Nutritivo Agar

Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco
exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos.
Su uso est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros
materiales de importancia sanitaria.
Fundamento
Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos
poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo
bacteriano. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrgeno para el desarrollo bacteriano. El
agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias
para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes.
Frmula (en gramos por litro)
Pluripeptona

5.0

Extracto de carne

3.0

Cloruro de sodio

8.0

Agar

15.0

Instrucciones
Suspender 31 g de polvo por litro de
agua destilada. Mezclar y dejar
reposar 5 minutos. Calentar
suavemente agitando y hervir 1 o 2
minutos hasta su disolucin. Distribuir
y esterilizar a 121C durante 15
minutos.

pH final: 7.3 0.2

Siembra
En superficie o por la tcnica de pour plate, segn el uso a que se destine.
Incubacin
En aerobiosis, a 35-37 C durante 24 horas.
Resultados
a-Agar nutritivo:
Microorganismos
P. mirabilis ATCC 43071

Crecimiento
Bueno-excelente

E. coli ATCC 25922

Bueno-excelente

S. aureus ATCC 25923

Bueno-excelente

B. cereus ATCC 10876

Bueno-excelente

E. faecalis ATCC 29212

Bueno-excelente

P. aeruginosa ATCC 27853

Bueno-excelente

b-Agar nutritivo suplementado con 5% de sangre de carnero:

Microorganismos

Crecimiento

Hemlisis

S. pyogenes ATCC 19615

Abundante

Beta

S. pneumoniae ATCC 6305

Abundante

Alfa

S. pneumoniae ATCC 49619

Abundante

Alfa

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro a medio ligeramente opalescente.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin
x 100g :Cdigo: B02-12205

x 500g :Cdigo: B02-12206

6 x 50 ml: B04-122-84

http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/nutritivoagar.htm
El agar nutritivo es una de las sustancias gelatinosas que se pueden usar en el fondo de una placa de
petri. Este material contribuye a un entorno hospitalario para el crecimiento microbiolgico,
proporcionando tanto comida para los organismos y una base para crecer que no se degrade cuando
se expone al crecimiento de microorganismos. El agar nutritivo es diferente de otros medios de
crecimiento en los que se usa agar, que es derivado de algas, como el agente gelatinoso.

Otras personas estn leyendo

Cmo identificar bacterias sobre un agar

Cul es el propsito del agar en el agar nutritivo?

Object 1

Agar nutritivo simple

El agar nutritivo simple est hecho de caldo de carne, peptona, agua, agar y posiblemente sal. El pH
se ajusta al 7,0 y es filtrado o pasado por el autoclave para esterilizarlo. Este agar nutritivo simple
puede servir para que crezcan la mayora de tipos de bacteria y es especialmente til si no ests
seguro de qu tipo de bacterias buscas.

Agar LB
El agar LB no hace crecer preferentemente un tipo de bacteria sobre otra. Tiene muchas variaciones
diferentes, aunque casi todas contienen extracto de levadura, que proporcionan vitaminas y restos
de elementos, pptidos y peptonas de casena proporcionadas por triptona y sal. El "LB" en el
nombre se suele identificar como una referencia al inventor, Giuseppe Bertani, pero se ha
establecido que las iniciales son de "Caldo de Lisogenia".

Object 2

Agar de sangre
El agar de sangre es creado aadiendo sangre animal a la solucin de agar, y para algunos tipos
(como el agar de chocolate), la mezcla es tratada ms para fomentar cierto tipo de crecimiento
bacteriano. Recuerda a la sangre fresca o seca y se usa para cultivar una variedad de microbios. Es
til porque la mayora de organismos crecern en sangre, pero tambin porque puede ayudar a
determinar cmo interaccionan estos organismos con el cuerpo.

Agar de medio selectivo

El agar de medio selectivo es diseado para fomentar el crecimiento de un tipo de organismo y
desalentar a otro. Por ejemplo, los agares de crecimiento fngico son especialmente cidos para
desalentar el crecimiento bacteriano pero permiten a los organismos fngicos florecer. Por otra
parte, algunos agares estn impregnados con antibiticos que permiten que las bacterias resistentes
a ellos crezcan, mientras excluyen a otros organismos.

Agares diferenciales
Los agares diferenciales contienen compuestos que cambian de color cuando se exponen a los
productos de desecho de un tipo de organismo, o cambian el color del organismo mientras crece. El
agar MacConkey contiene un indicador de pH que pone las colonias de E. coli rojas. El agar de sal
de manitol se vuelve amarillo cuando un organismo puede fermentar el manitol que contiene y bajar
el pH.

Object 3

http://www.ehowenespanol.com/tipos-agar-nutritivo-info_77051/

MEDIOS DE CULTIVO COMUNES.

Son los ms corrientemente utilizados, y aunque no vamos a enumerarlos todos, s son los ms
conocidos en un laboratorio de Microbiologa.

Agar nutritivo: Este medio es bastante bueno para el cultivo de grmenes que no presentan
exigencias particulares. No es diferencial.

Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza adems para la investigacin de los diversos
tipos de hemlisis(, gamma ). Se utiliza para el crecimiento de estreptococos. Para la
preparacin del agar sangre se puede utilizar el agar nutritivo enriquecido con cloruro sdico o un
preparado enriquecido con otras sustancias como Columbia o el tripticase de soja. La adicin de
sangre a un medio de cultivo no proporciona las sustancias que estn en el interior de los hemates,
pero s puede aadir factores inhibidores del crecimiento bacteriano presentes en el suero. Este es
un inconveniente que puede solucionarse calentando la sangre para romper los eritrocitos y para que
se destruyan las sustancias inhibidoras, que son termolbiles.La sangre utilizada como aditivo a
estos medios suele ser sangre de carnero diluida al 5%, pero en algunas ocasiones es necesario

