Streptococcus pneumoniae
*Cepa S
*Cepa R
La molcula de la
transformacin era el ADN?
1944 Oswald Theodore Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty aslan ADN como
material gentico
Lab rats ... James Watson, above left, and Francis Crick weren't
going to let Rosalind Franklin get in the way of scientific glory.
Photo-illustration: Harry Afentoglou
Rosalind Franklin
Durante 50 aos, la historia de la ciencia ha
sostenido que los descubridores de la doble hlice
del ADN fueron Crick y Watson. En los ltimos
aos, las investigaciones han sacado a la luz la
labor de Rosalind Franklin, sin cuyas radiografas
sus colegas no hubieran llegado tan rpido a la
meta. Hoy se puede decir que si stos son los
padres del hallazgo de la estructura helicoidal
de la molcula, Franklin merece ser considerada la
madre.
El ADN de los
cromosomas se compone
de dos cadenas enrolladas
una a la otra en una doble
hlice.
Los azcares y fosfatos que
unen un nucletido al
siguiente forman el
esqueleto en cada lado de
la doble hlice.
En tanto que las bases de
cada cadena se aparean en
el centro de la hlice.
Bases Nitrogenadas
Fosfatos van
unidos al azcar
en el C-5 y el C-3
Hebras
antiparalelas
Punta 3 libre
Punta 5 libre
ACIDOS NUCLEICOS
DIMENSIONES
DEL ADN
20 kb
La replicacin siempre se
produce en sentido 5' 3',
siendo el extremo 3'-OH libre
el punto a partir del cual se
produce la elongacin
del ADN
Fragmentos de Okazaki
longitud entre 100 y 400
nucletidos.
REPLICACIN
Romper puentes de hidrgeno ---enzimas helicasas.
Eliminar la tensin----topoisomerasas.
Evitar que las dos hebras vuelvan a reunirse y formar los puentes de
hidrgeno----protenas SSB.
Discontinua -ARN
polimerasa sintetiza unos
40 nucletidos de ARN en
un punto que dista unos
1.000 nucletidos de la
seal de iniciacin. A
partir de ellos la ADN
polimerasa III sintetiza unos
1.000 nucletidos de ADN,
formndose un fragmento de
Okazaki.
ADN polimerasa I
(exonucleasa y polimerasa)
retira los segmentos de
ARN, y luegorellena los
huecos con nuceltidos de
ADN.
ADN ligasa unir los
extremos
Hebra lder
Hebra retardada
CORRECCIN DE ERRORES
La actividad de la ADN polimerasa debe ser
exacta, rpida y fiel------ fidelidad de la
duplicacin del ADN.
Se comete 1 error de apareamiento por cada
10 millones de bases.
Genoma humano que contiene 3 x 109 pares
de bases.
300 equivocaciones en cada duplicacin
teniendo en cuenta que durante el
desarrollo embrionario a partir del zigoto
el genoma humano se duplica casi mil
millones de veces, trescientos mil billones
de errores.
Estructura de un cromosoma
Telmeros
DNA no codificante.
Son secuencias cortas de 5-8 pb, ricas en G
Localizadas al final de los extremos de los cromosomas
Son necesarios para el mantenimiento y la estabilidad de los cromosomas.
Durante la replicacin debido a que al eliminar el cebador de los fragmentos
de Okazaki del extremo 5' de la cadena retardada del telmero del nuevo
cromosoma lineal se produce un hueco que no puede ser rellenado por accin
de la DNA polimerasa, puesto que solo funcionan en direccin 5' 3.
Se acortan los telmeros a razn de 100 a 150 nucletidos en cada proceso
replicativo.
1.
2.
3.
4.
Agentes extracelulares
1.
2.
3.
Qumicos ambientales
Hebra molde
Transcripcin
Traduccin
TRANSCRIPCIN
Transmisin de la informacin
La transmisin se lleva a cabo principalmente
gracias a la existencia de los cidos ribonucleicos
o ARNs
ARN mensajero (lineal de hebra simple)
ARN de transferencia
ARN ribosomal
Y a las ARNs polimerasas
ATENCION:
Grupo hidroxilo
en la posicin 2
Ribonucletido
PROCARIOTES
EUCARIOTES
El cromosoma bacteriano se
encuentra libre en el citosol
Transcripcin y traduccin
acopladas
No tienen intrones
Intrones y exones
CROMATINA
Es un complejo DNA-protenas
Protenas
Histonas pequeas, bsicas, ricas en lisina y
arginina
No histonas polimerasas, protenas
reguladoras, etc.
TIPOS DE HISTONA
HISTONA
H1
FUNCION
Asociacin con el DNA
ligador
H2A
H2B
H3
H4
NUCLEOSOMA
Es la estructura de repeticin que forma la
cromatina
146pb de DNA envuelven un octamero de dos
moleculas de H2A, H2B, H3 y H4
TRANSCRIPCION EN EUCARIOTAS
Es un proceso de mucha discriminacin
(segn el tejido o etapa del desarrollo sern
los genes que se van a transcribir)
La maquinaria de la transcripcin debe tener
en cuenta la compleja estructura de la
cromatina eucariota
La RNA polimerasa requiere de factores
adicionales llamados factores de
transcripcin para iniciar la transcripcin
IMPORTANTE.
Los genes estn fragmentados en zonas sin
sentido o intrones y zonas con sentido o
exones. Antes ha de madurar y eliminar los
intrones.
