PRIMER SEMESTRE 2012

POR: ALBERT y JAVIER

MD-43

Definiciones
v

Micologa: Rama de la biologa que estudia los

Micologa Mdica: Rama de la microbiologa mdica

que estudia los microhongos y las enfermedades que
estos producen
en humanos. Sus caractersticas morfolgicas,
mecanismos de virulencia, tratamientos y epidemiologa.

Micosis: Colonizacin o enfermedades producidas por

v
v

macromicetos (macrohongos) y los micromicetos

(microhongos)

los

hongos microhongos.

Micetismo: Intoxicacin por macrohongos

Micotoxicosis: Intoxicacin por microhongos

Que son los hongos?

Son

organismos que
poseen caractersticas
biolgica y
filogenticamente similares,
agrupados en el Reino
Fungi

Caractersticas de los
Hongos
v

SON ORGANISMOS EUCARIOTICOS

UNI O PLURICELULARES

AEROBIOS ESTRICTOS O ANAEROBIOS FACULTATIVOS

SON QUIMIOHETEROTROFOS CON NUTRICIN POR ABSORCIN

NO FOTOSINTTICOS

POSEEN EN SU PARED CELULAR:

v QUITINA , CELULOSA, MANANO, GLUCANO.

REPRODUCCION ASEXUAL Y SEXUALMENTE

SINTETIZAN LISINA.

Distribucin en la
naturaleza
v Aire:

Bioaerosoles

v Agua:

Chytridiomycetes

v Suelo:

Saprofita (descomposicin)

Interaccin con la naturaleza

SAPROFITAS
v SIMBIOTICA
v PARASITA
v PATOGENAS
Plantas
Insectos
Animales
Humanos
v

Tipos de hongos: morfologa

v Macrohongos:

v Microhongos:

Setas

Mohos y Levaduras

Clasificacin morfolgica: Fases

v

Levaduriforme
vlevaduras

Micelial
vMohos

Dimrficos:
vAmbas

Fase Levaduriforme
(Levaduras)
vHongos unicelulares.
vMacroscpicamente: Colonias pastosas, mucoides, etc.
vColonias pigmentadas:
vBlanco, crema, amarillo, rojo, salmn, chocolate, negro.
vReproduccin asexual (gemacin o fisin)
vGemacin: Monopolar, Bipolar o multilateral
vMicroscpicamente : clulas oval, redonda (diam. 3-15 m) o

artrosporas,
vTubo germinal, pseudohifas.
vCrecen:

vTemperaturas: 20-28C o 30 -37 C

Colonia de Levadura

Levadura

Levadura

Gemacin de Levadura

Fase Micelial
(Mohos)

vHongos multicelulares
vMicros:
vHifas: clulas filamentos /unidad estructural
vEsporas: estructura para reprod. asexual.
vMacroesporas o macroconidias
vMicroesporas o microconidias
vMacros: textura superficial:
vColonias algodonosas, lanosa, aterciopelada
vPigmentadas: todos los colores
vReproduccin: Sexual y asexual.
vCrecen: 20-28C. Dimrficos a 37 C

Unidad estructural:
Mohos

vHIFAS

TIPOS DE HIFAS
VEGETATIVAS

Y AEREAS

Tipos de esporas o conidias

COLONIAS MICELIALES

Hongos Dimrficos
vSon

los hongos que tienen la

capacidad de desarrollar tanto la
fase micelial como la fase
levaduriforme, bajo diferentes
condiciones ambientales
(Temperatura)
vFase Micelial: 20-28C.
vFase levaduriforme: a 37 C
vLos patgenos.

Diagnstico de
Laboratorio

El diagnstico
micolgico

vEtiolgico:

vCausante de una micosis o

infeccin
Diferencial:
vTodos los posibles agentes
causantes de una micosis o
infeccin

Muestras
vEscamas
vEsputo
vUa
vSecrecion

es
vPelos

n Cabellos
n Hisopados
n L.C.R
n Sangre
n Biopsias

Directo
examen en fresco
v KOH

al 10-20 %
v Azul de algodn o Lactofenol
v Calcofluor blanco
v Negro de Clorazol E
v Tinta China
v

AGUA

Otras
Tinciones
vNigrosin

a
vWrigtht
vGiemsa
vDiffquick

nGram
nPAS
nMusicarmin
nGomori
nH.E

Medios de cultivos
Secunadarios

Primarios
v Sabouraud
vGlucosa,

peptona.

v Mycosel

vCiclohexim

ida

v Littman
v Agar de

Malta

v CROMOagar
v Agar

Dextrosa Papa
(P.D.A)
v Agar Harina de Maz o
corn-meal (A.H.M)
v G25N
v STAIB
v DTM, Etc.

