CONOCIMIENTO Y OPERACIN DE UN

ESPECTROFOTMETRO UV-VIS DE ABSORCIN

MOLECULAR
Practica #2 de Anlisis instrumental
Equipo #7a
Santos Molina Carlos Antonio
Lpez Bartoln Teresa del Rosario
Lpez Ortiz Gerardo Arturo

Minatitln Ver a 28 de

Objetivo de la prctica
Identificar los componentes principales de un espectrofotmetro UV-VIS de
absorcin molecular, adquiriendo los conocimientos fundamentales para su
operacin.
Marco terico
Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve
para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una
misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la
concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es
utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y
microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica, de
absorcin molecular (que comnmente se conoce como espectrofotmetro UVVIS), y no debe ser confundido con un espectrmetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a
travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est
presente en la muestra
La espectrofotometra de absorcin molecular ultravioleta visible, comnmente
llamada espectrofotometra UV-VIS, tiene una larga y continua historia en el
campo de la qumica analtica. Esta tcnica est basada en la medicin de
absorcin de radiacin U.V. o visible por determinadas molculas. La radiacin
correspondiente a estas regiones del espectro electromagntico provoca
transiciones electrnicas a longitudes de ondas caractersticas de la estructura
molecular de un compuesto.

Componentes de un espectrofotmetro

Fuente de luz

La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes
condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral
continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lmpara de wolframio (tambin
llamado tungsteno), lmpara de arco de xenn y lmpara de deuterio que es
utilizada en los laboratorios atmicos.

Monocromador

El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o

se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromtica.
Est constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de
dispersin. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente
que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un
prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud
deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de
salida.

Compartimiento de Muestra

Es donde tiene lugar la interaccin con la materia (debe producirse donde no haya
absorcin ni dispersin de las longitudes de onda). Es importante destacar, que
durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su mxima expresin,
con base en sus leyes de absorcin, en lo que concierne al paso de la molcula de
fundamental-excitado.

Detector

El detector, es quien detecta una radiacin y a su vez lo deja en evidencia, para

posterior estudio. Hay de dos tipos:
a) los que responden a fotones;

b) los que responden al calor.

Fotodetectores

En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para

percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el
espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles
del equipo.

Cubetas

Cubetas de espectrofotometra. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el

trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, de plstico, para colorimetra (es
decir, empleando luz visible).
Son los recipientes donde se depositan las muestras liquidas a analizar.
Dependiendo de la longitud de onda a medir, sern hechas de cuarzo, vidrio o de
material plstico. Se caracterizan por tener dos paredes correspondientes a los
lados pticos por donde cruza el haz de luz.

Equipo

Espectrofotmetro UV-VIS de absorcin molecular Marca Genesys 20

Materiales

Celdas de cuarzo y de metacrilato para lectura en espectrofotmetro

Desarrollo de la prctica
Esta prctica comenz con las instrucciones de la catedrtica. Consista en
conocer los equipos de espectrofotometra que tenamos disponibles en el

laboratorio, as que procedimos a entrar al cuarto de pesado donde se encontraba

dichos instrumentos.

El primer equipo que vimos fue un colormetro Corning 252 el cual nos explic la
maestra que ya no funcionaba pero que este instrumento permita medir
absorbancia de una muestra.

Procedimos a ver el siguiente aparato que era un espectrofotmetro ultravioleta

visible marca MILTRON ROY COMPANY 20 d el cual permite realizar medidas
de proporciones de longitud de onda absorbida; tambin contaba con un puerto
para conectarlo a la computadora y por medio de un software realizar las
mediciones de absorbancia.

Continuando con el recorrido tambin pudimos ver otro Espectrofotmetro

ultravioleta visible pero este era marca UNICO modelo 2800 UV/VIS, no dijo que
este espectrofotmetro era muy econmico y tena un software de computadora
que facilitaba el uso del mismo, pero de igual manera que los dems no
funcionaba.

El ltimo equipo que vimos era el equipo que bamos a utilizar para la siguiente
prctica. Se trataba de un espectrofotmetro ultravioleta visible marca THERMO
GENESYS 20 SCIENTIFIC este equipo era ms avanzado que los que ya
habamos visto, ya que el software con el que contaba podamos decidir si calcular
absorbancia o transmitancia, podamos modificar la longitud, de onda, facilidad de
calibrado entre otras funciones importantes. Debajo tena una fuente de luz la cual
proporcionaba una radiacin intensa que necesitaramos para obtener las
mediciones absorbancia.

Este aparato contaba con celdas de metacrilato en donde iba el analito que
desebamos analizar. Estas celdas tenan la forma de un cubo con dos caras
claras y dos caras opacas. El haz de luz debera pasar por la cara clara, esta
deba de estar libre de ralladuras o algn otro factor que pudieses alterar el
resultado esperado.

Para concluir esta sesin la profesora nos demostr cmo es que se utilizaba el
espectrofotmetro que bamos a utilizar. Para esto usamos agua destilada, la cual
colocamos dentro de la cubeta de metacrilato y la colocamos dentro del aparato.

La profesora coment que cada compuesto tiene una longitud de onda y que cada
compuesto absorbe a una longitud de onda determinada. Y nos dej investigar a
cuanta longitud de onda absorbe el permanganato de potasio, la cual era la
muestra que bamos a utilizar para nuestro siguiente experimento.
Conclusiones

Santos Molina Carlos Antonio

Es importante antes de realizar cualquier tipo de prctica que involucre algn

aparato o instrumento conocer con qu clase de materiales o equipos vamos a
trabajar, esto para saber cmo es que funcionan dichos objetos. Tambin
debemos conocer parmetros extras de las soluciones que vamos a evaluar.
Estos aparatos son caros y deben ser tratados con mucho cuidado para evitar
accidentes dentro del laboratorio.

Lpez Ortiz Gerardo Arturo

Cuando estuvimos dentro del cuarto de pesado la maestra nos explic cmo es
que funcionaban los espectrofotmetros para que cuando nos tocara utilizarlos
supiramos como es que trabajan, esto con la finalidad de no cometer errores a la
hora de utilizar los reactivos que estbamos preparando para la siguiente prctica
y esto fuese ms rpido ya que somos ms de 6 quipos y solo tenemos un
espectrofotmetro disponible.

Lpez Bartoln Teresa del Rosario

Los espectrofotmetros son equipos que nos ayudan a medir la absorbancia y la

transmitancia de cualquier sustancia, lo nico que necesitbamos era la longitud
de onda a la que absorbe dicho sustancia. Los espectrofotmetros son muy tiles
y un poco caros, es por eso que debemos de utilizarlos con mucha
responsabilidad y con mucho cuidado para que evitemos algn accidente.

Bibliografa
http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1321/1/6_Fundamentos_de_Espectrofotometria
_8269.pdf
http://www.ehowenespanol.com/analisis-usando-espectrofotometro-como_473475/
http://cali.olx.com.co/mantenimiento-y-calibracion-de-espectrofotometros-thermo-scientificiid-598843776