-lactamasas AmpC

Fenotipos de resistencia
Deteccin en el
laboratorio
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de
Catalunya

Generalidades
Espectro actividad
Origen y tipos AmpC plasmdicas
Inhibidores

Deteccin en el laboratorio
Especies sin AmpC cromosmico

Especies con AmpC cromosmico

Confirmacin sensibilidad carbapenems

Descartar la presencia de carbapenemasas

C. Segura. Patologia Infecciosa. Laboratori de

Referncia de Catalunya

Espectro actividad e inhibicin

Estas enzimas se caracterizan por ser resistentes a los inhibidores como el

cido clavulnico (AC) y Tazobactam . Espectro de actividad cefalosporinasa.
Cromosmica de E. coli (constitutiva), E. cloacae (Inducible), C. freundii
(I),
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

Betalactmicos/Betalactamasas
1940-1950

Penicilinas/Aminopenicilinas

S. aureus penicilinasa

1960-1970

Aminopenicilinas/cefalosporinas
orales

Betalactamasas de amplio
espectro (TEM-1, TEM-2,
SHV-1)

Cefalosporinas 3 generacin
1980
Inhibidores de betalactamasa

1990-2000

Cefalosporinas 4 generacin
Carbapenems

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Betalactamasa de espectro
extendido (derivadas de TEM y
SHV), betalactamasas
resistentes a los inhibidores
Hiperproduccin de AmpC

Betalactamasas de espectro
extendido (CTX-M derivadas)
AmpC plasmdicas
Carbapenemasas plasmdicas

CMY-1

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Updated Functional Classification of -Lactamases

Karen Bush and George A. Jacoby. AntimicrobiAgents and Chemother, Mar.
2010, p. 969976
AmpC Lactamases George A. Jacoby Clin Microbiol Rev 2009:161-82

Movilizacin de genes AmpC del cromosoma de especies

productoras de esta enzima. Insercin en transposones y
plsmidos conjugativos

DHA-1, 2

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

-lactamasas AmpC plasmdicas

FOX (7), MOX (3), CMY (50), LAT (1), MIR (4), ACC (4),
ACT (3), DHA (2)

ACT-1, DHA-1, DHA-2 y CMY-13 estn ligados al gen ampR y

son inducibles
Resto AmpC plasmdicas no estn ligadas al gen ampR y se
expresan contitutivamente (similar a desrepresin)

Presencia de promotores eficaces que incrementan la

expresin tanto en las inducibles como en constitutivas

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

AmpC Lactamases George A. Jacoby Clin Microbiol Rev 2009:161-82

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Inhibidores AmpC
Disco cloxacilina (500 g)

C3G

Aztreonam
Cloxacilina
c. bornico

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Medio con cloxacilina

250 g/ml)

Inhibidores AmpC
Cefotetan + cloxacilina

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Inhibidores AmpC
Cloxacilina/Bornico (300 g)

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Bornico + Caz; Bornico +

Ctx

DETECCIN EN EL
LABORATORIO

C. Sgura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

SISTEMAS AUTOMATIZADOS

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Deteccin en el laboratorio
Especies sin AmpC cromosmico
Salmonella,
Proteus
mirabilis,
Klebsiella
Citrobacter koseri, Citrobacter amalonaticus

spp.,

Deteccin fcil. Perfil que no concuerda con la especie

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Proteus mirabilis AmpC plasmdica/cefamicinasa (DHA)

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Proteus mirabilis AmpC plasmdica/cefamicinasa (DHA)

Ampicilina
Amox+AC
Pip/Taz
Cefalotina
Cefazolina
Cefoxitina
Ceftazidima
Ceftazid/AC
Cefotaxima
Cefotax +AC
Cefepime
Aztreonam
Ertapenem
Imipenem

>16
>16 /8
<=8
>16
>16
<=8
16
>2
16
>4
<=1
<=1
<=0.5
<=1

A+C

CRO

CTX

CEP

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

IMI

CAZ

AZT

4317814

K. pneumoniae CMY-2
AMP

PIP

CEF

CXM

CAZ

FOX

CTX

AMC

FEP

ATM

IPM

C. Segura. Patologia Infecciosa. Laboratori de Referncia de

Catalunya

CMI

Ampicilina
Ticarcilina
Piperacilina
Piper/Tazo
Amox / clav
Cefalotina
Cefoxitina
Cefuroxima
Cefotaxina
Ceftazidima
Cefepime
Aztreonam
Imipenem

