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Centro Universitario Mxico

Departamento de Biologa Ciclo Escolar: 2014-2015


Laboratorio de Biologa (CLAVE 1613)
Prof. Titular: Dr. Carlos Ramos Abraham
Prof. De Laboratorio: Bio. Ma. Elena Garca Andrade., I.Q. Edgard Flores Ramrez.
Saln 104
Equipo # 2
Ayala Vega Karla
104-06
Ayuso Gmez Paola Michelle 104-07
Belmont Garca Diego
104-08
Campos Snchez Jos Roberto104-09
Cortes Ayala Estefana
104-10
Prctica #3
MICROSCOPIA ESTRUCTURA Y FUNCIONES CELULARES
RESUMEN
INTRODUCCIN. El instrumento esencial para el avance en el estudio de la clula ha sido el microscopio; un instrumento
mecnico ptico que permite ver objetos muy pequeos ms grandes, por lo cual es necesario el estudio de este y conocer las
funciones celulares para saber que estamos observando a travs de este. OBJETIVOS. Practicar el manejo y cuidados del
microscopio de manera correcta, para observar de manera optima, estructuras celulares de diferentes organismos y
microorganismos. HIPTESIS. Si conocemos el mtodo del uso correcto del microscopio ptico fotonico, elaboramos preparaciones
y agregamos diversos colorantes, entonces, podremos observar preparaciones celulares de distintos tipos con los cuales podremos
observar las diferentes compuestos de las clula. MATERIALES Y MTODOS. Se uso como instrumento principal para la
observacin de diferentes muestras el microscopio ptico fotonico, en los cuales empleamos la zanahoria, cebolla y corcho para
poder distinguir las diferentes partes de las clulas a travs del microscopio ptico fotonico que se pueden observar gracias a los
reactivos aplicados a estas. RESULTADOS. Se observaron a travs del microscopio ptico fotonico algunas estructuras de la clula
como paredes, membranas y ncleos, de los epitelios de la zanahoria y ceboa, a los cuales se les agregaron diversos reactivos y
colorantes que hizo que variara lo observado sin reactivo y con reactivo. DISCUSIN. En el laboratorio se preparan diferentes
muestras las cuales fueron observadas con el microscopio ptico fotonico con aumentos reales de 100 y 400 en los cuales se le
agregaron diversos reactivos como azul de metileno, los reactivos de la tincin de Gram y preparaciones frescas como NaCl
0.9%, solucin isotnico e hipertnica, hacan que se pudieran observar con mayor calidad las preparaciones y logrando as ver las
partes de la clula, como las paredes, membranas y ncleos. CONCLUSIONES. An cuando se ha logrado un progreso
considerable en la microscopa, no todo est dicho. En el futuro, tal cual como se ha demostrado en el pasado, a medida que avance
la tecnologa se implementarn instrumentos y tcnicas cada vez ms eficientes y con aplicaciones novedosas que permitirn
incrementar los conocimientos en el mbito de la biologa celular y la histologa.. PERSPECTIVAS. La Microscopa ha estado en
constante evolucin desde finales del siglo XX, con la introduccin de nuevos recursos que han mejorado su prctica. Por ejemplo,
el uso del microscopio virtual ha alcanzado un alto nivel de madurez; se trata de una sin ergia entre disciplinas como la patologa,
histologa, la informtica mdica y anlisis de imgenes. Esta tecnologa ha avanzado muchos paradigmas en la investigacin, el
diagnstico, la educacin y la formacin mdica.
Palabras Clave; microscopio, clulas, epitelios, reactivos, colorantes, estructuras celulares, laboratorio, preparaciones frescas,
tinciones.
ABSTRACT
Introduction. The key to progress in the study of cell instrument is a microscope; an optical mechanical instrument of very small
"larger" objects, so this study is necessary to know the cellular functions and to know that we are seeing through this. Objectives.
Practice management and care properly microscope to observe optimally, cellular structures from different organisms and
microorganisms. Hypothesis. If you know the correct method of use of photonic optical microscope, elaborate preparations and add
various dyes, then, we can see different types of cell preparations with which we can observe the different compounds of the cell.
Materials and methods. Was used as the main instrument for observing different samples photonic light microscopy, in which we use
the carrot, onion and cork to distinguish the different parts of cells that can be observed thanks to the reagents applied to these.
Results. Some structures such as cell walls, membranes and nuclei, the aggregation of various reagents and stains were observed,
the observed caused to vary without reactant and reagent. Discussion. Laboratory different samples which were observed by light
microscopy photonic with actual increases of 100 and 400 in which it is added various reagents such as methylene blue, reagents
Gram stain and fresh preparations and 0.9% NaCl are prepared isotonic and hypertonic solution that could be made to look more
quality preparations and achieving see the parts of the cell, such as walls, membranes and nuclei. Conclusions. Although it has made
considerable progress in microscopy, all is said. In future, exactly as has been shown in the past, as technology advances instruments
and increasingly efficient techniques are implemented and new applications that will increase knowledge in the field of cell biology and
histology .. Perspectives. Microscopy has been evolving since the late twentieth century with the introduction of new resources that
have improved their practice. For example, using virtual microscope has reached a high level of maturity; it is a non ergia between
disciplines such as pathology, histology, medical informatics and image analysis. This technology has advanced many paradigms in
research, diagnosis, education and medical training.
Keywords; microscope, cells, epithelia, reagents, dyes, cellular structures, laboratory, fresh preparations, stains.
Fecha de entrega
2014-12-04

