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CARRERA DE INGENIERA AGROPECUARIA

SANTO DOMINGO

INFORME DE BIOQUIMICA

PERODO

Agosto 2013 Diciembre 2013

ASIGNATURA

Bioquimica

ESTUDIANTES

Cristian Jaramillo
Adrian Borbor
Andrs Garca
John Gngora

NIVEL

Tercero

DOCENTE

Ing. Freddy Enriquez

FECHA

15 de Septiembre del 203

SANTO DOMINGO - ECUADOR

2013

TEMA: Extraccin e identificacin de Carbohidratos

OBJETIVO GENERAL:

Comprobar mediante tcnicas sencillas de laboratorio, que tipo de glcidos estn

presentes en determinados alimentos de consumo humano tomando como base los
conocimientos tericos adquiridos en la asignatura de bioqumica.

OBJETIVOS ESPECFICOS:

Extraer carbohidratos de diferentes extractos vegetales

Identificar azucares reductores y no reductores
Identificar el almidn y mediante su hidrolisis determinar el poder reductor de los
azucares que lo conforman.

INTRODUCCION:
Sabiendo que los carbohidratos tambin llamados hidratos de carbono son constituyentes de los
tres principales grupos qumicos que forman la materia orgnica junto con las grasas y protenas,
se llev a cabo la identificacin de carbohidratos lo cual hace referencia a los cambios que se
dieron en cada uno de las muestras de fructosa, sacarosa y almidn, carbohidratos con los que se
trabaj con ayuda de la adicin de otras sustancias que reaccionaron, y as pudimos observar
cmo fueron esos cambios e identificar los tipos de carbohidratos a los que pertenecan cada uno
de los elementos. Palabras Claves: Fructosa, almidn, sacarosa, reaccin, mezcla, carbohidratos.
Por medio de este informe daremos a conocer los cambios que se dieron en las sustancias al ser
mezcladas en agua con (almidn), fruta dulce (fructosa), y el azcar (sacarosa), haciendo
referencia a estos como fuentes de carbohidratos; y luego al aplicarles otros elementos reactivos
como el lugol y el fehling a y b que permitieron identificar y comprobar los principales tipos de
carbohidratos al que pertenecan cada una de las mezclas, si fueron monosacridos, disacridos
o polisacridos, y as verificar si fueron positivos o negativos para cada uno; teniendo en cuenta
los colores que se adquirieron en cada una de las muestras y cuando fueron expuestas al calor con
el bao mara.
Existen muchos tipos de carbohidratos y se encuentran principalmente en los alimentos tipo
almidn, como el pan, fideos y arroz, as como en algunas bebidas endulzadas con azcares.
La principal funcin es proporcionar energa, aunque tambin desempean una funcin
importante para la estructura y el funcionamiento de las clulas, tejidos y rganos

REVISION DE LITERATURA:
Los carbohidratos
Segn McKee (2003), los carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la
biosfera y a su vez los ms diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de
los vegetales y tambin en los tejidos animales, como glucosa o glucgeno. Estos sirven como
fuente de energa para todas las actividades celulares vitales.
Clasificacin de los Carbohidratos
Atendiendo a la complejidad de su estructura los glcidos se clasifican en:
1.- Monosacridos o azcares simples:
Son alcoholes con 3 hasta 7 tomos de carbono que contienen un grupo aldehdo o cetnico, por
lo que pueden considerarse como productos de oxidacin de alcoholes polivalentes en los que
una funcin alcohlica primaria o secundaria se transforma en un grupo carbonilo (CO). Si este
grupo carbonilo es terminal en la cadena, el monosacrido es una aldosa, si no se encuentra en
posicin terminal, el monosacrido es una cetosa.
Si se toma en cuenta el nmero de tomos de carbono se dividen en:
Triosas
Tetrosas
Pentosas
Hexosa y
Heptosas
Los monosacridos ms sencillos son los de 3 tomos de carbono: el gliceraldehdo o aldehdo
glicrido y la dihidroxiacetona, que se obtienen por oxidacin de la glicerina.
Los monosacridos ms importantes son:
Gliceraldehdo y la dihidroxiacetona: ambos compuestos se encuentran en clulas
vegetales y animales, desempean un papel muy importante en el metabolismo de los
carbohidratos.
La ribosa y la desoxirribosa: Se encuentran en la naturaleza en la forma cclica de
estructura furanosa, se encuentran en los cidos nucleicos de todas las clulas vivas. La
ribosa es una intermediaria en la ruta metablica de los carbohidratos y un componente
de algunas enzimas.

