U.

D 5

RECOGIDA, PREPARACIN Y CONSERVACIN DE LAS MUESTRAS

DEL APARATO URINARIO

MUESTRAS DEL APARATO URINARIO

Las muestras de orina se han descrito como una biopsia lquida de los tejidos del
tracto urinario obtenida de forma indolora. Se trata de un material que permite obtener
una considerable informacin de forma rpida y econmica cuyo anlisis es un
procedimiento muy til para el mdico como indicador de salud o de enfermedades
especialmente en casos de trastornos renales. El estudio de muestras de orina puede
plantearse desde 2 puntos de vista:
-Diagnstico y tratamiento de enfermedades renales del tracto urinario.
-Detencin de enfermedades metablicas o sistemticas no relacionadas directamente
con el sistema urinario.
RECOGIDA
Para que el anlisis de orina tenga un significado este debe ser recogido
adecuadamente. La recogida incorrecta puede invalidar los resultados de los
procedimientos de laboratorios. La orina debe de recogerse en un recipiente limpio,
seco y estril. Se pueden utilizar recipientes desechables de plstico o de papel
reforzado irrompibles, con diferentes tamaos y provistos de tapones para cubrir la
muestra y evitar la contaminacin de la misma.
Hemos de observar ciertas precauciones como no dejar la muestra a temperatura
ambiente ni exponerla a la luz, analizar la orina cuanto antes en la primera hora
siguiente a la emisin y evitar la contaminacin bacteriana o de otro tipo.
Todo estos factores hacen variar la composicin de la orina. Los eritrocitos, leucocitos
y cilindros se descomponen cuando la muestra permanece varias horas a temperatura
ambiente.
La bilirrubina y el urobilingeno disminuyen cuando existe exposicin a la luz.
Las clulas y bacterias presentes en la orina utilizan la glucosa y las cetonas y la
contaminacin bacteriana alcaliniza la orina, elevan el pH provocando turbidez y
cambio de color y olor.
Adems tendremos en cuenta que la concentracin y composicin de la orina varia en
un periodo de 24 horas. La concentracin depende de la ingesta de agua del paciente
y de su actividad. Adems varios solutos pueden aparecer en mayor o menor cantidad
en determinadas horas del da: glucosuria despus de las comidas (metabolismo del
tomo de carbono), proteinuria despus de la actividad fsica. Incluso la presencia de
bacterias en la orina de un paciente con infeccin del tracto urinario vara a los largo
del da.
La tcnica de recogida presenta ciertas variaciones dependiendo del tipo de anlisis
que vamos a realizar.

TCNICAS RECOGIDA
Miccin espontanea: Normalmente se recoge el chorro medio (se descarta la primera
parte de la miccin) con una higiene previa en la zona para evitar la contaminacin de
la muestra. La recogida de la muestra es responsabilidad del paciente y se emplea
para realizar anlisis fsico-qumico, sedimento y creatinina.
Por medio de miccin espontanea se realiza una recogida para establecer de forma
aproximada el origen de las clulas y bacterias que se encuentran en la orina del
paciente varn. Los urlogos utilizan la tcnica de los 2 o 3 vasos. Se recoge los
2030 ml iniciales en un envase estril. La orina contiene elementos de arrastre uretral
junto a otros de origen vesical o renal. El resto de orina se recoge en un segundo
envase estril, encontramos clulas, bacterias, etc. procedentes de la vejiga, urteres
y riones pero muy pocos elementos uretrales. Si se emplean 3 vasos el paciente
interrumpe la miccin y recibe un masaje prosttico. La muestra recogida a
continuacin contendr lquido prosttico junto a elementos renales y vesicales.
Bolsa adhesiva perineal: En neonatos y nios pequeos lactantes sin control de
esfnteres.
Sondaje vesical: el sondaje es necesario en algunos pacientes cuando no puede
efectuar la miccin por si mismo, pero hay que tener en cuenta que cuando
introducimos una sonda en la uretra o en la vejiga existe el riesgo de producirle una
infeccin.
Cateterizacin uretral: los catteres uretrales se insertan mediante un cistoscopio por
cada meato uretral. Primero se recoge la orina vesical separadamente de cada pelvis
renal se etiqueta con izquierda o derecha y a continuacin una muestra de lavado
vesical, esta tcnica puede utilizarse para distinguir la infeccin de la vejiga de la del
rin.
Puncin-aspiracin suprapbica: se aspira la orina con jeringa y aguja por encima de
la snfisis del pubis y a travs de la pared abdominal hasta penetrar en la vejiga. La
muestra se obtiene directamente de la vejiga. Este mtodo se utiliza para cultivos
anaerbicos, cultivos problemticos en los que no es posible descartar la
contaminacin. Se suele realizar en recin nacidos, lactantes y nios pequeos que no
comtrolen la miccin correctamente. No suele presentar complicaciones.
RECOGIDA DE MUESTRAS
MICROBIOLGICO

PARA

EL

ESTUDIO

FSICO-QUMICO

La recogida de muestras para el estudio qumico y microscpico suele ser mediante

miccin espontanea. Si hay posibilidad de que la muestra se contamine por
secreciones vaginales o hemorragias puede ser necesario taponar la vagina,
especialmente si el estudio del sedimento urinario resulta crtico.
En general una orina ms concentrada es preferible a una ms diluida, por tanto la
primera orina de la maana es la ms adecuada para el anlisis ya que el paciente no
ha bebido agua durante las horas de sueo.

