Anda di halaman 1dari 5

Efeito de Aditivos na Desacetilao de Quitina

C
Srgio P. Campana F, Roberta Signini
Instituto de Qumica de So Carlos, USP
Resumo: Reaes de desacetilao de quitina comercial em suspenso aquosa de hidrxido de sdio foram
realizadas em etapa nica de 6 horas a 115C. Os efeitos de aditivos (boro hidreto de sdio ou antraquinona)
e de borbulhamento de gases inertes (nitrognio ou argnio) sobre as caractersticas das amostras desacetiladas
foram avaliados. A espectroscopia de ressonncia magntica nuclear de hidrognio e viscosimetria capilar
foram empregadas para determinaes de graus mdios de acetilao e de viscosidades intrnsecas de
quitosanas, respectivamente. A difrao de raiosX foi empregada para comparar as amostras quanto
cristalinidade e os espectros no infravermelho foram comparados para avaliar modificaes estruturais decorrentes da reao de desacetilao. As quitosanas mais cristalinas foram obtidas quando um dos gases
inertes foi borbulhado no meio durante a reao de desacetilao. Amostras ligeiramente mais desacetiladas
foram obtidas na ausncia de qualquer aditivo, mas severa despolimerizao ocorreu nesses casos. A adio
de boro hidreto de sdio ao meio reacional reduziu significativamente a despolimerizao, mas a presena de
antraquinona e o borbulhamento de nitrognio, ou de argnio, no surtiu qualquer efeito, sugerindo que a
presena de oxignio no um pr-requisito para a ocorrncia de despolimerizao.

O
M
U
N

Palavras-chave: Quitina, desacetilao, quitosana, boro hidreto de sdio, antraquinona.


Effects from Additives on Deacetylation of Chitin
Abstract: Deacetylation reactions of commercial chitin were carried out in aqueous sodium hydroxide solution
at 115C for 6 hours. The effect from additives (sodium borohydride or anthraquinone) and of bubbling inert
gas (nitrogen or argon) on the characteristics of deacetylated samples were evaluated. Average degrees of
acetylation and intrinsic viscosity were determined by 1H NMR spectroscopy and capillary viscometry,
respectively. X-ray diffraction was employed to evaluate changes in crystallinity and infrared spectroscopy
was used to monitor structural changes due to deacetylation. The bubbling of inert gas during the deacetylation
reaction resulted in more crystalline samples of chitosan. Deacetylations carried out without any additive
produced slightly more deacetylated chitosans but they were severely depolymerized. The depolymerization
process was much less important when sodium borohydride was added to the reaction medium but the addition
of anthraquinone and the bubbling of nitrogen, or argon, did not have any effect, this suggests that oxygen is
not required for depolymerization.

I
C
A

Keywords: Chitin, deacetylation, chitosan, sodium borohydride, anthraquinone.

Introduo
Quitina e quitosana so polmeros atxicos,
biodegradveis, biocompatveis e produzidos por fontes naturais renovveis, cujas propriedades vm sendo exploradas em aplicaes industriais e tecnolgicas
h quase setenta anos[1,2]. Ambas estruturas so cons-

titudas por unidades de 2-acetamido-2-deoxi-Dglicopiranose e 2-amino-2-deoxi-D-glicopiranose


unidas por ligaes glicosdicas (14), entretanto
os polmeros diferem quanto proporo relativa
dessas unidades e quanto solubilidade. Na estrutura da quitina, que insolvel na maioria dos solventes
testados, predominam unidades de 2-acetamido-2-

Autor para correspondncia: Srgio P. Campana Filho, Instituto de Qumica de So Carlos, USP, Av. Trabalhador Sancarlense 400, CEP: 13560-970, So
Carlos, SP. E-mail: scampana@iqsc.sc.usp.br