Incubacin
vLevadura:

v37 C, 48 horas, aerobiosis

vMoho:

vT.Amb. 2 das-30 das

vDimrfico

vLev: 7-30 das

vMoho: 5 das a 30 das o ms

Identificacin
v Morfologa:

90 % de utilidad en los mohos

v Fisiolgica y nutricional: 95% de la
levaduras
vFermentacin o asimilacin de azcares, urea

v Inmunolgicas:
vAntgenos: IF, ELISAS
vAnticuerpos: Rx Agente , (1,3)--D-glucano

v Moleculares:

PCR. REA, etc.

CLASIFICACION
DE LOS
HONGOS

Penicillium spp.
Generalidades:
La especie patgena es
Penicillium marneffei
Caractersticas
Microscopicas:
Conidiforos biverticilados y
de localizacin
preferentemente terminal.
Ejemplos: P. citrinum, P.
janthinellum, P.
purpurogenum, y P. rubrum

Penicillium spp.
Caracteristicas

de la fase micelial:

Producen conidioforos en el extremo de las hifas vegetativas

septadas ramificadas, dando lugar a rmetulas que originan las

fialides, las cuales portan cadenas de conidias lisas o rugosas

Penicillium

Medios de cultivo:
- Mycosel
- Sabouraud dextrosa
Tinciones: Azul de
lactofenol

Aspergillus spp.
Caracteristicas generales:
Hongo que vive en materia de plantas
descompuetas
Patologa: tos, dificultad para respirar,
fiebre y lesiones (aspergiloma),
Onicomicosis.
Caracteristica de la fase micelial
Los conidiforos fcilmente
distinguibles del micelio vegetativo, de
longitud variable terminando en una
vescula globosa o clavada, rodeada
parcial o totalmente, con sus conidias
globosas o elipsoidales, hialinas o
coloreadas
Ejemplos: Aspergillus niger,
Aspergillus flavis.

Aspergillus

Aspergiloma

Localizaciones del aspergiloma: Pulmon

Aspergillus spp.

Caracteristicas macroscopicas:
Son colonias de crecimiento
rpido de aspecto variable,
afelpado, pulvurulento o
algodonoso.
Cultivo: Agar sabouraud
Tinciones: Azul de lactofenol

Mucor spp.

Caracteristicas Generales
Hongo

filamentoso encontrado en suelo, plantas, frutas que se caen.

Contaminante

Mucor

comn del laboratorio.

spp. puede causar infecciones en hombre, anfibios, ganados, y cerdos.

La

mayora de los Mucor spp. no pueden crecer a 37C y las muestras aisladas
de infecciones humanas son generalmente de los Mucor sp. termotolerantes.
Ejemplos:

Mucor ramosissimus y Mucor circinelloides.

Mucor spp

Caracteristicas microscopicas
Los esporangioforos son recto, simple o ramificado, forman
terminaciones grandes (60-300 um en dimetro) globosa o
esfrica, el esporangio contiene mltiples esporas con una
columna bien desarrollada.

Mucor spp.

Caracteristicas Macroscopicas:
Su aspecto algodonoso con una altura de vario centmetro se
asemeja al caramelo del algodn
Cultivo: Sabouraud Dextrosa
Tincion: Azul de lactofenol

Rhizopus spp.
Caracteristicas generales:
-Micelio: rapido crecimiento,
aspecto algodonoso, de color
blanco ceniza o negrusco.
-Hifas: cenociticas hialinas del
cual se diferencian
esporangioforos, sobre un
rizoide, terminando en
esporangiosporas.
Ejemplos: Rhizopus oryzae, R.
rizopodimorfis, R. stolonifer, R.
microsporas y R. nigricans.

Rhizopus spp.

Rhizopus spp.

