PLANIFICACIN DE ASIGNATURA

IDENTIFICACION GENERAL DE LA ASIGNATURA

CARRERA
DEPARTAMENTO
ASIGNATURA
PRERREQUISITOS
CREDITOS (TEL)
AO
RGIMEN DE ASISTENCIA
Palabra Clave
HORAS PEDAGOGICAS

BIOQUIMICA
BIOLOGIA
BIOLOGIA MOLECULAR II
Biologa Molecular I
0-0-6
Primer Semestre 2008
Obligatoria
Tcnicas de ADN recombinante
TEORIA
0
EJERCICIO
0
LABORATORIO
6

CDIGO

1681

II DESCRIPCION DE LA ASIGNATURA

La asignatura de Biologa Molecular II tiene carcter eminentemente prctico, con nfasis en el empleo de
tcnicas y mtodos de ADN recombinante, y donde se espera la aplicacin, por parte del alumno, de la teora
previamente aprendida en qumica, fisicoqumica, bioqumica y biologa molecular para analizar, comprender
y describir los fenmenos observados en el quehacer experimental de este curso.

III OBJETIVO GENERAL

Poner en prctica diversas tcnicas y procedimientos experimentales de biologa molecular, analizando y

comprendiendo los resultados obtenidos, los principios tericos fundamentales de los mismos, as como su
aplicabilidad en el rea de la bioqumica.

IV CAPACIDADES A LOGRAR POR EL ALUMNO

Reconocer los aspectos tericos de cmo funcionan las herramientas de biologa molecular ms
comunes.
Aplicar procedimientos prcticos de extraccin y visualizacin de ADN y ARN, PCR, clonamiento y
transformacin bacteriana, purificacin de ADN recombinante, hibridacin de cidos nucleicos y anlisis
de expresin transcripcional.
Manejar los aspectos tericos y prcticos de enzimas auxiliares (polimerasas, enzimas de restriccin,
ligasas, etc.), kits y vectores comerciales, y reactivos qumicos en general, utilizados frecuentemente
en biologa molecular.
Conocer las magnitudes de volmenes, masas y unidades enzimticas ms frecuentemente usadas en
biologa molecular, as como ser capaces de realizar los clculos matemticos necesarios para preparar
reacciones.
Manejar el equipamiento habitual existente en laboratorios de biologa molecular.

Analizar las posibles fuentes de errores en experimentos fallidos, as como proponer procedimientos
experimentales alternativos.
Reconocer la importancia de mtodos de biologa molecular en la comprensin de la estructura y funcin
de los cidos nucleicos.
Ser capaz de trabajar en equipo, con el orden y disciplina necesaria para un laboratorio de biologa
molecular.
Discutir en forma oral y escrita los resultados experimentales en coherencia con los fundamentos tericos
que sustentan dichos resultados.

V
VI UNIDADES TEMTICAS
UNIDAD I: Extraccin de ADN genmico, ADN plasmidial, PCR y clonamiento

Aprendizajes
Esperados
Extraer e identificar
distintos tipos de
ADN.

Criterios de evaluacin

Amplificar
un
fragmento de ADN
mediante PCR.

Clonar un fragmento
de ADN y transformar
una bacteria con
ADN recombinante.

Analizar
ADN
mediante enzimas de

Obtiene, identifica y cuantifica

ADN cromosomal y plasmidial
mediante tcnicas estndares.
Reconoce las teoras y
principios biolgicos detrs del
proceso
experimental
de
obtencin de distintos tipos de
ADN y de su anlisis mediante
electroforesis.
Amplifica e identifica un
fragmento de ADN amplificado
por PCR.
Reconoce las teoras y
principios biolgicos detrs del
proceso de amplificacin de ADN
por PCR.
Conoce la mecnica bsica de
funcionamiento
de
un
termociclador.
Obtiene clones bacterianos al
transformar con una mezcla de
ligacin vector-inserto preparada
previamente.
Reconoce las teoras y
principios biolgicos detrs del
proceso de ligacin de ADN y
transformacin bacteriana.
Reconoce la teora y utilidad de
mtodos de seleccin positiva de
clones recombinates.
Obtiene
fragmentos
de
restriccin desde una mezcla de

N HORAS 30

Contenidos
Extraccin de ADN cromosomal y
su visualizacin en geles de
agarosa. Purificacin de plsmidos
por el mtodo de lisis alcalina y su
anlisis en geles de agarosa.

Amplificacin por PCR de un gen

desde ADN cromosomal.

