Biologia
Governo Federal
Presidenta da Repblica
Dilma Vana Rousseff
Vice-Presidente da Repblica
Michel Miguel Elias Temer Lulia
Ministro da Educao
Aloizio Mercadante Oliva
FICHA TCNICA
COORDENAO DE PRODUO DE MATERIAIS DIDTICOS
Marcos Aurlio Felipe
PROJETO GRFICO
Ivana Lima
REVISO DE MATERIAIS
Reviso de Estrutura e Linguagem
Eugenio Tavares Borges
Janio Gustavo Barbosa
Jeremias Alves de Arajo
Jos Correia Torres Neto
Kaline Sampaio de Arajo
Luciane Almeida Mascarenhas de Andrade
Thalyta Mabel Nobre Barbosa
Reviso de Lngua Portuguesa
Camila Maria Gomes
Cristinara Ferreira dos Santos
Emanuelle Pereira de Lima Diniz
Janaina Tomaz Capistrano
Priscila Xavier de Macedo
Rhena Raize Peixoto de Lima
EDITORAO DE MATERIAIS
Criao e edio de imagens
Adauto Harley
Anderson Gomes do Nascimento
Carolina Costa de Oliveira
Dickson de Oliveira Tavares
Heinkel Hugenin
Leonardo dos Santos Feitoza
Roberto Luiz Batista de Lima
Rommel Figueiredo
Diagramao
Ana Paula Resende
Carolina Aires Mayer
Davi Jose di Giacomo Koshiyama
Elizabeth da Silva Ferreira
Ivana Lima
Jos Antonio Bezerra Junior
Rafael Marques Garcia
Mdulo matemtico
Joacy Guilherme de A. F. Filho
IMAGENS UTILIZADAS
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www.depositphotos.com
www.morguele.com
www.sxc.hu
Encyclopdia Britannica, Inc.
Copyright 2005. Todos os direitos reservados a Editora da Universidade Federal do Rio Grande do Norte EDUFRN.
Nenhuma parte deste material pode ser utilizada ou reproduzida sem a autorizao expressa do Ministrio da Educaco MEC
Sumrio
Apresentao Institucional
27
49
73
91
119
141
159
181
199
229
253
Apresentao Institucional
Comparando clulas
procariticas e clulas eucariticas
Aula
Apresentao
ma vez que voc j aprendeu sobre a diversidade dos organismos vivos que habitam
a terra na disciplina de Biodiversidade (vegetais, animais, protozorios, algas, fungos
e bactrias), vamos ento aprofundar nosso conhecimento a respeito de um desses
organismos, ou melhor, microrganismos que so as bactrias. O mundo microbiano constitudo
de bactrias, fungos, protozorios e algumas algas, mas as bactrias especicamente possuem
uma relao muito ntima conosco, pois elas esto dentro de ns, sobre ns e em toda parte
ao nosso redor. Voc sabia que nosso corpo possui mais clulas bacterianas que as nossas
prprias clulas?
Objetivos
1
Aula 1
10
Aula 1
Atividade 1
Observe as guras abaixo representativas de duas clulas.
Voc percebe diferena entre as duas? Indique que tipo de diferenas voc pode observar.
Aula 1
11
Como voc deve ter observado, o interior de uma das clulas diferente da outra. A clula
eucaritica possui muitas estruturas no seu interior, enquanto a outra (procaritica) no. Pois
, as clulas procariticas e eucariticas so similares na sua constituio qumica, pois ambas
so constitudas por carboidratos, lipdios, protenas e cidos nucleicos; porm, so diferentes
em algumas estruturas. Veja um resumo dessas diferenas na tabela abaixo.
Caractersticas
Clulas procariticas
Clulas eucariticas
Membrana plasmtica
Um nico cromossoma
circular dentro do citoplasma
Ncleo
Ausente
Presente
Ausente
Presente
Ribossomos
Presente (70S)
Presente (80S)
Parede celular
Reproduo
Sexuada e assexuada
Esterol
um tipo de lipdio.
S
uma unidade usada
para medir a velocidade
de sedimentao dos
ribossomos durante a
centrifugao (a letra
S em homenagem
ao pesquisador
Theodor Svedberg,
que inventou um
equipamento denominado
ultracentrfuga, utilizada
para estudar os
ribossomos)
12
Aula 1
Conhecendo uma
bactria por dentro e por fora
Agora que voc consegue distinguir uma clula procaritica de uma eucaritica, vamos
conhecer melhor a estrutura de uma clula procaritica atravs das bactrias, as quais
representam uma clula procaritica tpica. As bactrias so delimitadas pela membrana
celular ou citoplasmtica. Internamente e externamente a essa membrana, existem estruturas
importantes para a sua sobrevivncia, as quais esto detalhadas logo abaixo.
...Por dentro
Membrana Celular: a membrana celular ou membrana plasmtica das bactrias possui a
mesma estrutura geral da membrana das clulas eucariticas. Essa estrutura separa o meio
interno (citoplasma) do meio externo. constituda principalmente por fosfolipdios e protenas
na seguinte proporo: duas camadas de fosfolipdios com as protenas inseridas no centro
(protenas transmembranas ou intrnsecas) ou mais frouxamente colocadas na superfcie
interna e externa (protenas perifricas) da camada de fosfolipdios. Como as protenas esto
inseridas frouxamente e se movem dentro da camada de fosfolipdios, esse arranjo chamado
de mosaico uido. A principal funo da membrana celular selecionar o que entra e sai
da clula. Podemos dizer, ento, que a membrana possui uma permeabilidade seletiva ou
semipermevel. Tambm importante na digesto de nutrientes e na produo de energia
(esse assunto ser discutido na Aula 5).
Aula 1
13
Atividade 2
1
Protena
perifrica
Protena intrnseca
Molcula de fosfolipdeo
Fonte: <www.netxplica.com>. Acesso em: 23 set. 2009.
<http://www.territorioscuola.com/youtube/index.php?key=Plasm%C3%A1tica>.
Clique sobre o vdeo Biologia: Membrana Plasmtica (Prof Toid).
Descreva o que voc assistiu.
14
Aula 1
Aula 1
15
Atividade 3
Agora que voc j reconhece uma clula procaritica e uma eucaritica, observe as
Figuras (a) e (b).
a
b
Citoplasma
Membrana
plasmtica
Complexo
de Golgi
3
2
Mitocndria
Ncleo
Retculo
endoplasmtico
rugoso
Retculo
endoplasmtico
liso
Nuclolo
4
5
Lisossomos
Baseado na leitura acima, indique o tipo de clula nas Figuras (a) e (b) e denomine as
estruturas numeradas na Figura (b).
Estrutura 1 ______________________________
Estrutura 2 ______________________________
Estrutura 3 ______________________________
Estrutura 4 ______________________________
Estrutura 5 ______________________________
16
Aula 1
N-Acetilmurmico
Parede Bacteriana
N-Acetilglicosamina
L-alanina
D-cido glutmico
L-lisina
D-Alanina
Aula 1
17
Bactrias Gram negativas: a parede das bactrias Gram negativas um pouco diferente.
constituda de poucas camadas de peptidoglicano, formando uma estrutura na; externamente
ao peptidoglicano h uma membrana denominada como membrana externa (no confunda
essa estrutura com a membrana celular, vista anteriormente). Na membrana externa
encontram-se inseridos protenas e um composto denominado de lipopolissacardeo (lipdios
e polissacardeos) ou LPS. Essa estrutura, assim como o cido teicoico da parede das Gram
positivas, est relacionada com a capacidade de causar doena em humanos e animais. Entre
a membrana plasmtica e a membrana externa existe um espao denominado de espao
periplasmtico, local onde a bactria armazena vrias protenas utilizadas para vrias funes,
como obteno de energia e transporte de substncia para dentro da clula (veja na Figura 3
a parede celular de uma bactria Gram negativa).
18
Aula 1
LPS
Porina
Lipoprotenas
Membrana externa
Peptidoglicano
Espao periplasmtico
Membrana
citoplasmtica
Atividade 4
Observe novamente as diferenas existentes entre a parede celular de uma bactria Gram
positiva e uma Gram negativa nas Figuras 2 e 3. Enumere as diferenas que voc observou
entre as duas paredes.
Aula 1
19
Externamente parede, algumas bactrias podem apresentar estruturas que auxiliam sua
sobrevivncia, como glicoclix, agelos e fmbrias.
Glicoclix: um polissacardeo que recobre a bactria. Essa estrutura utilizada para a bactria
se xar em uma superfcie. Se o glicoclix estiver rmemente aderido parede, ele chamado
de cpsula, e quando est fracamente aderido chamado de camada limosa.
Fmbrias ou pili: So estruturas mais curtas e mais nas que os agelos, tambm de natureza
proteica, utilizadas para a xao da bactria nas superfcies. Essa estrutura tambm pode ser
utilizada para a bactria fazer um contato fsico com outra bactria, medida que os pili de
uma se ligam superfcie de outra (voc ver mais detalhes sobre esse assunto na Aula 8).
20
Aula 1
Atividade 5
Observe a Figura 4. Relacione as estruturas externas parede celular.
Aula 1
21
Coco
Cocobacilo
Vibrio
Bacilo
Espirilo
Espiroqueta
22
Aula 1
b
Plano de
diviso
Diplococos
Bacilo nico
Estreptococos
Ttrade
Diplobacilos
Sarcinas
Estreptobacilos
Estalococos
Figura 6 (a) Os principais arranjos dos cocos; (b) os principais arranjos dos bacilos
Fonte: Tortora, Berdell e Funke (2005).
Atividade 6
Observe as principais formas e arranjos das bactrias nas Figuras 5 e 6. Tente desenhar
as principais formas e arranjos dentro dos crculos abaixo.
Aula 1
23
Atividade 7
Faa uma pesquisa na internet sobre a espcie bacteriana produtora de endsporo
chamada Clostridium tetani e responda.
24
Aula 1
a)
b)
c)
Resumo
Nesta aula, voc viu que os seres vivos esto distribudos em dois tipos de
clulas, procariticas e eucariticas, e aprendeu a diferenci-las. Voc viu,
tambm, que a maioria das bactrias se apresenta sob a forma esfrica (cocos),
em basto (bacilo) ou espiralada (vibries, espirilos e espiroquetas) e que as
bactrias so classicadas em Gram positivas e Gram negativas. Entendeu que
elas podem apresentar externamente estruturas como agelos, cpsula e fmbrias,
e, nalmente, compreendeu que algumas espcies de bactrias podem produzir
estruturas denominadas endsporos, que capacitam a bactria a sobreviver em
ambientes desfavorveis.
Autoavaliao
1
2
3
Cite as principais diferenas na parede celular das bactrias Gram positivas e Gram
negativas.
Cite as estruturas externas parede celular de uma bactria com sua respectivafuno.
Referncias
BLACK, J. G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio de Janeiro: Editora
Guanabara Koogan, 2002.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makon Books, 1996.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed,2005.
Aula 1
25
Anotaes
26
Aula 1
Trabalhando no laboratrio
de Microbiologia
Aula
Apresentao
Objetivos
1
Aula 2
29
30
Aula 2
Usar jaleco (bata) abotoado de mangas compridas. Protege as roupas do indivduo, assim
como fornece uma proteo adicional ao corpo.
Usar protetor facial (mscaras). Protege a face contra o impacto de partculas slidas,
lquidas, vapores etc.
Gorro
culos
Mscara
Bata
Luvas
Sapato
Prender cabelos longos e retirar todos os acessrios pessoais como brincos, anis,
relgios etc.
Todo material contaminado deve ser colocado em recipientes adequados. Nunca deve
ser deixado sobre a bancada.
Aula 2
31
Atividade 1
Qual a importncia da utilizao das normas de segurana no laboratrio de
Microbiologia?
32
Aula 2
Materiais e
equipamentos utilizados no
laboratrio de Microbiologia
Uma vez que voc j aprendeu as principais regras de segurana para se trabalhar em um
laboratrio de Microbiologia, vamos conhecer agora os materiais e equipamentos necessrios
para manipularmos os microrganismos. Como sabemos, os microrganismos esto em toda
parte: no solo, no ar, na gua, nos alimentos, no corpo humano, nas plantas e nos animais. Isso
acontece porque eles encontram nesses diferentes ambientes condies fsicas e nutricionais
para sobreviver e se multiplicar. Dessa forma, para podermos cultivar os microrganismos no
laboratrio, precisamos fornecer a eles essas mesmas condies que so encontradas nos
seus ambientes naturais, ou seja, temperatura adequada, nutrientes, gua etc. Vamos listar a
seguir os principais materiais e equipamentos que so utilizados na rotina de um laboratrio
de Microbiologia.
Aula 2
33
500ml
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Figura 8 Pipeta graduada: equipamento calibrado para medida precisa de volume de lquidos
Fonte: <www.casadolaboratorio.com.br/vidrar.html>.
Acesso em: 23 out. 2009.
34
Aula 2
da presena ou ausncia de uma substncia que solidica o meio de cultura chamada gar
(uma espcie de gelatina), ou seja, quando o meio de cultura slido, ele contm cerca de
1,5 a 2% de gar; quando semisslido, contm em torno de 0,3 a 0,5% de gar, e quando
lquido, no contm o gar.
Aula 2
35
Observao: ser marcado um dia no seu polo para revermos esse assunto,
oportunidade em que voc poder conhecer diferentes tipos de meios de cultura.
36
Aula 2
gua destilada uma gua sem impurezas, ou seja, contm somente molculas
de gua.
Atividade experimental 1
Prepare um meio de cultura
Passo 1 Tente conseguir os seguintes materiais: um tablete de caldo de carne, um pacote de
gelatina incolor, 2 copos de gua, tampas de pote de caf ou margarina, cotonetes.
Passo 2 Forma de preparar o meio de cultura
Distribua dentro de recipientes rasos como uma tampa de pote de caf ou tampa de
margarina, cobrindo o fundo do recipiente com uma camada rasa do meio.
Cubra as tampas contendo o meio de cultura com um pedao de plstico e deixe descansar
por algumas horas.
Passe outro cotonete do lado de dentro da sua bochecha e contamine outra tampa
contendo meio de cultura.
Aula 2
37
Observao Voc pode tentar outras formas de contaminar o meio de cultura. Por exemplo:
tente passar um o do seu cabelo sobre o meio, tente passar o cotonete na sua mesa, na
maaneta da porta do seu banheiro ou entre os dedos do seu p. Use a sua imaginao e faa
outras experincias.
38
Aula 2
Aula 2
39
CMARA ASSPTICA um pequeno quarto fechado com uma lmpada ultravioleta e uma
bancada onde instalado um bico de Bunsen. A rea em volta da chama do bico de Bunsen
(Figura 16) fornece uma rea chamada de rea de segurana, onde se pode manipular
materiais estreis sem contamin-los com microrganismos do ambiente.
Figura 16 Bico de Bunsen: equipamento ligado a um botijo de gs que gera uma rea de calor em volta da chama,
o que impede a entrada de microrganismos provenientes do ambiente
Fonte: <http://www.vetfacil.com/_/rsrc/1250170894255/Home/microbiologia-1/
Microbiologia-Veterinaria/laboratorio-de-microbiologia/equipamentos/bico-debunsen/Bico%20de%20Bunsen.jpg>. Acesso em: 19 set. 2009.
40
Aula 2
Atividade 2
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=312&ordem=2>.
Clique na seta para iniciar a animao e assista.
Cite os materiais utilizados no laboratrio de Microbiologia que voc observou
na animao.
Aula 2
41
Figura 18 Autoclave
Fonte: <www.ciencor.com.br/catalogo/paginas/autoclave.htm>.
Acesso em:7 out. 2009.
42
Aula 2
Aula 2
43
Atividade 3
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=310&ordem=2>
Clique na seta para iniciar a animao e observe a semeadura de um microrganismo
em um meio de cultura.
Cite o instrumental que foi utilizado para a semeadura do microrganismo no
meio de cultura.
44
Aula 2
1)
2)
3)
4)
Deixar esfriar ala e agulha antes de obter o inculo, dentro da rea de segurana.
5)
Aula 2
45
Atividade 4
Acesse o endereo eletrnico <www.e-escola.pt/topico.asp?id=312&ordem=2>.
Clique na seta para ver a animao.
Cite as manobras asspticas que voc observou na animao.
46
Aula 2
Resumo
Nesta aula, voc cou sabendo que possvel cultivarmos um microrganismo
fora do seu habitat natural, ou seja, no laboratrio. Para isso, basta fornecermos
a esse microrganismo condies semelhantes a que ele tinha no seu ambiente
natural, como nutrientes e temperatura adequados. Voc viu, ainda, que
embora sejam necessrios alguns equipamentos especcos para cultivarmos
os microrganismos, possvel improvisarmos utilizando materiais simples e
um pouco de criatividade. Voc aprendeu, tambm, que para se manipular os
microrganismos com segurana no laboratrio, necessrio seguirmos algumas
normas de biossegurana e algumas manobras asspticas, principalmente para
evitar que a pessoa que est manipulando o microrganismo se contamine ou que
o ambiente venha contaminar o material com o qual se est trabalhando.
Autoavaliao
1
Dena o termo rea de segurana do bico de Bunsen e diga qual a sua utilizao.
