Anda di halaman 1dari 42

1.

Introduccin .................................................................................................................. 2

2.

Consideraciones generales............................................................................................ 4
2.1 Composicin del tejido nervioso .................................................................................. 5

3.

La neurona..................................................................................................................... 7

4.

Adquisicin de la polaridad neuronal: formacin del axn ........................................ 11


4.1 Ruptura de la neuroesfera y crecimiento de neuritas ................................................ 13
4.2 Rho-GTPasas y su relacin con el crecimiento de neuritas ........................................ 15
4.3 Formacin del axn y elongacin axonal.................................................................... 16
4.3.1 Funcin de PI3-quinasa en la formacin del axn ............................................... 17
4.3.2 Otras protenas relacionadas con la formacin del axn .................................... 18
4.4 Formacin del segmento inicial del axn ................................................................... 21

5.

Elongacion y arborizacin axonal ................................................................................ 27

6.

Funcin de los receptores purinrgicos en la diferenciacin neuronal ...................... 29


6.1 Calcio y crecimiento axonal ........................................................................................ 31
6.2 Los receptores P2X y su funcin en la regulacin del crecimiento axonal ................. 32
6.2.1 Papel del receptor P2X7 en la regulacin del crecimiento axonal ...................... 34

1.

Mecansimos celulares y moleculares que regulan la localizacin polarizada de

proteinas axonales ...................................................................................................................... 39


CONCLUSIN ........................................................................................................................ 41

1. Introduccin

Las funciones normales del organismo dependen de la recepcin de


estmulos provenientes del ambiente externo o del proprio organismo, nuestros
movimientos, las percepciones sensoriales de lo que ocurre a nuestro
alrededor y la generacin de una respuesta a ellas dependen de una compleja
red de neuronas en nuestro sistema nervioso central y perifrico. Santiago
Ramn y Cajal fue el primero en postular la existencia de la neurona como una
unidad bsica de funcionamiento del cerebro. Adems, propuso en su ley de
polarizacin dinmica que la transmisin del movimiento nervioso se produce
siempre desde las ramas protoplsmicas y cuerpo celular, al axn o expansin
funcional, y que toda neurona posee, pues, un aparato de recepcin, el soma y
las prolongaciones protoplsmicas (dendritas), un aparato de emisin, el axn,
y un aparato de distribucin, la arborizacin nerviosa terminal. Con esta idea,
Ramn y Cajal abri dos cuestiones que estn plenamente de actualidad, cmo
se adquiere la morfologa de una neurona y cules son los mecanismos
celulares y moleculares que permiten la transmisin del impulso nervioso de
una neurona a otra. Esta revisin pretende abordar algunos de los avances
ms importantes que se han producido en el campo de la polaridad neuronal en
estos ltimos aos.
Diversos avances tcnicos, entre ellos, modelos de cultivo de neuronas han
permitido estudiar de una forma ms precisa la morfognesis neuronal. En la
actualidad, conocemos con una mayor precisin que el primer fenmeno en el
establecimiento de la polaridad neuronal es la formacin de un axn, antes

incluso que se desarrollen las otras neuritas como dendritas. En dicha


formacin estn implicadas al menos dos rutas de sealizacin, la ruta de PI3quinasa y una ruta menos conocida en la que juega un papel importante la
protena LKB1 (tumor suppressor kinase Lkb1). Estas rutas regulan la
dinmica del citoesqueleto de actina y microtbulos, el cual juega un papel
esencial tanto en el crecimiento del axn como en el transporte al axn de las
protenas de membrana que van a permitir la conduccin del impulso nervioso.
Dicho impulso se genera en respuesta a las seales recibidas por las dendritas,
se integra en el segmento inicial del axn, generando el potencial de accin y
se transmite a lo largo del axn hasta llegar a la regin presinptica. Para que
esta maquinaria funcione correctamente cada dominio de la neurona
(somatodendrtico, segmento inicial del axn y axn) debe cumplir su funcin
especfica y para ello necesita un conjunto propio y especfico de protenas
funcionales (receptores de neurotransmisores, canales inicos y protenas
capaces de anclar las anteriores en una posicin concreta). Por tanto, la
desregulacin a cualquier nivel de sealizacin del citoesqueleto, la ausencia o
falta de funcin de las protenas anteriormente mencionadas, as como una
localizacin imprecisa de estas protenas puede generar una disfuncin de la
red de neuronas, generando enfermedades neurodegenerativas o mentales.

2. Consideraciones generales

La recepcin de estmulos provenientes del ambiente externo o del proprio


organismo, de estos estmulos empieza la generacin de reacciones integradas
dirigidas en respuesta. Existen en el organismo animal dos tipos de sistemas
coordinadores o integrados responsables por esa actividad entre estimulo y
respuesta, entre el rgano receptor e el rgano efector que son el sistema
nervioso y el sistema endocrino.
El sistema endocrino por lo general hace un control de reacciones ms
difusas y prolongadas, en cambio el sistema nervioso representa la base
estructural para las reacciones precisas, rpidas y casi siempre ms cortas.
La unidad estructural y funcional del sistema nervioso es la neurona, esta
clulas nerviosas estn formadas por un cuerpo o soma, una prolongacin
corta, las dendritas y una prolongacin larga, el axn. Las neuronas reciben
informacin a travs de sus dendritas, esta informacin se procesa en el soma
y se conduce a lo largo del axn hasta la siguiente sinapsis con otra neurona.
Los axones tienen muchas terminaciones nerviosas, transmiten la
informacin de manera centrifuga a otras neuronas o a clulas efectoras:
transporte de protenas entre las clulas y las sinapsis.

2.1 Composicin del tejido nervioso

Celularmente el tejido nervioso en el sistema nervioso central est


compuesto principalmente por neuronas mayoritariamente multipolares, (en el
cerebro humano aprox. 100.000.000) y clulas de sostn. La neurona o clula
nerviosa es la unidad funcional del tejido nervioso y se les reconoce en su
estructura bsica por estar compuestas centralmente por un ncleo celular y un
citoplasma asociado llamado pericarin, este ncleo y citoplasma asociado, es
a menudo llamado soma neuronal. Del soma neuronal salen miles de
prolongaciones citoplasmticas delgadas llamadas dendritas que contiene
bsicamente neurotbulos estas dendritas ampliamente ramificadas en
conjunto de llaman dendroplasma; tambin del soma neuronal sale una
prolongacin nica y gruesa llamada axn que termina ramificndose en
numerosas ramas finalizadas en expansiones llamadas pie axnico y contiene
bulbos terminales. Estn especializadas en recibir estmulos nerviosos y
conducir impulsos elctricos a otras partes del tejido a travs del axn. Estn
organizadas como una red de comunicaciones integrada, los contactos
especializados entre una neurona y otra reciben el nombre de sinapsis. Se
llama Axoplasma al citoplasma neuronal relacionado con l axon y contiene
microtbulos, microfilamentos intermedio tipo neurofilamentos, mitocondrias y
retculo endoplamatico liso. Las clulas de sostn que acompaan a las
neuronas en el sistema nervioso central son llamadas genricamente clulas
de Glia, Neuroglia o gliocitos ; constituyen el 90% de todas las clulas del SN.,
esto es en la practica por cada clula neurona 9 clulas de glia: Los subtipos

son: Astrocitos Protoplasmticos y astrocitos fibrosos, oligodendrocitos y


microgliocitos. Todas estas clulas caractersticamente tienen citoplasmas
ramificados cuyas prolongaciones citoplasmticas genricamente llamados
glioplasmas.