La glucosa: Es el azcar ms abundante en la naturaleza. Se encuentra en frutas maduras,

se conoce como dextrosa. La glucosa es el azcar circulante de los animales; la sangre
contiene aproximadamente 0.08 % de glucosa. Requiere el humano para la sntesis de la
lactosa (glndulas mamarias). La galactosa se halla en vegetales y animales en forma de
numerosos derivados: glucolpidos (sustancia blanca del cerebro, nervios), polisacridos
complejos (pectinas, gomas, agar-agar, muclagos, etc.).

2.- Disacridos:
Son glcidos formados por dos molculas de monosacridos unidas entre s por el denominado
enlace glucosdico. Por esta razn al hidrolizarse se producen dos unidades monosacridos. Su
frmula general es:

Tienen sabor dulce, cristalizan bien y son solubles en agua. El trmino glucosdico se refiere al
enlace carbono-oxgeno-carbono que une a los dos componentes del acetal.
Los disacridos naturales ms importantes son:
Sacarosa: Tambin llamada azcar de caa o de remolacha, no se presenta en el organismo
animal, aunque es un importante alimento bsico, se emplea como edulcolorante de alimentos.
La sacarosa est compuesta de dos unidades monosacridas diferentes, una molcula de glucosa y
una molcula de fructosa, con eliminacin de una molcula de agua.
El cuerpo humano es incapaz de utilizar la sacarosa o cualquier otro disacrido en forma directa
(la molcula es muy grande y no pasa las membranas celulares). El disacrido debe fragmentarse
por hidrlisis. Las enzimas catalizan la reaccin de hidrlisis, tambin se logra con HCl.

Polisacridos: Son los carbohidratos ms abundantes que existen en la naturaleza. Sirven como
sustancias alimenticias de reserva y como componentes estructurales de las clulas. Los tres
polisacridos ms importantes son: almidn, glicgeno y celulosa.
Almidn: Es el carbohidrato de reserva ms importante y la fuente principal de caloras en la
dieta humana. Es un polisacrido de origen vegetal que constituye la principal reserva de energa
de las plantas. El almidn es un polvo blanco constituido por grnulos de estructura casi

cristalina. Es inspido. Es soluble en agua fra y al calentarse en agua tiende a formar una
suspencin coloidal llamada engrudo. El almidn est formado por dos fracciones estructurales:
la amilosa y la amilopectina.
Reaccion de molisch
Permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una muestra; se basa en la accin
hidrolizante y deshidratante que ejerce el cido sulfrico sobre estos compuestos. Como se sabe,
los cidos concentrados originan una deshidratacin de los azcares para rendir furfurales, que
son derivados aldehdicos del furano. Los furfurales se condensan con los fenoles para dar
productos coloreados caractersticos, empleados frecuentemente en el anlisis colorimtrico
Las pentosas y hexosas (tanto aldosas como cetosas) en presencia de cidos minerales como el
cido sulfrico y a temperaturas elevadas sufren procesos de deshidratacin originando furfural
(derivados de pentosas) o hidroximetilfurfural (derivados de hexosas)

Los monosacridos en caliente y medio muy cido, sufren una deshidratacin que conduce a la
formacin de un anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, segn se parta de pentosas o
hexosas. Los oligosacridos y polisacridos tambin sufren estas reacciones, ya que el medio
cido favorece la hidrlisis previa del enlace glicosdico. Los furfurales formados se combinan
fcilmente con diversos fenoles y aminas, dando reacciones coloreadas.
Estos compuestos, furfural o hidroximetilfurfural, reaccionan con compuestos aromticos
(fenoles, aminas cclicas o heterociclos) dando productos coloreados. Aunque son pruebas
especficas de monosacridos, los oligosacridos y polisacridos tambin dan positivo, ya que en
medio cido se hidroliza el enlace glicosdico. Se disponen de diferentes tcnicas, dependiendo
del reactivo utilizado.