Caracteristicas Macroscopicas:
-Rapido crecimiento, aspecto algodonoso, de color blanco ceniza o
negrusco.
-Llena todo el plato, llega hasta la tapa del agar.
Cultivo: Sabouraud dextrosa

Fusarium spp.
Caracteristicas generales:
-Hifas: con conidioforos simples o
ramificados, solitarios o formando
esporodoquios con microconidias
apicales simples y macroconidias
fusiformes de bordes curvados, con
apices obtusos o agudos, solitarios o en
cadena con algunos tabiques
transversales.
-Patologia: onicomicosis, cancer de
sangre (leucemia aguda no linfoide)
-Puerta de entrada:
Tracto respiratorio
Tracto digestivo
Piel
Catteres venosos
Uas

Fusarium spp.

Ejemplos: F. solani, F. oxysporum, F.

proliferatum, F. verticillioides
Cultivo: Sabouraud

Scopulariopsis sp.
Caracteristicas
Generales:
-Es un hongo contaminante comn.
Las esporas nacen del conidiforo y se
desprenden de la base hacia el apice
en forma distal, colonias de color
chocolatoso.
-Hifa: conidioforos ramificados, la
porcion superior se asemeja a racimos
de fialides, conidios hialinos de una
celula globosa con una base truncada.
-conidias en forma de concha.
Patologias: Onicomicosis, Tinea
corporis, tinea pedis.
Ejemplos: Scopulariopsis brevicaulis

Neurospora sp.
Caracteristicas Generales:
Hifa: originan conidioforos que
producen cadenas ramificadas de
conidias (ovales) por gemacion
continua que se disocian con
facilidad. Las artrosporas
constituyen porciones de micelio
vegetativo que se desintegraron a
nivel de los tabiques.

Neurospora sp.

Caracteristicas Macroscopicas:
Rapido crecimiento; al principio blanco y luego color
salmon debido a produccion masiva de esporas.
Cultivo: sabouraud

 Micosis

superficial
Infecciones en mucosas
Infeccin oportunista. Candida sp.
Crnicas o agudas
Distribucin: Cosmopolita
Hbitat: flora normal.

Rhodotorula glutinis
Levadura

mucoide con pigmento

carotenoide que le confiere color rojoanaranjado.
Puede causar problemas renales en los
hospitalizados.
Saprofita
Blastoconidias unicelulares, ovaladas

Cryptococcus neoformas

Levadura encapsulada, no micelial

Examen directo se realiza con esputo, exudado o
tejido cerebral. Tambin se ve en heces de aves.
Tincin con tinta china para resaltar (TINCION
NEGATIVA)
Cultivos se realizan en temperaturas de 32 a 37.
Colonias blancas o amarillentas, lisas y brillantes de
aspecto mucoso.
Positivo para la prueba de ureasa.
Dx con LCR, se centrifuga y se realiza con tinta
china diluida en agua (1:5)
MENINGITIS CRIPTOCCCICA

Colonias
amarillentas,
blancosas,
brillantes y lisas

Azul de Algodn

Candida albicans
Produce la enfermedad mictica
conocida como candidiasis.
v Levadura que puede localizarse en piel,
dentro de la boca y rea vaginal.
v En las mujeres VIH positivas, la
candidiasis vaginal puede resultar ms
frecuente y severa.
v La candidiasis oral es comn entre las
personas VIH positivas.
v Colonias pastosas en SDA (Saboraud
dextrosa agar)
v

CHROMagar
Medio de cultivo selectivo y diferencial para

Candida albicans, diferencia especies de

Candidas por su color.
Candida albicans es verde

clamidospora

Tincin
de
GRAM

Tubos
germinales

Tincin en Azul
de algodn

Malassezia furfur
Produce Pitiriasis versicolor (pao
blanco)
Crecen en el medio Dixon a 32
Es lpido dependiente
Colonias: cremosas, pequeas, de color
beige.
Morfologa: racimos de esporas gemantes
ovaldas o redondeadas y filamentos
fragmentados, cortos, sinuosos de 2-4
micras y ambas dan apariencia de
macarrones con bolitas de carne

Prueba de UREASA

(+)

(-)

(+)

(+)

 Dermatofitos:

hongos estrechamente
relacionados por taxonomia y
QUERATINOFILIA
Queratinofilia: afinidad que tienen los hongos por

estructuras queratinizadas como ua, cabello y

piel
Causantes

de las enfermedades cutneas

llamadas TIAS O DERMATOFITOSIS

 Medios

de cultivo

DTM (Dermatophyte test medium): Medio

selectivo para dermatofitos con cicloheximida

(antisaprfitos) y un indicador rojo fenol
Mycosel: Medio de cultivo altamente selectivo con
ciclohexamida y cloranfenicol
Tinciones: Azul

de algodn

MYCOSEL

DTM

Microsporum:
Cabello, vello y piel

Trichophyton:

Cabello, piel y ua.