Real

Interpr

R
64->256 R
32->256 R
64- >256 R
R
>256
R
>256
32->256 R
32->256 R
2->256 r/R
2->256 r/R
S
0,12-1
2->256 r/R
0,06-0.12 S
>256

SEIMC GEMARA. F. Navarro

R
R
R
R
R
R
R
R
R
R
S
R
S

K. pneumoniae DHA-1 + CTX M 15

Ampicilina
Amox+AC
Pip/Taz
Cefalotina
Cefazolina
Cefoxitina
Ceftazidima
Ceftazid/AC
Cefotaxima
Cefotax +AC
Cefepime
Aztreonam
Ertapenem
Imipenem

>16
>16/8
64
>16
>16
>16
>32
>2
>16
>4
>16
>16
<=0.5
<=1

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

CAZ

CRO

IMI

AMC

CTX

FEP

AZT

4304893

K. pneumoniae DHA-1 + CTX M 1 + SHV-12

Ampicilina
Amox+AC
Pip/Taz
Cefalotina
Cefazolina
Cefoxitina
Ceftazidima
Ceftazid/AC
Cefotaxima
Cefotax +AC
Cefepime
Aztreonam
Ertapenem
Imipenem

4633366

>16
>16/8
<=8
>16
>16
>16
>16
>2
>32
>4
>16
>16
<=1
<=1

C. Segura. Patologia Infecciosa. Laboratori

de Referncia de Catalunya

Deteccin en el laboratorio
Especies con AmpC cromosmico
Constitutiva de baja expresin: Escherichia coli
Difcil de detectar por mtodos fenotpicos
Inducible:
Enterobacter cloacae, Enterobacter
aerogenes, Citrobacter freundii, Morganella morganii,
Providencia spp.
No detectable por mtodos fenotpicos

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Hiperproduccin de la -lactamasa cromosmica

(AmpC). E. coli
CMI
AMP

CXM

CTX

PIP

CAZ

AMC

ATM

CEF

FOX

FEP

IPM

Ampicilina
Ticarcilina
Piperacilina
Piper/Tazo
Amox / clav
Cefalotina
Cefoxitina
Cefuroxima
Cefotaxina
Ceftazidima
Cefepime
Aztreonam
Imipenem

Real

32->256
8-32
8-32

32->256
32->256
32->256
16->256
16->256
0,25-2
1-4
0,06-0.12
0,25-2

0,06-0.12

Interpr

R
r
r
R
R
R
R
R
r
r
S
r
S

SEIMC GEMARA. F. Navarro

R
I
I
R
R
R
R
R
I/R
I/R
S
I/R
S

Produccin de una cefamicinasa plasmdica

E. coli CMY-2
(AmpC)
AMP

PIP

CXM

CAZ

CTX

AMC

ATM

CEF

FOX

FEP

IPM

CMI

Ampicilina
Ticarcilina
Piperacilina
Piper/Tazo
Amox / clav
Cefalotina
Cefoxitina
Cefuroxima
Cefotaxina
Ceftazidima
Cefepime
Aztreonam
Imipenem

Real

R
16->256 r/R
16->256 r/R
32->256 R
>256
R
>256
R
32->256 R
32->256 R
2->256 r/R
2->256 r/R
0,12-1
S
2->256 r/R
0,06-0.12 S
>256

Interpr

R
R
R
R
R
R
R
R
R
R
S
R
S

SEIMC GEMARA. F. Navarro

E. coli AmpC plasmdica DHA-1

Ampicilina
Amox+AC
Pip/Taz
Cefalotina
Cefazolina
Cefoxitina
Ceftazidima
Ceftazid/AC
Cefotaxima
Cefotax +AC
Cefepime
Aztreonam
Ertapenem
Imipenem

>16
>16/8
<=8
>16
>16
>16
16
2
8
1
<=1
8
<=0.5
<=1

4476959
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

Produccin de una cefamicinasa plasmdica (AmpC).

