Manual Básico de Hematologia

MANUAL BSICO DE PROCEDIMIENTOS DEL
REA DE HEMATOLOGA
Observaciones:
SI MODIFIC LA HEMOGLOBINA TAMBIN MODIFICARE EL CHM Y CHCM, EXCEPTO
EL VCM
HTO : HGB SI PASA DEL 0.5 SE CAMBIARA LA HEMOGLOBINA, CHM Y CHCM
LEUCOCITOS 4.000 - 9.000 / MM3
EJEMPLO: LEUCOCITOSIS CON NEUTROFILIA RELATIVA O
LEUCOPENIA CON NEUTROFILIA RELATIVA
EOSINOFILIA RELATIVA 5-9
EOSINOFILIA ABSOLUTA 10- A MS
NEUTROFILIA RELATIVA 72-79
Abundantes abastonados= desviacin a la izquierda
MVC =HTO X 10/G.R

MCH= HBG X 10/G.R
MCHC = HG X 100/HTO
#NEU = (NEUTROFILOS) X LEUCOCITOS/100
#MIX = (B+E+M) X LEUCITOS/100
#LIN = (LINFOCITOS)/100
DEL IREN , ONCOMAS,PERSONAS CON CANCER CON TRATAMIENTO QUIMIOTERAPIA
SOLO SE REPORTAN SIMPLE NEUTROFILIA
NEUTROFILIA ABSOLUTA 80 A MS
LINFOCITOSIS RELATIVA 41 A MAS
Linfocitosis absoluta NO EXISTE
Macrocitos se informan con cruces
+ 1-2 x campo
++5-6 x campo
+++ 10 x campo
HEMOGRAMA Y ESTUDIO DE LAMINA
SB DENTRO DE LOS LIMITES NORMALES
SR NORMOCITICA NORMOCROMICA
SP : PLAQUETAS EN NMERO Y CANTIDAD ADECUADA
Linfocitos atpica : Cuando hay linfocitosis, se informa en %

Blastos se informan en porcentajes
Si es del IREN nose i nforma atpicos excepto que tengan blastos
Granulaciones toxicas enneutrofilos
HEMOGLOBINA = HOMBRE 13-16
MUJER 12-18
Hemoglobian baja
ANN Anemia Normocitica Normocromica
INTRODUCCIN
El Laboratorio Clnico es una herramienta primordial para el rea mdica, ya que por
medio de este se diagnostican diferentes patologas y adems se realizan estudios para
establecer el tipo de tratamiento que se debe administrar al paciente, al igual que el
seguimiento del mismo.
En este manual de procedimientos para el rea de hematologia, se pretende dar a
conocer todas las reas manejadas en un laboratorio, la realizacin y lectura de los
diferentes exmenes, el procesamiento y toma de las muestras, sin olvidar la parte
humana que definitivamente es tan importante como cualquier otra.
El paciente o usuario llega al Laboratorio para realizarse sus exmenes clnicos, del
personal encargado depende que este usuario reciba el servicio adecuado en todo sentido,
ya sea cientfico o humano, el profesional de la salud debe estar en condiciones de
proporcionar una ayuda integral.
Con la gua de este manual se pretende resolver a cabalidad las dudas que puedan
presentarse, se espera cumplir con las expectativas de fructificar y enriquecer el
conocimiento en el rea de la salud, para colocar en prctica lo aprendido en cualquier
situacin, prestando una ayuda al paciente.
CONSIDERACIONES PARA SU PROTECCIN PERSONAL

Todas las muestras de especimenes biolgicos deben considerarse potencialmente
infecciosas. Vacunarse contra los principales agentes infecciosos.Procurar no producir
"salpicaduras" con la muestra obtenida. Debe limpiarse y desinfectarse cualquier
superficie
contaminada
por
algn
espcimen
biolgico.Lavarse
las
manos
correctamente, despus de haber tenido contacto con cada paciente y al concluir

cualquier procedimiento.
No deben ingerirse comidas, bebidas, goma de mascar o fumar durante los diferentes
procedimientos en el Laboratorio.
Vigile que los elementos de trabajo estn en perfectas condiciones fsicas. Algn
elemento en mal estado, podra causarle una herida.
USO DE ANTICOAGULANTES
Existen mltiples factores involucrados en el proceso de coagulacin de la sangre. Los
anticoagulantes son sustancias que previenen la formacin de cogulos. Existen
diferentes tipos de ellos en polvo o lquidos. Deben seleccionarse siempre el
anticoagulante apropiado segn el estudio que se quiera realizar.
Los anticoagulantes mas comunes son:
EDTA: (ETILEN-DIAMINO-TETRA-ACETATO) Este tipo de anticoagulante es
utilizado principalmente cuando se realizan estudios en donde se cuentan clulas.
CITRATO DE SODIO: Generalmente en concentraciones al 3.8 % y ser utiliza
comnmente en estudios de coagulacin.
HEPARINA: Se utiliza tanto en algunos estudios de rutina como especializados. Su
presentacin puede incluir heparina con concentraciones de sodio o litio. En general, la
heparina con tilio es utilizada para estudios de qumica y la heparina sdica se utiliza
para estudios de linfocitos.
OXALATOS: Son anticoagulantes menos comunes, utilizados ocasionalmente en las

determinaciones de glucosa.
Los tubos deben mezclarse inmediatamente, una vez que la sangre ha entrado en ellos.
Invertir suavemente ( 10 15 veces) o colocarlos en rotores especiales, para as obtener
mezclas homogneas.
Existen cdigos de colores internacionalmente conocidos, para las diferentes

presentaciones de tubos colectores de nuestras sanguneas.
Tapa roja.. Sin anticoagulante (Tubo seco).
Tapa violeta. Con EDTA.
Tapa azul Con CITRATO DE SODIO
En este laboratorio se utiliza:
Tubos Bacutainer tapa lila (EDTA)
Tubos bacutainer tapa celeste (citrato)
Tubos bacutainer tapa roja (sin anticoagulante)
Capilares sin anticoagulante
Capilares con EDTA
RETRACCIN DE COGULO
Fenmeno le
ANLISIS DE HEMATOLOGA
CONSTANTES CORPUSCULARES
METODO:
No aplica
FUNDAMENTO DE LA PRUEBA:
El recuento de glbulos rojos, la hemoglobina y el hematocrito puede ser utilizados para
obtener ciertos ndices, llamados indices eritrocitarios de Wintrobe o constantes
corpusculares", que definen el tamao y contenido de hemoglobina de un eritrocito.
MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