utilizar sangre de otras especies (caballo, conejo, humana), pues facilitan las reacciones hemolticas
o contienen determinados factores de enriquecimiento o no poseen sustancias inhibidoras del
crecimiento de determinados grmenes. Agar chocolate: El agar chocolate se obtiene calentando la
sangre antes de adicionarla al medio base. Por esta razn el agar chocolate contiene hemoglobina,
que aporta al medio un importante elemento para el crecimiento: el factor X o hemina termoestable.
El agar chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de Neisserias (gonococos
ymeningococos) y Haemophilus, pero en l pueden crecer muchos otros microorganismos
exigentes. El agar chocolate puede convertirse quizs en uno de los medios ms enriquecidos si
aadimos una mezcla de factores de crecimiento no contenidas en la sangre. Estas mezclas,
denominadas de forma diferente segn las casas comerciales (Polivitex, Isovitalex, etc.) contienen
ms de una docena de compuestos que confieren a este medio unas cualidades nutritivas
extraordinarias. Por adicin de uno o varios antibiticos pueden lograrse medios inhibidores o
selectivos para el crecimiento de determinados microorganismos. Un ejemplo clsico es el ThayerMartin, utilizado para el aislamiento del gonococo y que no es otra cosa que un agar chocolate
enriquecido al cual se ha aadido unamezcla de tres antibiticos especficos que impedirn el
crecimiento del resto de la flora acompaante. Agar MacConkey: Es un medio utilizado para el
aislamiento e identificacin de enterobacterias. Es un medio inhibidor de los grmenes Gram
positivos por su contenido en cristal violeta y selectivo para enterobacterias por su contenido en
sales biliares. En su composicin lleva un azcar (lactosa) y un indicador (rojo de metilo) que lo
convierten en un medio diferencial. Los grmenes que fermenten la lactosa producen una
acidificacin del medio que hacen aparecer de color rojo fuerte a las colonias resultantes. Las
colonias lactosa negativas sern incoloras, apareciendo del mismo color que el medio subyacente
(naranja).

Agar C.L.E.D.: El medio C.L.E.D. (Cistina Lactosa Electrlito Deficiente) est recomendado
para el recuento e identificacin presuntiva de los microorganismos de las vas urinarias. Su bajo
contenido en electrolitos evita la invasin de los cultivos por Proteus.La presencia de lactosa en su
composicin le confiere el carcter de medio diferencial, aunque la interpretacin sea diferente al
anterior medio por la incorporacin de otro indicador: el azul de bromotimol. Las colonias lactosa
positivas aparecern de color amarillo y las lactosa negativas lo harn con un color verdoso, blanco
o azulado.

Agar S.S.:El agar SS es un medio selectivo empleado para el aislamiento de Salmonella y

Shigella a partir demuestras fecales. El medio contiene sales biliares y verde brillante para impedir
el crecimiento de coliformes y grmenes Gram positivos. La presencia de lactosa y rojo de metilo
nos permiten diferenciar las colonias que fermentan la lactosa (rosas o rojas) de las que no lo hacen
(incoloras).Las especies de Salmonella y Shigella no fermentan nunca la lactosa por lo que este
medio es excelente para descartar todas las colonias que no cumplan este requisito. El agar SS es
doblemente diferencial, porque adems de indicarnos el comportamiento de los grmenes con
relacin a la lactosa, nos muestra los grmenes que son capaces de producir cido sulfhdrico, que
se manifiesta como un precipitado de color negro en el centro de la colonia. As, una colonia
incolora y con un punto negro central es sospechosa de Salmonella, y ser exclusivamente a estas
colonias a quienes se hagan las pruebas bioqumicas confirmatorias de esta especie. El agar SS es
un medio muy inhibidor que a veces impide incluso el crecimiento de ciertas especies de
Salmonella y sobre todo de Shigella. Por esta razn debe utilizarse siempre junto con otro medio
menos inhibidor como el Hektoen.

Agar Hektoen :Es un medio ms diferencial y menos selectivo que el agar SS. Se utiliza para
facilitar el aislamiento de las enterobacterias. La presencia de tres azcares (lactosa, sacarosa y
salicilina ) permiten ampliar el poder diferencial de este medio. Este medio es capaz de detectar los
grmenes formadores de SH2, igual que el SS. Las cualidades del agar Hektoen se deben a su
riqueza en peptonas y azcares, que neutralizan el efecto inhibidor de las sales biliares respecto a
ciertos grmenes de cultivo delicado (Shigella en particular).El crecimiento de Salmonella es

excelente, igual que el de Shigella, obtenindose colonias ms numerosas y voluminosas que en los
medios selectivos usuales. La inhibicin tiene lugar, esencialmente, sobre E. coli y en menor
medida sobre Proteus y Citrobacter. Hay que sealar que el vibrin colrico crece bien en este
medio.

C.P.S. ID3. :Medio cromognico desarrollado por Biomerieux, que permite la identificacin de
E. coli, P. mirabilisy E. faecalis, con la simple visualizacin del cambio de color de la colonia sobre
el medio (rojo burdeos, azulo marrn). La identificacin solo requiere la adicin de un reactivo para
confirmar o descartar la especie sospechada. Otros microorganismos diferentes requieren los
sistemas de identificacin habituales (API, p. ej) Granada, Islam o New GBS: Medios utilizados
para deteccin de Streptococcus agalactiae, mediante la utilizacin de un sustrato cromognico
especfico de este microorganismo.

Agar Mueller-Hinton: Es el medio universalmente aceptado para la realizacin de los

antibiogramas o pruebas de sensibilidada los antimicrobianos. A l nos referiremos ms
ampliamente en el captulo correspondiente

Agar Tripticase de soja: Es un medio utilizado para el crecimiento de grmenes exigentes,

como Brucella, Neisseria o Streptococcus. Es un medio muy enriquecido, pero no es diferencial.
Caldo tioglicolato con resazurina: Es un medio recomendado para controles de esterilidad. Permite
el cultivo de aerobios, anaerobiosy microaerfilos. Tiene un bajo potencial redox que, al aumentar,
se manifiesta por un color rosa del medio.

Agar Chapman: Es un medio selectivo para el aislamiento de estafilococos. Su elevado

contenido en cloruro sdico permite la inhibicin de la mayora de los otros grmenes. La presencia
de manitol y rojo fenol convierten a este medio en diferencial: as se puede identificar
presuntivamente el Staphylococcus aureus, ya que estegrmen crece bien en medios salados y
fermenta el manitol (colonias amarillas).