Por otra parte la recogida de una muestra aleatoria suele resultar ms cmoda para el
paciente y es utilizada en la mayora de las pruebas selectivas.
Recogida para el anlisis cuantitativo: para muchas pruebas se utiliza una muestra de
24 horas. Tambin se utilizan muestras de 2 a 12 horas; por ejemplo: para
urobilingeno, xilosa y recuento celulares cuantitativos.
Debido a que durante un periodo de 24 horas se excretan restos como hormonas,
protenas y electrolitos de una forma variable, la mejor forma de realizar una
determinacin vlida es utilizar la muestra de 24 horas. Los errores que se producen
en las pruebas cuantitativas se deben principalmente a problemas de recogida de la
muestra, como prdida de una de las muestras del da, mala conservacin, fallo en
descartar la primera muestra (primer chorro).
Siempre que sea posible en el periodo de recogida hay que restringir la ingestin de
lquidos y evitar la ingesta de alcohol, de ciertos alimentos y de frmacos. Se indica al
paciente que vace su vejiga a las 8 de la maana o en un momento adecuado al
levantarse y deseche la orina, todas las dems muestras deber ser recogidas incluso
la eliminada a las 8 de la maana del da siguiente. Se determina el volumen total de
esta muestra y se registra. Y a continuacin se mezcla por completo la orina antes de
proceder a retirar la muestra para su anlisis.
RECOGIDA DE MUESTRA PARA UROCULTIVO
En estos casos es preferible tomar una muestra de emisin limpia de la mitad de la
miccin. A veces es necesario llevar a cabo un sondaje o una aspiracin suprapbica
de la vejiga. Los cultivos bacteriolgicos deben sembrarse inmediatamente. Si ello no
es posible la orina se conservar a 4C, hasta el momento del cultivo durante un
periodo no superior a las 12 horas.
En el varn es preciso exponer adecuadamente el glande, limpiarlo con una solucin
antisptica suave y secarlo.
Si se trata de una mujer se le pedir que se acuclille o arrodille sobre un orinal o que
se mantenga de pie sobre este. La paciente o la enfermera separarn usando guantes
estriles los labios menores a fin de exponer el orificio de entrada y los mantendrn
separados durante toda la operacin. Se limpiar cada lado del meato urinario con
torundas jabonosas, enjuagando despus con torundas estriles empapadas en agua.
Es preciso recoger unos 30100 ml de orina.
MUESTRAS PARA CITOLOGA
Una recogida de orina a las dos horas tras desechar la primera miccin matinal
permitir obtener clulas frescas procedentes de la va urinaria as como cilindros.
Cuando se recoge orina para la valoracin de clulas tumorales se mezcla un volumen
igual de alcohol al 50% con fijador. La orina no fijada debe ser refrigerada
inmediatamente y enviada al laboratorio en el plazo de 1 hora para evitar destruccin
celular.

TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIN

Debe estudiarse muestras recientes de orina escogidas al azar, dentro de la primera
hora despus de la miccin o bien refrigerar la orina y estudiarla tan pronto como sea
posible. En general muchas de las sustancias que se determinan as como las clulas
y los cilindros se conservan mejor cuando la refrigeracin va acompaada de un pH
cido (pH = 6) mediante el empleo de conservantes.
Las determinaciones cuantitativas de creatinina y protenas sobre muestras de 24
horas se realizan manteniendo en refrigeracin y sin aadir conservantes.
La congelacin es til para tratar una parte que se van a usar para pruebas qumicas
cuantitativas, adems puede ayudar a retrasar la prdida de sustancias lbiles (que se
estropean rpido) tales como el urobilingeno, bilirrubina y el porfobilingeno.
A menudo se utilizan conservantes qumicos para la conservacin actuando aquellos
como agentes antibacterianos y antimicticos y algunos como los compuestos de
mercurio conservan las clulas. El conservante utilizado depender de la sustancia
que va a ser analizada y del mtodo que se ha de utilizar. Los ms habituales son:
cidos minerales, cido ascrbico, cido brico, cido benzoico, fenoles, timol,
tolueno, cloroformo, formol y compuestos de mercurio.
No deben emplearse estos conservantes cuando se va a realizar un estudio
bacteriolgico.
PROCESADO DE LA MUESTRA
El volumen de orina necesario depende del nmero de pruebas que hay que realizar
en el laboratorio En general bastan 2 ml, sin embargo es ms recomendable obtener
una muestra superior a 15 ml.
Si el volumen de orina es inferior a 2,5 ml de ordinario puede realizarse una prueba
mltiple con tiras reactivas determinacin de densidad, una prueba de reduccin del
cobre y de determinacin de bilirrubina. La orina puede estudiarse al microscopio y se
dan los resultados a partir de la muestra no centrifugada.
Con un volumen comprendido entre 310 ml se puede realizar una prueba de tiras
reactivas, determinacin de densidad, prueba de reduccin del cobre (de 2 a 5 gotas)
determinacin de bilirrubina (tabletas) y dilucin para los cuerpos cetnicos. A
continuacin se centrifuga 2'5 ml de orina para obtener 0'25 ml o 5 ml para obtener 0'5
ml para el estudio del sedimento.
En algunos casos pueden utilizarse cantidades de orina inferiores a 0'5 ml en busca de
determinadas sustancias.
Las muestras deben refrigerarse si no pueden estudiarse de inmediato pero antes de
utilizar tiras reactivas enzimticas es necesario que alcance la temperatura ambiente.
Las muestras deben estar libres de cualquier contaminacin fecal o vaginal y
adecuadamente identificadas. Si slo disponemos de una muestra la primera prueba
que hay que realizar es el examen selectivo de la bacteriuria, siempre que la muestra
haya sido recogida en un recipiente estril. Los mtodos alternativos comprenden

tincin de Gram de una muestra no centrifugada, procedimiento cuantitativo de cultivo

