, las enzimas
reciben un nombre de acuerdo con el sustrato o los sustratos que participan en
la reaccin seguido por el tipo de reaccin catalizada y, por fin, la terminacin
-asa. A menudo los nombres as obtenidos resultan largos y complejos, por lo
que es muy dificil que en la prctica se pueda excluir el uso de los nombres
triviales, consagrados por la costumbre. Sin embargo, con fines de
sistematizacin, se reconoce la necesidad de aceptar el nuevo sistema.
Aunque su claridad y carencia de ambigedad recomiendan al sistema de
nomenglatura IUB para trabajos de investigacion, nombres mas ambiguos, pero
basante mas cortos persisten en libros de texto y en el laboratorio clinico. Por
esta razon, a continuacion solo se presenta principios generales del sistema
IUB:
1.

Las reacciones y las enzimas que las catalizan se dividen en 6 clases

principales, cada una con 4 a 13 subclases.
2. El nombre de la enzima tiene 2 partes: la primera es el nombre del o los
sustratos; la segunda, con terminacion asa, indica el tipo de reaccion
catalizada.
3. Informacion adicional, si es necesario aclarar la reaccion, puede seguir
el parentesis. Por ejemplo: la enzima que cataliza L-malato + NAD = =
piruvato + CO2 NADH + H= , se denomina como 1.1.1.37 L-malato:NAD +
oxidorreductasa (descarboxilante).
4. Cada enzima tiene un numero clave (E.C.) que caracteriza al tipo de
reaccion segn la clase (primer digito), subclase (segundo digito) y
subclase (tercer digito). El cuarto digito es para la enzima especifica. Asi,
E.C. 2.7.1.1 denota la clase 2 (una transferasa), subclase 7 (transferencia
de fosfato), sub-clase 1 (una funcion alcohol como aceptor de fosfato). El

ultimo digito denota a la enzima hexocinasa o ATP: D-hexosa-6fosforotransferasa, enzima que cataliza la transferencia de fosfato desde
el ATP al grupo hidroxilo de carbono 6 de la glucosa.
Al final de sus y trabajos, clasifico las enzimas en seis grupos principales,
correspondientes por sus trminos a las raciones que cada enzima ejerce
sobre el sustrato. Estos grupos se subdividen en otro, segn el tipo de sustrato
y los tomos concretos que son sensibles a sus acciones. Estos seis grupos
son los siguientes:
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Oxidoreductasas
Transferasas
Hidrolasas
Isomerasa
Liasas
Ligasas

1.Oxido-reductasas: Son las enzimas relacionadas con las oxidaciones y las

reducciones biolgicas que intervienen de modo fundamental en los procesos
de respiracin y fermentacin. Las oxidoreductasas son importantes a nivel de
algunas cadenas metablicas, como la escisin enzimtica de la glucosa,
fabricando tambin el ATP, verdadero almacn de energa. Extrayendo dos
tomos de hidrgeno, catalizan las oxidaciones de muchas molculas
orgnicas presentes en el protoplasma; los tomos de hidrgeno tomados del
sustrato son cedidos a algn captor.
En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales:
Deshidrogenasas y oxidasas. Son ms de un centenar de enzimas en cuyos
sistemas actan como donadores, alcoholes, oxcidos aldehidos, cetonas,
aminocidos, DPNH2, TPNH2, y muchos otros compuestos y, como receptores,
las propias coenzimas DPN y TPN, citocromos, O2, etc.

2.Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de

la molcula (dadora) a otra (aceptora). Su clasificacin se basa en la naturaleza
qumica del sustrato atacado y en la del aceptor. Tambin este grupo de
enzimas actan sobre los sustratos mas diversos, transfiriendo grupos metilo,
aldehdo, glucosilo, amina, sulfat, sulfrico, etc.
3.Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actan normalmente sobre las
grandes molculas del protoplasma, como son la de glicgeno, las grasas y las

protenas. La accin cataltica se expresa en la escisin de los enlaces entre

tomos de carbono y nitrgeno (C-Ni) o carbono oxigeno (C-O);
Simultneamente se obtiene la hidrlisis (reaccin de un compuesto con el
agua)de una molcula de agua. El hidrgeno y el oxidrilo resultantes de la
hidrlisis se unen respectivamente a las dos molculas obtenidas por la ruptura
de los mencionados enlaces. La clasificacin de estas enzimas se realiza en
funcin del tipo de enlace qumico sobre el que actan.
A este grupo pertenecen protenas muy conocidas: la pepsina, presente en el
jugo gstrico, y la tripsina y la quimiotripsina, segregada por el pncreas.
Desempean un papel esencial en los procesos digestivos, puesto que
hidrolizan enlaces ppticos, estricos y glucosdicos.

4.Las isomerasas:Transforman ciertas sustancias en otras ismeras, es decir,

de idntica formula emprica pero con distinto desarrollo. Son las enzimas que
catalizan diversos tipos de isomerizacin, sea ptica, geomtrica, funcional, de
posicin, etc. Se dividen en varias subclases.
Las racemasas y las epimerasas actan en la racemizacin de los aminocidos
y en la epimerizacin de los azcares. Las primeras son en realidad pares de
enzimas especficas para los dos ismeros y que producen un solo producto
comn. Las isomerasas cis trans modifican la configuracin geomtrica a
nivel de un doble ligadura. Las xido reductasas intramoleculares cetalizan la
interconversin de aldosas y cetosas, oxidando un grupo CHOH y reduciendo
al mismo tiempo al C = O vecino, como en el caso de la triosa fosfato
isomerasa, presente en el proceso de la gluclisis ; en otros casos cambian de
lugar dobles ligaduras, como en la (tabla) isopentenil fosfato isomerasa,
indispensable en el cambio biosintico del escualeno y el colesterol. Por fin las
transferasas intramoleculares (o mutasas) pueden facilitar el traspaso de
grupos acilo, o fosforilo de una parte a otra de la molcula, como la lisolecitina
acil mutasa que transforma la 2 lisolecitina en 3 lisolecitina, etc. Algunas
isomerasa actan realizando inversiones muy complejas, como transformar
compuestos aldehdos en compuestos cetona, o viceversa. Estas ultimas
desarrollan una oxidorreduccin dentro de la propia molcula (oxido rreductasa
intramoleculares)sobre la que actan, quitando hidrgeno, a algunos grupos y
reduciendo otros; actan ampliamente sobre los aminocidos, los hidroxcidos,
hidratos de carbono y sus derivados.

5.Las Liasas: Estas enzimas escinden (raramente construyen) enlaces entre

tomos de carbono, o bien entre carbono y oxigeno, carbono y nitrgeno, y
carbono y azufre. Los grupos separados de las molculas que de sustrato son
casi el agua, el anhdrido carbnico, y el amoniaco. Algunas liasa actan sobre
compuestos orgnicos fosforados muy txicos, escindindolos; otros separan el
carbono de numerosos sustratos.

6.Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unin de dos

molculas, lo cual sucede simultneamente a la degradacin del ATP, que, en
rigor, libera la energa necesaria para llevar a cabo la unin de las primeras. Se
trata de un grupo de enzimas muy importantes y recin conocidas, pues antes
se pensaba que este efecto se llevaba a cabo por la accin conjunta de dos
enzimas, una fosfocinasa, para fosforilar a una sustancia A (A + ATP A - +
ADP) y una transferasa que pasara y unira esa sustancia A, con otra, B (A -
+ B A B + Pi ). A este grupo pertenecen enzimas de gran relevancia reciente,
como las aminocido ARNt ligasas conocidas habitualmente con el nombre de
sintetasas de aminocidos ARNt o enzimas activadoras de aminocidos que
representan el primer paso en el proceso biosinttico de las protenas, y que
forman uniones C-O; las cido-tiol ligasas, un ejemplo tpico de las cuales es la
acetil coenzima. A sintetasa, que forma acetil coenzima. A partir de cido
actico y coenzima
A ; las ligasas cido

amoniaco
(glutamina
sintetasa), y las
ligasas
cidoaminocido
o
sintetasas
de
pptidos,
algunos
de cuyos ejemplos
ms conocidos son
la
glutacin
sintetasa, la carnosina sintetasa, etc.

La accin de estas enzimas se manifiesta con la formacin de enlaces entre

tomos de carbono y oxigeno de diversas molculas, o bien entre carbono y
azufre, carbono y nitrgeno y carbono y carbono. Las ligasas utilizan siempre,
para el proceso de reaccin, la energa proporcionada por el ATP o compuestos
homlogos que son degradados, Por consiguiente las enzimas de esta clase
son los nicos que intervienen en reaccin no espontnea desde un punto de
vista termodinmico; Actan sobre los sustratos ms diversos y revisten
particular importancia en el metabolismo de los cidos nucleicos.
Estas reacciones enzimticas se desarrollan en dos tiempos: en el primero se
forma un complejo intermedio con potencia energtica muy alta-, en el segundo
utilizan la energa obtenida para realizar la reaccin de sntesis.