Sensible a cefoxitina.
E. coli ACC-1
AMP

PIP

CXM

CTX

CTZ

AMC

ATM

CEF

FOX

FEP

IPM

CMI

Ampicilina
Ticarcilina
Piperacilina
Piper/Tazo
Amox / clav
Cefalotina
Cefoxitina
Cefuroxima
Cefotaxina
Ceftazidima
Cefepime
Aztreonam
Imipenem

Real

R
>256
r/R
32-256 r/R
32->256 R
>256
R
>32
R
4-16
S/I
>256
R
8-32
I
16-32
r
0,25-4
S
1-8
r
0,06-0.12 S
>256

Interpr

R
R
R
R
R
R
R
R
R
R
S
R
S

Estudio cefamicinasas
Criterios inclusin:
Especies no AmpC cromosmica : R I a alguna
C3G , C4G M y A+C I R
Enterobacteriaceas con CIM a IMI >0.5 mg/L
Perodo estudio: 02/2009- 07/2009
Cepas incluidas: 184

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

12 CARBAPENEMASAS

SI 12

NO 1

39
184 TOTAL

SI 30

CEFAMICINASAS
PLASMDICAS

7 E.coli *
1 E. cloacae

SI 7

10
HIPERPRODUCCIN
E. coli

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

3 E. coli*

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Fallos
Proteus mirabilis: Oxa- 30 + blea o hiperproduccin
SHV-1 (LRC); CMY-2 (centro referencia)
Klebsiella pneumoniae: AmpC plasmdica (LRC); No
deteccin de AmpC plasmdica (centro de referencia)
Klebsiella pneumoniae: BLEA + AmpC plasmdica ??
No deteccin de AmpC plasmdica (centro de
referencia);

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

CONFIRMAR POR DIFUSIN LA

SENSIBILIDAD A CARBAPENEMS

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Disminucin actividad carbapenems

1. Alteracin en la permeabilidad.
Afecta a
carbapenems en cepas con
determinadas
AmpC
(ciertas ampC plasmdicas, ESAC).
Tambin en BLEAS

ERTAPENEM /IMIPENEM
2. Presencia de carbapenemasas: Clase A (KPC,..),
Clase B (VIM,..),
Clase D (Oxa- 48,..).
Sospechar y desenmasarar
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

1 . AmpC + alteraciones permeabilidad (Omp F-,

Omp C-)

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

AmpC + alteraciones permeabilidad (Omp F-,

Omp C-)

Actividad carbapenemsica en CMY-2, ACT-1 y DHA-1. Relacin con

estructura R2 binding. Aparicin de resistencia a carbapenems en cepas con
alteraciones en la permeabilidad.
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

1. ESAC lactamasas:
Extended-spectrum AmpC
Subclase 1e
Ampliacin espectro: cefepime y cefpiroma
En P. aeruginosa variante con incremento en
la actividad sobre imipenem
Modificaciones en 6 regiones ampC
En cepas con Omp C- y Omp F- + ESAC :
Resistencia a ertapenem y reduccin
sensibilidad a imipenem
AmpC cromosmicas y plasmdicas
Deteccin slo por biologa molecular
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

AmpC Lactamases George A. Jacoby Clin Microbiol Rev 2009:161-82

2. Descartar carbapenemasas
K. pneumoniae
DHA-1 + CTXM-15 + SHV-12
Ampicilina
Amox+AC
Pip/Taz
Cefalotina
Cefazolina
Cefoxitina
Ceftazidima
Ceftazid/AC
Cefotaxima
Cefotax +AC
Cefepime
Aztreonam
Ertapenem
Imipenem

>16
>16/8
<=8
>16
>16
>16
>16
>2
>32
>4
>16
>16
<=0.5
<=1

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

K. oxytoca

AmpC + BLEA + permeabilidad

??

Ampicilina
>16
Amox+AC
>16/8
Pip/Taz
>64
Cefalotina
>16
Cefazolina
>16
Cefoxitina
>16
Ceftazidima >16
Ceftazid/AC >2
Cefotaxima
>32
Cefotax +AC >4
Cefepime
16
Aztreonam
>16
Ertapenem
1
Imipenem
2

K. oxytoca

Etest IMIP/IMIP+EDTA

VIM 1 + SHV-12

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

Difcil cuando existen

mecanismos diferentes

varias

enzimas

1 Sinergias a diferentes distancia y con varios

inhibidores:
amoxicilina + c. clavulnico (BLEAS , KPC)
cido bornico (AmpC, KPC)
EDTA (metalobetalactamasas)
cloxacilina (AmpC)
2 PCR BLEAS, Carbapenemasas
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

Gracias por vuestra atencin

K. oxytoca

K. pneumoniae DHA-1 + CTX M 1 +

SHV-12

CRO

AZT

AMC

CEP

IMI

CAZ

C. Segura. Patologia Infecciosa.

Laboratori de Referncia de Catalunya

AZT

K. oxytoca

AMC
AMC
AZT

CPE

No sinergia
C. Segura. Patologia Infecciosa.
Laboratori de Referncia de Catalunya

sinergia