Revista de Toxicologa

Asociacin Espaola de Toxicologa

revtoxicol@unex.es

ISSN (Versin impresa): 0212-7113

ISSN (Versin en lnea): 1697-0748
ESPAA

2001
TOXICOLOGA ANALTICA
Revista de Toxicologa, ao/vol. 18, nmero 003
Asociacin Espaola de Toxicologa
Pamplona, Espaa
pp. 177-180

Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina y el Caribe, Espaa y Portugal

Universidad Autnoma del Estado de Mxico
http://redalyc.uaemex.mx

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El botulismo es una intoxicacin aguda causada por una exotoxina,

producida por el bacilo Clostridium botulinum y caracterizada por
una parlisis muscular progresiva descendente. La toxina botulnica
es la sustancia ms txica que se conoce. La solicitud de investigacin de la toxina botulnica est relacionada con diversas categoras
de botulismo: alimentario, aviar, infantil y en aquellos casos en los
que se presenta un cuadro neurolgico semejante a la intoxicacin
botulnica. El alimentario y aviar tienen su origen en la ingestin de
toxina preformada en los alimentos, mientras que el infantil se
caracteriza por la colonizacin del tracto intestinal por el bacilo que
produce la toxina. La determinacin de la toxina en el laboratorio se
realiza mediante el bioensayo en ratn, empleando antitoxinas especficas. En este trabajo hacemos una revisin de los 56 ensayos que
hemos realizado en el INT de Madrid en los tres ltimos aos. Un
38% del total tena relacin con el consumo de alimentos; un 13%
se corresponda con pacientes con patologa neurolgica; un 5% se
relacionaba con botulismo infantil y un 44% se corresponda con
botulismo aviar. Se discute la importancia de la investigacin en las
diferentes categoras, haciendo especial hincapi en la necesidad de
investigar la toxina en el Sndrome de Muerte Sbita del Lactante
(Botulismo Infantil), ya que hemos detectado toxina en dos de tres
casos investigados.
TOXICOLOGAANALTICA
TAN-1.
ANALISIS DE COCAINA Y BENZOILECGONINA EN PELO
POR HPLC-PDA. P. Fernndez, M. Len, A.M.Bouzas, A.M.Bermejo, M.J.Tabernero. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Santiago de Compostela.
Se analizan cocana y benzoilecgonina en pelo mediante Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC) acoplada a un detector
Photo Diode Array (PDA) y a una columna Nova-Pack C18
(3,9x150mm). Se utiliz articana como patrn interno, y metanoltampn fosfato 0,02M pH 7 (70-30) como fase movil, a un flujo de
0,4 mL/min. Se construyen las rectas de calibrado en fase mvil,
representando la relacin de reas de cada analito/articana frente a
la concentracin. Las ecuaciones obtenidas son: y = 0,3093x +
0,0342 (R=0,9989) para la cocana e y = 0,4653x + 0,3720
(R=0,9881) para la benzoilecgonina. Se observa una buena linealidad en el rango de concentraciones estudiada, que va desde 0,1 a 10
mg/mL. Respecto al estudio de la precisin del mtodo, los coeficientes de variacin para cada nivel de concentracin no sobrepasaron el 5%. Los lmites de deteccin y cuantificacin demostraron
una buena sensibilidad del mtodo propuesto. El mtodo fue aplicado a 54 muestras reales, que se sometieron a una digestin enzimtica con DTT y pronasa para liberar las drogas del pelo, seguida de
una purificacin de las muestras mediante extraccin lquido-lquido con toxitubos A.
TAN-2.
ANLISIS DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLICCLICOS EN PESCADO POR CROMATOGRAFA LQUIDA DE
ALTA RESOLUCIN. MJ Moreno, MI Arufe, JLRomero. Unidad
de Medicina Legal y Toxicologa. Facultad de Medicina. Plaza Fra gela n 9, 11003 Cdiz.
Los hidrocarburos aromticos policclicos (PAH) son contaminantes
ambientales encontrados en una gran variedad de alimentos.
Muchos de ellos, como el benzo(a)pireno, resultan potentes carcingenos en animales y en el hombre. En el presente trabajo se des-