Grupo

Accion

ejemplos

1. Oxidoreductasas

Catalizan
reacciones
de Dehidrogenasas
oxidorreduccin. Tras la accin
Aminooxidasa
catlica quedan modificados en su
grado de oxidacin por lo que debe ser Deaminasas
transformados antes de volver a actuar
Catalasas
de nuevo.

2. Transferasas

Transfieren grupos activos (obtenidos Transaldolasas

de la ruptura de ciertas molculas)a
Transcetolasas
otras sustancias receptoras. Suelen
actuar
en
procesos
de Transaminasas
interconversiones de azucares, de
aminocidos, etc

3. Hidrolasas

Verifican reacciones de hidrlisis con Glucosidasas

la
consiguiente
obtencin
de
Lipasas
monmeros a partir de polmeros.
Suele ser de tipo digestivo, por lo que Peptidasas
normalmente actan en primer lugar
Esterasas
Fosfatasas

4. Isomerasas

Actan sobre determinadas molculas Isomerasas

obteniendo de ellas sus ismeros de azcar
funcin o de posicin. Suelen actuar
Epimerasas
en procesos de interconversion
Mutasas

de

5. Liasas

Realizan la degradacin o sntesis Aldolasas

(entonces se llaman sintetasas) de los
Decarboxilasas
enlaces denominados fuertes sin ir
acoplados a sustancias de alto valor
energtico.

6. Ligasas

Realizan la degradacin o sntesis de Carboxilasas

los enlaces fuertes mediante el
Peptidosintetasas
acoplamiento a sustancias ricas en
energa como los nucleosidos del ATP

Partes del sistema enzimatico

Los sistemas enzimticos en general, estn formados por la enzima
propiamente dicha (apoenzima), el sustrato o los sustratos un grupo proteico
( o coenzimas) y sustancias activadoras. La estructura formada por la
apoenzima y la coenzima se denomina boloenzima; con cierta frecuencia se
reconocen sistemas enzimaticos que no tienen grupo prosttico o activadores
reconocidos.
Apoenzima: concepto del centro activo
La apoenzima es la enzima propiamente dicha, de naturaleza proteica formada
por cadenas de polipptidos, con peso molculas elevado, no dializable y
termolbil.
Las estudiadas analticamente hasta ahora, han sido, por razones tcnicas de
peso molecular bajo, 12 a 24 000, tienen una sola cadena polipeptdica
(ribonucleasa, papaina, tripsina, pepcina, etc.) excepto uno o dos casos ( quimotripsina y aldolasa) que tienen dos.
El anlisis de los aminocidos que componen a diversas enzimas demuestran
que tienen una estructura similar a la de cualquier protena; existen, de hecho
unos cuantos casos en los que se ha determinado su secuencia completa, es
decir, el orden en el que estn dispuestos todos ellos en la cadena. El anlisis
de la estructura secundaria de la protena, osea el modo como la cadena
peptdoica se dispone a lo largo de su eje mayor y el de la estructura terciaria,
osea la forma en que la cadena se pliega y se acomoda para formar una
estructura tridimensional se conocen muy mal para todas las enzimas. Solo en
el caso de la lisozima (enzima presente en las lgrimas donde funciona como
un antisptico suave y que tiene la capacidad de atacar a los polisacridos que
forman la pared de diversas bactrias) se ha determinado la estructura
tridimensional de una enzima; para este fin se aplican las tcnicas de
cristalografa de rayos x, con una solucin de dos , lo que demostr que la
lisosima es una protena con su cadena de 129 aminocidos ampliamente
plegada y en la que se reconoce una hendidura representante del centro activo
donde se acomodan muy bien los inhibidores ciertos compuestos del tipo de
carbohidratos que nulifican su actividad enzimtica. Se ha demostrado, en

este caso, que es cierta regla general de que el modo como se ordenan y
disponen los aminocidos de termoina el arreglo espacial que permite a las
otras partes del sistema enzimtico sustratos, cofactores, iones, etc.
adaptarse, en el espacio, en forma adecuada, para que se lleve a cabo la
accin cataltica. Por lo tanto, las estructuras indispensables que permiten la
combinacin con el sustrato y que confieren propiedades enzimticas a la
molcula se denomina "centro activo". Se acepta que el centro activo no es una
parte muy grande de la enzima completa y, en ciertos sistemas estudiados por
medio de bloqueos qumicos no parece constituir una zona de ms de 20 de
dimetro. Es muy posible que el centro activo est formado por la contribucin
de grupos funcionales de aminocidos situados en distintas cadenas o en
diferentes repliegues de una cadena, asiendo aparecer a dichos grupos muy
distantes entre ellos si se considera el orden que guardan a lo largo de la
cadena polipeptdica.
Un caso muy ilustrativo sobre lo que significa la estructura del centro activo
desde el punto de vista de la composicin de los aminocidos es el de la
triptofano pirrolasa, enzima ampliamente estudiada en bacterias desde el punto
de vista de la bioqumica gentica. En ella, la modificacin de algunos
aminocidos produce perdida e la actividad enzimtica, que se recupera si
vuelve a incluirse los aminocidos en el orden original; sin embargo, se pueden
reemplazar dos de ellos por otros completamente distintos, y la enzima vuelve
a ser totalmente activa. Es posible que con estos nuevos aminocidos se
consigan tambin las condiciones de distribucin espacial de grupos
funcionales y estructuras necesarias para la actividad enzimtica.
El concepto de arreglo tridimensional adecuado de los aminocidos que forman
la cadena polipeptdica de la enzima para lograr la actividad funcional correcta
permite entender numerosos denmenos: la necesidad de que la molcula
proteica ntegra est preservada en su forma; el hecho de que la
desnaturalizacin de la enzima al permitir la separacin de los pliegues,
conduce a la perdida de la actividad enzimtica; que al calentar una enzima
con su sustrato (por ejemplo, la invertasa con sacaroza, la transaminasa con
cido -cetoglutrico), se impide una desnaturalizacin que sin ellos se
producira, pues es posible que el propio sustrato contribuya a sostener y
reforzar la aproximacin de los pliegues de la cadena, etc.
Tambin se entiende por que al atacar la ribonucleasa con pepsina y romper
una sola unin peptdica que separa un tetrapptido del extremo con grupo
carboxilo libre se pierde la actividad, mientras que si solo se quita los tres
ltimos disminuye su accin sugiriendo as la importancia del residuo de cido
asprtico para sostener el centro activo en condiciones de eficiencia, o lo que
es ms probable, para formar parte del propio centro activo. Si se parte la
ribonucleasa entre los aminocidos 20 y 21, y se separan los dos fragmentos,
ninguno es activo, pero basta mezclarlos para que se unan en tal forma que se
restablece la actividad, aunque un poco menor que la originalmente observada.
El estudio detallado de la estructura del centro activo se hace por medio de
inhibidores o de reactivos que se combinan de modo especfico, con algunos
de los aminocidos del centro activo tales como el diisopropilfluorofosfato
(DFP), que se combina con el OH del aminocido serina, en diversas
esterasas, peptidasas, etc. , e inactiva el centro activo del que forman parte

dicho aminocido; este inhibidor, an a concentraciones de 10 -10 M, inhibe a la

acetilcolinesterasa; mucho de los derivados del DFP se utilizan como gases de
guerra o como insecticidas (parathion), y su utilidad se debe, en rigor a su
capacidad para destruir funcionalmente ciertas enzimas.
La unin del DFP al aminocido cedina es muy estrecha y a permitido el
anlisis de los aminocidos vecinos a l, haciendo un estudio de su
ordenamiento en el centro activo. La secuencia de los centros activos de
diversas enzimas hidrolticas sensibles al DFP, se demuestran que la mayora
tienen cerina y a dems un aminocido dicarboxlico (asprtico o glutmico) y
en el otro un aminocido neutro (alanina o glicina). Tambin se ha demostrado
que la histidina, cuando menos para el caso de la quimotripsina, forma parte
del centro activo an cuando el anlisis de la secuencia no demuestra que
exista cerca de la cerina ninguna histidina; se trata, por lo tanto, de otro
ejemplo de una aminocido, alejado e otro, y en distinto pliegue de la cadena,
que integra el centro activo.
Teniendo en cuenta estos hechos, se deduce, por lo tanto, que la actividad de
la enzima depende en parte de la disposicin o arreglos de los aminocidos y
grupos prostticos en determinada regin de la protena. Los aminocidos que
componen a las protenas pueden tener moderadas actividades catalticas,
aunque de ninguna manera comparable en su magnitud, cuando se les
considera en forma aislada, a las que muestran la gran molcula proteica. De
hecho para muchos sistemas enzimticos se han ideado modelos anlogos,
osea sustancias qumicas sencillas que suelen reproducir los efectos
ocasionados por la enzima, tal es el caso de los anlogos, a base de piridoxsal
que representan la parte activa de enzimas descarboxilantes y transaminantes.
Esto no significa que necesariamente, en el estado natural, la enzima funcione
como lo hace el anlogo pues muchos sistemas pudieran tener otro mecanismo
de operacin; la hidrlisis del almidn lo mismo se logra con la adicin del
cido que con la enzima especfica amilasa, an cuando en el primer caso se
atacan indiscriminadamente numerosas uniones glucosdicas, y con la enzima,
en cambio solo se desprenden, uno tras otro fragmentos de dos unidades de
glucosa de los extremos de las ramificaciones.