INTRODUCCION
Se define como microscopio cualquiera de los distintos tipos de instrumentos que se utilizan para obtener una imagen aumentada
de objetos minsculos o detalles muy pequeos de los mismos. (J. Navarro, 2011)
TIPOS DE MICROSCOPIOS
Microscopio compuesto
Microscopio ptico
Microscopio digital
Microscopio fluorescente
Microscopio electrnico
Microscopio de diseccin

MICROSCOPIO PTICO Y SUS TRES SISTEMAS: PTICO, MECNICO Y DE ILUMINACIN


Los microscopios fotnicos compuestos que se emplean actualmente tienen sus antecesores en los instrumentos pticos
desarrollados, en el periodo comprendido entre 1590 y 1610, por Hans (padre) y Zacaras (hijo) Janssen; quienes mediante el
tallado cuidadoso de lentes biconvexas construyeron los primeros microscopios compuestos (fig. microsc. 1).
A partir de esa poca, el microscopio es el instrumento ms utilizado en el estudio
de clulas y tejidos. Se fue perfeccionando, tanto en su parte ptica como en su
parte mecnica, gracias a los adelantos tecnolgicos aplicados a los
componentes antes mencionados. Se denominan compuestos porque la imagen
se forma mediante la utilizacin de tres sistemas de lentes, cada uno de ellos
constituidos por lentes convergentes y divergentes. Los sistemas de lentes son el
condensador, los objetivos y los oculares.
En la actualidad, el microscopio fotnico es un instrumento de uso cotidiano en
los laboratorios de investigacin y de diagnstico as como en las aulas de
enseanza de Biologa, Embriologa, Histologa, Microbiologa y Patologa.
COMPONENTES DEL MICROSCOPIO FOTNICO.
El microscopio fotnico compuesto est integrado por tres tipos de componentes:
COMPONENTES PTICOS: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los
prismas. Los tres primeros estn constituidos por sistemas de lentes positivos y
negativos.
Condensador: Es el componente ptico que tiene como funcin principal concentrar y
regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa (fig.
micros. 3)
Est formado por una o dos lentes convergentes que renen los rayos luminosos y los
orientan hacia la abertura central de la platina. Mediante un mecanismo de cremallera se
acerca o aleja de la platina. Tambin tiene incorporado un diafragma iris que regula la
entrada de luz Todo ello con la finalidad de concentrar la mayor cantidad de rayos
luminosos en el plano donde est situado el objeto a observar. La mayora de los
condensadores de los microscopios actuales tambin poseen una apertura numrica que
indica la cantidad de luz que puede
captar y luego enviar hacia la
preparacin.
Objetivos. Los objetivos estn considerados los elementos ms importantes en
la formacin de la imagen microscpica, ya que estos sistemas de lentes
establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene
para captar los detalles de la misma (poder de resolucin). Estn constituidos
tambin por un juego de lentes, en este caso, convergente y divergente, para
eliminar, en la medida de lo posible, una serie de aberraciones que afectaranla
calidad de las imgenes formadas.
Las lentes se disponen dentro de un soporte o camiseta de metal, en cuyo exterior estn inscritas una serie de anotaciones
numricas que indican, como se observa en la figura microsc.4: el aumento propio del objetivo, la apertura numrica, el tipo de

material con que estn tallados las lentes (de fluorita o semiapocromticos) o la calidad que tendrn las imgenes, al anularse en
la construccin de los objetivos, algunas aberraciones de las lentes (acromticos, apocromticos, aplanticos etc.)

o si se debe usar alguna sustancia de inmersin.


Los objetivos se fabrican para ampliar las imgenes de los objetos observados en diversos aumentos; as se tienen objetivos con
aumentos propios de 3.5 x, 4x, 10x, 25x, 40x, 65x y 100x. Algunos objetivos tienen alrededor de ellos una lnea coloreada que
indica a simple vista el aumento propio.
Los objetivos tambin se clasifican de acuerdo al medio que existe entre el objeto examinado y la lente frontal del objetivo. De
acuerdo a esta caracterstica son secos o de inmersin. Son objetivos secos aquellos que entre el objeto observado y el objetivo
solamente existe el aire; en cambio se denominan objetivos de inmersin aquellos que requieren que entre la preparacin y la
lente frontal del objetivo se coloque una sustancia lquida, sta puede ser agua, glicerina
o un aceite de inmersin, natural como el aceite de
cedro o aceites artificiales.
Otra clasificacin de los objetivos se refiere al tipo de correccin al que deben someterse las lentes con la finalidad de disminuir o
anular algunas aberraciones que se producen en las lentes, como las aberraciones cromtica, de curvatura de campo,
astigmatismo y de esfericidad. Dependiendo de las aberraciones corregidas los objetivos pueden ser:

Acromticos. Estos objetivos corrigen los rayos luminosos azules y rojos hacindolos coincidir en un solo plano focal. En
tanto que los otros rayos coloreados se forman en otro plano focal generando una imagen cuyos bordes se observan
levemente difusos (espectro luminoso secundario). Los objetivos de los microscopios de estudiante son acromticos.
Semiapocromticos. Se les conoce tambin como objetivos de fluorita, corrigen el espectro secundario dando como
resultado imgenes de bordes ms ntidos.
Por la alta capacidad que tienen para transmitir las radiaciones luminosas de onda corta, se les considera como los objetivos
ideales para microscopa de fluorescencia.
Apocromticos. En estos objetivos se hacen coincidir en un solo plano los rayos luminosos azules, rojos y verdes,
obteniendo as una imagen de bordes sumamente ntidos, pero la correccin de esta aberracin trae consigo la acentuacin
de otra, que es la de curvatura de campo, pues la superficie focal de la imagen es ligeramente curva, dando como resultado
que, al observar la imagen y tratar de enfocarla en la zona central del campo microscpico se desenfoca la zona perifrica y
viceversa.
Planapocromticos. Son los objetivos en los cuales se han corregido la mayor cantidad de aberraciones como la
cromtica, curvatura de campo, de esfericidad y de astigmatismo; por lo tanto se obtienen imgenes sumamente ntidas y el
campo microscpico aparece totalmente plano, enfocado en toda su extensin. Son los objetivos que generan imgenes con
mejor resolucin, es preferible usarlos cuando se desea obtener imgenes fotogrficas ( fotomicrografa).

ndice de refraccin: Se denomina as a la relacin existente entre la


velocidad de la luz en el aire y su velocidad en el medio transparente
utilizado. De la misma manera, se pueden obtener los ndices de refraccin
de una serie de sustancias que se utilizan en la construccin y tallado de las
lentes de los objetivos.
Angulo de apertura: Es la capacidad de un objetivo de captar los rayos
luminosos refractados cuando stos atraviesan un medio transparente.
Cuanto mayor sea este ngulo, la lente frontal del objetivo aceptar una
mayor cantidad de ellos (fig. micros. 5).
Apertura numrica (NA): Es una medida que indica la capacidad del objetivo
de poder captar los rayos refractados por las estructuras finas de las cuales est constituido el objeto que se observa. Esta
capacidad se traduce en el poder 5 del microscopio de formar imgenes que muestren al observador una serie de detalles del
objeto que se est examinando. Cuanto mayor sea la apertura numrica de un objetivo, ste tendr una mayor capacidad de
mostrar detalles finos en la imagen que forma.
Aumento de un objetivo. Es la capacidad que posee un objetivo de ampliar la imagen del objeto observado. Se define como la
relacin entre el tamao de la imagen y el objeto, en valores lineales (largo y ancho).En la relacin anterior, un objetivo que tiene
grabado en la camiseta la cifra 10x aumentar 10 veces el tamao de la imagen del objeto examinado.
Poder de resolucin. Se define as la capacidad de un objetivo de poder distinguir la distancia mnima que debe existir entre dos
puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados. La calidad de una imagen, en la que se observe la
claridad, nitidez y la riqueza de detalles, depende del poder de resolucin del objetivo.
El poder de resolucin (PR) de un objetivo depende de la longitud de onda () del rayo luminoso utilizado y la apertura numrica
del sistema ptico del objetivo.
.
OCULAR.
Es otro componente ptico del microscopio, debe su nombre porque la imagen final se observa a travs de l acercando el ojo a la
lente ocular del componente.
Es el encargado de formar una segunda imagen a partir de la imagen primaria que forma el objetivo. La imagen del ocular es de
mayor tamao, virtual y derecho. Esta imagen nicamente ampla un nmero determinado de veces (5x,
8x, 10x, 12x) a la imagen formada por el objetivo. No aade, por ms aumentos propios que posea, ningn detalle a los generados
por el objetivo.
En la generalidad de los casos, los oculares estn construidos por dos lentes convergentes (planos convexos).