cribe un mtodo analtico para la determinacin en pescado de 15

PAH clasificados por la Agencia de Proteccin Ambiental de los
Estados Unidos (EPA) como "contaminantes prioritarios". El procedimiento incluye un primer paso de homogeinizacin en ciclohexano, particin lquido-lquido en varias etapas y purificacin en
columna de slica gel. La identificacin y cuantificacin se llevan a
cabo por cromatografa lquida de alta resolucin con deteccin de
fluorescencia. En la puesta a punto del mtodo se adicionan distintas cantidades de una mezcla patrn de PAH, de forma que las concentraciones finales oscilan entre 1.6 y 160 Fg/kg, dependiendo del
compuesto individual. Se calcula el porcentaje de recuperacin
medio de los distintos PAH, que resulta ser del 65.7% y del 56.8%
para las muestras de bajo y alto contenido en grasas, respectivamente, y se determinan otros parmetros relacionados con la validacin del mtodo analtico.
TAN-3.
ANLISIS DE OPICEOS EN SALIVA POR CROMATOGRAFA GASEOSA-ESPECTROMETRADE MASAS (CG/EM)
EN IMPACTO ELECTRNICO (EI) E IONIZACIN QUMICA
POSITIVA (PCI). P.Cmpora, A.M.Bermejo, M.J.Tabernero, P. Fernndez. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Santiago de Compostela.
La saliva es una matriz biolgica alternativa para el anlisis de drogas de abuso, que presenta algunas ventajas sobre las muestras tradicionales como sangre y orina. El mtodo fue desarrollado para
determinar simultneamente codena, morfina y 6-acetilmorfina
(MAM) en saliva. Las muestras fueron recogidas utilizando un dispositivo comercial, denominado Salivette. Los analitos fueron
extrados mediante extraccin lquido lquido con toxitubos A y
derivatizados con N, O Bis-trimetilsilil-trifluoroacetamida (BSTFA)
y trimetilclorosilano (TMCS) al 1%. El anlisis por CG/EM se realiz en modalidad de ion nico (SIM) utilizando dos tipos de fragmentacin, EI y PCI. La respuesta del detector fue lineal para cada
analito en un rango de concentraciones de 10-500 ng/mL en EI y de
30-500 ng/mL en PCI. El lmite de deteccin fue de 1,0; 1,8; y 0,3
ng/mL en EI y 0,7; 6,1; y 1,1 ng/mL en PCI, para codena, morfina
y MAM, respectivamente. Se analizaron por ambas metodologas
propuestas 72 muestras reales de pacientes en tratamiento de desintoxicacin a opiceos y se correlacionaron las concentraciones salivares (EI v/s PCI) encontradas. Conclusin: Se estableci una correlacin positiva y estadsticamente significativa para cada analito, en
el anlisis de opiceos por EI y PCI en saliva.
TAN-4.
APLICACIN DEL SISTEMA DE MICROEXTRACCIN EN
FASE SLIDA A LA DETECCIN DE ANTIDEPRESIVOS
TRICCLICOS EN PLASMA POR GC-FID. A. de Castro, E.
Gallardo, O. Quintela, A. Cruz, M. Lpez-Rivadulla. Servicio de
Toxicologa Forense, Instituto de Medicina Legal, Universidad de
Santiago de Compostela.
El empleo de la SPME en el anlisis cuantitativo de antidepresivos
tricclicos por GC-FID se presenta como una alternativa ventajosa
frente a la extraccin lquido-lquido o slido-lquido, fundamentalmente por la reduccin del tiempo necesario para el anlisis. En este
ensayo hemos partido de muestras de 2 ml de plasma, con concentraciones de antidepresivo de 0.5, 1, 2.5 y 5 g/ml; como I.S. se ha
usado SKF 20 g/ml. La fibra se pone en contacto con la muestra
durante 30 minutos, mediante agitacin. A continuacin, se deja
desorber durante 5 minutos, y 1 minuto ms a partir del inicio del

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cromatograma. Se ha comparado el procedimiento con los llevados