Conformacin de la enzima y propiedades del centro activo. La

propiedad cataltica de las enzimas parece depender de la facilidad con la
que ayudan a que se pongan en contacto las sustancias reaccionantes para
dar el producto o los productos de la reaccin. Esto implica que el sistema
enzimtico tenga una conformacin especial osea, una disposicin
adecuada de os grupos funcionales aminocidos de la apoenzima y
grupos prostticos, cuando existen estos y de las molculas mismas de los
sustratos que se unirn a aquellos y permitirn que se lleve a cabo la
reaccin qumica. Este acercamiento de las sustancias reaccionantes de los
grupos prostticos y los grupos funcionales fue las razn del modelo de
Ehrlich, conocido clsicamente como de la "llave y la cerradura". As la
enzima sera un molde tridimensional en negativo, de la estructura tambin
tridimensional, en positivo de los reaccionantes que se adaptaran
perfectamente a ala disposicin de la enzima. Sin embargo ha sido
necesario reconsiderar esta situacin y sugerir de acuerdo con Koshland
la teora de un "acomodo inducido".

As las enzimas pueden sufrir un cambio en su estructura desde el momento en

que entran en contacto con los reaccionantes, sustratos y cofactores, y es
posible que todos ellos modifiquen el arreglo tridimensional de la enzima; la
enzima los recibe en un orden determinado y cada uno de ellos al unirse a la
enzima modifica su estructura. La nueva analoga es la del "guante y la mano";
aquel no representa una estructura de negativo tridimensional mientras no se
halla la mano en el, ya que antes pueden tener diversas formas y
disposiciones, una vez que ha entrado la mano - que a su vez tambin puede
adoptar distintas posiciones se ponen en contacto todas las partes
correspondientes, es decir, en el caso de la enzima, las partes reactivas del
sistema enzimtico, con las partes reaccionantes, osea los sustratos. Se ha
preservado con esta nueva idea, el aspecto de la armona estructural entre el
sustrato y la enzima pero se introduce el nuevo concepto de que es necesario
provocar un cambio en la estructura proteica que favorezca la colocacin
adecuada de todos los elementos que interviene en la reaccin enzimtica. Los
cambios de la estructura protica se denominan "conformacionales". El cambio
en la disposicin tridimensional puede hacerse a distancia y en muchas
ocasiones la unin del sustrato a una parte de la enzima modifica otras zonas
de ella y an su estructura completa, debido a plegamientos que acercan o
alejan diversos grupos colocados a lo largo del pptido que forma la enzima.
Esta alteracin mltiple y de tipo flexible, permite entender mejor el proceso de
entrada ordenada de los sustratos, y los cofactores y la reaccin en la que se
participan. Tambin permiten comprender porque un sustrato entra a una
enzima y es atacado y uno que no lo es an muy parecido a l, puede quedar
excluido del centro activo.
Se ejemplifican estas ideas en A se encuentra la enzima en una forma
desplegada con ciertos grupos reactivos (+) y (-), colocados en una zona de la
superficie de la enzima. La entrada de un cofactor F 1, modifica una parte del
sistema (B); se introduce en el sistema un nuevo arreglo a base de la
reactividad de tipo electrnico entre la zona (+) y una parte del cofactor F 1,
recin introducido; por fin la entrada de un nuevo reaccionate F 2 modifica la
parte terminal de la enzima de manera que permite la entrada del otro
reaccionante (sustrato) que se acomoda en un lugar preparado previamente
por los reaccionantes F1 y F2, y permite de esta manera echar a andar la
reaccin cataltica. Los cambios conformacionales, se pueden demostrar con
diversos mtodos algunos de tipo fsico, como son las modificaciones en la
rotacin ptica o en el patrn de sedimentacin en el campo gravitacional de la
ultracentrfuga, o qumicos como el aumento o la disminucin de la actividad
enzimtica bajo la influencia de cambios trmicos o la adicin de agentes
desnaturalizantes. Basten unos cuantos ejemplos: la transaminasa
-cetoglutrica se pude calentar a 65 C. en presencia de su sustrato sin que
se afecte, al paso que la enzima sola es rpidamente degradada, cambia de
configuracin y se precipita; la miosina, protena muscular contrctil, en
presencia de ATP hace ms notable su forma de espiral y permite el
reconocimiento de aminocidos previamente ocultos en sus pliegues; la Damino oxidasa, al unirse a su cofactor, el FAD, pasa de la forma espiral en
-hlice, a una disposicin irregular distribuida al azar.

Coenzima y grupos prostticos

Aparte del sustrato, cuya transformacin ser condicionada por la enzima,
existe otra parte del sistema enzimtico, de peso molculas bajo y por lo tanto
dializable, termostable y en general, no protica, adherida de mas o menos
laxa a la apoenzima y a la cual se le llama grupo prosttico, si est muy
intimanente ligada a la apoenzima como es el caso del ncleo porfirnico de
numerosas oxidasas o la estructura flavnica de la deshidrogenasa succnica
o coenzima cuando la unin es dbil y se separan fcilmente, como por
ejemplo el DPN y el TPN que asisten a las funciones de varias
deshidrogenasas. Es muy grande la importancia del grupo prosttico o de la
coenzima desde el punto de vista funcional pues suelen ceder y recibir
alternadamente parte de los productos de la reaccin. Por ejemplo en las
reacciones de oxido reduccin los hidrgenos desprendidos de un sustrato
deben ser captados por una sustancia con lo que se expulsa al sustrato
oxidado y es posible recibir una nueva molcula del sustrato con hidrgenos.
Tal sustancia es una coenzima, como el DPN, el TPN, el FAD, etc., que, a su
vez, suele cederlos a una tercera sustancia o, cuando las reacciones son
reversibles los pasan al sustrato oxidado para reducirlo. Algunos autores
denominan cosustratos a estos agrupamientos coenzimticos para hacer
nfasis en su carcter reversible, no cataltico y equimolecular con respecto al
sustrato. Una proporcin de las vitaminas forman parte de molculas mas
complejas que funcionan como coenzimas en diversas reacciones.

Muchas enzimas requieren una coenzima

Muchas enzimas que catalizan la transferencia de grupos y otras reacciones

requieren, adems de su sustrato, una segunda molcula orgnica conocida
como coenzima sin la cual son inactivas. Para distinguirlas de iones metlicos
activadores y de las enzimas mismas, las coenzimas se definen como
compuestos orgnicos termoestable, de peso molecular bajo, requeridas para
la actividad de las enzimas. La mayor parte de las coenzimas se unen a las
enzimas por fuerza no covalentes. Las que forman enlace covalentes con las
enzimas se denominan tambin grupos prostticos.
Entre las reacciones que requieren coenzimas estn las oxidorreducciones, las
reacciones de transferencia de grupo e isomerizacin y las reacciones que
forman enlaces covalentes (claves 1,2,5 y 6;IUB). Las reacciones lticas que
comprenden reacciones hidrolticas catalizadas por enzimas digestivas no
requieren de coenzimas.

Las coenzimas pueden considerarse como segundo sustrato

La coenzima puede considerarse como un segundo sustrato o cosustrato por

dos razones. En primer lugar, los cambios qumicos en la coenzima compensa
exactamente a los que realizan en el sustrato. Por ejemplo, en las reacciones o
oxidorreduccin (deshidrogenasa), una molcula de sustrato es oxidasa y una
molcula de coenzima es reducida.
Una segunda razn para dar igual nfasis a las reacciones de la coenzima es
que, en realidad, este aspecto de la reaccin es el que puede ser de significado
fisiolgico fundamental. Por ejemplo, la importancia de la capacidad del
msculo que trabaja en condiciones anaerobias para convertir el piruvato en
lactato no residen en el piruvato ni en el lactato.
La reaccin sirve solamente para oxidar la coenzima reducida NADH a NAD+.
Sin NAD+ la gluclisis no puede continuar y la sntesis anaerobias de ATP (y
por tanto, el trabajo) tiene que cesar. En condiciones anaerobias, la reduccin
del piruvato en lactato reoxida al NADH y permite la sntesis de ATP. Otras
reacciones pueden servir igualmente bien. Por ejemplo, en las bacterias o
levaduras que crecen en medio anaerobio, algunos metabolitos derivados del
piruvato son utilizados como oxidante para el NADH y son reducidos en el
proceso.