Polmeros: Cincia e Tecnologia, vol. 11, n 4, p. 169-173, 2001

169

Campana F, S. P.; Signini, R. - Desacetilao de quitina

deoxi-D-glicopiranose enquanto que quitosana, que


predominantemente formada por unidades de
2-amino-2-deoxi-D-glicopiranose, solvel em solues aquosas diludas de cidos orgnicos e
inorgnicos[1-3].
A quitosana, que ocorre naturalmente em alguns
fungos, geralmente obtida pela desacetilao da
quitina, polissacardeo encontrado abundantemente
na natureza e que constitui os exoesqueletos de insetos e crustceos[1,3]. A princpio, a hidrlise dos grupos acetamida da quitina pode ser alcanada em meio
cido ou alcalino, mas a primeira condio no empregada devido susceptibilidade das ligaes
glicosdicas hidrlise cida[4] . De fato, mesmo quando realizada em meio alcalino, a desacetilao da
quitina raramente completa, pois quitosanas so
obtidas quando a extenso da reao atinge cerca de
60% (ou mais) e o prolongamento da reao, que gera
produtos mais completamente desacetilados, tambm
provoca severa degradao das cadeias polimricas.
Assim, condies muito severas de reao, tais como
as empregadas na desacetilao da quitina por fuso
alcalina, e o emprego de solues alcalinas concentradas, por tempos prolongados e a temperaturas elevadas, so evitadas quando o objetivo a obteno
de quitosana de massa molar elevada[1]. A prtica industrial mais comum, e que tambm bastante empregada em laboratrios de pesquisa, aquela na qual
a desacetilao da quitina realizada em suspenso
de soluo aquosa de hidrxido de sdio, sendo que
a concentrao dessa soluo, o excesso de lcali, o
tempo e a temperatura da reao so variveis, conforme o procedimento adotado. Assim, no se pode
definir uma condio padronizada para a realizao
dessa reao. Entretanto, reconhecido que os principais fatores que afetam a eficincia da desacetilao
e as caractersticas das quitosanas obtidas so[1,5]:
a) temperatura e tempo de reao; b) concentrao
da soluo de lcali e adio de diluente (lcoois de
cadeia curta e cetonas so empregados); c) razo
quitina/lcali; d) tamanho das partculas de quitina;
e) atmosfera da reao e presena de agentes que evitem a despolimerizao.
Os efeitos devidos presena de aditivos (boro
hidreto de sdio e antraquinona) e ao borbulhamento
de gases inertes (nitrognio e argnio) sobre a
desacetilao de quitina comercial e sobre as caractersticas das quitosanas obtidas so investigados neste
trabalho.
170

Experimental
Desacetilao de quitina e caracterizao das
quitosanas obtidas
Quitina comercial (Fluka/BioChemika), identificada como amostra F, foi submetida reao de
desacetilao, conforme o procedimento descrito a
seguir: cerca de 4,6 g da amostra F, previamente triturada em liquidificador domstico por 2 minutos,
foram suspensos em 220 mL de soluo aquosa de
hidrxido de sdio (40%) a 115 2C e a suspenso
foi mantida sob agitao mecnica constante (350
rpm) durante 6 horas em reator de vidro encamisado
e conectado com banho termosttico de circulao.
Aps este perodo a suspenso foi filtrada e o slido
lavado com gua at a neutralidade das guas de lavagem; em seguida foi lavado com metanol e ento
seco temperatura ambiente. Todas as reaes de
desacetilao foram realizadas com o mesmo material, que constitudo por partculas de quitina com
granulometria conhecida[6], de maneira a excluir os
efeitos devidos variao desse fator. Da mesma
maneira, outros fatores e condies que afetam a reao e as caractersticas das quitosanas obtidas foram
mantidos invariveis em todos os experimentos. Entretanto, as condies empregadas nas reaes de
desacetilao foram variadas com relao presena
de aditivos (0,1 g de NaBH4/1 g de quitina ou 0,003 g
de antraquinona/1 g de quitina) e quanto ao emprego
de fluxo de gs inerte (nitrognio ou argnio), visando minimizar a ocorrncia simultnea de despolimerizao.
As quitosanas obtidas foram purificadas na forma neutra aps dissoluo em cido actico diludo,
filtrao e precipitao por adio de hidrxido de
amnio[6]. Seus graus mdios de acetilao (GA) e
viscosidades intrnsecas ([]) foram determinados por
espectroscopia de ressonncia magntica nuclear de
prton (1H RMN) e viscosimetria capilar, respectivamente, conforme procedimentos descritos anteriormente[7,8].
Medidas de difrao de raios-X foram realizadas
empregando difratmetro de raios-X RIGAKU (USPIFSC) com tubo de cobre ( = 1,54 ); a voltagem e
a corrente utilizadas foram de 40kV e 40mA,
respectivamente. Essas medidas foram realizadas no
intervalo de 3-50 com velocidade de varredura de
1/minuto em etapas de 0,02.
Polmeros: Cincia e Tecnologia, vol. 11, n 4, p. 169-173, 2001