MATERIAL:
Tubo com EDTA
EQUIPOS:
Contador Hematolgico semi-automatizado (SYSMEX KX-N21)
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
La muestra de sangre con EDTA se homogenizara 8 veces antes de pasar a espirar por el
CALCULO DE RESULTADOS:
Observar en la guincha las constantes corpusculares (VCM HCM CHCM)
VALORES REFERENCIALES:
VCM = 80.0 100.0
HCM = 26.0 32.0
CHCM = 31.0 34.0
CONTRO DE CALIDAD
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
FENMENO L. E.
MTODO:
No aplica
Un anticuerpo IgG (Factor LE) presente en el suero o plasma de pacientes, reacciona
contra la nucleoprotena liberada da algunos leucocitos durante la prueba. El complejo
nucleoprotena anticuerpo con la presencia de complemento es fagocitado por un
leucocito neutrfilo o monocito resultando la formacin de la clula LE.

MATERIAL:
Tubos de Wintrobe
Pipeta Pasteur
Cronometro
Colador
Laminas porta objeto
Reactivo Wright
Aceite de inmersin
Bagueta
EQUIPOS:
Bao maria
Centrifuga
Microscopio
MUESTRAS:
Coagulo
PROCEDIMIENTO:
Pasar todo el contenido del tubo (coagulo) a travs de un colador de alambre de

cobre, con la ayuda de una bagueta, hacia otro recipiente colocado debajo.
La muestra filtrada se coloca en los tubos de wintrobe.

Incubar los tubos de wintrobe en Bao maria a 37 por el lapso de 30 min.
Centrifugar los tubos a 3500 rpm por 15 min.
Descartar el suero hasta 2 mm sobre la capa blanca de leucocitos con la ayuda de
un papel absorbente.
Extraer el sedimento y realizar un frotis y colorear con Wright.

Observar al microscopio mas de 2 clulas LE pasa ser considerada positivo.
Las Clulas LE se observan como Neutrfilos o monocitos cuyo ncleo se halla
aplanado y desplazado hacia la periferia, por haber fagocitado una masa abalonada,
homognea, de color rosado violceo, generalmente de mayor tamao a un hemate.
No aplica
CONTRO DE CALIDAD
RETRACCIN DE COGULO
MTODO:
No aplica
Esta prueba se basa en el hecho de que la sangre total que coagula normalmente se
retrae de las paredes de su recipiente, con lo que se separa el suero transparente y el
cogulo. Las plaquetas son muy importantes en el mecanismo de la retraccin del
cogulo, as que esta reaccin se altera cuando las plaquetas disminuyen o funcionan de
manera anormal. Adems, esta reaccin tambin depende del contenido de fibringeno
del plasma, de la relacin entre el volumen plasmtico y eritrocitos y de la actividad de
un principio acelerador de la retraccin del cogulo.
MATERIAL:
Tubo milimetrado
Alambre espiralado
Cronometro
EQUIPOS:
Bao maria
MUESTRAS:
Sangre total sin anticoagulante
PROCEDIMIENTO:
Colocar en un tubo milimetrado 3 ml de sangre total recin extrada sin anticoagulante.
Introducir en el tubo un alambre espiralado.
Colocara el tubo en bao maria a 37 por el lapso de 1 hora.
Sacar el alambre con el cogulo y medir el precipitado.
Dividir el volumen obtenido entre el volumen total de la muestra (3ml) y multiplicarlo
por 100 (factor de conversin)
Valor normal : 45 a 65
CONTRO DE CALIDAD
DETERMINACIN DE FIBRINGENO
MTODO:
Mtodo de Clauss
El mtodo de Clauss mide el ndice de conversin del fibringeno en fibrina en
presencia de un exceso de trombina, este mtodo ha demostrado ser una prueba rpida,
sensible y exacta.
Cuando el plasma diluido se coagula por exceso de trombina, el nivel el fibringeno es
inversamente proporcional al tiempo de coagulacin

