PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN & PEMERIKSAAN URINE

ATAS INDIKASI UROBILIN

JUNI 10, 2012MITSUKORAYNZZ TINGGALKAN KOMENTAR
LAPORAN PRAKTIKUM
BIOKIMIA KLINIK
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN
&
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN
DI SUSUN
OLEH :
Maulina (0801027)
Kelompok II A (Ganjil)
Tanggal praktikum: 18 April 2012
Dosen: Dra. Sylvia Hasti, M.Farm., Apt
Asisten : 1. Mela Afryyanna
2. Yelvi Rahmi
PROGRAM STUDI S1 FARMASI
SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAU
YAYASAN UNIVERSITAS RIAU
2012
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN
Tujuan :
Untuk menentukan adanya bilirubin dalam urine

Tinjauan Pustaka
Definisi Bilirubin :
Bilirubin ( sebelumnya disebut sebagai hematoidin ) adalah produk rincian kuning normal
hemekatabolisme. Heme ditemukan dalam hemoglobin, komponen utama dari sel darah
merah . Bilirubin diekskresikan dalam empedu dan urin , dan peningkatan kadar dapat
mengindikasikan penyakit tertentu.Hal ini bertanggung jawab untuk warna kuning memar ,
warna kuning air seni (melalui produk pemecahan direduksi, urobilin ), warna coklat dari
kotoran (melalui konversi kepada stercobilin ), dan perubahan warna kuning pada penyakit
kuning .
Bilirubin Secara Kimia :
Bilirubin terdiri dari sebuah rantai terbuka dari empat pirol -seperti cincin ( tetrapyrrole ).
Dalam heme , sebaliknya, keempat cincin yang terhubung ke sebuah cincin yang lebih
besar, yang disebut porfirincincin.
Bilirubin adalah sangat mirip dengan pigmen phycobilin digunakan oleh ganggang tertentu
untuk menangkap energi cahaya, dan untuk pigmen fitokrom digunakan oleh tanaman
untuk merasakan cahaya.Semua ini mengandung rantai terbuka empat cincin pyrrolic.
Seperti ini pigmen lainnya, beberapa ganda obligasi di bilirubin isomerize ketika terkena
cahaya. Ini digunakan dalam fototerapi dari bayi kuning:. E, Z-isomer bilirubin yang
terbentuk setelah terpapar cahaya lebih larut daripada, Z unilluminated Z-isomer, sebagai
kemungkinan ikatan hidrogen intramolekul akan dihapus Hal ini memungkinkan ekskresi
bilirubin tak terkonjugasi dalam empedu.
Beberapa buku teks dan artikel penelitian menunjukkan isomer geometris salah bilirubin.
Para isomer alami adalah Z, Z-isomer.
Fungsi bilirubin :
Bilirubin dibuat oleh aktivitas reduktase biliverdin pada biliverdin , pigmen empedu hijau
tetrapyrrolic yang juga merupakan produk katabolisme heme.Bilirubin, ketika teroksidasi,
beralih menjadi biliverdin sekali lagi. Siklus ini, selain demonstrasi aktivitas antioksidan