Campana F, S. P.; Signini, R. - Desacetilao de quitina

Espectros de infravermelho foram obtidos a partir de pastilhas amostra/KBr (1:100 m/m), empregando espectrmetro BOMEM modelo MB-102 com
transformada de Fourier.
Resultados e Discusso
Independentemente da presena de aditivos e do
emprego de fluxo de gs inerte, as reaes de
desacetilao de quitina foram experimentos
reprodutveis que propiciaram, em todos os casos, a
recuperao de 50-60% da massa do material inicial
na forma de quitina desacetilada ( GA <12%). Aps a
purificao, as quitosanas foram caracterizadas atravs de determinaes de graus mdios de acetilao
e de viscosidades intrnsecas (Tabela 1), por
espectroscopia no infravermelho (Figura 1) e difrao
de raios-X (Figura 2).
Embora os espectros no infravermelho de quitina
e de quitosana apresentem semelhanas (Figura 1),
podem ser observadas diferenas, que so atribudas
a diferentes contedos de grupos acetamida, principalmente nas regies correspondentes aos seguintes
intervalos de nmero de onda: 3700 cm-1 3000 cm-1,
3000 cm-1 2800 cm-1 e 1800 cm-1 - 1500 cm-1. De
fato, embora ocorra uma banda muito larga e intensa
na regio definida pelo primeiro intervalo citado acima, atribuda deformao axial de grupos O H e
N H, podem ser observados mais detalhes no espectro de quitina do que naqueles de quitosanas.
Entretanto, essas diferenas no devem ser atribudas somente s diferentes estruturas primrias de
quitina e quitosanas com respeito ao teor de grupos
acetamida, mas tambm ocorrncia de um
empacotamento mais ordenado em quitina. Assim, o
pequeno ombro em torno de 3480 cm-1 no espectro

Figura 1. Espectros no infravermelho das amostras de quitina e de


quitosanas obtidas por desacetilaes realizadas em diferentes condies.

de quitina, e que no observado nos espectros de


quitosanas, pode ser atribudo s ligaes hidrognio
intramoleculares envolvendo o grupo OH ligado ao
carbono da posio 6 do anel de glicopiranose e o
grupo C=O das acetamidas[10].
Tambm, as bandas em torno de 3260 cm-1 e 3100
cm-1 no espectro de quitina, e que no so observadas
nos espectros de quitosanas, podem ser atribudas aos
grupos NH da acetamida em ligaes intermoleculares
de hidrognio. Na regio de deformao axial de CH,
correspondente ao intervalo 3000 cm-1 - 2800 cm-1, o
espectro de quitina apresenta bandas mais intensas, e
em maior nmero do que observado nos espectros de
quitosanas, devido ao elevado teor de acetamidas do
primeiro polmero. No intervalo 1800 cm-1 - 1500 cm-1,
no qual so observadas as bandas denominadas de amida
I e de amida II, os espectros de quitina e de quitosanas
so muito diferentes. No espectro de quitina, podem ser
observados dois sinais de intensidades semelhantes, prximos de 1660 cm-1 e de 1625 cm-1, correspondentes
banda de amida I. O desdobramento da banda de amida
I, como observado no espectro de quitina, associado

Tabela 1. Graus mdios de acetilao (GA), viscosidades intrnsecas ([]), massas molares mdias viscosimtricas ( M v ), ndices de cristalinidade
(ICR) e dimetros mdios de cristalitos de quitinas desacetiladas(a).