Figura 1: Composicin de la sustancia gris y blanca en sistema nervioso


central. En el sistema nervioso central hay regiones nicas donde los somas
neuronales forman verdaderos centros o ncleos donde se asocian los somas
neuronales con sus dendroplasmas y axoplasmas junto con glioplasmas; en
histologa eso se llama sustancia gris. (zona A) Tambin hay en regiones del
sistema nervioso central donde solo hay dendroplasmas, axoplasmas y
glioplasmas asociados sin somas neuronales. En histologa eso se llama
sustancia blanca (zona B). Fuente: http://biology.ucsc.edu/classes/bio125
Es inconcebible pensar que en la organizacin histolgica de la sustancia
gris con millones de neuronas no se toquen axoplasmas, dendroplasmas (mas

abundantes), con los glioplasmas de las clulas de glia que son 9 veces mas
abundantes. Esa mezcla de citoplasmas se reconoce como neuropilo, y es
adems en sustancia gris por donde pasa la vasculatura que irriga a la misma
sustancia gris.

3. La neurona

Los componentes funcionales de una neurona comprenden el cuerpo celular


(soma), el axn, las dendritas y los contactos sinpticos.

Figura

2:

Imagen

histolgica

de

una

neurona.

fuente:

http://enzocards.blogspot.com.br/2012/02/n-e-u-r-o-n.html
El cuerpo celular o soma est compuesto por el ncleo rodeado por
cantidades variables de citoplasma, esta se denomina pericarion. Contiene el

ncleo y los orgnulos que mantienen la clula. Las prolongaciones que se


extienden desde el soma constituyen la nica caracterstica estructural comn
a todas las neuronas. Las dendritas son las prolongaciones ms cortas,
transmiten los impulsos desde el medio hasta el soma neuronal. El axn, la
nica prolongacin de la neurona caracterstica que transmite el impulso
nervioso del soma neuronal hacia una terminacin especializada (sinapsis) que
entra en contacto con otra neurona o una clula efectora.

Figura 3: Diagrama de una neurona del sistema nervioso perifrico. El soma


neuronal con el ncleo y citoplasma, las dendritas y el axn con la clula de
Schwann, su vaina de mielina y su terminacin en las fibras musculares.
Fuente: http://www.infovisual.info/03/0

La neurona es la unidad funcional y estructural del tejido nervioso. El


sistema nervioso humano contiene ms de 10 000 millones de neuronas, su
tamao y forma varan mas que los de cualquier otro grupo celular del
organismo. Las neuronas pueden clasificarse en tres categoras generales:
Neuronas sensitivas que transmiten los impulsos desde los receptores
hasta el sistema nervioso central. Las prolongaciones de estas neuronas estn
incluidas en las fibras nerviosas aferentes somticas, que transmiten las
sensaciones de dolor, temperatura, tacto y presin desde la superficie corporal.
Adems estas fibras la sensacin de dolor y propiocepcin (percepcin de los
movimientos y la posicin del cuerpo) desde rganos internos para promover al
encfalo informacin relaciona con la orientacin del tronco y los miembros.
Tambin estn incluyas en las prolongaciones de estas neuronas las fibras
aferentes viscerales que transmiten los impulsos de dolor y otras sensaciones
desde los rganos internos, las membranas mucosas, las glndulas y los vasos
sanguneos.
Neuronas motoras que transmiten impulsos desde el sistema nervioso
central o los ganglios hacia las clulas efectoras. Las prolongaciones de estas
neuronas estn incluidas en las fibras nerviosas eferentes somticas y
eferentes viscerales. Las neuronas eferentes somticas envan impulsos
voluntarios a los msculos esquelticos. Las neuronas eferentes viscerales
transmiten impulsos involuntarios al musculo liso, a las clulas del sistema
cardionector (fibras de Purkinje) y a las glndulas.

Las interneuronas forman una red integrada de comunicacin entre las


neuronas sensitivas y las neuronas motoras. Se calcula que ms de 99,9% de
todas las neuronas pertenece a esta red de integracin.
Adems, las neuronas se clasifican segn la disposicin y cantidad de
prolongaciones que se extienden desde el soma neuronal.
En las neuronas multipolares, el soma emite una sola prolongacin de axn
y dos o varias dendritas. La disposicin de los impulsos es desde las dendritas
hacia el soma, y desde el soma al axn. Las membranas plasmticas de cada
segmento de este tipo de neurona estn adaptadas a captar o transmitir los
impulsos nerviosos, con la ayuda de los neurotransmisores. Las neuronas
motoras y las interneuronas constituyen la mayor parte de las neuronas
multipolares del sistema nervioso.
Las neuronas bipolares son aquellas que tienen un solo axn y una sola
dendrita. Son infrecuentes, lo ms comn es que se asocien con receptores de
los sentidos especiales (gusto, olfato, odo, vista y equilibrio). En general se
encuentran en la retina del ojo y en los ganglios del nervio vestibulococlear
(nervio craneal VIII) del odo.
Neuronas seudounipolares son las que tienen una prolongacin, el axn,
que se divide cerca del soma neuronal en dos largas prolongaciones. Una rama
axnica se extiende a la periferia y otra hacia el sistema nervioso central. Se
desarrolla a partir de una neurona bipolar conforme su axn y su dendrita
migran alrededor del soma neuronal y se fusionan en una prolongacin nica.
La mayor parte de las neuronas seudounipolares son neuronas sensitivas. Los

10

impulsos se generan en las arborizaciones perifricas de la neurona que son la


porcin receptora de la clula. Estn situados en los ganglios espinales y en los
ganglios de los nervios craneales.
Las neuronas unipolares que originalmente tienen una sola prolongacin y
son tpicas de los ganglios de los invertebrados.

4. Adquisicin de la polaridad neuronal: formacin del axn

La neurona es una de las clulas con una mayor complejidad morfolgica y


funcional. La adquisicin de esta complejidad comienza con la especificacin
de una de las neuritas como axn y su crecimiento. De este modo, la neurona
adquiere su polaridad morfolgica, diferenciando un dominio somatodendrtico
(postsinptico)

un

dominio

axonal

(presinptico).

