Universidad Autnoma Del Estado De Mexico

Facultad De Qumica
Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

Nivel:
Laboratorio clnico

1. Objetivo: Observar y caracterizar las clulas del sistema inmune presentes en la

sangre perifrica a travs de una tincin de Wright, obteniendo la muestra por
puncin venosa.
2. Introduccin

CONTROL DE EQUIPO AL INICIO DEL PROCESO

CDIGO
UAEM

EQUIPO

REALIZ

VERIFIC

Microscopio

FECHA
14/02/15

SURTIDO DE REACTIVOS
INGREDIENTE

REALIZ

VERIFIC

FECHA

Colorante de Wright

14/02/15

Solucin amortiguadora de fosfato pH

7.4

14/02/15

REPORTE DE DESPEJE DE REA/VERIFICACIN DE CONDICIONES DE REA Y

EQUIPO
ACTIVIDA
D
El rea
est libre
de
producto,
materiales
y
documento
s
Los
equipos y
reas estn
limpios
Los
equipos
estn
ajustados

CUMPLE

NO
COMPLE

REALIZ

Judith
Rodrguez

Judith
Rodrguez

Judith
Rodrguez

VERIFIC

FECHA

Pablo
Ramrez

14/02/15

Pablo
Ramrez

14/02/15

Pablo
Ramrez

14/02/15

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Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

3. Etapas del proceso

A. MATERIALES Y REACTIVOS
C. TINCION DE WRIGHT
E. RESULTADOS
G. DESECHO DE RESIDUOS

Nivel:
Laboratorio clnico

B. TOMA DE MUESTRA
D. OBSERVACIONES
F. CONCLUSIONES
H. CUESTIONARIO

A MATERIALES Y REACTIVOS
Jeringas de plstico estriles de 3 o 5 mL,
Sistema Vacutainer
Torundas embebidas en etanol al 70%
1 caja de portaobjetos por grupo
Gradilla
Aplicadores de madera
Tubos de 13 x 100 con anticoagulante
EDTA

Ligadura
Microscopio
Colorante de Wright
Solucin amortiguadora de fosfatos pH
7.4
Aceite de inmersin

B TOMA DE MUESTRA
ACTIVIDAD
1.-Localizar y palpar la vena en el brazo

REALIZ
O
Nayeli
Yaes

2.-Verificar que la aguja este atornillada en la jeringa y

que el embolo fluya sin ningn obstculo.

Nayeli
Yaes

3.-Colocar una ligadura (torniquete) aprox. 15 cm por

encima de la vena.

Nayeli
Yaes

4.-Desinfectar el rea donde se localiz la vena con una

torunda impregnada en etanol al 70% y con
movimientos circulares de antro hacia afuera se realiza
la desinfeccin.
5.-Colocar el bisel de la aguja con la perforacin hacia
arriba antes de introducirlo, una vez que se tiene el bisel
dentro de la vena, jalar el embolo lentamente hasta la
cantidad que se va a obtener (3 mL).
6.-Colocar la torunda encima del bisel antes de quitar la

Nayeli
Yaes

VERIFIC
O
Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez

Nayeli
Yaes

Judith
Rodrgu
ez

Nayeli

Judith

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Revis:
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Nivel:
Laboratorio clnico

jeringa y al mismo tiempo se quita la ligadura.

Yaes

7.- Vaciar la muestra lentamente por las paredes del

tubo con anticoagulante EDTA y mezclar por inversin 5
a 7 veces
8.-Si se utiliza el sistema vacutainer se debe colocar la
aguja doble en el soporte de plstico y realizar el mismo
procedimiento.

Nayeli
Yaes

C TINCION DE WRIGHT
ACTIVIDAD
1.- Una vez que tengan su muestra debern colocar una
gota (10 L) en uno de los extremos del portaobjetos.

REALIZ
O
Nayeli
Yaes

2.- Inmediatamente con otro portaobjetos colocado a

45 del primero recorrer para hacer un extendido
3.- Secar la laminilla por 5 minutos

Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes

4.- Teir con el reactivo de Wright dejar por 3 min

Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes

5.-Agregar el amortiguador de Wright dejar por 10 min

6.-Lavar con agua destilada la laminilla
7.- Vaciar la muestra lentamente por las paredes del
tubo con anticoagulante EDTA y mezclar por inversin 5
a 7 veces
8.- Observar al microscopio a un aumento de 100x con
aceite de inmersin.
9.- Comparar los datos obtenidos contra los valores de
referencia y registrarlos para su anlisis.
10.- Identificar las clulas del sistema y llevar a cabo un
conteo de 100.