mediante asa con un minicultivo para lo que bastan 1 2 gotas de orina.
Se debe anotar color, aspecto y olor, sobre todo si son anormales.
Con una gota de orina puede determinarse la densidad con un refractmetro.
Empleando tiras reactivas podemos hacer estudios selectivos qumicos bsicos,
determinndose los siguientes parmetros: pH, protenas, glucosa, cuerpos cetnicos,
sangre, bilirrubina, urobilingeno, nitritos, esterasa leucocitaria y densidad.
Si no se emplea una tira reactiva, las tabletas ictotest para la determinacin de la
bilirrubina constituye un mtodo sencillo, sensible y de fcil interpretacin. Es
importante realizar la prueba de sustancias reductoras del cobre (azcares) en toda
muestra procedente de un nio de corta edad mediante el mtodo benedict o
utilizando una tableta clinictest. A continuacin la muestra debe centrifugarse en el
tubo desechable y separar el sobrenadante, que se refrigera, del sedimento. Se coloca
una gota de sedimento concentrado entre un porta y cubre para su estudio en busca
de hemates, leucocitos, clulas epiteliales, renales, cilindros o un nmero excesivo de
cristales.
Tambin puede estudiarse la muestra sin centrifugar en una cmara de recuento y
darse el resultado en forma de clulas por microlitro.
En el sobrenadante puede realizarse las siguientes pruebas:
-Prueba proteica de confirmacin
-Prueba de BenceJones
-Electroforesis
-Separacin de azcares mediante cromatografa si la prueba de reduccin de cobre
ha resultado positiva y la de glucosa oxidasa negativa.
-Determinacin de cido ascrbico, si se han detectado hemates y la prueba de la tira
reactiva para la presencia de sangre es negativa.
-Comprobar los resultados dudosos con bilirrubina con ictotest
-Confirmar el urobilingeno y el porfobilingeno
-Confirmacin de la presencia de cristales de cistina mediante una prueba cualitativa.
RESULTADOS
Antes de desechar cualquier muestra hay que revisar los resultados de los estudios
realizados para determinar si los obtenidos a partir del sedimento concuerdan con las
pruebas qumicas, color y aspecto y si todas las anomalas han sido confirmadas de
forma adecuada. Si se encuentran cristales raros u otros hallazgos inexplicables
deben obtenerse o contrastarse una lista de los frmacos que ha estado tomando el
paciente.

ESTUDIO FSICO-QUMICO Y MICROBIOLGICO DE LA ORINA

El anlisis de orina bsico comprende varios pasos:
1 Caractersticas organolpticas y fsicas: color, olor, sabor, turbidez, volumen y
densidad
2 Determinaciones bioqumicas:
-protenas
-glucosa
-cetonas
-hemoglobina, hemosiderina y mioglobina
-bilirrubina
-urobilingeno
-nitrito
-esterasa leucocitaria
Adems otros test especiales como el test de embarazo.
3 Examen microscpico del sedimento centrifugado:
-leucocitos
-eritrocitos
- clulas epiteliales: epitelio tubular renal y de vas urinarias inferiores
-cilindros
-cristales: en orinas fisiolgicas cidas alcalina y en orinas patolgicas
- bacterias, levaduras, espermatozoides, parsitos, contaminantes y artefactos.
4 Deteccin y semicuantificacin de la bacteriuria
Mtodo de placa de cultivo convencional
Test de nitritos y mtodos de tiras de cultivo.
Las tiras reactivas qumicas tratadas son muy tiles para determinaciones cualitativas
rpidas del pH urinario, glucosa, cetonas, bilirrubina, urobilingeno y hemoglobina. Se
utilizan rutinariamente en el anlisis de orina bsico sustituyendo a otros test antiguos
ms pesados. Adems se pueden conseguir otros tipos de test de tiras reactivas,
tabletas qumicas, portaobjetos selectivamente tratados o test de cultivo simplificados
para determinaciones especiales.

1 Caractersticas organolpticas y fsicas:

La primera observacin que normalmente se hace sobre una muestra de orina es
sobre su apariencia. Si se presta una cuidadosa atencin a los detalles y a la relacin
con experiencias pasadas se podrn obtener claves muy tiles para determinar la
presencia de muchas sustancias en la orina.
~ Volumen: el volumen normal de orina eliminado por un adulto en un periodo de 24
horas es de 750 a 2.000 ml, siendo el volumen medio de 1500 ml. Esta cantidad est
directamente relacionada con la ingestin de fluidos, la temperatura, el clima y sudor.
La medicin del volumen urinario se realiza vertiendo la muestra en una probeta
graduada obtenindose el volumen en mililitros. El volumen total es referido a la
unidad de tiempo, generalmente 24 horas.
La poliuria (emisin de orina en cantidades superior al promedio normal) es una
respuesta fisiolgica a grandes ingestas de fluidos, ingestas de medicamentos o de
bebidas diurticas, enfriamiento del cuerpo, nerviosismo, ansiedad y a la ingestin
intravenosa de fluidos. Aparece adems en varias enfermedades: diabetes mellitus,
diabetes inspida, enfermedades renales crnicas, ciertos tumores cerebrales y de
espina dorsal, acromegalia, mixedema, etc.
La oliguria es la disminucin del volumen urinario (menos de 200 ml en 24 horas).
Aparece fisiolgicamente causada por disminucin en la ingestin de fluido, ingerir
grandes cantidades de sal, por sudoracin excesiva, tambin es consecuencia de
vmitos, diarrea, fallo renal, nefritis, envenenamiento o insuficiencia cardiaca y
ocasionalmente se debe a la obstruccin mecnica del aparato urinario dificultando la
emisin de orina. Si hay una ausencia total de emisin de orina se denomina anuria.
~Caractersticas organolpticas:
A) Color: el color amarillo o mbar de la orina normal es debido a la presencia de un
pigmento amarillo llamado urocromo, as como de pequeas cantidades de urobilina
(producto del metabolismo de la bilirrubina) y uroeritrina (pigmento rosado
consecuencia de la precipitacin de uratos amorfos, aumenta con la refrigeracin). La
intensidad del color normal de la orina depende de su concentracin.
Este color cambia en muchas enfermedades debido a la presencia de pigmentos que
normalmente no aparecen en la orina, como:
1 pigmento biliares: color amarillo, amarillomarrn o grisceo
2 porfirinas: color marrnrojo
3 hemoglobina: color marrnrojizo
4 melaninas: marrnnegro
5 alcaptonuria: marrn oscuro, negro. Enfermedad producida por un trastorno del
metabolismo de los aminocidos tirosina y la fenilalanina.
Adems la orina puede tomar distintos colores segn la ingestin de ciertos alimentos
y drogas.

