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LABORATORIO
CLINICO

PROCEDIMIENTOS
OPERATIVOS ESTANDAR
HEMATOLOGIA

Vigente desde:
Enero 2014

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DETERMINACION DEL ESTRADIOL


OBJETIVO
Determinar la concentracin de la hormona estradiol presente
ALCANCE
Este procedimiento define las instrucciones necesarias para la correcta ejecucin de
las actividades tcnicas a cargo del profesional encargado del rea.
RESPONSABLE
La responsabilidad del adecuado manejo y correcto manejo del respectivo manual
recae directamente sobre el responsable del rea y el respectivo tcnico de
laboratorio o responsable del turno.
PROCEDIMIENTO
a. PRINCIPIO
El Estradiol es un ensayo de competicin en fase slida (ELISA) las muestras y el
conjugado enzimtico de estradiol aadido a los pozos sensibilizados con anticuerpos
monoclonales (anti-Estradiol) El estradiol de los pacientes compite con la estradiol de
la enzima conjugada por los sitios de unin. El estradiol y la enzima de estradiol
conjugada que
no se haya unido son desechados en el lavado con solucin buffer. Al agregar el
substrato la intensidad de la coloracin
va a ser inversamente proporcional a la concentracin de estradiol en las muestras la
curva estndar es preparada relacionando la intensidad de estradiol.
b. MATERIAL

Micropozos recubiertos con Estradiol


Estndares de Estradiol(listo para usar) .
Enzima conjugada de Estradiol concentrado
Diluyente demuestra(listo para su uso)
Sustrato TMB (listo para su uso )
Solucin de Paro ( listo para su uso)
7.Solucin de Lavado Concentrado

Agua desionizada o destilada


Pipetas de precisin
Puntillas desechables para micro pipeta
Micro lector de Elisa con longitud de onda a 450nm.
Papel absorbente
Papel para graficar.

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d. PROCEDIMIENTO
1. Todas las muestras y reactivos deben ser llevados a temperatura ambiente (18-26 C)
antes de su uso.
2. Coloque el numero de pozos a utilizar
3. Dispensar 25l de los estndares control y muestras en los micro pozos designados
4. Agregar 100l de la solucin de Trabajo de Estradiol en cada pozo(ver seccin de
preparacin del reactivo)
5. Mezcle suavemente los pozos aprox. 10-20 segundos
6. Incube a temperatura ambiente (18-20C) por 60 segundos
7. Remueva el lquido de los pozos .Lave en tres tiempos con 300 l de solucin de
lavado a 1x. Golpee los pozossobre una toalla o papel absorbente
8. Agregue 100 l de sustrato TMB en cada pozo. Mezcle suavemente por 10 segundos
9. Incube a temperatura ambiente( 18-25C) por 30 minutos
10. Frene la reaccin agregando 50 l de Solucin de Paro a cada pozo
11. Mezclar por 30 segundos. Es importante que en este paso cambie el color azul a
amarillo completamente.
12. Leer O.D.450 estable durante 15 minutos.
FORMULARIOS Y REGISTROS
1. Cuaderno de registro de pacientes.
2. Cuaderno de registro del rea de inmunologia.
3. Hoja de reporte para el paciente.
REFERENCIAS
deska pagana. pruebas diagnosticas y de laboratorio.2 edicin. editorial mosbydoyma.2008
balcells. la clnica y el laboratorio. 21 edicin. elsevie masson. 2010.
LISTA DE DISTRIBUCION Responsable del rea de inmunologa

REDACTADO POR:
Dra. Valeria Franco Tudela

REVISADO POR:
Dra. Saida Choque Siani

JEFE DE LABORATORIO

COORDINADOR MEDICO

FECHA:
14 Enero 2014

FECHA:
14 Febrero 2014

APROBADO POR:
Dr. Victor Hugo
Cardenas
DIRECTOR
FECHA:
14 Marzo 2014

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FLUJOGRAMA
RECEPCION DE LA MUESTRA

REVISION DE LA CALIDAD
DE LA MUESTRA Y LA
INFORMACION NECESARIA
DEL PACIENTE

CUMPLE CON LOS REQUISITOS PARA EL ANALISIS,


MUESTRA
PTIMA?

