Aula de Microbiologia.

Introduo ao Crescimento Microbiano

Em microbiologia, o termo crescimento refere-se a um aumento do nmero de clulas

e no ao aumento das dimenses celulares.

Medidas do crescimento microbiano

O crescimento dos microrganismos pode ser mensurado por diferentes tcnicas, tais
como pelo acompanhamento da variao no nmero ou peso de clulas, por exemplo.
Dentre as diferentes tcnicas utilizadas, descreveremos o exemplo a seguir.

Contagem total de clulas

Esta metodologia envolve a contagem direta das clulas em um microscpio, seja de

amostras fixadas (e coradas) ou analisadas a fresco, (sendo aplicados cerca de 10 l da
suspenso, na maioria dos casos), utilizando-se cmaras de contagem. A contagem
direta uma tcnica rpida, mas tem como principais limitaes a impossibilidade de
distino entre clulas vivas e mortas.

Figura mostrando a cmara de contagem de clulas.

Curva de crescimento (cultura descontnua)

Quando uma cultura microbiana desenvolve-se em um sistema fechado, pode-se

confeccionar uma curva de crescimento. Esta pode ser dividida em diferentes etapas:
lag, log, estacionria e de declnio.

Lag:

um perodo onde o nmero de organismos permanece praticamente inalterado. Esta

fase apenas observada quando o inculo inicial proveniente de culturas mais
antigas. A fase lag ocorre porque as clulas de fase estacionria encontram-se
desprovidas de vrias coenzimas essenciais e/ou outros constituintes celulares
necessrios absoro dos nutrientes presentes no meio.

Figura mostrando todas as etapas que ocorrem em uma curva de crescimento bacteriano de
uma cultura de bactrias em um sistema fechado.

A fase lag tambm observada quando as clulas sofrem traumas fsicos (choque
trmico, radiaes) ou qumicos (produtos txicos), ou quando so transferidas de um
meio rico para outro de composio mais pobre, devido a necessidade de sntese de
vrias enzimas. Assim, durante este perodo observa-se um aumento na quantidade de
protenas, no peso seco e no tamanho celular.

Log ou exponencial:

Nesta etapa, as clulas esto plenamente adaptadas, absorvendo os nutrientes,

sintetizando seus constituintes, crescendo e se duplicando. A taxa de crescimento
exponencial varivel, de acordo com o tempo de gerao do organismo em questo.
Geralmente, ao final da fase log, as bactrias passam a apresentar fentipos novos,
decorrentes do processo de comunicao denominado "quorum sensing".

Estacionria:

Nesta fase, os nutrientes esto escasseando e os produtos txicos esto tornando-se

mais abundantes. Nesta etapa no h um crescimento lquido da populao, ou seja, o
nmero de clulas que se divide equivalente ao nmero de clulas que morrem. Na
fase estacionria que so sintetizados vrios metablitos secundrios, que incluem
antibiticos e algumas enzimas. Nesta etapa ocorre tambm a esporulao das
bactrias.

Declnio

A maioria das clulas est em processo de morte, embora outras ainda estejam se
dividindo. A contagem total permanece relativamente constante, enquanto a de
viveis cai lentamente. Em alguns casos h a lise celular. Culturas descontnuas
tendem a sofrer mutaes que podem repercutir na populao como um todo. As
prprias condies ambientais tendem a promover variaes de carter fenotpico
(reversvel) nas culturas.

Efeito dos fatores ambientais no crescimento

O crescimento dos microrganismos grandemente afetado pelas condies fsicas e

qumicas do ambiente onde se encontram, sendo que estas podem influir
positivamente ou negativamente de acordo com o microrganismo em questo.

Temperatura

Corresponde a um dos principais fatores ambientais que influenciam o

desenvolvimento bacteriano. A medida que h um aumento da temperatura, as
reaes qumicas e enzimticas na clula tendem a tornar-se mais rpidas, acelerando
a taxa de crescimento. Entretanto, em determinadas temperaturas inicia-se o processo
de desnaturao de protenas e cidos nuclicos, inviabilizando a sobrevivncia
celular.

Tipos de bactrias em relao temperatura tima de crescimento:

pH

Os ambientes naturais tem uma faixa de pH de 5 a 9, o que comporta o crescimento de

diferentes tipos de microrganismos.

Bactrias - faixa entre 7, com algumas acidfilas (Thiobacillus de 0,5 a 6,0 com timo
entre 2 e 3,5) e outras alcaliflicas (Bacillus e Archaea).

Fungos - tendem a ser mais acidfilos que as bactrias (pH <5).

Tenso de O2:

Extremamente importante no desenvolvimento, uma vez que os microrganismos

comportam-se de forma bastante distinta, sendo classificados como aerbios,
anaerbios facultativos, anaerbios estritos, anaerbios aerotolerantes e
microaerfilos (requerem concentraes baixas de O2).

Aerbios Obrigatrios: Fazem metabolismo apenas na presena de oxignio

Anaerbios Estritos: Incapazes de usar O2 no metabolismo e so inibidas por ele.

Anaerbios Facultativos: Crescem aerobicamente e anaerobicamente, obtendo

energia pela fermentao de compostos orgnicos

Anaerbios Aerotolerantes: Toleram [O2] at 2-8% (responsveis pela maioria das

infeces)

Figura mostrando as bactrias: 1) Aerbias. 2)anaerbias, 3)Anaerbias Facultativas, 4)

Microaerfilos e 5) Anaerbios Aerotolerantes.

gua

Essencial a qualquer microrganismo, embora as necessidades sejam variadas. o

solvente universal, mas sua disponibilidade varivel (solues com acares ou sais
tm menos gua disponvel).