B) Olor: normalmente la orina tiene un olor ligeramente aromtico debido segn se

cree a la presencia de cidos voltiles. En orinas que han permanecido envasadas
cierto tiempo se desarrolla un olor amoniacal debido a la descomposicin de la urea de
la muestra.
La orina de pacientes con diabetes mellitus puede tener olor a fruta debido a la
presencia de acetonas.
Las infecciones del tracto urinario puede adquirir un olor desagradable, especialmente
si el organismo infeccioso es un bacilo coniforme. Ciertos alimentos como los
esprragos pueden causar un olor peculiar.
Como la orina tiene varios olores caractersticos este parmetro no es considerado de
especial utilidad diagnstica.
C) Turbidez: la orina normal, limpia y reciente es usualmente clara o transparente pero
puede tener apariencia turbia ante la presencia de fosfatos o carbonatos. Si la muestra
es alcalina esta turbidez desaparecer al acidificarse la muestra. Si es roscea puede
indicar la presencia de uratos. Una turbidez anormal aparece en la orina de pacientes
con infecciones del tracto urinario pero generalmente es debido a la alcalinidad ms
que al nmero de bacterias o leucocitos presentes.
~ Densidad: la densidad de la orina indica la relacin entre las proporciones relativas
de slidos disueltos y el volumen total de la muestra. La densidad mide la capacidad
del rin para concentrar o diluir la orina. La densidad normal de la orina vara de
1'0005 a 1'030 con una media de 1'010 a 1'025.
Los valores de densidad baja pueden ser debidos a diabetes inspida, glomrulo
nefritis, pelonefritis. La densidad alta a diabetes mellitus, insuficiencia renal,
enfermedades hepticas y fallo cardiaco congestivo.
Fisiolgicamente puede presentarse densidad elevada ante prdidas excesivas de
agua por sudor, fiebre, vmitos, diarrea
Otra posible alteracin consiste en la existencia de una densidad fija baja que indica
dao renal severo.
La osmolaridad de la orina es una medida de la concentracin ms exacta que la
densidad pues depende del nmero de partculas de soluto en una unidad de solucin
mientras que la densidad depende tanto del nmero como de la naturaleza de las
partculas. Esta medicin puede realizarse a travs de osmmetros.
Los mtodos analticos con los que contamos para la determinacin de la densidad
son:
1 Densmetro: es un instrumento en forma de bulbo que tiene un rabillo cilndrico con
una escala calibrada para la lectura de la densidad. El instrumento flotar en el
recipiente que contiene la orina hundindose hasta una cierta profundidad que indicar
su densidad. Esta se lee en la escala, en al unin o a nivel de la unin de la orina con
el aire.

2 Refractmetro: el ndice de refraccin de la orina est relacionado con la densidad

por ello las medidas del ndice de refraccin pueden sustituirse por las medidas de
densidad esto es especialmente til en muestras de poco volumen, ya que las
medidas pueden utilizarse con una gota de orina. El ndice de refraccin es la
medicin del valor de la velocidad de la luz en el aire con el de la velocidad de la luz
en la disolucin.
Esta relacin vara directamente con el nmero de partculas disueltas en la orina y
como tal vara con la densidad de la orina. El refractmetro es un instrumento manual
que est calibrado en trminos de densidad de ndice de refraccin y de total de
slidos contenidos. El instrumento se coloca en la fuente de luz y la respuesta se lee
inmediatamente en la escala calibrada localizada en la pieza ocular.
3 Tiras reactivas: la zona para la determinacin de densidad de la tira analtica
(multisticks) consta de 2 secciones:
* La denominada alma del mtodo es una polielectrolito
* La otra es un indicador de pH (Azul de bromotimol)
El polielectrolito contiene numerosos grupos carboxlicos que en solucin acuosa se
ioniza y se carga negativamente. En orinas de baja densidad el polielectrolito libera
pocos iones, el pH es alto y el indicador se encuentra en su forma azul alcalina. Si por
el contrario la densidad es alta el pH baja y el indicador aparece en la zona cida
amarilla.
2-Pruebas bioqumicas
A) pH urinario
Los riones y los pulmones son los rganos principales en la regulacin del equilibrio
corporal cidobase. Los riones regulan la excrecin de cidos no voltiles
producidos por el metabolismo tisular normal. La acidez de la orina se debe a la
presencia de fosfatos cidos y una pequea cantidad de cidos orgnicos: cido
pirvico, lctico y ctrico, excretados a la orina en forma de sales de sodio, potasio,
calcio y amonio (NH3). Los riones regulan la excrecin selectiva de varios cationes
para mantener el equilibrio cidobase reabsorbiendo una cantidad variable de iones
sdicos de los tbulo y secretando iones hidrgeno y amonio en intercambio. El pH en
orina es una medida de la concentracin de iones hidrgeno en ella. La orina normal
reciente de pacientes sometidos a dieta normales es cida con un pH de 6
aproximadamente.
Una orina excesiva cida puede ser excretada por pacientes con dietas altas en
protenas o medicacin con determinados frmacos; con acidosis y diabetes mellitus.
La orina alcalina se excreta frecuentemente despus de la comida como respuesta a
la secrecin del jugo gstrico. Tambin ocurre en individuos que consumen dietas
altas en vegetales, ctricos, leche, etc. Igualmente producen orina alcalina algunas
medicaciones (bicarbonato sdico) y algunas infecciones del tracto urinario.

La medida exacta del pH urinario se obtiene con muestras recientes ya que al

permanecer envasadas se alcaliniza debido a la prdida de hidrxido carbnico, o la
conversin de urea en amonio por accin de organismos bacterianos.
En anlisis de orina rutinarios el pH se mide con tiras de papel (papeles de nitracina).
Se pueden conseguir papeles para anlisis impregnados con productos qumicos para
determinaciones colormetras fciles y rpidas. Cuando se precisan medidas ms
exactas se utiliza un medidor de pH con un electrodo de cristal cerrado, previamente
estandarizado con 3 tampones de pH conocidos. La medida del pH es casi siempre
parte del anlisis de orina completo por lo que se utilizan tiras reactivas mltiples
(labstick o multistick) ya que es un sistema ms rpido y cmodo. La parte de cada tira
destinada al pH est impregnada con 2 indicadores separados que proporcionan un
amplio espectro de cambio de color (desde el naranja al verde o azul) con un pH de 5
a 9. La tira se humedece en la muestra de orina y el cambio de color se compara con
el modelo.
B) Determinaciones qumicas:
~ Protenas: normalmente la cantidad de protena excretada en orina es de 4080 mg
diarios considerndose normal el intervalo de 100150 mg. Aproximadamente 1/3 de
la protena urinaria es albmina y el resto son globulinas.
La proteinuria es un aumento anormal de la cantidad de protenas en orinas siendo
probablemente el indicador importante de una enfermedad renal. El tipo de protenas
excretadas en las enfermedades est generalmente relacionado con la protenas
srica, en casos graves las protenas excretadas son extractos sricos. Las protenas
pequeas son excretadas con ms frecuencia que las grandes. Ciertas enfermedades
estn caracterizadas por la excrecin de globulinas especficas.
La proteinuria intermitente es causada en la mayora de los casos por condiciones
fisiolgicas funcionales.
La proteinuria puede ser de varios tipos segn el origen de la misma:
-glomerular
-tubular
-por rebosamiento
-Bence-Jones
-ortosttica
-funcional
Un amplio nmero de test simples se pueden emplear para determinar la protena de
manera rutinaria adems de algunos mtodos semicuantitativos y cuantitativos. Para
la deteccin y cuantificacin de la albmina, globulina, protena de BenceJones y
otras protenas se utilizan mtodos especficos la mayora de estos mtodos a
excepcin de los test de tiras reactivas dependen de la precipitacin de protenas
como bases de determinaciones cuantitativas.