Epidermophyton:
Piel y ua

TRICHOPYHTON

Trichophyton rubrum
Rubrum = rojo
Caractersticas en el plato
Cuando crece en el plato se forma una especie

de borde rojo alrededor AL REVERSO

De forma ALGODONOSA
Caractersticas

en el microscopio

Microconidia en forma de lgrima

Causante

LA UA)

de ONICOMICOSIS (MICOSIS DE

Trichophyton mentagrophytes
En el plato: de color blanco marfil.
En el microscopio:
Hifas en espiral
Microconidias en forma de racimo de uvas
Escasos macroconidios

UREASA +
ONICOMICOSIS

Trichophyton tonsurans
Caractersticas en el plato: Color azufroso
(blanco amarillento),anaranjado AL
REVERSO algodonoso
Caractersticas en el microscopio:
Microconidias alrededor de la hifa como
patitas de ciempies o en forma de globo
alargado
Hifas delgadas
A veces presentan clamidiosporas
ONICOMICOSIS

Epidermophyton floccossum
Caractersticas en el plato: No son tan
abundantes, es seco, verde oliva. Es de
color marrn anaranjado AL REVERSO
Caractersticas en el microscopio:
Macroconidias en forma de dedo, forma
achatada, agrupados como en rcimos de
pltano
TINEA CORPORIS

Mycrosporum canis
Caractersticas en el plato: Forma
algodonosa de color amarilloso
Caractersticas en el microscopio:
Macroconidia englobada en forma de huso
con mas de 6 clulas por macroconidias.
TINEA CAPITIS

Mycrosporum gypseum
Caractersticas en el plato: Forma polvosa y
seca de color caf canela
Caractersticas en el microscopio:
Macroconidias englobadas en forma de huso

hasta 6 clulas
Punta lanceolada
TINEA CAPITIS

Dematiceos
(micosis
subcutnea)

Dematiceos
(micosis subcutnea)
Curvularia
Phialophora
Cladosporium
Fonsecaea
Clulas

fumagoides

Caracterstica
Clasificacin taxonmica
Clase: monilia
Orden: Hyphomycetales
Familia: dematiaceae
Va de infeccin: exgena
Distribucin: Ubicua (asociado a material
orgnico, suelo y vegetacin).

Colonias de Dematiceos
Medio:

Sabouraud
Colonias crecen a 37 C
De crecimiento lento 7-12 das
Colonias: presentan un color negro
desde una vista superior e inferior del
plato, lo llamado: negro por delante y
negro por detrs.

Phialophora spp.
Filides

en forma de florero o botella,

son ssiles, de base ancha y cuello
estrecho.
Las fialosforas se unen por un material
adhesivo y se aglutinan en forma de
ramillete.
Microconidias en el conodiforo.

Curvularia lunata
Macroconidias

en forma ovalada.
Conidia curvada, marrn oscuro con 3
tabiques.
Es un patgeno de plantas con gran
importancia en los trpicos.
En humanos, causa queratitis y
sinusitis.

Cladosporium spp.
Cnidioforos

cortos y pigmentados, con

formacin acroptala de conidios y cada
conidio produce el subsecuente por
gemacin, de manera que forman
cadenas.
Las cadenas pueden ser cortas, de 3 a
4 esporas y son muy ramificados y con
conidios elpticos de tamao constante

Fonsecaea pedrosoi
Fonsecaea

pedrosoi es un hongo
saprtrofo, pigmentado y filamentoso
que vive en plantas cactcea.
Los hongos de esta especie son
sexualmente dimrficos,es decir, tienen
un estado moho (en medio de cultivo) y
otro levadura.
Las esporas llamadas blastoconidias se
localizan al extremo de hifas.