La primera lente se denomina de campo o frontal, est situada en la parte anterior del ocular (fig. micros.8) y, es la encargada de
recoger y ampliar la imagen generada por el sistema de lentes del objetivo. La lente posterior, en contacto estrecho con el ojo del
observador, se denomina lente ocular y es la responsable de aumentar nuevamente la imagen y orientarla hacia el ojo del
observador
Los oculares se clasifican, dependiendo de la disposicin de las lentes y del diafragma, dentro de la camiseta metlica que los
contienen, en:
Oculares negativos de Hygens. Estn constituidos por dos lentes plano
convexos, con la superficie convexa dirigida hacia abajo. Entre ambos se sita
un diafragma anular, localizado en el plano focal de las lentes. En este
diafragma se puede adherir un puntero o sealador que suele ser elaborado por
una pequea porcin de una pestaa o pelo.
Oculares positivos o de Ramsden. Las lentes plano convexas estn dispuestas
con las superficies curvas dirigidas hacia adentro. El diafragma est situado por
debajo de la lente de campo o frontal; en el plano donde se forma la imagen
formada por el objetivo. Adems de estos oculares, existen otros tipos como los
de campo de visin amplia; aquellos acondicionados para poder observar con los anteojos puestos y otros oculares que
generalmente que se usan en los microscopios binoculares, denominados oculares de compensacin. stos consisten en que uno
de ellos posee un sistema de lentes mviles que permite enfocar correctamente la imagen del objeto, despus que el enfoque total
del microscopio se ha realizado y se nota an una imagen levemente desenfocada en uno de ellos, generalmente el izquierdo,
porque al observar la imagen a travs de cada ocular derecho e izquierdo se nota que una de ellas no est enfocada
correctamente.
PRISMAS. En los microscopios modernos monoculares o binoculares, se requiere el empleo de prismas, estructuras transparentes
que, en el caso de los microscopios monoculares,
sirven para desviar los rayos luminosos de la trayectoria rectilnea del eje ptico del objetivo y dirigirlos hacia el tubo ptico
ligeramente inclinado y luego hacia el ocular.
En los microscopios binoculares, los prismas separan los rayos luminosos provenientes del objetivo, en dos haces de luz y los
dirigen a cada ocular. En ambos casos existe siempre una superficie reflectante para evitar la descomposicin de la luz.
E) COMPONENTES DE ILUMINACIN: Se consideran dentro de este grupo a los instrumentos que proporcionan energa
luminosa al microscopio. Las fuentes de energa luminosa son de dos tipos natural y artificial.
La luz natural, emitida por el sol, se obtiene de manera indirecta mediante un espejo que posee una superficie plana y otra
cncava. El espejo est situado en la superficie superior de la base o pie. Un
mecanismo especial permite
orientarlo hacia un lugar iluminado indirectamente por el sol (una ventana, por
ejemplo) y luego dirigir el haz luminoso hacia la lente del condensador.
La luz artificial se genera a travs de una lmpara de bajo voltaje (generalmente de
6 voltios) que, mediante un reostato regula la emisin y la intensidad de luz. Al
igual que el espejo, este sistema de iluminacin se inserta en la base o pie del
microscopio.7
En los microscopios que poseen un espejo, por carecer de una fuente de luz
incorporada, tambin se puede emplear la luz artificial emitida por una lmpara que
proyecta el haz luminoso de la misma manera como se orienta la superficie
reflectante del espejo cuando se ilumina el microscopio con luz natural.
FILTROS. En diversas partes del recorrido de haz luminoso, aunque en la mayora
de los casos se sitan entre la fuente luminosa y el condensador. Tienen por
finalidad modificar la longitud de onda de la luz que ilumina el objeto
a observar. Por ejemplo, cuando se utiliza Son estructuras transparentes (de vidrio, plstico o gelatina) coloreadas que se localizan
luz artificial es necesario emplear filtros azules pues modifican el color ligeramente amarillento que poseen los rayos luminosos
que emite las lmparas elctricas, transformndolos en rayos de luz blanca. Este color de luz es ms aceptada por la retina y en
las preparaciones histolgicas coloreadas mejora facilita la rendicin de color de las estructuras celulares o tisulares examinadas.
Para ciertos casos de microscopa fotnica especial se requiere el auxilio de filtros especiales como en el caso de los microscopios
de fluorescencia, contraste de fases y de polarizacin.Dependiendo del fabricante y de los modelos de microscopios, los filtros se
colocan en anillos o dispositivos especiales denominados portafiltros que, en el caso de los microscopios fotnicos de campo
claro (de uso ms frecuente), estn situados inmediatamente encima de la fuente luminosa o debajo de la lente frontal del
condensador.
Aumento total del microscopio fotnico compuesto. El aumento total de la imagen del microscopio compuesto se obtiene
multiplicando el aumento propio del objetivo por el aumento propio del ocular:
PODER DE PENETRACIN O DE PROFUNDIDAD
DE CAMPO. La imagen que se forma a travs del microscopio proviene de un objeto sumamente delgado (5 m a 10 m de
grosor), que genera varios planos de imgenes: profundos, intermedios y superficiales.

Cuando se examina un tejido con objetivos de bajos aumentos 4x 10x la imagen que se observa puede enfocarse con facilidad
con el tornillo macromtrico, sin que se diferencien los planos de enfoque antes mencionados, pero cuando la imagen se forma al
emplear objetivos de 40x y 100x, es necesario utilizar el enfoque fino a travs del tornillo micromtrico, pues es mucho ms

evidente que si enfocamos el plano superficial, es probable que al ascender levemente la platina por accin del micromtrico
logremos enfocar y visualizar con nitidez el plano focal medio o el profundo.

Distancia libre de trabajo. Se denomina as a la distancia que existe entre la superficie de la laminilla cubreobjetos y la lente frontal
del objetivo. Esta distancia ser mayor cuanto menor sea el aumento propio del objetivo y viceversa.

FORMACIN DE LA IMAGEN A TRAVS DEL MICROSCOPIO FOTNICO.


