LABORATORIO No 1:
CARACTERISTICAS DE OPERACIN DEL
SPECTRONIC 20
GRUPO DE LABORATORIO #1
OBJETIVO.
Introducir los principios fundamentales de la espectrofotometra y conocer las
caractersticas de operacin de un espectrofotmetro.
INTRODUCCION.
En el presente reporte de laboratorio se comprender el uso y aplicaciones del
Spectronic 20 con el fin de obtener las respectivas curvas espectrometricas con
los datos observados en el espectrofotmetro.
Se comprobar el cambio de color entre el rango de luz UV/visible e infrarrojo.
Al momento de determinar la absorbancia de la solucin de Cr(NO 3)3, primero se
har la prueba en un blanco (agua destilada) a cada longitud de onda para
eliminar interferencia del solvente a la hora de obtener resultados.
TEORA.
La espectrometra de absorcin se refiere a una variedad de tcnicas que
emplean la interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. En la
espectrometra de absorcin, se compara la intensidad de un haz de luz medida
antes y despus de la interaccin con una muestra. Las palabras transmisin y
remisin se refieren a la direccin de viaje de los haces de luz medidos antes y
despus de la absorcin. Las descripciones experimentales por lo general asumen
que hay una nica direccin de incidencia de la luz sobre la muestra, y que un
plano perpendicular a esta direccin pasa por la muestra. En la transmisin, la luz
es dispersada desde la muestra hacia un detector en el lado opuesto de la
muestra. En la remisin, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector
en el mismo lado de la muestra. La radiacin remitida puede estar formada por
dos clases de radiacin: reflexin especular (cuando el ngulo de reflexin es igual
al ngulo del frecuencia) y reflexin difusa (en todos los dems ngulos).
Otro descriptor asociado con la espectrometra de absorcin es la variedad de
desde un nivel de energa a otro en esa sustancia. La muestra puede ser una
sustancia pura, homognea o una mezcla compleja. La longitud de onda en la cual
el fotn incidente se absorbe es determinada por la diferencia en los niveles de
energa disponibles de las diferentes sustancias presentes en la muestra. Esta es
la selectividad de la espectrometra de absorbancia, la capacidad de generar
fuentes de fotones (luz) que son absorbidas slo por algunos componentes en una
muestra. Tpicamente, los rayos X se usan para revelar la composicin qumica,
mientras que las longitudes de onda cercanas al ultravioleta y el infrarrojo se usa
para distinguir las configuraciones de diversos ismeros detalladamente. En la
espectroscopia de absorcin, los fotones absorbidos no son emitidos de nuevo
(como en la fluorescencia) sino que la energa que se transfiere al compuesto
qumico en la absorbancia de un fotn se pierde por medios no radiantes, como la
transferencia de energa por calor a otras molculas.
Aunque la intensidad relativa de las lneas de absorcin no vara con la
concentracin, a cualquier longitud de onda dada la absorbancia medida ( log (I /
I0)) es proporcional a la concentracin molar de las especies que absorben y el
grosor de la muestra por la que la luz pasa. Esto se conoce como ley de BeerLambert. El grfico de la cantidad de radiacin absorbida respecto a la longitud de
onda para un compuesto particular se conoce como espectro de absorcin. El
espectro de absorcin normalizado es caracterstico para cada compuesto
particular, no cambia con la concentracin y es como la "huella digital" qumica del
compuesto. En las longitudes de onda correspondientes a los niveles de energa
resonantes de la muestra, se absorben algunos de los fotones incidentes, lo que
provoca una cada en la intensidad de transmisin medida y una pendiente en el
espectro. El espectro de absorcin puede medirse usando un espectrmetro.
Conociendo la forma del espectro, la longitud de ruta ptica y la cantidad de
radiacin absorbida, se puede determinar la estructura y la concentracin del
compuesto.
Los espectros de absorcin de luz visible pueden tomarse en cualquier material
que sea visiblemente claro. El poliestireno, el cuarzo, y las clulas de borosilicato
Espectrofotmetro Spectronic-20
Celdas para espectroscopia
5 frascos volumtricos de 25 ml
Pipeta de 10 ml
Pipeta de 5 ml
2 beakers de 10 ml
1 frasco volumtrico de 4500 ml
Scout wiper
Pizeta
Agitador de vidrio
Balanza analtica
REACTIVOS Y DISOLVENTES:
NO
Solucin de Cr
0.05 M
Agua destilada.