MATERIAL:
Micropipetas de 50ul, 100ul
Puntas amarillas descartables
Cubetas descartables
EQUIPOS:
Coagulometro semi-automatizado (stago)
MUESTRAS:
Suero citratado
PROCEDIMIENTO:
De acuerdo a instrucciones de uso del fabricante
50ul plasma citratado +100 ul reactivo multifibrin U
La lectura en el coagulometro se da en segundos, calcular la cantidad de fibringeno en
la tabla adicional del inserto del reactivo a usar.
Valor normal : 200 a 400 mg/dl
CONTRO DE CALIDAD:
DMERO D
MTODO:
Aglutinacin ltex
FUNDAMENTO DE LA PRUEBA
El dmero D (DD) es un producto de degradacin de la fibrina, su presencia indica un
proceso de fibrinolisis posterior a una trombosis. Sus niveles plasmticos se encuentran
elevados en la trombosis venosa profunda (TVP), el tromboembolismo pulmonar (TEP),
en neoplasias, infarto, trombosis arterial, coagulacin intravascular diseminada,
neumona, embarazo, traumatismo reciente o hepatopata.
MATERIAL:
Reactivo de Dimero D
Placa oscura
Mondadientes
Cronometro
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Suero citratado
PROCEDIMIENTO:
20 ul plasma citratado + gota de rx
Mover 3 y observar
Dilucin igual que RPR :100 buffer +
Factor : 0.3
Negativo 0.20
Directo: 0.30
:0.60
: 1.20
1/8
:2.40
Segn el reactivo a utilizar
CONTRO DE CALIDAD:
HEMATOCRITO:
MTODO:
Microescala
Este mide el tanto por ciento del volumen total de una muestra de sangre venosa ocupado
por los hemates o expresado de otra manera es la relacin entre el volumen de
eritrocitos y el de la sangre total. Se expresa como porcentaje (%).
Se aumenta en: Quemaduras, infecciones, intoxicaciones, policitemia, insuficiencia
respiratoria
crnica.
Disminuye en: Concentracin baja del volumen globular, anemias crnicas, cirrosis,
insuficiencias cardacas, ciertas hiperproteinemias.
MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS
MATERIAL.
Tabla para porcentajes de hematocrito
Plastilina
EQUIPOS:
Microcentrifuga
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
Llenar un capilar para hematocrito con sangre con EDTA.
Taponar un extremo del capilar con plastilina.
Centrifugar en la centrifuga para micro hematocrito durante 3 min. a 10 500 rpm.
CLCULO DE RESULTADOS:
Leer el valor de hematocrito haciendo uso de la tabla para porcentajes de hematocrito.
Valores Normales:
Al nacer: 44 - 62 %
Nios de 1 ao: 35 % +/- 5
Nios 10 aos: 37% +/- 5
Hombres: 40 - 54 %
Mujeres: 37 - 47 %
CONTROL DE CALIDAD:
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Manual de tcnicas bsicas para un laboratorio de salud
HEMOGLOBINA:
MTODO:
Indirecto
Es el componente principal de los glbulos rojos, es una protena conjugada que sirve
de vehculo para el transporte de O2 y CO2. Se aumenta en hemoconcentracin, en
estados de shock, quemaduras, por diarrea, vomito y poliglobulina primaria.
Se disminuye en casos de anemia.
MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS
MATERIAL:
Plastilina
EQUIPOS:
Microcentrifuga
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
Llenar un capilar para hematocrito con sangre con EDTA.
Taponar un extremo del capilar con plastilina.
Centrifugar en la centrifuga para micro hematocrito durante 3 min. a 10 500 rpm.
. Leer el valor de hematocrito haciendo uso de la tabla para porcentajes de hematocrito.
La hemoglobina se determinara dividiendo el valor del hematocrito entre 3.1 (factor de
conversin).
Valores Normales:
Neonatos, sangre de cordn: 13.6 - 19.6 g/dl
Nios de 1 ao: 11.2 g/dl
Nios de 10 aos: 12.9 g/dl
Hombres: 13.0 - 18.0 g/dl
Mujeres: 12.0 - 16.5 g/dl
CONTRO DE CALIDAD:
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:
GRUPO ABO y FACTOR RH

MTODO:
Aglutinacin en lamina
Existen principalmente dos tipos de protenas que determinan el tipo de sangre, la
protena A y la B. Diferentes combinaciones de las mismas resultan en los 4 grupos
sanguneos:
Grupo A: Tiene protena A en la superficie del glbulo rojo. Reactivo anti A.
Grupo B: Tiene protena B en la superficie del glbulo rojo. Reactivo anti B.
Grupo AB: Tiene ambas protenas A y B.
Grupo O: No tiene ninguna (A o B) en la superficie del glbulo rojo.
El Rh es otra protena que si est presente en la superficie del glbulo rojo ser Rh
positivo y si est ausente, es rh negativo. Reactivo anti D y se confirma con anti
CDE.
MATERIAL:
Lamina escavada
Micropipeta
Palillos mondadientes
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
En una placa con depresiones circulares o en una lamina limpia y libre de grasa,
colocar equidistantemente 3 gotas de sangre fresca o con anticoagulante.
Agregar 1 gota de suero anti A, anti B y Reactivo anti D, respectivamente.
Con un aplicador de madera o plstico uno diferente cada vez mezclar las gotas.
Balancear la lamina con movimientos circulares por 1 min.
Observar la presencia de aglutinacin macroscpica y reportar resultados
No aplica
CONTRO DE CALIDAD
HBV (PRUEBA RAPIDA)

MTODO:
Cualitativo
La inmunocromatografa se basa en la migracin de una muestra a travs de una

membrana de nitrocelulosa. La muestra es aadida en la zona del conjugado, el cual est
formado por un anticuerpo especfico contra uno de los eptopos del antgeno de la
hepatitis B (HbsAg) y un reactivo de deteccin. Si la muestra contiene el antgeno a
problema, ste se unir al conjugado formando un complejo inmune y migrar a travs
de la membrana de nitrocelulosa. Sino, migrarn el conjugado y la muestra sin unirse.
La zona de captura est formada por un segundo anticuerpo especfico contra otro
eptopo del antgeno. Al llegar la muestra a esta zona, los complejos formados por la
unin del antgeno y conjugado quedarn retenidos y la lnea se colorear (muestras
positivas). En el caso contrario las muestras son negativas.
La zona control est formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de
deteccin. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el anticuerpo se unir al
conjugado libre que no ha quedado retenido en la zona de captura. Esta lnea es un
control de que el ensayo ha funcionado bien, porque se colorea siempre, con muestras
positivas y negativas.

MATERIAL:
Kit de prueba rpida
Micropipeta
Cronometro
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
Suero
PROCEDIMIENTO:
Positivo:
Presencia de 2 lneas rojas en la zona de lectura
Negativo:
Solo presencia de una lnea la de control.
No aplica
CONTROL DE CALIDAD
REFERENCIA BIBLIOGRFICA
HCV (PRUEBA RPIDA)

MTODO:
Cualitativo
La inmunocromatografa se basa en la migracin de una muestra a travs de una

membrana de nitrocelulosa. La muestra es aadida en la zona del conjugado, el cual est
formado por un anticuerpo especfico contra uno de los eptopos del antgeno de la
hepatitis C y un reactivo de deteccin. Si la muestra contiene el antgeno a problema,
ste se unir al conjugado formando un complejo inmune y migrar a travs de la

membrana de nitrocelulosa. Sino, migrarn el conjugado y la muestra sin unirse.
La zona de captura est formada por un segundo anticuerpo especfico contra otro
eptopo del antgeno. Al llegar la muestra a esta zona, los complejos formados por la
unin del antgeno y conjugado quedarn retenidos y la lnea se colorear (muestras
positivas). En el caso contrario las muestras son negativas.
La zona control est formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de
deteccin. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el anticuerpo se unir al
conjugado libre que no ha quedado retenido en la zona de captura. Esta lnea es un
control de que el ensayo ha funcionado bien, porque se colorea siempre, con muestras
positivas y negativas.