La imagen total del microscopio fotnico se forma mediante las imgenes que generan sucesivamente el objetivo y el ocular. Para
que se forme una imagen del objeto observado es indispensable que por lo menos dos rayos luminosos que inciden en el objeto
iluminen una porcin del mismo. Tal como se observ en los casos de formacin de imgenes, un punto iluminado del objeto
trasmite dos rayos luminosos: uno, orientado paralelamente al eje principal, se refracta al atravesar la lente del objetivo, en tanto
que el otro se traslada en direccin oblicua hacia el centro ptico de la lente y la atraviesa sin refractarse. En el lugar donde los
dos rayos luminosos se interceptan se formar la imagen del punto iluminado. Si del objeto se trasmiten dos rayos luminosos por
cada punto que lo constituyen igual nmero de puntos luminosos formarn la imagen. Con la diferencia que la imagen ser
ampliada N nmero de veces correspondiente al aumento propio que posea el objetivo.
COMPONENTES MECNICOS: Son aquellos que sirven de sostn, movimiento y sujecin de los sistemas pticos y de
iluminacin as como de los objetos que se van a observar. stos se muestran en la imagen del microscopio de la figura microsc.
2:
Base o pi. Es un soporte metlico, amplio y slido en donde se apoyan y sostienen
los otros componentes del microscopio.
Brazo, estativo o columna. Permite la sujecin y traslado del microscopio. Soporta al
tubo ptico, a la platina y el revlver.
Platina. Superficie plana de posicin horizontal que posee una perforacin circular
central. En ella se apoya la preparacin (lmina portaobjetos que contiene a la muestra
que se va a examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un carrito o
charriot que, mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la preparacin de
derecha a izquierda y de adelante hacia atrs.
Tubo ptico. Consiste en un cilindro metlico que suele medir 160mm o 170 mm de
longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual en
un extremo, est conectado al revolver o porta objetivos y en el otro se relaciona con el
(los) ocular(es).
Revolver o porta objetivos. Es un componente que gira alrededor de un eje con la finalidad que los objetivos que sostiene
coincidan de manera perpendicular con la perforacin central de la platina. En su superficie
inferior posee varios agujeros donde se atornillan los objetivos.
Tornillos macro mtrico y micromtrico. Generalmente estn situados en la parte inferior del brazo o columna. Pueden estar
separados (en los microscopios antiguos) o el tornillo micromtrico est incorporado en la circunferencia del tornillo macro mtrico
(microscopios actuales). Ambos tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de
acercar o alejar la preparacin hacia los objetivos y as conseguir un enfoque ptimo de la imagen.
El macro mtrico produce desplazamientos evidentes y rpidos de la platina, en cambio el tornillo micromtrico produce
movimientos imperceptibles de
la platina y sirve para efectuar el enfoque fino y definitivo de la imagen. En la actualidad los microscopios tienen incorporados a los
mecanismos de desplazamiento de los tornillos macro y micromtricos, topes de seguridad que impiden que stos continen
descendiendo indefinidamente y as se evita roturas y
daos a la laminilla y a las lentes de los objetivos.
Engranajes y cremallera. Constituyen mecanismos de desplazamientos de las diferentes partes del microscopio.
Cabezal. Es un componente situado en relacin con el tubo del microscopio que alberga principalmente prismas o espejos que
sirven para acondicionar en l dos o ms oculares, o sistemas mecnicos que soportan cmaras
fotogrficas, de vdeo o sistemas de proyeccin
de la imagen.
Qu es un microscopio Estereoscpico?
Tambin llamado "microscopio de diseccin", es un microscopio que utiliza dos objetivos y dos
oculares que permiten ver un espcimen bajo ngulos por los ojos humanos formando una visin
ptica de tercera dimensin.

Preparacin de muestras para microscopa ptica


El objetivo de la preparacin de muestras para microscopa ptica es permitir que las estructuras de los materiales se revelen con
suficiente contraste de modo que las caractersticas de inters sean descritas, grabadas y caracterizadas en detalles visibles a una

escala menor que la agudeza visual del ojo humano. La escala ltima de observacin estar limitada por la resolucin del sistema
de imagen del microscopio.
Criterios en las tcnicas de preparacin
Asegurar que la muestra a observar es
representativa del material, objeto u organismo de procedencia que se desea estudiar.
Hacer que las caractersticas de inters sean accesibles al sistema de imagen del microscopio.
Cuando sea necesario, aumentar el contraste entre los elementos estructurales de los materiales y el fondo.
Proporcionar las condiciones suficientes para la estabilidad de las muestras, y suficiente significa proteger las muestras de
decaimiento, degradacin, corrosin o contaminacin dentro de
la escala de tiempo de la observacin.
Ajustar la muestra a los requisitos pticos del sistema de imagen del microscopio para proveer de las condiciones ptimas de
contraste y resolucin, y evitar artefactos pticos que pudieran aparecer y que oscureceran la imagen o incorporaran falsos
detalles.

Los objetivos de esta prctica consistieron en;


Practicar el manejo y cuidados del microscopio.
Observar una estructura de corcho.
Observar e identificar diferentes tipos de algas en cultivo sin y con tincin.
Observar e identificar diferentes protozoarios en cultivo sin y con tincin.
Observar e identificar los diferentes tejidos en la raz de una zanahoria con y sin tincin de lugol.
Observar el epitelio de la mejilla interna y el fenmeno de osmosis en el epitelio una cebolla.

HIPTESIS
Si conocemos el mtodo del uso correcto del microscopio ptico fotonico, elaboramos preparaciones y agregamos
diversos colorantes, entonces, podremos observar preparaciones celulares de distintos tipos con los cuales podremos
observar las diferentes compuestos de las clula.
MATERIALES Y MTODO
Materiales

Palillos
Portaobjetos y cubreobjetos
Microscopio fotonico compuesto
Pipetas Pasteur

Especialmente biolgicos

Corcho
Cultivo de levaduras
Cultivo de algas
Cultivo de protozoarios

Procedimiento
1)

Elaboramos con cter de un filo un corte lo ms delgado posible al corcho. Observamos las paredes
celulares, tal como lo hizo R.Hooke. esquematizamos y elaboramos al menos 2 esquemas, anotando los
aumentos reales con los que se observo y nombres en las partes de la muestra observada.