Las coenzimas funcionan como reactivos en la transferencia de grupos

Las reacciones bioqumicas de transferencia de grupo del tipo.

D G + A= A G + D
En la cual un grupo funcional, G es transferido de una molcula denadora, D-G,
a una molcula aceptora, A, por lo general comprende la participacin de una
coenzima como ltimo aceptor (por ejemplo, reacciones de dehidrogenacin) o
como portador intermediario del grupo (por ejemplo, reacciones de
transaminacin). El esquema siguiente muestra el ltimo concepto.
D-H CoE A-G
D CoE-G A

Aunque estos sugiere la formacin de un complejo sencillo CoE-G, durante el

curso de la reaccin global, pueden intervenir varios complejos intermediarios
CoE-G en una reaccin particular (por ejemplo, transaminacin).
Cuando el grupo transferido es el hidrgeno, es costumbre representar slo la
"mitad izquierda de la reaccin":
D-H CoE
D CoE-H
Que esto representa en realidad slo un caso especial de la transferencia
general de grupos puede apreciarse mejor en trminos de las reacciones que
ocurren en las clulas intactas. Se pueden representar de las siguientes
manera:
D-H CoE A-H
D CoE-H A

Las coenzimas pueden clasificarse de acuerdo al grupo cuya

transferencia facilitan

Basndose en este concepto podra clasificarse a las coenzimas como sigue:

Para la transferencia de grupos distintos del hidrgeno:

Fosfatos de azcares
CoASH
Pirofosfato de tiamina.
Fosfato de piridoxal
Coenzimas del folato
Biotina
Coenzimas de cobamida (B12)
cido lipoico
Para la transferencia del hidrgeno:
NAD+, DADP+
FMN, FAD.
cido lipoico
Coenzima Q.

-Muchas coenzimas derivan de vitamina B y del monofosfato de adenosina

Las vitaminas B forman parte de la estructura de numerosas coenzimas. Las
vitaminas B; nicotinamida, tiamina, riboflavina y cido pantotnico son
constituyentes esenciales de las coenzimas para las oxidaciones y las
reducciones biolgicas y las coenzimas cido flico y cobamida funcionan en el
metabolismo de compuestos de un solo carbono. Numerosas coenzimas
contienen adenina, ribosa y fosfato y se derivan del monofosfato de adenosina
AMP. Los ejemplos incluyen NAD+ y NADP+

Activadores
Las enzimas son catalizadores orgnicos que disminuyen la barrera
denominada energa de activacin; y por tanto facilitan el que se inicie una
reaccin. Este proceso implica el trabajo necesario para poner a dos molculas
en un contacto lo suficientemente estrecho como para que reaccionen;
adems, el trabajo debe realizarce sobre la unin qumica una con covalencia
en sentido estricto para que pueda romperse y formar otros compuestos. Las
enzimas, como muchos catalizadores, son partculas de gran superficie y
muestran que tienen capacidad para atraer y captar diversas molculas.
Cualquier factor que permita por una parte atraer al sustrato a su centro activo
se pude considerar como un activador, adems algo que permita la rpida
salida de los productos tambin pude considerarse como un activador. Asi se
reconocen diversas posibilidades:

Activacin inica. Numerosos metales monodivalentes son necesarios

para la actividad enzimtica de diversos sistemas. Destacan entre ellos los
siguientes: K+, Mn++, Mg++, Ca++, Fe+++, Cu+, Cu++, etc. A menudo el metal, a
estas condiciones, es el centro que permite la unin conjunta del sustrato,
de la coenzima y de la misma apoenzima con la que forma quelatos (de
chelos, garra; complejos moleculares sostenidos por un metal) al unirse con
grupos cargados electricamente. Muy amenudo se demuestra que es
posible sustituir los metales divalentes entre ellos, sin grandes
modificaciones de la velocidad de la reaccin.
Los metales como el hierro, el cobre y el molibdeno, actan a menudo
como transportadores de electrones y no se les puede considerar
activadores en el sentido estricto pues forman parte integral del grupo
prosttico. Algunos aniones tambin son necesarios para la actividad de
ciertas enzimas; bien conocido es el caso del Cl -, el que puede
sustituirse, a un cuando con baja de la velocidad, por Br-, para la amilasa
salival; o el propio radical fosfato que se requiere en reacciones de
fosforilacin.

Activacin por el grupo prosttico. En determinadas reacciones estos

son indispensables para el trabajo de la enzima y constituyen, en rigor, la
parte funcional activa del sistema.
Activacin de la apoenzima. Consisite en la obtencin de una correcta
estructura del centro activo de la proteina con actividad enzimtica, ya
referido anteriormente.
Integridad de los grupos funcionales del centro activo. Destaca la
relacionada con los grupos sulfhidrilo, -SH. Cualquier alteracin qumica que
los destruya, bloquee u oxide a disulfuro, -S-S-, puede inactivar a las
enzimas. Esto puede suceder incluso en las suaves condiciones del trabajo
celular por exposicin a agentes oxidantes o al oxigeno mismo, aunque
puede lograrse por el efecto de sustancias que los ataquen y que combinen
con ellos como la yodacetamida. En otras ocaciones la destruccin de los
grupos SH, aun la distancia del centro activo modifica de tal manera la
estructura tridimencional de la enzima que el centro activo se deforma al

grado de que no puede llevar a efecto su accin sobre las sustancias

reaccionantes. Existen otros grupos funcionales cuyo bloqueo acaba por
completo con la actividad enzimatica; en tal caso estara la accin de
inhibidores o venenos enzimticos.
Medida de la actividad enzimtica. Aparte del problema de medir las
pequesimas cantidades de enzimas presentes en los tejidos; muy pocas
de ellas poseen caractersticas qumicas o espectroscpicas particulares
que permita medirlas directamente. En general, las enzimas se cuantean
siguiendo la actividad de la reaccin que catalizan y se aceptan, en principio
que dicha actividad es proporcional a la cantidad de enzima presente. Como
la actividad de un enzimas slo rara vez se puede expresar en relacin a su
peso absoluto o a la molaridad de la enzima, lo habitual es expresarla en
"unidades" fijadas de modo convencional con relacin a la proteina presente
en la preparacin.

La actividad enzimtica se mide por la desaparicin del sustrato o la aparicin

de alguno de los productos de la reaccin, siguiendo dichos cambios en el
tiempo. Sin embargo, las condiciones del sistema no son uniformes a lo largo
del tiempo: el grado de saturacin de la enzima con el sustrato cambia
constantemente, los productos que aparecen suelen inhibir a la enzima o se
presentan modificaciones del pH que afectan a la reaccin, etc. Para evitar
estos problemas se hace la medida de la velocidad inicial, tomando en cuenta
solo el comienzo, en forma de lnea recta de la grfica, lo que sucede en
general cuando se ha consumido no ms de una cuarta parte del sustrato.
La actividad puede espresarce, una vez determinada la reaccin, en relacin
con el tiempo empleado por la enzima para producir un cambio determinado;
mientras mayor sea el tiempo, la actividad de la enzima es menor. Por lo tanto,
la recproca del tiempo (la inversa del tiempo osea el valor que resulta de dividir
la unidad sobre el tiempo, 1/T) es una medida de la actividad enzimtica.

Especificidad enzimtica
Los distintos grupos de enzimas muestran variaciones considerables en su
grado de especificidad. Algunas de ellas muestran requerimientos estrictos
tanto para el sustrato (o los sustratos si se trata de reacciones bimoleculares)
como para el tipo de unin qumica sobre el que van a actuar; pequeos
cambios en cualquiera de ellos bastn para inactivar la reaccin; tal es el caso
de la mayora de las enzimas. En otras ocaciones, la deshidrogenasa
alcohlica, que funciona con DPN como coenzima, es absolutamente
especfica para el DPN, pero pude actuar sobre diversos alcoholes aparte del
etlico que es su sustrato caracterstico. Asi mismo, las enterasas, las
fosfatasas y ciertas peptidasas a menudo solo son especficas para el tipo de
unin atacada ster, peptdica, etc. y no requieren estructuras definidas en
el sustrato, a ambos lados de la unin. Hay ejemplo de especificidad doble: la
xantina oxidasa, altamente especfica para la xantina a la que convierte en
cido rico, y por otro lado muy activa, pero en forma inespecfica, al mostrar
gran capacidad para mostrar la activacin de gran variedad de aldehidos.
El requisito de estereoespecificidad para los sustratos es muy importante. Las
enzimas que habitualmente atacan a los azcares naturales con configuracin
D-, no lo hacen sobre sus ismeros artificiales L-; las enzimas tan activas en la
naturaleza sobre los aminocidos comunes tipo L- so inactivas para los
aminocidos artificiales (o muy raros en los organismos vivos) de tipo D-. Esto
es tan absoluto que cuando existen mezclas racmicas de ismeros D- y L-, un
mtodo conveniente de separarlas, es el de dejar que actue sobre ellas una
enzima que degradar exclusivamente a uno de los dos ismeros dejando al
otro intacto.
Cuando el sustrato es simtrico y el producto es asimtrico, la enzima provoca,
especficamente, la formacin de uno solo de los productos asimtricos, aquel
para el que la enzima es activa; tal es el caso de la deshidrogenasa lctica que,
al actuar sobre el cido pirvico (simtrico) produce exclusivamente cido Dlctico y no cido L-lctico, y el de la deshidrogenasa glutmica que al atacar el
cido -cetoglutrico produce solo cido L-glutmico:
CH3 CH3
||
C = O HCOH
||
COOH COOH
cido pirvico cido D-lctico
Existen otras formas de isomerismo geomtrico aparte del isomerismo D-, L-,
suceptibles de ser reconocidas por enzimas. Tal es la situacin de los ismeros
cis trans en que solo uno de los tipos del par es atacado. La fumarasa
introduce una molcula de agua en el cido fumrico trans, pero el ismero cis,
o sea el cido maleico, no es atacado.
H C COOH H C COOH