Referncias
OKURA, M. H.; RENDE, J. C. Microbiologia roteiros de aulas prticas. Ribero Preto: Editora
Tecmedd, 2008.
SILVA FILHO, G. N.; OLIVEIRA, V. L. Microbiologia manual de aulas prticas. 2. ed.
Florianpolis: Editora da UFSC, 2007.
VERMELHO, A. B. et al. Prticas de microbiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
Aula 2
47
Anotaes
48
Aula 2
Vendo o invisvel
Aula
Apresentao
1 m
Milionsima
parte do milmetro.
Objetivos
1
Aula 3
51
Preparando os microrganismos
para a visualizao
Embora as lentes dos microscpios possibilitem a visualizao dos microrganismos,
dependendo do que se deseja observar, necessrio criar um contraste entre o microrganismo
que ser observado e o plano de fundo, pois a maioria dos microrganismos quase incolor
quando observados atravs de um microscpio ptico padro. Esse contraste conseguido
atravs de coloraes em que o microrganismo submetido antes de ser observado ao
microscpio. Outro aspecto importante na preparao dos microrganismos para a visualizao
a qualidade do preparo do material a ser visualizado. Por exemplo, necessrio ter um
cuidado especial com a limpeza das lminas de vidro onde ser depositado o microrganismo
para visualizao. Veja a seguir como se prepara as lminas de vidro.
Preparo das lminas de vidro: as lminas devem estar completamente livres de gordura, e para
isso devem ser lavadas com gua e sabo, enxaguadas exaustivamente em gua e deixadas
em um recipiente com etanol a 95%. Antes da utilizao, as lminas devem ser retiradas do
recipiente com uma pina e secas com papel-toalha ou pano bem macio que no solte apos.
De uma forma geral, as clulas microbianas podem ser examinadas a fresco
(microrganismo vivo) ou fixadas sobre uma lmina de vidro (microrganismo morto),
dependendo do que se deseja examinar.
Exame a fresco
Cultura microbiana
Crescimento de
um microrganismo em
um meio de cultura.
52
Aula 3
O exame a fresco consiste na deposio de uma gota de cultura microbiana entre uma
lmina e uma lamnula de microscpio. A visualizao microscpica a fresco difcil devido ao
tamanho reduzido dos microrganismos e ao fato de parecerem translcidos, quando suspensos
em um meio aquoso. Porm, bastante til para observar a viabilidade do microrganismo.
Nas preparaes a fresco, podem-se utilizar corantes para facilitar a visualizao. Veja na Figura 1
o esquema de uma preparao a fresco.
Ala
Bacteriolgica
Lamnula
Lmina
Cultura Microbiana
Cultura Microbiana
Atividade 1
Observando microrganismos vivos
Observao Antes de iniciar essa atividade experimental, faa uma reviso a respeito das
normas de segurana e das manobras asspticas na Aula 2, Trabalhando no Laboratrio de
Microbiologia. As Atividades 1, 5 e 6 desta aula so experimentais e devem ser realizadas no
seu polo de ensino.
Objetivo:
Materiais:
Lminas de microscpio;
Lamnulas;
Cultura da espcie bacteriana Escherichia coli em meio lquido;
Microscpios.
Aula 3
53
Procedimentos:
1)
Flambe at car vermelha uma ala bacteriolgica na chama de uma lamparina e deixe-a
esfriar prximo chama.
2)
Abra o tubo de ensaio contendo a cultura bacteriana prximo chama, retire uma alada
da cultura, deposite no centro da lmina e ento feche o tubo de ensaio; em seguida, ambe
a ala novamente antes de guard-la.
3)
4)
5)
Tente fazer um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina.
Colorindo os microrganismos
O uso de corantes para corar os microrganismos uma estratgia bastante til, pois faz
com que eles se destaquem contra seus planos de fundo, otimizando sua observao.
Tipos de corantes
Em Microbiologia, os corantes mais utilizados so os corantes catinicos (positivamente
carregados) ou bsicos e os aninicos (negativamente carregados) ou acdicos. Os corantes
bsicos, tais como o azul de metileno, o cristal violeta, a safranina e o verde de malaquita so
atrados pelos componentes celulares que so negativamente carregados como, por exemplo,
a membrana plasmtica. J os corantes acdicos como a eosina e o cido pcrico so repelidos
pela carga negativa da superfcie dos microrganismos. Nesse caso, o microrganismo no
corado e o corante ca depositado somente na lmina.
54
Aula 3
Atividade 2
Cite as duas categorias de corantes mais utilizados para corar microrganismos
e diga o que caracteriza cada tipo.
Tipos de colorao
Em Microbiologia, so utilizados 2 tipos principais de colorao: a colorao simples
e a diferencial. Veja abaixo a denio de colorao simples e, mais frente, a denio de
colorao diferenciada.
Colorao simples utiliza apenas um nico corante e revela os formatos bsicos das clulas e
seus arranjos (revise sobre as formas e os arranjos bacterianos citados na Aula 1, comparando
clulas procariticas e clulas eucariticas). Alguns dos corantes mais utilizados nesse tipo
de colorao so azul de metileno, safranina e o cristal violeta. Esse tipo de colorao pode
ser positiva ou negativa.
Colorao simples positiva Usa-se um corante bsico (carregado positivamente), o qual vai
impregnar a superfcie celular da clula (carregada negativamente). til para se constatar a
presena de microrganismos em alguma amostra ou substrato. Acompanhe os passos dessa
tcnica na Figura 2.
Aula 3
55
Figura 2 Colorao simples positiva. a) Adicionar o corante sobre a lmina contendo uma alada de cultura; b) lavar a
lmina com gua; c) secar a lmina com papel toalha
Fonte: Vermelho et al (2006).
56
Aula 3
Figura 4 Colorao simples negativa. a) Adicionar o corante sobre uma das extremidades da lmina; b) adicionar
uma alada da cultura microbiana sobre o corante; c) colocar uma outra lmina sobre a cultura e o corante e deixar
que o material se espalhe na extremidade da lmina inclinada; d) deslizar a lmina inclinada sobre a outra lmina,
espalhando a cultura e o corante de maneira uniforme
Fonte: Vermelho et al (2006)
Aula 3
57
Observando o microrganismo xo
em uma lmina (morto)
Para a observao do microrganismo xado em lmina necessrio o preparo do
esfregao, ou seja, xar o microrganismo na lmina de vidro. nesse momento que os
microrganismos so mortos. Veja abaixo como se prepara um esfregao a partir de uma
cultura lquida e de uma slida.
Esfregao a partir de uma cultura em meio lquido com o auxlio de uma ala bacteriolgica,
retira-se uma ou duas aladas da cultura lquida e deposita-se sobre o centro de uma lmina de
vidro. necessrio espalhar a cultura ao longo da extenso da lmina com movimentos circulares.
Esfregao a partir de uma cultura em meio slido Coloca-se previamente 1 a 2 gotas de
soluo siolgica estril sobre a lmina de vidro e, ento, se adiciona uma poro da cultura
retirada do meio slido com o auxlio de uma ala bacteriolgica, espalhando o material ao
longo da extenso da lmina.
Fixao do esfregao pelo calor Deixe que o material depositado na lmina seque ao ar
totalmente antes de proceder com a xao. A xao pelo calor consiste em passar a lmina
contendo o esfregao 3 vezes sobre a chama do bico de Bunsen ou lamparina. A xao do
esfregao vai impedir que os microrganismos depositados sobre a lmina sejam removidos,
quando submetidos ao processo de colorao. Veja na Figura 6 a preparao de um esfregao
a partir de uma cultura lquida e de um meio slido.
58
Aula 3
Meio Lquido
Meio Slido
f
Fixao
Fixao
Figura 6 Preparo do esfregao para colorao. a e d) Adicionar as clulas bacterianas sobre o centro da lmina
(quando as clulas forem provenientes de meio slido, adicionar antes uma gota de soluo siolgica estril);
b e e) espalhar o material depositado com a ala bacteriolgica; c e f) xao do esfregao atravs da chama do
bico de Bunsen
Fonte: Vermelho et al (2006).
Atividade 3
Qual a diferena na realizao de um esfregao a partir de uma cultura lquida
e de uma cultura slida? Qual a nalidade da xao do esfregao?
Aula 3
59
Colorao diferencial utiliza dois ou mais corantes e diferencia dois tipos de organismos.
As coloraes diferenciais mais comuns so a colorao de Gram e a de Ziehl-Neelsen.
Atividade 4
Revise a Aula 1 a respeito da estrutura da parede celular das bactrias Gram
positivas e Gram negativas e, aps a reviso, descreva as diferenas existentes
entre a parede celular desses dois tipos de bactrias.
Agora que voc j relembrou a estrutura da parede celular das bactrias, podemos ento
estudar a tcnica de colorao de Gram e a de Ziehl-Neelsen.
Colorao de Gram essa tcnica de colorao recebeu essa denominao em homenagem
ao mdico dinamarqus Hans Christian Gram, que desenvolveu esse mtodo em 1884. Essa
colorao separa as bactrias em 2 grandes grupos: as bactrias Gram positivas e as Gram
negativas. Esse mtodo de colorao o mtodo de escolha para a identicao de bactrias.
Mordente
uma substncia que
forma um complexo
insolvel quando se liga
ao corante
60
Aula 3
Essa diferena em funo das diferenas existentes entre a parede celular das bactrias
Gram positivas e das Gram negativas. As Gram positivas tm a parede celular mais espessa
e, portanto, so mais difceis de serem descoradas pelo o lcool, e as Gram negativas, como
tm uma parede mais delgada, so mais facilmente descoradas quando so lavadas pelo lcool
durante o processo de colorao. Lembre-se que voc aprendeu as diferenas entre esses dois
grupos de bactrias na Aula 1. Observe os reagentes usados nessa colorao na Figura 7 e as
etapas da tcnica na Figura 8.
Violeta
de genciana
Iodo
lcool
Safranina
Aplicao de
violeta de genciana
(corante prpura)
Aplicao de iodo
(mordente)
Lavagem com
lcool
(descolorao)
Aplicao de
safranina
(contracorante)
Aula 3
61
Atividade 5
Colorao de Gram
Objetivos:
62
Aula 3
Materiais:
Tubos de ensaio contendo uma suspenso bacteriana (cultura em meio lquido);
Lminas de vidro;
Reagentes para a colorao de Gram;
Alas bacteriolgicas;
leo de imerso;
Microscpios pticos.
Procedimentos:
Etapa 1 - Preparao do esfregao
1)
Identique o lado da lmina em que voc vai depositar a cultura fazendo uma marca com
lpis grate sobre a extremidade fosca da lmina;
2)
3)
Colete uma alada ou mais da suspenso bacteriana e espalhe bem sobre a superfcie da
lmina com a prpria ala bacteriolgica;
4)
Deixe o material secar sobre a lmina, deixando-a prximo da chama do bico de Bunsen;
5)
Passe a lmina 2 a 3 vezes atravs da chama do bico de Bunsen para xar o material
sobre a lmina.
1)
2)
Despreze o excesso de corante no depsito apropriado e adicione lugol e deixe agir por
1 minuto;
3)
4)
5)
6)
7)
Aula 3
63
8)
9)
Pingue uma gota de leo de imerso sobre o esfregao corado e observe ao microscpio
ptico utilizando a objetiva de 100;
10)
Faa um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina e depois
responda s perguntas a seguir.
A bactria que voc corou Gram positiva ou Gram negativa? Justique sua resposta.
3
64
Aula 3
Colorao de Ziehl-Neelsen
Esta tcnica utilizada para identicar bactrias do gnero Mycobacterium, como por
exemplo as espcies Mycobacterium tuberculosis, agentes causadores da tuberculose, e
a Mycobacterium leprae, que causa a doena conhecida como lepra ou Hansenase. Esse
gnero bacteriano possui parede celular diferente das bactrias Gram positivas e Gram
negativas; assim, a tcnica de colorao de Gram no adequada para cor-las. A parede das
micobactrias possui uma espessa camada de lipdeos que evita a penetrao de diversos
corantes; porm, uma vez coradas, resistem fortemente descolorao, mesmo com solues
cidas e lcool absoluto. Por essa caracterstica, essas bactrias so chamadas de Bacilos
lcool-cido Resistentes (BAAR).
A colorao de Ziehl-Neelsen consiste na aplicao do corante fucsina fenicada (soluo
de fucsina e fenol) sobre o esfregao e aquec-lo (esse aquecimento do esfregao permite
a entrada da fucsina atravs da parede da clula). Em seguida, o esfregao lavado com
uma soluo de lcool-cido (etanol e cido clordrico a 3%) e ento submetido a outro
corante, normalmente, azul de metileno. Aps a realizao da tcnica, as bactrias que forem
lcool-cido resistentes (AAR) no se descoram com a soluo de lcool-cido e permanecem
coradas de vermelho (cor da fucsina), e as que no forem AAR se descoram e, depois, se coram
de azul (cor do azul de metileno).
Veja na Figura 11 os reagentes usados nessa tcnica de colorao, na Figura 12 os
passos da tcnica e, na Figura 13, a visualizao microscpica de bactrias AAR aps serem
submetidas colorao de Ziehl-Neelsen.
Aula 3
65
Placa aquecedora
Figura 12 Colorao de Ziehl-Neelsen. a) Adio da fucsina sobre o esfregao e aquecimento em uma placa
aquecedora; b) lavagem do esfregao com gua; c) adio da soluo de lcool-cido; d) lavagem com gua;
e) adio do azul de metileno; f) lavagem com gua; g) secar com papel de ltro
Fonte: Adaptado de Vermelho et al (2006).
66
Aula 3
Atividade 6
Colorao de Ziehl-Neelsen
Objetivos:
Materiais:
Esfregaos de bactrias lcool-cido resistentes;
Reagentes para a colorao de Ziehl-Neelsen;
Microscpios pticos;
leo de imerso.
Procedimento:
1)
2)
3)
Com o auxlio da chama do bico de Bunsen ou de uma placa aquecedora, aquea a lmina
pela sua parte inferior at que comece a desprender vapor, no deixando ferver nem secar.
Repetir essa operao at completar trs emisses sucessivas. Porm, esse procedimento
deve demorar em torno de 5 minutos;
4)
5)
6)
7)
8)
Despreze o corante;
9)
Aula 3
67
10)
11)
Pingue uma gota de leo de imerso sobre o esfregao corado e observe ao microscpio
ptico utilizando a objetiva de 100;
12)
Faa um desenho dentro do crculo do que voc observou na sua lmina e responda s
perguntas a seguir.
68
Aula 3
Qual a cor que a bactria adquiriu aps essa tcnica de colorao? Justique
sua resposta.
Resumo
Nesta aula, voc cou sabendo que, embora os microrganismos no sejam
visveis a olho nu, possvel observ-los com o uso de corantes e microscpios
adequados ao que se deseja observar. Voc aprendeu, ainda, que existem
corantes e tcnicas de coloraes especcas para a visualizao de estruturas
microbianas, como por exemplo a cpsula para a deteco de atividades
celulares como a motilidade e, ainda, para se observar a forma e o arranjo das
clulas. Voc viu que a tcnica de colorao de Gram uma das tcnicas mais
utilizadas na Microbiologia e usada para diferenciar as bactrias Gram positivas
das Gram negativas, e que a tcnica de Ziehl-Neelsen usada para identicar
duas espcies de bactrias importantes como a Mycobacterium tuberculosis e
Mycobacterium leprae que causam, respectivamente, as doenas tuberculose
e hansenase no homem.
Autoavaliao
1
3
4
Por que as bactrias Gram positivas cam roxas e as Gram negativas cam rosas
aps a colorao de Gram?
Aula 3
69
Referncias
BLACK, Jaquelyn G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 2002.
OKURA, M. H.; RENDE, J. C. Microbiologia roteiros de aulas prticas. Ribero Preto: Editora
Tecmedd, 2008.
SILVA FILHO, G. N.; OLIVEIRA, V. L. Microbiologia manual de aulas prticas. 2. ed. Florianpolis:
Editora da UFSC, 2007.
VERMELHO, A. B. et al. Prticas de microbiologia. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
Anotaes
70
Aula 3
Anotaes
Aula 3
71
Anotaes
72
Aula 3
Aula
Apresentao
Objetivos
1
Aula 4
75
De que os microrganismos
se nutrem?
Aula 4
Atividade 1
Baseado no que voc aprendeu sobre os fatores qumicos necessrio para o
crescimento microbiano, preencha o quadro a seguir.
ELEMENTO QUMICO
CARBONO
NITROGNIO
HIDROGNIO
OXIGNIO
FSFORO
OLIGOELEMENTOS
Aula 4
77
Crescimento microbiano
Como j foi dito a voc, o termo crescimento microbiano diferente do que usamos
na linguagem cotidiana, na qual nos referimos ao aumento de tamanho. As crianas, outros
animais e vegetais crescem, ou seja, aumentam de tamanho, mas os organismos unicelulares
no mximo dobram de tamanho e logo se dividem em duas novas clulas. Dessa forma,
crescimento microbiano sinnimo de multiplicao microbiana, ou seja, aumento do nmero
de clulas, e no de tamanho. Assim como determinados elementos qumicos (nutrientes) so
exigidos ao crescimento microbiano, determinados fatores fsicos tambm so indispensveis.