ampuh bilirubin, telah menyebabkan hipotesis bahwa peran utama fisiologis bilirubin
adalah sebagai antioksidan seluler
Pemeriksaan bilirubin :
Pemeriksaan bilirubin dalam urin berdasarkan reaksi antara garam diazonium dengan
bilirubin dalam suasana asam, yang menimbulkan warna biru atau ungu tua. Garam
diazonium terdiri dari p-nitrobenzene diazonium dan p-toluene sulfonate, sedangkan asam
yang dipakai adalah asam sulfo salisilat.
Adanya bilirubin 0,05-1 mg/dl urin akan memberikan basil positif dan keadaan ini
menunjukkan kelainan hati atau saluran empedu. Hasil positif palsu dapat terjadi bila dalam
urin terdapat mefenamic acid, chlorpromazine dengan kadar yang tinggi sedangkan negatif
palsu dapat terjadi bila urin mengandung metabolit pyridium atau serenium.
Metabolisme bilirubin
Eritrosit secara fisiologis dapat bertahan/ berumur sekitar 120 hari, eritrosit mengalami lisis
1-2108 setiap jamnya pada seorang dewasa dengan berat badan 70 kg, dimana
diperhitungkan hemoglobin yang turut lisis sekitar 6 gr per hari. Sel-sel eritrosit tua
dikeluarkan dari sirkulasi dan dihancurkan oleh limpa. Apoprotein dari hemoglobin
dihidrolisis menjadi komponen asam-asam aminonya.
Katabolisme heme dari semua hemeprotein terjadi dalam fraksi mikrosom sel
retikuloendotel oleh sistem enzym yang kompleks yaitu heme oksigenase yang merupakan
enzym dari keluarga besar sitokrom P450. Langkah awal pemecahan gugus heme ialah
pemutusan jembatan metena membentuk biliverdin, suatu tetrapirol linier.
Besi mengalami beberapa kali reaksi reduksi dan oksidasi, reaksi-reaksi ini memerlukan
oksigen dan NADPH. Pada akhir reaksi dibebaskan Fe3+ yang dapat digunakan kembali,
karbon monoksida yang berasal dari atom karbon jembatan metena dan biliverdin.
Biliverdin, suatu pigmen berwarna hijau akan direduksi oleh biliverdin reduktase yang
menggunakan NADPH sehingga rantai metenil menjadi rantai metilen antara cincin pirol
III IV dan membentuk pigmen berwarna kuning yaitu bilirubin. Perubahan warna pada
memar merupakan petunjuk reaksi degradasi ini.

Dalam setiap 1 gr hemoglobin yang lisis akan membentuk 35 mg bilirubin. Pada orang
dewasa dibentuk sekitar 250350 mg bilirubin per hari, yang dapat berasal dari pemecahan
hemoglobin, proses erytropoetik yang tidak efekif dan pemecahan hemprotein lainnya.
Bilirubin dari jaringan retikuloendotel adalah bentuk yang sedikit larut dalam plasma dan
air. Bilirubin ini akan diikat nonkovalen dan diangkut oleh albumin ke hepar. Dalam 100
ml plasma hanya lebih kurang 25 mg bilirubin yang dapat diikat kuat pada albumin.
Bilirubin yang melebihi jumlah ini hanya terikat longgar hingga mudah lepas dan berdiffusi
ke jaringan.
Bilirubin I (indirek) bersifat lebih sukar larut dalam air dibandingkan dengan biliverdin.
Pada reptil, amfibi dan unggas hasil akhir metabolisme heme ialah biliverdin dan bukan
bilirubin seperti pada mamalia. Keuntungannya adalah ternyata bilirubin merupakan suatu
anti oksidan yang sangat efektif, sedangkan biliverdin tidak. Efektivitas bilirubin yang
terikat pada albumin kira-kira 1/10 kali dibandingkan asam askorbat dalam perlindungan
terhadap peroksida yang larut dalam air. Lebih bermakna lagi, bilirubin merupakan anti
oksidan yang kuat dalam membran, bersaing dengan vitamin E.
Di hati, bilirubin I (indirek) yang terikat pada albumin diambil pada permukaan sinusoid
hepatosit oleh suatu protein pembawa yaitu ligandin. Sistem transport difasilitasi ini
mempunyai kapasitas yang sangat besar tetapi penggambilan bilirubin akan tergantung
pada kelancaran proses yang akan dilewati bilirubin berikutnya. Bilirubin nonpolar (I /
indirek) akan menetap dalam sel jika tidak diubah menjadi bentuk larut (II / direk).
Hepatosit akan mengubah bilirubin menjadi bentuk larut (II / direk) yang dapat
diekskresikan dengan mudah ke dalam kandung empedu. Proses perubahan tersebut
melibatkan asam glukoronat yang dikonjugasikan dengan bilirubin, dikatalisis oleh enzym
bilirubin glukoronosiltransferase. Hati mengandung sedikitnya dua isoform enzym
glukoronosiltransferase yang terdapat terutama pada retikulum endoplasma. Reaksi
konjugasi ini berlangsung dua tahap, memerlukan UDP asam glukoronat sebagai donor
glukoronat. Tahap pertama akan membentuk bilirubin monoglukoronida sebagai senyawa
antara yang kemudian dikonversi menjadi bilirubin diglukoronida yang larut pada tahap
kedua.