Amostra

Aditivos/Gs

(%) GA

[
](mL/g)

F0

nenhum

9,5 1,3

514 23

FB

NaBH4

11,6 1,5

FAt

Antraquinona

FN

Mv x 10-4

(b)

ICR (%)

Dap ()

11,1 0,6

64

18,5

827 65

20,5 2,1

67

17,6

10,7 1,7

481 7

10,0

67

14,2

Nitrognio

11,2 2,0

490 20

10,3 0,6

70

20,0

FAr

Argnio

10,5 0,7

497 50

10,5

74

20,5

FBN

NaBH4/ Nitrognio

11,3 1,8

883 42

22,3 1,5

67

14,2

(a)As reaes foram realizadas em duplicatas, com exceo das que resultaram nas amostras F0 e FN que correspondem a triplicatas.
(b)Valores calculados a partir de [] utilizando os parmetros apropriados[9].
Polmeros: Cincia e Tecnologia, vol. 11, n 4, p. 169-173, 2001

171

Campana F, S. P.; Signini, R. - Desacetilao de quitina

Figura 2. Difratogramas das amostras de quitina e de quitosanas obtidas por desacetilaes realizadas em diferentes condies.

com interaes intermoleculares e a primeira banda


atribuda s ligaes hidrognio de grupos C=O e grupos NH, enquanto que a banda centrada em 1625 cm-1
atribuda s ligaes hidrognio envolvendo grupos
C=O, NH e OH ligado ao carbono da posio 6 do
anel de glicopiranose[10]. A banda de amida I menos
intensa nos espectros de quitosanas e o seu desdobramento no observado nesses casos. Alm disso, a banda de amida II, centrada em 1560 cm-1, menos intensa
nos espectros de quitosanas, como conseqncia do
acentuado processo de hidrlise dos grupos acetamida
de quitina.
O emprego de difrao de raios-X tambm permite distinguir claramente a quitina de partida de seus
derivados desacetilados. De fato, o difratograma de
quitina apresenta sinais mais resolvidos e em maior
nmero do que observado nos difratogramas de
quitosanas (Figura 2), o que atribudo existncia
de domnios cristalinos, maiores e em maior nmero
no caso de quitina[1]. Os ndices de cristalinidade
(ICR)[11] e o dimetro mdio aparente dos cristalitos
(Dap)[12] podem ser determinados com o emprego das
Equaes 1 e 2, respectivamente.
% I CR =

IC I A
x100
IC

(1)

sendo: Ic e IA as intensidades dos sinais das regies


cristalinas (220) e amorfas (212), respectivamente.
K
Dap =
cos ( ) 0
172

(2)