a cabo con extraccin lquido-lquido, y se indican las ventajas e
inconvenientes del uso de estos sistemas en la rutina de un laboratorio de toxicologa. Asimismo se ha aplicado la tcnica a casos reales que proceden del mbito hospitalario.
TAN-5.
APLICACIN DEL SISTEMA DE MICROEXTRACCIN EN
FASE SLIDA PARA LA DETERMINACIN DE ANESTSICOS LOCALES EN PLASMA POR GC-MS. E. Gallardo, A. De
Castro, O. Quintela, A. Cruz, M. Lpez- Rivadulla. Servicio de
Toxicologa Forense, Instituto de Medicina Legal, Universidad de
Santiago de Compostela.
Se ha utilizado la microextraccin en fase slida (SPME) por inmersin directa en combinacin con la Cromatografa de gases- espectometra de masas para la determinacin de anestsicos locales en
muestras de plasma humano. Se han utilizado dos tipos de fibras
para llevar a cabo el anlisis: una compuesta de carbowax y divinilbenceno y la otra de polidimetilsiloxano. Se presentan las ventajas
de uso de cada una de ellas. Con este procedimiento se han preparado cinco anestsicos en plasma y se ha aplicado el mtodo para la
determinacin de los niveles de mepivacana usando el SKF como
patrn interno. A partir de 1 ml de plasma la fibra se mantiene en
contacto con la muestra durante 35 minutos, para posteriormente
proceder a su desorcin en el inyector del cromatgrafo a 270C
durante 5 minutos. El rango de linealidad result de 0,25-2,5 g/mL
con LOD y LOQ de 1,2 y 3,9 ng/mL respectivamente. Parmetros
que influyen en el proceso como la precipitacin previa de protenas, tiempo de desorcin y necesidad de agitacin fueron estudiados
para posteriormente aplicar el proceso a la monitorizacin de mepivacana en pacientes.
TAN-6.
DETERMINACIN DE CROMO VI Y CROMO III EN AGUAS
POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA
ELECTROTRMICA. M. Lpez-Artiguez y M. Repetto. Instituto
Nacional de Toxicologa. Sevilla. E-mail: artiguez@cica.es.
Se describe un mtodo sensible para la cuantificacin de cromo(VI)
y cromo (III) en aguas. En medio cido, el cromo (VI) reacciona con
el agua oxigenada originando un pentxido de cromo, extraible por
metilisobutilcetona, mientras que el cromo (III) no reacciona y no se
extrae por el disolvente orgnico. El cromo total presente en la
muestra, se acompleja con pirroliditiocarbamato amnico y se
extrae con metilisobutilcetona. La posterior cuantificacin de cromo
(VI) y total se efecta por espectrofotometra de absorcin atmica
a 357,9 nm utilizando cmara de grafito, frente a una curva de calibrado preparada previamente de la misma forma. Por diferencia
entre los valores de cromo total y cromo (VI) se calcula la concentracin de cromo (III). Por la inestabilidad del pentxido de cromo
en el medio orgnico, el anlisis debe efectuarse rpidamente.
TAN-7.
DETERMINACIN DE HERONAEN SALIVA POR GC/MS-EI.
P.Cmpora, A.M.Bermejo, M.J.Tabernero, P.Fernndez. Instituto de
Medicina Legal. Seccin de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Santiago de Compostela.
Se describe un mtodo analtico para la determinacin de herona en
saliva. Su inters radica en la importancia que tiene, hoy da, la utilizacin de la saliva para el anlisis de drogas de abuso, pudindose
presentar como una alternativa al anlisis de sangre y/o orina en