Los

mecanismos

intracelulares que regulan la especificacin del axn y su posterior crecimiento


son an poco conocidos. A pesar de los datos conocidos sobre la morfognesis
neuronal, la comprensin de los mecanismos intracelulares que regulan la
neuritognesis y la formacin del axn requieren sistemas experimentales
donde las neuronas puedan ser manipuladas durante su diferenciacin. La
generacin de un modelo estandarizado de cultivo de neuronas de hipocampo,
con estadios definidos, ha permitido avanzar en el estudio de los mecanismos
moleculares responsables de la formacin del axn y su elongacin (Figura 4).
En este modelo las neuronas reproducen los cambios morfolgicos y

11

funcionales que se observan en las neuronas y su contribucin a la


investigacin de la funcin neuronal ha sido de gran importancia.

Figura 4: Modelo de adquisicin de la polaridad neuronal. (A) Esquema


representativo de los estadios de diferenciacin neuronal en el modelo de
neuronas de hipocampo en cultivo. (B) En el panel inferior se muestran
ejemplos de estas neuronas en estadio 2 (a) y estadio 3 (b y c). En el estadio 2
(a), el axn an no ha comenzado a crecer y se distinguen varias neuritas que
crecen a partir del soma, con conos de crecimiento marcados con FaloidinaAlexa 594 (rojo), mientras que los microtbulos se marcaron con anti--tubulina
y un anticuerpo secundario Alexa-488 (verde). En el estadio 3, se observa
como el axn ha comenzado a crecer a un mayor ritmo que el resto de
neuritas. El patrn del citoesqueleto de microtbulos y actina se marc como
en a. En c se muestra la diferenciacin del citoesqueleto de microtbulos entre
el

dominio

somatodendrtico

el

dominio

axonal.

http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

12

.Fuente:

4.1 Ruptura de la neuroesfera y crecimiento de neuritas

Tras la ltima divisin, la neurona postmittica presenta una forma


redondeada. En las fases ms tempranas, en cultivo, genera un lamelipodio de
actina polimerizada a su alrededor (estadio1). El primer paso en la ruptura de
esta simetra es la concentracin, en uno o varios puntos, de receptores de
factores y protenas que regulan la polimerizacin de actina. Se ha descrito que
la deteccin de una seal positiva de crecimiento a travs de receptores de
membrana transforma RhoA-GTP a su forma inactiva, RhoA-GDP. Esta
inactivacin rompe el complejo de RhoA-ROCK-Profilina e induce la
despolimerizacin de actina en este punto concreto. Otra protena asociada a
actina que participa en la despolimerizacin de la actina es la cofilina. Esta
ruptura de la barrera de actina es utilizada entonces por los microtbulos para
crecer y generar las neuritas (estadio 2, Figura 5). La regulacin del
citoesqueleto de actina durante el crecimiento neurtico y axonal es an poco
conocida. Adems de la regulacin de la dinmica de ensamblaje de los
filamentos de actina, su nucleacin tambin juega un papel importante en los
mecanismos de crecimiento y motilidad neuronal. Quizs el factor de
nucleacin ms conocido es Arp2/3, que necesita de la colaboracin de otros
factores como WASP (Wiskott-Aldrich syndrome protein) y cuya actividad es
regulada por miembros de la familia de Rho-GTPasas.

13

Figura 5: La ruptura de la barrera de actina es necesaria para el crecimiento


de neuritas y el axn. (A) El crecimiento de las neuritas a partir del estadio de
neuroesfera y su posterior elongacin requieren de la despolimerizacin de los
microfilamentos de actina (rojo) y la ruptura de la barrera de actina. Esto es
aprovechado por los microtbulos (verde) para invadir esta regin y promover
el crecimiento de las neuritas. (B) Inmunofluorescencia de un cono de
crecimiento axonal en sus primeras etapas donde se observa la barrera de
actina con su estructura de lamelipodio y filopodios (rojo) y el citoesqueleto de
microtbulos (verde). En comparacin con el crecimiento de las neuronas
control (C), la estabilizacin del citoesqueleto de actina mediante el uso de
jasplakinolide (D) impide el crecimiento de las neuritas, mientras que su
despolimerizacin con cytochalasina D permite el crecimiento de multiples
neuritas.Fuente:
http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

14

4.2 Rho-GTPasas y su relacin con el crecimiento de neuritas

Los miembros ms conocidos de la familia de Rho-GTPasas son RhoA


(Rashomologous member A), Rac1 (Ras-related C3 botulinum toxin substrate
1) y Cdc42 (cell-division cycle 42). Las Rho-GTPasas son protenas que se
expresan de forma ubicua y estn presentes a lo largo de toda la filogenia. La
microinyeccin de formas constitutivamente activas o dominantes negativos de
estas GTPasas ha permitido conocer sus funciones en el control del
citoesqueleto de actina. Estas protenas presentan una forma activa, unida a
GTP, y una forma inactiva, unida a GDP. El intercambio de GDP a GTP, y
viceversa, est regulado por otras familias de protenas, GAPs, GEFs y GDIs
que regulan este intercambio o lo inhiben. Como se ha mencionado
anteriormente, el crecimiento de neuritas y con posterioridad del axn depende
de la inactivacin de RhoA, siendo adems esencial la actividad de Rac1. Las
Rho-GTPasas regulan el citoesqueleto de actina unindose a protenas
asociadas a actina (forminas, WASP, profilina, cofilina, etc.) en funcin de su
estado de actividad y regulando de esta forma la generacin de filamentos de
actina, su despolimerizacin y la orientacin de estos microfilamentos de
actina. Existe una clara relacin entre los citoesqueletos de actina y
microtbulos durante el crecimiento y movimiento celular, aunque no existen
muchos datos sobre ello. Un trabajo ha propuesto que RhoA tiene un papel
dual en la estabilizacin y desestabilizacin de microtbulos, que Rac1
incrementa el crecimiento de microtbulos y Cdc42, adems de cooperar con

15

Rac1, est implicado en la reorientacin del centrosoma hacia la direccin de


migracin.

4.3 Formacin del axn y elongacin axonal

La adquisicin de la polaridad neuronal comienza con la formacin de un axn


a partir de una de las neuritas generadas (estadio 3). El crecimiento del axn a
un mayor ritmo que el resto de neuritas requiere la concentracin de
mecanismos de regulacin del citoesqueleto de actina y microtbulos, as como
de mecanismos de transporte especficos del axn. Se ha descrito que el punto
de crecimiento del axn depende de la posicin del centrosoma tras la ltima
divisin, lo que supondra un apoyo a la organizacin de los microtbulos, su
crecimiento y el transporte de protenas axonales. Sin embargo, el estudio del
crecimiento del axn en el modelo de cultivo de neuronas de hipocampo no
muestra una relacin entre la posicin del centrosoma y el punto de crecimiento
del axn. Recientemente, un trabajo sugiere que el axn se forma a partir de
una de las dos primeras neuritas generadas. Si bien, este punto an necesita
de nuevos estudios para determinar con claridad dnde se forma el axn, los
mecanismos que lo generan y las protenas asociadas con la formacin del
axn son un poco ms conocidos.