2)

Elaboramos una preparacin fresca de cultivo de protozoarios. Observamos primero sin teir y despus
teimos de azul de metileno. Elaboramos 4 esquemas; 2 sin teir con aumentos reales y con nombres; 2 con
tincin donde utilizamos (colorante) y anotamos finalmente los aumentos reales y nombres.
3)
Elaboramos una preparacin fresca del cultivo de algas. Observamos primero sin teir y despus teimos
con azul de metileno, elaboramos 4 esquemas; 2 sin teor con aumentos reales y con nombres; y 2 con tincin
donde utilizamos (colorante) y anotamos finalmente los aumentos reales y nombres
4)
Elaboramos una preparacin fresca de epitelio o mucosa del interir de la mejilla. Para esto raspamos
suavemente con un palillo el interior de la mejilla de una de nuestras compaeras y vaciamos el producto del
raspado en una gota colocndola sobre un portaobjetos, colocamos el cubreobjetos y observamos las

5)
6)
7)
8)
9)
10)
11)

12)

Membranas celulares, el ncleo y el citoplasma, anotamos nuestras observaciones con esquemas a colores.
Observamos primero sin teir y despus tiendo con azul de metileno, elaboramos 4 esquemas; 2 sin teir con
2 aumentos reales y con nombres, y 2 con tincin de azul de metileno con 2 aumentos reales y con nombres.
Elaboramos una preparacin fresca de epitelio o mucosa del interior de la mejilla de una compaera
Observamos la primera preparacin fija que se nos indicio durante la primera sesin y elaboramos 2
esquemas con aumentos reales diferentes.
Observamos la segunda preparacin fija que se nos indicio durante la primera sesin y elaboramos 2
esquemas con aumentos reales diferentes.
Ahora elaboramos una preparacin fresca de epitelio de Elodea sp, y anotamos nuestras observacin con
esquemas a colores y dos aumentos reales.
Elaboramos una preparacin fresca que obtuvimos con el micrtomo para vegetales un corte de lo ms
delgado de la raz de zanahoria y anotamos nuestras observaciones con esquemas a color y dos aumentos
reales.
Observamos el fenmeno de osmosis
Elaboramos un preparacin fresca de epitelio de cebolla utilizando NaCl 0.9%, observamos las paredes
celulares de la membrana, el ncleo y anotamos nuestras observaciones con esquemas a colores.
Ahora elaboramos una preparacin fresca de epitelio de cebolla utilizando solucin salina concentrada (sol,
hipertnica). Observamos lo que pasa con las paredes celulares en la membrana y el nucleo, anotamos
nuestras observacin con esquemas a colores
Ahora elaboramos una preparacin fresca de epitelio de cebolla utilizando agua deionizada (sol, hipertnica)
observamos lo que pasa con las paredes celulares la mebranas y el nucleo, y anotamos nuestras observacin
con esquemas a colores

RESULTADOS

DISCUSIN
Elaboramos con cter de un filo un corte lo ms delgado posible al corcho. Observamos las paredes celulares, tal
como lo hizo R.Hooke, Donde primero se enfoco el microscopio a un aumento real a 50 y despus de tenerlo bien
ubicado se aumento a 400, se observaron los micro espacios que hay en el corcho y como si tiene un gran parecido
con lo que hoy realmente conocemos como clula.
Elaboramos una preparacin fresca de cultivo de protozoarios. Observamos primero sin teir y despus teimos de
azul de metileno. De los cuales elaboramos 4 esquemas; 2 sin teir con aumentos reales, primero lo observamos con
un aumento real de 50 y ya tenindolo bien enfocado se aumento a 400, todo eso sin tincin, donde se observo que
los protozoarios se movan libremente por la muestra preparada y finalmente a esas mismas muestras se elaboraron
2 con tincin donde utilizamos azul de metileno, donde observamos que con el azul de metileno, fueron exterminados
los protozoarios porque este es el efecto que produce este colorante como desinfectante..
Elaboramos una preparacin fresca del cultivo de algas. Observamos primero sin teir los cloroplastos de estas,
donde primero se enfoco con un aumento real de 100 y finalmente para observar con mas detalle a 400 y despus
teimos con azul de metileno donde elaboramos 4 esquemas; 2 sin teir con aumentos reales y con nombres; y 2 con
tincin donde utilizamos (colorante) y anotamos finalmente los aumentos reales y nombres
Elaboramos una preparacin fresca de epitelio o mucosa del interior de la mejilla. Para esto raspamos suavemente
con un palillo el interior de la mejilla de una de nuestras compaeras y vaciamos el producto del raspado en una gota
colocndola sobre un portaobjetos, colocamos el cubreobjetos y observamos las membranas celulares, el ncleo y el
citoplasma, anotamos nuestras observaciones con esquemas a colores. Observamos primero sin teir y despus
tiendo con azul de metileno, elaboramos 4 esquemas; 2 sin teir con 2 aumentos reales y con nombres, y 2 con
tincin de azul de metileno con 2 aumentos reales y con nombres.
Elaboramos una preparacin fresca de epitelio o mucosa del interior de la mejilla de una compaera, en el cual se
observo con el microscopio ptico fotonico, primero con un aumento real de 100 posteriormente se observo a 400, al
ser de una compaera pudimos observar el corpsculo de Barh, el cual solo poseen las mujeres de igual manera se
le agregaron 2 gotas de azul de metileno el cual nos permiti ver con mayor calidad esta muestra.
Observamos la primera preparacin fija de bacterias por el microscopio ptico fotonico gram negativas primero con un
aumento real de 100 y posteriormente a 400 que las distinguimos como gram negativas al teirse de color morado por
medio de la tincin de Gram.
Ahora elaboramos una preparacin fresca de epitelio de Elodea sp, la cual se observo con el microscopio ptico
fotonico primero a un aumento real de 100 y despus a 400, en el primero se observaron una serie de estructuras
bien organizadas, la cual eran divididas por la raz, las series que se observaron, eran la pared del epitelio de la
ceboa.
Elaboramos una preparacin fresca que obtuvimos con el micrtomo para vegetales un corte de lo ms delgado de la
raz de zanahoria obteniendo pequeos fragmentos de la pared celular de la zanahoria, en la cual se observo a travs
del microscopio ptico fotonico .
Observamos el fenmeno de osmosis, elaborando preparaciones frescas del epitelio de la ceboa agregando
diferentes reactivos como NaCl 0.9%, solucin salina, y finalmente agua desionizada. Que alteraban la forma en la
que se observaban estas diferentes muestras, que como caracterstica principal observamos que tenan una pared
muy organiza en forma de redes que se observan como escamas, en las cuales de igual manera se observaban
gracias estos las membranas y el ncleo de un color ms fuerte, el cual nos indicaba que la aglomeracin de color.

