Micro Pet

O Centro de Pesquisa Pr-Clnica (CPP) do InsCer uma unidade de vanguarda, que abriga um sistema
integrado de imagem molecular e anatmica TriumphTM PET/CT. O sistema garante a obteno
simultnea de imagens de microtomografia por emisso de psitrons (PET) e microtomografia
computadorizada (CT) em contexto experimental.
A exemplo do PET/CT, o PET/CT combina duas modalidades de imagem, tornando possveis estudos que
correlacionam funo celular/molecular com estrutura anatmica. Esse sistema apresenta muitas
vantagens frente a outros mtodos de estudo experimentais, como a aplicao em estudos longitudinais,
acompanhando a origem e progresso de doenas como o cncer, doenas cardiovasculares e
neurolgicas. Tambm possvel monitorar a eficcia de um determinado tratamento ou interveno
teraputica em modelos experimentais. Alm disso, podem-se determinar in vivo caractersticas
farmacocinticas e farmacodinmicas de uma molcula em estudo.
PET/CT tem grande aplicabilidade no desenvolvimento de novos frmacos e da terapia celular. Por outro
lado, tambm uma ferramenta valiosa para o estudo dos mecanismos fisiopatolgicos das doenas
neurolgicas e na pesquisa pr-clnica de marcadores neuropatolgicos.
Atualmente, esto sendo cumpridas etapas de calibrao do sistema PET/CT do InsCer, que em breve
estar disponvel para a realizao de pesquisas pr-clnicas.

Principais Pesquisadores - Linhas de pesquisa

Samuel Greggio, Ph.D, Encarregado do MicroPET/CT
Formao:
1. Obteno do ttulo de doutor em maro de 2013, atravs do PPG Pediatria e Sade da Criana com a
tese intitulada "TERAPIAS INOVADORAS EM MODELO EXPERIMENTAL DE HIPXIA-ISQUEMIA NEONATAL:
NEUROPEPTDEO NAP E CLULAS MONONUCLEARES DE SANGUE DE CORDO UMBILICAL HUMANO".
- Bolsa de estudos CNPq.
- Resumo:
Objetivos: investigar, separadamente, o potencial teraputico do neuropeptdeo NAP e do transplante
intra-arterial de clulas mononucleares de sangue de cordo umbilical humano (CMSCUH) em um modelo
experimental de hipxia-isquemia (HI) neonatal.
Mtodos: ratos Wistar machos com 7 dias de vida foram submetidos ao modelo de HI neonatal atravs da
ocluso permanente da artria cartida comum direita e hipxia sistmica (8% O2 por 2 h). A
administrao do neuropeptdeo NAP (3 g/g, i.p.) ocorreu imediatamente (0 h) e 24 h aps a aplicao
do modelo. J o transplante de CMSCUH (1 x 106 ou 1 x 107 clulas/50 L) foi realizado 24 h ps-HI
atravs de tcnica de microagulha na artria cartida comum esquerda. Somente no estudo do NAP,
ensaio cometa alcalino, peroxidao lipdica e nveis de glutationa reduzida foram determinados no
hipocampo e crtex cerebral 48 h ps-HI. Para ambas as terapias empregaram-se a verso espacial do
labirinto aqutico de Morris (LAM) e determinao estereolgica da volumetria hemisfrica cerebral na
fase adulta destes animais. Utilizou-se o teste do rotarod acelerado e pesagem corporal e cerebral dos
animais adultos apenas no estudo do transplante intra-arterial de CMSCUH. A migrao das CMSCUH foi
monitorada atravs da tcnica de nested-PCR no crebro e rgos sistmicos.
Resultados: o tratamento com NAP restabeleceu a integridade hipocampal e cortical do DNA e membranas
lipdicas, junto ao incremento do sistema glutationa. Alm disso, o NAP impediu o desenvolvimento de
dficits do aprendizado e da memria espacial juntamente reduo da atrofia cerebral em ratos adultos.
O transplante intracarotdico de CMSCHU em ratos neonatos HI demonstrou-se factvel e seguro. Este
tratamento preveniu, de maneira dose-dependente, o desenvolvimento de prejuzo cognitivo de ratos
adultos previamente expostos HI neonatal, sem influncia sobre a atrofia cerebral. A funo motora e
peso corporal de ratos adultos no sofreram influncia da HI neonatal ou da administrao intra-arterial
de CMSCHU. As CMSCHU puderam ser detectadas tanto logo aps o transplante como tardiamente (30
dias) no crebro e rgos sistmicos dos animais transplantados.
Concluses: os efeitos benficos e duradouros do neuropeptdeo NAP e do transplante intra-arterial de
CMSCHU, assim como sua viabilidade, fornecem evidncias de uma possvel translacionalidade destas duas
terapias inovadoras para o tratamento da HI neonatal. Desta forma, o neuropeptdeo NAP e a via
intracarotdica para o transplante de CMSCHU tornam-se candidatos potenciais para a preveno do dano
HI cerebral e decorrentes sequelas.
Doutorado Sanduche no perodo de fevereiro a julho de 2012, sob orientao do Prof. Dr. David