Eksresi bilirubin larut ke dalam saluran dan kandung empedu berlangsung dengan
mekanisme transport aktif yang melawan gradien konsentrasi. Dalam keadaan fisiologis,
seluruh bilirubin yang diekskresikan ke kandung empedu berada dalam bentuk terkonjugasi
(bilirubin II).

Masalah Klinis :
Bilirubin Total, Direk
Peningkatan Kadar : ikterik obstruktif karena batu atau neoplasma,hepatitis , sirosis hati,
mononucleosis infeksiosa, metastasis (kanker) hati, penyakit Wilson. Pengaruh obat :
antibiotic (amfoterisin B, klindamisin, eritromisin, gentamisin, linkomisin, oksasilin,
tetrasiklin), sulfonamide, obat antituberkulosis ( asam para-aminosalisilat, isoniazid),
alopurinol, diuretic (asetazolamid, asam etakrinat), mitramisin, dekstran, diazepam
(valium), barbiturate, narkotik (kodein, morfin, meperidin), flurazepam, indometasin,
metotreksat, metildopa, papaverin, prokainamid, steroid, kontrasepsi oral, tolbutamid,
vitamin A, C, K.
Penurunan Kadar : anemia defisiensi besi. Pengaruh obat : barbiturate, salisilat (aspirin),
penisilin, kafein dalam dosis tinggi.
Bilirubin indirek
Peningkatan Kadar : eritroblastosis fetalis, anemia sel sabit, reaksi transfuse, malaria,
anemia pernisiosa, septicemia, anemia hemolitik, talasemia, CHF, sirosis terdekompensasi,
hepatitis. Pengaruh obat : aspirin, rifampin, fenotiazin (lihat biliribin total, direk)
Penurunan Kadar : pengaruh obat (lihat bilirubin total, direk)
Alat dan Bahan
Alat :
Tabung
Corong
Kertas saring

 Pinset
Pipet tetes
Pipet takar
Bahan :
FeCl3
Trikhloracetat
BaCl2
Urine segar (urine sewaktu)

Metoda :
I. Percobaan Hariison
1. Prinsip :
BaCl2 bereaksi dengan sulfat dalam urine membentuk endapan BaSO4 dan bilirubin
menempel pada molekul ini. FeCl3 mengoksidasi bilirubin menjadi :
Bilivardin warna hijau
Bilicyanin warna biru
Cholatelen warna kuning
2. Pembuatan reagen
Reagen fauchet
0.9 g FeCl3 di larutkan dalam trikhloracetat 25% sampai 100 ml.
Larutan BaCl2 10%
3. Cara pemeriksaan
5 ml urine di masukkan dalam tabung reaksi
Tambahkan 5 ml BaCl2 10%, campur, kemudian saring dengan kertas saring.
Presipitat pada kertas saring di biarkan sampai kering.
Tambahkan 1 tetes reagen fouchet pada presipitat
4. Pengamatan hasil

Positif bila timbul warna hijau atau biru kehijauan

5. Sensitifitas
0.05 0.1 mg billirubin dalam urine.
II. Percobaan Hawkinson
Cara ini menggunakan kertas saring yang tebal (shlesinger atau schull nomor 470) yang
direndam dalam BaCl2 jenuh, kemudian kertas saring di keringkan. Potong kertas saring
berukuran 4 x inci
1. Cara periksaan
a. Pada potongan kertas saring yang mengandung BaCl2 di teteskan urine beberapa tetes.
b. Biarkan selama 3 detik sampai 2 menit.
c. Teteskan 2-3 tetes reagen fouchet.
2. Pengamatan hasil
Positif bila terbentuk warna hijau
3. Keterangan
Pemeriksaan billirubinuria harus menggunakan urine segar, <4 jam, karena billirubin akan
teroksidasi, sehingga menghasilkan falsa negatif, terutama bila terkena cahaya.
Percobaan howkinson lebih cepat dan sederhana dibandingkan percobaan harrison.