Agar Baird-Parker: Permite el crecimiento de estafilococos coagulasa positivos, a la vez que

los diferencia del resto.

Medio de Loeffler: Es un medio especfico para el cultivo de Corynebacterium difteriae.

Agar Desoxicolato Citrato Lactosa Sucrosa (DCLS):Similar al agar SS. Es un medio
diferencial e inhibidor a la vez.

Agar Kligler: Medio especfico para pruebas de identificacin de enterobacterias. Aunque de l

hablaremos conms detenimiento en el captulo de pruebas de identificacin bacteriana, podemos ir
adelantando que se tratade un medio diferencial que permite conocer el comportamiento del
microorganismo ante dos azcares (glucosa y lactosa), investigar la formacin de gas y comprobar
si el microorganismo puede producir sulfatoferroso a partir del tiosulfato sdico.

Agar Levine EMB (Eosina azul de metileno):Se utiliza para aislamiento de enterobacterias,
pues impide el crecimiento de Gram positivos y diferencia muy bien a E. coli, cuyas colonias
adquieren un color negruzco con un brillo metlico caracterstico. Caldo selenito-F: Se utiliza
exclusivamente para enriquecimiento de Salmonellas.

Agar Cetrimida. Agar King: Permiten el crecimiento de Pseudomonas, inhibiendo Gram

positivos y la mayora de enterobacterias.El segundo pone adems de manifiesto la pigmentacin
fluorescente de Pseudomonas bajo luz UV.

Agar Schaedler: Es un medio con sangre y vitamina K muy adaptado para el cultivo de
anaerobios.

Agar Gardnerella:Agar con sangre humana ms una mezcla de antibiticos que permiten la
observacin de colonias betahemolticas caractersticas de Gardnerella vaginalis

Campylosel: Se utiliza para el aislamiento de Campylobacter intestinales creciendo a 42 C en

microaerofilia.

Agar BCYE (Buffer Charcoal Yeast Extract):Se utiliza para el aislamiento de bacterias
del gnero Legionella

Lwenstein-Jensen:Este medio se utiliza para el cultivo de Mycobacterium tuberculosis.

Contiene verde malaquita parainhibir parcialmente el crecimiento de otras bacterias. El huevo se
utiliza como sustancia de enriquecimiento.
http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm

SIEMBRA EN AGAR NUTRITIVO

MEDIO DE CULTIVO
El caldo Nutriente:
Es un medio muy generalista, as es muy empleado para el
crecimiento de microorganismos exigentes y no exigentes.
Asimismo, anotamos como los Clostridios y anaerobios
adquieren crecimiento igualmente en el momento que se
incuban bajo condiciones de anaerobiosis. En su
composicin por litro se observa 17 g de digestivo
pancretico de casena, 3 g de digestivo papaico de harina
de soja, 2.5 g de dextrosa, 5 g de cloruro sdico, y 2.5 g de
fosfato Di potsico.
El agar nutriente
Es un medio con fines generales para la siembra y el
crecimiento de la mayora de los microorganismos poco
exigentes. Su composicin esta a base de 3 g de extracto

de Carne de buey, 5 g de peptona trplica de gelatina, 15 g

de agar, y un pequeo montante de cloruro sdico y
glucosa, y agua destilada hasta 1000 ml
Objetivo
Obtener cultivos puros
REACTIVOS A UTILIZAR
5 ml / fco
Caldo nutritivo
Agar nutritiva
Preparacin
Heptano de casena 10 g / l
Extracto de carne 10 g / l
Material a utilizar
cajas de Petri
matraz
Pipeta Pasteur
Plancha agitadora
Mechero bunsen

Mas 8 g / agar / l

PREPARACION DE UN MEDIO DE CULTIVO

Primeramente se mesclan los reactivos utilizados despus
los disolvemos con agua destilada, para as vaciar a un
matraz y hervirlos en la plancha de agitacin
introducindole un magneto o un clip para que se este
agitando y el medio no se queme, asta que el agar hierva y
este estril.
Siembra en agar
primero limpiamos la mesa para esterilizarla con alcohol al
70% colocamos los mecheros para encenderlos para tener
el campo desinfectado, las cajas petri despus de
esterilizarlas en el horno de microondas vaciamos el agar a
las cajas pero teniendo el egar y las cajas cerca de los
mecheros para que estos no se contaminen ya vaciados los
dejamos enfriar para que el agar se coagule y poder
sembrar el caldo contaminado, con una pipeta Pasteur
asindolo cerca de los mecheros tomamos un poco de
caldo y lo regamos sobre el agar en forma de zinc saca. En
todas las cajas, y despus esperamos 24 horas para
observar el crecimiento.

http://microbiologiadaniel.blogspot.com/2011/06/practica-agar-nutritivo.html
Los microbilogos necesitan cultivar bacterias en el laboratorio por varias de razones para llevar a
cabo experimentos sobre investigaciones. Para lograrlo de la manera ms efectiva, es importante
utilizar un medio de crecimiento que se asemeje lo ms posible al medio natural. El caldo de cultivo
con agar se denomina agar nutritivo. El propsito general del agar es adaptar el medio para esas
bacterias especficas.

Caldo de cultivo
El caldo de cultivo consiste en agua, extracto de carne y petpona. La petpona es una mezcla de
nitrgeno de fuentes animales y vegetales. Luego se le agrega agar para convertir la mezcla en
slido, y en ese estado se denomina agar nutritivo.

Agar
El agar es un polisacrido que proviene de las algas rojas marinas. Los polisacridos son cadenas
repetidas de monosacridos ligadas por enlaces glicosdicos. El agar es un coloide lquido hasta que
se enfra por debajo de los 36 grados Celsius. Un coloide es simplemente una mezcla que contiene
partculas dispersas por todas partes, y que son tan pequeas que no resultan visibles al ojo humano.