16

4.3.1 Funcin de PI3-quinasa en la formacin del axn

Utilizando el modelo de neuronas de hipocampo en cultivo se ha descrito que


la actividad de PI3-quinasa es esencial para formar un axn. Dicha actividad
genera PI3P fosfo-inostidos que regulan la localizacin polarizada, en el
extremo de la neurita que se especifica como axn, de protenas como mPar3 y
mPar6. Adems, la actividad de PI3-quinasa activa otras protenas (p. ej.
PKCz, Akt, GSK3, Rap1b, Rac1 y Cdc42) relacionadas con el citoesqueleto de
actina y microtbulos que permiten la elongacin del axn. La actividad
coordinada de estas protenas y sus vas de sealizacin permiten una mayor
despolimerizacin del citoesqueleto de actina en el punto de crecimiento del
axn y la polimerizacin de microtbulos que elongan el axn. La importancia
de la despolimerizacin localizada de actina para permitir el crecimiento del
axn fue demostrada por el grupo de Carlos Dotti. Tratando neuronas de
hipocampo en cultivo con cytochalasina D observaron que su aplicacin local,
en otra neurita diferente a la que haba generado el axn, permita el
crecimiento de un segundo axn (Figura 5). Posteriormente, se ha demostrado
que protenas asociadas a la actina, como la profilina, actan conjuntamente
con las protenas de la familia de Rho-GTPasas, regulando el estado de
polimerizacin de la actina en el punto de crecimiento del axn. En general, el
crecimiento del axn depende de un balance a favor de una mayor cantidad de
Rac-GTP y una mayor inactividad de Rho (Rho-GDP).

17

4.3.2 Otras protenas relacionadas con la formacin del axn

La importancia de la va de PI3-quinasa en la formacin del axn no slo se


refiere a la actividad de PI3-quinasa. Recientemente, se ha descrito que otras
quinasas reguladas por esta activad son esenciales para la formacin o
especificacin del axn. La inhibicin de la actividad de GSK3 impide la
formacin del axn. Aunque durante mucho tiempo se ha puesto nfasis en
GSK3, mediante el uso de ARNs de interferencia se ha podido demostrar que
adems de GSK3, GSK3 tambin es necesaria para la formacin del axn
en neuronas de hipocampo durante su desarrollo in vitro. Sin embargo, la
elongacin posterior del axn es acentuada por la inhibicin de la actividad de
GSK3. Algunos artculos han descrito que la inhibicin de SK3 tambin genera
mltiples axones, pero dada la compleja regulacin de esta protena y su
participacin en diferentes procesos celulares, harn falta ms estudios para
entender de una forma ms concreta su participacin en la formacin del axn.
La regulacin de la actividad de GSK3 es bastante compleja y se conoce mejor
su actuacin fosforilando protenas asociadas al citoesqueleto. La fosforilacin
de protenas asociadas a microtbulos como tau o MAP1B regula la estabilidad
y polimerizacin de microtbulos, participando de esta forma en la regulacin
del crecimiento axonal. De hecho, las neuronas de hipocampo de ratones con
una expresin muy reducida de MAP1B presentan un retraso importante en el
crecimiento inicial del axn. MAP1B fosforilada por GSK3 se localiza
esprecificamente en el axn y es un marcador temprano durante la formacin
del axn. Con posterioridad, la forma de tau no fosforilada por GSK3, tau-1, se

18

localiza especficamente en el axn. Por tanto, GSK3 tiene un papel diferente


dependiendo del momento de desarrollo del axn (especificacin o elongacin).
CRMP-2 es una protena regulada por GSK3 y que acta polimerizando
microtbulos y permitiendo el crecimiento del axn. CRMP-2 se une a
monmeros de tubulina que va incorporando al extremo positivo de los
polmeros de tubulina. Su sobreexpresin en neuronas genera mltiples
axones.
GSK3 tambin fosforila a beta-catenina, la cual participa en el crecimiento
axonal asociada a APC y al citoesqueleto. La regulacin de la fosforilacin de
beta-catenina por GSK3 tambin juega un papel importante en el transporte de
beta-catenina al ncleo y su participacin en la transcripcin de genes. Como
posteriormente se tratar, un tipo de receptores capaces de interactuar con la
actividad de GSK3 y regular la elongacin del axn y su arborizacin, son los
receptores purinrgicos. Otros receptores que regulan la actividad de GSK3 y
que han sido ms estudiados son los receptores de insulina e IGF-I, cuya
supresin mediante ARN de interferencia impide la formacin del axn.
Adems de GSK3, la actividad de KK/IKK (Quinasa del inhibidor de NFB, IB) es necesaria para formar un axn. Recientemente, hemos
demostrado que la supresin de la actividad de IKKs impide la formacin del
axn. Sin embargo, al igual que ocurre con GSK3, una vez establecido el axn,
la actividad de IKKs no es necesaria para elongar el axn, aunque si juega un
papel muy importante en la formacin y maduracin del segmento inicial del
axn. Esta regin aloja una importante concentracin de canales de sodio
dependientes de voltaje y es responsable de la generacin del potencial de

19

accin. Diferentes trabajos han mostrado que existe una interrelacin entre la
actividad de GSK3 y la ruta de sealizacin de NFB, pero la forma en que
interaccionan en las neuronas no es an conocida.
Otra va de sealizacin implicada en la formacin del axn, y por el
momento no asociada con la actividad de PI3-quinasa, implica a la protena
LKB1. Se ha demostrado que la fosforilacin de LKB1 por PKA es necesaria
para que se forme un axn.
Asimismo, otras protenas reguladas por diferentes vas estn implicadas en
los mecanismos responsables de formar el axn. Por ejemplo, la forma
fosforilada de JNK2 est presente en la regin distal del axn y dicha
fosforilacin es necesaria para formar el axn. Recientemente, se ha propuesto
que Rit, perteneciente a la familia de Ras GTPasas est implicada en el
crecimiento del axn y su actividad adems de promover el crecimiento axonal,
puede actuar como un factor inhibidor del crecimiento de las dendritas. Otras
protenas relacionadas previamente con el transporte de protenas hacia el
axn se han identificado en las primeras fases de especificacin y crecimiento
axonal. Una de ellas es una subunidad de la kinesina-1, cuya localizacin en la
neurita que va a formar axn determina su crecimiento. Esta subunidad de la
kinesina-1 se localiza con posterioridad en el segmento inicial del axn y su
asociacin con microtbulos estables en este dominio determina el transporte y
localizacin axonal de protenas como la protena precursora del amiloide
(APP).

20

4.4 Formacin del segmento inicial del axn

El segmento inicial del axn (AIS) fue identificado en los aos 60 como una
estructura que se diferenciaba estructuralmente del resto del axn y del
dominio somatodendrtico. Sus principales caractersticas son:
a) una capa densa granular e intracelular
b) la presencia de algunos grupos de ribosomas, y
c) la presencia de fascculos de microtbulos. Esta estructura se asemeja a
la de los nodos de Ranvier. Durante muchos aos, algunos estudios aislados
han seguido describiendo la estructura del segmento inicial del axn en
diferentes tipos de neuronas y en diferentes especies. Sin embargo, este
dominio axonal slo ha adquirido una relevancia especial en la funcionalidad
neuronal durante los ltimos 10 aos (Figura 6).