Hasil
Pada percobaan harrison dan hawkinson tidak ditemukan adanya bilirubin karena hasil
yang didapat tidak menunjukkan warna kehijauan
Pembahasan
Pada praktikum pemeriksaan urine atas indikasi bilirubin ini harus menggunakan urine
sampel segar yang kurang dari 4 jam, hal ini dikarenakan bilirubin akan teroksidasi jika
terlalu lama dan apalagi terpapar oleh cahaya. Sehingga akan menghasilkan nilai yang falsa
negatif.

Pada percobaan Harrison ini mula-mula sampel urine coba (yang mengandung sulfat
didalamnya) diberikan dahulu BaCl2, hingga BaCl2 bereaksi dengan sulfat dalam urine
hingga membentuk endapan BaSO4. Kemudian disaring dengan kertas saring untuk
memperoleh presipitat. Setelah itu presipitat di atas kertas saring dibiarkan mengering dan
bilirubin menempel pada molekul ini. Baru diberikan reagen fauchet yang terkandung
FeCl3 didalam larutannya. Hingga FeCl3 mengoksidasi bilirubin menjadi :
Bilivardin warna hijau
Bilicyanin warna biru
Cholatelen warna kuning
Pada pemeriksaan bilirubin dengan menggunakan metode Hawkinson ini kita
menggunakan kertas saring yang tebal yaitu kertas saring shlesinger atau schull nomor 470
yang telah direndam dalam BaCl2 jenuh, kemudian kertas saring di keringkan. Potong
kertas saring berukuran 4 x inci. Lalu pada potongan kertas saring yang mengandung
BaCl2 ini di teteskan urine beberapa tetes. Biarkan selama 3 detik sampai 2 menit. Baru
diteteskan 2-3 tetes reagen fouchet. Dan didapati hasil berupa warna kuning. Hal ini
menandakan negatif bilirubin karena tidak terbentuk hasil berwarna hijau.
Untuk mengamati warna positif bilirubin kita dapat membandingkan dengan hasil punya
teman yang positif. Hal ini akan mendapatkan perbedaan warna yang signifikan.
Pemeriksaan Harrison sangatlah lama dikarenakan menunggu presipitat nya mengering
barulah ditetesi oleh reagen fauchet. Tapi tidak pada Hawkinson karena kertas saring ini
sudah didapat kertas saring yang jenuh dengan BaCl2.
Kenaikan ringan pada bilirubin dapat disebabkan oleh:
Hemolisis atau pemecahan peningkatan sel darah merah
Sindrom Gilbert kelainan genetik metabolisme bilirubin yang dapat mengakibatkan
penyakit kuning yang ringan, ditemukan pada sekitar 5% dari populasi
Rotor sindrom : non-gatal sakit kuning, dengan kenaikan bilirubin dalam serum pasien,
terutama dari jenis yang terkonjugasi.
Kenaikan bilirubin sedang dapat disebabkan oleh:
Farmasi obat (terutama antipsikotik , beberapa hormon seks , dan berbagai obat lain)

 Sulfonamid adalah kontraindikasi pada bayi kurang dari 2 bulan (kecuali bila digunakan
dengan pirimetamin dalam mengobati toksoplasmosis ) karena mereka meningkatkan
bilirubin tak terkonjugasi menyebabkan kernikterus .
Hepatitis (tingkat mungkin sedang atau tinggi)
Kemoterapi
Bilier striktur (jinak atau ganas)

Sangat tinggi kadar bilirubin dapat disebabkan oleh:

Neonatal hiperbilirubinemia , dimana hati bayi baru lahir tidak mampu untuk memproses
bilirubin menyebabkan penyakit kuning
Obstruksi saluran empedu yang luar biasa besar, batu misalnya di saluran empedu, tumor
menghalangi saluran empedu dll
Hati yang berat kegagalan dengan sirosis (misalnya sirosis bilier primer )
Crigler-Najjar sindrom
Dubin-Johnson syndrome
Choledocholithiasis (kronis atau akut).