adictos a herona. Debido a la corta vida media que presenta esta

sustancia (3 min) se estudi la posibilidad de detectarla en este fluido biolgico. El mtodo propuesto se basa en la utilizacin de la
cromatografa gaseosa acoplada a la espectrometra de masas, con
un impacto electrnico de 70 eV y trabajando en modalidad de ion
selectivo (SIM). Para ello las muestras de saliva son sometidas a un
procedimiento de extraccin lquido-lquido con Toxitubos A y los
analitos extrados, previamente evaporados y reconstituidos con
acetonitrilo, son inyectados directamente en el cromatgrafo de
gases. Se ha obtenido linealidad en un rango de concentraciones de
10-750 ng/mL, con un coeficiente de regresin lineal r=0,9995,
unos coeficientes de variacin menores del 7% y un rendimiento de
extraccin cercano al 100%. El lmite de deteccin fue de 1,4 ng/mL
y el de cuantificacin de 4,8 ng/mL. Se analizaron 74 muestras reales, resultando 19 de ellas positivas para esta droga, en un rango de
concentraciones de 5,0-2028,9 ng/mL. Conclusin: La saliva resulta un fluido biolgico idneo para la deteccin de herona.
TAN-8.
EXTRACCIN EN FASE SLIDA Y DERIVATIZACIN PARA
LA DETERMINACIN POR HPLC-DAD DE GABAPENTINA
EN SUERO. ML.Soria, S.Garca, M. Menndez y M. Repetto. Instituto Nacional de Toxicologa. Apdo 863. 41080 Sevilla.
La gabapentina, cido 1-(aminometil)ciclohexanoactico, es un
agente anticonvulsivante utilizado en pacientes epilpticos que no
son adecuadamente controlados con otros medicamentos. Los mtodos de anlisis publicados son laboriosos ya que su estructura y propiedades qumicas dificultan tanto su extraccin de matrices acuosas como su determinacin por tcnicas cromatogrficas. En el caso
de la Cromatografa Lquida es necesario derivatizar para producir
cromforos que absorban en el ultravioleta o que le confieran fluorescencia. Este ltimo procedimiento es el ms utilizado para aminocidos (derivados con el o-ftaldialdehdo). Se propone un mtodo
rpido y sensible para muestras de suero, con un primer paso de
extraccin en fase slida por C18 (2 mLde suero acidificado) y posterior derivatizacin con cloruro de p-toluensulfonilo (cloruro de
tosilo). La gabapentina N-tosilada es analizada por fase reversa con
detector de fotodiodos y cuantificada a 228 nm. La curva de calibrado del derivado, en muestras de suero contaminadas con gabapentina, fue lineal (r2 > 0.99) en un rango de concentraciones de
0.5-5 mg/L. Tanto las recuperaciones (76.97-89.31%), la estabilidad
del derivado, precisin y reproducibilidad del mtodo (< 10%),
como el lmite de deteccin (0.49 mg/L), inferior al rango teraputico (2-8 mg/L), hacen que sea un mtodo rpido, sensible y asequible para la determinacin de gabapentina en suero.
TAN-9.
INFLUENCIA DEL HIERRO EN LA DETERMINACIN DE
CROMO (VI) POR ESPECTROFOTOMETRADE ABSORCIN
ATMICACON CMARADE GRAFITO (GFAAS) F. Garca, E.
Gonzlez, R. Villaseca. Instituto de Seguridad y Salud Laboral de la
Regin de Murcia. c/ Lorca, 70. 30120 El Palmar (Murcia).
El ambiente generado por procesos de soldadura de acero inoxidable, presenta distintos compuestos de cromo que afectan de forma
diferente, segn sus caractersticas (fundamentalmente solubilidad y
valencia), a la salud de los trabajadores. En este ambiente, junto al
cromo, se encuentra de forma mayoritaria el hierro. Aunque es
conocida la influencia del hierro en la determinacin de cromo por
espectrofotometra de absorcin atmica con llama, es necesario el
estudio de esta interaccin cuando se utiliza atomizador electrotr-