Antes de falarmos dessas exigncias ambientais, vamos aprender como os microrganismos
procariticos se multiplicam?
78
Aula 4
Parede celular
Membrana plasmtica
Alongamento da clula
e replicao do DNA
DNA
Incio da diviso da
parede celular e da
membrana plasmtica
Separao
das clulas
Aula 4
79
Atividade 2
Faa um desenho esquemtico das etapas da diviso binria de uma clula
procaritica e descreva o que acontece em cada etapa.
80
Aula 4
Os microrganismos tambm
passam por fases de crescimento
Quando um microrganismo cresce em um meio de cultivo rico em nutrientes, ele passa por
quatro principais fases de crescimento: 1) fase lag, 2) fase log ou logartmica, 3) fase estacionria
e 4) fase de declnio ou de morte. Essas fases formam a curva de crescimento bacteriano.
Fase lag Essa fase uma fase de adaptao do microrganismo ao meio. Ele no se
multiplica, porm, est em intensa atividade metablica, ou seja, produzindo energia na forma
de ATP, enzimas e vrias outras molculas. Essa fase tambm denominada de latncia e o
tempo de durao depende das condies do meio e da espcie microbiana.
Fase log nessa fase que ocorre a diviso celular de fato e a populao dobra de tamanho.
Cada espcie leva um tempo geneticamente determinado para se dividir e esse intervalo
denominado de tempo de gerao. Nessa fase, as clulas crescem em velocidade exponencial
ou logartmica (log), ou seja, a populao dobra a cada tempo de gerao. Por exemplo, uma
cultura contendo 1.000 organismos com um tempo de gerao de 20 minutos conteria 2.000
organismos aps 20 minutos, 4.000 aps 40 minutos e 8.000 aps 60 minutos (1 hora).
Fase estacionria Fase em que as novas clulas so produzidas com a mesma velocidade
com que as clulas antigas morrem e assim o nmero de clulas vivas permanece constante.
Fase de declnio (morte) Nessa fase ocorre uma reduo do nmero de clulas vivas,
pois muitas perdem a capacidade de se multiplicar e morrem. Isso ocorre porque o meio de
cultivo vai cando cada vez mais desfavorvel multiplicao, pois os nutrientes se tornam
escassos e tambm h um acmulo de resduos txicos, originados pelo prprio metabolismo
microbiano. Veja na Figura 3 um grco representando uma curva de crescimento tpica.
Log
Estacionria
Declnio
Log - n de clulas
Lag
tempo em horas
Aula 4
81
Atividade 3
Observe o grco abaixo de uma curva de crescimento bacteriano e descreva o
que ocorre em cada fase indicada pelos nmeros 1, 2, 3 e 4.
1 ______________________
3
N de
clulas
2 ______________________
4
3 ______________________
4 ______________________
Tempo
82
Aula 4
Atividade 4
De acordo com o que voc aprendeu, complete o quadro abaixo.
Acidlo
Neutrlo
Alcallo
Aula 4
83
Atividade 5
De acordo com o que voc aprendeu, complete o quadro abaixo.
Psicrlos
Meslos
Termlos
84
Aula 4
2H2O2 + O2
superxido dismutase
Radical
superxido
Perxido de Oxignio
hidrognio
2H2O2 Catalase2H2O + O2
Perxido de
hidrognio
Oxignio
gua
H2O2 + 2 H+
Peroxidase
2H2O
gua
Perxido de
hidrognio
a. Aerbicos
obrigatrios
b. Anaerbicos
facultativos
c. Anaerbicos
obrigatrios
d. Microaerfilos
Somente crescimento
aerbico; necessidade de
oxignio.
Crescimento aerbico e
anaerbico; aumento do
crescimento na presena
de oxignio.
Somente crescimento
anaerbico; no h
crescimento na presena
do oxignio.
Somente crescimento
aerbico; necessidade
de oxignio em baixas
concentraes.
Produo de quantidades
letais das formas txicas
de oxignio quando
expostos atmosfera
normal de oxignio.
Aula 4
85
Atividade 6
De acordo com o que voc aprendeu, responda: por que alguns microrganismos
no conseguem sobreviver na presena do oxignio?
Soluo isotnica
quando a concentrao de
solutos igual dentro e
fora da clula.
Soluo hipertnica
quando a concentrao de
solutos do meio maior
do que a do interior
da clula.
Hipotnico
Soluo hipotnico:
quando a concentrao de
solutos do meio menor
do que a do interior
da clula.
86
Aula 4
Presso osmtica Esse termo denido como a presso necessria para impedir o
uxo de gua de um meio de maior concentrao para um de menor concentrao atravs de
uma membrana semipermevel.
Os microrganismos retiram da gua, presente em seu meio ambiente, a maioria dos seus
nutrientes solveis. Portanto, eles necessitam de gua para seu crescimento e seu contedo
celular composto de cerca de 80 a 90% de gua. Dessa forma, quando uma clula microbiana
est num meio aquoso, no devem existir grandes diferenas na concentrao de solutos
dentro e fora, ou as clulas poderiam perder gua ou romper-se.
Quando uma clula est em uma soluo isotnica, o uxo de gua para dentro e para
fora da clula est em equilbrio e a clula cresce normalmente. Porm, a gua presente
dentro da clula pode ser removida por elevaes na presso osmtica. Por exemplo, quando
uma clula microbiana se encontrar em uma soluo hipertnica, ou seja, contendo uma
concentrao de solutos superior quela do interior da clula, ocorrer a passagem de gua
de dentro da clula para o meio atravs da membrana plasmtica e o crescimento microbiano
ser inibido. Esse fenmeno de perda de gua pela clula chamado de plasmlise. Ao
contrrio, quando o meio hipotnico contendo uma concentrao menor de solutos, a gua
ui para dentro da clula rompendo-a. Veja na Figura 5 uma clula em uma soluo isotnica,
hipotnica e hipertnica.
b
Soluto
Parede
Membrana
Citoplasma
celular
plasmtica
Soluo hipertnica
(hiperosmtica) a gua se move para fora da clula,
fazendo sua membrana plasmtica
encolher (plasmlise)
Atividade 7
Baseado no que aprendeu, responda: por que voc acha que salgando a carne,
ela dura mais tempo, mesmo fora da geladeira?
Entenda que os mesmos fatores que afetam o crescimento microbiano podem ser utilizados
como estratgias para controlar os mesmos, desde que voc altere as condies timas de
cada fator. Por exemplo, quando colocamos um alimento na geladeira estamos impedindo
que os microrganismos meslos cresam nesse alimento, pois esses microrganismos no
crescem na temperatura da geladeira, que em torno de 4C.
Aula 4
87
Resumo
Nesta aula, voc aprendeu que o crescimento microbiano pode ser denido
como um aumento no nmero de clulas, e no um aumento de tamanho. Voc
aprendeu, tambm, que os microrganismos procariticos se multiplicam por um
mecanismo chamado de diviso binria, no qual uma clula parental se parte em
duas clulas idnticas e que algumas espcies podem se multiplicar por outro
mecanismo chamado de brotamento. E, ainda, que durante seu crescimento,
o microrganismo passa por diferentes fases. Finalmente, voc compreendeu
que cada espcie microbiana possui exigncias prprias com relao a fatores
nutricionais e fsicos para seu crescimento. Por m, voc compreendeu que os
mesmos fatores que afetam o crescimento microbiano podem ser usados para
controlar seu crescimento.
Autoavaliao
1
7
88
Aula 4
O que presso osmtica e como ela afeta o crescimento das clulas microbianas?
Referncias
BLACK, J. G. Microbiologia fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio de Janeiro: Editora
Guanabara Koogan, 2002.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makon Books, 1996.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed, 2005.
Anotaes
Aula 4
89
Anotaes
90
Aula 4
Obteno de energia
para a vida microbiana
Aula
Apresentao
Metabolismo
conjunto de todas as
reaes bioqumicas que
ocorrem em uma clula ou
organismo.
Substrato
substncia ou material que
serve de base ou suporte.
Nesse caso, substrato
a substncia doadora
de eltrons no processo
de oxidao que fornece
energia para a clula.
Objetivos
1
Aula 5
93
Bioluminescncia
A emisso de luz da
cadeia de transporte
de eltrons de certos
organismos vivos (a
cadeia de transporte de
eltrons ser vista mais
adiante no texto
dessa aula).
94
Aula 5
Sua lista provavelmente contm algumas das seguintes atividades: mobilidade atravs do
movimento de agelos; transporte de substncias do meio para o interior da clula (absoro
de nutrientes) e da clula para o meio (excreo de resduos e secreo de substncias ativas);
reproduo; reparo de danos e manuteno da integridade celular; manuteno da presso
osmtica constante na clula; bioluminescncia. Alm de todas essas atividades, as clulas
precisam de energia para a biossntese de novas macromolculas, que o trabalho de maior
demanda energtica da clula.
De onde a clula retira a energia necessria para todas essas atividades? Voc j deve
ter ouvido falar em um composto chamado adenosina trifosfato ou trifosfato de adenosina, o
ATP. A molcula de ATP (Figura 1) acumula ligaes de alta energia dentro da clula. Quando
a clula precisa realizar a biossntese ou outra atividade celular, a energia necessria cedida
pelas molculas de ATP.
Essas molculas so formadas por adenina (uma base nitrogenada), ribose (um acar
com cinco tomos de carbono) e trs grupos fosfato. O smbolo ~ representa uma ligao
de alta energia, que pode ser prontamente quebrada para liberar energia utilizvel pela clula.
Quando o ATP se degrada em ADP e fosfato inorgnico, grande quantidade de energia qumica
liberada para uso em outras reaes qumicas.
NH2
Adenina
N
HC
P~ O
P~ O
CH
C
N
N
O
CH2 O
H
Ribose
H
HO
OH
AMP
ADP
ATP
Atividade 2
1
A energia qumica das ligaes de alta energia do ATP liberada quando o grupo
fosfato terminal retirado da molcula, resultando na formao de outro composto
com menos energia. Analise a Figura 1 e descubra qual esse composto. Depois,
escreva seu nome completando a reao abaixo.
Agora, descubra qual a reao geral de formao de ATP. Basta escrever a reao
inversa da anterior:
________ + fosfato + __________ ATP
Aula 5
95
Reduo
A oxidada
B reduzida
Oxidao
Figura 2 Oxidao-reduo
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).
96
Aula 5
Atividade 3
Resuma na tabela a seguir as informaes que voc acabou de estudar.
Processo de
obteno de energia
Microrganismos
Origem da energia
Respirao aerbica
Composto orgnico ou
inorgnico
Respirao anaerbica
Fermentao
Bactrias verdes
Bactrias prpuras
Fotossntese
Cianobactrias
Algas
Respirao aerbica
Veremos agora uma srie de reaes necessrias respirao celular aerbica, ou seja,
que ocorre apenas em ambientes onde o oxignio est presente. A respirao aerbica se d
em trs etapas, de forma semelhante em eucariotos (incluindo animais e plantas superiores)
e procariotos aerbicos. Algumas diferenas existem. Vamos descobrir.
Aula 5
97
H
H O
O H H C
H
H
O
O H
H
Hidrognio
Carbono
Oxignio
Atividade 4
Analise a Figura 3 e complete a frmula da molcula de glicose, indicando o nmero de
tomos de cada elemento:
C__H__O__
98
Aula 5
Atividade 5
Ns, humanos, assim como muitas bactrias, fungos e protozorios,
precisamos obter a glicose para a respirao a partir dos alimentos disponveis
no meio. Microrganismos retiram a glicose do solo, da gua, de tecidos animais
e plantas onde se hospedam. Pesquise sobre a glicose em livros ou na internet
e faa uma lista de alimentos que so ricos desse carboidrato.
Aula 5
NAD +
Abreviao do nome da
molcula transportadora
de eltrons chamada
nicotinamida adenina
dinucleotdeo (forma
oxidada).
NADH
Abreviao do
nome da molcula
transportadora de
eltrons chamada
nicotinamida adenina
dinucleotdeo (forma
reduzida).
99
Veja a Figura 4. Ela representa a oxidao biolgica. Dois eltrons e dois prtons
(juntos equivalem a dois tomos de hidrognio) so transferidos de uma molcula orgnica
para uma coenzima, NAD +. NAD +, na realidade, recebe um tomo de hidrognio e um
eltron, e um prton liberado no meio. NAD+ reduzido a NADH, que uma molcula
mais rica em energia.
Reduo
+
H H
(prton)
e
H+
Molcula orgnica
Coenzima NAD +
que inclui dois tomos (transportador de eltron)
de hidrognio
Molcula orgnica
oxidada
NADH + H + (prton)
(transportador de
eltron reduzido)
Oxidao
Figura 4 Representao da oxidao biolgica
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).
Atividade 6
Faa aqui uma relao dos produtos resultantes da gliclise, a primeira etapa da
respirao. Considere o nmero de molculas resultantes para cada molcula de
glicose que entra no processo.
Produto formado
1.
2.
3.
100
Aula 5
Baseado no que voc estudou at agora, explique com as suas palavras como ocorre
a formao do NADH e qual sua funo na clula.
2 ATP
2 cido
pirvico
2 CO2
2 NADH
+2H +
Passo preparatrio
2 Acetil CoA
6 NADH
+6H +
CICLO DE
KREBS
4 CO2
2 FADH2
10 NADH2
2 FADH2
(Total)
6 CO2
(Total)
+10H +
2 ATP
Eltrons
Cadeia de
transporte
de Eltrons e
Quimiosmose
34 ATP
6 O2
+ 12H +
6 H2O
38 ATP
(Total)
Aula 5
101
Atividade 7
1
Etapas
Composto
Incio da gliclise
Glicose
Final da gliclise
Piruvato
Acetil coA
Etapa preparatria do ciclo de Krebs
CO2
102
Aula 5
CO2
Aula 5
FADH 2
Abreviao do nome da
molcula transportadora
de eltrons chamada
avina adenina
dinucleotdeo (forma
reduzida).
FAD
Abreviao do
nome da molcula
transportadora de
eltrons chamada
avina adenina
dinucleotdeo (forma
oxidada).
103
Atividade 8
Faa aqui uma relao dos produtos resultantes da etapa de transformao do
piruvato (preparatria para o ciclo de Krebs), do ciclo de Krebs. Considere o nmero
de molculas resultantes para cada molcula de glicose que entra no processo.
Produto formado
Nmero de molculas
1.
2.
3.
4.
104
Aula 5
NADH
Respirao
Gliclise
NAD +
NADH
ATP
NADH
FADH2
FAD
Ciclo de Krebs
F l u xo
FMN
Q
de el
tr on
Cyt b
Fermentao
Cyt c1
ATP
2 H+
Cyt c
ATP
Cadeia de
transporte de
eltrons e quimiosmose
Cyt a3
1
2
Reduo
Energia
Cyt a
Legenda:
O2
H2O
Oxidao
Alta concentrao de H +
H+
H+
Cadeia de
transporte de
eltrons (inclui
bomba de prtons)
Membrana
Citoplasmtica
ATP
sintase
3
Energia de
luz solar
ou NADH
ADP + P
ATP
Baixa concentrao de H +
Figura 6 Cadeia de transporte de eltrons. O diagrama na lateral indica a relao da cadeia de transporte de eltrons com o processo
total da respirao
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).
Aula 5
105
106
Aula 5
1)
2)
3)
Atividade 9
Analise a Figura 7 a seguir e descubra que diferenas so essas. Depois, escreva suas
concluses no espao abaixo.
Procariotos
Eucariotos
Glicose
Glicose
Gliclise
ATP
NADH
Gliclise
Piruvato
ATP
NADH
Piruvato
Mitocndria
Ciclo
de Krebs
Ciclo
de Krebs
CO2
NADH
FADH2
ATP
CO2
NADH
FADH2
ATP
Aula 5
107
Atividade 10
1
108
Aula 5
Pseudomonas
NO3
Desulfovibrio
SO42
Methanococcus
CO2
Geobacter metallireducens
Fe3 +
Aula 5
109
Atividade 11
Faa uma pesquisa em livros e na internet e descubra em quais ambientes
podemos encontrar bactrias anaerbicas. Registre no espao abaixo os
resultados de sua pesquisa.
Leveduras
fungos microscpicos,
unicelulares e
no-lamentosos,
com clulas ovais ou
esfricas.
110
Aula 5
Atividade 12
Voc recorda quais so os produtos formados durante a gliclise? Escreva-os aqui.
Aula 5
111
Gliclise
Glicose
Respirao
Gliclise
NADH
2 NAD +
ATP
NADH
2 ADP
2
2 NADH
ATP
Ciclo de Krebs
2 cido pirvico
Fermentao
cido pirvico
(ou derivados)
ATP
2 NADH
ATP
Cadeia de
transporte de
eltrons e quimiosmose
2 NAD +
Formao de
produtos finais
da fermentao
cido pirvico
Organismos
Streptococcus,
Lactobacillus,
Bacillus
cido ltico
Produtos Finais
da Fermentao
Saccharomyces
(levedura)
Etanol
e CO2
Propionibacterium
cido propinico,
cido actico,
CO2 e H2
Clostridium
Escherichia,
Salmonella
Enterobacter
cido butrico,
butanol,
acetona,
lcool isoproplico
Etanol,
cido ltico,
cido succnico,
cido actico,
e CO2
CO2 e H2
CO2 e H2
Figura 9 Representao do processo de fermentao. O diagrama indica a relao da fermentao e da respirao. a) Viso geral da
fermentao. b) Produtos nais de vrias fermentaes microbianas
Fonte: Adaptado de Tortora, Funke e Case (2002).