HOOC C H H C COOH
cido fumrico (trans) cido malico (cis)
Las enzimas tambin pueden distinguir molculas que desde el puntod e vista
estructural, como compuestos qumicos, son identicas. Por ejemplo, la glicerol
cinasa, por medio de ATP, convierte al glicerol en L-grlicerol 3- fosfato, osea
produce su fosforilacin, pero exclusivamente en la posicin 3, hecho que se
ha demostrado con glicerol marcado con C radiactio, C 14, en las dos posiciones
posibles 1 y 3.
Los mismo sucede con el cido ctrico que al ser oxidado y descarboxilado
hasta producir cido -cetoglutrico adquiere un grupo C=O, en uno de los
lados de la molcula, quimicamente simtrica. Esta capacidad de la enzima
para reconocer el sustrato obedece a que debe tener por lo menos tres grupos
qumicos orientados en el espaciod e tal modo que el sustrato, aunque en
apariencia simtrico, solo puede adaptarse por completo a la enzima en una
sola posicin. De todo esto se desprende por el sustrato a los sustratos
necesitan tener un patrn peculiar de grupos qumicos, especficos para cada
enzima particular, de modo que se adapte perfectamente a su centro activo;
mientras mayor y ms complejo sea este requerimiento mayor ser la
especificidad de la enzima.

Cinetica de las reacciones enzimaticas

Aunque las leyes generales de la catlisis debieran ser vlidas para las
enzimas, el hecho de que stas sean sustancias complejas, de alto peso
molecular, de tamao coloidal y de composicin difcil de precisar, impide la
aplicacin de dichas leyes de una manera estricta; por ejemplo, su tamao
coloidal puede causar fenmenos de adsorcin o diversas reacciones debidas
a sus numerosas cargas elctricas. No obstante, los factores que afectan la
velocidad de la reaccin enzimtica son los ya sealados a propsito de las
reacciones qumicas en general, como la temperatura y las concentraciones de
las sustancias reaccionantes que, en este caso particular, son la enzima el
sustrato. Adems intervienen el PH medio donde se realiza la reaccin, la
presencia de los productos de la reaccin, y otros factores secundarios como
las radiaciones y los efectos xido reductores.

Relaciones entre la enzima y el sustrato.

Es universalmente aceptado, que la enzima, como todo catalizador, participa de
una manera activa en la reaccin. Existen pruebas experimentales de esta
situacin cuando menos para algunos.
Un ejemplo bien conocido es el de la peroxidasa que, en presencia de perxido
de hidrgeno, H2O2, y un acceptor de hidrgeno adecuado, produce la
reduccin del H2O2, . La peroxidasa en ausencia de H 2O2 muestras unas bandas
de absorcin caractersticas en el espectro visible; cuando se combina con el
H2O2 , pero sin que exista el acceptor de los hidrgenos, aparece una nueva
distribucin de las bandas. Si se permite el paso de los hidrgenos a un
acceptor, automticamente desaparecen las bandas nuevas y reaparecen las
originales de peroxidasa.
Se acepta corrientemente una hiptesis propuesta por Michaelis para explicar
la actividad enzimtica, sobre la base de la informacin de un compuesto de la
enzima con el sustrato (complejo enzima sustrato), previamente al ataque del
sustrato por la enzima y a la liberacin de los productos de la reaccin. El
desarrollo matemtico que permiti a Michaelis formular su hiptesis, estuvo
acorde con los datos experimentales obtenidos una vez vencidos los enormes
obstculos de orden tcnico para llevar a cabo la confirmacin de la teora en el
laboratorio.
Si se hace el estudio de la actividad de una enzima en relacin con la
concentracin de sustrato. En ella se registran, en las abscisas, la cantidad
creciente de sustrato y, en las ordenadas, la cantidad de uno de los productos
de la reaccin liberada de un tiempo dado, que expresa, en rigor, la actividad
de la enzima. La curva obtenida es la de una hiprbola rectangular, la cual tiene
algunas propiedades interesantes; por ejemplo, la velocidad lmite o velocidad
mxima, es el valor que trata de alcanzar la curva a medida que se aumenta el
sustrato y que, en la figura, est sealada con la lnea V. Existe un punto, fijado
arbitrariamente, en el que la mitad de la velocidad lmite corresponde a una
concentracin especfica del sustrato; esta concentracin de sustrato se
representa habitualmente como KM, y se denomina constante de Michaelis,
valor caracterstico para un par enzima sustrato y que, por lo tanto, es la
concentracin de sustrato con la cual se alcanza la mitad de la velocidad lmite
o velocidad mxima de la reaccin. Los resultados obtenidos
experimentalmente concuerdan con los derivados de modo matemtico, sobre
la hiptesis de formacin de un complejo enzima sustrato.
La constante de Michaelis, KM, indica en trminos generales, las relaciones de
afinidad entre el sustrato y la enzima; un KM, implica la necesidad de una alta
concentracin de sustrato que, al combinarse con una enzima, produzca la
mitad de la velocidad mxima, o sea, que la afinidad por la enzima y sustrato
es pobre; por el contrario, si la concentracin de sustrato que se requiere para
alcanzar la mitad de la velocidad es muy pequea (KM pequea), quiere decir
que el sustrato tiene una gran afinidad por la enzima.
En ocasiones, la misma enzima puede ser ms afn a un sustrato que a otro;
por ejemplo, la sacarasa es 16 veces ms activa para atacar a la sacarosa que

a la rafinosa. Se conocen con exactitud los valores de KM para muchos

sustratos y enzimas, con los siguientes: la pepsina, actuando sobre albmina,
de huevo: KM de 4.5. por ciento; la tripsina sobre la casena :KM de 2 por
ciento; la amilasa sobre el almidn en presencia de Cl : KM de 0.4 por ciento ;
la sacarasa de levadura, sobre la sacarosa : KM 0.016 a 0.04 M, etc.
La explicacin de la curva hiperblica que implica la formacin del complejo
enzima sustrato parece depender de la existencia fsica, en la enzima, de
determinados sitios donde se absorbe el sustrato para ser activado. Al principio
de la curva se puede aumentar la concentracin del sustrato y la enzima es
capaz de activarlo con toda eficiencia; pero como una vez activado el sustrato
se separa en forma de los productos, y la velocidad con la que stos se
separan no es igual a la velocidad con la que captado el sustrato, y en vista de
la cantidad creciente del sustrato, la lnea obtenida no es una recta, sino la
curva sealada. Cuando la cantidad de sustrato ha sobrepasado la capacidad
fsica de la enzima para recibirlo y poder transformarlo, la curva alcanza una
meseta, lo que significa que la reaccin prosigue a la misma velocidad,
independientemente de la cantidad de sustrato adicionada. De acuerdo con los
trminos ligados a la velocidad de reaccin, expresados en la pgina 36, se
encuentra que, al principio del experimento, la reaccin depende
exclusivamente de la concentracin del sustrato y se trata de una reaccin de
primer orden; al final de ella, cuando hay un exceso de sustrato, la reaccin es
independiente de la cantidad de sustrato y, por lo tanto, es de orden cero.
Otra caracterstica en relacin con la finalidad de la enzima por el sustrato es la
comprendida en el llamado nmero de recambio, el cual representa los moles
de sustrato atacados por un mol de enzima en una unidad de tiempo
determinada, generalmente un minuto. Este nmero de recambio, en algunas
ocasiones, es muy elevado, como sucede con la catalasa que a 0 C., tiene un
nmero de recambio de 2.5 millones; es decir, un mol de enzima es capaz, en
un minuto, de desdoblar dos y medio millones de moles de H 2O2 ; el citrocomo
c, a 38 C, tiene un nmero de recambio de 1.4 X 10 3 ; la carboxialasa a 30 C.,
da un nmero de recambio de 1 X 103 , etc.
Mecanismo Ping Pong
En la transaminacin, la reaccin avanza a travs de los fenmenos alternos
de adicin de sustrato y liberacin de producto .
Iones sustrato
Estos facilitan la fijacin del sustrato y la catlisis por creacin de varias de
complejo de puente constituidos por un enzima, metal y sustrato en la que os
iones metlicos pueden actuar como catalizadores cidos generales o facilitar
la aproximacin de los reactantes.