* Test colorimtrico de tiras reactivas: este test se basa en la propiedad de las

protenas de alterar el color de algunos indicadores cidobase sin cambiar el pH.
* Test de precipitacin semicuantitativos: estos mtodos resultan simples para la
determinacin semicuantitativas de protenas, destacan:
1 Mtodo por calor y cido actico
2 Mtodo del cido sulfosaliclico
3 Sistema del cido ntrico
4 Otros mtodos se pueden utilizar con otros cidos que provoquen la precipitacin
de la protena.
* Determinaciones cuantitativas: la estimacin del contenido de protenas en un
periodo de 24 horas. Se valora la cantidad de precipitado formado despus de la
adicin de un reactivo especfico a la orina, midiendo este en comparacin con
estndares conocidos:
A Test de ATC/biuret: se basa en la precipitacin de las protenas con un cido y
redisolucin con un lcalis y medicin colormetrica.
B Test del cidosulfosaliclico.
* Determinacin de la protena BenceJones: la protena BenceJones precipita al
calentarla entre 4560C y se disuelve de nuevo cuando la orina sigue calentndose
hasta conseguir al punto de ebullicin. El mejor mtodo para detectar la protena de
BenceJones en orina es el electrofortico.
~ Glucosa: la cantidad total de sustancias reductoras encontradas en la orina normal
es menor del 0'1% expresado en glucosa (azcar ms abundante en orina), esta
cantidad est por debajo de la necesaria para dar reaccin positiva con test
comnmente usados en los anlisis de orina. En ciertas condiciones se pueden hallar
otros azcares como lactosa, fructosa,...
La presencia de cantidades detectables de glucosa en orina o glucosuria aparece
cuando debido a un nivel elevado de glucosa en sangre se disminuye la reabsorcin
tubular fisiolgica (comidas fuertes, stress emocional) o patolgicamente.
La condicin patolgica ms frecuente que cursa con glucosuria es la diabetes
mellitus.
Los test para determinaciones de glucosa en orina son de 2 tipos:
A Test de reduccin: basados en la reduccin de ciertos iones metlicos por la
glucosa: Benedict y Nylander.
B Enzimticos: basados en la accin de la glucosa oxidasa sobre la glucosa. La
prueba de la glucosa oxidasa es especfica para la glucosa. Se puede conseguir por 2
mtodos:
1 Lquida: la cual comprende soluciones acuosa junto con un fotmetro

2 En forma de tiras: clinicsticks, multisticks, labsticks.

~ Cetona en orina: siempre que la dieta contenga un carbohidrato determinado o
siempre que haya un defecto en el metabolismo de los carbohidratos el cuerpo
metaboliza una mayor cantidad de cidos grasos. Cuando el aumento es grande la
metabolizacin de los cidos grasos es incompleta y los productos intermedios de ese
metabolismo aparecen en sangre y son excretados en orina.
La diabetes mellitus es el desorden ms importante en el que aparece cetonuria.
Tambin puede presentarse en los casos en que la dieta sea muy elevada en grasas o
en los que se restringe la ingestin de carbohidratos (ejemplo: fiebre, anorexia,
caquexia, desnutricin, desrdenes gastrointestinales
La cetonuria puede clasificarse en:
-diabtica
-no diabtica
-acidosis lctica
El mtodo de determinacin de cetonuria mediante tiras reactivas es la tcnica ms
simple y la ms comnmente utilizada.
Pruebas de determinacin de la cetona:
* Test de Rothera
* Test de Legal
* Test de Gerhardete
* Test de Hart
~ Hemoglobina en orina: la hemoglobinuria es producida por hemlisis lo cual puede
darse en la corriente sangunea, en un rgano corporal, en el rin, en el tracto
urinario, en la muestra de orina
Puede indicar desordenes hematolgicos como anemia hemoltica posttransfusin,
hemoglobinuria, enfermedades infecciosas serias como: fiebre amarilla o malaria,
envenenamiento con cidos fuertes o setas, quemaduras,infarto renal, neoplasias y
traumas del tracto urinario.
Los sistemas de test de tiras reactivas (multisticks, hemasticks) son los ms directos
par detectar la hemoglobinuria.
~ Bilirrubina: la bilirrubina en orina indica bien la presencia de una obstruccin intra o
hepatobiliar o de una enfermedad hepatocelular. La bilirrubina se forma en el bazo o
mdula sea a partir de hemoglobina viaja en la corriente sangunea unida a la
albmina hasta el hgado. La bilirrubina indirecta o insoluble no suele aparecer en
orina en cantidades significativas.