MATERIAL:
Kit de prueba rpida
Micropipeta
Cronometro
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
suero
PROCEDIMIENTO:
Positivo:
Negativo:
No aplica
CONTROL DE CALIDAD
HEMOGRAMA SIMPLE
MTODO:
No aplica
En el hemograma simple se hace el recuento de leucocitos por mm3 de sangre y se
enumera todos los tipos de clulas nucleadas en la sangre, se debe tener en cuenta que
esto incluye eritrocitos nucleados los cuales despus del reporte se deben descontar.
Valores Normales: 4.000 - 9.000 / mm3
Cifras mayores de 9.000 indican leucocitosis, aunque algunas personas normales pueden
tener cifras superiores. El ejercicio produce leucocitosis fisiolgicas, a veces de
consideracin, de ah, que el recuento de leucocitos debe hacerse en condiciones
bsales. Hay leucopenia cuando el recuento es inferior a 4.000 por mm3. Una
recomendacin til en la valoracin del recuento de leucocitos en que una sola cifra
puede ser equvoca y en caso de duda debe hacerse por lo menos dos veces.
El hemograma simple abarca el recuento de leucocitos, hemoglobina-hematocrito y
recuento de frotis sanguineo.
MATERIAL:
Tubos de 3ml
Plastilina
Capilares sin EDTA
Cmara de Newbauer
Reactivo de Turk
Micropipeta
Contmetro
Reactivo Wright
Cronometro
Aceite de inmersin
EQUIPOS:
Microscopio
Microcentrifuga
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
Frotis sanguneo
PROCEDIMIENTO:
En un tubo de 3ml llenar 0.38ul de reactivo de Turk
Agregar a este 20 ul de sangre con EDTA, mezclar y dejar reposar por 1 minuto.
Llenar correctamente la cmara de Newbauer para recuento de glbulos blancos. Dejar
reposar por 1 min. Luego realizar los recuentos de glbulos blancos en los 4 cuadrantes
respectivos.
Realizar la lectura del hematocrito y por el mtodo indirecto calcular la hemoglobina.
La coloracin del frotis sanguneo se proceder de la siguiente manera:
Agregar 10 gotas de colorante Wright con 25 gotas de agua tamponada
Homogenizar y dejar reposar por el lapso de 5 minutos.
Lavar con agua a chorro y secar.
Se leer la lmina en la parte media del cuerpo del frotis. Anotando la cantidad de
formas de leucocitos que se observen dentro de un mximo de 100 clulas. Se reportara
los recuentos en porcentaje.
La sumatoria de los cuatro cuadrantes en la cmara se multiplicara por el factor (50) y
se obtendr el recuento total de leucocitos por ml3
El valor del hematocrito se leer en la tabla para porcentajes de hematocrito.
La hemoglobina se determinara dividiendo el valor del hematocrito entre 3.1 (factor de
conversin).
Se reportara el recuento de frotis en porcentaje.
LEUCOCITOS:
Valores Normales: 4.000 - 9.000 / mm3
HEMATOCRITO:
Valores Normales:
Al nacer: 44 - 62 %
Nios de 1 ao: 35 % +/- 5
Nios 10 aos: 37% +/- 5
Hombres: 40 - 54 %
Mujeres: 37 - 47 %
HEMOGLOBINA:
Valores Normales:
Neonatos, sangre de cordn: 13.6 - 19.6 g/dl
Nios de 1 ao: 11.2 g/dl
Nios de 10 aos: 12.9 g/dl
Hombres: 13.0 - 18.0 g/dl
Mujeres: 12.0 - 16.5 g/dl
CONTROL DE CALIDAD:
REFERENCIA BIBLIOGRFICA:
Manual de procedimientos de laboratorio en tcnicas bsicas de hematologia
HEMOGRAMA COMPLETO
MTODO:
No aplica
El hemograma completo abarca mas anlisis tales como recuento de leucocitos,
recuento de glbulos rojos, constantes corpusculares, hemoglobina-hematocrito,
plaquetas y un estudio de lamina perifrica.Para realizar un buen estudio de lamina es

fundamental tener un buen frotis sanguneo.
El hemograma completo tieno por objeto determinar los porcentajes de las distintas
clases de leucocitos normales y anormales en la sangre

MATERIAL:
Contmetro
Reactivo Wright
Cronometro
Aceite de inmersin
EQUIPOS:
Contador Hematolgico semi-automatizado

(SYSMEX KX-N21)
Microscpio
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
Frotis sanguneo
PROCEDIMIENTO:
La muestra de sangre con EDTA se homogenizara 8 veces antes de pasar a espirar por el
Realizacin del frotis de sangre
Es una de las partes ms importantes del cuadro hemtico, se coloca una gota de sangre
anticoagulada en una lmina que debe ser preferiblemente nueva o en su defecto
lminas completamente desengrasadas y con una lmina (Extensora) en un ngulo de 30