21

Figura 6: El segmento inicial del axn. (A) Neurona de hipocampo en


cultivo. El dominio somato-dendrtico se identific mediante el marcaje con
anticuerpos dirigidos contra la protena asociada a microtbulos, MAP2a+b
(rojo), y el segmento inicial del axn utilizando anticuerpos dirigidos contra losa
canales de sodio dependientes de voltaje (PanNaCh, verde). (B) Esquema
representativo de la estructura proteica del segmento inicial del axn. Sobre un
citoesqueleto denso de actina submembranoso se anclan protenas como la
IV-espectrina y la ankirina G, que a su vez ancla protenas integrales de
membrana como los canales de sodio, canales de potasio, neurofascina o
L1/NCAM. Esta densidad de protenas acta como barrera de difusin en la
membrana, controlando el trfico de protenas hacia el axn.

22

El segmento inicial del axn es la estructura responsable de la generacin


del potencial de accin y acta tambin como una barrera de difusin que
controla el trfico de protenas hacia el axn. La generacin del potencial de
accin es posible gracias a la concentracin de canales de sodio dependientes
de voltaje en este dominio axonal. Dicha concentracin es posible gracias a su
anclaje a ankirina G en el segmento inicial del axn a travs de la secuencia
AIS de aminocidos presente en el canal de sodio. El AIS acta tambin como
una barrera que impide el trfico hacia el axn de protenas que no van a
formar parte del axn. Ello es posible gracias a una fuerte concentracin de
protenas en la membrana del AIS que limita la difusin de protenas. Dada la
importancia del segmento inicial del axn en la adquisicin de la polaridad
funcional de las neuronas, diversos grupos han estudiado como se forma su
estructura. Estudios en secciones de cerebro de ratones salvajes y ratones
knock-out para ankirina G y IV-espectrina han mostrado que la concentracin
de canales de sodio en el AIS depende de la llegada con anterioridad de
ankirina G y IV-espectrina. Dos estudios han mostrado que existe una
secuencia de aminocidos en el canal de sodio neuronal dependiente de
voltaje que es responsable de concentrar estos canales en el segmento inicial
del axn y que dicha secuencia une estas protenas a la ankirina G. Esta
secuencia ha sido con posterioridad identificada en otros canales inicos, como
los canales de potasio KCNQ2/3 (Kv7.2 y Kv7.3), que estn relacionados con
epilepsias neonatales. Adems, la mutacin de un glutmico en esta secuencia
de aminocidos impide la concentracin de protenas, su anclaje a ankirina G y
cuando la mutacin est presente en el canal de sodio dependiente de voltaje

23

de msculo cardiaco, entonces se produce la cardiomiopata conocida como el


sndrome de Brugada. El anclaje de ankirina G y IV-espectrina necesita a su
vez de una estructura de citoesqueleto diferenciada del resto del axn. As, el
segmento inicial del axn se caracteriza por una densidad elevada de actina
bajo su membrana plasmtica. El uso de agentes despolimerizantes de actina
reduce la amplitud del potencial de accin. Asimismo, observaciones de
nuestro laboratorio y de otro grupo muestran que los microtbulos del
segmento inicial del axn presentan isoformas de tubulina ms estables
(tubulina acetilada) y su organizacin es diferente a la del resto del axn o el
dominio somatodendrtico. Estos microtbulos ms estables juegan un papel
esencial en el transporte de protenas hacia el axn, al permitir la unin de la
subunidad KIF5B de la kinesina- 1 que acta como protena de transporte hacia
el axn. Otra subunidad de la kinesina-1, KIF5C, se une de forma diferencial a
microtbulos tirosinados (ms dinmicos) y a microtbulos detirosinados (ms
estables), siendo la velocidad de transporte ms lenta en estos ltimos. Esta
diferencia permitira al segmento inicial del axn cumplir su funcin de control
de trfico de las protenas axonales.

24

Figura 7: La formacin del segmento inicial del axn est asociada a la


formacin inicial del axn. (A) Neuronas de hipocampo cultivadas durante 36,
48 72 horas y marcadas con anticuerpos dirigidos contra el marcador axonal
(rojo) y pIkBa (verde). (B) Como se observa en la cuantificacin de
fluorescencia de ambos marcadores colocalizan en el axn desde su inicio y
posteriormente pIBse concentra en el segmento inicial del axn (48 y 72
horas). Fuente: http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

Recientemente, hemos demostrado que la formacin del segmento inicial


del axn es un evento mucho ms temprano de lo que se pensaba y no es
necesaria una previa maduracin dendrtica. La forma fosforilada del inhibidor
de NF-, pI, se localiza en el segmento inicial del axn de todas las

25

neuronas e interneuronas en el sistema nervioso central. Cuando se estudio la


formacin del axn en el modelo de neuronas de hipocampo en cultivo, se
observ que desde el primer momento que el axn puede ser identificado como
tal, la localizacin de pI est restringida al incipiente axn. Segn el axn
comienza a elongar pI se comienza a concentrar prximo al axn (Figura 7)
y unas 24 horas tras la iniciacin del axn, el segmento inicial del axn se ha
formado. Aunque los mecanismos que regulan el transporte de protenas hacia
el segmento inicial del axn son poco conocidos y se ha propuesto que la
ankirina G es la primera protena en llegar al segmento inicial del axn, nuestro
estudio ha mostrado que la fosforilacin de pIes necesaria para el transporte
de ankirina G y canales de sodio dependientes de voltaje hacia el axn. pI se
asocia a microtbulos y podra de esta forma regular el transporte de protenas
hacia el axn. Esto supone la implicacin de una ruta de sealizacin tanto en
el control de la transcripcin de genes como el transporte de las protenas que
estos codifican, siendo de esta forma un mecanismo de coordinacin a nivel
intracelular de los mecanismos que regulan la morfognesis y la sntesis de
protenas. Futuros estudios en esta direccin podran ser tiles para
comprender enfermedades del sistema nervioso relacionadas con la prdida de
estructuras en las neuronas.

