Practica No.

3: Extraccin en fase solida: separacin de colorantes sintticos / fecha de

realizacin: 11/septiembre/2014---/6FV1/ Profesores: Jonathan fragoso Vzquez, Luis Almazn
Snchez, Eleuterio Burgueo Tapia / Equipo 3: Hernndez Balderas Jos Luis, Lozano Apolinar
Martin Alejandro.
Objetivos

Discusiones

Separar una mezcla de colorantes

sintticos usados en alimentos, tartrazina
y rojo nmero 3, por extraccin en fase
slida, aplicando los conceptos de
cromatografa en fase reversa.
Comprobar la eficiencia de la separacin
por medio de la cromatografa en capa
fina sobre gel de slice.

Introduccin
La extraccin en fase solida (SPE) en fase reversa
es una simple y eficiente tcnica de purificacin de
muestras que es rpida y sencilla. Estas columnas
consisten en un lecho de adsorbente de partculas
de slice modificadas (con hidrocarburos
saturados, insaturados y aromticos) como el
octadecilsilano.
Esta tcnica consta de 4 pasos:
acondicionamiento, aplicacin de la muestra,
lavado y elusin.
En la etapa de acondicionamiento se pasa un
disolvente polar como el metanol para
asegurarnos de homogeneizar la superficie del
adsorbente. En la etapa de aplicacin de la
muestra se hace interaccionar a las molculas de
la muestra con las de la fase estacionaria, las
molculas de la muestra se retienen en la fase
estacionaria. Para la etapa de lavado se eliminan
los compuestos no adsorbidos lavndolos con
compuestos polares. La ltima etapa: elucin, los
compuestos adsorbidos por la slice gel son
eluidos con una mezcla de disolventes de tal
manera que se vaya incrementando la polaridad.

Realizamos nuestra tcnica

en 4 pasos la primera fue
homogeneizar la superficie
y que no se formen burbujas
(esto propicia que haya
interacciones iguales en
toda la superficie de la
slice) , despus aplicamos
la muestra , esto hizo que hubiera interacciones
entre las molculas de los colorantes y de la fase
estacionaria , se retuvieron molculas de dichos
colorantes en la fase estacionaria ,
posteriormente en la etapa de lavado se
eliminaron los compuestos no adsorbidos con
agua y finalmente en la elusin los compuestos
que se encuentran retenidos en la fase
estacionaria se eluyen con un gradiente de
metanol/agua al 10% , 50% y grado reactivo , es
decir se fue aumentando la polaridad de la mezcla
de disolventes para extraer a los colorantes.
Observamos que en nuestra muestra el Rojo No. 3
tuvo un Rf menor a comparacin de la tartrazina
esto quiere decir que el Rojo No.3 es ms afn por
la fase estacionaria y que la tartrazina es ms afn
por la fase mvil; a su vez evidenciamos que la
tartrazina es un compuesto ms polar, esto debido
a que tuvo un Rf mayor.
Conclusiones

La tartrazina es ms polar que el Rojo

No.3.

La tcnica de extraccin en fase solida

permiti la separacin de los colorantes
de una manera rpida y eficaz.

Para cromatografa en fase reversa se

utilizan disolventes polares.

Resultados
Cromatografa en placa fina de los colorantes

Tartrazina

2.6/3.8= 0.68

Rojo n.3:

3.8 3.4/3.8= 0.89

T
R3

Estndar

M. inferior: 0.68
M. superior: 0.89

Cuestionario
a)

Definir los siguientes conceptos: eluir,

eluyente, eluato, adsorcin, particin,
exclusin, intercambio inico, fluido
supercrtico.

Eluir: arrastrar mediante un lquido o fluido

sustancias adheridas o absorbidas en una
columna cromatografa.