Judith
Rodrgu
ez
Pablo
Ramrez
Pablo
Ramrez
Pablo
Ramrez
Nayeli
Yaes

Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez

VERIFIC
O
Judith
Rodrgu
ez
Pablo
Ramrez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes
Pablo
Ramrez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes
Pablo
Ramrez
Nayeli
Yaes

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Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

Nivel:
Laboratorio clnico

Judith
Rodrgu
ez

Judith
Rodrgu
ez

D. OBSERVACIONES
D
Observamos y detectamos la vena cubital al palpar el rea posterior al codo,
facilitando la extraccin de 5 mL de muestra sangunea.
Se debe realizar una homogenizacin correcta de la muestra, para obtener
una cantidad adecuada de clulas sanguneas.
Al agregar el reactivo para la tincin de Wright y dejar secar 3 minutos, el
portaobjetos se tio morado obscuro.
Enseguida se agreg el buffer dejando secar por 10 minutos. Despus se
enjuago con agua destilada teniendo cuidado de no perder muestra
enjuagando.
Al observar en el microscopio a 100x realizamos un conteo de las clulas
sanguneas, identificando sus caractersticas.
E
Eusinofilos: Grnulos de color rojo-naranja y unos azules.
Neutrfilo: Grnulos azules.
Linfocitos: Se observ la presencia de un color azul claro(agranulosos)
Basfilo: Grnulos color azul oscuras.
Monocitos: Color azul intenso con una forma caracterstica.
F
E. RESULTADOS
G
H
N
T
Z

1 conteo
2 conteo
3 conteo

Neutrfilos
O 72
U
AA 65

CONTEO
Linfocitos

P 27
V
AB 30

Monocitos
Q 12
W
AC 3

Basfilos
R 4
X
AD 2

Eosinofil
os
S 1
Y
AE 0

AF
AG
F. CONCLUSIONES

AH
AI Como pudimos observar se encontr mayor cantidad de neutrfilos que era lo que
se esperaba tericamente y aquellos ms raros como los eusinofilos los encontramos
en menor cantidad i casi nulos ya que estos solo estn presentes en caso de
intoxicaciones o reacciones alrgicas, concluyendo podemos decir que cada clula del
sistema inmunitario tiene diferentes caractersticas que las distinguen una de otra y
por ello su identificacin adecuada es importante.
AJ
G. DISPOSICION DE RESIDUOS
AK
AL
-El contenido de los tubos Vacutainer se debe juntar y depositar en el
recipiente de desechos biolgico-infecciosos para su posterior tratamiento
AM
-Las muestras de las laminillas de deben inactivar con hipoclorito de sodio y
lavar posteriormente con jabn y agua; se pueden reutilizar.
AN
-Los residuos de la tincin se deben depositar en el frasco de residuos B
AO
AP
H. CUESTIONARIO
1. Qu es un anticoagulante?
AQ Un anticoagulante es una sustancia de distinta naturaleza qumica que afecta al
proceso de coagulacin o bien de la agregacin de las plaquetas. Poseen un efecto
biolgico, lo cual permite que se puedan dividir en dos tipos:
AR 1. Anticoagulantes de accin indirecta: Este tipo de anticoagulantes son
aquellos que por medio de su intervencin con otras protenas alteran el
funcionamiento de las cascadas de coagulacin, esta accin tambin sucede
cuando actan en otras vas metablicas.
AS Entre los anticoagulantes de accin indirecta se encuentran:
AT Inhibidores medianos de antitrombina III

Inhibidores de sntesis de factores de coagulacin

Derivados del dicumarol

Heparina no fraccionada

Heparina de bajo peso molecular

Danaparoide sdico

AU . Anticoagulantes de accin directa: Estos anticoagulantes son aquellos que son

capaces de inhibir la cascada de la coagulacin.
AV Entre los anticoagulantes de accin directa, se encuentran:

Inhibidores directos de trombina

Hirudina

Argatroban

Cules son las clulas granulocticas?

AW
Leucocitos:
AX
Neutrfilo
AY
Eosinfilos Basfilos
AZ
Cules son los valores normales de las clulas sanguneas?

BA Valores

BB Hombres

BC Mujeres

BD Eritrocitos

BE 4,5-5,6 mill./l

BF 4,2-5,4 mill./l

BG Reticulocito

BH 3-18/1.000

BI 3-18/1.000

normales

eritrocitos

eritrocitos

BJ Leucocitos

BK 4.000-11.000/l

BL 4.000-11.000/l

BMTrombocito

BN 150.000-

BO 150.000-

s
BP Hemoglobin

4000.000/l

400.000/l

BQ 14-18g/dl

BR 12-16g/dl

BT 42-52%

BU 37-47%

a
BS Hematocrit
o
BV
1. Qu calores obtuviste en tu muestra?

BW
BX Eusinofilos: Granulos de color rojo-naranja y unos azules.
BY Neutrofilo: Granulos azules.
BZ Linfocitos: Presenta un color azul claro(agranulosos)
CA Basofilo: Granulos color azul oscuras.
CB Monocitos: Color azul con una forma caractersticas
CC
CD
HISTRICO DE CAMBIOS EN EL PRECEDIMIENTO DE OPERACIN
CE
CHDescripcin del
CF Revisin
CGFecha
cambio
CI 00A
CJ 14 Febrero 2015
CK Primera versin

CL