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mico, ya que los niveles de deteccin y la sensibilidad son significativamente diferentes. Una vez separadas las fracciones "soluble"
e " insoluble", siguiendo el criterio adoptado por la Norma ISO/WD
16740, se estudian de forma comparativa dos procesos de especiacin de cromo: analizando en el mismo medio las dos formas de cromo (el cromo hexavalente mediante el procedimiento colorimtrico
de la difenl-carbazida, y el cromo total mediante GFAAS), o bien
separando previamente el cromo hexavalente con Amberlita LA-2,
determinando tanto el cromo hexavalente como el trivalente por
GFAAS. Los resultados obtenidos han permitido establecer, en primer lugar, las condiciones experimentales para la determinacin de
cromo en presencia de diferentes concentraciones de hierro por
GFAAS y, en segundo lugar, la influencia de la presencia de hierro
en la extraccin selectiva de cromo hexavalente con la resina de
intercambio inico.
TAN-10.
INTOXICACIN POR DICLOROBENCENO. DETERMINACIN POR MICROEXTRACCIN EN FASE SLIDA Y CROMATOGRAFA DE GASES-ESPECTROMETRA DE MASAS.
D. Olano, M. P. Gimnez, M. Menndez. Instituto Nacional de
Toxicologa. Sevilla. Apdo. 863.
Se presenta un caso de una mujer de 27 aos que ingresa en el hospital por presentar trastornos neurolgicos, gastrointestinales y drmicos desde haca dos meses. Haba estado tomando un reparado
antipolillas que contena p-diclorobenceno durante seis meses. Se
describe un mtodo de extraccin de p-diclorobenceno y su metabolito, 2,6-diclorofenol, en tejido graso y orina respectivamente,
usando microextraccin en fase slida de espacio en cabeza. Su
identificacin y cuantificacin se han llevado a cabo usando CGEM-EI. Las concentraciones en las matrices biolgicas se han determinado empleando como patrones internos sus respectivos compuestos deuterados.
TAN-11.
LA CG/EM-PCI EN EL ANLISIS DE COCANA Y SUS PRINCIPALES METABOLITOS EN SALIVA. P.Cmpora, A.M. Bermejo, M.J.Tabernero, P.Fernndez. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Santiago de
Compostela.
La cocana y sus principales metabolitos, ecgoninametil ster
(EME) y benzoilecgonina (BEG), pueden ser determinadas en saliva por CG/EM-PCI, lo que convierte a esta muestra en una buena
alternativa a la sangre y/o orina, ya que su recogida es sencilla y sin
riesgos de manipulacin y ofrece informacin valiosa sobre el consumo reciente de esta droga. El procedimiento de extraccin en saliva fue lquido-lquido con Toxitubos A, y los analitos extrados
derivatizados con BSTFA-TMCS (1%). El anlisis por CG/EM fue
en modalidad de ion selectivo (SIM), utilizando para la ionizacin
qumica metano como gas reactivo (20 mL/min). La respuesta del
detector fue lineal para cada analito en un rango de concentraciones
de 25-1000 ng/mL, con unos coeficientes de variacin menores del
7%, y un rendimiento de extraccin mayor del 95%. Los lmites de
deteccin fueron de 0,9; 2,2; y 0,2 ng/mL para EME, cocana y
BEG, respectivamente. Se analizaron 46 muestras reales, resultando
19 de ellas positivas para EME (3,5-128,4 ng/mL), 19 para cocana
(7,8-513,3 ng/mL) y 43 para BEG (21,6-427,5 ng/mL). Conclusin:
La espectrometra de masas por ionizacin qumica positiva resulta
idnea para el anlisis de cocana y sus metabolitos en saliva, siendo el analito predominante en este fluido biolgico la benzoilecgo-

nina.
TAN-12.
LA CROMATOGRAFA DE GASES APLICADA A LA DETERMINACIN DE COCANA Y SUS METABOLITOS EN HUMOR
VTREO. P.Fernndez, A.M.Bouzas, M.Len, A.M. Bermejo,
M.J.Tabernero. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa
Forense. Facultad de Medicina. Santiago de Compostela.
Se propone un mtodo de cromatografa de gases con detector de
ionizacin de llama para la determinacin de cocana, benzoilecgonina y ecgoninametilester en humor vtreo, utilizando proadifn
como patrn interno. Tras someter las muestras a un proceso de
extraccin slido-lquido con columnas Bond Elut Certify, y a su
derivatizacin con BSTFA-TMCS (1%), se estudi la correlacin
entre los cocientes de reas de los compuestos/patrn interno y las
concentraciones, resultando ser lineal en el rango de 1-20 mg/mL.
Las rectas de calibrado obtenidas en humor vtreo fueron:
y=0,0384x-0,0063 para la cocana; y=0,0325x-0,0136 para la benzoilecgonina e y=0,0218x-0,0039 para la ecgoninametilester, con
unos coeficientes de correlacin de 0,9992; 0,9980 y 0,9963, respectivamente. Se estudi la precisin del mtodo, obtenindose
unos coeficientes de variacin por debajo del 10%. Los lmites de
deteccin y de cuantificacin resultaron ser aceptables, considerando los niveles de cocana y metabolitos encontrados en las muestras
reales analizadas. Las concentraciones de cocana en humor vtreo
procedente de sujetos intoxicados por esta droga, sola o con opiceos, oscilaron entre 0,24 y 3,96 mg/mL; las de benzoilecgonina, entre
0,24 y 4,52 mg/mL; y las de ecgoninametilester, entre 0,28 y 3,36
mg/mL.
TAN-13.
MTODO ENZIMTICO AUTOMATIZADO PARALADETERMINACIN DE ETANOL. P Var(*), M Rodrguez(*), V Carrera(**). (*)Dpto. Ingeniera Qumica. Universidad de Alicante.
Pedro.varo@ua.es. (**)Divisin de Toxicologa. Universidad
Miguel Hernndez.
La determinacin de etanol en cervezas sin alcohol mediante mtodo enzimtico ha sido recomendado por varios autores. Existen kits
comerciales para determinacin enzimtica de etanol en alimentos,
pero todos ellos presentan el inconveniente de aplicarse de forma no
automatizada. Es por ello que el disponer de mtodos rpidos automatizados y con un lmite de deteccin adecuado para el contenido
alcohlico de estas bebidas ha sido hasta ahora motivo de investigacin. Se ha utilizado el analizador Syva ETS Plus (Syva Co.) con
software versin 4.04. El sistema ETS Plus puede realizar la tcnica de Emit ETS Plus Alcohol Etlico para el anlisis cuantitativo de alcohol etlico en muestras de orina o suero/plasma. El mtodo se basa en la determinacin enzimtica de etanol con alcohol deshidrogenasa. En este trabajo se informa sobre la repetibilidad y
reproductibilidad de un mtodo enzimtico automatizado utilizado
en diagnstico clnico aplicado a la cuantificacin de alcohol etlico
en cervezas sin alcohol. En controles acuosos (0.05-0.06 % v/v etanol) se encontr una repetibilidad (r95) de 0.006, y una reproducibilidad (R95) de 0.011. En cervezas sin alcohol (alc.<0.5 % vol.),
r95 y R95 obtenidas fueron 0.017 y 0.038 respectivamente. El mtodo de ensayo propuesto es particularmente til para la determinacin de etanol en cervezas sin alcohol. La precisin obtenida es
comparable a otros mtodos.El lmite de deteccin es de 0.01% v/v.
TAN-14.

