PRACTICA Nro 02

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO PARA HONGOS

Universidad Nacional Del Altiplano

Facultad De Ciencias Biolgicas
Escuela Profesional De Biologa
MAMANI ROJAS Gustavo S.
Cdigo 092079

RESUMEN
Esta prctica se realiz el da jueves 16 de abril del 2013, en la ciudad
universitaria, laboratorio de biologa (microbiologa) desde las 8:00 am a 10:00
am, bajo la supervisin del docente; con la finalidad de preparar medios de
cultivo adecuados para desarrollo y crecimiento de hongos. Para lo cual se
emple materiales necesarios y medios de cultivos puros de Agar Sabouraud
Maltosa (SMA) y Agar Papa Dextrosa (PDA),culminando posteriormente con el
plaqueo y rotulacin respectiva de los medios de cultivo.

1.-INTRODUCCIN
Un medio de cultivo es un sustrato o una solucin de nutrientes que permite el
desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar
un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las
que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos tale como bacterias y hongos son los seres ms
abundantes de la tierra, algunas pueden vivir en condiciones extremas de pH,
temperatura y tensin de oxgeno como las bacterias, pero a diferencia de
hongos estas necesitan de un medio hmedo, temperatura ptima de 25c a
27c y los medios necesarios par su crecimiento y desarrollo colonizando una
amplia diversidad de nichos ecolgicos. Entre los requerimientos ms
importantes para su desarrollo estn el carbono, el oxgeno, nitrgeno, dixido
de carbono e hidrgeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte
extra de factores de crecimiento especficos en forma de suero, sangre y
extracto de levadura entre otros.
CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
SEGN SU ORIGEN:

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o

vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin qumica no se
conoce exactamente.

b) SINTTICOS: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cualitativa y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
c) SEMISINTTICOS son los sintticos a los que se les aaden factores de crecimiento
bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo extracto de
levadura.

SEGN SU CONSISTENCIA

a) LQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solucin acuosa.

b) SLIDOS: se preparan aadiendo un agar a un medio lquido (caldo) a razn de

15g/litro. El agar es una sustancia inerte polisacrida (hidrato de carbono) que se extrae
de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningn
elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en
placas de Petri o en tubos de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar
bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio lquido".
c) SEMISLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la
motilidad de las especies en estudio.
Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.
Segn su composicin: A causa de los requerimientos qumicos del mundo
microbiano, a veces es necesario agregar o eliminar componentes qumicos del medio.

a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los

microorganismos poco existentes. Es el medio ms frecuentemente utilizado para
mantener colonias microbianas. Por ejemlo: agar comn o caldo comn.
b) ENRIQUECIDOS: estn compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento
al cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos,

por ejemplo: sangre, suero, lquido asctico, etc. Se utiliza para microorganismos que
tienen grandes exigencias nutricionales.

c) SELECTIVOS: son slidos en los que la selectividad se consigue alterando las

condiciones fsicas del medio o aadiendo o suprimiendo componentes qumicos
especficos con el fin de inhibir el crecimiento de especies qumicas cuyo crecimiento no
interesa. Este tipo de medio slo permite el crecimiento de un grupo de
microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar
microorganismos a partir de poblaciones mixtas.

OBJETIVOS.

Preparar medios de cultivo Agar Sabouraud Maltosa (SMA) y Agar Papa

Dextrosa (PDA) segn los componentes.

2.-METODOLOGIA.

2.1 MATERIALES

- placas de Petri
- autoclave.
- matraz.
- Probeta.
- mechero.
- cocina elctrica.
- balanza analtica.
- azcar.
- algodn.
- balanza.
- papa.
- alcohol.
- papel Graf.

2.2 AGAR SABOURAUD

Este medio de cultivo es utilizado para cultivo de mohos y levaduras patgenas y no
patgenasasi como tambien para el aislamiento de dermatofitos.
COMPOSICION
Maltosa o glucosa

40gr

Peptona

10gr

Agar Agar

15gr

Agua destilada

1000 ml

Esta realiz de la siguiente manera:

Preparacion para

60ml

Maltosa o glucosa

2.4 gr

Peptona

0.6 gr

Agar agar

0.9 gr

PREPARACION.
Se disolvi los tres componentes en agua destilada calentando y agitando
frecuentemente, lo dejamoa hervir durante 1 minuto para disolver completamente los
ingredientes. Evitamos el sobrecalentamiento. Esterilizamos a15 lb de presin, 121c
durante 15 minutos. Los dejamos enfriar y distribuimos en tres placas petri a
temperatura ambiente antes de su utilizacin.

2.3. MEDIO DE PAPA DEXTROSA AGAR (PDA)

El medio es usado para el aislamiento de hongos fitopatogenos y algunas micorrizas.
COMPOSICIN:
o

trozos de papa

200.gr

dextrosa de glucosa

20.gr

agar agar

15.gr

agua destilada

1000.ml

Se realiz de la siguinte manera:

Preparacin para

60 ml

Papa

12 gr

Dextrosa glucosa

1.2 gr

Agar

0.9 gr

PREPARACIN
Se disolvio la dextrosa y agar agar en 30ml de agua destilada y los restantes
30ml se puso a hervir juntamente con la papa, luego se dejo enfriar y se procedio a
mezclar tamizando el caldo de la papa. Esterilizamos a 15 lb de presin, 121c durante
15 minutos. Los dejamos enfriar y distribuimos en tres placas petri a temperatura
ambiente antes de su utilizacin.
3.- RESULTADOS Y DISCUSIN

plaqueo de los medios de cultivo.

Se debe tener en ambiente limpio, fumigado o desinfectado.

Se debe tener el material de vidrio esterilizado y frio: placas de petri.

Medios de cultivo esterilizado

Procedimiento:
Plaqueo o reparto de medios en placa petri: colocar todo el equipo necesario sobre la
mesa y proceder de la siguiente manera:
- abrir las placas de petri, quitando hilo o papel.
- abrir el medio y repartir y flamear una ida y vuelta sobre la llama.
- con la mano derecha coger el frasco que contiene el medio de cultivo, agitar
suavemente rotando, flamear la boca del frasco y verter dentro de la placa una
cantidad adecuada.

- cerrar la placa y dejar sobre la mesa sin que el medio toque la tapa.
- proseguir con el resto del medio y placas, flameando con una ida y vuelta la
boca del frasco que contiene el medio de cultivo que se est repartiendo.
- una vez acabado de repartir, se debe enjuagar con agua de cao los frascos.
- una vez enfriado y endurado los medios en las placas se voltean y rotulan con
lpiz de cera.

4.- CONCLUSIONES.
Los medios de cultivo realizados se plaquearon satisfactoriamente para su
posterior utilizacion.

5.- REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

- J.W. DEACON. Introduccin A La Micologa moderna. (1998). 339p
- URL:
http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/Sabouraud_Media_Low%20pH.pdf