Accion de inhibidores.
Si a un sistema enzimtico se aaden sustancias que impidan la realizacin de
la actividad propia de la enzima, se dice que el sistema ha sido inhibido, y la
sustancia usada con estos fines se denomina inhibidor.
Muchos inhibidores son agentes que desnaturalizan a las enzimas, ya que
stas son molculas protenicas, susceptibles a una diversidad de agentes,
especialmente qumicos, como aniones complejos o metales pesados, Zn ++,
Pb ++, Ag ++, etc. A menudo estos agentes que impiden la actividad enzimtica
actan sobre casi todas las enzimas, lo que demuestra que su accin no es
especfica, sino que afectan a tosa molcula protenica . Tal es el caso de los
inhibidores de sufhidrilos, -SH, los cuales forman parte de una gran variedad de
enzimas. Otras sustancias bloquean especficamente determinadas reacciones
enzimticas y su especificidad es tal, que slo cierto sustrato y cierta enzima
son los susceptibles.
De acuerdo con esto, es posible clasificar los fenmenos de inhibicin
enzimtica en diversos grupos : inhibicin por competencia e inhibicin por no
competencia y sta, a su vez, en la debida a agentes desnaturalizantes y a
agentes inespecficos.

Inhibicion competitiva
En este caso el inhibidor no permite la formacin del complejo enzima
sustrato normal, ya que se forma un complejo enzima inhibidor ; una vez que
el inhibidor ocupa el lugar activo de la enzima, el complejo enzima inhibidor,
no se separa, en vista de que la enzima no tiene accin sobre el inhibidor y, por
lo tanto, queda bloqueada la parte activa de la enzima. El sustrato no puede
entrar al lugar activo, que est ocupado por el inhibidor y, de esta manera, se
impide la accin enzimtica.
El ejemplo clsico de inhibicin competitiva es el de la enzima deshidrogenasa
succnica que, en presencia de cido succnico en cido fumrico, reduciendo,
simultneamente, al acceptor de H. Diversas sustancias parecidas al cido

succnico, como el cido malnico, el oxlico y el glutrico, se pueden combinar

con la enzima e impiden su accin sobre el cido succnico.
Al aadir el inhibidor, la actividad enzimtica disminuye sin embargo, si se
aaden cantidades mayores del sustrato natural de la enzima (en el ejemplo
anterior, de cido succnico) nuevamente empieza a aparecer actividad
enzimtica, y cuando las cantidades de cido succnico aadido sobrepasan
considerablemente a las presentes del inhibidor, la actividad enzimtica se
restablece por completo. Esta situacin representa, aparentemente, un
fenmeno de competencia entre el sustrato natural y el inhibidor para ocupar el
sitio activo de la enzima; la cantidad presente de una sustancia o de otra , en
un momento dado, en el sitio de la reaccin , determina si se dirige en un
sentido o de otro; si hay ms inhibidor, la enzima queda bloqueada por ste, y
no se lleva a cabo la reaccin enzimtica ; si an en presencia de importantes
cantidades de inhibidor existen mayores cantidades del sustrato natural, ste
domina al inhibidor y llega a desplazarlo introducindose en los sitios activos de
la enzima para permitir que se reanude la actividad cataltica.

Inhibicion acompetitiva
Cuando las sustancias inhibidoras actan independientemente de la calidad del
sustrato natural presente, se trata de inhibicin por no competencia. En este
caso, el inhibidor bloquea loas sitios activos de la enzima de modo irreversible ;
en ocasiones se trata de la desnaturalizacin de la enzima, como cuando se
aaden aniones o cationes que precipitan las protenas. En otros casos la
combinacin irreversible se hace con sustancias que actan de manera
especfica sobre ciertos grupos activos de la enzima, o sobre la conformacin o
estructura completa de ella ; sin embargo, en estas circunstancias, se ven
afectadas por igual todos o cuando menos varios tipos de enzimas.
Existen algunos inhibidores no competitivos que muestran cierta especificidad,
como los agentes bloqueadores del radical sulfhidrilo, -SH, presente en las
cadenas laterales del aminocido cistena, comn a todas las molculas
protenicas y, por lo tanto, a las enzimas. Entre los inhibidores de sulfhidrilos

ms conocidos se encuentran el ferricianuro, el yodacetato, el famoso gas

usado con fines blicos, la lewisita, y otras sustancias de tipo arsenical que
deben sus efectos letales a su combinacin con los grupos sulfhidrilo de
protenas y enzimas de gran importancia fisiolgica.
Hay enzimas que contienen iones metlicos indispensables para su actividad y
que son susceptibles a la accin inespecfica de agentes que afectan dichos
iones; tal es el caso de las enzimas con hierro que son intoxicadas por medio
del cianuro o el H2S. De la misma manera, la adicin de oxalato a un sistema
puede precipitar el calcio o el magnesio, e impedir la actividad de enzimas que
los requieren.

Antagonismo metabolIco (antimetabolitos)

Las enzimas pueden ser inhibidas por diversos compuestos, especialmente los
que presentan una estructura parecida al sustrato natural, como expres en el
caso del cido malnico y el cido succnico con respecto a la deshidrogenasa
succnica.
Esta inhibicin se denomina metabolitos las sustancias presentes o producidas
en el curso del metabolismo celular, y antimetabolitos las sustancias parecidas
a aqullos, y que impiden su aprovechamiento y utilizacin ; en general, se
trata de sustancias que compiten, a nivel enzimtico, en vista de su parecido
estructural, con los metabolitos naturales.
Numerosos hongos, actinomicetos, bacterias, etc., producen sustancias que
muestran actividad contra otros microorganismos. Estas sustancias se han
denominado antibiticos y, en principio, se deben considerar como

antimetabolitos que impiden, por razones de competencia , el crecimiento de

determinadas formas microbianas. En medicina ha resultado del mayor inters
el aislamiento y la actividad de los antibiticos, ya que en ciertas condiciones
se usan para reprimir el desarrollo de grmenes patgenos para los seres
humanos.
El estudio de los antimetabolitos probablemente se inici al observar que
numerosas bacterias podan crecer en un medio que tuviera sulfanilamida, que
normalmente es un inhibidor de su crecimiento, siempre que se aadieran
grandes cantidades de cido p-aminobenzoico, una vitamina necesaria para la
nutricin celular. En vista del parecido estructural entre las dos molculas, la
sulfanilamida y el cido p-aminobenzoico, se acept que los fenmenos de
inhibicin tenan una base estructural.
Entre los antibiticos, existen algunos de gran utilidad teraputica, como la
penicilina, aislada de diversos hongos Penicillium ; la estreptomicina,
proveniente de cultivos de Streptomyces griseus, y las tetracilinas, sustancias
que tienen amplio campo de accin de diversas infecciones producidas por
bacterias grampositivas o gramnegativas. Qumicamente, son sustancias
complejas formadas por distintos grupos :por ejemplo, la estreptomicina
contiene glucosamina, estreptosa y estreptidina. Algunos antibiticos son
pptidos, de tipo bsico, aislados de bacterias, tales como la gramicidina y las
tirocidinas. Un ejemplo peculiar de antibitico producido por el hongo
Pemicillium notatum es la notatina, idntica a la enzima glucosa oxidasa que
ataca a la glucosa permitiendo su conversin a gluconolactona y cido
glucnico ; es posible que de esta manera ejerza su accin de antibitico.
Muchos antimetabolitos suelen intervenir de modo especfico a nivel de las
coenzimas o de los grupos prostticos, cuando stos son del tipo de las
vitaminas. Se trata, por lo tanto, en estos casos, de antivitaminas , muy
comunes en las del grupo B. As, la tiamina modificada en su estructura
qumica para formar piritiamina o oxitiamina, no participa en los procesos de
descarboxilacin.
El cido piridn 3 sulfnico impide la accin de la vitamina natural parecida a
l, o cido nicotnico y perturba numerosas reacciones de deshidrogenacin. La
piridoxina es antiorganizada por la desoxipiridoxina y la biotina, de la misma
manera, por la destiobiotina. Se han preparado numerosas sustancias
parecidas a las bases pricas y pirimidnicas con la finalidad de bloquear los
sistemas de formacin de protena, que dependen de la presencia de cidos
nucleicos que contienen dichas bases, en el interior de la clulas; estos
trabajos se han planeado para deprimir la velocidad de desarrollo de clulas
cancerosas. Entre las sustancias obtenidas en fechas recientes se puede
sealar el grupo del 5 fluorouracilo, que produce inhibicin tumoral por el
siguiente mecanismo, que puede ser comn a un gran nmero de sustancias
con estas propiedades : en el tumor falta la enzima que destruye el
antimetabolito, en este caso el 5 fluorouracilo, el cual se vuelve muy agresivo
hacia el tumor ya que no es degradado por l; en cambio, dicha sustancia es
menos txica para el tejido normal que s est en posibilidad de destruirlo.