Kesimpulan
Pada percobaan harrison dan hawkinson tidak ditemukan adanya bilirubin karena hasil
yang didapat tidak menunjukkan warna kehijauan. Negatif bilirubin
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN
(PERCOBAAN SCHLESINGER)
Tujuan
Untuk menentukan adanya urobilin dalam urine
Prinsip
Urobilin dengan reagen schlesinger membentuk suatu kompleks dengan memberikan
flouresensi hijau.
Tinjauan Pustaka

Definisi urobilin :
Urobilin adalah pigmen alami dalam urin yang menghasilkan warna kuning. Ketika urin
kental, urobilin dapat membuat tampilan warna oranye-kemerahan yang intensitasnya
bervariasi dengan derajat oksidasi, dan kadang-kadang menyebabkan kencing terlihat
merah atau berdarah.
Banyak tes urin (urinalisis) yang memantau jumlah urobilin dalam urin karena merupakan
zat penting dalam metabolisme/ produksi urin. Tingkat urobilin dapat memberikan
wawasan tentang efektivitas fungsi saluran kemih.
Urobilinogen adalah larut dalam air dan transparan produk yang merupakan produk dengan
pengurangan bilirubin dilakukan oleh interstinal bakteri . Hal ini dibentuk oleh pemecahan
hemoglobin. Sementara setengah dari Urobilinogen beredar kembali ke hati, setengah
lainnya diekskresikan melalui feses sebagai urobilin. Ketika pernah ada kerusakan hati,
kelebihan itu akan dibuang keluar melalui ginjal. Ini siklus ini dikenal sebagai
Urobilinogen enterohepatik siklus . Ada dapat berbagai faktor yang dapat menghambat ini
siklus . Salah satu alasan menjadi gangguan lebih dari hemoglobin (hemolisis) karena
malfungsi hati berbagai seperti hepatitis, sirosis. Ketika ini terjadi, Urobilinogen lebih
diproduksi dan diekskresikan dalam urin. Pada saat seseorang menderita penyakit kuning,
itu didiagnosa oleh warna kulit yang sedikit kuning dan warna kuning dari urin.Namun bila
ada obstruksi pada saluran empedu, hal itu akan menyebabkan penurunan jumlah
Urobilinogen dan ada lebih sedikit urobilin dalam urin. Lebih rendah jumlah urobilin Sof
dapat disebabkan oleh hilangnya flora bakteri usus yang berperan dalam sintesa produk
HTI.
Untuk mendeteksi jenis kerusakan di hati, tes Urobilinogen dilakukan dengan mengukur
kadar uribilinogendalam urin. Reaksi Aldehid Ehrlich adalah tes umum yang digunakan
untuk menguji tingkat Urobilinogen.Sebuah benzaldehida dengan keberadaan asam
berubah warna jika Urobilinogen hadir untuk warna merah merah muda. Diubah atau tidak
adanya lengkap tingkat Urobilinogen biasanya menunjukkan disfungsi hati. Dan
peningkatan tingkat petunjuk Urobilinogen urin ke warna merah darah Hemolisis sel.
Tujuan utama dari tes ini adalah untuk membantu mengetahui penghalang hati tambahan