Aureobasidium pullulans.
Hongo

dimorfo que presenta micelio

pigmentado con hifas de las que nacen
de forma ssil numerosos conidios
hialinos (de 2-3 m) y piriformes, los
cuales, una vez libres, forman por
gemacin otros ms pequeos.

Clulas Fumagoides
Tambin

llamadas clulas de Medlar o

cuerpos cruzceo.
Su caracterstica asemeja a granos de
caf o monedas de cobre.
Se observan en grupos de 2 o ms; son
esfricas u ovaladas, miden de 4 a 8 um
de dimetro, son de color caf
amarillento

Cromomicosis
Proceso

granulomatoso de la piel
debido a infeccin por: Phialophora
verrucosa, Fonsecae y otros
dematiceos.
Tambin conocida como:
Cromoblastomicosis, Enfermedad de
Pedroso, Enfermedad de Fonseca.

Dimrficos
Producen

micosis sistmica
Su foco primero de infeccin es el
Pulmn
En cultivos a 37 C presentan
morfologa unicelular (levadura).

Histoplasma capsulatum
histoplasmosis
Muestra:

sangre, mdula sea, hgado,

piel y esputo
Se puede obtener la fase levaduriforme
cultivando a 37
Hifas largas y ramificadas y septadas, a
los lados hay microconidias esfricas.
Macroconidias equinuladas o
tuberculadas.
Medio: Sabouraud

Fase
levaduriforme

Fase
micelial

Histoplasma
capsulatum
Fase micelial

Datitos

Se
diferencian
por ser de
color azul.

Macroconidias

Paracoccidioides brasilensis
Paracoccidioidomicosis
El examen directo se realiza con muestras
de esputo, exudado o triturado de biopsia
Morfologa levaduras esfricas u ovales de
doble pared y con gemacin mltiple.
Importancia mdica: Infecciones
pulmonares asintomticas.
Cultivos: Sabouraud y BHI,Mycosel, a
temperaturas de 25 y 37C
Tincin utilizada: la de Gomori

Datitos
Parecen orejas de
Mickey mouse

Blastomyces dermatitidis
Examen

directo se obtiene de pus,

lavado bronquial y esputo con KOH.
Cultivo en Sabouraud, a 25 C
obtenindose la forma micelial.
Caracterstica: en el tejido es una
levadura enorme de una base ancha de
gemacin.

Fase
micelial

En
Tejido

Pneumocystis jiroveci
No

es di mrfico
Morfologa: similar a protozoos
( ameboideo y pseudpodos).
No crece en medio micolgicos
Estadios: trofozoito, prequiste y quiste.
Dx: mediante lavado broncoalveloar y
un examen directo

Sporotrix schenckii
Esporotricosis
Muestra:Biopsia del tejido, fluido de la
rodilla.
Tambin llamado enfermedad del jardinero.
Se puede diseminar y aparecer pulmonar u
osteoarticular.
Se clasifican: como dimrfico y
dermaticeos.
Forma de margarita.
Hifa vegetativa

Fase
levaduriforme

Fase
micelial

Inclusiones virales
Los

cuerpos de inclusin son

estructuras observables a microscopa
ptica y constituyen centros activos del
ciclo vrico intracelular. Corresponden a
complejos replicativos, transcripcionales
o de ensamblaje

Ojo de bho
Agente causante: Citomegalovirus
Localizacin: Nuclear
Caractersticas: Hacen las clulas mas
grandes, inclusiones basfilas.
Caractersticas de reconocimiento: Inclusin
basfila con un halo claro que se extiende
hasta la membrana nuclear

Cuerpos de Negri
Agente causante: Virus de la rabia
Localizacin: Citoplasmtica
Caractersticas: agregados de nucleocpside
en las neuronas de cerca de 50 a 80% de
los humanos infectados.
Caractersticas de reconocimiento: masas
redondas u ovales (forma de bala) y
EOSINFILAS

Coilocito
Agente causante: Virus del papiloma humano
Localizacin: Es una clula epitelial plana
modificada
Caractersticas: pierde los bordes angulados
usuales de la clula escamosa superficial.
Caractersticas de reconocimiento: Clula
redondeada u ovoide con ncleo excntrico.
con un margen muy bien definido, de forma
oval. A veces con material fagocitado dentro del
espacio coiloctico

Cuerpos de Cowdry
Agente causante: De la familia Herpesviridae
Localizacin: Estrictamente intranuclear
Caractersticas: Solo encuentras 1 por clula
Caractersticas de reconocimiento: Clula
aumentada de tamao, halo perinuclear en
forma de cuentas de rosario.