Inhibicion alosterica

De gran importancia en el fenmeno de la actividad enzimtica es el hecho de

que, en las protenas, pueden existir dos (o cuando menos dos) sitios
diferentes desde el punto de vista estereo- especfico y que, adems, estn en
lugares distintos. Un de estos sitios es el centro activo, donde el sustrato es
atacado para dar origen a los productos de la reaccin y por lo tanto donde
reside el aspecto funcional de la protena. El otro sitio denomina sitio alostrico
y en l puede acomodarse de manera complementaria - pero reversible alguna sustancia llamada efector alostrico ; al efectuarse esta unin se
produce una alteracin discreta de la estructura de la protena, la transicin
alostrica, que modifica la actividad biolgica de la protena, porque altera la
distancia, las propiedades del sitio activo.
Es muy importante que el efector alostrico normal no tiene relacin qumica o
metablica alguna con el sustrato de dicha enzima y que su accin tan
especfica se debe a que altera de tal modo la conformacin de la protena que
modifica su centro activo.
El efecto alostrico se ha estudiado de manera especial en bacterias, pero
ocurre tambin en animales superiores. En un principio se reconoci como un
efecto inhibidor que, por su caractersticas, fue denominado "por retroalimentacin" o "por producto final" . En rigor, en las bacterias, es la regla que
el metabolito formado al final de un camino metablico, resulte un poderoso
inhibidor de su propia sntesis. Parte de la explicacin de este efecto (pg. 535)
se debe a que dicho metabolito inhibe especficamente a una sola enzima
localizada en el camino metablico que forma a dicha sustancia, y de manera
curiosa, la enzima sensible al metabolito final es la primera de este camino
metablico.
En un ejemplo de camino A B C D E, siendo E el metabolismo final, ste
inhibira a la primera enzima la que forma B a partir de A. En este captulo en
que se estudia la regulacin metablica se analizan con detalle algunos de
estos ejemplos y las reacciones qumicas individuales afectadas. La inhibicin
alostrica demuestra la alta especializacin de las enzimas que reconocen
tanto al sustrato como al inhibidor, siendo muy especficas para ambos. Como
qumicamente el sustrato y el efector alostrico son muy distintos, se acepta
que la unin con la enzima debe efectuarse en sitios diferentes, lo que ha
demostrado con mutantes bacterianas no sensibles al efector alostrico .
Adems, no hay interaccin directa entre el sustrato y el inhibidor puesto que
los sitios receptores estn muy separados.
Las protenas alostricas pueden corresponder a polmeros, es decir, a
molculas compuestas de sub- unidades idnticas, con ejes de simetra
definidos. El hecho de que se agreguen las subunidades, por una parte, y el
que al estar en forma polimrica adopten diversas situaciones conformaciones,
hace susceptibles a la enzima a los inhibidores, o por el contrario, a recibir (fig.
3-10) al sustrato y llevar a efecto su accin caracterstica. Ms an, para el
caso de la transcarbamilasa asprtica se ha demostrado que una subunidad se
combina con el sustrato y otra, distinta, con el inhibidor. Estos fenmenos
adquieren una importancia de tipo general, al demostrarv que es factible
modificar la accin de las enzimas por cambios en la estructura cuaternaria de
las protenas, basados en la asociacin y disociacin de subunidades. Algunos

ejemplos particulares son los siguientes : la deshidrogenasa glutmica, con

peso molecular de cerca de 1 milln puede partirse en subunidades de 250 000
por diversos agentes : DPN, ADP, estrgenos tiroxina y ciertos aminocidos .
Otro ejemplo es la carboxilasa de la acetil coenzima. A, que es activada por la
adicin de citrato, el cual cambia el coeficiente de sedimentacin de la enzima
de 18 S a 43 S, o sea la molcula pasa a forma de polmero activo a partir de
monmeros inactivos. Un caso ya clsico es el de la fosforilasa inactiva que se
convierte en activa cuando se fosforila; la estructura inactiva est formada por 2
unidades y la activa por 4.

Efecto de la Temperatura
Un aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reaccin
hasta cierta temperatura ptima, ya que despus de aproximadamente 450 C
se comienza a producir la desnaturalizacin trmica. Las enzimas de muchos
mamferos tienen una temperatura ptima de 370 C, por encima de esa
temperatura comienzan a inactivarse y se destruyen Sin embargo existen
especies de bacterias y algas que habitan en fuentes de aguas termales y en el
otro extremo ciertas bacterias rticas tienen temperaturas ptimas cercanas
a00 C.

Enzimas:
actividades

regulacion de

La regukacion
logra
la

del metabolismo
homeostacia

La regulacin de la actividad enzimtica contribuye en gran parte a preservar la

homeostasia que, mantiene un entorno intracelular e intraorgnico
relativamente constante en presencia de fluctuaciones amplias en al medio
ambiente externo, como cambios de temperatura, presencia o ausencia de
agua o tipos especficos de alimentos.
Como conservar la homeostasia
Las concentraciones locales de sustrato , comparticin de enzimas y secrecin
como proenzimas o cimogenos ( como por ejemplo la quimiotripsina ) sin
actividad cataltica contribuyen a la regulacin de los procesos metablicos .
Adems , las alteraciones rpidas y mnimas en la actividad cataltica de
enzimas reguladas clave tienen funciones importantes en la canalizacin
selectiva de metabolitos hacia uno u otro proceso metablico .

Las enzimas reguladoras

Tienden a ser aquellas que catalizan una reaccin temprana nica ( con
frecuencia la primera ) de una secuencia determinada de reacciones
metablicas .
La actividad cataltica de las enzimas reguladas puede modularse por
ejemplo ,cambios repetidos entre estados bajo y alto de actividad cataltica ;
cuando no hay sntesis protenica nueva ni degradacin protenica .
La modulacin se logra cuando matabolitos especficos se unen en forma
covalente y no covalente, a la enzima regulada en general a sitios
( alostricos ) bastantes separados del sitio cataltico .
Tres mecanismos generales regulan la actividad enzimatica
Por ejemplo el flujo neto de carbono en una reaccin catalizada en una
reaccin enzimtica podra ser influido
1.
2.

Cambiando la cantidad absoluta de enzima presente .

Alterando el tamao del conjunto de sustancias reaccionantes distintas
de la enzima.
3. Alterando la eficacia cataltica de la enzima (estas tres opciones son
utilizadas e casi todas las formas de vida).
La modulacin de actividad enzimtica por cambios en la conformacin del sitio
cataltico puede incluir la alteracin de Km para un sustrato de Vmax para la
reaccin global o para efectos sobre los dos, Km y Vmax.
A menudo las curvas de saturacin de sustrato para la inhibicin alostrica son
sigmoideas, por ende la ecuacin de Michaelis Menten no se aplica.

Patologas
Fenilcetonuria (PKU):
La Fenilcetonuria (PKU) es una ECM de Fenilanina (Phe) capaz de causar
retraso mental irreversible en ausencia de tratamiento, debido, en el 97-99% de
los casos, a deficiencia en la enzima Phe-hidroxilasa heptica.
La enfermedad cursa con niveles de Phe aumentados en sangre, lo cual
permite establecer su diagnstico en el perodo neonatal, cuando an las
manifestaciones clnicas no son evidentes. La frecuencia con que se presenta
es de 1:10000 nacidos vivos, y su patrn de herencia es autosmico recesivo.
El tratamiento consiste en la administracin de una dieta especial restringida en
Phe, bajo control continuo y cuidadoso. Dicho tratamiento debe iniciarse antes
del mes de vida, a fin de conseguir un desarrollo intelectual normal del nio.
Existe una forma menos frecuente de PKU (1-3%), debida a deficiencia de
tetrahidrobiopterina (THB), que es un cofactor natural de la Phe-hidroxilasa,

donde el defecto puede hallarse en la va de sntesis o de reciclado del

mencionado cofactor. En estos casos, el tratamiento debe efectuarse
suplementando adems con el cofactor activo, L-DOPA y 5-OH triptofano.
Tambin existen deficiencias menos severas de la enzima Phe-hidroxilasa, las
cuales cursan con niveles moderadamente aumentados de Phe en sangre y
reciben el nombre de Hiperfenilalaninimias (HPA). en las mismas, la necesidad
de implementacin del tratamiento depende de la tolerancia a la sobrecarga
oral de Phe y de los niveles alcanzados por el aminocidos en sangre.
Galactosemia:
Se conocen tres tipos de errores congnitos del metabolismo (ECM) de
galactosa (GAL) originados en la deficiencia de distintas enzimas involucradas
en la ruta metablica principal, los cuales difieren en su cuadro clnicos y en su
patrn bioqumico en sangre. De acuerdo a la severidad de dicho cuadro, la
ms importante es la deficiencia de Gal-1-P-Uridil Transferasa, la cual se
conoce comnmente como Galactosemia Clsica. La misma es capaz de
producir retraso mental, cataratas, toxicidad hepatorrenal y en ocasiones la
muerte del individuo a los pocos das de vida. La afeccin cursa con niveles
elevados de GAL Total lo cual permite su deteccin en sangre del recin
nacido. El patrn de herencia es autosmico recesivo y la frecuencia con que
se manifiesta es de 1:60000. La restriccin dietaria de GAL en el perodo
neonatal evita la instalacin de los mencionados sntomas y los pacientes
resultan
normales.