- 45 grados sobre la primera de forma tal que la sangre se extienda por capilaridad a lo
largo del ngulo agudo formado por dos lminas y se deja secar. El extendido de sangre
debe hacerse mximo una hora despus de que se tome la muestra.
Los leucocitos se dividen en cinco grupos:
NEUTROFILOS: 60 71 %
LINFOCITOS: 30 40%
MONOCITOS: 0-5%
EOSINOFILOS: 0 5 %
BASOFILOS: 0 1%
Tcnica de Coloracin:
Cubrir la lmina con colorante wright (10 gotas), luego se le agrega 25 gotas deuna
solucin tamponada (Agua destilada) y se deja por 5 minutos, se lava la lmina con
agua de chorro.
Tener en cuenta que cada vez que se empiece un colorante nuevo se debe estandarizar el
tiempo de coloracin, y filtrar los colorantes cada vez que sea necesario.
Lectura:
Se leer la lmina en la parte media del cuerpo del frotis. Anotando la cantidad de
formas de leucocitos que se observen dentro de un mximo de 100 clulas. Se reportara
los recuentos en porcentaje.
CONTROL DE CALIDAD:
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
MTODO:
No aplica
Para realizar transfusiones, deben tomarse medidas para asegurar la compatibilidad de
los grupos sanguneos del donante y el receptor, para evitar reacciones hemolticas
potencialmente fatales. La tabla de compatibilidades e incompatibilidades de tipos de
sangre es como se indica en la tabla.
Sin embargo, no son el ABO y el Rh los nicos tipos de grupos sanguneos existentes.
Existen otros tipos de grupos sanguneos menos conocidos por ser menos antignicos
que los anteriores y por lo tanto menos susceptibles de provocar reacciones de
incompatibilidad. Por ello es imprescindible realizar pruebas cruzadas entre la sangre de
donante y la del receptor, para descartar la existencia de anticuerpos en el receptor
contra eritrocitos del donante..
COMPATIBILIDAD SANGUNEA
Tipo de sangre
A+
AB+
BAB+
ABO+
O-
Puede donar a :
A+, AB+
A+, A-, AB+, ABB+, AB+
B+, B-, AB+ ,ABAB+
AB+, ABA+, B+ ,AB+, O+
TODOS

MATERIAL:
Albunina al 22%
Reactivo de coombs
Cronometro
Puntas amarillas
Micropipeta
Lamina porta objeto
Solucion salina fisiolgica
Tubos de 5ml y de 3 ml
EQUIPOS:
Bao maria
Centrifuga
Microscpio
MUESTRAS:
Puede recibir de :
O+, O-, A+ ,AO- ,AO+, O- ,B+, BO-, BTODOS
O- ,B-, A-, ABO+, OO-
Sangre con EDTA del Donante

Suero o plasma del Receptor
PROCEDIMIENTO:
En un tubo de 5ml lavar 20ul de sangre del donante con solucion salina fisiologica
(SSF) a 3500 rpm (3 veces).
Preparar una suspensin de los hemates lavados
En un tubo de 3ml colocar 50 ul de la suspensin (hemates del donante) con 50ul del
suero del receptor.
Aadir una gota de albumina al 22% y centrifigar a 3500 rpm por 30 segundos.
Homogenizar y observar al microscopio (10x) presencia o no de aglutinacin
Llevar a Bao maria por el lapso de 20 minutos, retirar el tubo y lavar 2 veces con SSF.
Eliminar el sobrenadante y agregar una gota de reactivo de commbs, centrifugar s 3500
rpm por 30 segundos.
Observar al microscopio presencia de aglutinacin o no.
Aglutinacion : IMCOMPATIBILIDAD
No Aglutinacion : COMPATIBLE
CONTROL DE CALIDAD:
TIEMPO DE COAGULACIN
MTODO:
Mtodo en lmina
Este examen es util para evaluar la eficasia del mecanismo de coagulacin.
Su utilidad es limitada, pues detecta deficiencias graves en la coagulacin y no detecta

las deficiencias leves de la coagulacin.
MATERIAL:
Lamina porta objeto
Cronometro
Lanceta esteril
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Pulpejo del dedo
PROCEDIMIENTO:
Se realiza una puncin del pulpejo del dedo con lanceta, colocar 3 gotas equidistantes
en 1 lamina porta objeto y cronometrar de inmediato. Empezar a controlar a partir de los
4 min. Levantando la gota de sangre con la punta de la lanceta, controlar hasta que
aparezca los primeros hilos de fibrina y parar el cronometro.
Registrar el tiempo
De 5 a 10 min.
CONTROL DE CALIDAD:
Procedimiento de laboratorios
PRUEBAS DE COAGULACIN
TIEMPO DE PROTROMBINA (P.T TIEMPO DE QUICK)
MTODO:
No aplica
Se define como el tiempo en segundos necesario para la formacin del cogulo despus
de la adicin de calcio y tromboplastina al plasma. La prueba mide la integridad de la
va extrnseca del sistema de coagulacin sangunea. La principal aplicacin clnica de
la prueba es el control de la anticoagulacin oral.
El plasma debe ser separado de las clulas lo ms rpido posible y refrigerarlo si no es
procesado inmediatamente, teniendo en cuenta que su procesamiento debe hacerse antes
de cuatro horas despus de haber tomado la muestra.
MATERIAL:
Micropipetas de 50ul, 100ul
EQUIPOS:
MUESTRAS:
Sangre con citrato
PROCEDIMIENTO:
50ul plasma citratado +100 ul reactivo protombin
La lectura en el coagulometro se da en segundos calcular el porcentaje y el INR en la
tabla adicional del inserto del reactivo a usar.
Valor normal 13 14 segundos
Un valor no coagulante mayor de 20 segundos en personas sin anticoagulacin es
crtico, y en personas anticoaguladas un valor por encima de tres veces el valor de
referencia.
CONTROL DE CALIDAD:
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (KPTT, PTT, APTT)

