Reporte Cromatografa en columna (CC) y en capa fina (CCF)

Antecedentes
La cromatografa es una tcnica de separacin de una mezcla de
dos o ms compuestos diferentes, por la distribucin entre dos
fases, una estacionaria y otra mvil. Existen varios tipos de
cromatografa de acuerdo a la naturaleza de las fases sustancias a
separar; para mezclas slido-lquido se utiliza la cromatografa en
columna, de capa fina o en papel, para lquido-lquido existe la HPL
(High Performance Liquid) y para gas-lquido se usa la
cromatografa de fase vapor. La cromatografa es una tcnica que
depende de la diferencia de solubilidad y adsorcin de las
sustancias que se desean separar. El fenmeno de adsorcin es un
proceso mediante el cual una sustancia presente en una fase es
removida de esa por la acumulacin en la interfase entre la fase en
que se encontraba con la de la sustancia utilizada, denominada
adsorbente; las fuerzas intermoleculares (incluyendo fuerzas de
Van der Waals, dipolo-dipolo, interacciones de coordinacin y
puentes de hidrgeno) ocasionan que compuestos orgnicos se
adhieran a la superficie del gel de slice o la almina usada en la
cromatografa y entre ms polar sea el grupo funcional de la
molcula con mayor fuerza se va a adsorber.
La cromatografa en capa fina se utiliza comnmente para observar
que tanto se han separado los componentes de la mezcla en
cuestin y es usualmente complementaria a la cromatografa en
columna.
Cuestionario
CCF

1.-Discuta la importancia de la polaridad y cmo interviene este

factor durante la separacin por CCF.
R= La polaridad es un factor de suma importancia en todas las
cromatografas, pues el principio que se utiliza es el mismo, que la
fase estacionaria, debido a sus caractersticas de afinidad (la
polaridad de sus molculas) con algunas molculas del compuesto
que se est haciendo elur. Esto va a hacer que aquellas molculas
que se sientan ms atradas hacia el compuesto de la fase
estacionaria se queden atrapadas.
2.- Discuta la importancia de complementar con CCF el proceso de
separacin por columna.
R= La importancia en complementar la CC con CCF es debido a que
se pueden purificar en mayor medida los compuestos, sera como
pasarlo por dos filtros, dos filtros son mejor que uno.
3.-Analice las CCF de las fracciones obtenidas y evale la separacin
en funcin de la polaridad de los pigmentos.
R= El tono del color de los compuestos eludos fue de amarillo
claro, amarillo fuerte y anaranjado. Fueron tres las fases que se
lograron separar gracias a la polaridad del hexano y el ter de
petrleo.
4.-Identifique los diferentes pigmentos cloroflicos.
R=Carotenos y xantofilas.
CC
1.-Discuta la importancia de la polaridad y como interviene este
factor durante la separacin por CC.
R=El principio es bsicamente el mismo, la fase estacionaria tiene
caractersticas ms polares que la fase mvil, esto hace que las
molculas ms polares del compuesto queden atrapadas en esta
fase pudindose separar de las dems.

2.-Discuta la importancia de complementar con CCF el proceso de

separacin por columna.
R=La CCF nos permite conocer la pureza de los compuestos
extrados por CC, ya que no estn exentos de impurezas debido al
mtodo algo rudimentario de hacerlo.
3.-Analice las CCF de las fracciones obtenidas y evale la separacin
en funcin de la polaridad de los pigmentos.
R=Los pigmentos presentan polaridades bastante elevadas debido a
la presencia de elementos metlicos en ellos. Obtuvimos tres tonos
o tal vez dos y uno contaminado, los tonos ms claros se separaron
primero, esto quiere decir que eran menos polares los carotenos
que las xantofilas.
4.-Identifique los diferentes pigmentos cloroflicos separados.
R=Carotenos y xantofilas.
5.-Defina los siguientes trminos.
Eluyente: Sustancia que diluye o limpia.
Fase mvil: Fase en la cual el eluyente se lleva consigo parte del
compuesto menos polar.
Fase estacionaria: Fase ms polar que la fase mvil, retiene las
molculas ms polares.
Factor de separacin: Es una razn de distribucin dividia por otra,
mide la habilidad del sistema para separarse en dos sustancias.
Resolucin: Es el parmetro que expresa el grade de separacin
que se puede obtener en un sistema cromatogrfico para dos
componentes dados.
Platos tericos: Es el volumen requerido por una molcula para
establecer un equilibrio entre ella, la matriz y la fase mvil del
sistema.
6.- Investigue cmo se detectan los compuestos no coloridos.

R=Se identifican por su aroma.

Resultados
Primero se comenz por la cromatografa en columna. Se tritur el
chile en un mortero mientras se mont el equipo de CC.
Se aadi un poco de algodn al fondo de la columna, seguido de
arena, hexano y silica. Se aadi el sulfato de sodio y en seguida la
muestra de chile. Se dej eluir, aadiendo una y otra vez el hexano
que sala de la columna hasta que comenzaron a separarse las
bandas de colores, todo esto sin dejar de humedecer nuestra
mezcla de compuestos con disolvente. Luego de que se termin de
echar el hexano se puso ter de petrleo y se continu el proceso.
Al final quedaron tres diferentes matraces con tonos diferentes de
compuestos y se reservaron. A continuacin se prepar la cmara
cromatogrfica y se puso tolueno en el fondo. Con ayuda de
capilares se puso un poco de las muestras en 4 cromatoplacas ya
preparadas y se metieron dentro de la cmara. Esperamos hasta
que el tolueno subiera por capilaridad por las placas hasta casi el
borde y las sacamos. Se dejaron secar un rato y luego pasamos a
medir la distancia de corrimiento, despus de esto las pasamos a
ver con luz ultravioleta.

Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Discusin

RF=5cm
RF=5cm
RF=4cm
RF=4.5cm

El pigmento lleg a 4.9cm

El pigmento lleg a 4.9cm
El pigmento lleg a 4cm
El pigmento lleg a 4.4cm

Debido a la falta de material y reactivos en el laboratorio, aunado a

la falta de tiempo no se pudieron realizar las tcnicas de
cromatografa tal y como lo indicaba el manual, por lo que se tuvo
que realizar todo en una sola prctica y en ocasiones reemplazar
hexano con tolueno, a pesar de esto y con los errores que estas
tcnicas pueden acarrear por si solas, la prctica tuvo resultados
positivos, demostrando y corroborando la base terica que a final
de cuentas era el punto importante.
Conclusiones
Se pudieron observar las caractersticas ms o menos polares de los
pigmentos que logramos separar, resultando que, aparentemente,
el caroteno es menos polar que las xantofilas, y tambin a que tipo
de disolvente eran ms afines, al hexano como fue con el caroteno,
y el ter de petrleo como fue con las xantofilas.
Bibliografa
McMurry J., Qumica orgnica, 7. Edicin, Cengage Learning,
Mxico, 2008.
Bruice, P.Y., Qumica orgnica, 5 Edicin, Pearson Prentice Hall,
Mxico, 2008.