CONCLUSIONES.
Las limitaciones para el estudio de las clulas y tejidos han sido superadas a lo largo del tiempo gracias al desarrollo
tecnolgico que ha permitido la construccin de instrumentos de laboratorio, tales como el microscopio, el cual
permite la observacin y obtencin de imgenes aumentadas de esos especmenes diminutos, que a simple vista
resultan invisibles.
El microscopio ha sido y ser el instrumento de mayor utilidad en el estudio de las clulas y tejidos.
Para resaltar los detalles de los especmenes, adems de las coloraciones se han creado microscopios especiales
para tal fin, permitiendo adems la observacin de clulas vivas, con las ventajas que esto trae consigo. El poder de
aumento de los microscopios se ha perfeccionado al conocer los mecanismos involucrados en la formacin de las
imgenes, modificando en los instrumentos algunos elementos tales como el tipo de iluminacin, el sistema ptico o
el mtodo para obtener las imgenes, logrando incrementar la resolucin de los instrumentos. Actualmente pueden
verse desde elementos ultraestructurales cuyas dimensiones estn en el orden de las micras, hasta elementos
atmicos de dimensiones nanomtricas.
An cuando se ha logrado un progreso considerable en la microscopa, no todo est dicho. En el futuro, tal cual como
se ha demostrado en el pasado, a medida que avance la tecnologa se implementarn instrumentos y tcnicas cada
vez ms eficientes y con aplicaciones novedosas que permitirn incrementar los conocimientos en el mbito de la
biologa celular y la histologa. Cada vez son ms frecuentes los nuevos aportes que sorprenden a los interesados en
el tema y debido al gran y constante incremento en la informacin es casi imposible estar al tanto de todo, a pesar del
fcil acceso a internet, que en los ltimos aos se ha convertido en la base de datos ms grande que existe. La
microscopa seguir evolucionando.
PERSPECTIVA
La Microscopa ha estado en constante evolucin desde finales del siglo XX, con la introduccin de nuevos recursos
que han mejorado su prctica. Por ejemplo, el uso del microscopio virtual ha alcanzado un alto nivel de madurez; se
trata de una sinergia entre disciplinas como la patologa, histologa, la informtica mdica y anlisis de imgenes.
Esta tecnologa ha avanzado muchos paradigmas en la investigacin, el diagnstico, la educacin y la formacin
mdica. Los sistemas de microscopa virtuales requieren la digitalizacin de una diapositiva fsica, utilizando
microscopios motorizados, procesamiento de imgenes pre y post, compresin, transmisin y visualizacin. La
microscopa virtual ha comenzado a utilizarse ampliamente en educacin y formacin mdica, segundas opiniones,
procesamiento y anlisis de imgenes, actividades diagnsticas e investigacin biomdica, y se han convertido en
una herramienta potencial en telepatologa.
REFLEXIONES CRTICAS ACERCA DE LA PRCTICA
Esta prctica nos ha permitido conocer el uso correcto del microscopio el cual a futuro si nos dedicamos a cualquier
rea relacionada con la salud, es fundamental el uso de este, de igual manera es indispensable conocer la tcnica de
preparacin de muestras para la observacin de estos, y por tanto nos ha dejado satisfechos esta prctica, adems
de tratar de mejorar cada vez y buscar en fuentes cada vez ms complejas, variadas y fiables , lo cual no permitir en
algn futuro en cualquier rea realizar un investigacin de cualquier ndole de manera ms que correcta, esta prctica
nos deja repetimos con un buen sabor de boca.
CUESTIONARIO
1. DESCRIBA CULES SON LOS PASOS PARA EL ENFOQUE CON EL MICROSCOPIO FOTNICO COMPUESTO
DE CAMPO CLARO.

Coloque el objetivo de menor aumento (10x) en su posicin de enfoque (se siente un click)
Regular la intensidad de la luz moviendo la palanca del diafragma para obtener la cantidad correcta de luz.
Coloque la preparacin sobre la platina, procurando que la muestra quede al mismo nivel del orificio de la
platina, sujeta el portaobjetos con las pinzas.
Viendo el microscopio lateralmente usa el tornillo micromtrico para subir poco a poco la platina hasta que el
objetivo llegue el tope o hasta que se encuentre aprox. A 2 ml de la preparacin.
Observando por el ocular, bajar de manera gradual la platina hasta que se logre ver la preparacin.
Al observar la muestra, si el enfoque no es claro, mover lentamente el tornillo micromtrico hasta obtener
una nitidez total.