PROCEDIMIENTO.
A- OPERACIN Y RESPUESTA DEL ESPECTROFOTOMETRO
1. Encienda el espectrofotmetro.
2. Ajuste la perilla de control de amplificador (ubicado al lado izquierdo en el
frente del instrumento) hasta que la aguja del medidor lea 0%T, y deje que
el instrumento caliente al menos por 20 minutos.
3. Mientras tanto, prepare una solucin 0.02 M de Cr(III) a partir de la solucin
stock 0.05M de Cr(III)
4. Despus que el instrumento haya calentado, vuelva a llevar a cero el
instrumento si es necesario.
NO
3.
4.
5.
6.
INSTRUMENTO UTILIZADO.
Escala
Piloto
Recipiente
Para muestra
Perilla de control
de longitud de onda
Escala de
Longitud de onda
Perilla de control
de cero e interruptor.
longitudes de onda de luz similares pasa a travs de una segunda rejilla hacia la
muestra de solucin a medir. Cualquiera de las longitudes de onda de esta luz que
no es absorbida por la muestra de solucin, pero que atraviesa la solucin, incide
sobre el fototubo, donde la intensidad de la luz transmitida se mide
electrnicamente. La rejilla de difraccin es una lmina plana de vidrio recubierta
de plstico dividida en finos surcos paralelos. La superficie aluminizada para
volverla reflectora de la luz. La luz blanca que incide en la rejilla es dispersada en
un pequeo abanico de rayos con las longitudes de onda cortas y las longitudes
de onda largas en el otro extremo.
DATOS PROCESADOS.
A. Operacin y respuesta del espectrofotmetro.
Longitud de onda, m
Respuesta (relativa) %T
350
375
400
425
450
475
500
512
525
550
575
600
612
625
12
23
37
55
73
91
100
99
91
68
38
13
9
6
Respuesta (relativa)
%T, fototubo
90
98
100
98
91
81
68
61
53
37
21
10
7
5
120
100
80
RESPUESTA RELATIVA
60
RESPUESTA RELATIVA
RESPUESTA RELATIVA
FOTOTUBO
40
20
0
LONGITUD DE ONDA
B. El espectro visible.
Colores observados en el espectro visible para distintas longitudes de onda.
650 nm.
450 nm.
600 nm.
400 nm.
550 nm.
350 nm.
500 nm.
intensidad relativa=
=12.3
100
3
o para una longitud de onda de 425
55 100
intensidad relativa=
=18.7
98
3
o para una longitud de onda de 450
73 100
intensidad relativa=
=26.7
91
3
o para una longitud de onda de 475
91 100
intensidad relativa=
=37.4
81
3
o para una longitud de onda de 500
100 100
intensidad relativa=
=49.02
68
3
o para una longitud de onda de 512
99 100
intensidad relativa=
=5 4.1
61
3
o para una longitud de onda de 525
91 100
intensidad relativa=
=57.2
53
3
o para una longitud de onda de 550
68 100
intensidad relativa=
=61.3
37
3
o para una longitud de onda de 575
intensidad relativa=
38 100
=60.3
21
3
Respuesta (relativa)
%T
350
375
400
425
450
475
500
512
525
550
575
600
612
625
12
23
37
55
73
91
100
99
91
68
38
13
9
6
Respuesta
(relativa) %T,
fototubo
90
98
100
98
91
81
68
61
53
37
21
10
7
5
Intensidad
relativa de la
lampara
4.4
7.8
12.3
18.7
26.7
37.4
49.02
54.1
57.2
61.3
60.3
43.3
42.9
40
120
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
300
respuesta relativa
350
400
450
500
550
600
650
longitud de onda
600
625
0.271
0.174
espectro de absorcion
90
80
70
60
%T
50
espectro de absorcion
40
30
20
10
0
400 425 450 475 500 525 550 575 600 625 650
longitud de onda (nm)
Referencia bibliogrfica.