26

5. Elongacion y arborizacin axonal

El axn, una vez formado, debe elongar y alcanzar dianas especficas para
generar contactos sinpticos con otras neuronas o clulas especializadas en
diferentes tejidos (p. ej. musculares o sensoriales). Esta elongacin est
regulada por seales externas positivas y negativas que regulan el crecimiento
y guan al axn hacia su diana. Diversos estudios han mostrado que la
ramificacin axonal est ligada al comportamiento del cono de crecimiento. Por
ejemplo, la semaforina 3A repele los axones corticales in situ e in vitro y reduce
la arborizacin axonal. Por otro lado, esta misma molcula repele los conos de
crecimiento de las neuronas de retina pero induce la ramificacin de estos
axones una vez que el cono de crecimiento se ha recuperado de su colapso.
Para ello el cono de crecimiento axonal cuenta con receptores de estas seales
que estn acoplados a mecanismos de regulacin del citoesqueleto de actina y
microtbulos, tales como las neuropilinas, plexinas o integrinas. Estos factores
pueden regular la dinmica de los microfilamentos de actina o microtbulos en
zonas especficas del cono de crecimiento, permitiendo su giro hacia una u otra
direccin o incluso el colapso del cono de crecimiento. La neurona, a travs del
conjunto de receptores y sensores en su cono de crecimiento, realiza
exploraciones y crece en la direccin permitida o colapsa ese cono de
crecimiento si el ambiente no permite el crecimiento, impidiendo de esta forma
la generacin de ramificaciones axonales. En ciertas condiciones, el axn
puede ramificarse y generar multiples ramificaciones (arborizacin axonal) con
mltiples contactos sinpticos. La formacin de ramificaciones axonales es

27

necesaria para el desarrollo del sistema nervioso y a su vez, el tamao y


complejidad de las ramificaciones est determinado por la actividad neural.
Para

que

estas

ramificaciones

se

produzcan

el

citoesqueleto

debe

remodelarse. As, el axn a partir del cual se generan las ramificaciones est
formado por largos microtbulos que deben cortarse y moverse hacia la
ramificacin en formacin. Esto es posible gracias a protenas como la katanina
o la spastina que rompen estos microtbulos en fragmentos ms pequeos y
mviles. La regulacin del crecimiento de estas ramificaciones y su extensin
con respecto al axn principal depende de diferentes seales. Sin embargo, las
bases moleculares que regulan la arborizacin axonal son poco conocidas.
Recientemente se ha descrito, que modificaciones localizadas transitorias de
los niveles de calcio intracelular pueden estar implicadas en la toma de esta
decisin.
Estas variaciones en los niveles de calcio, junto con las vas de sealizacin
dirigidas por otros factores externos pueden regular ese crecimiento y
arborizacin axonal. Recientemente se ha descrito que NGF potencia el
crecimiento axonal en neuronas de ganglio de la raz dorsal e induce la
inhibicin de GSK3. Adems, la inhibicin de GSK3, en neuronas de
hipocampo en cultivo, induce el crecimiento y la arborizacin axonal. Adems
de GSK-3, tanto RhoA como FAK (focal adhesion kinase) juegan un papel
esencial en la regulacin de la formacin de ramificaciones axonales.
Adems de las seales que inducen el crecimiento y la arborizacin axonal,
otras seales, como el ATP, pueden impedir o restringir el crecimiento del
axn. Como se discute a continuacin, los receptores purinrgicos pueden

28

jugar un papel importante en la regulacin de la elongacin y arborizacin del


axn, aunque su papel en el desarrollo de los circuitos neuronales es an muy
poco conocido.

6. Funcin de los receptores purinrgicos en la


diferenciacin neuronal

Una de las familias de molculas que ms importancia est adquiriendo en


los ltimos aos por el papel que desempean en la diferenciacin y
supervivencia neuronal son los nucletidos de adenina. Estos compuestos, que
presentan una amplia distribucin en todo el organismo, ejercen un efecto
trfico directo en el desarrollo y mantenimiento del sistema nervioso central y
juegan un papel fundamental en el las respuestas frente a enfermedades y
traumatismos. Como ya se ha mencionado en captulos anteriores los
nucletidos de adenina, y en particular el ATP, ejercen un papel como
neurotransmisor rpido en el sistema nervioso central, ya que solo no activa
canales inicos especficos denominados receptores P2X, sino que adems,
las ectonucleotidasas presentes en la membrana plasmtica lo degradan
rpidamente a adenosina. Los receptores P2X, estn formados por la
combinacin de al menos 7 subunidades diferentes denominadas P2X1 al
P2X7, y conforman un canal funcional cuando se combinan al menos 3 de
estas subunidades iguales o diferentes. La activacin de estos receptores
induce la entrada de calcio al interior de la neurona independiente de la
activacin de los canales de calcio dependientes de voltaje. Como

29

consecuencia de esta entrada de calcio, el ATP, es capaz de inducir la


liberacin de ms neurotransmisores, participando as en la propagacin del
impulso nervioso. Adems, estos receptores, al inhibir la induccin de la
potenciacin a largo plazo en el hipocampo, participan en los procesos de
plasticidad neuronal, fundamentales en el funcionamiento de los circuitos
neuronales implicados en los procesos de memoria.
Es precisamente durante el desarrollo del hipocampo donde los receptores
P2X juegan un papel importante en la formacin de las redes neurales. As, en
estudios realizados en rodajas de hipocampo de ratones neonatos, se observ
que la activacin de los receptores P2X1, 2 y 4 inducen la formacin de fibras
nerviosas en el giro dentado. Por el contrario, en explantes neuronales se ha
descrito que la activacin de receptores P2X3 desencadena una disminucin
de la elongacin axonal.
La importancia que los nucletidos de adenina desempean en la
diferenciacin neuronal no solo se limita a los efectos que estos compuestos
ejercen sobre la morfologa neuronal. As, otro de los papeles importante que
desempeen los nucletidos de adenina se centra en el control que clulas
progenitoras poseen para controlar la recepcin de las seales procedentes de
su entorno. Uno de estos mecanismos de control consiste en la alta expresin
de ectonucleotidasas en su membrana plasmtica, impidiendo de esta manera
la llegada de seales que las induzca a diferenciarse.

30

6.1 Calcio y crecimiento axonal

Hace unos aos, se report por primera vez la influencia que el calcio
ejerca en los proceso de elongacin y ramificacin axonal. As se observ que
los incrementos de calcio espontneos (por lo tanto, producidos por agentes
desconocidos) que se producen en el cono de crecimiento estn inversamente
relacionados con la capacidad que tiene el axn de migrar y crecer. Al analizar
en profundidad este fenmeno, se determin que nicamente los incrementos
de calcio de baja frecuencia son capaces de inducir la parada del crecimiento y
arborizacin axnica. No debemos olvidar que el efecto primario que inducen
los nucletidos de adenina, al activar sus receptores P2X, es incrementar el
calcio intracelular en un punto muy concreto de la neurona. De tal manera, que
si estos receptores estuvieran presentes en los conos de crecimiento seran
unos excelentes candidatos para ser los agentes causantes de desencadenar
los incrementos de calcio espontneos antes descritos. Si bien existe poca
literatura al respecto, no debemos olvidar que los conos de crecimiento son las
estructuras primigenias que constituirn el componente presinptico de los
contactos sinpticos que se establezcan en los circuitos neurales del cerebro
en un animal adulto. Es precisamente en esta localizacin donde se ha descrito
ampliamente la presencia de los receptores de nucletidos y establecido que
su activacin no solo induce la entrada de calcio a la terminal nerviosa, sino
que tambin, inducen la liberacin de los neurotransmisores almacenados en
las vesculas sinpticas. De todas las subunidades P2X encontradas a nivel

31

presinptico, la que presenta una mayor abundancia en el SNC es la subunidad


P2X7.