B. Stout no Preclinical Imaging Technology Center do Crump Institute for Molecular Imaging, localizado na
University of California Los Angeles (UCLA).
- Bolsa de estudos CAPES.
- Resumo:
Enquanto visitando o UCLA Crump Institute for Molecular Imaging, o aluno Samuel Greggio aprendeu os
procedimentos e habilidades necessrios para conduzir experimentos em um centro de imagem prclnica. O aluno foi treinado em como manusear os animais para escaneamento, anestesia inalatria,
aquecimento para roedores, biossegurana, controle de patgenos para animais imunocomprometidos,
injeo de istopos i.v./i.a./i.p., cateterizao da veia da cauda e ratos e camundongos, puno cardaca,
eutansia, como sondas radioativas so produzidas para PET, como estas sondas so injetadas e suas
indicaes, captao consciente e inconsciente de radioistopos, efeitos fisiolgicos e diferenas na
captao das amostras, blindagem e radioproteo, protocolos e configurao de escaneamentos,
escaneamento de microPET esttico e dinmico, aquisio de dados e gerao de imagem, fuso de
imagem entre microPET e microCT, como usar o software AMIDE, desenhar regies de interesse, correo
de atenuao, anlise quantitativa, curvas de atividade-tempo, algoritmos de reconstruo, normalizao,
calibrao e controle de qualidade do microPET, identificao de animais e sesses de imagens,
armazenamento de dados, aspectos financeiros e rastreamento de dados. Como parte do processo de
aprendizado, o Samuel revisou os procedimentos operacionais padro assim como atualizou-os de acordo
com a metodologia vigente do laboratrio. Durante a sua permanncia da UCLA, o aluno acompanhou dois
cursos: Introduo Imagem Molecular (M248) e Seminrio de Treinamento e Workshop do Sistema
Xenogen IVIS. Acerca do sistema de imagem ptico, o Samuel foi treinado tanto para uso rotineiro como
para adquirir e avaliar o controle de qualidade deste sistema. O Samuel teve a oportunidade de
acompanhar os experimentos da Dra. Tove Olafsen que conduziu estudos de biodistribuio utilizando
contador gamma e escaneamento microPET/CT. Com a sua orientao, o Samuel aprendeu como dissecar
rgos de camundongos, operacionalizar o contador gamma e observar estudos experimentais utilizando
anticorpos marcados radioativamente. O aluno tambm acompanhou todos os outros projetos de imagem
por microPET/CT conduzidos no centro durante sua estadia em Los Angeles. Atravs da colaborao entre
a UCLA e Cedars-Sinai Medical Center, o Samuel dispendeu diversos dias no Biomedical Imaging Research
Institute (BIRI) sob orientao do Dr. Mark Hyun e Dr. Wafa Tawackoli, e teve a oportunidade de
operacionalizar o sistema Triumph MicroPET/CT/SPECT Gamma Medica. Enquanto visitou o BIRI, o aluno
teve contato com Joann Zhang, chefe cientfica da Gamma Medica, em lhe foi dado instrues tcnicas de
como manusear o sistema Triumph.
Gianina Teribele Venturin, Ph.D
Formao:
1. Farmacutica formada pela Universidade Federal do Rio Grande do Sul (2000-2005);
2. Mestre em Cincias Biolgicas Neurocincias pela Universidade Federal do Rio Grande do Sul (20062008);
3. Doutora em Cincias da Sade pela Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul (2008-2012);
4. Instrutora visitante no Programa de Imagem Molecular da Universidade de Stanford durante estgio
ps-doutoral (Bolsa Capes - 2012-2013);
Projetos de pesquisa:
1. Avaliao in vivo por imagem molecular da migrao, distribuio e sobrevivncia de clulas-tronco em
um modelo animal de epilepsia.
Nesse projeto, a imagem molecular possibilitar o monitoramento de clulas-tronco transplantadas atravs
da avaliao molecular de processos biolgicos de tecidos e clulas vivas, com a utilizao do gene
reprter HSV1-sr39tk e do radiofrmaco 18F-FHBG. Essa tcnica permitir analisar substratos marcados
radioativamente a partir da sua interao com o produto da expresso permanente de um gene exgeno
inserido em determinado grupo celular, podendo revelar a localizao, a sobrevivncia e migrao das
clulas-tronco transplantadas em modelo in vivo.
2. Rede Gacha de Clulas-Tronco: Estudo Clulas-Tronco da Medula ssea na Epilepsia Experimental.
A investigao experimental com clulas-tronco tem crescido exponencialmente nestes ltimos anos em
virtude de seu potencial teraputico em inmeras patologias, em sua maioria de natureza degenerativa.
Pode-se afirmar que h um potencial muito grande para a terapia com clulas-tronco no tratamento das