seperti penyumbatan saluran empedu umum dan juga untuk memungkinkan hati serta
gangguan hematologi.
Tingkat Urobilinogen dalam urin
Dalam urin: kisaran Urobilinogen normal adalah kurang dari 17 umol / L (<1mg/dl).
Kisaran Urobilinogenukur adalah 0 8 mg / dl. Nilai Urobilinogen abnormal dapat
menampilkan meningkat serta nilai-nilai rendah.
Peningkatan nilai adalah indikasi dari kerusakan RBC secara berlebihan, membebani hati,
produksi Urobilinogen berlebih, hati yang berfungsi dalam batasan, hematoma, keracunan,
sirosis hati, fungsi hati.
Nilai-nilai rendah adalah indikasi penyumbatan di bileducts dan kegagalan empedu
produksi.
Pembentukan urobilin :
Bilirubin terkonjugasi yang mencapai ileum terminal dan kolon dihidrolisa oleh enzym
bakteri glukoronidase dan pigmen yang bebas dari glukoronida direduksi oleh bakteri
usus menjadi urobilinogen, suatu senyawa tetrapirol tak berwarna.
Sejumlah urobilinogen diabsorbsi kembali dari usus ke perdarahan portal dan dibawa ke
ginjal kemudian dioksidasi menjadi urobilin yang memberi warna kuning pada urine.
Sebagian besar urobilinogen berada pada feces akan dioksidasi oleh bakteri usus
membentuk sterkobilin yang berwarna kuning kecoklatan.
Pemeriksaan Urobilinogen :
Pemeriksaan urobilinogen dengan reagens pita perlu urin segar. Dalam keadaan normal
kadar urobilinogen berkisar antara 0,1 1,0 Ehrlich unit per dl urin.
Peningkatan ekskresi urobilinogen urin mungkin disebabkan oleh kelainan hati, saluran
empedu atau proses hemolisa yang berlebihan di dalam tubuh. Dalam keadaan normal tidak
terdapat darah dalam urin, adanya darah dalam urin mungkin disebabkan oleh perdarahan
saluran kemih atau pada wanita yang sedang haid. Dengan pemeriksaan ini dapat dideteksi
adanya 150-450 ug hemoglobin per liter urin. Tes ini lebih peka terhadap hemoglobin

daripada eritrosit yang utuh sehingga perlu dilakukan pula pemeriksaan mikroskopik urin.
Hasil negatif palsu bila urin mengandung vitamin C lebih dari 10 mg/dl. Hasil positif palsu
didapatkan bila urin mengandung oksidator seperti hipochlorid atau peroksidase dari
bakteri yang berasal dari infeksi saluran kemih atau akibat pertumbuhan kuman yang
terkontaminasi.
Dalam keadaan normal urin bersifat steril. Adanya bakteriura dapat ditentukan dengan tes
nitrit. Dalam keadaan normal tidak terdapat nitrit dalam urin. Tes akan berhasil positif bila
terdapat lebih dari 105 mikroorganisme per ml urin. Perlu diperhatikan bahwa urin yang
diperiksa hendaklah urin yang telah berada dalam buli-buli minimal 4 jam, sehingga telah
terjadi perubahan nitrat menjadi nitrit oleh bakteri. Urin yang terkumpul dalam buli-buli
kurang dari 4 jam akan memberikan basil positif pada 40% kasus.
Hasil positif akan mencapai 80% kasus bila urin terkumpul dalam buli-buli lebih dari 4
jam. Hasil yang negatif belum dapat menyingkirkan adanya bakteriurea, karena basil
negatif mungkin disebabkan infeksi saluran kemih oleh kuman yang tidak mengandung
reduktase, sehingga kuman tidak dapat merubah nitrat menjadi nitrit. Bila urin yang akan
diperiksa berada dalam buli-buli kurang dari 4 jam atau tidak terdapat nitrat dalam urin,
basil tes akan negatif.
Kepekaan tes ini berkurang dengan peningkatan berat jenis urin. Hasil negatif palsu terjadi
bila urin mengandung vitamin C melebihi 25 mg/dl dan konsentrasi ion nitrat dalam urin
kurang dari 0,03 mg/dl.
Alat dan Bahan
Alat-alat :
Pipet takar 5 ml/gelas ukur 10 ml.
Pipet tetes
Kertas saring
Corong
Tabung reaksi

 Rak tabung
Bahan:
Zn (CH3COO)2
Alkohol 96%
I2
KI
Aquades
Urine segar (urine sewaktu)

Metoda
I. Pembuatan reagen
a. Reagen schlesinger
10 g Zn (CH3COO)2 disespensikan dalam 100 ml alkohol 96%
b. Larutan lugol
0.5 g I2 dan 1 g KI dilarutkan dalam air, setelah larut ditambahkan air sampai 150 ml.
II. Cara pemeriksaan
a. 5 ml urine ditambah 2 tetes larutan lugol
b. Tambahkan 7.5 ml reagen schlesinger, kemudian di kocok.
c. Saring sampai didapat filtrat yang jernih
d. Filtrat diperiksa/dilihat dengan latar belakang hitam
III. Pengamatan hasil
Positif bila didapat flourescensi hijau pada filtrat
Hasil

bening kuning ( negatif urobilin ).Hasil filtrat urine + lugol + schlesinger

Perbandingan filtrat negatif dengan filtrat positif.