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realizacin: 11/septiembre/2014---/6FV1/ Profesores: Jonathan fragoso Vzquez, Luis Almazn
Snchez, Eleuterio Burgueo Tapia / Equipo 3: Hernndez Balderas Jos Luis, Lozano Apolinar
Martin Alejandro.
Eluato: producto o sustancia que se separa en un
proceso de elucin.
Eluyente: sustancia que se aade en una columna
cromatografica para hacer eluir (mover) nuestro
producto de inters.
Adsorcin: es la retencin, adhesin o
concentracin en la superficie de un slido de
sustancias disueltas o dispersas en un fluido.
Particin: es el reparto de los solutos entre una
fase mvil y una fase estacionaria que esta
retenida en un soporte.

Colorante artificial ampliamente utilizado en la

industria alimentaria, tiene un peso molecular de
534.3 gr. perteneciente a la familia de los
colorantes azoicos (contienen el grupo azo (N=N-).Se presenta en forma de polvo y es soluble
en agua; hacindose de color ms amarillo en
tanto ms disuelta este. Adems es empleada en
bebidas, purs instantneos, papas fritas,
repostera, sopas instantneas, helados
caramelos, chicles, mermeladas, yogurt, gelatinas,
se trata del colorante amarillo de las paellas
(azafrn).

Exclusin: una fase estacionaria generalmente de

gel, va a seleccionar de acuerdo a los tamaos de
que tengan las partculas.

Rojo No.3

Intercambio inico: es una reaccin qumica

reversible, y se produce cuando un ion de una
disolucin se cambia por otro ion de igual signo
(positivo o negativo) que est unido a una
partcula solida inmvil.

NaO

I
O

I
NaOOC

Fluido supercrtico: es una sustancia a

temperatura y presin superiores a sus valores
crticos, y que tiene una densidad similar o
superior a la densidad critica.
b)

Investigar los nombres, formulas y

propiedades de los colorantes artificiales
usados en alimentos y empleados en la
prctica.

Tartrazina
ONa

O
N

NaO 3S

N
N
N

SO3Na

Se usa principalmente como colorante de

alimentos, para tinta de impresora, como mancha
biolgica etc. Puede causar foto sensibilidad y
puede ser cancergena, tiene un peso molecular
de 634.5. Es un xenoestrogeno, junto con otros
colorantes sintticos para alimentos.
Rojo 2G

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realizacin: 11/septiembre/2014---/6FV1/ Profesores: Jonathan fragoso Vzquez, Luis Almazn
Snchez, Eleuterio Burgueo Tapia / Equipo 3: Hernndez Balderas Jos Luis, Lozano Apolinar
Martin Alejandro.
Corresponde a fase reversa por que se utilizan
disolventes polares, en este caso metanol/agua ya
que en la fase normal se utilizaran mezclas de
disolventes no polares ya que la fase estacionaria
es polar.
e)

Es
un
colorante usado en la industria alimentaria, se usa
para la coloracin de productos crnicos y en el
lustrado de elementos de repostera, debido a que
es un colorante azoico puede provocar cncer,
alergias provocadas por salicilatos.
c)

Discutir en base a las estructuras de los

colorantes, el orden de elucin esperado
de los mismos en la cromatografa en
columna y en capa fina.

La tartrazina por la estructura, presenta un mayor

momento dipolar, en comparacin con el Rojo
No.3, por lo tanto es ms polar; es decir en la fase
normal (placa fina) eluira primero el Rojo No.3 y
despus la tartrazina, y en una fase inversa
(cromatografa en columna) eluira primero la
tartrazina y despus el Rojo No.3.
d)

Explicar si la relacin de polaridades

utilizada para la fase estacionaria y para
la fase mvil corresponde a la
cromatografa en columna en fase normal
o en fase reversa.

Explicar. Qu se entiende cuando la

columna de cromatografa empacada con
gel de slice de fase reversa lleva en su
etiqueta C12 o C18?

Se refiere a que la columna tiene en sus partculas

cadenas de 12 o 18 carbonos respectivamente, es
decir son modificadas, se vuelven matrices no
polares.
Bibliografa
Principios de anlisis instrumental
.Skoog, 5ta edicin, pgs.

K. Bauer, L. Gros y W. Sauer. 1992.

Cromatografia de capafina una
introduccin. Merck . Espaa.