2. DESCRIBA CULES SON LOS PASOS PARA EL ENFOQUE CON EL MICROSCOPIO DE DISECCION

Sirve para observar organismos multicelulares sin preparacin previa.


Regular la intensidad de la luz con una lmpara externa al microscopio.
Coloque la muestra sobre la platina.
Viendo el microscopio lateralmente usa el tornillo micromtrico para bajar poco a poco los lentes hasta que
se logre ver la muestra.

Al observar la muestra, si el enfoque no es claro, mover lentamente el tornillo micromtrico hasta obtener
una nitidez total.

3. INDIQUE LAS DIFERENCIAS ENTRE: MICROSCOPIO OPTICO FOTONICO COMPUESTO CON EL


MICROSCOPIO DE DISECCION.El microscopio estereoscpico permite la formacin de imgenes 3D mientras que
el microscopio fotonico permite obtener aumentos de hasta 1000 veces del tamao original de la muestra.
4. DESCRIBA CUALES SON LOS CUIDADOS QUE SE DEBEN TENER CON EL MICROSCOPIO.
Hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, cuando no se est utilizando el
microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes; nunca hay
que tocar las lentes con las manos; no dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con
pauelos especiales para ptica o con papel de filtro; no forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio; no
cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del
ocular; mantener seca y limpia la platina del microscopio.
5. DESCRIBA LA IMPORTANCIA DE LOS DIFERENTES TIPOS DE MICROSCOPIOS PARA EL AVANCE DE LA
CIENCIA Y LA TECNOLOGIA
Sin el microscopio no se hubieran podido descubrir las vacunas y ms de la mitad de la poblacin mundial estara
muerta, adems de que la gente es ms longeva gracias a los descubrimientos de cmo funcionan las clulas y la
bioqumica en el cuerpo humano. La mayora de la tecnologa moderna se debe gracias a que se utiliz el
microscopio para corroborar a pequea escala los procesos que nos han permitido vivir en esta era de la vida
moderna. El mismo tomo no se hubiese podido descubrir sin esto. Muchos cientos de millones de personas se
salvan gracias a la microciruga, cuya base es el microscopio. Y por ltimo, todos los descubrimientos de la medicina
son gracias al microscopio, tanto para descubrirlos o confirmarlos.
6. DESCRIBA LAS DIFERENCIAS QUE REGISTRO ENTRE LAS DIVERSAS PREPARACIONES QUE OBSERVO.
Observamos que las preparaciones sin teir solo se podan ver su forma ms bsica y teidas podamos distinguir
algunos de sus ncleos y algunos otros organelos. Tambin pudimos ver que evidentemente con el lente de mas
aumento en este caso 40x, se pueden ver mucho mejor las distintas muestras de las diversas preparaciones. las
distintas muestras de las diversas preparaciones.
7. ELABORE UN ESQUEMA DE CELULA PROCARIONTE TIPICA Y UNA DE EUCARIONTE TIPICA
CELULAS
EUCARIONTAS

PROCARIONTAS

ADN no encerrado en una


membrana celular (nucleoide)

Organelos

Membrana plasmtica,
citoplasma, citoesqueleto,
ncleo, nuclolo, retculo
endoplasmico (liso, rugoso),
ribosomas, mitocondrias,
complejo de Golgi, lisosomas,
centriolos, vesculas, flagelos,
cilios.

ADN encerrado en una


membrana nuclear.

Organelos

RMP H PA
EOR OLN
N O N
E T G
R I O
A S S
T Capsula, pared celular, membrana
Aplasmtica, citoplasma, nucleoide,
flagelos, pili o pelos, mesosoma,
ribosomas.

8.

Pared celular, vacuola central,


plastos: cloroplastos,
leucoplastos, cromoplastos,
amiloplastos y oleoplastos.

INDIQUE LAS DIFERENCIAS ENTRE LAS CELULAS DE LOS REINOS: MONERA,


PROTISTA, ANIMAL, VEGETAL Y HONGOS.
U
n
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9. ELABORE ESQUEMAS INDIVIDUALES INDICANDO CADA UNA DE LAS


ESTRUCTURAS Y FUNCIONES DE LAS CELULAS DE: EUBACTERIAS,
ARQUEOBACTERIAS, PLANTAS, HONGOS Y ANIMALES.

Carecen de
mureina
Estremofilas
ARQUEOBACTERIA
S

Membrana
plasmtica
formada por
lpidos

P
r
o
c
a
r
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o
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s

Nucloide
E E
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c c
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y
r Mesosomas
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ribosomas
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H
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t
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o
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o
H H s
e e

Algunas no tienen pared


celular.

Delimita al citoplasma, transporta slidos y fluidos,


reconocimiento e interaccin con componentes qumicos y
biolgicos del ambiente y con otras clulas, protege a la clula
Formado por una sola cadena de doble hlice de ADN asociado a
protenas no histonas.
Invaginaciones de la membrana que se ubican cerca de la zona
de la divisin celular y aumenta la superficie; y ribosomas: Sitio
donde se ensamblan los aminocidos para formar protenas.

BIBLIOGRAFA
http://www.leicamicrosystems.com/fileadmin/downloads/Leica%20BM%20E/Brochures/Leica_Theory_of_the_microscope_RvA-Booklet_ES.pdf
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos%20en%20Linea/Apuntes/2_microscopia.pdf
http://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf
Medical Microbiology, jawets, melnick, & adelbergs, edicin 26