Coleo UABUFSCar

Tecnologia Sucroalcooleira

Reinaldo Gaspar Bastos

Tecnologia das fermentaes

fundamentos de bioprocessos

Tecnologia das fermentaes

fundamentos de bioprocessos

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Reinaldo Gaspar Bastos

Tecnologia das fermentaes

fundamentos de bioprocessos

2010

 2010, Reinaldo Gaspar Bastos

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B327t

Bastos, Reinaldo Gaspar.

Tecnologia das fermentaes : fundamentos de
bioprocessos / Reinaldo Gaspar Bastos. -- So Carlos :
EdUFSCar, 2010.
162 p. -- (Coleo UAB-UFSCar).

ISBN 978-85-7600-190-4

1. Biotecnologia. 2. Bioprocessos. 3. Fermentao. 4.

Microbiologia industrial. 5. Enzimologia. I. Ttulo.

CDD 660.6 (20a)

CDU 66:577.1

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...........

Sumrio

APRESENTAO. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
UNIDADE 1: Introduo
1.1 Biomassa microbiana. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21
1.2 Enzimas microbianas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
1.3 Metablitos microbianos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
1.4 Produtos recombinantes. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
1.5 Biotransformao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
1.6 Microrganismos de interesse industrial. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
UNIDADE 2: Metabolismo microbiano e biomolculas envolvidas
2.1 Enzimas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
2.2 Metabolismo microbiano. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
2.2.1 Gliclise e Ciclo TCA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
2.2.2 Respirao. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
2.2.3 Metabolismo anaerbio. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41

Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43

UNIDADE 3: Cintica enzimtica

3.1 Cintica de Michaelis-Menten. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49
3.2 Determinao dos parmetros cinticos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
3.3 Inibio enzimtica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
3.3.1 Inibio enzimtica irreversvel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.3.2 Inibio enzimtica reversvel. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

3.3.2.1 Inibio enzimtica reversvel competitiva. . . . . . . . . . . . .

3.3.2.2 Inibio enzimtica reversvel no competitiva . . . . . . . . .

3.3.2.3 Inibio enzimtica reversvel incompetitiva . . . . . . . . . . .

3.3.2.4 Inibio enzimtica reversvel pelo substrato. . . . . . . . . . .

56
57
57
59
60
62

3.4 Efeito da temperatura na atividade enzimtica . . . . . . . . . . . . . . . 63

3.5 Efeito do pH na atividade enzimtica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66
Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67
UNIDADE 4: Balanos elementares em processos biotecnolgicos
4.1 Balanos materiais . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 71
4.2 Os bioprocessos podem ser conduzidos em:. . . . . . . . . . . . . . . . 71
4.3 Estequiometria dos processos microbiolgicos. . . . . . . . . . . . . . 77
4.4 Grau de reduo dos substratos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81

UNIDADE 5: Cintica dos processos biotecnolgicos

5.1 Parmetros cinticos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86
5.2 Fases de crescimento celular . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 92
5.3 Cintica de Monod. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
5.4 Modelos de crescimento celular . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
5.5 Influncia de parmetros fsico-qumicos no
crescimento celular. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 99
Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
UNIDADE 6: Operaes unitrias dos processos fermentativos
6.1 Esterilizao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 109
6.2 Agitao e mistura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 114
6.2.1 Transferncia de oxignio. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115
6.2.2 Agitao mecnica sem aerao. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 121

Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123
UNIDADE 7: Biorreatores
7.1 Biorreatores de mistura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 127
7.2 Biorreatores de mistura contnuos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131

7.3 Biorreatores tubulares . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 133

7.4 Configuraes de biorreatores. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
7.5 Aumento de escala de biorreatores. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
7.5.1 Mtodo da constncia da potncia por unidade
de volume de meio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.5.2 Mtodo da constncia do coeficiente global de transferncia
de oxignio. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.5.3 Mtodo da constncia da velocidade na extremidade do
impelidor. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.5.4 Mtodo da constncia do tempo de mistura. . . . . . . . . . . . . . . . .
7.5.5 Mtodo da constncia do Nmero de Reynolds . . . . . . . . . . . . . .
7.5.6 Escolha do critrio de scale-up. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

140
140
141
141
142
142

Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 142
UNIDADE 8: Purificao de biomolculas
8.1 Rompimento celular. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 149
8.2 Filtrao e centrifugao . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 150
8.3 Purificao baseada na solubilidade. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 152
8.4 Extrao em sistemas de duas fases aquosas . . . . . . . . . . . . . . 156
8.5 Cromatografia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 157
8.6 Tratamentos finais. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158
Referncias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 160

Apresentao
O principal objetivo deste livro apresentar os princpios da engenharia de bioprocessos e da biotecnologia industrial, de forma prtica, acessvel e condensada.
Apesar da ocorrncia de excelentes referncias sobre bioprocessos em ingls, so escassas as bibliografias em portugus que abordem esse tema. Sendo
assim, esta reviso tem a proposta de atenuar esse problema encontrado em cursos que abordem as reas de bioqumica industrial.
De maneira didtica procurou-se classificar esse amplo assunto em oito
Unidades. No incio so apresentados os conceitos fundamentais, com a definio dos termos que sero usados amplamente durante a leitura do texto. A seguir,
procurou-se apresentar os principais modelos metablicos utilizados por microrganismos de interesse industrial. importante salientar que o leitor interessado
em aprofundar os conhecimentos em metabolismo celular e bioenergtica, por
exemplo, deve procurar as referncias listadas no final de cada Unidade.
Na sequncia do texto analisamos os processos enzimticos e microbiolgicos por meio da estequiometria e balanos elementares. Um ponto fundamental
no estudo dos bioprocessos a cintica das reaes, abordada com a definio
dos parmetros mais importantes e exemplo de casos. Por fim, comentamos sobre as principais operaes unitrias utilizadas nos bioprocessos, incluindo os
princpios da purificao de biomolculas.
O autor espera que o texto seja o primeiro passo, ou seja, um agradvel impulso inicial para que o leitor se interesse pelo assunto devido facilidade de leitura
e procure aprimorar seus estudos nesta rea.

Prof. Dr. Reinaldo Gaspar Bastos

DTAiSER/CCA/UFSCar