112
Aula 5
Atividade 13
Analise e Figura 8 e compare a respirao com a fermentao. Quais etapas
da respirao faltam na fermentao? O texto que antecede essa gura pode
ajud-lo a responder. Registre suas concluses abaixo.
Aula 5
113
Atividade 14
O iogurte uma bebida fabricada graas fermentao do leite. Bactrias
do grupo lactobacilos se alimentam do acar do leite e produzem uma
substncia azeda, chamada cido ltico. De acordo com o que voc aprendeu
sobre fermentao, qual , nesse exemplo, o substrato (fonte de energia) para
os lactobacilos? E qual o aceptor nal de eltrons?
Leituras complementares
http://objetoseducacionais2.mec.gov.br/bitstream/handle/mec/2701/cadeia%20
transportadora_ATPsintase.swf?sequence=1
A cadeia transportadora de eltrons e a fosforilao oxidativa: trata-se de uma animao
que est disponvel no Banco Internacional de Objetos Educacionais do MEC. Atravs desse
endereo, voc vai poder entender melhor o mecanismo da cadeia de transporte de eltrons. Caso
o endereo no abra diretamente, v em <http://objetoseducacionais2.mec.gov.br> e digite no
campo de busca Cadeia de transporte de eltrons. Em seguida, clique no link correspondente.
http://cienciahoje.uol.com.br/105458
Os segredos da fermentao: este artigo da revista Cincia Hoje fala sobre a importncia
do estudo da levedura Saccharomyces cerevisiae, envolvida no processo de fermentao da
cachaa de alambique no Brasil. Na parte de baixo da pgina, h um cone que disponibiliza
o artigo completo.
http://cienciahoje.uol.com.br/147455
lcool mais limpo: neste outro artigo da revista Cincia Hoje, voc vai encontrar uma
matria que retrata uma nova tcnica de fermentao do lcool derivado da cana-de-acar,
que garante mais economia para as usinas e reduz o risco de danos ao meio ambiente.
114
Aula 5
Resumo
Nesta aula, abordamos a diversidade de processos que fornecem energia para
a manuteno e o crescimento (reproduo) da clula microbiana. Voc teve
a oportunidade de compreender a importncia do ATP para o fornecimento
de energia nas clulas vivas, em especial os microrganismos. Apresentamos
as classes de substratos que os microrganismos retiram do ambiente e usam
como fonte de energia em cada um desses processos. Discutimos as principais
diferenas e semelhanas das etapas da respirao aerbica, anaerbica e
fermentao. Foram apontadas algumas diferenas da respirao de procariotos
e eucariotos. Foi discutido, tambm, como microrganismos fermentadores tm
sido usados na fabricao de alimentos e bebidas.
Autoavaliao
Um dos objetivos desta aula foi fazer voc identicar a diversidade de substratos
energticos usados por microrganismos e descrever os respectivos processos de obteno
de energia. Faa os exerccios abaixo para atestar se esses objetivos foram alcanados.
Aula 5
115
Substratos
Produtos nais
Respirao aerbica
Respirao anaerbica
Fermentao
116
Aula 5
a)
b)
c)
d)
Referncias
BARBOSA, H. R.; TORRES, B. B. Microbiologia bsica. So Paulo: Ed. Atheneu, 2005. 196p.
BRIGGS, B. et al. Teaching cellular respiration & alternate energy sources with a laboratory
exercise developed by a scientist-teacher partnership. The American biology teacher,
Washington, v. 71, n. 3, p. 164-167, 2009.
MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. So Paulo: Prentice
Hall, 2004.
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000, 827p.
Aula 5
117
Anotaes
118
Aula 5
Controlando os microrganismos
Aula
Apresentao
Objetivos
1
Aula 6
121
Atividade 1
Voc conhece alguma forma que utilizamos no dia a dia para matar
microrganismos? Cite-as.
122
Aula 6
paciente na gola do seu casaco. Os curativos cirrgicos eram muitas vezes feitos com o algodo
que sobrava no cho das fbricas. Foi nesse contexto que o cientista francs Louis Pasteur
demonstrou que havia organismos invisveis, os micrbios, que eram causadores de doenas.
O trabalho de Pasteur inuenciou o cirurgio ingls Joseph Lister, que aplicou a teoria
dos germes de Pasteur nos procedimentos cirrgicos. Fundou, assim, a cirurgia moderna, com
antissepsia. Para desinfetar o ambiente cirrgico, Lister passou a utilizar uma soluo de cido
fnico (fenol), a qual era pulverizada em torno da sala de operao com um pulverizador de mo.
Figura 2 Cirurgia no sculo XIX utilizando o pulverizador de Lister com cido carblico.
Fonte: <http://www.textbookofbacteriology.net/earlysurgery.jpg>.
Acesso em: 28 out. 2009.
Aula 6
123
Atividade 2
O que voc entende por esterilizao?
O controle do crescimento microbiano pode ser feito por meio de tcnicas que inibem
o crescimento, matando os microrganismos ou removendo-os de um ambiente. Assim, os
agentes antimicrobianos podem ser divididos em agentes que matam os microrganismos,
ou bactericidas, e agentes que inibem o seu crescimento, ou bacteriostticos. Esse controle
geralmente envolve o uso de agentes fsicos ou qumicos. Um bactericida mata bactrias, um
fungicida mata fungos, e assim por diante.
Em Microbiologia, o termo esterilizao refere-se destruio ou eliminao de todos
os organismos viveis dentro ou sobre uma substncia a ser esterilizada. No h graus
intermedirios de esterilizao; assim, um objeto ou substncia ou est estril ou no est.
A esterilizao pode ser realizada por vrios mtodos, como veremos a seguir.
124
Aula 6
Controle de microrganismos
por meios fsicos
O calor o mtodo de esterilizao mais largamente utilizado. Para uma esterilizao
eciente, deve-se considerar o tipo de calor, e o mais importante, a temperatura utilizada para
assegurar a destruio de todos os microrganismos.
Incinerao
Queima e destruio fsica dos organismos.
Ebulio
Submisso do objeto contaminado a 100 C por 30 minutos. Elimina tudo, exceto alguns
endsporos. Para matar endsporos e, portanto, esterilizar uma soluo, um tempo muito
longo (> 6 horas) de ebulio necessrio.
Aula 6
125
Pasteurizao
126
Aula 6
Radiao eletromagntica
uma forma ecaz para esterilizar ou reduzir a carga microbiana de quase qualquer
substncia. O forno de micro-ondas, a radiao ultravioleta (UV), os raios X, os raios gama e
eltrons so utilizados nesse processo, embora cada tipo de radiao tenha um mecanismo
especco de ao. A radiao ultravioleta (UV), que no penetra slidos, til para a
desinfeco de superfcies, do ar e lquidos que no absorvem as ondas UV. Os raios gama e X,
que so mais penetrantes, so mais difceis e caros, mas tm sido utilizados na conservao
de alimentos e outros processos industriais.
Atividade 3
Sabendo que a radiao gama inativa enzimas autocatalticas, que participam do
processo de degradao natural, pesquise e descreva brevemente em que esse
tipo de radiao tem sido muito usado.
Aula 6
127
Figura 5 Exemplos de membranas (ltros) com dimetro de 0,22 micras de porosidade para reteno de partculas
microscpicas
Fonte: <http://www.interface.co.pt/images/produtos/mf_gr.jpg>; <http://www.
interface.co.pt/images/produtos/pes_gr.jpg> <http://www.interface.co.pt/images/
produtos/durapore_gr.jpg>. Acesso em: 28 out. 2009.
Controle de microrganismos
por agentes qumicos
Antimicrobianos so substncias qumicas que matam ou inibem o crescimento de
microrganismos. Agentes antimicrobianos incluem conservantes qumicos e antisspticos,
bem como drogas usadas no tratamento de doenas infecciosas de animais e plantas. Os
agentes antimicrobianos podem ser de origem natural ou sinttica e podem ter um efeito
esttico ou mortal sobre microrganismos.
128
Aula 6
Aula 6
129
Iodo
Aldedos***
Metais pesados
Espectro de
ao*
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR**
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas
BAAR
Gram-positivas
Gram-negativas
Uso
Modo de ao
Tempo de exposio
Desvantagens
Antisspticos
Desinfetantes
Desnaturao proteica
Dissoluo de lipdeos
Tratamento
da gua
Inativao enzimtica
do agente oxidante
Efeito imediato
Antisspticos
Desinfetantes
Inativao enzimtica
Efeito imediato
Desinfetantes
Desnaturao proteica
do agente alquilante
Tempo de
exposio longo
Antisspticos
Inativao enzimtica
No atuam sobre
BAAR e esporos
Pouco ativo
contra esporos
Odor irritante;
pouco ativo
contra esporos
Odor irritante;
pouco ativo
contra esporos
Atividade 4
Ateno! Esta atividade deve ser feita em regime presencial. Dirija-se ao seu
polo de ensino para realiz-la.
Aula 6
1)
Pegue uma placa de Petri contendo gar e divida em 4 partes iguais. Utilize, para isso,
uma caneta de retroprojetor, fazendo a diviso na parte de baixo da placa.
2)
Identique cada quadrante com os termos: Controle (C), Mo Suja (MS), Detergente (Det),
lcool 70% (Al). Prepare a placa seguindo o esquema abaixo.
MS
Det
Al
3)
No quadrante identicado como Mo Suja, voc deve encostar o dedo (sem lavar) por
alguns segundos, fazendo leve presso.
4)
Em seguida, lave as mos com detergente, seque-as ao ar livre e encoste o mesmo dedo
no quadrante do gar identicado como Detergente por alguns segundos.
5)
Agora, lave as mos com lcool, seque-as e encoste o mesmo dedo no quadrante do gar
identicado como lcool por alguns segundos.
6)
Aps, no mnimo, 24 horas, faa a leitura dos resultados encontrados na placa, de acordo
com o que se pede a seguir:
Aula 6
131
Crescimento Bacteriano
++
+++
++++
Controle
Mo Suja
Placa I
Detergente
lcool 70%
sem crescimento microbiano; + crescimento microbiano. Estabelea um critrio de quantidade de colnias para atribuir a simbologia +, ++, +++ ou ++++
ao crescimento.
a)
Qual a diferena entre o controle e os outros campos da placa? Por que isso
ocorre?
b)
Ateno! Quem trabalha com microrganismos tem que estar sempre atento:
deve-se evitar a contaminao do material com contaminantes, assim como
evitar espalhar microrganismos por todo o laboratrio.
132
Aula 6
Os antibiticos
O homem sempre procurou descobrir formas de curar leses, febres e as dores. Nessa
perspectiva, os antibiticos vieram revolucionar a capacidade de curar doenas de natureza
microbiana. A partir da descoberta da penicilina a base dos antibiticos pelo bacteriologista
escocs Alexander Fleming, gerou-se uma revoluo na Medicina do sculo XX. Fleming
descobriu que o fungo Penicillium produzia substncias capazes de destruir as bactrias que
cavam sua volta, e deu-lhe o nome de penicilina.
Desse perodo em diante, esses fungos passaram a ser cultivados em laboratrios para
a produo em escala industrial de antibiticos que atacavam microrganismos que o sistema
imunolgico humano no conseguia eliminar sozinho. Graas a esses medicamentos, doenas
infecciosas como a pneumonia, a slis, a gonorreia e a tuberculose puderam ser tratadas,
deixando de ser fatais. Durante a Segunda Guerra Mundial, a penicilina salvou a vida de milhes
de soldados feridos nos campos de batalha, permitindo tambm que a expectativa de vida da
poca aumentasse.
Aula 6
133
Como os antibiticos
agem para matar as bactrias?
O mecanismo de ao dos antibiticos pode se dar de diversas formas:
1)
2)
3)
4)
5)
Replicao do DNA
Sntese de RNA
ADN
ARNm
Ribosomas
50
30
50
30
50
30
Antimetablitos
Sntese de protenas
(ribossomo 50S )
Sntese de protenas
(ribossomo 30S )
134
Aula 6
H
N
R
O
S
N
OH
1)
2)
3)
PBP
Protena que se liga
penicilina.
Aula 6
135
Atividade 5
Pesquise os dois outros tipos de resistncia aos antimicrobianos e descreva-os
brevemente no espao a seguir.
136
Aula 6
Resumo
Nesta aula, vimos que o controle do crescimento de microrganismos possvel
pela ao de agentes fsicos e qumicos, que possuem propriedades de matar
a clula microbiana ou de impedir a sua reproduo. Voc aprendeu tambm
que, por outro lado, as bactrias podem ser resistentes a esses agentes ao
desenvolverem diversos mecanismos que impedem a ao de antimicrobianos.
Autoavaliao
1
Referncias
CONTROL of microbial growth. Disponvel em: <http://textbookofbacteriology.net/kt_toc.html>.
Acesso em: 28 out. 2009.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. 10. ed. So Paulo:
Prentice-Hall, 2004.
MURRAY, Patrick R.; PFALLER, Michael A.; ROSENTHAL, Ken S. Microbiologia mdica. 5. ed.
Rio de Janeiro: Ed. Elsevier, 2006.
SERRA, Henrique A. A histria dos antibiticos. Disponvel em: <http://www.medstudents.
com.br/historia/eming/eming.htm>. Acesso em: 28 out. 2009.
TORTORA, G. J.; FUNK, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: ArtMed, 2005.
Aula 6
137
Apndice A
Denies importantes
Esterilizao: destruio ou remoo de todas as formas de vida de um objeto ou
habitat. Processo que visa destruio total de todas as formas de vida (inclusive
esporos), de um material ou ambiente, atravs de mtodos fsicos ou qumicos.
Desinfeco: processo que promove a inibio, morte ou remoo de vrios microrganismos
patognicos e saprtas, sem eliminar todas as formas de vida. Consiste na destruio,
remoo ou reduo dos microrganismos presentes num material inanimado. Visa eliminar a
potencialidade infecciosa do objeto, superfcie ou local.
Sanitizao: processo que leva reduo dos microrganismos, em nveis seguros, de acordo
com os padres de sade pblica (elimina 99,9% das formas vegetativas).
Antissptico: produto que evita a infeco em tecidos, seja inibindo ou matando os
microrganismos. Como so aplicados em tecidos vivos, os antisspticos so, geralmente,
menos txicos que os desinfetantes (agentes aplicadas em materiais inanimados).
Germicida: mata microrganismos, mas no endsporos.
Assepsia: Procedimento que visa evitar o retorno da contaminao a um objeto, superfcie
ou local.
Antissepsia: desinfeco de tecidos vivos, como pele e mucosas.
Bactericida: agente que mata as bactrias. Similarmente, temos fungicida (fungos), viricida
(vrus) e esporocida (esporos).
Bacteriosttico: agente que inibe a multiplicao bacteriana.
138
Aula 6
Anotaes
Aula 6
139
Anotaes
140
Aula 6
Aula
Apresentao
Voc j aprendeu nas aulas anteriores que os microrganismos so muito versteis
metabolicamente. Eles conseguem se adaptar a ambientes diversos devido a sua capacidade
de utilizar compostos muito variados como fonte de energia para o seu desenvolvimento.
Nesta aula, voc ir compreender como a estrutura do cromossomo bacteriano
e quais os mecanismos bsicos que permitem fazer com que as informaes genticas
sejam expressas pelos organismos. Tambm iremos discutir como podem se apresentar
outros modos de informao gentica nos microrganismos, alm daquelas contidas no
prprio cromossomo.
Objetivos
1
Aula 7
143
144
Aula 7
Aula 7
145
Atividade 1
Estabelea uma comparao entre as duas clulas do ponto de vista da
organizao do material gentico.
Voc deve ter observado que a clula procaritica no dispe de uma membrana tpica,
ao contrrio de clula eucaritica. Nesta, o material nuclear encontra-se envolvido por uma
membrana que se conecta com o citoplasma.
Nos vrus, que no so clulas, mas so considerados entidades biolgicas exatamente
por possurem material gentico, dentre outras caractersticas, o genoma est contido no
interior de uma capa de protenas chamada capsdeo.
146
Aula 7
Aula 7
147
plasmdeos F (conjugao);
plasmdeos R (resistncia);
plasmdeos de virulncia;
plasmdeos colicinognicos;
Atividade 2
Pesquise na internet ou em livros disponveis nos polos (se for o caso) sobre a funo
dos plasmdeos R e dos plasmdeos de virulncia.
Plasmdeos R
Funo:
148
Aula 7
Plasmdeos de virulncia
Funo:
Como so os cromossomos
dos microrganismos?
Se voc no percebeu, na Figura 5, a maior parte da informao gentica das bactrias
est contida em um cromossomo nico e circular, o qual consiste de DNA e protenas. Essa
informao duplicada e repassada igualmente entre as duas clulas lhas, quando a clulame se divide. Isso s possvel porque o DNA uma molcula autorreplicvel e pronta para
fazer uma cpia exata de si mesma antes de ocorrer a diviso celular.
Nos vrus, o genoma muito diversicado e pode conter DNA ou RNA, como voc pode
observar nas Figuras 6 e 7 a seguir.