sendo: K uma constante; () o comprimento de onda


da radiao empregada; o ngulo (rad) do sinal devido s regies cristalinas; 0 (rad) a largura do sinal
devido s regies cristalinas no ponto em que sua intensidade a metade da intensidade mxima.
A quitina comercial empregada neste trabalho tem
ICR 85% e Dap 35, valores muito superiores aos
de seus derivados desacetilados (Tabela 1), o que
coerente com as modificaes observadas por
espectroscopia de infravermelho. As quitosanas mais
cristalinas, e que possuem cristalitos maiores, foram
obtidas quando o meio reacional empregado na
desacetilao de quitina foi borbulhado com gases
inertes. As diferenas entre as quitosanas, no que diz
respeito a essas caractersticas (ICR e Dap), no parecem, entretanto, ter uma relao simples com seus
graus mdios de acetilao e massas molares mdias
viscosimtricas.
Os valores de graus mdios de acetilao das
amostras (Tabela 1) esto inseridos em um intervalo
restrito (de 9,5% a 11,6%) e so, em todos os casos,
muito prximos daqueles mencionados na literatura
para desacetilaes de quitina realizadas em uma etapa[1]. Esses resultados mostram que a eficincia da
desacetilao independe da presena de aditivos e do
emprego de fluxo de gs inerte, mas a extenso do
processo de despolimerizao fortemente influenciada pela presena de boro hidreto de sdio no meio
reacional.
De fato, constatado que a adio de NaBH4 ao
meio, isoladamente ou simultaneamente ao emprego
de fluxo de nitrognio, levou obteno das
quitosanas que apresentaram os maiores valores de
viscosidade intrnseca e, consequentemente, de massas molares mdias viscosimtricas mais elevadas.
Assim, a comparao entre as quitosanas obtidas na
presena e na ausncia de NaBH4 mostra que os valores de viscosidade intrnseca das primeiras (amostras FB e FBN) so, em mdia, cerca de 40% maiores.
Por outro lado, constatado que a adio de
antraquinona e o borbulhamento de nitrognio, ou
argnio, no impedem a despolimerizao, reforando a idia que a presena de oxignio no uma prcondio para a sua ocorrncia[6].
Concluses
A adio de NaBH4, um agente redutor, ao meio
reacional minimiza a ocorrncia de despolimerizao
Polmeros: Cincia e Tecnologia, vol. 11, n 4, p. 169-173, 2001

Campana F, S. P.; Signini, R. - Desacetilao de quitina

durante a reao de desacetilao de quitina em meio


aquoso alcalino. A adio de antraquinona e o
borbulhamento de nitrognio (ou argnio), que retiram oxignio do meio reacional, no impedem a
despolimerizao, sugerindo que a presena de oxignio no uma pr-condio para a sua ocorrncia.
Agradecimentos
Os autores agradecem FAPESP e ao CNPq pelos recursos que viabilizaram a execuo deste trabalho.
Referncias Bibliogrficas
1. Roberts, G. A. F. - Chitin Chemistry, The Macmillan
Press, London (1992).
2. Goosen, M. E. A Applications of chitin and chitosan,
Technomic Publishing Company, Lancaster (1996).
3. Mathur, N. K. & Narang, C. K. J. Chem. Educ., 67
(11), p.938 (1990).
4. Solomons, T. W. G. Carbohydrates, in: Organic
Chemistry, cap. 22, John Wiley & Sons, New York
(1996).

Polmeros: Cincia e Tecnologia, vol. 11, n 4, p. 169-173, 2001

5. No, H. K. & Meyers, S. P. Preparation of Chitin and


Chitosan, in: Chitin Handbook, R. A A. Muzzarelli
& M. G. Peters (eds.), European Chitin Society,
p.475 (1997).
6. Signini, R. & Campana Filho, S. P.; Effects of additives
and inert gas bubbling on the deacetylation of chitin
and chitosan, in: Proceedings of the Third International Symposium on Natural Polymers and Composites, p. 131, So Pedro SP, maio (2000).
7. Signini, R. & Campana Filho, S. P. - Polmeros: Cincia
e Tecnologia, 4, p.63 (1998).
8. Signini, R. & Campana Filho, S. P. Polym. Bull., 42,
p. 159 (1999).
9. Rinaudo, M.; Milas, M.; Dung, P. L. Int. J. Biol.
Macromol., 15, p. 281 (1993).
10. Focher, B.; Naggi, A.; Torri, G.; Cosani, A.; Terbojevich,
M. Carbohydr. Polym., v.18, p. 43 (1992).
11. Li, J.; Revol, J.-F.; Marchessault, R. H.; - J. Appl. Polym.
Sci., 65, p. 373 (1997).
12. Alexander, L. E.; X-ray diffraction methods in polymer
science, John Wiley & Sons Inc., New York (1985).

Recebido: 22/03/01
Aprovado: 15/11/01

173