La bilirrubina directa contenida en la bilis se vierte al tracto intestinal donde es

convertida en urobilingeno debido a la accin bacteriana por lo que suele aparecer en
orina en cantidades pequeas. La cantidad normal es de 0'2 mg cada 100 ml
aproximadamente siendo un reflejo de los niveles de bilirrubina conjugada en sangre.
El sistema de tiras reactivas (multisticks o labsticks) es el mtodo semicuantitativo
ms simple para la determinacin de bilirrubina.
Otra prueba de confirmacin es la prueba de Harrison.
~ Urobilingeno: en la orina se excretan normalmente pequeas cantidades de
urobilingeno siendo mayor la cantidad excretada en heces. La orina normal contiene
entre 14 mg de urobilingeno en un periodo de 24 horas.
Su excrecin en orina aumenta por cualquier condicin que eleve la produccin de
bilirrubina y por enfermedades que impidan al hgado eliminar el urobilingeno
reabsorbido a travs de la vena porta.
Disminuye o no est presente en orina cuando no se excretan cantidades normales de
bilirrubina al tracto intestinal como ocurre en la obstruccin parcial o completa de los
conductos biliares, tambin terapias de antibiticos que supriman la flora intestinal
normal pueden impedir la transformacin de bilirrubina a urobilingeno y causan la
ausencia de este ltimo en la orina.
Las tiras de determinacin comn son: urobilisticks, multisticks, Msticks y chenstrip.
Otras pruebas de determinacin de urobilingeno son:
* Test de Ehrlicho (antes de al aparicin de las tiras este era el mtodo rutinario de
determinacin de urobilingeno.
* Test de Schlessinger
* Mtodo cuantitativo de Watson
~ Nitritos: la presencia de estos compuestos en alta cantidad de orina puede ser una
indicacin para la realizacin de un cultivo a menos que las muestras hayan sido mal
almacenadas permitiendo el crecimiento bacteriano. La presencia de cantidades
importantes de grmenes productores de nitratos o de bacterias que no pueden formar
nitratos a partir de nitritos en la orina pueden dar resultados falsamente negativos.
El mtodo de determinacin comnmente utilizado son el de las tiras multisticks
chenstrip.
~ Leucocitos: se han sealado como cifras normales de leucocitos entre 320 clulas
/ml de orina; estas cifras aumentan en general en las enfermedades urinarias y del
tracto urinario aunque se valoran fundamentalmente como signo de infeccin aguda.
Se utilizan para la determinacin las tiras multisticks.
3-Examen del sedimento urinario: la muestra para el anlisis de orina suele proceder
de recogida aleatoria de una muestra . La orina debe ser estudiada mientras est
fresca ya que clulas y cilindros comienzan a lisarse en el plazo de 1 a 3 horas. La
refrigeracin ayuda a evitar esta lisis. Los cilindros tienden a sedimentar. Se coloca 10

ml de orina en un tubo de centrfuga graduado desechable y se centrifuga a 2.000

r.p.m. durante 35 minutos, decantar el sobrenadante a otro tubo y re-suspender el
sedimento en 1 ml de orina. 1 gota de este sedimento se coloca sobre un porta, se
tapa con un cubre.
Se estudia el sedimento a bajo aumento y con poca luz (campo brillante) o mediante
iluminacin de contraste de fase. Al examinar el porta hay que variar continuamente el
foco y es importante tambin seguir de forma sistemtica los 4 lados del cubre.
Podemos utilizar muestras teidas o sin teir segn el tipo de estudio y la experiencia
del observador. Los cilindros se encuentran en general en los bordes del cubre.
A elevado aumento pueden identificarse los cilindros, as como hemates, leucocitos y
clulas epiteliales.
Tambin hay que anotar la presencia de bacterias y levaduras y la de cristales si su
nmero es muy elevado o su aspecto anormal.
El informe final contendr el recuento medio de 10 campos significativos. Las clulas
se cuentan en gran aumento mientras que cilindros y cristales a pequeo aumento.
~ Mtodos de estudios del sedimento urinario:
1 Microscopa en campo claro de orina no teida: para poder observar los elementos
formes ms traslcidos de la orina, cilindros hialinos, cristales y moco; es necesario
disminuir la intensidad de luz. En preparaciones no teidas puede resultar difcil
identificar distintos tipos de clulas y cilindros celulares.
2Microscopa en campo claro con colorantes supravitales: las caractersticas
celulares son de ms fcil observacin cuando el sedimento se tie con un colorante
(azul de metileno).
3 Microscopa de fase interferencia: esta tcnica permite la tincin de los elementos
formes ms translcidos, cilindros hialinos, moco y bacilos que pueden no detectarse
utilizando la microscopa de campo claro. El microscopio de fase aumenta el contraste
de los bordes de los elementos formes.
4 Citocentrifugacin y tincin de Papanicolao combinados: el sedimento obtenido
por centrifugacin de 10 ml de orina a 1.500 r.p.m. se somete a una
citocentrifugacin de muestras preparadas sobre portaobjetos. A continuacin se
realiza la tincin de Papanicolao, as es posible realizar un estudio sencillo, rpido,
reproducible y semicuantitativo para preparar el sedimento de orina ponindose
claramente de manifiesto los cilindros celulares, clulas mononucleares solubles,
fragmentos hsticos y clulas neoplsicas.
5Mtodo en portaobjeto estandarizado: hay sistemas estandarizados (sistema Kova,
sistema Kouv10) que incluyen tubos de centrifugacin cerrados para transporte
pipetas de transferencia tincin supra vital y portaobjetos de plstico que parece ms
reproducibles y fiables que los mtodos habituales.