Parvovirus
Hepadnavirus
Papovavirus
Poxvirus
Adenovirus
Herpesvirus
Iridovirus
100 nm
Togavirus
Rhabdovirus
Picornavirus
Orthomyxovirus
Bunyavirus
Coronavirus
Reovirus
100 nm
Arenavirus
Retrovirus
Paramyxovirus
Aula 7
149
As etapas do uxo
da informao gentica
Os processos de replicao, transcrio e traduo ocorrem em todos os organismos,
mas existem diferenas entre o que ocorre em procariotos e eucariotos.
O uxo da informao gentica pode ser caracterizado em trs processos moleculares,
descritos a seguir.
a)
b)
c)
150
Aula 7
transcrio
(a)
DNA
traduo
RNA mensageiro
Protena
replicao
(b)
fitas novas
DNA de fita dupla
DNA
(c)
mRNA
tRNA
rRNA
(d)
Aminocido (ativado)
Ribossomo
NH2
as duas bandas de DNA so antiparalelas uma outra, ou seja, uma banda corre na
direo 5 - 3 e a outra corre na direo 3- 5;
a sntese de DNA semiconservativa, ou seja, cada nova molcula conserva uma das
cadeias antigas.
Aula 7
151
Figura 10 Estrutura molecular do DNA (a cadeia dupla enrolada em si mesma formando uma hlice)
Fonte: <http://4.bp.blogspot.com/_R-rTvAicCNQ/SeLIakiR-DI/AAAAAAAABso/3ATUbN92iGs/s400/
como_funciona_o_dna_06.jpg>. Acesso em: 6 out. 2009.
152
Aula 7
Atividade 3
Analise a gura a seguir e explique por que as etapas do uxo gentico em uma clula
eucaritica (como no caso da gura) so diferentes em relao a uma clula procaritica, em
termos espaciais.
Aula 7
153
Viso geral da
replicao do DNA bacteriano
Como voc j sabe, a diviso celular nas bactrias consiste em um processo simples
de diviso chamado sso binria, na qual as clulas se dividem em duas, como revela a
guraseguinte.
Origem da replicao
154
Aula 7
Aula 7
155
Sequncias repetidas
(a)
ACGTACGTACGT
TGCATGCATGCA
TGCATGCATGCA
ACGTACGTACGT
DNA hospedeiro
Stio alvo
CATGC
GTACG
(b)
CATGC
GTACG
Insero do transposon
(c)
ACGTACGTACGT
GTACG TGCATGCATGCA
TGCATGCATGCA CATGC
ACGTACGTACGT
CATGC ACGTACGTACGT
TGCATGCATGCA CATGC
GTACG TGCATGCATGCA
ACGTACGTACGT GTACG
Os microrganismos e gentica
O uso cada vez mais intenso de microrganismos na gentica deu um novo impulso
cincia da hereditariedade. Isso foi um marco decisivo para o desenvolvimento dessa rea,
porque os microrganismos possuem excelentes qualidades para os estudos genticos.
Eles apresentam, em geral, um ciclo de desenvolvimento rpido, facilitando assim o estudo
da transmisso de caractersticas hereditrias em um curto perodo de tempo. Como so
microscpicos, podem ser cultivados em grandes densidades em um espao pequeno. Sendo
organismos morfologicamente mais simples, mais fcil, por meio deles, compreender os
mecanismos de herana das caractersticas genticas.
Grande parte dos microrganismos apresenta apenas um cromossomo ou um nmero
reduzido de cromossomos, fato que tambm os torna mais fceis de serem estudados. Por
essas e outras razes, como a utilizao dos microrganismos na indstria de alimentos e de
medicamentos, entre outros usos, a compreenso da gentica de microrganismos torna-se
necessria, como veremos nas aulas seguintes.
156
Aula 7
Resumo
Nesta aula, voc estudou onde se encontram as informaes genticas dos
microrganismos. Foram revistas as estruturas do DNA bacteriano, que nico
e circular, o que leva a um modo diferenciado de replicao. Voc aprendeu
tambm que pode haver informaes genticas em forma de plasmdeos e que
h sequncias cromossmicas que mudam de lugar, os chamados transposons.
Autoavaliao
1
2
3
4
5
Referncias
MADIGAN, M. T. Microbiologia de Brock. So Paulo: Pearson Ed. Do Brasil, 2004. 589 p.
PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makron Books, 1996.
RAVEN, Johnson.Biology. 6th ed. New York: Mc Graw-Hill, 2001.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. I. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre: Editora
Artmed,2005.
TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F. Microbiologia. 4. ed. So Paulo: Editora Atheneu, 2004.
Aula 7
157
Anotaes
158
Aula 7
As bactrias se modicam
Aula
Apresentao
s bactrias se reproduzem o tempo inteiro, o que faz com que variaes genticas se
espalhem rapidamente numa populao. Existem dois processos gerais que originam
variaes nos microrganismos: a mutao e a recombinao gentica. Nesta aula,
voc compreender como ocorrem esses processos e como, a partir deles, as modicaes
acontecem, mais especicamente nas bactrias. Tambm estudaremos como os vrus podem
contribuir para as alteraes genticas nos genomas bacterianos.
Objetivos
1
Aula 8
161
M
Inspito
Que no recebe com
hospitalidade. Diz-se do
lugar onde no se pratica
a hospitalidade. Que no
agasalha, ou no protege;
que no serve para ser
habitado. Fonte: dicionrio
Michaelis.
uitas bactrias trocam material gentico entre si. Essa troca de DNA entre clulas
bacterianas permite o intercmbio de genes e, consequentemente, de certas
caractersticas entre elas, o que leva ao aparecimento de cepas bacterianas antes
no existentes. Essa transferncia de genes pode ser vantajosa para a bactria receptora,
especialmente quando o DNA codica mecanismos de resistncia a antibiticos ou se o
gene novo permitir que a bactria faa uso de um substrato antes no utilizado para sua
sobrevivncia em um ambiente inspito. O material gentico transferido pode se integrar
ao cromossomo da bactria receptora ou manter-se de forma estvel, como na forma de um
elemento extracromossmico, como um plasmdeo, que voc j conheceu na aula anterior.
Pode ainda ser um material gentico advindo de um vrus bacteriano (bacterifago) e ser
transmitido s clulas lhas, como veremos nesta aula.
Atividade 1
Virulncia
Capacidade de um
vrus ou bactria de
se multiplicar dentro
de um organismo,
provocando doena.
Fonte: dicionrio
Houaiss da lngua
portuguesa.
162
Aula 8
plasmdeos conjugativos codicam todos os fatores necessrios para sua prpria transferncia.
Alm disso, outros plasmdeos podem ser transferidos de uma clula bacteriana a outra por
meio de outros mecanismos de transferncia, como veremos.
Atividade 2
1
Mutao
Conjugao
Voc acha que esses dois processos tm alguma importncia para os seres vivos?
Por qu?
Aula 8
163
Os microrganismos
sofrem modicaes
J vimos que possvel aos microrganismos, especialmente s bactrias, sofrer
modicaes por meio da transferncia de genes entre elas. O modo como isso pode acontecer
o que estudaremos agora.
As variaes bacterianas podem ser:
Fenotpicas: quando resultam das adaptaes das bactrias ao ambiente. So reversveis, no
se relacionando com alteraes genticas. No so, portanto, transmissveis.
Essas variaes so de carter adaptativo, decorrentes de uma modicao no
meio e podem ser morfolgicas ou siolgicas.
Por exemplo: Serratia marcescens (37 C sem pigmentao 25 C vermelhas)
Genotpicas: alteraes na sequncia de nucleotdeos, levando a uma modicao gentica.
Assim, so transmitidas aos descendentes e irreversveis.
As variaes genotpicas podem ocorrer por recombinao ou por mutao.
164
Aula 8
1)
Transformao
2)
Conjugao
3)
Transduo
Estado de
competncia
Aquele estado em
que a bactria deve
apresentar stios de
superfcie para a ligao
com o DNA da clula
doadora e apresentar
a membrana em uma
condio que permita a
passagem desse DNA.
Cromossomo
Aula 8
165
Atividade 3
Leia o texto da revista Cincia Hoje sobre quorum sensing <http://www.unb.br/ib/
cel/microbiologia/artigos/qs.pdf> e descreva resumidamente o que voc entendeu
sobre esse processo. O artigo tambm estar disponvel na pgina da disciplina.
166
Aula 8
DNA de
fita dupla
Parede
celular
Membrana
citoplasmtica
DNA integrado
Tratamento com
corrente eltrica
Clula receptora
Fragmentos do DNA
da clula doadora
Clula transformada
Atividade 4
1
2
Aula 8
167
De modo geral, consideramos que a conjugao pode ocorrer em bactrias Gram positivas
e Gram negativas (reveja a Aula 1, Comparando clulas procariticas e clulas eucariticas)
por diferentes mecanismos:
Plasmdeos
Os plasmdeos que
tm a capacidade
de se integrar ao
cromossomo da clula
so chamados de
epissomos.
168
Aula 8
Plasmdeo
Pilus sexual
Aula 8
169
Fonte: <http://1.bp.blogspot.com/_iW5f4BaDqvw/SOpbR1v9yKI/AAAAAAAAAC8/iUj6iNPrtHk/s400/
conjuga%C3%A7%C3%A3o+bacteriana+08.jpg>. Acesso em: 14 out. 2009.
Atividade 5
Por que no podemos dizer que a conjugao bacteriana um processo de
reproduo sexuada?
170
Aula 8
No ciclo ltico, depois que um bacterifago ou fago entra em uma bactria, ele pode
induzi-la a fazer cpias de si prprio. No m desse processo, a bactria infectada sofre lise
e novos vrus so lanados no ambiente, como voc pode ver na Figura 6 a seguir. Em A, o
vrus infecta uma clula bacteriana, injetando nela seu DNA. Em B, o DNA viral induz a clula
a replicar os genes virais. A etapa C mostra que partes dos vrus so formadas no interior da
clula bacteriana, para dar origem a novas partculas virais completas. Finalmente, em D, a
clula sofre lise e os vrus completos so liberados para o meio extracelular.
Aula 8
Lise
A lise o processo de
ruptura ou dissoluo
da membrana
plasmtica ou da
parede bacteriana, que
leva morte da clula
e liberao de seu
contedo.
171
172
Aula 8
A - Transduo generalizada
B - Transduo especializada
DNA bacteriano
DNA do fago
A+ B+
B+
A+
A+
DNA do profago
A+
B+
A+
B+
A+
A+
A+
-
A-
A B
B-
A+
B-
Aula 8
173
Atividade 6
Qual a diferena bsica, em termos do ciclo viral, para que ocorra transduo
generalizada ou especializada?
174
Aula 8
Ponto de mutao
Substituio de base
A
Substituio de
uma base ou de muitas bases
Insero
Adio de uma base
ou de algumas bases
A
Deleo
perda de uma
ou de algumas bases.
A
Aula 8
175
Resumo
Nesta aula, voc compreendeu como os microrganismos realizam trocas
de material gentico. Vimos que isso possvel por meio de mecanismos de
transferncia gnica ou de mutaes pontuais no cromossomo. No primeiro
caso, voc aprendeu que as bactrias utilizam trs mecanismos pra transferir
sequncias de DNA plasmidial ou cromossmico: a transformao, a transduo e
a conjugao. Tambm foram discutidos os tipos de mutao que podem ocorrer
espontaneamente ou de forma induzida no cromossomo bacteriano.
Autoavaliao
1
176
Aula 8
Fonte: <http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B5_MICRO_INM/T51_
MICROBIOLOGIA/ejercicios/Diapositiva5.GIF>. Acesso em: 7 out. 2009.
Aula 8
177
178
Aula 8
Referncias
MADIGAN, Michael T.; MARTINKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de Brock. 10. ed.
New Jersey: Prentice Hall, 2004.
PELCZAR JNIOR, Michael. Microbiologia: conceitos e aplicaes. So Paulo: Makron
Books, 1997.
RAVEN, Johnson.Biology. 6th ed. New York: Mc Graw-Hill, 2001.
TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre:
ArtMed, 2005.
TRABULSI. Microbiologia. 3. ed. So Paulo: Atheneu, 1999.
Anotaes
Aula 8
179
Anotaes
180
Aula 8
Aula
Apresentao
Objetivos
1
Aula 9
183
A vida microbiana
nos primrdios da Terra
Estromatlito
Estrutura fossilizada de
massa microbiana com
idade de cerca de 3,5
bilhes de anos.
Figura 1 Estromatlitos com 3,4 bilhes de anos descobertos por pesquisadores na Austrlia
Foto: Abigail Allwood.
Atividade 1
Reveja as aulas iniciais da disciplina Biodiversidade e descreva como era a
atmosfera da Terra primitiva. Como os primeiros microrganismos obtinham
energia para sobreviver?
184
Aula 9
Entendendo o planeta
dos microrganismos
Imagine um tempo em que sequer se imaginava que pudessem existir organismos
microscpicos, e que eles eram os causadores de muitas doenas. Esse tempo, voc sabe,
j existiu. Hoje, precisamos ter conscincia de que, mais do que causar doenas, a maioria
dos microrganismos fundamental para a manuteno da nossa vida, e que apenas uma
pequena parcela das espcies existentes nos causam danos. Ao falarmos de microrganismos,
relembre que estamos nos referindo a bactrias, vrus, protozorios e alguns tipos de fungos
microscpicos. Ns dependemos da maioria desses organismos de vrias formas. Eles
produzem oxignio, do qual necessitamos, nos mantm saudveis, so fontes de drogas que
curam doenas, auxiliam nossa digesto, dentre tantas outras atividades bencas. Alguns dos
microrganismos que vivem no nosso corpo competem por espao com espcies patognicas,
numa relao mutualstica em que somos beneciados por sermos protegidos de doenas e
os microrganismos conseguem um espao para viver dentro de ns!
Aula 9
185
Fenotpicas
Que tm o mesmo
conjunto de caracteres
anatmicos, siolgicos
e antignicos.
186
Aula 9
Atividade 2
Voc j conhece os conceitos de sistemtica e classicao. Relembre e
reescreva esses conceitos.
J percebeu como os
microrganismos so muito diversos em
todos os seus aspectos: aparncia,
metabolismo, siologia e gentica?
Aula 9
187
Os esquemas de classicao
dos microrganismos
Considera-se que h cinco principais grupos de microorganismos: Archaea, bactrias,
algas, protozorios e fungos. As Archaea e bactrias so formadas por clulas procariticas.
As algas unicelulares e protozorios (em conjunto chamados de Protistas) e os fungos so
formados por clulas eucariticas, semelhantes s de plantas e animais.
Voc j sabe que podemos considerar a organizao dos seres vivos de acordo com o
sistema de classicao dos trs domnios. No Quadro 1 a seguir, esto estabelecidas, para
que voc possa rememorar, as diferenas existentes entre esses trs domnios.
Caracterstica
Bacteria
Archaea
Eukarya
Carioteca
Ausente
Ausente
Parede celular
Presena de
peptidoglicano
Ausncia de
peptidoglicano
Mitocndria
Ausente
Ausente
Presente
De slica (em Diatomceas);
celulose (algas e plantas);
quitina (fungos)
Presente
Cloroplastos
Ausente
Ausente
DNA
01 cromossomo
Habitat
Em todos os ambientes
01 cromossomo
Frequentemente em
ambientes extremos
Vrios cromossomos
Em ambientes que no
sejam extremos
188
Aula 9
Domnio Bacteria
As bactrias so organismos unicelulares procariontes. Elas possuem um nico tipo de
parede e membrana celulares que as distinguem das Archaea. Vivem em todos os lugares na
Terra onde a vida possvel, exceto nos ambientes mais extremos, inclusive em associaes
com animais e plantas. A maioria benca, mas algumas causam doenas.
Anlises logenticas atuais das bactrias tm demonstrado a existncia de mais de
20 grupos distintos. A maioria dos grupos listados consiste em los distintos, e alguns
so agora subdivididos em mais de um lo. Muitos grupos so compostos por membros
fenotpica e siologicamente independentes. Alm disso, em alguns grupos (por exemplo,
Proteobacteria e Gram-positivos), h uma considervel diversidade logentica, o que no
aparece na grande rvore da vida.
DEFFERIBACTER
DOMINIO BACTERIA
FLAVOBACTERIAS
CYTOPHAGA
ESPIROQUETAS
VERRUCOMICROBIOS
BACTERIAS
VERDES NO
DEL AZUFRE
DEINOCOCCI
BACTERIAS
VERDES
DEL AZUFRE
PLANTOMYCES/PIRELLA
CHLAMYDIA
CYANOBACTERIA
THERMOTOGA
C
hG
Hig GC
Low
THERMODESULFOBACTERIUM
BACTERIAS
GRAM POSITIVAS
NITROSPIRA
AQUIFEX
PROTEOBACTERIAS
b)
Aula 9
189
Atividade 3
As cianobactrias (Figura 5 a seguir) tambm esto organizadas no Domnio Bacteria.
Descreva as caractersticas principais desse grupo, a partir de uma pesquisa que pode ser feita
em sites conveis da internet ou nos livros disponveis no polo. Pea orientao ao seu tutor.