6.2 Los receptores P2X y su funcin en la regulacin del crecimiento


axonal

Llegados a este punto, la principal pregunta que queda por esclarecer es si


los receptores P2X regulan el crecimiento axonal. Para contestarla, el primer
punto que debamos establecer es la presencia de receptores ionotrpicos
funcionales de ATP en los conos de crecimiento. Gracias a la utilizacin de un
sistema de videoimagen que nos permite registrar pequeas variaciones en la
concentracin de calcio intracelular en puntos muy concretos de la neurona,
observamos que la estimulacin de las neuronas de hipocampo en cultivo con
pulsos de ATP, produca una entrada de calcio en el cono de crecimiento.
Adems, pudimos constatar que la onda de calcio generada se quedaba
restringida a la zona ms distal del axn, sin llegar a afectar ni siquiera a la
zona del segmento inicial del axn (Figura 5). Tambin constatamos como la
activacin de los receptores P2X presentes en el cono de crecimiento provocan
una disminucin de la elongacin del axn (Figura 11). Estas observaciones no
solo identifican al ATP como uno de los agentes causantes de los incrementos
de calcio espontneos registrados en los conos de crecimiento de las neuronas
en cultivo, sino que adems, constituyen las primeras evidencias funcionales
que demuestran que los receptores P2X ejercen un control negativo de la
elongacin axonal.

32

Figura 8: El ATP induce corrientes de calcio en el cono de crecimiento de


neuronas de hipocampo en cultivo a travs de receptores P2X: A, Imagen de
fluorescencia de una neurona hippocampal en cultivo cargada con la sonda
fluorescente fura-2. Adems se muestran las diferentes reas analizadas tanto
a lo largo del axn (regiones 2 y 3) como en el compartimiento somatodendrtico (regin 1). Las grficas representan el ratio de los cambios
temporales en las longitudes de onda emitidas por el fura-2 al ser este excitado
a 340 (F340) o a 380 (F380) nm. La neurona fue estimulada con un pulso de
ATP 1mM en el punto b, y con otro de KCl 60 mM en el punto d. Los paneles
que se muestran en la derecha se corresponden con las imgenes de fura
registradas para la neurona analiza en los puntos temporales indicados como a

33

al d, que se muestran en las grficas de la izquierda. Los tiempos de


estimulacin se representan con lneas slidas y corresponden a 50 segundos.
B, Neuronas hipocampales en su tercer da de cultivo en presencia o ausencia
de ATP 1 mM. Las neuronas fueron teidas con anticuerpos frente a la tubulina
(verde)

con

la

actina

(rojo).

Escala

(50

m).

fuente:

http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

6.2.1 Papel del receptor P2X7 en la regulacin del crecimiento axonal

El siguiente paso a analizar era determinar que tipo de receptores P2X


estaban involucrados en el control de la elongacin del axn. Para contestar
esta pregunta, se opt por realizar un estudio farmacolgico, empleando
diferentes antagonistas de los receptores P2X. Mediante este abordaje
experimental no solo conoceramos la naturaleza del receptor, sino que
tambin determinaramos si el bloqueo de estos receptores induce la
elongacin del axn. De todos los antagonistas utilizados, solamente aquellos
que inhiben al receptor P2X7, como son el BBG, el KN62 y el A-438079
indujeron una elongacin y ramificacin del axn mayor a la observada en las
neuronas no tratadas (Figura 6). Confirmamos de la participacin del receptor
P2X7 mediante el empleo de tcnicas de biologa molecular, gracias a las
cuales pudimos observar la evolucin del crecimiento y ramificacin axonal en
neuronas que carecan o sobre-expresaban el receptor P2X7. Como se
observa en la Figura 6, la supresin del receptor P2X7 indujo una elongacin y

34

ramificacin

axonal

similar

la

obtenida

mediante

los

tratamientos

farmacolgicos en los que se emplearon antagonistas selectivos del receptor


P2X7. Por el contrario, la sobre-expresin de dicho receptor indujo una
disminucin en la longitud y nmero de ramificaciones del axn, el mismo
efecto observado al activar el receptor P2X7 con ATP (Figura 9).

Figura 9: El receptor P2X7 regula el crecimiento y arborizacin axonal. A,


Se muestran neuronas de hipocampo en su tercer da de cultivo tratadas en

35

presencia de diferentes antagonistas de los receptores P2X; BBG (5 M),


PPADS (50 M) e Ip5I (1 M). Las neuronas fueron teidas con anticuerpos
frente a la tubulina para observar su morfologa. Escala (100 m). B, Se
muestran neuronas hipocampales en cultivo transfectadas con GFP, un RNA
de interferencia del receptor P2X7 (shRNA-P2X7) fusionado a GFP (P2X7GFP).Escala(50m).fuente:
http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

Una vez determinada la participacin del receptor P2X7 en el crecimiento y


ramificacin axonal solo quedaba determinar el mecanismo molecular por el
cual dicho receptor regula negativamente la elongacin y ramificacin axonal.
Al analizar en detalle la morfologa que presentaban los conos de crecimiento
despus de activar o inhibir el receptor P2X7 observamos que si bien la
activacin del receptor promova un colapso de los mismos, su inhibicin
induca
el efecto opuesto (Figura 10). Este hecho correlacion con una activacin la
protena FAK (quinasa de los puntos focales de adhesin) mediada por la
inhibicin de la protena quinasa dependiente de calcio CaMKII. No debemos
olvidar que uno de las protenas dianas del receptor P2X7 es la CaMKII, de tal
manera que se ha descrito como la activacin de P2X7 induce una fuerte y
rpida activacin de la quinasa dependiente de calcio CaMKII. Como se ha
mencionado anteriormente, una de las quinasa claves en los procesos de
elongacin y arborizacin del axn, es GSK3. As, se ha descrito que la

36

inhibicin sostenida de GSK3 es capaz de inducir una mayor elongacin y


arborizacin axonal, una vez que el axn ya esta formado. Como cabra
esperar, cuando se analiz el estado de activacin de la GSK3 despus de
inducir una inhibicin sostenida del receptor P2X7, se observ una clara
disminucin en la actividad de la quinasa GSK3. Esta disminucin de la
actividad de GSK3 no solo correlaciona con la elongacin y arborizacin axonal
inducidas por la inhibicin del receptor P2X7, sino que ambos fenmenos
comparten una secuencia temporal. As, sabemos que la inhibicin del receptor
P2X7 desencadena una activacin de la quinasa FAK. Dado que un sustrato de
FAK es la PI3-quinasa.
Esta secuencia de acontecimientos la pudimos constatar en nuestro modelo
de neuronas de hipocampo, al observar como la arborizacin y elongacin
axonal inducida por el BBG eran revertidas en presencia de un inhibidor de la
PI3-quinasa (LY-294002) (Figura 10). Como se ha mencionado con
anterioridad, la activacin de PI3-quinasa desencadena la fosforilacin e
inhibicin de GSK3, de tal manera que el receptor P2X7 desencadena
finalmente una regulacin de la actividad de la quinasa GSK3. El hecho de que
la inhibicin de GSK3 promueve el crecimiento y arborizacin axonal en axones
lesionados in vivo, abre nuevas perspectiva teraputica para la utilizacin de
inhibidores del receptor P2X7 en lesiones medulares.