Propsito del agar

El agar no se convierte en slido hasta que alcanza cierta temperatura, lo que resulta til para que la
sangre pueda mezclarse con el medio de cultivo. El proceso permite especficamente determinar
reacciones hemolticas. Un agar slido tambin puede utilizarse para cultivar bacterias, detectar
cultivos puros o medir el crecimiento de bacterias.

Agar para probar motilidad

Si intentas probar algo que requiera que las bacterias tengan movilidad, utiliza un medio ms
semislido. Puede utilizarse una menor concentracin de agar para producir este resultado.

Otras consideraciones
Cuando el agar se hace slido, seguir slido a temperatura ambiente. A una temperatura de 85
grados Celsius o ms, se derretir. Las bacterias termoflicas pueden cultivarse efectivamente en
agar debido a esta propiedad.
http://www.ehowenespanol.com/proposito-del-agar-agar-nutritivo-sobre_77705/v

La composicin del Agar nutritivo

Agar es uno de un nmero de diferentes tipos de sustancias gelatinosas utilizadas para cocinar y es
probablemente la nica sustancia ms popular para experimentos de laboratorio. A diferencia de
otro verdadera gelatina, agar proviene de las plantas y no requiere el sacrificio de un animal.
Adems, es el medio gelatinoso de eleccin para las Naciones que estn mejor posicionados para
cosechar cultivos mar que to crecer fcula de maz en la tierra.

Aplicaciones
Para todos los propsitos, agar es casi intercambiable con gelatina basada en colgeno utilizado en
la cocina. Agar puede solidificar en algo de 90 a 104 grados Fahrenheit y se derrite hasta que
alcanza unos 185 grados. Esto hace que la sustancia un espesante ideal para sopas y otros platos lo
suficientemente calientes como para activar a otros agentes espesantes de nuevo en un lquido. Su
amplia gama de temperatura uso tambin es ideal para uso en laboratorio, ya que muchos
laboratorios necesitan incubar las culturas en o cerca de punto de fusin de una gelatina estndar.

Produccin de agar
Agar habita en las paredes celulares de un nmero de diferentes tipos de algas rojas (alga marina)
que crecen a lo largo de la costa asitica del Pacfico y las islas circundantes. Los japoneses se
refieren a que contienen agar algas como Kanten. Para quitar el agar de las algas, los productores
ralle el alga en tiras, permite congelar toda la noche y luego djelo descongelar en el sol al da
siguiente. Despus de repetidos de congelacin y descongelacin, las tiras de perder el contenido de
agua, causando el agar separar las paredes celulares. Despus, las tiras son hervidas y los flotadores
del agar libre de las algas.

Estructura y propiedades
Agar es una sustancia bipartito compuesta de agarosa y agaropectin, que lo convierte en un tipo de
coloide. Colliods son cualquier tipo de sustancia uniformemente dispersada en otra sustancia; los
ejemplos incluyen humo (slidos dispersados en un gas), poliestireno (gas dispersadas en un slido)
y agar (un lquido dispersado en un slido). Agarosa, un polmero lineal slido, es en realidad la
jalea porcin del gel de agar y agaropectin lquido estaba disuelto en su interior como las burbujas
en espuma de poliestireno.

Valor nutricional
Agar no tiene ningn valor nutricional, como tal, principalmente, ya que es casi difcil de digerir
por la mayora de los organismos. En trminos de nutricin, agar acta como fibra pura en que pasa
justo a travs de la mayora de las criaturas sin agregar ningn valor calrico importante. Es esta
propiedad muy que hace agar tan valioso como un medio de cultivo clnico; bacterias, hongos y

otros especmenes pueden vivir en l, pero que no pueden comerlo. Etiqueta de los alimentos de la
FDA para esta sustancia se lee como el del agua embotellada, listado de agar como tener cero por
ciento de grasa, colesterol, carbohidratos, protenas, vitaminas y minerales.
http://www.davidmsc.com/la-composicion-del-agar-nutritivo.html
Medio de cultivo Nutritivo
INTRODUCCIN:
CRITERIOS DE DESEMPEO Y LIMITACIONES
DEL MTODO
Es un medio de cultivo enriquecido sin aditivos Por ser el Agar Nutritivo un medio enriquecido
preparado para la recuperacin y aislamiento de permitir el crecimiento de bacterias tanto
toda clase de microorganismos gram-positivos y patgenas como saprofitas, por esto es importante
gram-negativos, hongos y levaduras que no trabajar con las mayores condiciones de asepsia
requieren para garantizar que no hay crecimiento de
elementos microorganismos contaminantes que puedan
especiales ocasionar un resultado errneo.
para
su
crecimiento, se usa principalmente para el
mantenimiento de cepas, realizacin de subcultivos
para confirma la pureza de los aislamientos.
COMPONENTES PREPARACIN DE LOS REACTIVOS:
1. Caja por 10 unidades La placa de agar sangre de cordero viene lista
2. Inserto para ser utilizada.
MATERIALES REQUERIDOS
SUMINISTRADOS:
NO
1. Asas Bacteriolgicas
2. Guantes Estriles
3.Tapabocas
4.Estufa a 37C
5. Mechero de Bunsen.
METODOLOGA:
Principio del mtodo:
El agar Nutritivo garantiza el crecimiento de todos los
microorganismos de importancia clnica tanto
grampositivos como gramnegativos, hongos y

levaduras,
adems
de
proporcionar
una
herramienta para el mantenimiento y confirmacin
de aislamientos primarios
El agar Nutritivo se prepara a partir del medio de
cultivo deshidratado, materia prima producida por la
casa BBL y tiene la siguiente composicin:
g/l
Extracto de carne.................................... 3.0 g
Peptona........ ........................................... 5.0 g
Agar........................................................ 15.0 g
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS:
Y
El Agar Nutritivo debe conservarse a T de 48 colocando las placas en posicin invertida
C
para evitar que el agua de condensacin pueda
caer sobre la superficie del medio. Este producto
debe
manipularse
con
cuidado
evitando
movimientos bruscos o cadas que puedan
resquebrajar la capa del medio.
La congelacin arruina totalmente el medio.
Conservado en condiciones ptimas el medio es
estable hasta la fecha de expiracin sealada.
PROCEDIMIENTO:
1-Con asa bacteriolgica estril trabajando
siempre a la llama del mechero, tomar una mnima
muestra.
2. Sembrar suavemente sobre la superficie tersa del

medio por el procedimiento de agotamiento.