Figura 5 Cianobactrias
Fonte: <http://universe-review.ca/I11-30-cyanobacteria.jpg>. Acesso em: 16 dez. 2009.
190
Aula 9
Domnio Archaea
As arqueobactrias so um grupo de clulas procariontes, unicelulares, que muitas vezes
vivem em ambientes extremos, como aqueles com altas temperaturas, pH baixo ou altas
concentraes de sal. Elas so especicamente adaptadas a essas condies devido a presena
de tipos especiais de membranas e um metabolismo diferenciado.
EURYARCHAEOTA MARINOS
CRENARCHAEOTA MARINOS
HALOBACTERIUM
HALOCOCCUS
Euryarchaeota
ARCHAEOGLOBUS
NATRONOCOCCUS
METHANOBACTERIUM
METANGENOS
HALFILOS
Crenarchaeota
SULFOLOBUS
METHANOTHERMUS
PYRODICTIUM
METHANOSACINA
METHANOSPIRILLUM
FERROPLASMA
THERMOPLASMA
METHANOCAL
DOCOCCUS
THERMOCOCCUS
PYROCOCCUS
THERMOPROTEUS
METHANOPYRUS
DESULFUROCOCCUS
PICROPHILUS
Korarchaeota
Com base em sua siologia, as Archaea podem ser organizadas em trs tipos: metanognicas
(produtoras de metano); hallas extremas (que vivem em concentraes muito elevadas de sal)
e hipertermoflicas (que vivem em temperaturas muito elevadas). Alm das caractersticas que
as distinguem das bactrias, como a ausncia de peptidoglicano na parede celular, as Archaea
possuem outros atributos estruturais ou bioqumicos nicos que lhes permitem adaptar-se aos
seus habitats particularmente inspitos.
Metanognicas
So anaerbios obrigatrios, no tolerando a exposio ao oxignio. Ambientes
anaerbicos incluem sedimentos marinhos e de gua doce, pntanos e solos profundos,
o trato intestinal dos animais, e estaes de tratamento de esgoto. So habitantes normais
do rmen de vacas e outros animais ruminantes. O produto nal de seu metabolismo, o gs
metano, acumula-se no seu ambiente, representando um dos gases do chamado efeito estufa.
Sabia que a vaca arrota cerca de 50 litros de gs metano por dia durante o
processo de ruminao?
Aula 9
191
Atividade 4
Pesquise na internet sobre o efeito do gs metano na atmosfera. Resuma a ideia
principal desse efeito.
Haloflicas
Vivem em ambientes naturais, como o Mar Morto, ou lagoas de evaporao da gua
do mar, onde a concentrao de sal muito elevada. Esses organismos requerem sal para o
crescimento e no conseguem crescer a baixas concentraes de sal. Na verdade, as clulas
lisam a baixas concentraes de NaCl. Suas paredes celulares, ribossomos e enzimas so
estabilizados por Na+. So hetertrofos que respiram aerobicamente.
Hipertermlas
Organismos que requerem uma temperatura muito alta (80 a 105 graus) para seu
crescimento. Suas membranas e enzimas so extraordinariamente estveis em altas
temperaturas. A maioria destas Archaea exige enxofre elementar para o crescimento e algumas
so anaerbias, utilizando o enxofre como um aceptor de eltrons para a respirao no lugar
de oxignio. Hipertermlas so habitantes de ambientes quentes, geralmente associados ao
vulcanismo, como fontes termais, giseres e fumarolas no Parque Nacional de Yellowstone e
outros lugares, fontes hidrotermais e rachaduras no fundo do oceano.
192
Aula 9
Atividade 5
Pesquise sobre a espcie bacteriana Thermus aquaticus e a sua importncia
para o campo da Biologia de hipertermlos e para a Biologia molecular. Pea
orientao ao seu tutor.
As Archaea so Gram-positivas
ou Gram-negativas?
Embora a reao de Gram dependa tanto do formato estrutural como da composio
qumica da parede celular das bactrias, a maioria das Archaea so Gram-negativas,
independentemente de sua estrutura bsica ou da composio qumica. Uma exceo
interessante Methanobacterium formicicum, que se cora como Gram-positiva, uma vez que
a sua parede celular contm pseudomurena, um tipo diferente de peptidoglicano. Observaes
mostram que, em uma preparao de Gram, com uma populao microbiana mista contendo
arqueobactrias e bactrias, as Archaea se coram como clulas Gram-negativas, e as clulas
Gram-positivas so provavelmente bactrias.
Aula 9
193
Os microrganismos eucariontes
Nem todos os microrganismos so procariontes. Alguns grupos de eucariontes possuem
clulas microscpicas.
Os protozorios
Protozorios so organismos eucariontes semelhantes a animais, no-fotossintetizantes
comuns em ambientes midos, incluindo o trato intestinal dos animais. A maioria dos
protozorios mvel porque, uma vez que so predadores de outros microrganismos,
necessitam buscar e ingerir os alimentos. Alguns deles causam algumas doenas importantes,
como a malria e a doena de Chagas.
Fungos microscpicos
Os fungos so eucariontes no fotossintetizantes, geralmente mveis, que absorvem os
nutrientes diretamente do meio ambiente. O reino compreende tambm os cogumelos, bolores
e leveduras. As leveduras so unicelulares, e os bolores e cogumelos, apesar de terem uma
forma vegetativa multicelular, produzem esporos unicelulares.
Muitos fungos vivem principalmente no solo e so responsveis pela decomposio
(biodegradao) do material orgnico. Eles tambm podem ser uma importante causa de
doenas de plantas e motivo da deteriorao dos alimentos. Alguns causam doenas no homem
e em outros animais.
194
Aula 9
Resumo
Nesta aula, pudemos conhecer a grande diversidade de microrganismos existente.
As diferenas entre os grupos procariticos Archaea e Bacteria foram enfatizados.
Vimos que as Archaea compreendem grupos que vivem em ambientes extremos
e que as bactrias compem a maior parte dos organismos, incluindo as
patognicas. As caractersticas gerais dos grupos de protozorios, fungos e vrus
foram apresentadas.
Aula 9
195
Autoavaliao
1
Referncias
CANHOS, V. P.; MANFIO, G. P. Recursos microbiolgicos para biotecnologia. Disponvel em:
<http://www.inpa.gov.br/~cpca/charles/pdf/Canhos-Mano_Rec-biol_2001.pdf>. Acesso em:
16 dez. 2009.
KERSTERS, K. et al. Introduction to the proteobacteria. Prokaryotes, n. 5, p. 3-37, 2006.
MADIGAN, Michael T.; MARTINKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de Brock. 10. ed.
New Jersey: Prentice Hall, 2004.
SILVA, Alline Braga. A importncia das bactrias para a vida. 2009. Disponvel em: <http://
portaldoprofessor.mec.gov.br/chaTecnicaAula.html?aula=1523>. Acesso em: 16 dez. 2009.
TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 8. ed. Porto Alegre:
ArtMed, 2005.
196
Aula 9
Anotaes
Aula 9
197
Anotaes
198
Aula 9
Os microrganismos auxiliam
a (re)circulao da matria no planeta
Aula
10
Apresentao
Objetivos
1
Aula 10
201
A vida no planeta
depende da fotossntese
Atividade 1
1
Oxignio
Oxignio
Glicose
Energia Solar
Gs Carbnico
Esquema da Fotossntese
202
Aula 10
Aula 10
203
Bactrias protagonistas
do processo de fotossntese:
principais caractersticas
As bactrias capazes de usar a luz como fonte de energia compreendem um grupo
numeroso e heterogneo de organismos, tendo como caracterstica comum a presena de
pigmentos fotossintetizantes e a capacidade de gerar ATP atravs da fotofosforilao, processo
que veremos adiante. Dentre esses organismos, dois grandes grupos so reconhecidos:
as cianobactrias
Analisando a Figura 1, voc deve ter concludo que a fotossntese consiste na fabricao
de glicose utilizando dixido de carbono (CO2 ), gua (H 2O) e minerais, sendo tambm
produzido oxignio gasoso (O 2). Dizemos, ento, que na fotossntese ocorre a transformao
da energia luminosa em energia qumica, que armazenada na glicose, o composto orgnico
produzido. Essa transformao entre formas de energia caracteriza a fotossntese tanto em
eucariotos quanto em procariotos. Em ambos os grupos o processo fotossinttico dependente
de pigmentos fotossensveis que absorvem a energia luminosa.
A semelhana da fotossntese entre procariotos e eucariotos para por a. Os tipos de
pigmentos presentes e sua disposio na clula so variveis nesses grupos e at mesmo
dentro dos grupos (veja o destaque abaixo). Por exemplo, a clorola, o pigmento verde presente
em plantas e algas (eucariotos) e cianobactrias (procariotos) ausente nas demais bactrias
fotossintetizantes. Bactrias verdes e prpuras, por sua vez, possuem um pigmento relacionado
clorola, chamado bacterioclorola.
204
Aula 10
Pigmentos
acessrios
Auxiliam na absoro
de luz e na transferncia
da energia radiante para
os centros de reao.
Aula 10
205
Figura 2 Fotograa feita atravs de microscopia eletrnica. Chlorobium tepidum, uma bactria verde
Fonte: <www.bio.ku.dk/nuf/research/chlorosome.htm>. Acesso em: 2 dez.
2009.
Figura 3 Fotograas feitas atravs de microscopia eletrnica. a) Clula de uma cianobactria evidenciando
tilacoides; b) Detalhe dos tilacoides na clula de cianobactria
Fonte: <www.pnas.org/content/102/3/850/F2.expansion>. Acesso em: 2 dez. 2009.
206
Aula 10
Atividade 2
Complete a tabela abaixo, considerando o que voc acabou de estudar.
Microrganismo
Pigmentos
Localizao na clula
Algas
Cianobactrias
Bactrias verdes
Bactrias prpuras
Aula 10
Fonte termal
Emergncia de gua
subterrnea aquecida,
seja pelo calor causado
pelo gradiente geotrmico,
seja por processos
de vulcanismo. As fontes
termais existem em
toda a Terra, incluindo o
fundo dos oceanos.
207
Atividade 3
Leia o texto anterior e depois relate em quais ambientes podemos encontrar
organismos procariotos fototrcos.
Fotofosforilao
Produo de ATP
pela fotossntese.
208
Aula 10
a
Fotofosforilao cclica
Cadeia de
transporte
de eltrons
Eltrons
excitados
(2 e)
ATP
Energia para
produo
de ATP
Luz
Transportador de eltrons
Bacterioclorofila
b
Fotofosforilao acclica
Cadeia de
transporte
de eltrons
ATP
Energia para
produo
de ATP
Eltrons
excitados
(2 e)
NADP+
Luz
NADPH
Clorofila
(2 e)
H2O
1
H+ + H+
O2
Aula 10
209
Atividade 4
Analise a Figura 4 e descreva as diferenas no processo de fotossntese entre
procariotos Figura 4(a) e eucariotos e cianobactrias Figura 4(b).
210
Aula 10
Voc deve ter notado que no primeiro esquema Figura 4(a) h um retorno dos
eltrons para a molcula do pigmento aps a produo de ATP. Por isso esse processo
denominado de fotofosforilao cclica. Nesse processo, eltrons liberados do pigmento
pela ao da luz retornam bacterioclorola aps passarem atravs da cadeia de transporte
de eltrons, gerando a produo de ATP.
Diferentemente, na fotofosforilao acclica, eltrons liberados a partir da clorola so
repostos por eltrons provenientes da molcula de gua, a partir da qual se forma o oxignio
veja a Figura 4(b). Os eltrons da clorola so encaminhados atravs da cadeia de transporte
de eltrons para o aceptor de eltrons NADP +, gerando a produo de ATP. O NADP+
combina com os eltrons e com ons hidrognio da gua formando NADPH. Esta coenzima,
assim como o NADH (veja a Aula 5), uma molcula transportadora de alta energia que ser
usada nas reaes escuras, como veremos mais tarde.
NADP +
Nicotinamida
adenina dinucleotdeo
fosfato, uma coenzima
similar ao NAD+.
Atividade 5
Baseado no que voc acabou de aprender, e com auxlio da Figura 4, complete o
quadro abaixo.
Fotossntese
Organismos
Oxignica
Anoxignica
Aula 10
211
A transformao do CO2
em molculas orgnicas
A fotossntese ocorre em duas etapas. A primeira delas, dependente da luz, denominada
de reaes luminosas, quando ocorre o processo de fotofosforilao que acabamos de estudar.
Voc viu que nas reaes luminosas a energia luminosa usada para converter ADP e fosfato
em ATP. A segunda etapa, chamada de reaes escuras, independente da luz e caracteriza-se
pela converso do CO2 em acar.
A segunda etapa, caracterizada pelas reaes escuras, pode ocorrer na ausncia de luz, e
na maioria dos fototrcos elas so caracterizadas por uma srie de reaes em uma via cclica
complexa chamada de ciclo de Calvin-Benson. Nesse ciclo, dizemos que o CO2 xado. Isso
porque este composto incorporado nas molculas de acares sintetizadas pela clula. Para
tanto, a clula necessita de energia do ATP e da energia redutora proveniente dos eltrons do
NADPH. Onde a clula obtm toda essa energia?
Os organismos oxignicos, que desempenham a fotofosforilao acclica, produzem
durante esse processo o ATP e NADPH necessrios xao do CO2 . J a fotofosforilao
cclica das bactrias anoxignicas no gera coenzimas reduzidas (NADPH). Essas bactrias
utilizam compostos como o gs sulfdrico (H2S ), o tiossulfato (S2O 32), o gs hidrognio
(H2) ou at mesmo o ferro ferroso (Fe2+) como doadores de eltrons para reduzir NADP + a
NADPH e, posteriormente, transformar CO2 em acares.
1)
Fotossntese oxignica:
luz
6CO2 + 12H2O
2)
C6H12O6 + 6H 2O + 6O2
Eq. 1
Eq. 2
Fotossntese anoxignica:
luz
6CO2 + 12H2S
212
Aula 10
Diversidade metablica
entre os organismos
Os processos de obteno de energia descritos na Aula 5 e at agora nesta aula
demonstram a extraordinria variao metablica encontrada entre os microrganismos. Vamos
agora fazer uma sntese sobre isso.
Todos os organismos, incluindo os seres microscpicos, podem ser classicados quanto ao
seu padro nutricional, isto , quanto a sua fonte de energia e de carbono. Considerando a fonte
de energia, podemos classicar os organismos como fototrcos, que usam a energia luminosa,
ou quimiotrcos, que dependem de reaes de oxidao-reduo de substncias qumicas
orgnicas ou inorgnicas para obterem energia. Qualquer que seja a fonte primria, a energia
ser transferida para formas qumicas prontamente utilizveis pela clula (ATP e NADPH).
Quanto fonte de carbono, organismos que utilizam exclusivamente o CO2 para fabricar
suas molculas orgnicas so chamados autotrcos. Aqueles que requerem um ou mais
compostos orgnicos como fonte de carbono so considerados HETEROTRFICOS. Esses
conceitos foram discutidos tambm na Aula 3 (Pequena histria da diversidade dos seres
vivos) da disciplina Biodiversidade. Se combinarmos as fontes de energia com as fontes de
carbono, surgiro quatro grupos de organismos, descritos a seguir.
Fotoautotrcos: utilizam a luz como fonte de energia e CO2 como nica fonte de carbono;
todos os compostos celulares orgnicos so sintetizados graas xao do CO2. Na ausncia
de luz, esses organismos obtm energia da respirao usando sua prpria matria-prima, ou
seja, acares formados no processo fotossinttico. Esses seres podem ser aerbicos (plantas,
algas, cianobactrias) ou anaerbicos (muitas bactrias verdes e prpuras).
Quimioautotrcos: oxidam compostos inorgnicos reduzidos como a amnia, nitrito, o
sulfeto de hidrognio (H2S ) e ons ferro (Fe2+) para obteno de ATP. Vimos essa modalidade
no item Microrganismos tambm extraem a energia de substncias inorgnicas usando o
O 2, na Aula 5. Esses organismos tambm utilizam o CO2 como fonte de carbono. Bactrias
nitricantes do gnero Nitrosomonas, que estudaremos adiante, so exemplos desse grupo.
Quimioheterotrcos: usam reaes de oxidao-reduo de compostos orgnicos como
fonte de energia e, normalmente, utilizam essas mesmas substncias orgnicas como fonte de
carbono. Tais fontes so muito variveis e incluem a glicose e outros carboidratos, protenas,
lipdios e at compostos orgnicos menos reativos, como hidrocarbonetos. Os processos de
respirao aerbica a partir de substratos orgnicos e a fermentao (estudadas na Aula 5)
so as vias metablicas mais comuns desse grupo de organismos. A maioria dos procariotos
est inserida nessa categoria, incluindo todas as bactrias patognicas. Todos os eucariotos
no fototrcos, incluindo fungos e protozorios, tambm so quimioheterotrcos.
Aula 10
213
Fotoheterotrcos: utilizam a luz como fonte de energia (ATP), mas no podem converter
CO2 a glicose. Ento, essas bactrias usam compostos orgnicos, como alcois, cidos
graxos e carboidratos como fonte de carbono. So anoxignicos, e incluem algumas bactrias
verdes e prpuras.
Atividade 6
Resuma, no quadro abaixo, as principais caractersticas das categorias metablicas dos
seres vivos, incluindo microrganismos.