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PROCEDIMIENTOS RPIDOS PARA LA DETERMINACIN

DE METALES TXICOS EN FLUIDOS BIOLGICOS
MEDIANTE ESPECTROMETRA DE ABSORCIN ATMICA
CON ATOMIZACIN ELECTROTRMICA. M. Hernndez-Crdoba*, P. Vias, N. Campillo, I. Lpez-Garca y N. Aguinaga. *
Departamento de Qumica Analtica, Facultad de Qumica, Universidad de Murcia, E-30071 Murcia.
El control de a exposicin humana a metales txicos se realiza generalmente por monitorizacin estos metales en muestras biolgicas
tales como sangre, suero y orina. La determinacin de metales en
fluidos biolgicos presenta numerosos problemas causados principalmente a los bajos contenidos metlicos, por la gran variacin de
la matriz de una muestra a otra, as como por la contaminacin. En
consecuencia, los metdos analticos convencionales, que implican
el tratamiento de las muestras para destruir la materia orgnica y la
extraccin de los analitos, no son recomendables porque adems de
ser muy laboriosos, suponen un alto riesgo de contaminaciones o
prdida de analitos. Los mtodos ideales han de requerir un tratamiento mnimo de las muestras y presentar bajos lmites de deteccin. La espectrometra de absorcin atmica con atomizacin electrotrmica (ETAAS) es en este sentido una interesante eleccin.
Ahora bien, las determinaciones en fluidos biolgicos mediante
ETAAS no estn exentas de problemas, generalmente derivados de
atomizaciones incompletas, volatilidad de las sales de determinados
analitos y, especialmente, los altos valores de fondo y la acumulacin de residuos carbonceos en el atomizador. Se proponen diferentes procedimientos analticos para la determinacin de molibdeno, cromo, aluminio, cadmio, plomo, selenio y arsnico en orina,
suero y sangre humana, incluyendo interesantes alternativas para
eludir los problemas propios de la tcnica analtica.

TAN-15.
UN SENCILLO SISTEMA DE GENERARACIN DE HIDRUROS ACOPLADO A ESPECTROSCOPIA DE EMISIN DE
PLASMA. H.Bueno, M.L.Lpez, J.L.Valverde. Colaboradores:
M.A.Serrano, S.Gonzalez. Instituto Nacional de Toxicologa.
Departamento de Barcelona.
La tcnica de hidruros conlleva la reaccin de una muestra acuosa
acidificada con un agente reductor como el borohidruro sdico. Es
frecuentemente utilizada para la deteccin sensible de elementos
como As, Sb, Se, Bi, Te Para la utilizacin de la tcnica de hidruros lo ms habitual es el acoplamiento de un sistema FIAS con EAA
o ICP. El acoplamiento de la tcnica de hidruros con ICP frente al
acoplamiento con EAA presenta la ventaja de la facilidad de anlisis (no necesita cambio de lmparas, presenta amplios rangos de
linealidad,). En este trabajo se presenta un sencillo sistema de tcnica de hidruros para ICP, en la cual, mediante el uso de una nica
bomba peristltica del equipo ICP y un colector acoplado donde se
produce la mezcla de muestra y agente reductor, se introducen en el
nebulizador los hidruros generados. Presentamos los rangos de linealidad obtenidos, lmites de deteccin y cuantificacin, as como la
precisin de resultados para los elementos que forman hidruros
mediante este sistema frente al sistema convencional de anlisis por
ICP.
TOXICOLOGABIOQUMICA
TB-1.
ACTIVIDAD HIDROLIZANTE DE PARAOXON Y SU DISTRI-