SI

SOLICITAR NUEVA
MUESTRA O
NO LA
COMPLETAR
INFORMACION
NECESARIA

SI
Coloque el numero de pozos a
utilizar

Dispensar 25l,ESTNDAR, SUERO


Agregue 100 l de sustrato TMB en cada pozo.
Mezclar por 30 segundos
ESPECIFICAR CANTIDADES CON EL
PROCEDIMIENTO

Lectura a 0,465
de abs en el
lector de elisa

IMPRESION DE RESULTADO PARA LA


ENTRENTREGA

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LA PRUEBA RPIDA DE CLAMYDIA


OBJETIVO
Determinar cualitativamente la concentracion de la clamidia
ALCANCE
Este procedimiento define las instrucciones necesarias para la correcta ejecucin de las
actividades tcnicas a cargo del profesional encargado del rea.
RESPONSABLE
La responsabilidad del adecuado manejo y correcto manejo del respectivo manual
recae directamente sobre el responsable del rea y el respectivo tcnico de
laboratorio o responsable del turno.
PROCEDIMIENTO
a. PRINCIPIO
La prueba rpida de Clamydia utiliza un sistema de immunuoensayo de sndwich y la
deteccin immunocromatogrfica del ensayo, para ser realizada en un solo ensayo.
Previo a la prueba, se obtiene un espcimen clnico endocervical y colocado dentro de
un tubo que contiene el Reactivo A (solucin de Extraccin), despus de 2 minutos, el
Reactivo B (Solucin de Neutralizacin) se aade al tubo y se mezcla. Entonces se
aaden 3 gotas de la muestra extrada al pozo de muestra de dispositivo de prueba. Si
la Clamydia se presenta en la muestra en concentraciones arriba del nivel de
deteccin, un anticuerpo-tinte especfico etiquetado conjugado es atado a este,
formando un antgeno-anticuerpo-tinte complejo. Este complejo emigra hacia arriba, y
es capturado por otro anticuerpo especfico inmovilizado en la Zona de Prueba (T) de
la membrana, produciendo una banda de color rosa visible sobre la membrana. La
intensidad de color depender de la concentracin de Clamydia en la muestra. Por otro
lado, una banda de color siempre aparecer en la Zona de Control ("C).
b. MATERIALES
10 Cassettes.
Contador de Tiempo.
Papel de Prueba de pH.
Tubos de recoleccin con solucin de extraccin
4. Isopos de dacrn.

c. PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Previo al uso, traslade todos los componentes del test y muestra del paciente a
temperatura ambiente.

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. (Cierre el Tubo si no lo ha hecho todava) con la tapa roja, rompa la punta de la tapa y
aplique 4gotas (150-200 microlitros) de la muestra extrada en la ventana de la
muestra.
5. Permita que cada gota se absorba antes de agregar la siguiente
6. Evite la formacin de burbujas en la ventana de reaccin aadiendo lquidos. Los
residuos demuestra o diluyente permaneciendo en la zona de reaccin al final del
periodo de incubacin pueden ser descuidados.
7. La prueba debe incubarse y leerse despus de 20 minutos de agregar la muestra
extrada a la placa.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Resultado Positivo: Aparece una lnea de prueba color rojo-violeta en la parte
superior de la ventana indicando un resultado positivo para el antgeno de la clamidia
en la muestra. Aun una lnea dbil indica un resultado positivo. Puede haber distinta
intensidad de color entre las lneas de control y de prueba pero no afecta la
interpretacin de resultados.
Resultado Negativo: Aparece una lnea control (C) rojo-violeta en la parte superior de
la ventana de resultado, demostrando que la prueba se efecto correctamente.
Resultado Invlido: Si no aparece una lnea de control (C), an si aparece una lnea
de prueba, repita la prueba con un nuevo test, siguiendo cuidadosamente el
procedimiento.

FORMULARIOS Y REGISTROS
4. Cuaderno de registro de pacientes.
5. Cuaderno de registro del rea de inmunologia.
6. Hoja de reporte para el paciente.
REFERENCIAS
1. Schachter J. Chlamydia. In manual of Clinical Microbiology, 4 th edition.Lennette EH,
editor-inchief, Balows A, Hausler WJ, Shadomu HJ, editors.WashingtonsDC:American
Society for Microbiology, 1985:856-862.
2. OLeary W. The Chlamydia. In: CRC practical handbook of microbiology. Boca Raton:
CRS Press, Inc, 1989:187-194.
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FLUJOGRAMA
RECEPCION DE LA MUESTRA

REVISION DE LA CALIDAD
DE LA MUESTRA Y LA
INFORMACION NECESARIA
DEL PACIENTE

CUMPLE CON LOS REQUISITOS PARA EL ANALISIS,


MUESTRA
PTIMA?

SI

SOLICITAR NUEVA
MUESTRA O
NO LA
COMPLETAR
INFORMACION
NECESARIA

SI
ALISTAR LAS TIRAS A
TEMPERATURA AMBIENTE

Dispensar 15Ol, SUERO


Dispensar 150l, BUFER (no es indispensable)
Incubar 20 minnutos

Interpretar de
acuerdo al
procedimiento
especificado

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IMPRESION DE RESULTADO PARA LA


ENTRENTREGA

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