FACULTAD DE CIENCIAS

DEPARTAMENTO DE QUMICA
LABORATORIO DE PRINCIPIOS DE QUMICA ORGNICA

CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

GRUPO 4: Laura Marena Castao Garrido
Diego Alejandro Romero Jimnez
INTRODUCCIN
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin en la que los componentes
a separar se distribuyen en dos fases: estacionaria y mvil. Primordialmente es
usada para separar mezclas esencialmente moleculares y se basa en la
diferencias de velocidades en la que los componentes individuales que hacen
parte de la mezcla viajan por la fase estacionaria bajo la influencia de la fase
mvil, en un proceso adsorcin-desorcin 1. En esta prctica de laboratorio se
llevara a cabo la cromatografa de capa fina, siendo el tipo de cromatografa
ms usada por la simplicidad de sus mtodos y la velocidad de su anlisis; el
objetivo de la prctica es la identificacin de los compuestos de la mezcla
desconocida dada.
PROCEDIMIENTO
CROMTAOGRAFA EN CAPA FINA

Se activan las placas previamente preparadas, colocndolas en

la estufa.
Trazar una pequea marca a lado y lado de la placa a 1 cm del
origen.
Colocar las manchas de la muestra y los patrones sobre la marca
hecha.
Colocar el solvente en cada una de las cmaras cromatografas y
tapar hasta que se sature con el vapor de este.
Introducir la placa y retirar antes de que el frente del eluyente
llegue a la parte superior.

Marcar el frente del solvente con una capilar y medir las

distancias recorridas.
Repetir el procedimiento para una mezcla de solventes y realizar
los mimos clculos.
FIN

Imagen 1. Montaje de cromatografa de capa fina.

RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS
P1: p-nitrofenol
P2: Sudan III
P3: m-nitroanilina
P4: Azobenceno
Muestra 1: Distancia de la muestra en la primera placa con el solvente.
Muestra 2: Distancia de la muestra en la segunda placa con el solvente.
1. ter de petrleo
Frente
del
solvente
(cm)

Muestra
1 (cm)

P1 (cm)

P2 (cm)

Frente del
solvente(c
m)

Muestra
2 (cm)

P3 (cm)

P4 (cm)

1,7

2,6

Muestra
2 (cm)

P3 (cm)

P4 (cm)

1,5-1,73

1,6

4,3

5,8
0,5
1
1,5
5,9
0,5
Tabla 1. Distancias recorridas para el ter de petrleo.
2. Tolueno
Frente
del
solvente
(cm)

5,8

Muestra
1 (cm)

P1 (cm)

P2 (cm)

Frente del
solvente(c
m)

1,5-1,62,3
2,5
5,7
2,6
Tabla 2. Distancias recorridas para el tolueno.

3. Metanol
Frente
del
solvente
(cm)

Muestra
1 (cm)

P1 (cm)

P2 (cm)

Frente del
solvente(c
m)

5,7

4,6-5,35,4
5,5
5,9
5,6
Tabla 3. Distancias recorridas para el metanol.

Muestra
2 (cm)

P3 (cm)

P4 (cm)

5,1-5,75,8

5,7

5,8

Muestra
2 (cm)

P3 (cm)

P4 (cm)

4,5

5,5

4. Mezcla 9:1 Tolueno Metanol

Frente
del
solvente
(cm)

Muestra
1 (cm)

5,4

2,7-4,8

P1 (cm)

P2 (cm)

Frente del
solvente(c
m)

4,8

5,7

3,2-4,95,3
Tabla 4. Distancias recorridas para la mezcla de solventes.

Rf

ter

Tolueno

Metanol

Component
0,09
0,26-0,280,80-0,92es de la
0,45
1,02
muestra
p-nitrofenol
0,17
0,396
0,95
Sudan III
0,26
0,431
0,97
m0,29
0,281
0,97
nitroanilina
Azobenceno
0,44
0,754
0,98
Tabla 5. Rf para los patrones y la muestra en cada solvente.
Rst
p-nitrofenol
Sudan III
mnitroanilina
Azobenceno
Tabla 6. Rst con los

ToluenoMetanol
0,89-0,860,93
0
0,89
0-79
0,96

ter

Tolueno

Metanol

0,5
0,33
0,29

0,70
1,04
1,06

0,98
1,02
1

ToluenoMetanol
1
0
1,09

0,96

0,19
0,70
diferentes solventes.

Para la cromatografa como solvente el ter de petrleo aunque se observa

desplazamiento de los patrones utilizados, se observa poco desplazamiento de
la muestra y no hay separacin de sus componentes lo que indica que el ter
de petrleo presenta una polaridad casi nula con la muestra. Al contrario del
ter, para el metanol se obtiene el mayor desplazamiento indicando una alta
afinidad con los componentes de la muestra y los patrones.