FONTE DE
CARBONO
CO2
Compostos
orgnicos
214
Aula 10
FONTE DE ENERGIA
Oxidao-reduo de substncias qumicas
Luz
Grupo:............................................................
Grupo:............................................................
Caractersticas:...............................................
Caractersticas:...............................................
.......................................................................
.......................................................................
.......................................................................
.......................................................................
Grupo:............................................................
Grupo:............................................................
Caractersticas:..............................................
Caractersticas:..............................................
.......................................................................
.......................................................................
.......................................................................
.......................................................................
O destino da
matria orgnica produzida
Agora, voc j sabe como a matria orgnica produzida na Terra, atravs de seres
fotoautotrcos, dentre os quais plantas, microalgas, cianobactrias, bactrias verdes e
prpuras, e quimioautotrcos, dos quais apenas procariotos fazem parte. Mas para a
continuidade do processo ao longo do tempo, essa matria orgnica precisa ser reciclada. Para
tanto, um conjunto de processos chamado de mineralizao da matria orgnica deve ocorrer.
Atividade 7
O conceito de mineralizao da matria orgnica est implcito no texto da pgina
13 da Aula 6 da disciplina Biodiversidade.
a)
b)
Aula 10
215
O ciclo do carbono
Os microrganismos procariotos provocam a mineralizao da matria orgnica na medida
em que obtm energia atravs da respirao e da fermentao. Nutrientes liberados nesses
processos alimentam nova produo de biomassa. Essa sequncia cclica caracteriza o que
chamamos de ciclos biogeoqumicos. Todos os elementos na natureza percorrem um ciclo
particular, do ambiente para os tecidos dos organismos e vice-versa. Veremos agora como
microrganismos participam desses ciclos atravs de dois exemplos: os ciclos do carbono e
do nitrognio.
Ciclo do Carbono
Aerobiose
Respirao aerbica
Fotossntese oxignica
Metanotrofia
(CH2O)n
CH4
Fermentao
CO2
Metanognese
Respirao anaerbica
e fermentao
Fotossntese anoxignica
Anaerobiose
216
Aula 10
CH4 + 2H2O
Atividade 8
O CO 2 tambm usado como fonte de carbono pelas arqueobactrias
metanognicas. Nesse caso, o CO2 no xado pelo ciclo de Calvin-Benson,
mas por outro processo chamado de via acetil-CoA. Em qual categoria nutricional
(denida na Atividade 6) as metanognicas podem ser enquadradas?
Aula 10
217
Voc sabia?
218
Aula 10
O ciclo do C tem recebido grande ateno por parte dos cientistas que
procuram compreender os processos envolvidos no aumento do efeito
estufa, que tem causado o fenmeno de aquecimento global. O aquecimento
global causado, principalmente, pelo gs carbnico (CO 2), responsvel
por 77% do efeito estufa hoje. Embora o metano seja um componente
de menor importncia no ciclo global do carbono, ele importante em
algumas situaes particulares, pois as emisses de metano contribuem
para aumentar o efeito estufa na atmosfera. As emisses de metano so
da ordem de 1% da quantidade de CO2, porm o efeito de aquecimento da
molcula de CH4 25 vezes maior que a de CO2.
Atividade 9
Acesse o material educativo do site do INPE, Instituto Nacional de Pesquisas
Espaciais <http://videoseducacionais.cptec.inpe.br/>, e assista aos vdeos
Mudanas Ambientais Globais, Efeito Estufa e Ciclo do Carbono. Depois, relate
no espao abaixo o que signica efeito estufa e aquecimento global e qual o
papel do CO2 no aquecimento global.
O ciclo do nitrognio
O nitrognio (N), assim como o carbono, um importante macronutriente para os
seres vivos. O nitrognio est presente nos aminocidos, protenas, DNA, RNA e em outros
componentes celulares. Desvendaremos agora a intensa participao dos microrganismos no
ciclo desse elemento. O ciclo do N tem sido bastante modicado pelas atividades humanas.
Isso ocorre basicamente porque o crescimento das plantas terrestres , em geral, limitado pela
baixa disponibilidade de N nos solos. Por isso, precisamos fertilizar o solo com nitrognio
para aumentar a produtividade agrcola. Se por um lado tal procedimento ajuda a garantir a
produo de alimentos, por outro lado o aumento da concentrao de N no solo pode ter como
consequncia o aumento de sua concentrao em rios, lagos e outros ambientes aquticos,
onde seu excesso provoca poluio.
As principais formas de N assimiladas pelas plantas e microrganismos autotrcos so o
on amnio (NH4+ ) e o nitrato (NO3). Partindo dessas formas mais simples de N inorgnico,
as plantas, microalgas e procariotos fabricam aminocidos e protenas que constituiro as
clulas. Porm, a maior parte do N na natureza no se encontra nessas formas utilizveis pelos
organismos, e sim na forma de N2 (Figura 6).
Aula 10
219
(N2 )
Gs nitrognio livre
(N2) na atmosfera
Decomposio
Protenas
de clulas
mortas
Azotobacter
Beijerinckla
Cianobactrias
Clostridium
No-simbiticos
Plantas
leguminosas
Fixao
industrial como
fertilizante
Fixao
Organismos em
deteriorao (bactrias
aerbicas e bactrias
anaerbicas e fungos)
(N2O )
Denitrificadoras
(pseudomonas, Bacilus
licheniformis,Paracoccus
denitricans e outras)
Nitritos
(NO2)
Denitrificao
Procariotos
simbiticos
Assimilao
Amonificao
Nitrosomonas
Nitratos
(NO3)
Nitritos
(NO2)
Amnia
(NH3 )
Nitrificao
Nitrificao
Legenda
Amonificao
Fixao
Nitrificao
Denitrificao
Voc sabia?
O maior reservatrio de nitrognio do planeta encontra-se na forma de N2,
constituindo 78% da atmosfera!
O N2 pode ser assimilado apenas por certas bactrias e algumas cianobactrias,
atravs do processo conhecido como fixao biolgica do nitrognio.
Os procariotos xadores de N2 dispem de um sistema enzimtico denominado
nitrogenase, que catalisa a reduo do N2 a amnia (NH 3), com grande gasto
de ATP, segundo a equao abaixo. Uma vez fabricada a amnia, esta ser
incorporada a aminocidos e protenas (veja a Figura 6).
Fixao Biolgica do Nitrognio
N2 + 3H2
NITROGENASE
2NH3
220
Aula 10
Atividade 10
Simbiticos
Aula 10
221
Nitricao
Ex: Nitrosomonas
2NO 2 + 2H2O + 2H + + E
2NH3 + 3O2
Ex: Nitrobacter
2NO 2 + O2
2NO 3 + E
Atividade 11
Observe a Figura 6 e relate qual a forma nal do N no processo de desnitricao.
222
Aula 10
Desnitricao
a)
Ex: Pseudomonas
(matria orgnica)
b)
5H2 + 2KNO3
N2 + 2KOH + 4H2O + E
Atividade 12
Observe que o processo que denominamos ciclo do nitrognio constitui para
as bactrias formas de obteno de recursos.
a)
b)
Aula 10
223
Leituras complementares
AGNCIA FAPESP. Estrutura da clorola. 5 maio 2009. Disponvel em: <http://www.agencia.
fapesp.br/materia/10442/divulgacao-cientica/estrutura-da-clorola.htm>. Acesso em:
2 dez. 2009.
Nesse artigo so descritos resultados de uma pesquisa sobre a extraordinria ecincia
do processo de fotossntese de um grupo de bactrias verdes que vivem em regies profundas
do Mar Negro.
Resumo
Nesta aula, estudamos como ocorre o processo de obteno de energia atravs
da captao da energia luminosa: a fotossntese. Vimos que procariotos, com
exceo das cianobactrias, no produzem oxignio durante a fotossntese.
Outras diferenas, tais como pigmentos, localizao do processo na clula, entre
fotossntese eucaritica e procaritica foram apresentadas. Conclumos o estudo
sobre metabolismo microbiano classicando os seres vivos em diferentes tipos
nutricionais com base nas fontes de energia e carbono utilizadas. Microrganismos,
e especialmente bactrias, esto representadas em todos os tipos nutricionais!
Nesta aula, voc tambm teve a oportunidade de reconhecer a intensa participao
dos microrganismos nos ciclos do carbono e do nitrognio, e exemplos de como
os seres humanos esto interferindo nesses ciclos.
224
Aula 10
Autoavaliao
1
a)
b)
c)
Aula 10
225
Referncias
BARBOSA, H. R.; TORRES, B. B. Microbiologia bsica. So Paulo: Ed. Atheneu, 2005. 196p.
ESKINAZI-SANTANNA, Eneida M. et al. guas potiguares: osis ameaados. Cincia Hoje, v.
39, n. 233, p. 68-71, 2006.
FREITAS, S. R. et al. Emisses de queimadas em ecossistemas da Amrica do Sul. Estudos
Avanados, So Paulo: Instituto de Estudos Avanados, v. 19, n. 53, p. 167-185, 2005.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. So Paulo: Prentice
Hall, 2004.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.
WAGENINGEN UNIVERSITY AND RESEARCH CENTRE. Nitrogen Deposition Limits Climate
Change Impacts On Carbon Sequestration. ScienceDaily. Retrieved, n. 3, nov. 2009.
Disponvel em: <http://www.sciencedaily.com/releases/2009/10/091007103059.htm>.
Acesso em: 2 dez. 2009.
Anotaes
226
Aula 10
Anotaes
Aula 10
227
Anotaes
228
Aula 10
Como os microrganismos
se relacionam
Aula
11
Apresentao
Objetivos
1
Aula 11
231
Dividindo espaos
muito pequenos
J vimos que microrganismos ocupam os mais diversos habitats, incluindo aqueles onde
nenhum outro organismo pode sobreviver, tais como fontes termais (elevadas temperaturas) e
rochas cidas. Por sua grande diversidade metablica, microrganismos podem viver com ou
sem oxignio, com ou sem luz, e usando os mais diversos tipos de substncias como fonte de
energia e carbono (veja as Aulas 5 e 10). Devido ao reduzido tamanho dos microrganismos,
espaos pequenos como aquele exemplicado na Figura 1 (uma partcula de solo de 12mm
de dimetro) podem abrigar diferentes populaes com capacidades metablicas distintas se
esse habitat for heterogneo.
No exemplo da Figura 1 a concentrao de oxignio pode variar de 21% (normalmente
encontrado no ar que respiramos), na camada supercial da partcula, at 0% no centro
dela. Entre o ambiente oxigenado (na superfcie) e o anaerbico (centro), h um gradiente de
concentraes de oxignio. Essa heterogeneidade espacial, muito comum na natureza, favorece
a existncia do que chamamos de microhabitats. Ocupando esses microhabitats h distintas
populaes microbianas favorecidas por diferentes concentraes de oxignio no meio, desde
a aerobiose at a anaerobiose. Lembre-se de que estamos aqui falando apenas do oxignio,
mas outros fatores ambientais tambm podem variar e assim contribuir para o surgimento de
microhabitats. Microrganismos so encontrados compartilhando os microhabitats e, portanto,
esto em proximidade, favorecendo a inuncia mtua entre as populaes.
21
15
10
5
3
Distncia (mm)
0
Distncia (mm)
232
Aula 11
Tipo de interao
Espcie A
Espcie B
Natureza da interao
Neutralismo
Sem efeitos
Comensalismo
Comensal/hospedeiro no afetado
Mutualismo
Obrigatria
Protocooperao
No obrigatria
Competio
Inibio mtua
Predao
B ingerido por A
Parasitismo
B explorado por A
Amensalismo
A populao B no afetada
Aula 11
233
Atividade 1
234
Aula 11
a)
Observe a Tabela 1 e dena com suas palavras cada uma das interaes.
b)
Aula 11
235
Atividade 2
Durante perodos de stress ambiental (temperaturas elevadas ou secas, por
exemplo), populaes microbianas presentes no ambiente em formas de
resistncia podem desenvolver interaes de neutralismo. Que tipos de estruturas
de resistncia bacteriana podem ser encontradas nessas situaes? Voc pode
resolver essa atividade com auxlio da Aula 1 (Comparando clulas procariticas
e clulas eucariticas).
236
Aula 11
Aula 11
237
Atividade 3
Cite e explique dois exemplos que voc conhece de interao mutualstica.
238
Aula 11
239
por
isso que se diz que no
existem verdades absolutas na Cincia!
O conhecimento que se tem atualmente pode
ser modicado com as novas descobertas.
E isso torna a Cincia ainda mais
interessante!
Atividade 4
Procure fotos de liquens na internet e analise seu aspecto. Depois, procure
observar a presena de liquens em rvores de jardins ou praas onde voc mora.
Descreva no espao abaixo o que voc encontrou. H liquens de cores e formas
diferentes? Sugerimos os sites abaixo, mas voc pode buscar outros.
<http://www.microbiologia.vet.br/fungoscogumelos.htm>
<http://www.feiradeciencias.com.br/sala26/26_feira_01.asp>
240
Aula 11
Uma relao de protocooperao entre duas populaes microbianas indica que ambas as
populaes se beneciam com a interao, mas diferentemente do mutualismo, essa associao
no obrigatria. Ambas as populaes so capazes de sobreviver separadamente em seu ambiente
natural, embora o estabelecimento da interao traga vantagens mtuas para as populaes
envolvidas e tenda a maximizar o crescimento de ambas. As relaes de protocooperao so
fracas no sentido de que uma populao pode ser facilmente substituda por outra.
Em alguns casos, difcil determinar se ambas as populaes esto de fato se
beneciando, ou se apenas uma das populaes se benecia enquanto a outra no sofre
nenhum efeito (sendo a interao classicada como comensalismo). Em outros casos,
difcil determinar se a relao obrigatria, devendo, neste caso, ser considerada mutualismo.
Muitos cientistas no fazem distino entre mutualismo e protocooperao por causa dessas
diculdades, considerando tais interaes simplesmente como mutualismo.
Heterocitos
Clula especializada
na xao biolgica
do nitrognio em
algumas cianobactrias
lamentosas, onde a
enzima nitrogenase
armazenada.
Aula 11
241
com atividade mais elevada tero mais chance de absorver o fosfato e assim superar (em termos
de crescimento populacional) outras populaes que tm menor atividade da fosfatase.
Outro tipo de interao competitiva, considerada competio direta, tem como base
a produo e secreo por um microrganismo particular de substncias inibidoras do
crescimento de outras populaes potencialmente competidoras. Esse o caso da produo
natural de antibiticos por bactrias e fungos. A observao de um evento de competio
entre microrganismos levou em 1928 o cientista escocs Alexander Fleming descoberta da
penicilina, antibitico que revolucionou a Medicina.
Durante sua rotina de trabalho, cultivando e estudando bactrias, Fleming observou uma
colnia diferente em algumas placas de Petri com cultivo bacteriano. Essa colnia diferente era
formada por um microrganismo contaminante. Ao invs de desprezar os cultivos contaminados,
chamou-lhe a ateno um espao ao redor da colnia contaminante onde as bactrias cultivadas
no cresciam. Esse espao cou conhecido como halo de inibio. Ou seja, a rea no meio
de cultivo que sofre alguma inuncia da colnia a ponto de inibir o crescimento de outros
microrganismos. O fungo contaminante na placa de Fleming foi identicado como do gnero
Penicillium e a substncia inibidora do crescimento de bactrias foi posteriormente isolada e
nomeada penicilina.
242
Aula 11
Atividade 5
Faa uma pesquisa em livros ou sites da internet sobre outros microrganismos
produtores de antibiticos. Descubra que outros organismos produzem
antibiticos e quais so essas substncias. Registre no espao abaixo o que
voc encontrou.
Aula 11
243
Bdellovibrio
Bactria alvo
III. Invaso
I. Localizao da
bactria alvo
IV. Estabelecimento
V. Bdellovibrio em formao
244
Aula 11
Atividade 6
Considerando os conceitos ecolgicos de predao e parasitismo que voc
aprendeu, relate qual sua opinio a respeito da interao mostrada na Figura 4:
trata-se de um exemplo de parasitismo ou predao? Justique sua resposta.
Aula 11
245
Figura 5 Foto (em microscopia) de um ciliado dentro do qual se pode visualizar uma microalga que foi ingerida
Fonte: <http://www.pmbio.icbm.de/mikrobiologischer-garten/eng/enzoo01b.htm>. Acesso em: 2 dez. 2009.
246
Aula 11
Atividade 7
Assista ao vdeo Ciliate sweeping up bacteria, disponvel no link <http://www.
youtube.com/watch?v=Fc70Uk1fjTw>, e descreva a interao que voc v.
Aula 11
247
Leituras complementares
ANTUNES, Luis Caetano Martha. A linguagem das bactrias. Revista Cincia Hoje, v. 33, n.
193, p. 16-20, 2003.
Neste artigo, h a descrio de um mecanismo de comunicao qumica entre bactrias,
chamado quorum sensing. Esse mecanismo corresponde s bases bioqumicas que explicam
como seres microscpicos percebem a presena de outros microrganismos potencialmente
competidores ou mutualistas.