INTRONES
Dentro de la mayora de los genes eucariotas
existen secuencias que no se expresan en
cadenas polipeptdicas: INTRONES
Los intrones se alternan con los exones (regiones
que si se expresan en polipptidos)
RNA POLIMERASA II
TRANCRIBE LOS GENES ESTRUCTURALES, ES
DECIR, LOS QUE SE TRADUCEN A PROTEINAS
Contiene mltiples subunidades
FACTOR DE
TRANSCRIPCION
FUNCION
TFIID
TFIIA
TFIIB
TFIIF
RNA pol II
TFIIE
TFIIH
TRANSCRIPCIN
La ARN polimerasa
se activa cuando
forma un complejo
con los factores de
transcripcin o
elementos
trans. La interaccin
de estos entre s, y con
las secuencias
reguladoras del ADN
(los factores cis) es la
que determina donde,
cuando y con qu
rapidez ocurre la
transcripcin
TATAA
A
D
D
A
Inicio de la
transcripcin
RNApol II
B
RNApol II
B
RNApol II
E, F
Inicio de la
transcripci
n
B
RNApol IIE, F
EL PROBLEMA DE LA INICIACION
La estructura cromatnica plantea el problema
de cmo pueden unirse los factores de
transcripcin al DNA
Se genera lugares hipersensibles en el DNA:
regiones sin nucleosomas que permiten la unin
de protenas a los elementos del DNA. Esto es
probablemente mediado por protenas que
remodelan los nulceosomas
EL PROBLEMA DE LA TRANSCRIPCION
ACTIVA
La estructura cromatnica plantea el problema
de cmo puede pasar la polimerasa a travs de
una formacin de nucleosomas
Parece que los nucleosomas son desplazados
temporalmente pero es un MISTERIO.
TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION
La pol II sigue transcribiendo mas all de la seal de
terminacin pasando a travs de varias regiones
AATAAA.
El pre-mRNA que transporta esta seal en forma de
AAUAAA se rompe por una endonucleasa que reconoce
la seal y corta entre 11 y 30 residuos hacia el lado 3
Luego se aade una cola poli-A de hasta 200pb mediante
una polimerasa especial que no esta dirigida por un
molde
FORMACION DE LA CAPERUZA
La 1era modificacin y se
produce en el ext 5.
Se aade un residuo GTP
en una orientacin
inversa
Este GTP junto con los
dos primeros nucletidos
de la cadena forman lo
que denominan caperuza
que servir para colocar
el mRNA en el ribosoma
CORTE Y EMPALME
Luego de la formacin de la caperuza hay que
eliminar los intrones
El pre-mRNA forma complejos con
ribonucleoproteinas nucleares pequeas
(snRNPs), que a su vez estan formadas por
snRNA.
CORTE Y EMPALME
Al formar el espliceosoma , los snRNA
reconocen y se unen a lugares de corte y
empalme intron-exon
TRADUCCIN
Aspectos generales
Bsicamente se podra definir como el proceso mediante el cual
la informacin contenida en el ADN se ejecuta a travs de las
protenas.
Para ello requiere la participacin conjunta y coordinada de
macromolculas: ARNm, ARNt, ribosomas y muchas protenas
diferentes.
RIBOSOMA EUCARIOTE
60S
40S
ARNt
BRAZO ACEPTOR
En el extremo 5' es donde se
unir el aminocido que debe
ser transportado hasta el
ribosoma.
BRAZO AMINOACIL RNA-t
SINTETASA o TFIC
Interacciona con la enzima
que va a unir al RNA-t con su
aminocido especfico.
BRAZO ANTICODN.RNA-t
se une a un aminocido
especfico, segn la secuencia
de cada codn del RNA-m.
Activacin de
aminocidos:
Cada RNA-t busca a su aminocido
especfico segn el triplete de su
anticodn y se une a l por la
accin de una enzima especfica
llamada aminoacil RNA-t
sintetasa, que une al
aminocido con su RNA-t en el
brazo aceptor, gastndose una
molcula de ATP. De este modo,
un gran nmero de
transferentes se encuentran
unidos a su aminocido antes
de iniciarse la traduccin.
CODIGO
GENETICO
ARNm
RNAm
Iniciacin
El RNA-m llega hasta el ribosoma que est separado en sus dos subunidades y se une a la subunidad menor; a
continuacin se une la subunidad mayor. En los ribosomas existen dos lugares en los que pueden caber
transferentes, el llamado LUGAR P (= peptidil) y el LUGAR A (= aminoacil). El RNA-m se une de tal forma que
el primer codn se coloca en el lugar P. Este primer codon siempre es el mismo en todos los RNA-m, es el
AUG ledo desde el extremo 5', que codifica para el aminocido Metionina, con el que se inician todos los
procesos de traduccin celular. A continuacin llega hasta ese lugar P un RNA-t con el aminocido Metionina,
y al lugar A llega otro RNA-t con el siguiente aminocido que corresponda, segn las bases del segundo
triplete. En ese momento una enzima une ambos aminocidos mediante un enlace peptdico y todo el complejo
se desplaza un lugar hacia el primer codn, de tal manera que ahora el dipptido se coloca en el lugar P
(peptidil) y queda libre el lugar A (aminoacil).
TRADUCCIN
ARN --- Protena
Elongacin
Al quedar libre el lugar aminoacil se acerca un nuevo RNA-t, segn la
secuencia de su anticodn, trayendo un nuevo aminocido, volviendo
a crearse un enlace peptdico y repitindose el desplazamiento del
complejo. Estos procesos se repiten siempre que el codn que aparece
en el lugar A tenga sentido.
Reaccin de
condensacin
Polipptido
Estructura primaria
(Secuencia lineal)
Estructura secundaria
Estructura terciaria
Proteoma
Es el set de genes que codifican para protenas
Distribucin por su funcin en el GH:
22%
17%
12%
12%
12%
8%
17%