3. Incubar las placas en posicin invertida a 37 en
C
aerobiosis.
4. Al trmino de 18-24 horas de incubacin
examinar el cultivo, observando si hay
crecimiento monomicrobiano.
Medios y Reactivos
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
INTERPRETACIN
ANALTICOS:
DE
RESULTADOS
Es importante hacer una coloracin de Gram sobre
las colonias presentes para garantizar la pureza del
cultivo.
CONTROL DE CALIDAD:
El Agar Nutritivo tiene un estricto control de calidad a
lo largo del proceso de produccin. El producto final
tiene un cuidadoso control para asegurar que cada
lote llene las especificaciones del medio: Color,
consistencia, tersura, esterilidad, pH.
El desempeo del medio se controla mediante el
cultivo de cepas control ATCC de:
Ya que para la utilizacin de este medio se deben
manipular microorganismos patgenos, se deben
guardar las ms estrictas normas de asepsia y
antisepsia, los cultivos una vez ledos deben
esterilizarse y luego colocarse en bolsa roja
identificada y entregada a la compaa
especializada en recoleccin de productos
biolgicos de desecho.
BIBLIOGRAFA
1. Wentworth BB, Baselkivs, Doern GV et al.
Diagnostic procedures for bacterial infections 7th
Ed. 1987. Washington, D.C.AM Pub Health Ass.
Escherchia coli 255922 2. Pfaller MA. Microbiology. Section IX, Chapter

Enterococcus faecalis 19433 44, Bacteriology pg 1111-1168 in Clinical

Candida albicans 14083 laboratory Medicine Edited by McCIatchey KD.
Pseudomonas aeruginosa 27853 1994 Williams and Wilkins. Baltimore MD 21202
USA.
Para determinar calidad y caractersticas del 3. Becton, Dickinson and Company. Section III
crecimiento bacteriano que deben observarse en el Culture Medium an Ingredients Manual of
medio. El usuario recibe una copia de este estudio. Microbiological Culture Media. Pg 151 -153
Maryland 2003
VALOR DE REFERENCIA:
Este medio al usarse, debe ser estril y permitir un
desarrollo ptimo de las cepas de referencia.
4. Nash P, Krenz. MM. . Culture Media. Chapter
121. pg 1226-1228 in: Manual of Clinical
Microbiology, edited by Balows A, Hauser WJ, Jr,
Herrmann KL, Isenberg HD, Shadomy HJ. Fifth
Ed. 1991 Am Soc Microbiol. Washington DC.
REVISIN SEGN NORMAS DEL INVIMA
ABRIL2007
Medio de cultivo Nutritivo
INTRODUCCIN:
CRITERIOS DE DESEMPEO Y LIMITACIONES
DEL MTODO
Es un medio de cultivo enriquecido sin aditivos Por ser el Agar Nutritivo un medio enriquecido
preparado para la recuperacin y aislamiento de permitir el crecimiento de bacterias tanto
toda clase de microorganismos gram-positivos y patgenas como saprofitas, por esto es importante
gram-negativos, hongos y levaduras que no trabajar con las mayores condiciones de asepsia
requieren para garantizar que no hay crecimiento de
elementos microorganismos contaminantes que puedan
especiales ocasionar un resultado errneo.
para
su
crecimiento, se usa principalmente para el
mantenimiento de cepas, realizacin de subcultivos
para confirma la pureza de los aislamientos.
COMPONENTES PREPARACIN DE LOS REACTIVOS:
1. Caja por 10 unidades La placa de agar sangre de cordero viene lista
2. Inserto para ser utilizada.

MATERIALES REQUERIDOS
SUMINISTRADOS:
NO
1. Asas Bacteriolgicas
2. Guantes Estriles
3.Tapabocas
4.Estufa a 37C
5. Mechero de Bunsen.
METODOLOGA:
Principio del mtodo:
El agar Nutritivo garantiza el crecimiento de todos los
microorganismos de importancia clnica tanto
grampositivos como gramnegativos, hongos y
levaduras,
adems
de
proporcionar
una
herramienta para el mantenimiento y confirmacin
de aislamientos primarios
El agar Nutritivo se prepara a partir del medio de
cultivo deshidratado, materia prima producida por la
casa BBL y tiene la siguiente composicin:
g/l
Extracto de carne.................................... 3.0 g
Peptona........ ........................................... 5.0 g
Agar........................................................ 15.0 g
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS:
Y
El Agar Nutritivo debe conservarse a T de 48 colocando las placas en posicin invertida
C
para evitar que el agua de condensacin pueda
caer sobre la superficie del medio. Este producto
debe
manipularse

con
cuidado
evitando
movimientos bruscos o cadas que puedan
resquebrajar la capa del medio.
La congelacin arruina totalmente el medio.
Conservado en condiciones ptimas el medio es
estable hasta la fecha de expiracin sealada.
PROCEDIMIENTO:
1-Con asa bacteriolgica estril trabajando
siempre a la llama del mechero, tomar una mnima
muestra.
2. Sembrar suavemente sobre la superficie tersa del
medio por el procedimiento de agotamiento.
3. Incubar las placas en posicin invertida a 37 en
C
aerobiosis.
4. Al trmino de 18-24 horas de incubacin
examinar el cultivo, observando si hay
crecimiento monomicrobiano.
Medios y Reactivos
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
INTERPRETACIN
ANALTICOS:
DE
RESULTADOS
Es importante hacer una coloracin de Gram sobre
las colonias presentes para garantizar la pureza del
cultivo.
CONTROL DE CALIDAD:
El Agar Nutritivo tiene un estricto control de calidad a
lo largo del proceso de produccin. El producto final
tiene un cuidadoso control para asegurar que cada
lote llene las especificaciones del medio: Color,
consistencia, tersura, esterilidad, pH.
El desempeo del medio se controla mediante el
cultivo de cepas control ATCC de:

Ya que para la utilizacin de este medio se deben

manipular microorganismos patgenos, se deben
guardar las ms estrictas normas de asepsia y
antisepsia, los cultivos una vez ledos deben
esterilizarse y luego colocarse en bolsa roja
identificada y entregada a la compaa
especializada en recoleccin de productos
biolgicos de desecho.
BIBLIOGRAFA
1. Wentworth BB, Baselkivs, Doern GV et al.
Diagnostic procedures for bacterial infections 7th
Ed. 1987. Washington, D.C.AM Pub Health Ass.
Escherchia coli 255922 2. Pfaller MA. Microbiology. Section IX, Chapter
Enterococcus faecalis 19433 44, Bacteriology pg 1111-1168 in Clinical
Candida albicans 14083 laboratory Medicine Edited by McCIatchey KD.
Pseudomonas aeruginosa 27853 1994 Williams and Wilkins. Baltimore MD 21202
USA.
Para determinar calidad y caractersticas del 3. Becton, Dickinson and Company. Section III
crecimiento bacteriano que deben observarse en el Culture Medium an Ingredients Manual of
medio. El usuario recibe una copia de este estudio. Microbiological Culture Media. Pg 151 -153
Maryland 2003
VALOR DE REFERENCIA:
Este medio al usarse, debe ser estril y permitir un
desarrollo ptimo de las cepas de referencia.
4. Nash P, Krenz. MM. . Culture Media. Chapter
121. pg 1226-1228 in: Manual of Clinical
Microbiology, edited by Balows A, Hauser WJ, Jr,
Herrmann KL, Isenberg HD, Shadomy HJ. Fifth
Ed. 1991 Am Soc Microbiol. Washington DC.
REVISIN SEGN NORMAS DEL INVIMA
ABRIL2007
MEDIOS RICOS Y ENRIQUECIDOS: NO TIENEN AGENTES INHIBIDORES
MEDIO
COMPONENTES CARACTERSTICAS USOS VISUALIZACIN DE
PRINCIPALES LAS COLONIAS
Caldo nutritivo + Agar. No es diferencial Medio rico para el cultivo de -----

Diferentes versiones con microorganismos en general, crecen

distintos componentes una gran mayora, excepto algunos
(peptona, triptona-soja, muy exigentes
infusin de cerebro y
corazn, agar Brucella, agar
Columbia, etc.)
Digestin enzimtica de soja
y casena.
No es diferencial, si no ----se le aade sangre
Agar Columbia Peptona, triptena, extracto No es diferencial, si no BHI Infusin de tejidos
animales, No es diferencial Medio rico para el cultivo de
de levadura y extracto de se le aade sangre peptonas, glucosa y tampn microorganismos
en general. Se usa
corazn, almidn como base para agar sangre. Crecen
una gran mayora, e incluso algunos
exigentes, como Brucella,
Corynebactrium, Listeria
Medio rico para el cultivo de
microorganismos en general. Se usa
como base para agar sangre. Crecen
una gran mayora, e incluso algunos
exigentes al aadir sangre.
Medio rico que permite el
crecimiento de una gran mayora de
los microorganismos, menos los
muy exigentes. Se puede usar como
base para Agar sangre.
MEDIOS SLIDOS
Agar nutritivo
Agar TSA
-----Agar sangre Agar base (BHI, Columbia, Diferencial, permite ver Aislamiento de la gran mayora de
Distingue tres tipos de
TSA, Brucella) + 5% sangre distintos tipos de hemlisis:
de oveja desfibrinada microorganismos, incluidos algunos -hemlisis o hemlisis total
hemlisis -hemlisis o hemlisis

muy exigentes. No permite el parcial

crecimiento de Neisseria y -hemlisis o no hemlisis
Haemophilus.
Agar sangre con disco dem. a agar sangre + disco Diferencial, hemlisis Agar sangre con estra
Agar sangre con una estra S. pyogenes: Colonias betade bacitracina de bacitracina de muy baja estafiloccica con S.aureus. La beta- hemolticas
sensibles a
concentracin (0,04U) hemlisis producida por S. bacitracina (halo de
aureus libera factor V y inhibicin), S. agalactiae,
factor X, permitiendo el colonias beta-hemolticas no
crecimiento de Haemophilus sensibles
Agar base (p.e.., Columbia) Colonias puntiformes
+ 5% sangre de oveja + satelitales de Haemophilus
extracto de levadura +
hemina + vitamina K
Agar sangre, con la sangre
lisada (por calentamiento a
80oC). Los eritrocitos lisados
liberan la hemoglobina y
otros nutrientes como factor
X (hemina) y factor V
(NAD)
Agar sangre para
anaerobios
Agar chocolate
Identificacin de Streptococcus
pyogenes y Streptococcus
agalactiae
Identificacin de Haemophilus
como colonias satlites en la estra
de Staphylococcus aureus.
Diferencial, hemlisis Medio enriquecido, permite el Hemolisis
crecimiento de una gran mayora de
anaerobios
Ya no es diferencial Medio rico que permite el ----crecimiento de una gran mayora de
los microorganismos, incluidos los

muy exigentes como Neisseria y

Haemophilus
Agar CLED
Medio de Kligler
(Tubo en pico de
flauta)
Cistina, lactosa, deficiente
en electrolitos. La cistina
mejora la recuperacin de las
enterobacterias. La lactosa y
el indicador (azul de
bromotimol) permiten
distinguir las bacterias
fermentadoras de lactosa de
no fermentadoras de lactosa.
La deficiencia en electrolitos
limita el movimiento de
Proteus.
Lactosa:glucosa 10:1
Rojo fenol como indicador
Tiosulfato sdico
Fe para detectar la formacin
de sulfuro
Medio rico y diferencial, Para urocultivo Fermentadoras de lactosa se ven
permite distinguir amarillas (baja el pH y vira el
fermentadoras y no indicador a amarillo). Las no
fermentadoras de lactosa fermentadoras se ven incoloras,
blancas o incluso azuladas (si suben
el pH por utilizacin de las
peptonas).
Medio rico y diferencial, Identificacin presuntiva de Pico rojo/fondo amarillo: fermentan
permite ver 4 gneros de enterobacterias glucosa y no produce sulfuro
caractersticas de las (Providencia, Shigella, Serratia,
enterobacterias: algunas especies de Citrobacter)
fermentacin de la Pico rojo/ fondo rojo y precipitado
glucosa, fermentacin de negro: fermenta glucosa y produce
la lactosa, produccin de sulfuro (Salmonella, Proteus)