MTODO:
No aplica
Se define como el tiempo en segundos necesario para formacin de cogulo despus de

la adicin de calcio y fosfolpidos al plasma citratado pobre en plaquetas. El PTT mide
la integridad de la va intrnseca de la coagulacin, encontrndose alargado tambin en
coagulacin
Intravascular
diseminada,
disfibrinogenemias,
afibrinogenemia,
hepatopatas severas, deficiencia de vitamina K, tambin es utilizado en control de la

anticoagulacin con heparina.
MATERIAL:
Micropipetas de 50ul
EQUIPOS:
MUESTRAS:
Sangre con citrato
PROCEDIMIENTO:
50ul plasma citratado +50 ul reactivo
50 reactivo CaCl2
Se reporta la cantidad en segundos
Valor de referencia: 30 45 segundos con una diferencia no mayor de 5 segundos con el
control. En los recin nacidos es mas largo y solo a partir de los seis meses el resultado
es similar al de los adultos.
Un valor es considerado crtico cuando el resultado es mayor de 70 segundos. El PTT

reemplaza el tiempo de coagulacin que en la actualidad no tiene ninguna utilidad
clnica.
CONTROL DE CALIDAD:
VIH (PRUEBA RAPIDA)

MTODO:
Cualitativo
Las pruebas rpidas para deteccin de anticuerpos constituyen instrumentos auxiliares
para la deteccin de los virus VHI-1 o VHI-2 mediante la accin de diferentes reactivos
aplicados en suero y plasma.
Siempre es necesario re-confirmar el resultado arrojado por las pruebas rpidas
mediante un estudio Western Blot y luego si establecer un diagnostico, positivo o
negativoen
cuanto
Siempre
es
la
fundamental
infeccin
tener
dos
por
cosas
HIV
p
VIH.
presentes:
1- Toda prueba de deteccin, ya sea rpida o tradicional, de ninguna manera puede

asegurar
que
una
persona
no
se
haya
infectado
recientemente.
2- Todo resultado positivo, en ausencia de sntomas de SIDA, debe ser re-confirmado

MATERIAL:
Kit de prueba rpida
Micropipeta
Cronometro
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
Suero
PROCEDIMIENTO:
Positivo:
Negativo:
No aplica
CONTROL DE CALIDAD:
TIEMPO DE SANGRIA:
MTODO:
Mtodo de Duke
Tiempo que tarda en cesar una hemorragia provocada en una superficie cutnea que
daa solo capilares. Pone a prueba la formacin del tapn plaquetario en capilares
daados.
MATERIAL:
Lanceta esteril
Papel de filtro
Cronometro
EQUIPOS:
No aplica
MUESTRAS:
Lbulos de la oreja
PROCEDIMIENTO:
Limpiar con alcohol yodado el lbulo de una oreja del paciente.
Con una lanceta, realizar una puncin de 3 mm de profundidad en la parte interior del
lbulo y poner en marcha un cronometro simultneamente.
Cada 30 seg. Absorber la gota de sangre que se formara sobre un papel de filtro
(Walkman 1) hasta que no sangre.
Anotar el tiempo en que demora en dejar de sangrar
De 1 a 3 min.
CONTROL DE CALIDAD:
- Procedimiento de laboratorios
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR (VSG):

MTODO:
Wintrobe
La diferencia de gravedad especifica entre eritrocitos y plasma ocasiona la

precipitacin de los primeros en el fondo del tubo que contiene sangre anticoagulada
con una velocidad que es medida en determinada cantidad de tiempo.
Se llena el tubo de wintrobe con la aguja de pasteur y se coloca en un soporte de manera
que quede completamente recto, observar a la hora que tanto han descendido los
glbulos rojos, midiendo en esa distancia en la escala del tubo de wintrobe cuya marca
superior sea cero.
La
eritrosedimentacin
se
encuentra
elevada
en
infecciones,
enfermedades
inflamatorias, autoinmunes y malignas, especialmente las discrasias de clulas

plasmticas. La eritrosedimentacin es particularmente til en las enfermedades
reumatolgicas, especialmente en artritis reumatoidea, en la evaluacin de artritis
temporal y en la polimialgia reumtica, pueden haber variaciones fisiolgicas que se
deben tener en cuenta ya que la VSG se puede acelerar en caso de nios y ancianos, en
la mujer se aumenta antes y despus de la menstruacin, durante el embarazo y puede
estar elevada uno o dos meses despus del parto, la toma de anticonceptivos orales puede
tambin acelerar la velocidad.
MATERIAL:
Tubo de wintrobe
Pipeta Pasteur
Cronometro
EQUIPO:
No aplica
MUESTRA:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
Se usara sangre con anticoagulante EDTA.
Con una pipeta Pasteur llenar la sangre al tubo de Wintrobe hasta la marca de 0. No
agitar.
Colocar en un soporte en posicin vertical. Luego leer despus de 1 hora.
Valores Normales: Varan de acuerdo con la edad, el gnero y el mtodo.
- Hombres menores de 50 aos: 0 - 15 mm/hora
- Hombres mayores de 50 aos: 0 - 20 mm/hora
- Mujeres menores de 50 aos: 0 - 25 mm/hora
- Mujeres mayores de 50 aos: 0 - 30 mm/hora
CONTROL DE CALIDAD.
REFERENCIA BIBLIOGRFICAS:
Manual de procedimientos de laboratorio en tcnicas bsicas de hematologia.
RECUENTO DE PLAQUETAS
MTODO:
Recuento en lmina
Este resultado es importante ya que desempean un papel vital en la hemostasis.
Se disminuye en: Radiaciones, cncer, leucemia, mielomas, sndromes asociados a

anemias y leucopenias, infecciones bacterianas, lupus eritematoso, mononucleosis,
varicela, paperas, anemias megaloblstica y aplsicas, tratamientos con determinadas
drogas.
Se aumentan en leucemia mieloide crnica, enfermedades inflamatorias, ferropenias.