37

Figura 10: La inhibicin del receptor P2X7 modifica la morfologa del cono
de crecimiento de las neuronas de hipocampo mediante la inhibicin de la PI3quinasa. A, Se muestran la morfologa de los conos de crecimiento de las
neuronas de hipocampo tratadas durante 3 das en presencia o ausenta del
antagonista del receptor purinrgico P2X7 BBG (5 M). Mientras los conos de
las neuronas control mostraron una morfologa mixta de lamedipodio y
filopodio, los conos tratados con BBG solo presentan una morfologa de
lamedipodio. Escala (10 m). B, Se muestran neuronas de hipocampo en su
tercer da de cultivo tratadas en presencia y ausencia de BBG (5 M) y/ del
inhibidor de PI3-quinasa LY-294002 (50 M). El BBG y el inhibidor de la IP3-

38

quinasa fueron aadidos despus del primer da de cultivo. Escala (50 m)


fuente: http://www.analesranf.com/index.php/mono/article/view/906/874

1. Mecanismos celulares y moleculares que regulan la


localizacin polarizada de protenas axonales

Simultneamente a la estructuracin morfolgica del axn, en la membrana


axonal se van localizando protenas (canales inicos, receptores o protenas de
adhesin) que guan el axn, regulan su crecimiento y permiten la generacin
de potenciales de accin. Como se ha indicado con anterioridad, esta
localizacin polarizada de diferentes protenas en el axn, depende del
citoesqueleto de actina y microtbulos, as como de las protenas de transporte
(kinesinas, dineinas o miosinas). En los ltimos 10 aos el estudio de las
secuencias aminocidicas de protenas axonales ha permitido demostrar que
existen diversos motivos de aminocidos capaces de localizar protenas
especficamente en el axn. Se ha propuesto que algunas de estas protenas
pueden ser transportadas directamente hacia el axn, como es el caso de
NgCAM. Sin embargo, la distribucin especficamente axonal de muchas de las
protenas estudiadas depende de su eliminacin, mediante endocitosis, de la
membrana somatodendrtica. Este es el caso del canal de sodio neuronal
dependiente de voltaje o de la protena VAMP-2. Una vez transportadas hacia
el axn, estas protenas deben anclarse en un dominio especfico para cumplir
su funcin. Si bien en el dominio somatodendrtico, las protenas con dominios

39

PDZ, tales como la PSD-95, cumplen la funcin de anclaje de protenas


funcionales de membrana; en el caso del axn y del segmento inicial del axn,
esta funcin est representada por la ankirina B y ankirina G. Protenas que
actan como adaptadores entre las protenas de membrana y el citoesqueleto
de actina y microtbulos. La protena de adhesin L1 contiene una secuencia
de aminocidos (FIGQY) que la permite unirse a las ankirinas y estabilizarse en
la membrana axonal. Dicho anclaje est regulado por mecanismos de
fosforilacin y una secuencia de aminocidos (RSLE) que permite su
endocitosis. Otro ejemplo son los canales de sodio y potasio que se unen a la
ankirina G a travs del motivo AIS descrito en los canales de sodio.
Recientemente, se ha descrito que una protena de densidades postsinpticas,
PSD-93, es capaz de anclar canales de potasio y localizarlos en el axn.
Durante los ltimos 10 aos se han descrito motivos aminoacdicos que regulan
la localizacin y anclaje de protenas en el axn, lo que ha permitido entender
las bases estructurales que permiten desarrollar la funcin del axn en la
transmisin de seales.

40

Conclusin

La complejidad funcional del sistema nervioso tiene como unidad bsica


funcional a la neurona, junto con otras clulas que le sirven de apoyo y con las
que intercambia informacin. A pesar de que ya hace alrededor de un siglo que
Santiago Ramn y Cajal propuso la teora neuronal, solamente durante los
ltimos 25 aos hemos sido capaces de obtener bastante, pero an no
suficiente, informacin sobre cmo se forma una neurona y que mecanismos
intracelulares permiten crear la arquitectura morfolgica y funcional de las
neuronas. Sabemos cmo se inicia un axn, cmo se forma el citoesqueleto
neuronal

cules

son

las

causas

de

algunas

enfermedades

neurodegenerativas. Para su tratamiento, as como el tratamiento de lesiones


axonales, debemos conocer los factores, receptores y vas de sealizacin que
regulan el crecimiento axonal, as como los mecanismos que regulan su
posicin y que son responsables de que un receptor cumpla su funcin en un
momento concreto y en una localizacin especfica de la neurona. De esta
forma, podremos encontrar dianas farmacolgicas adaptadas que permitan
regular vas de sealizacin en dominios especficos de las neuronas. Por
ltimo, un mayor conocimiento de los mecanismos que regulan el crecimiento
axonal tambin ser til en un futuro para intentar regenerar axones
lesionados, junto con otras estrategias centradas en las clulas de gla.

41

Referencias
ROSS, Michael H. Histologa. 6 edicin. Buenos aires. editorial mdica panamericana
2013
GENESER. Finn. Histologa. 3 edicin. Editorial medica panamericana
CURTIS. Barnes.schnek. massarini/ biologa/ 7 edicin/ editorial medica
panamericana
RAMN y CAJAL. Comunicacin acerca de la significacin fisiolgica de las
expansiones protoplsmicas y nerviosas de la sustancia gris. 1891
RAMN Y CAJAL. Leyes de la morfologa y el dinamismo de las celulas nerviosas
CALDERON. de Anda. GARTNER A. TSAI H. DOTTI G. pyramidal neuron polarity axis
is defined at the bipolar stage. J. Cell. Sci. 2008
GONZALES. Billault. OWEN R. GORDON. Weeks. AVILA J. microtubule-associated
protein 1Bis involved in the initial stages of axogenesis in pherineal nervous system
cultured neurons. 2002
BRADKE F. DOTTI G. the role of local actin instanbility in axon formation. Science
1999
SHELLY. CANCEDDA. HEILSHORN. SUMBRE. LKBI1/STRAD promotes axon
initiation during neuronal polarization. Cell
NAKATA. HIROKAWA. Microtubules provide directional cues for polarized axonal
trnasport through interaction with Kinesin motor head. Cell. Biol. 2003
KOLE. ILSCHNER. KAMPA. WILLIAMS. RUBEN. STUART. Action potential
generation requires a high sodium channel density in the axon initial segment. Nat.
neurosci. 2008
LEMAILLET. WLAKER. MABERT. Identification of a conserved ankyrin-binding motif in
the family of sodium channel alpha subunits. J. biol. Cell. 2003
HEINE, C HEIMBRICH, B. VOGT, J. WEGNER, A. ILLES, P. FRANKE, H. receptorstimulation influences axonal outgrowth in the developing hippocampus in vitro.
Neuroscience. 2006
SAMPO, B. KAECH, S KUNZ, S BANKER,G. two distinct mechanismis target
membrane proteins to the axonal surface. Neuron. 2003

42