sulfuro y formacin de Pico amarillo/fondo amarillo:

gases. fermenta glucosa y lactosa y no
produce sulfuro (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter). Puede haber
formacin de gases (se levanta el
agar).
Pico amarillo, fondo amarillo y
precipitado negro: fermenta glucosa
y lactosa y produce sulfuro
(Citrobater freundii).
Meller-Hinton
Peptona, almidn, pH 7,3 Transparente para Realizacin de las pruebas de Se siembra en csped,
tres
observar bien los halos sensibilidad a antibitios (Bauer- veces con un hisopo
de inhibicin, no tiene Kirby, dilucin en agar y test de
PABA (interaccin con psilon)
antibiticos), grosor 4
mm.
Extracto de carne con NaCl. -- Para microorganismos no exigentes ---Se puede suplementar con
extracto de levadura,
peptonas, glucosa, etc.
Caldo tioglicolato Caldo suplementado con Caldo ms utilizado en Favorece el crecimiento de
aerobios, -----casena, extracto de levadura microbiologa clnica. microaerfilos, y anaerobios (capa
y de carne y tiglicolato. Para Bajo potencial redox. de parafina lquida), incluso
anaerobios, aadir adems microorganismos exigentes. Bajo
hemina y vitamina K. potencial redox, favorece la
recuperacin de anaerobios.
Caldo con carne Trozos de carne como fuente Bajo potencial redox Favorece la recuperacin de
picada de protenas anaerobios, mejor cuando se aade
una capa de parafina lquida.
CALDOS
Caldo nutritivo
CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO (agentes inhibidores a baja concentracin, retrasan el
crecimiento de la microbiota contaminante y
permiten el enriquecimiento de un microorganismo que se quiere recuperar.
MEDIO

Caldo gram negativos GN

Caldo selenito F
Caldo tetrationato
Caldo peptona
complementada
Caldo tioglicolato Campy
Caldo Todd-Hewitt con
sangre y antibiticos
COMPONENTES PRINCIPALES
Agentes inhibidores a baja
concentracin: citrato y desoxicolato
(sal biliar) inhiben las gram positivas
y retrasan el crecimiento de las
coliformes
Agente inhibidor: selenito de sodio.
Inhibe los enterococos y retrasa el
crecimiento de las coniformes. Se
puede aadir cisterna que favorece el
crecimiento de Salmonella.
Inhibidores: sales biliares y
tetrationato sdico (se genera en la
reaccin de tiosulfato con yodo),
inhiben las bacterias gram positivas y
las coniformes que no tienen la
enzima tetrationato reductasa
Caldo con peptona
Caldo similar al tioglicolato
suplementado con un poco de agar
(semislido) y antibiticos
Como inhibidores lleva cido
nalidxico y gentamicina o colistina
CARACTERSTICAS USOS
Enriquecimiento de Salmonella y Shigella
en muestras de heces e hisopados rectales
Enriquecimiento de Salmonella.
Enriquecimiento de Salmonella
pH 8,4

Enriquecimiento de especies de Vibrio,

antes de subcultivar en medios ms
selectivos
Enriquecimiento de especies de
Campylobacter antes de subcultivar en
medios ms selectivos
Enriquecimiento de Streptococcus
agalactiae de muestras genitales.
MEDIOS SELECTIVOS
MEDIO
Agar de MacConkey
Agar EMB
COMPONENTES
CARACTERSTICAS
PRINCIPALES
Inhibidores: cristal
Selectivo y diferencial
violeta y sales biliares.
Lactosa como agente
diferencial. Rojo neutro
como indicador.
Inhibidores: eosina y
azul de metileno.
Lactosa como agente
diferencial.
Selectivo y diferencial
USOS
Aislamiento de
bacterias gram
negativas
(enterobacterias). El
colorante cristal
violeta inhiben las
gram positivas. Las
sales biliares inhiben
las gram positivas y
algunas gram

negativas (no las

enterobacterias).
Aislamiento de
bacterias gram
negativas
(enterobacterias). Los
colorantes inhiben las
gram positivas.
VISUALIZACIN DE LAS
COLONIAS
Las enterobacterias fermentadoras de
lactosa (E. coli, Enterobacter, Klebsiella)
se ven rosa/rojo/violeta. E. coli puede
presentar um halo rosa alrededor de ls
colonias, debido a la precipitacin de las
sales biliares a pH muy cido. Las no
fermentadoras de lactosa (Salmonella,
Shigella,Providencia, Proteus) se ven
transparentes.
Las enterobacterias fermentadoras de
lactosa (Enterobacter, Klebsiella) se ven
rosa/rojo/violeta. E. coli se ve de color
verde metlico, debido a la precipitacin
de los colorantes a pH muy cido. Las no
fermentadoras de lactosa (Salmonella,
Providencia, Shigella, Proteus) se ven
transparentes.
Agar SS Inhibidores: sales Selectivo y diferencial
biliares, citrato, y el
colorante verde
brillante: Incorpora
lactosa y tiosulfato
como agentes
diferenciales. Rojo
neutro como indicador.
Agar entrico Hektoen Inhibidores: sales Selectivo y diferencial
(HE) biliares, citrato, y los