Aunque con el metanol se observa una separacin de los componentes de la

muestra, con el tolueno la separacin obtenida es ms ntida y el
desplazamiento observado de los patrones es grande.
Por los resultados anteriores se llega a la conclusin que para obtener un mejor
resultado la mejor mezcla de solventes a utilizar es tolueno-metanol en una
proporcin 9:1 ya que para el tolueno se observ la mejor separacin de
componentes de la muestra y un buen desplazamiento pero el metanol mostro
el mejor desplazamiento de los 3.
El resultado de la cromatografa con la mezcla de solventes fue el esperado ya
que se present una separacin de los componentes de la muestra muy
definida y hubo grandes desplazamientos por parte de los componentes y los
patrones.
Observando los resultados de la medida de velocidades en cada uno de los
solventes se puede comprobar que si estos son
poco polares y los
componentes de la muestra son polares va a haber mayor retencin en la fase
estacionaria arrojando valores de Rf ms pequeos y de la misma forma para
compuestos polares y solventes polares el desplazamiento es mayor y por lo
tanto su Rf tambin es mayor.
Los valores de Rst nos permiten identificar la presencia de los patrones 1,3 y 2
ya que las distancias recorridas por los patrones y los componentes de la
muestra son muy similares.
CUESTIONARIO
1. Qu ocurre si al introducir la placa en la cmara cromatografa,
el nivel del eluyente alcanza el sitio de aplicacin de la mancha?
Los componentes de la muestra y/o los patrones podran disolverse en el
eluyente impidiendo la separacin.
2. Cul es el efecto de la polaridad en la cromatografa?
De la interaccin que tengas las sustancias de las manchas con el depender la
velocidad de migracin de estas mismas.
3. Cules son las diferencias entre cromatografa liquida y de
gases?
A diferencia de la cromatografa liquida donde la fase mvil interacta
directamente con la sustancia a separar, en la cromatografa de gases esta
fase no interacta con las molculas de la sustancia ya que su nica funcin es
transportar estas molculas a travs de la columna cromatografa.
4. Profundizacin sobre fluorescencia para sustancias incoloras

Los indicadores para la luz ultravioleta permiten localizar algunos de los

compuestos separados, evitando de sta manera las reacciones de coloracin
que los altera qumicamente. Por lo anterior, existen placas que
traen impregnadas un indicador de fluorescencia para facilitar la identificacin
de las muestras, de otro modo se hara necesario pasar la placa a una etapa de
revelado que sustancialmente se hace bajo la influencia de la luz ultravioleta,
para ello se puede utilizar una fase estacionaria que contenga un indicador de
fluorescencia (F254 o F366) En los indicadores enunciados, el subndice
representa su longitud de onda de excitacin. Tambin podra accederse a la
introduccin de la placa en vapores de yodo o el roco de launa solucin de
Agua cido Sulfrico.
El indicador que se adiciona a los sorbentes para que produzca una intensa
fluorescencia cuando se exciten con luz U.V. de onda corta (234nm) es
generalmente el silicato de zinc activado con magnesio, en una proporcin del
2%. Los compuestos presentes en la placa que absorben esa longitud de onda
contrastarn en forma de manchas oscuras sobre un fondo verde. De manera
anloga, el indicador que permite el revelado con luz U.V. de longitud de onda
larga (366nm) es generalmente fluorescena sdica que emite una
fluorescencia azul sobre la cual resaltarn las manchas oscuras,
correspondientes a los compuestos que absorben a esa longitud de onda.
Tambin, pueden detectarse sustancias que no absorben a esas longitudes de
onda porque se disminuye la fluorescencia en el sitio correspondiente, por
ejemplo lpidos y esteroides saturados.2
5. Parmetros de la cromatografa liquida de alta eficiencia
La cromatografa de alta eficiencia se fundamenta en impulsar mecnicamente
el eluyente con ayuda de una bomba y de ste modo el proces suceder con
una mayor velocidad a la presentada convencionalmente ya que en esencia,
como el eluyente no asciende por capilaridad o no desciende por
gravedad ste proceso se agiliza.
ste tipo de cromatografa se lleva a cabo especialmente bajo las siguientes
consideraciones: Alta sensibilidad, adaptacin a determinaciones cuantitativas,
separacin de especies no voltiles, separacin de especies termolbiles.
De igual manera, este tipo de cromatografa est basada en el descubrimiento
de que las separaciones cromatografas mejoran mucho si la fase estacionaria
est formada por partculas esfricas de tamao uniforme y muy pequeas. El
tamao reducido de la partcula asegura tener una gran rea superficial para
adsorber mejor y una forma esfrica permite un empacamiento estrecho y
uniforme. En la prctica se suelen utilizar micro esferas recubiertas de slice, de
10 a 25 um de dimetro, preparadas especialmente. Slo 15 g de estas micro
esferas ocuparan una superficie igual a la de un campo de ftbol americano.
Se
requieren bombas de alta presin para hacer pasar el disolvente
a travs de una columna de cromatografa de alto rendimiento y se usan
detectores electrnicos para monitorear la aparicin de material eludo de la
columna.2
CONCLUSIONES

Los patrones presentes en la muestra dad son p-nitrofenol, azobenceno

y m-nitroanilina.
La influencia de la polaridad en la cromatografa de capa fina es muy
importante ya que dependiendo de la polaridad o apolaridad del
solvente utilizado y de los componentes de la muestra a analizar, estos
ltimos quedaran o no retenidos en la fase estacionaria, definiendo la
eficiencia de la cromatografa.
Es importante la aplicacin de la muestra o los patrones en las placas ya
que en muchos casos donde son colocadas muy cerca a los bordes al
momento de desplazarse sobre la placa tienden a irse hacia a fuera de la
placa ya que esta la fase estacionaria no est totalmente homognea
sobre esta.

BIBLIOGRFA
1. Gua de laboratorio de principios de qumica orgnica.
2-3
https://es.scribd.com/doc/216035542/Informe-5Cromatografia-en-capa-fINA