MATERIAL:
Lamina porta objetos
Contmetro
Aceite de inmersin
Reactivo Wright
Cronometro
EQUIPOS:
Microscpio
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
Frotis sanguneo
PROCEDIMIENTO:
Es un mtodo semicuantitativo, se requiere una buena extensin en lmina y una buena
coloracin sin precipitados.
Se realiza una sumatoria del recuento de plaquetas en 10 campos a 100x.
Este valor se multiplica por 1000.
Valor Normal Adultos: 150.000 - 400.000/ mm3
Nios : 150,000 600,000/mm3
CONTROL DE CALIDAD:
RECUENTO DE EOSINFILOS
MTODO:
Los eosinfilos son glbulos blancos activos en enfermedades alrgicas, infecciones

parasitarias y otros trastornos. El conteo de eosinfilos puede indicarse si el diferencial
sanguneo es anormal o si hay sospecha de enfermedades especficas.
El aumento de eosinfilos (eosinofilia) generalmente est asociado con enfermedades
alrgicas y parsitos (como lombrices
MATERIAL:
Cmara de newbauer
Contmetro
Laminilla
Micropipeta
Tubo de 3ml
Reactivo de eosina
EQUIPOS:
Microscpio
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
En un tubo de 3 ml agregar 0.38 ml de reactivo de eosina con 20 ul de sangre con
EDTA.
Homogenizar y dejar reposar por 1 minuto.
Cargar la camara de newbauer y dejar reposar por 1 minuto.
Contar en el microscopio (10x) cuantos eosinfilos hay en el cuadrante de los glbulos
rojos y reportar.
Los eosinfilos de observan de color anaranjado.
Luego de contar los eosinfilos en el cuadrante de los glbulos rojos multiplicar por 25
(factor de conversin)
Valor Normal: 50 a 200
CONTROL DE CALIDAD:
RECUENTO DE RETICULOCITOS
MTODO:
No aplica
Son eritrocitos no nucleados inmaduros, que contienen RNA y que continan
sintetizando hemoglobina despus de la prdida del ncleo.
Aumenta en anemias regenerativas, hemolticas, hemorragias internas o externas.
Disminuyen frente a una mdula sea no respondedora como en una anemia aplasica en
leucemias.
MATERIAL:
Tubo de 3ml
Reactivo Azul brillante de cresilo
Micropipeta de 50 ul
Contmetro
Aceite de inmersin
Lamina porta objeto
EQUIPOS:
Microscpio
Bao maria
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
Se mezcla en un tubo 50 ul de azul de cresil brillante y 50 ul de sangre con EDTA, se
incuban durante 15 minutos a 37 grados, se hacen dos extendidos en lmina y se miran
con objetivo de 100 X. Se cuentan aproximadamente 1.000 hemates y se saca el

promedio de reticulocitos.
Se reporta la cantidad de reticulocitos encontrados en los 1000 hemates en porcentajes.
Reticulocitos x100/1000
Valor Normal:
Neonatos: Hasta 2.6%
Adultos: Hasta 2.0%
CONTROL DE CALIDAD:
N de reticulocitos contados x 100 /1000 hemates = %
TEST DE COOMBS DIRECTO

MTODO:
No aplica
Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glbulos rojos y causar su
destruccin prematura (hemolisis).
Una de las mas importantes aplicaciones del coombs directo es en la investigacion de
las potenciales reacciones hemoliticas transfusionales. - En la enfermedad hemolitica
del recien nacido un resultado positivo es diagnostico por los anticuerpos IgG maternos
que cruzan la placenta y atacan a los eritrocitos fetales. - En los anticuerpos inducidos
por medicacion. - En la investigacion de autoanticuerpos, en artritis reumatoide,
leucemia, mieloesclerosis, sarcoidosis, lupus eritematoso diseminado, anemia aplastica.
MATERIAL:
Albunina al 22%
Reactivo de coombs
Cronometro
Puntas amarillas
Micropipeta
Lamina porta objeto
Tubos de 5ml y de 3 ml
EQUIPOS:
Bao maria
Centrifuga
Microscpio
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO :
En un tubo de 5ml lavar 100ul de sangre con EDTA con 4ml solucion salina fisiologica
(SSF) a 3500 rpm (3 veces).
(Suspensin al 5% = 1ml de sol.salina +50 ul del lavado anterior)
En un tubo de 3ml colocar 50 ul de la suspensin (hemates lavados) con una gota de
albumina al 22% y centrifigar a 3500 rpm por 30 segundos.
Aglutinacin : Positivo
No Aglutinacin : Negativo
CONTROL DE CALIDAD:
TEST DE COOMBS INDIRECTO
MTODO:
No aplica
La eristoblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido) es el nombre que
recibe el estado,debido ala destruccin (lisis) de los globulos rojos del feto por un
anticuerpo producido por la madre contra un antgeno que el feto heredo del padre y que
la madre no posee.La prueba antiglobulina humana resulta el mejor mtodo para
detectar anticuerpos sensibilizantes.
MATERIAL:
Albunina al 22%
Reactivo de coombs
Cronometro
Puntas amarillas
Micropipeta
Lamina porta objeto
Tubos de 5ml y de 3 m
Sangre con EDTA (rh positivo)
EQUIPOS:
Bao maria
Centrifuga
Microscpio
MUESTRAS:
Suero o Plasma
PROCEDIMIENTO :
En un tubo de 5ml lavar 20ul de sangre con EDTA de grupo RH positivo con solucin
salina fisiologica (SSF) a 3500 rpm (3 veces).
En un tubo de 3ml colocar 50 ul de la suspensin (hemates rh positivo) con 50 ul de
suero o plasma del paciente.
Agregar una gota de albumina al 22% y centrifigar a 3500 rpm por 30 segundos.
Aglutinacin : Positivo
No Aglutinacin : Negativo
CONTROL DE CALIDAD:
NDICE RETICULOCITARIO
MTODO:
No aplica
Son eritrocitos no nucleados inmaduros, que contienen RNA y que continan
sintetizando hemoglobina despus de la prdida del ncleo.
Aumenta en anemias regenerativas, hemolticas, hemorragias internas o externas.
Disminuyen frente a una mdula sea no respondedora como en una anemia aplasica en
leucemias.
MATERIAL:
Tubo de 3ml
Reactivo Azul brillante de cresilo
Micropipeta de 50 ul
Contmetro
Aceite de inmersin
Lamina porta objeto
EQUIPOS:
Microscpio
Bao maria
MUESTRAS:
Sangre con EDTA
PROCEDIMIENTO:
Se mezcla en un tubo 50 ul de azul de cresil brillante y 50 ul de sangre con EDTA, se
incuban durante 15 minutos a 37 grados, se hacen dos extendidos en lmina y se miran
con objetivo de 100 X. Se cuentan aproximadamente 1.000 hemates y se saca el
promedio de reticulocitos.
Se reporta la cantidad de reticulocitos encontrados en los 1000 hemates por la
hemoglobina del paciente y se divide por la hemoglobina de valor normal.
Indice reticulocitario = reticulocitos x Hb del paciente
Hb normal
Valor Normal:
hasta 1.0
CONTROL DE CALIDAD:
RECUENTO DE EOSINFILOS EN SECRECIN NASAL