6 Mtodos especiales:

* Mtodo para el estudio de cuerpos refrctiles en la orina los cuales aparecen

brillantes frente al campo oscuro
* Mtodo para el estudio de grasa en orina, la solucin saturada de Sudn III en
alcohol al 70%.
~ Caractersticas microscpicas del sedimento urinario:
a Clulas:
Eritrocitos: en la orina normal se encuentran siempre algunos hemates y leucocitos.
Estas clulas aparecen a gran aumento y sin tincin. Excepto en el caso de
contaminacin de orina con sangre menstrual, la presencia de sangre en orina, es
siempre una manifestacin patolgica que puede ir asociado a una gran variedad de
enfermedades renales patolgias extrarenales.
El aspecto de los eritrocitos es de discos transparentes pudiendo aparecer algunas de
estas clulas distorsionadas o de aspecto rugoso.
Leucocitos: a pesar de las grandes variaciones existentes entre sujetos sanos no se
deben encontrar ms de un leucocito por campo ni cantidades superiores a 15
clulas en mujeres y nios. Una cifra superior constituye piuria (infleccin). Indicando
de un proceso supurativo en alguna parte del rin, vejiga uretra.
Si su presencia va acompaada de cilindros leucocitario. La elevacin de leucocitos se
consideran de origen renal. Los leucocitos son algo mayores que los hemates.
Aunque menos que la mayora de elementos epiteliales. En su citoplasma
generalmente se reconocen por sus ncleos caractersticos y su citoplasma granuloso.
Su estructura se puede hacer resaltar con tinciones vitales.
Clulas epiteliales: su presencia y morfologa era el mtodo que se empleaba para la
localizacin de lesiones del tracto urinario, sin embargo no es un mtodo adecuado ya
que la mayora de las clulas presentan grandes alteraciones morfolgicas y cambios
degenerativos.
Cuando la distincin es posible se pueden reconocer 3 tipos de clulas epiteliales:
1 Clulas del epitelio tubular: son clulas cuboideas o columnares con unas
dimensiones aproximadamente 1/3 mayores que los leucocitos. En la orina normal se
pueden descubrir algunas clulas tubulares posiblemente desprendidas de los tbulos
renales en el curso del deterioro renal.
2 Cuerpos grasos ovales: los cuerpos grasos pueden aparecer a bajo aumento y con
luz amortiguada como manchas negras debido al elevado ndice de refraccin de
componente grass. Estos cuerpos aparecen con frecuencia junto a cuerpos grasos con
una significacin clnica muy discutida, si bien se han encontrado en asociacin con
una amplia gama de nefropatas.
3 Clulas del epitelio de transicin: son clulas de dimetro 2 a 4 veces mayores
que el de los leucocitos de forma piriforme o fusiforme pero pueden ser redondeadas
con una prolongacin de cola. El ncleo bien definido es oval o redondo y

relativamente pequeo en relacin con el tamao celular. Cuando aparecen en gran

nmero indica la presencia de un proceso patolgico causante de exfoliacin anormal.
4 Clulas de epitelio escamoso: son clulas grandes y aplanadas con dimetros
variables segn el grado de madurez. Con ncleo muy reducido o ausente en formas
maduras. Proceden de uretra o vagina y tienen escasa significacin, se observan a
menudo en las muestras de pacientes femeninos.
5 Otros tipos celulares: la orina puede presentar histiocitos indicativos de procesos
inflamatorios, mecanismos inmunes, etc. Son clulas de tamao muy variable,
contornos irregulares, ncleo con forma de huevo. Pueden confundirse con clulas de
epitelio celular. Podemos encontrar adems cuerpos de inclusin citomeglicos,
intranucleares o intracitoplasmticos provocando aumento del tamao de las
clulas que las contienen hasta 4 veces sus dimensiones normales.
* Clulas malignas: presentes en la orina suelen asociarse a cncer de pelvis renal,
tumores d otras localizaciones no suelen detectarse mediante examen citolgico de
orina pero pueden acompaarse de hematuria.
Estas clulas son difciles de caracterizar. Si bien suelen aparecer con ncleo
agrandado y citoplasma hipercromtico con tincin de Papanicolao lo que facilita su
deteccin.
* Clulas de levaduras: a menudo se confunden con hemates y a diferencia de estos
son insolubles en soluciones cidas y alcalinas.
b Cilindros:
Son moldes cilndricos formados en la luz de los tbulos renales o de los conductos
colectores.
Normalmente el sedimento urinario no contiene cilindros, aunque su deteccin no
implica la existencia de una patologa renal. En la orina de individuos sanos se pueden
encontrar cilindros hialinos simples sobre todo en orinas concentradas y cidas,
despus de ejercicios intensos, en presencia de fiebre, etc.
Por regla general, sin embargo la presencia de cilindros indica una enfermedad
intrnseca del rin con alteracin del metabolismo de la nefrona. Siempre que se
encuentren cilindros se debe sospechar una alteracin en la filtracin de protenas en
su absorcin o en ambas, ya que la proteinuria suele acompaan la formacin de
cilindros.
Los cilindros pueden presentar 3 tamaos: estrecho, intermedio y ancho.
El tamao est determinado por las dimensiones del conducto dentro del cual se
forman.
-Cilindros hialinos: son cilindros compuestos fundamentalmente de protenas sin
inclusiones, son semitransparentes e incoloras con un ndice de refraccin cercano al
medio que lo rodea lo que hace muy difcil su deteccin con el microscopio ptico

-Cilindros de epitelio tubular: estn constituidos fundamentalmente por clulas

epiteliales descamadas resultantes de una enfermedad renal intrnseca con afeccin
tubular. Las clulas de estos cilindros pueden confundirse con leucocitos.
-Cilindros granulosos gruesos y finos: su origen y composicin son discutidos.
Probablemente estn compuestos por clulas epiteliales degeneradas, leucocitos o
eritrocitos, albmina y grasa en proporciones variadas. El cilindro granuloso posee
forma regular con contornos bien definidos, uno de los lados puede ser curvos y otros
rectos, y los extremos pueden ser redondos aunque su perfil se ve bien contra fondo
claro, y cuando es suficientemente denso puede aparecer oscuro contra fondo claro.
La presencia patolgica de cilindros granulosos conlleva a las mismas implicaciones
diagnsticas que los cilindros epiteliales.
-Cilindros leucocitarios: suelen tener forma cilndrica y estn repletos de leucocitos a
veces degenerados lo cual dificulta su distincin de los cilindros celulares.
-Cilindros hemticos: son clulas de color rojo anaranjado con los bordes de las
clulas bien definidos. Su presencia indica hemorragia dentro de la nefrona.
-Cilindros con morfologa especial: los cilindros anchos son los que se forman en los
tbulos colectores son de tamao mucho mayor que los dems tipos. Su significacin
clnica es grande, indicando una reduccin importante en la capacidad funcional de la
nefrona. En gran nmero sugiere casi siempre un estadio final de una enfermedad
renal grave, por esas razones se les ha denominado cilindros del fallo renal.
-Cilindros estrechos: se forman en tbulos de luz reducida o ante un estrechamiento
causado por tumefaccin del epitelio o cicatrices peritubulares. Se puede considerar
el resultado de una alteracin tubular intrnseca en el lugar de formacin.
-Cilindros contorneados: se forman en los tbulos contorneados distales.
-Cilindroides: no son autnticos cilindros, podran ser pseudocilindros representando
masas mucoides amorfas resultantes de la inflamacin de la pelvis renal o de la uretra.
Presentan extremos afilados que pueden estar curvados o retorcidos y suelen ser
irregulares o estriados.
-Cilindros asociados a componentes anormales de la orina:

Cilindros creos: que se distinguen por su color amarillo cristalino y aspecto

frgil. Poseen mayor ndice de refraccin que los hialinos son ms opacos, cortos y
anchos que aquellos. Su significacin clnica se equipara a la del cilindro epitelial.