Clonamiento de un trozo de ADN.

Transformacin de E. coli.

Liberacin de un inserto desde

plsmidos usando enzimas de

restriccin

digestin vector-enzima de restriccin.

Anlisis
de
los
restriccin
preparada fragmentos mediante electroforesis
previamente.
en geles de agarosa.
Reconoce las teoras, y
principios biolgicos detrs de
los sitios de restriccin de ADN y
de las enzimas de restriccin.
Reconoce la utilidad de las
enzimas de restriccin en
ingeniera gentica.

Evaluacin de la Unidad
Tipo e instrumento
Evaluacin sumativa en Prueba Parcial
de Ciclo 1. Preguntas de desarrollo
Test de entrada a laboratorios peridicos
(uno por sesin de laboratorio).
Preguntas de desarrollo respecto a la
gua de laboratorio.
Evaluacin formativa. Desarrollo de
trabajos prcticos y presentacin de
informes.

contexto
Sala de Clases
Laboratorio de Biologa Molecular

Laboratorio de Biologa Molecular

UNIDAD II: Southern blot, extraccin de ARN y anlisis transcripcional

Aprendizajes
Esperados
Analizar
ADN
mediante la tcnica
de Southern blot

Criterios de evaluacin

Extraer e identificar
ARN.

Corta ADN genmico con

enzimas de restriccin y
transfiere estos fragmentos a
membranas de nylon.
Marca una sonda de ADN e
hibrida con ella la membrana
de nylon.
Lava y revela la membrana.
Reconoce las teoras, y
principios biolgicos detrs de
los distintos procedimientos
asociados a la tcnica de
Southern blot.
Reconoce la utilidad de la
tcnica de Southern blot en
ingeniera gentica.
Obtiene, identifica y cuantifica
RNA
mediante tcnicas

N HORAS 20 + 10

Contenidos
Corte de ADN cromosomal con
enzimas de restriccin. Transferencia
de fragmentos de ADN a membrana
de nylon. Marcacin de una sonda de
ADN mediante random priming.
Hibridacin de membrana de nylon
con la sonda. Lavado y revelado de la
membrana.

Extraccin de RNA total desde

distintos tipos celulares. Visualizacin

Analizar
las
diferencias en los
niveles
de
transcripcin de un
gen sometido a
distintas condiciones.

estndares.
Reconoce las teoras y
principios biolgicos detrs
del proceso experimental de
obtencin de ARN.
Reconoce las diferencias
tericas y prcticas de la
extraccin de ARN respecto
al ADN.
Reconoce las teoras y
principios biolgicos detrs
del proceso de expresin
diferencial de genes
Es capaz de obtener cDNA a
partir de los distintos RNA.
Es capaz de amplificar
diferencialmente por PCR el
cDNA obtenido en dos
condiciones distintas.
Es capaz de comparar e
interpretar los resultados de
distintos niveles de induccin
transcripcional de un gen.

de RNA en geles de azarosaformaldehdo.

Extraccin de ARN desde clulas

sometidas a distintas condiciones.
Amplificacin por RT-PCR de un gen
especfico en condiciones distintas.
Anlisis
de
la
induccin
transcripcional de un gen.

Evaluacin de la Unidad
Tipo e instrumento

contexto

Evaluacin sumativa en Prueba Parcial de Ciclo 1. Preguntas Sala de Clases

de desarrollo.
Test de entrada a laboratorios peridicos (uno por sesin de Laboratorio de Biologa Molecular
laboratorio). Preguntas de desarrollo respecto a la gua de
laboratorio.
Evaluacin formativa. Desarrollo de trabajos prcticos y Laboratorio de Biologa Molecular
presentacin de informes.
VII PONDERACIN DEL PROCESO EVALUATIVO
Unidad I
Unidad II
Examen

Prueba parcial de ciclo 1: 25%; test

entrada a laboratorios: 12,5%; informes
trabajos prcticos: 12,5%
Prueba parcial de ciclo 1: 25%; test
entrada a laboratorios: 12,5%; informes
trabajos prcticos: 12,5%
(*)

de
de
de
de

VII

REQUISITOS DE EXIMICIN DE EXAMEN

(*) El curso no contempla examen pues se aprueba slo si el promedio de cada uno de los tres tipos de
evaluacin por separado (pruebas parciales de ciclo, test de entrada e informes) tiene nota mnima 4,0.
Quienes no logren esta meta en alguno de los tres tipos de evaluaciones reprueban el curso.