MTODO:
No aplica
El anlisis citolgico del exudado nasal se puede utilizar con fines histolgicos y
bacteriolgicos. Constituye una prueba bsica en el estudio de las rinitis
En el exudado nasal, una vez teido, se pueden apreciar cc epiteliales, cc. de origen
hemtico (neutrfilos, linfocitos, eosinfilos, basfilos y mastocitos) y otros elementos
(bacterias, plenes y esporas micticas).
El frotis nasal puede ser realizado segn diversas tcnicas de tincin: eosina y azul de
metileno, colorantes de Wright y Hausel y tcnica de May-Grnwals-Giemsa, siendo
este ltimo el mtodo ms utilizado.

MATERIAL:
Agua destilada
Azul de metileno
Etanol
Reactivo eosina
Contmetro
Aceite de inmersin
Lamina porta objeto
EQUIPOS:
Microscpio
MUESTRAS:
Frotis de secrecin nasal
PROCEDIMIENTO:
El fortis se seca al ambiente
Se cubre el frotis con eosina y se deja por 1 minuto
Se agrega igual volumen de agua destilada y se deja reposar por 1 minuto
Se elimnina la eosina con el agua y luego se cubre con agua destilada hasta remover la
tincin.
Se cubre el frotis con etanol y luego se elimina
Se cubre nuevamente con azul de metileno por 1 minuto
Se agrega igual volumen de agua destilada y se deja reposar por 2 minutos
Se lava hasta remover la tincin
Se agrega etanol y se deja por 1 minuto
Se examina al microscopio con lente de inmersion
Celulas epiteliales nasales : con citoplasma azul,palido abundante y nucleo azul
Neutrofilos : que tienen nucleo azul lobulado y citoplasama rosado palido
Eosinofilos : tienen nucleos lobulados azules y citoplasma con granulaciones
intensamente eosinofilas que se permiten distinguir con facilidad
Valor Normal:
hasta 1.0
CONTROL DE CALIDAD:

Manual Básico de Hematologia

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MANUAL BSICO DE PROCEDIMIENTOS DEL

Abundantes abastonados= desviacin a la izquierda

MVC =HTO X 10/G.R

Linfocitos atpica : Cuando hay linfocitosis, se informa en %

situacin, prestando una ayuda al paciente.

CONSIDERACIONES PARA SU PROTECCIN PERSONAL

correctamente, despus de haber tenido contacto con cada paciente y al concluir

OXALATOS: Son anticoagulantes menos comunes, utilizados ocasionalmente en las

Existen cdigos de colores internacionalmente conocidos, para las diferentes

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Tubo com EDTA

Contador Hematolgico semi-automatizado (SYSMEX KX-N21)

Sangre con EDTA

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Pasar todo el contenido del tubo (coagulo) a travs de un colador de alambre de

La muestra filtrada se coloca en los tubos de wintrobe.

Extraer el sedimento y realizar un frotis y colorear con Wright.

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Micropipetas de 50ul, 100ul

Puntas amarillas descartables

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS

GRUPO ABO y FACTOR RH

HBV (PRUEBA RAPIDA)

La inmunocromatografa se basa en la migracin de una muestra a travs de una

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Kit de prueba rpida

Puntas amarillas descartables

Presencia de 2 lneas rojas en la zona de lectura

Solo presencia de una lnea la de control.

HCV (PRUEBA RPIDA)

La inmunocromatografa se basa en la migracin de una muestra a travs de una

ste se unir al conjugado formando un complejo inmune y migrar a travs de la

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Kit de prueba rpida

Puntas amarillas descartables

Presencia de 2 lneas rojas en la zona de lectura

Solo presencia de una lnea la de control.

plaquetas y un estudio de lamina perifrica.Para realizar un buen estudio de lamina es

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Contador Hematolgico semi-automatizado

lminas completamente desengrasadas y con una lmina (Extensora) en un ngulo de 30

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Sangre con EDTA del Donante

Su utilidad es limitada, pues detecta deficiencias graves en la coagulacin y no detecta

Lamina porta objeto

Micropipetas de 50ul, 100ul

Puntas amarillas descartables

Sangre con citrato

TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (KPTT, PTT, APTT)

Se define como el tiempo en segundos necesario para formacin de cogulo despus de

hepatopatas severas, deficiencia de vitamina K, tambin es utilizado en control de la

Puntas amarillas descartables

Sangre con citrato

Un valor es considerado crtico cuando el resultado es mayor de 70 segundos. El PTT

VIH (PRUEBA RAPIDA)

1- Toda prueba de deteccin, ya sea rpida o tradicional, de ninguna manera puede

2- Todo resultado positivo, en ausencia de sntomas de SIDA, debe ser re-confirmado

MATERIAL, EQUIPO Y MUESTRAS:

Kit de prueba rpida

Puntas amarillas descartables

Presencia de 2 lneas rojas en la zona de lectura

Solo presencia de una lnea la de control.

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR (VSG):

La diferencia de gravedad especifica entre eritrocitos y plasma ocasiona la