Resumo
Nesta aula, vimos que populaes microbianas dividem pequenos espaos
na natureza, e esto sempre interagindo entre si. Estudamos as interaes
ecolgicas chamadas neutralismo, comensalismo, mutualismo, protocooperao,
competio, predao, parasitismo e amensalismo, exemplicando tais interaes
no mundo microbiano. Nesses exemplos, distinguimos como os organismos
envolvidos podem ser afetados positivamente ou negativamente. Compreendemos,
tambm, que o estudo das interaes ecolgicas envolvendo microrganismos
pode trazer benefcios para o ser humano atravs do desenvolvimento de
medicamentos, por exemplo.
248
Aula 11
Autoavaliao
1
a)
b)
c)
Aula 11
249
Figura 2
Biomassa
Biomassa
A+B
Tempo (h)
250
Aula 11
Tempo (h)
Referncias
ATLAS, R.; BARTHA, R. Microbial ecology: fundamentals and applications. California: The
Benjamin Kummings Publ. Redwood City, 1993. pp. 37-68.
FUHRAMN, J. A. Marine viruses and their biogeochemical and ecological effects. Nature, n.
399, p. 541-548, 1999.
HYVRINEN, M. Marko; HRDLING, R.; TUOMI, J. Cyanobacterial lichen symbiosis: the fungal
partner as an optimal harvester. OIKOS, n. 98, p. 498504, 2002.
MADIGAN, M. T.; MARTINKO, J. M.; PARKER, J. Microbiologia de Brock. 10. ed. So Paulo:
Prentice Hall, 2004.
MILLIGAN, K. L. D.; COSPER, E. M. Isolation of Virus Capable of Lysing the Brown Tide
Microalga, Aureococcus anophagefferens. Science, v. 266, n. 5186, p. 805-807, 1994.
PINTO-COELHO, R. Fundamentos em ecologia. Porto Alegre: Ed. Artmed, 2000.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.
Anotaes
Aula 11
251
Anotaes
252
Aula 11
Os microrganismos
podem ser nossos aliados!
Aula
12
Apresentao
s microrganismos so vistos pela maioria das pessoas como seres nocivos que
causam doenas em plantas e animais, incluindo humanos. Contrariando esse
conceito, estudamos na Aula 10 (Os microrganismos auxiliam a (re)circulao da
matria no planeta) que microrganismos so fundamentais para o funcionamento da natureza
tal como conhecemos. Alm disso, exemplicamos na Aula 5 (Obteno de energia para a
vida microbiana) alguns casos em que microrganismos so usados pelos seres humanos
para a fabricao de alimentos e bebidas. Agora, reforaremos os aspectos positivos da nossa
convivncia com microrganismos no planeta. Estudaremos alguns exemplos de demonstram
que microrganismos so naturalmente importantes para a sade humana. Veremos tambm
exemplos de produtos microbianos usados para a fabricao de medicamentos, bem como
em processos de biorremediao e outras aplicaes.
Objetivos
1
2
3
Aula 12
255
Bactrias que
protegem nosso organismo
Voc j deve ter visto propagandas de sabonetes que prometem eliminar as bactrias
nocivas da pele. Mas ser que isso realmente benco?
A pele, assim como vrias partes do nosso organismo, colonizada por microrganismos
que chamamos de ora normal ou microbiota normal. So micrbios que naturalmente
colonizam nosso corpo, mas que no produzem doena em condies normais. A ora normal
muitas vezes benecia o hospedeiro atravs do fenmeno conhecido como antagonismo
microbiano. Nesse fenmeno, microrganismos da ora normal competem com patgenos
que poderiam se instalar no organismo humano. A competio (veja a Aula 11, Como os
microrganismos se relacionam) por nutrientes leva os microrganismos da ora normal a
produzirem substncias nocivas aos micrbios invasores. Como consequncia, nossos bons
micrbios previnem o crescimento excessivo de microrganismos nocivos. No exemplo da
pele, ca bvio que eliminar as bactrias da ora normal no um bom negcio.
256
Aula 12
Atividade 1
Leia o texto abaixo Sabo com bactericida (Protex) diga no! e descreva outra
desvantagem de se eliminar rotineiramente bactrias da ora normal do corpo humano.
Fonte: A pgina da qumica, Universidade Federal de Santa Catarina. Disponvel em: <http://www.qmc.ufsc.br/qmcweb/exemplar11.html>.
Acesso em: 18 jan. 2010.
Aula 12
257
Atividade 2
Leia o texto Infeco vaginal pelo fungo Candida albicans inserido no Moodle e descreva
o papel das bactrias da ora normal para a sade da mulher, bem como os possveis efeitos
adversos do uso desnecessrio de antibiticos.
258
Aula 12
Medicamentos
produzidos por microrganismos
Ao invs de nos causar doenas, algumas bactrias e fungos produzem substncias que
podem ser utilizadas para combater infeces causadas por microrganismos patognicos ou
para combater algum outro problema orgnico ou decincia nutricional. Em algum momento
da nossa vida, utilizamos tais substncias microbianas. Alis, pesquisas para descobertas de
produtos naturais sintetizados por microrganismos aumentam cada vez mais. Vejamos alguns
exemplos a seguir.
Antibiticos
Microrganismo produtor
Antibitico produzido
Bacillus subtilis
Bacitracina
Bacillus polymyxa
Polimixina
Streptomyces venezuelae
Cloranfenicol
Streptomyces erythraeus
Eritromicina
Micromonospora purpurea
Gentamicina
Cephalosporium spp.
Cefalotina
Aula 12
259
Atividade 3
Dirija-se a uma farmcia e pea para ler a bula de um dos antibiticos que
constam no quadro anterior. Anote quais bactrias ou fungos so inibidos (e,
portanto, suas infeces tratadas) pelo antibitico escolhido. No necessrio
abrir a embalagem do medicamento. As farmcias normalmente dispem de
um catlogo de medicamentos que contm as bulas dos remdios. Voc tambm
pode procurar bulas em sites mdicos ou de laboratrios farmacuticos.
Contraceptivo
Refere-se a algum mtodo
para evitar que a mulher
que grvidwa.
Suplementos
alimentares
Substncias ingeridas
para complementar a
quantidade de vitaminas
ou outros componentes
s vezes, em certas condies fsicas, somos orientados pelo mdico a fazer uso de
medicamentos anti-inamatrios como a cortisona, que faz parte de um grupo de substncias
qumicas denominadas esteroides. Tambm so do grupo dos esteroides os estrgenos e
progesteronas, usados como contraceptivos orais. A extrao de esteroides a partir de
fontes animais ou sua fabricao por mtodos qumicos bastante difcil. Porm, alguns
microrganismos podem sintetizar esteroides a partir de esteris, compostos facilmente
obtidos. Essa transformao feita por bactrias do gnero Streptomyces em uma nica
etapa, enquanto que por mtodos qumicos, em laboratrio, essa mesma transformao requer
cerca de 30 reaes diferentes!
260
Aula 12
Atividade 4
Faa uma pesquisa e descreva abaixo quais so as funes da vitamina
B12 no organismo humano. Reconhea, assim, a importncia das bactrias no
processo de produo dessasubstncia.
Puxa, muitas bactrias so mesmo aliadas da nossa sade! Mas sempre bom lembrar:
consuma apenas medicamentos receitados pelo mdico, principalmente aqueles com a
embalagem marcada venda sob prescrio mdica. Somente o mdico tem condies
de avaliar qual o tratamento que precisamos. Consumir medicamentos inapropriados
e na dose errada pode levar a uma piora no estado de sade e ao surgimento de
bactrias super resistentes. E no se esquea, futuro professor: voc tem um papel
muito importante na transmisso desse conceito para seus futuros alunos!
Aula 12
261
Microrganismos que
comem a poluio
Hoje em dia reconhecido que o aumento da poluio um efeito negativo do crescimento
econmico. O aumento da produo industrial e agrcola gera a produo de resduos muitas
vezes txicos, que so descartados no solo e em ambientes aquticos. Isso sem contar os
acidentes com navios e caminhes que transportam petrleo, combustveis e outros produtos
qumicos.
Para tentar minimizar esses problemas, muitas pesquisas tm sido feitas para o
desenvolvimento de tcnicas de despoluio do solo, de guas subterrneas e superciais,
alm de efluentes e resduos industriais. Aqui entram em cena os microrganismos
usados na biorremediao. Trata-se de um processo biotecnolgico no qual organismos
vivos (microrganismos ou plantas) so utilizados para remover ou reduzir (remediar)
poluentesnoambiente.
Os sistemas metablicos microbianos tm se mostrado aptos para degradar molculas
estveis de poluentes, usando a maquinaria natural de reciclagem das molculas da biosfera. J
vimos que microrganismos so capazes de utilizar diferentes substratos como fonte de energia
e carbono. E exatamente nisso que se baseia a biorremediao usando microrganismos.
Esses, literalmente, comem, ou usam como substratos os compostos poluentes indesejados.
A extraordinria capacidade metablica dos microrganismos se deve combinao do
potencial gentico individual das diferentes espcies microbianas em um sistema natural, com
enzimas e vias metablicas que evoluram ao longo de bilhes de anos, e a capacidade de
metabolismo integrado apresentado pela comunidade microbiana. Assim, produtos resultantes
do metabolismo de um microrganismo podem ser utilizados como substrato (obteno de
energia) por outro microrganismo. Esse intenso sinergismo metablico entre microrganismos
de fundamental importncia para os processos de biorremediao.
262
Aula 12
Atividade 5
Faa uma pesquisa em revistas ou na Internet sobre exemplos de utilizao
de microrganismos na despoluio de locais contaminados com resduos de
petrleo. Resuma a seguir o que voc encontrou, citando a fonte da informao.
Na lavoura, os micrbios
tambm podem ser nossos aliados
Voc est lembrado que na Aula 10 estudamos a importncia da xao biolgica do
nitrognio para a vida na Terra? O nitrognio um componente essencial das protenas, cidos
nucleicos e outras molculas orgnicas. Embora esse elemento seja abundante na atmosfera
(o nitrognio molecular, N2, perfaz 80% da atmosfera da Terra), ele no pode ser assimilado
por plantas e pela maioria das bactrias quando na forma molecular. As formas preferenciais
de assimilao do nitrognio so os ons amnio (NH 4+) e nitrato (NO3). Esses, por outro
lado, no so to abundantes no solo.
atravs da decomposio da matria orgnica (veja o ciclo do nitrognio na Aula 10) e
principalmente atravs da xao biolgica do nitrognio que esse elemento torna-se disponvel
para a biota. Nesse processo, o N2 transformado em amnia (NH3) por algumas bactrias e
cianobactrias. Tais microrganismos, ento, usam a amnia para a sntese de aminocidos e
protenas em suas clulas. Durante o metabolismo microbiano, e tambm com a morte dessas
Aula 12
263
Atividade 6
Leia o artigo Sequenciada bactria que produz adubo natural, no link
<http://cienciahoje.uol.com.br/noticias/genetica/sequenciada-bacteria-que-produz-adubonatural/?searchterm=embrapa>, e descreva no espao a seguir qual a bactria de interesse
no caso relatado, onde ela pode ser naturalmente encontrada e como esse microrganismo
pode ser usado na agricultura.
264
Aula 12
Microrganismos produzem
fontes alternativas de energia
Voc j deve ter ouvido falar que o petrleo, usado na fabricao de gasolina e o leo
diesel, um combustvel fssil armazenado em reservas que sero esgotadas no futuro. Com a
reduo dessas reservas, os preos esto se tornando mais altos. Assim, fontes alternativas de
energia devem ser desenvolvidas para a manuteno da sociedade humana como conhecemos
hoje. Fontes alternativas de energia mais limpas tambm so desejveis, visto que a extrao
e queima de combustveis fsseis geram uma grande emisso de poluentes, como demonstrado
na Atividade 9 da Aula 10.
O metano, um gs produzido por algumas bactrias (veja o ciclo do carbono tambm na
Aula 10), uma conveniente fonte de energia que pode ser produzida, por exemplo, a partir de
resduos em aterros sanitrios (depsitos controlados de lixo). O metano comea a acumular
alguns meses depois que o aterro est completo e selado. Ele pode permanecer produzindo
metano por 5 a 10 anos, dependendo das dimenses do aterro. O metano pode ser usado para
a gerao de energia eltrica.
Alm de bactrias, hoje em dia tem sido pesquisada a produo de biodiesel por
microalgas isoladas de amostras de lagos, reservatrios e oceanos. Microalgas so uma
potencial fonte de biodiesel em substituio aos combustveis de petrleo. Elas superam
culturas terrestres na produtividade de leo e crescem mais rpido do que as plantas terrestres.
Uma outra vantagem que microalgas dispensam terrenos frteis para seu cultivo. Um exemplo
a alga Botryococcus braunii, cujo contedo de leo pode atingir 75% do peso da clula!
Atualmente j existem empresas que cultivam grandes volumes de microalgas produtoras
de leo, extraindo biodiesel a partir da biomassa produzida. Entretanto, a utilizao de biodiesel
de microalgas em larga escala ainda muito cara, e pesquisas devem ser feitas para aprimorar
o processo. Veja uma foto da alga Botryococcus braunii no seguinte endereo da Internet:
<http://www.algaevs.com/the-wonders-of-algae/what-are-algae>.
Aula 12
Biodiesel
Combustvel biodegradvel
derivado de fontes
renovveis, que pode
ser obtido por diferentes
processos a partir de
gorduras animais ou de
leos vegetais. Existem
dezenas de espcies
vegetais no Brasil que
podem ser utilizadas, tais
como mamona, dend
(palma), girassol, babau,
amendoim, pinho manso
e soja, dentre outras.
265
Atividade 7
Leia o artigo Avaliao do leo extrado de diatomceas do RN para produo de
biodiesel, inserido no Moodle. Relate abaixo quais foram os objetivos e as principais concluses
da pesquisa. Que benefcios a produo de biodiesel descrita poderia trazer populao?
266
Aula 12
Leituras complementares
UETA, J. et al. Biodegradao de herbicidas e biorremediao. Biotecnologia, Cincia e
desenvolvimento, n. 10, p. 10-13, 1999.
Esse artigo descreve aspectos gerais sobre o emprego do herbicida atrazine na agricultura,
e relata uma experincia de seleo de bactrias degradadoras da atrazina e sua utilizao para
a descontaminao de solos contaminados por esse herbicida.
<http://www.biodiesel.gov.br/>
O Portal do Programa Nacional de Produo e Uso do Biodiesel, do Governo Federal,
divulga as informaes referentes ao Programa. Nesse Portal, voc poder conhecer melhor as
possibilidades oferecidas pelo emprego do biodiesel em substituio aos combustveis fsseis.
<http://www.rudekinc.com/algae.html>
Nesse site, em ingls, voc encontra informaes sobre o cultivo de microalgas para a
produo de biocombustveis. Veja as fotos das culturas da microalga Botryococcus braunii.
Resumo
Nessa aula vimos alguns casos em que as chamadas bactrias da ora normal
trazem benefcios para o organismo humano. Em outros exemplos, observamos
que microrganismos so usados para a produo de medicamentos, como
antibiticos e suplementos alimentares, tambm em prol da sade humana.
Tambm estudamos a aplicao de microrganismos para o controle da poluio
gerada pelas atividades humanas, como as bactrias degradadoras de derivados
de petrleo. Compreendemos tambm que bactrias xadoras de nitrognio
podem ser usadas nas lavouras em substituio aos adubos qumicos. E, por m,
vimos que microrganismos podem produzir substncias usadas para a gerao
de energia. Conclumos, portanto, que microrganismos podem se nossos aliados.
Aula 12
267
Autoavaliao
1
Faa uma redao explicando o que so microrganismos e como eles vivem. Explique,
de maneira geral, como constituda uma clula microbiana, diferenciando micrbios
eucariotos e procariotos. Aponte os aspectos principais da diversidade microbiana.
Explique sucintamente como bactrias se reproduzem e como obtm energia. Ressalte
a participao dos microrganismos na mineralizao da matria orgnica.
Leia o texto abaixo e identique qual a relao estabelecida entre seres humanos e
a bactria Escherichia coli no exemplo descrito. Se necessrio, retome os conceitos
estudados na Aula 11.
A bactria E. coli, habitante normal do intestino grosso humano, sintetiza vitamina K
e algumas vitaminas B. Estas vitaminas so absorvidas na corrente sangunea e
distribudas para as clulas do corpo. Em troca, as bactrias encontram no intestino
os nutrientes necessrios para sua multiplicao.
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Referncias
CHISTI, Y. Biodiesel from microalgae. Biotechnology advances, v. 25, p. 294-306, 2007.
GAYLARDE, C. C. et al. Biorremediao: aspectos biolgicos e tcnicos da biorremediao de
xenobiticos. Biotecnologia, Cincia e desenvolvimento, n. 34, p. 36-43, 2005.
TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, C. L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: Ed. Artmed,
2000. 827p.
Anotaes
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Esta edio foi produzida em ms de 2012 no Rio Grande do Norte, pela Secretaria de
Educao a Distncia da Universidade Federal do Rio Grande do Norte (SEDIS/UFRN).
Utilizando-se Helvetica Lt Std Condensed para corpo do texto e Helvetica Lt Std Condensed
Black ttulos e subttulos sobre papel offset 90 g/m2.
Impresso na nome da grca
Foram impressos 1.000 exemplares desta edio.
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