Reactivo de Fehling
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin descubierta
por el qumico alemn Hermann Von Fehling y que se utiliza como reactivo para la
determinacin de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa en la orina.
El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:
Sulfato de cobre cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
Sal de Seignette (Tartrato mixto de Potasio y Sodio), 150 g; solucin dehidrxido de sodio al
40%, 3; agua, hasta 1.000 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del
hidrxido de cobre (II).
El ensayo con el licor de Fehling se funda en el poder reductor del grupo carbonilo de
un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre
(I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la
forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si
un azcarreduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor.
Se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores, y es til para demostrar la
presencia de glucosa en la orina, y tambin para detectar derivados de la glucosa como la
sacarosa o la fructosa.
Al reaccionar con monosacridos, se torna verdoso; si lo hace con disacridos, toma el color
del ladrillo. (DOcon, 1998)
Reaccin del lugol con los carbohidratos
La reaccin del Lugol es un mtodo que se usa para identificar polisacridos.
El almidn en contacto con el reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un
color azul-violeta caracterstico. Esa coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se
introduce entre las espiras de la molcula de almidn. Por lo tanto, no es una verdadera reaccin
qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de
esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta. Este complejo es sensible a la temperatura,
ya que si se calienta el tubo, el color desaparece. Esto se debe a que las espiras del almidn se
"desarman", por as decirlo, y el yodo se libera. Una vez fro, las espiras se reorganizan y se
vuelve a ver el color.
Tipos de azcares reductores
Todos los monosacridos (azcares simples que no pueden descomponerse en molculas ms
pequeas) son azcares reductores. Dos de los tres tipos de azcares disacridos (con dos anillos
de sustancias qumicas), maltosa y lactosa, tienen la estructura qumica abierta necesaria para
actuar como agentes reductores. La estructura simple de los monosacridos les permite romperse

dos veces tan rpidamente como los disacridos, mientras que los disacridos se rompen en sus
partes ms pequeas primero.
Tipos de azcares no reductores
El tercer tipo de disacridos, sacarosa, y polisacridos (azcares con anillos qumicas mltiples)
son los azcares no reductores. Los polisacridos - almidones - tienen estructuras cerradas, que
utilizan tomos libres para unir entre s los anillos mltiples, y tardan mucho ms tiempo en
descomponerse.
MATERIALES:
Materiales
Cuchillo
Remolacha
Uva
Tubos de ensayo
Vasos de precipitacin
Mortero
Mechero
Papa

Reactivos
Agua destilada
Lugol
cido sulfrico
Filin A y B
Glucosa
Sacarosa
Lactosa
Almidn de papa y yuca

PROCEDIMIENTO:
Identificacin de Molisch
1. Se coge la papa y se la raya lo ms que se pueda, el mismo procedimiento de la papa
se lo hace con la remolacha, la uva se coge y con ayuda de un mortero la vamos
aplastar la uva no debe tener pepas, y si las posee retrelas.
2. Tomamos 2 tubos de ensayo y de la solucin preparada con papa y remolacha, se
coloca 0,1 ml de alfa naftol y 1 ml de cido sulfrico.

1.
2.
3.
4.
5.

Prueba del azcar redactora

Se toman 3 tubos de ensayo y uno va estar con sacarosa otro con glucosa y el ltimo
con fructosa.
A cada tubo se les coloca filin Ay B, y se los deja calentar en 300ml de agua hasta
que cambien su coloracin.
Se toman 2 tubos de ensayo mas y a cada tubo se le coloca cido clorhdrico, aun
tubo se le coloca remolacha y al otro sacarosa.
Se toma otro tubo con 1 ml de almidn de papa ms lugol y se lo deja calentar en
agua.
Con otro tubo de ensayo se coloca 1 ml de almidn de yuca ms cido sulfrico y se
lo deja calentar en agua.

6. Luego del tubo de ensayo nmero 5 se toma 1 ml de solucin se le aade nuevamente

lugol y esperamos ver la coloracin que toma.
7. En otro tubo de ensayo se coloca 1 ml de almidn de yuca ms cido clorhdrico y se
lo deja calentar en agua.
8. Luego se toma otro tubo de ensayo con 1ml de solucin del paso nmero 7, se le
coloca lugol y se lo deja calentar.
9. Se toma 1 ml de la solucin de almidn del paso 7 y se coloca filin Ay B y se lo pone
a calentar en agua.
RESULTADOS Y DISCUSIN:

Se rayo la papa, remolacha y

las uvas se las aplasto para
agregarles 5ml de agua.

Cuando se agrego el fehling A y B la muestra

de uva (izquierda) se torno azul y la de
remolacha (derecha) color verde.

En el jugo de uva se produce una reaccin positiva

y aparece un precipitado rojo ladrillo al reaccionar
el Cu del CuSO4 con el OH hemiacetlico de los
azcares del zumo. El Cu se precipito esto nos da
como resultado que es un azcar reductor.
En la remolacha no se produjo este color ya que
posee una azcar no reductora que es la sacarosa.