colorantes fucsina
cida y azul de
bromotimol. Incorpora
lactosa y tiosulfato
como agentes
diferenciales. Azul de
bromotimol como
indicador.
Inhibidores: sales
biliares a alta
concentracin, citrato y
tiosulfato. Lactosa,
sacarosa y xilosa como
agentes diferenciales.
Lisina como agente
diferencial. Tiosulfato
y citrato como agentes
diferenciales.
Indicador: rojo fenol.
Agar XLD
Selectivo y Diferencial
Aislamiento selectivo
de Salmonella y
Shigella de muestras
de heces o hisopados
rectales.
Colonias de Salmonella: incoloras, no
fermentan la lactosa y con punto central
negro (producen sulfuro).
Colonias de Shigella: incoloras, sin punto
central negro.
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,
pero rosa/rojo, por la fermentacin de la
lactosa. Gram positivas no crecen.
Aislamiento selectivo Colonias de Salmonella: incoloras o
de Salmonella y

verdes, del color del medio, no fermentan

Shigella de muestras
la lactosa y con punto central negro
de heces o hisopados
(producen sulfuro).
rectales.
Colonias de Shigella: incoloras o verdes,
del color del medio, sin punto central
negro. Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas, y
amarillas, (fermentacin de la lactosa).
Gran positivos no crecen.
Aislamiento selectivo Colonias de Salmonella rosas o rojas (no
de especies de
fermentan la lactosa, pero descarboxilan la
Salmonella y Shigella. lisina, suben el pH) con punto central
negro (por produccin de sulfuro). Las
colonias de Shigella se ven transparentes
(no fermentan la lactosa) sin punto central
negro.
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,
pero amarillas, por la fermentacin de la
lactosa. Gram positivos no crecen.
Agar desoxicolato- Inhibidores:
citrato (ADC) Selectivo y Diferencial
desoxicolato y citrato.
Incorpora lactosa como
agente diferencial. Rojo
neutro como indicador.
Aislamiento selectivo
de especies de
Salmonella y Shigella.
Colonias de Salmonella y Shigella se ven
transparentes (no fermentan la lactosa).
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,

pero rosa/rojo, por la fermentacin de la

lactosa.
Agar sulfito de bismuto Inhibidor: bismuto y el Selectivo y Diferencial. Colonias con bordes claros
y punto central
colorante verde Aislamiento selectivo negro.
brillante. Sulfato Muy inestable, no se
ferroso y sulfito como de Salmonella typhi
agentes diferenciales. puede usar al cabo de una
semana tras su
preparacin.
Agar verde brillante Inhibidor: colorante Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivo Colonias de
Salmonella rosas, blancas o
verde brillante (inhibe de especies de transparentes, dependiendo de la
gram positivas). Salmonella, salvo S. fermentacin de los azcares.
Incluye lactosa y typhi y S. paratyphi.
sacarosa. Rojo fenol No se recomienda
como indicador. para Shigella
Agar chocolate con Agar sangre, con la Ya no es diferencial. Los Medio selectivo ----Isovitalex y sangre lisada (por eritrocitos lisados liberan modificado para el
vancomicina calentamiento a 80oC). la hemoglobina y otros aislamiento de
Se aade isovitalex nutrientes como factor X Neisseria y
(suplemento (hemina) y factor V Haemophilus
vitamnico, (NAD). El aadido de
aminocidos, Fe, vitaminas, aminocidos,
glucosa, etc.) y glucosa, Fe, etc. permite
vancomicina para el crecimiento de
inhibir gram positivos Neisseria y Haemophilus
Agar salino manitol Inhibidor: cloruro Aislamiento selectivo Los estafilococos coagulasa positivos
(Chapman) Selectivo y diferencial de estafilococos y (Staphylococcus aureus) fermentan el
sdico al 7,5%. Manitol micrococos manitol y dan colonias amarillas. Los
como agente estafilococos que no fermentan el manitol
diferencial, rojo fenol (p.e., S. epidermidis) dan colonias blancas
como indicador. o del color del medio.
Agar Columbia CNA Agar base Columbia No es diferencial Aislamiento de cocos ---con colistina y cido gram positivos
nalidxico
Agar selectivo para Inhibidores: cristal Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivo Permite ver
hemlisis (beta).

estreptococos violeta y antibiticos de S. pyogenes

(trimetoprim- (garganta) y S.
sulfametoxazol y agalactiae
colistina). Tambin
lleva sangre.
Agar PEA (alcohol fenil Inhibidor: alcohol Selectivo. Aislamiento selectivo Si lleva sangre se
observan reacciones
etlico) fenil-etlico (inhibe Si lleva sangre es de cocos gram hemolticas. Si no, no es diferencial.
gram negativas). diferencial positivos
Tambin se puede (estafilococos y
aadir 5% sangre de estreptococos).
oveja. Tambin para cocos
gram positivos
anaerobios si se
incuba en
anaerobiosis.
Agar sangre lacada con
kanamicina y
vancomicina (KVLB)
BHI + Antibiticos
Sangre lacada
(congeladadescongelada). Agentes
inhibidores:
antibiticos
(kanamicina, inhibe
algunos gram negativos
aerbios, y
vancomicina, que
inhibe gram positivos
em general).
dem. a BHI +
cicloheximida (inhibe
hongos saprfitos) +
cloranfenicol
(antibacteriano)
Selectivo. Aislamiento selectivo -----

No es diferencial de anaerobios,
fundamentalmente
gram negativos, de
muestras en las que
hay microbiota
aerobia y anaerobia
mezcladas.
Selectivo. No es Aislamiento selectivo ----diferencial de hongos patgenos
Agar sangre + Agar base (BHI,
antibiticos Selectivo y Diferencial
Columbia) + 5% sangre
de oveja desfibrinada +
cloranfenicol +
gentamicina
Agar glucosa de Agentes inhibidores de
Sabouraud bacterias: antibiticos
(cicloheximida y
cloranfenicol), pH
levemente cido (5,6)
inhibe algunas
bacterias
Selectivo. No es
diferencial
Aislamiento selectivo
de hongos patgenos,
incluso los ms
exigentes. Los
antibiticos inhiben
las bacterias.
Aislamiento de
hongos patgenos
dermatofitos.
-----Agar SABHI
Agar base de
Sabouraud al que se le

aade BHI, para poder

aislar hongos ms
exi