Cilindros amieloides: se hace necesario el anlisis histoqumico para

distinguirlos de otros elementos y algunos amorfos. Los elementos formes son
similares a los observados en las nefropatas con alteracin tubular.

Cilindros de uratos: son mezcla de varias sales de cido rico de color marrn
amarillento carentes de lmites pueden semejar cilindros granulosos. Los cilindros de
urato amnico de pequeo tamao se presentan con mayor frecuencia en nios.

c Bacterias:
La orina normal no contiene bacterias. Estas pueden encontrarse en el sedimento
urinario como resultado de una infeccin del tracto urinario o por contaminacin de la
muestra. La presencia de gran nmero de leucocitos sugiere infecciones del tracto
urinario. Los microorganismos que aparecen con ms frecuencia son los bacilos ya
que la mayora de las infecciones urinarias se deben a microorganismos de origen
entrico. Estos son ms fciles de reconocer que los cocos que se pueden confundir
con cristales amorfos.
d Cristales:
En general la presencia de cristales en orina reviste poca importancia clnica. Pues
muchos de ellos aparecen en le sedimento de orina normal:fosfato, uratos. Para la
identificacin de los cristales es imprescindible conocer el pH de la orina.
Cristales de la orina cida normal:
-Uratos amorfos (uratos de calcio, de sodio, magnesio, potasio) precipitan en orina
cida en forma de pequeos granos amarillospardos. La precipitacin global de la
muestra de orina puede adoptar un color rosanaranja o pardo rojizo.
-Uratos cristalinos (de sodio, potasio y amonio) forman pequeas esferas pardas o
agujas incoloras. Las esferas se unen en pares o tripletes. Al acidificar con cido
actico se transforman en placas de cido rico sobre el portaobjetos.
-cido rico cristalino: tiene distintas formas en general a un pH de 55'5. La forma
tpica tiene 4 lados y son planos, amarillos o de color rojizo.
-Oxalato de calcio: aparecen en pH igual a 6 y en orinas neutras. Son pequeos,
incoloros y octadricos. Tambin pueden ser grandes y aparecer juntos.
Cristales de orina alcalina normal:
-Fosfatos amorfos de calcio y magnesio: grnulos incoloros amorfos que aparecen en
la orina de pH alcalino o ligeramente cido. Se ven en forma de acumulaciones o
masas.
- Fosfatos cristalinos:
-Fosfatos triples: en general de tamao variable, prismas incoloros de 3 a 6
lados con extremos oblicuos que recuerdan las tapas de un atad. Con menor
frecuencia formas aplanadas foliaceas.
-Fosfatos diclcicos: prismas largos de 3 lados con extremos puntiagudo,
forman acumulaciones o rosetas.
-Fosfato magnsico: con formas romboides, incoloras y algunos con esquinas o
extremos hendidos.
-Carbonato clcico hidrogenado: pequeos grnulos o esferas incoloras con formas de
parejas o dobles parejas.

-Diurtico de amonio: forma esfera pardoamarillentas. A menudo denominada

manzana con pinchos, pues presentan estriaciones radiales o concntricas y
proyecciones regulares, espinas o cuernos.
Cristales de orina patolgica:
-Cistina: incoloras, refrctiles, placas hexagonales a veces emparejadas recuerdan a
los cristales de cido rico.
-Tirosina: finas agujas sedosas que se pueden disponer en acumulaciones haces
sobre todo tras su refrigeracin. Amarillos incoloros aprecen negros al enfocarlos
con el microscopio.
-Leucina: esferas amarillentas de aspecto aceitoso con estriaciones radicales y
concntricas. Los cristales de leucina y tirosina pueden aparecer juntos, precipitando
la leucina con los cristales de tirosina al aadir alcohol a la orina.
-Cristales de sulfamidas: en ocasiones son incoloras pero en general son pardo
amarillento. Las formas dependen del frmaco.
-Ampicilina: cristales largos, finos e incoloros. Forman gradillas bastas por
refrigeracin.
-Medios de contraste radiolgico: se observan en un periodo de tiempo breve tras un
estudio radiolgico con contraste intravenoso. Forman placas romboides, hendidas e
incoloras, claras y planas o rectngulos finos y claros.
Contaminantes y artefactos:
Hilos de algodn
Pelo
Grnulos de almidn
Maderas
Fibras de lana
Deben ser adecuadamente reconocidos para investigar si estas sustancias tienen un
significado diagnstico en el sedimento urinario
DIAGNSTICO LABORATORIAL DE INFECCIN DE ORINA
Inicialmente la realizacin de una tira reactiva y la observacin de los resultados de los
parmetros indicativos de infeccin ( leucocitos y nitritos) pueden sugerir la presencia
de bacteriuria.
Pruebas qumicas: mediante al reaccin del nitrito detectamos la presencia de
nitritos (bacterias reductoras de nitrato) por una prueba cuantitativa colorimtrica muy
sencilla. La negatividad de la prueba no excluye la infeccin.

A continuacin el estudio microscpico del sedimento nos permitir observar la

presencia de leucocitos, hemates, cilindros, bacterias u hongos. El diagnstico
definitivo con la posibilidad de identificar al agente patolgico nos lo dar la realizacin
de un cultivo.
Cultivo de orina o urocultivo: el hallazgo de una bacteriuria no permite concluir
que se trate de una infeccin urinaria. Habr que enjuiciar su valor clnico mediante el
cultivo cuantitativo de orina. Se recomienda recogida directa por cateterismo asptico,
mejor sin sondaje tomando el chorro intermedio.
Se ha llegado a la conclusin de que si el cultivo arroja una cifra de bacterias inferior a
10.000/ml la infeccin no es probable. Entre 10.000100.000 es probable. Por encima
de 100.00 la infeccin es prcticamente segura. Si las cifras se repiten en 2 cultivos
consecutivos. El hallazgo de ms de 2 especies de bacterias es sospechoso de
contaminacin artificial.