Pembahasan
Pada percobaan pemeriksaan urine atas indikasi urobilin ini, dimana sampel urine segar
dimasukkan didalam tabung reaksi kemudian ditambahkan larutan lugol baru ditambah
reagen schlesinger kemudian diaduk / dikocok homogen. Lalu disaring dengan kertas
saring, jika hasil saringan keruh maka disaring kembali hingga didapatkan filtrat yang
jernih.
Kemudian setelah didapat filtrat yang jernih, lihatlah flouresensi filtrat dengan background
yang gelap ( hitam ). Hasil positif jika terdapat flouresensi yang kehijauan, dan negatif jika
tidak ada flouresensi hijau ( hasil praktikum negatif ). Dalam keadaan normal, selalu
terdapat flourescensi hijau yang amat ringan. Bila hasil ragu-ragu harus dibandingkan
dengan percobaan schlesinger pada urine normal.
Daalam praktikum ini jika sampel urine yang akan diuji urobilinnya ini memiliki bilirubin
dalam urine akan mengganggu pemeriksaan karena menyebabkan flourescensi merah
muda. Oleh karena itu bila ada bilirubin maka harus dikeluarkan dengan CaCl2 dan
Na2CO3.
Filtrat yang diperoleh dan percobaan untuk billirubin menurut harrison tidak dapat dipakai
untuk pemeriksaan urobilin. Menurut schlesinger karena urobilin akan diabsorbsi oleh
endapan yang terjadi karena BaCl2 (dari reagen faucehet) oleh karena itu dalam reagen
faucehet BaCL2 diganti dengan CaCl2 sehingga pemeriksaan billirubin menurut harrison
dan pemeriksaan urobillin menurut schlesinger dapat dirangkap: filtrat untuk pemeriksaan
schlesinger dan endapan untuk pemeriksaan bilirubin.
Riboflavin (vitamin B2) yang terdapat dalam tablet atau injeksi B kompleks akan
mempengaruhi fluoresensi hijau, tetapi fluoresensi telah tampak pada urine sebelum diberi
reagen schlesinger.
Faktor yang Dapat Mempengaruhi Temuan Laboratorium
1. Reaksi positif palsu

 Pengaruh obat : fenazopiridin (Pyridium), sulfonamide, fenotiazin, asetazolamid

(Diamox), kaskara, metenamin mandelat (Mandelamine), prokain, natrium bikarbonat,
pemakaian pengawet formaldehid.
Makanan kaya karbohidrat dapat meninggikan kadar urobilinogen, oleh karena itu
pemeriksaan urobilinogen dianjurkan dilakukan 4 jam setelah makan.
Urine yang bersifat basa kuat dapat meningkatkan kadar urobilinogen; urine yang
dibiarkan setengah jam atau lebih lama akan menjadi basa.
2. Reaksi negatif palsu
Pemberian antibiotika oral atau obat lain (ammonium klorida, vitamin C) yang
mempengaruhi flora usus yang menyebabkan urobilinogen tidak atau kurang terbentuk
dalam usus, sehingga ekskresi dalam urine juga berkurang.
Paparan sinar matahari langsung dapat mengoksidasi urobilinogen menjadi urobilin.
Urine yang bersifat asam kuat.
Kesimpulan
Tidak ditemukannya urobilin dalam sampel urine, hal ini ditunjukkan dengan hasil
berwarna kuning bening. Dan dibandingkan dengan kelompok sebelah yang memberikan
flouresensi hijau
DAFTAR PUSTAKA
Baron, D.N, 1990, Patologi Klinik, Ed IV, Terj. Andrianto P dan Gunakan J, Penerbit EGC,
Jakarta.
Depkes, 1991, Petunjuk Pemeriksaan Laboratorium Puskesmas,Jakarta,Depkes
Guyton, A.C, 1983, Buku Teks Fisiologi Kedokteran, edisi V, bagian 2, terjemahan Adji
Dharma et al.,E.G.C., Jakarta.