BUCIN EN 2891 MUESTRAS DE SUERO HUMANO. V. Carrera(1), I. Llopis(2), P. Varo(3), J. Sastre(2), Vilanova E(1). (1)Divisin de Toxicologa. Universidad Miguel Hernndez. E-03550Campus de San Juan. Alicante. v.carrera@umh.es. (2)Hospital Virgen de los Lirios.Alcoy. (3) Departamento de Ingeniera Qumica.
U. Alicante.
En este trabajo se midi la actividad hidrolizante de paraoxn por un
mtodo automatizado (autoanalizador HitachiR) de uso rutinario en
los laboratorios clnicos y adaptado previamente. Se estudi la distribucin de la actividad paraoxonasa en el suero procedente de
extracciones realizadas, en tubos con heparina sdica, a 2891 personas del rea de salud de Alcoy que acudieron a diversos centros para
la realizacin de exmenes rutinarios de salud en atencin primaria.
Los resultados obtenidos muestran que la media de la actividad
paraoxonasa en suero fue 70.2 16.5 UI/L. La actividad fue menor
en los nios de menos de 15 aos (p<0.0005) y en las personas
mayores de 56 aos (no significativo). Los valores fueron mayores
de la media en las mujeres que en los hombres (p<0.0005). La actividad srica humana mostr una distribucin unimodal en la poblacin estudiada en contraste con otros estudios en otras poblaciones
que mostraron una distribucin bimodal. AGRADECIMIENTOS:
FIS (95/0053-02). Beca postdoctoral FIS para I. Llopis.
TB-2.
ALTERACIN DE LA PARAOXONASA /ARILESTERASA
PLASMTICAEN ELCURSO DE LAEXPOSICIN CRNICA
A PLAGUICIDAS. AF Hernndez, MA, Gmez, G Pena*, F Gil, L
Rodrigo, A Pla, E Villanueva. Depto. Medicina Legal y Toxicologa,
Facultad de Medicina, Universidad de Granada. *Centro de Salud
Motril Este.
La Paraoxonasa/Arilesterasa (PON) constituye la misma expresin
proteica de dos actividades catalticas distintas (utilizando paraoxn
y fenilacetato como sustratos, respectivamente). La PON presenta
una distribucin polimrfica en la poblacin, existiendo al menos
tres fenotipos sricos distintos. Se ha sugerido que aquellos individuos que presentan un fenotipo BB (homozigotos para la alta actividad enzimtica) tendran una mejor proteccin frente a la exposicin crnica a organofosforados (OP) que los homozigotos de baja
actividad (AA). En el presente estudio se ha monitorizado la PON
(sus dos actividades catalticas) en un grupo de 105 trabajadores de
invernadero, con diferente grado de exposicin a plaguicidas, a lo
largo de un ciclo anual de fumigacin. No se observaron diferencias
significativas en la paraoxonasa de los diferentes grupos de trabajadores, ni tampoco en la de cada grupo a lo largo del ciclo. Aunque
las mujeres presentaron un valor superior al de los hombres, las diferencias no fueron significativas. La paraoxonasa no se correlacion
con ningn otro parmetro enzimtico estudiado y, en el caso de las
mujeres, se observ un descenso significativo con la edad. Por el
contrario, la arilesterasa (ArE) de los trabajadores expuestos a plaguicidas fue significativamente superior a la de los controles en todo
el ciclo de fumigacin, debido al efecto de la exposicin. Aproximadamente un 10% de la variabilidad de la ArE se explica por la
exposicin a plaguicidas. No se observaron diferencias significativas por sexo, aunque las mujeres presentaron valores ms altos. En
el anlisis de correlacin, la ArE mostr una asociacin directa con
la exposicin a plaguicidas (ms evidente en el momento de mxima fumigacin) y, en el caso de las mujeres, con la colinesterasa (r=
0.425). Agradecimientos. Este estudio ha sido financiado por el
Fondo de Investigaciones Sanitarias FIS-96/0232.

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