epilepsias refratrias, principalmente para aquelas que tm um curso progressivo pela freqncia de crises
associada polifarmacoterapia. Na epilepsia, a exemplo de outros distrbios do sistema nervoso central,
h perda de sub-populaes neuronais, o que representa uma conseqncia importante na patogenia da
doena. Esta observao vem estimulando a pesquisa que objetiva repor seletivamente os neurnios
perdidos durante o processo da doena, bem como os mediadores fisiolgicos que eles produzem.
Estratgias teraputicas envolvendo o transplante de clulas-tronco e terapia gnica comeam a ser
estudadas em modelos experimentais de epilepsia. Entre elas est o uso clulas-tronco da medula ssea.
Assim, este projeto verificar o efeito do tratamento com clulas da frao mononucleada da medula
ssea e clulas-tronco mesenquimais no controle de crises e no desempenho cognitivo de animais
submetidos a um modelo experimental de epilepsia. Pretendemos avanar nos mecanismos subjacentes,
utilizando estudos moleculares e de histologia/imuno-histoqumica para melhor compreendermos de que
maneira essas clulas interagem com o rgo alvo.
3. Potencial Teraputico de clulas-tronco da medula ssea na esclerose lateral amiotrfica.
A esclerose lateral amiotrfica (ELA) uma doena neurodegenerativa que se caracteriza por uma perda
seletiva de neurnios motores na medula espinhal, tronco enceflico e crtex motor. A perda de
motoneurnios d incio a uma paralisia progressiva que afeta o msculo esqueltico. Os sintomas clnicos
predominantes so: fraqueza e atrofia muscular e espasticidade. O bito se d usualmente 2 a 5 anos
aps o incio da doena, quando os motoneurnios respiratrios so afetados. H paralisia praticamente
completa de braos, pernas e dos msculos necessrios para a fala. Hoje, medidas sintomticas, como
manuteno da alimentao e da funo respiratria, so o pilar do manejo deste distrbio, tendo efeito
mais significativo do que a terapia farmacolgica existente. Embora a ELA seja uma doena rf, sua
letalidade uniforme lhe d uma importncia que extrapola sua prevalncia. Na ELA, a exemplo de outros
distrbios do sistema nervoso, h perda de sub-populaes neuronais, o que desempenha um importante
papel patogenia da doena. Esta observao estimula a pesquisa que objetiva repor seletivamente os
neurnios perdidos durante o processo da doena. Assim, o objetivo desse estudo avaliar se as clulas
mononucleares e mesenquimais da medula ssea apresentam potencial teraputico no controle da morte
neuronal progressiva em camundongos transgnicos que superexpressam SOD1, atravs da restaurao
da populao e/ou conexes neurais perdidas.