EMBRIONES DE POLLO

PARTES

Partes del embrion que se utilizan para

inocular virus:
Membrana corioalantoidea
Cavidades alantoideas y amniticas
Saco vitelino
Intracerebral
Endovenosa

Virus que se pueden inocular en

embrin de pollo
Mixovirus:

Influenza y parotiditis
Herpesvirus: herpes simplex
Poxvirus: viruela

Que pasa en la fase aguda de la

virosis
Se

puede detectar el antgeno, cidos

nucleicos y su biologa molecular

Como podemos detectar el

virus
ME,

poder de resolucin: 2nm o 0,0002

um. El tamao de los virus vara de 20
300 nm
aislamiento del virus en cultivo de cel,
animales de laboratorio, mosquitos,
embrin de pollo
deteccin del cido nucleico
deteccin de Antgeno

Que pasa en la fase

convalesciente
Se

pueden determinar anticuerpos

contra el virus

Medios de transporte para la

muestra
PBS
Caldo

de triptosa fosfato con

antimicoticos y antibioticos ademas de
proteinas de soporte (albmina o
gelatina)

Tomado de la muestra
3-5

das de los primeros sntomas

Rotular con datos del paciente y
acompaarse del formulario
Hisopado nasal, lavado nasal, muestras
de heces, LCR, biopsias, orina, sangre.

Pruebas que hicimos para

determinar Ac
Faltan

algunas pruebas como la de la

rubeola y algunas creo que no se
hicieron pero la importancia es que
todas estas pruebas son por
INMUNOCROMATOGRAFIA.
Esta se basa en la deteccin del
complejo antgeno-anticuerpo.

 Tcnica

por inmunocromatografa:

Banda C: es la banda de control, indica que la

prueba es vlida, NO INDICA NADA MS

BANDA G: Es la banda que indica proteccin
(Vacuna) o puede ser una infeccin que ya tiene
meses de haber pasado su estado
sintomatolgico
Banda M: Marca una prueba POSITIVA para una
infeccin reciente o en progreso.

Principio de la prueba de
hemaglutinacin
El

virus tiene hemaglutininas que se

unen a los glbulos rojos (Reaccin
antgeno anticuerpo)

Principio de la prueba de la
inhibicin de la hemaglutinacin
La

inhibicin de la hemaglutinacin es
un mtodo que consiste en la capacidad
de los anticuerpos presentes en un
suero para contrarrestar los virus
aglutinantes, a travs del bloqueo de los
sitios de unin entre virus y glbulos
rojos.

Principio de la prueba de
ELISA
Se basa en la habilidad de materiales
biolgicos (antgenos virales, anticuerpos)
de adherirse a superficies plsticas. Luego
se agrega IgM conjugada con la enzima
que se unir al complejo Ag-Ac formado.
Luego se adiciona el cromgeno (TMB).
Si el paciente tiene Ac se producir un
color azul que por el H2S04 se torna
amarillo, esta intensidad ser proporcional
a la concentracin de los anticuerpos

Criterios para validar una prueba

diagnstico
Sensibilidad:

porcentaje de personas
infectadas con un resultado positivo
Especificidad: porcentaje de personas
que dan un valor negativo por no tener
la enfermedad
Valor predictivo: indica la probabilidad
que la prueba correcta indique la
presencia o ausencia de la enfermedad.
Siguen un criterio llamado: GOLD
STANDAR

Texto de la profesora
Si

usted atiende un paciente en quien

sospecha una virosis, tiene varias
alternativas con ese paciente:
puede solicitar exmenes de rutina
puede tener su diagnstico clnico sin hacer

laboratorios especficos de virus

puede solicitar estudios de citologa para ver
inclusiones, aislar virus, detectar Ag,
detectar cidos nucleicos, mirar al ME

Efecto citoptico
Cambios bioqumicos y moleculares,
morfolgicos y de viabilidad celular,
visibles a microscopa ptica, causados
durante el ciclo de replicacin viral.