A la solucin que sali de la papa se

coloco en una caja petri y se la puso
en la estufa por 24 horas

IDENTIFICACION DE MOLISH

Se formo el anillo
morado en 4 tubos

2 ml de Agua
2 ml de Sacarosa
2 ml de Fructosa
2 ml de Glucosa
2 ml de Lactosa

SUSTANCIAS
2 gotas de Naftol + Acido Sulfrico
2 gotas de Naftol + Acido Sulfrico
2 gotas de Naftol + Acido Sulfrico
2 gotas de Naftol + Acido Sulfrico
2 gotas de Naftol + Acido Sulfrico

REACCIN
No reacciono
Reacciono formo anillo morado
Reacciono formo anillo morado
Reacciono formo anillo morado
Reacciono formo anillo morado

Para Harris (2004) la reaccin que se dio al formar el anillo morado se basa en la accin
hidrolizante y deshidratante del cido sulfrico sobre los hidratos de carbono. En dicha reaccin
el cido sulfrico cataliza la hidrlisis de los enlaces glicosdico de las muestras y la
deshidratacin a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas).
Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reaccin de Molisch)
dando un producto coloreado (anillo morado).

IDENTIFICACIN DE AZCARES REDUCTORES Y NO REDUCTORES

2 ml de Sacarosa
2 ml de Fructosa
2 ml de Glucosa
2 ml de Lactosa

SUSTANCIAS
Fehling A y B
Fehling A y B
Fehling A y B
Fehling A y B

REACCIN
Positiva
Negativo
Positiva
Positiva

Todos los monosacridos son reductores porque tienen un grupo Aldehdo (aldosas) libre (en su
forma acclica). Por esa razn la Fructosa no es reductor ya que no poseen un carbono
anomrico libre
IDENTIFICACION DE POLISACARIDOS

Al momento de colocar las 2

gotas de lugol un tubo
reacciono positivamente.

Segn Muoz (2006) dice que el almidn en contacto con el Lugol toma un color azul-violeta
caracterstico se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No
es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica
las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta. Esto se
comprob en la prctica realizada ya que el almidn se torno de color violeta y la fructosa no.

Este complejo es sensible a la temperatura, ya que si se calienta el tubo, el color desaparece. Esto
se debe a que las espiras del almidn se "desarman", y el yodo se libera una vez fro, las espiras
se reorganizan y se vuelve a ver el color.
HIDRLISIS DE ALMIDON

El almidn se encuentra compuesto de amilosa y amilopectina. La amilosa es un polisacarido

helicoidal no ramificado con enlaces alfa 1-4. Por su parte el lugol se encuentra compuesto de
Yodo el cual queda impregnado en el centro de las hlices de la amilosa y es as como en
presencia de almidn el producto se torna de un color morado.
CONCLUSIONES:

La identificacin de azucares reductores y no reductores se las comprob por el mtodo

de Fehling A y B, en donde salieron reductores la sacarosa, glucosa y lactosa reductores
porque tienen un grupo Aldehdo libre en su forma acclica. Mientras que el nico no
reductor es la fructuosa ya que este no poseen un carbono anomrico libre.
Por medio de la extraccin de las uvas, la remolacha y la papa, se pudo decretar las
diferentes reacciones, para la identificacin de carbohidratos, polisacridos, de azucares
reductores y no reductores en la practica

Al momento de la hidrolisis del almidn que esta formado por amilosa y amilopectina, en
la practica formo un color morado por el lugol que contiene yodo este queda adherido en
las hlices de la amilosa dando positivo.
A pesar de que la glucosa, fructosa son de composiciones similares no muestran las
mismas reacciones como el color al rato de identificarlas.
A travs de este informe pudimos ver como se identifican los tipos de carbohidratos de
diferentes sustancias las cuales son mezcladas con reactivos qumicos que ayudan a
identificar estos tipos de glcidos.

BIBLIOGRAFIA:

DOcon MC, Garca MJ, Vicente JC (1998): Estudio general del metabolismo de los
hidratos de carbono. En DOcon MC, Garca MJ, Vicente JC (eds): Fundamentos y
Tcnicas de Anlisis Bioqumico, 1 Ed. Editorial Paraninfo (Madrid, Espaa).
Harris RA (2004): Metabolismo glucdico I: Principales rutas metablics y su control. En
Devlin TM (eds): Bioqumica, 4 Ed. Editorial Revert (Barcelona, Espaa).
Muoz E (2006): Propiedades qumicas de los azcares. En Lozano JA, Tudela J (eds):
Prcticas de bioqumica. Experimentacin y Simulacin, 1 Ed. Editorial Sntesis
(Madrid, Espaa).
McKee T, Mckee JR (2003): Hidratos de carbono. En Mckee T, McKee JR (eds):
Bioqumica. La base molecular de la vida, 3 Ed. Editorial McGraw-Hill Interamericana
(Madrid, Espaa).