Hiperplasia Suprarrenal Congnita (HSC):

La HSC es un desorden heredado en forma autosmica recesiva cuya
frecuencia establecida internacionalmente es de aproximadamente 1 : 12.000
nacidos vivos. La misma, es ocasionada por un defecto en alguna de las 5
enzimas que intervienen en la esteroidognesis adrenal, lo cual trae aparejado
una cada en la produccin de cortisol y, en algunos casos, una disminucin en
la
produccin
de
aldosterona.
En ms del 95 % de los casos la enzima afectada es la 21-Hidroxilasa, siendo
la 17-alfa-Hidroxi progesterona (17-OHPG) el principal precursor que se
acumula en sangre. Por esta razn, es el parmetro bioqumico de eleccin
para la deteccin de HSC en Programas de Pesquisa Neonatal.
Desde el punto de vista clnico - bioqumico, el dficit de 21-Hidroxilasa posee
distintas formas de presentacin: 1) Forma perdedora de sal: se presenta con
un dficit tanto de glucocorticoides como de mineralocorticoides, observndose
una excesiva produccin de andrgenos. 2) Forma virilizante simple: no se

manifiestan prdidas de sodio en orina ni hipercaliemia, sugiriendo que los

pacientes afectados controlan la produccin de mineralocorticoides. 3) Forma
no clsica o tarda: su principal signo clnico es la aparicin de hirsutismo en la
adolescencia. 4) Forma asintomtica o crptica: carece de manifestaciones
clnicas.
Los pacientes del primer grupo pueden parecer normales al nacimiento, pero
entre los 7 y 30 das de vida desarrollan una crisis salina que puede llevarlos a
la muerte si no son diagnosticados y tratados adecuadamente. El exceso de
andrgenos que se produce en los pacientes de las 3 primeras formas
determina que las nias afectadas presenten al nacimiento genitales ambiguos,
con distintos grados de virilizacin. Si este exceso de andrgenos no es
corregido, traer aparejado en ambos sexos un aceleramiento del crecimiento
seo con cierre temprano de las epfisis y desarrollo de pubertad precoz.
El tratamiento se basa en la administracin de sustitutos hormonales que
cumplen la funcin de las hormonas faltantes. En el caso de los pacientes que
presentan la forma perdedora de sal se busca corregir el dficit tanto de
mineralocorticoides como de glucocorticoides, en tanto en los grupos restantes
solo
es
necesaria
la
correccin
de
estos
ltimos.
El objetivo principal del tratamiento consiste en lograr que el organismo sea
capaz de mantener un balance adecuado de sales y agua, alcanzando
parmetros normales de crecimiento, maduracin sexual y fertilidad en la vida
adulta. El control del progreso del tratamiento se realiza mediante evaluaciones
clnicas y monitoreos peridicos que permiten ajustar las dosis de la
medicacin.

Deficiencia de Biotinidasa:
Se trata de un error congnito del metabolismo que carece de signos clnicos
en el perodo neonatal, capaz de producir sntomas neurolgicos como
convulsiones, prdida de la audicin y la vista, ataxia, hipotona y otras
manifestaciones como retraso del crecimiento, hiperventilacin, apneas,
dermatitis y alopeca. En ausencia de tratamiento, el inicio de la enfermedad se
da en promedio a los tres meses de vida, pudiendo retrasarse hasta los 2 aos.
Desde el punto de vista bioqumico presenta una deficiencia en la enzima
Biotinidasa, la cual tiene como funcin la recuperacin de biotina, vitamina
soluble del complejo B, de la va de degradacin de las carboxilasas Piruvato
CoA-, Propionil CoA-, b-Metilcrotonil CoA- y Acetil CoA-. A consecuencia de
esto, los pacientes pueden presentar aciduria orgnica, cetoacidosis
metablica
e
hiperamonemia
moderada.
El diagnstico neonatal se efecta midiendo la actividad de Biotinidasa en
sangre entera colectada en papel de filtro, pudiendo detectarse deficiencias
absolutas o parciales de la misma, segn si su actividad es < 10 % o de un 1530
%
respectivamente.

El patrn de herencia es autosmico recesivo y la incidencia estimada es de

1:45.000.
El tratamiento se realiza administrando por va oral dosis farmacolgicas de
biotina de 5 a 20 mg/da, con lo cual es posible evitar la instalacin de los
sntomas.
Enfermedad de Orina de Jarabe De Arce:
La Enfermedad de Orina de Jarabe de Arce, conocida tambin como MSUD
(Maple Syrup Urine Disease) o Leucinosis, es un error congnito del
metabolismo de los aminocidos de cadena ramificada producida por una
deficiencia en la decarboxilacin oxidativa de los cetocidos correspondientes a
estos 3 aminocidos. El patrn de herencia con que se transmite es
autosmico recesivo, en tanto su incidencia es variable encontrndose datos
en la bibliografa que oscilan entre 1:185.000 nacidos vivos en individuos
anglosajones
y
1:60.000
nacidos
vivos
en
individuos
latinos.
La enfermedad posee 5 formas fenotpicas de presentacin que se describen a
continuacin:
1. Forma Clsica: es la de mayor inters por la severidad de su cuadro
clnico y por ser la ms comn de todas. La misma se caracteriza por un
cuadro de encefalopata de comienzo neonatal, con rechazo de la
alimentacin y somnolencia alrededor de los 10 das de vida que
progresa rpidamente al coma sin causa aparente. Posteriormente, se
instala un cuadro neurolgico de severidad progresiva que conduce al
paciente a la muerte cuando no se realiza un diagnstico precoz e inicio
inmediato del tratamiento adecuado. Como dato particular, y
simultneamente con el cuadro antes descripto, el beb presenta un olor
caracterstico en piel y orina que se asemeja a azcar quemada o jarabe
de arce. Desde el punto de vista bioqumico se caracteriza por un
defecto en la enzima Deshidrogenasa de los cetocidos de cadena
ramificada (actividad 0-2 %), el incremento de Val, Leu e Ile en sangre y
orina, la presencia de Alo-Ile, y la excresin urinaria de los
correspondientes cetocidos.
2. Forma Intermitente: su forma de presentacin es ms leve, y las crisis
metablicas recurrentes se desencadenan por infecciones o despus de
una ingesta importante de protenas. Los individuos afectados por esta
forma pueden ser sanos durante su primera infancia e incluso hasta
antes de la adolescencia. Durante los perodos de crisis se encuentran
niveles aumentados de Val, Leu e Ile, mientras que en los perodos
intercrticos el cuadro clnico-bioqumico es absolutamente normal. A
pesar de esto, y de acuerdo con el grado de severidad observado
durante las crisis se pueden presentar secuelas neurolgicas
importantes.
3. Forma Intermedia: se caracteriza por un cuadro clnico menos severo
que la forma Clsica. Los individuos afectados presentan retraso de
crecimiento y retardo mental en ausencia de tratamiento.
Bioqumicamente se caracteriza por presentar una actividad enzimtica
residual de 3 a 30 % con una elevacin persistente de Val, Leu e Ile.
4. Forma Respondedora a Tiamina: se presenta en pacientes con un
cuadro clnico similar a la forma intermedia, pero a diferencia de aquella

requiere para su tratamiento adems de la restriccin dietaria de Val,

Leu e Ile, la administracin de dosis variables de tiamina.
5. Forma Deficiente en Subunidad E3: es una forma muy poco frecuente
que afecta a una de las 3 subunidades de la enzima Deshidrogenasa de
los cetocidos de cadena ramificada. Se caracteriza por presentar un
cuadro similar al de la forma intermedia pero acompaado de acidosis
lctica.
Con respecto al tratamiento la nica alternativa posible de es mediante la
restriccin dietaria de protenas y ms especficamente de los aminocidos de
cadena ramificada, siendo su efectividad dependiente de la precocidad con que
se implemente el mismo. Las normas recomiendan iniciarlo antes de los 10
das de vida para asegurar la ausencia de secuelas neurolgicas.