In: Recent Advances in Small Animal Reproduction, P.W. Concannon, G. England, J. Verstegen and C. LindeForsberg (Eds.

)
Publisher: International Veterinary Information Service (www.ivis.org), Ithaca, New York, USA.

Evaluacin y recoleccin de semen, e inseminacin artificial en el gato (27-Jun-2003)

E. Axnr and C. Linde-Forsberg
Department of Obstetrics and Gynaecology, Swedish University of Agricultural Sciences, Uppsala, Sweden.
Traducido por: Y. A. Corrada y C. Gobello, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata,
Argentina., (26-Jun-2003).
Introduccin
La recoleccin del semen y la inseminacin artificial (IA) en gatos fue descrita por primera vez hace ms de 30 aos [1] pero
los procedimientos todava no son utilizados rutinariamente porque muy pocas clnicas veterinarias ofrecen estos servicios.
Mientras que tcnicas de biotecnologa ms avanzadas tales como la fertilizacin in vitro (FIV), inyeccin intracitoplsmica
de espermatozoides (ICSI) y el clonado se han realizado experimentalmente con xito en el gato, no se han llevado a la
prctica e incluso el uso clnico de la IA tampoco est bien desarrollado en el gato como lo ha estado desde hace dcadas en
muchas otras especies domsticas [2-4]. Muchas de las investigaciones que han generado conocimiento sobre la reproduccin
asistida en el gato han sido desarrolladas utilizando al gato domstico como modelo para las especies felinas salvajes en
peligro de extincin. Sin embargo, hay una creciente demanda de estos servicios entre los criadores de gatos domsticos. El
comportamiento de los gatos machos enteros los hace inadecuados para habitar en una casa. Debido a esto, el nmero
disponible de gatos machos reproductores es muy pequeo y se utilizan para criar muchas ms hembras que machos. Esto
eventualmente puede conducir a una escasa variacin gentica en muchas razas de gatos. Si el semen de gatos genticamente
valiosos fuera congelado antes de la castracin, la situacin mejorara mucho. El uso del semen enfriado y congelado en
programas de IA tambin hara ms fcil el intercambio de material gentico a travs de largas distancias y, adems, reducira
el riesgo de transmisin de enfermedades infecciosas.
Cmo colectar semen de gato
La recoleccin de semen en los animales domsticos se realiza habitualmente con la ayuda de una vagina artificial por
manipulacin digital. Para la recoleccin del semen en el gato domstico tambin se puede utilizar la vagina artificial pero el
mtodo no es muy prctico en situacin clnica debido al comportamiento y temperamento de esta especie. La recoleccin del
semen por manipulacin digital no se ha descrito en el gato. El mtodo ms comnmente usado para la recoleccin de semen
en gatos es la electroeyaculacin. Los espermatozoides tambin se pueden colectar de los epiddimos luego de la castracin
quirrgica, pos-mortem, por lavado vaginal despus del servicio natural.

Figure 1. Vagina artificial para gatos. - Para ver esta imagen en su tamao completo, dirjase al sitio
www.ivis.org . -

Figure 2. Recoleccin de semen con vagina artificial en el gato. - Para ver esta imagen en su tamao
completo, dirjase al sitio www.ivis.org . -

Vagina artificial - La recoleccin con vagina artificial requiere generalmente que el gato est entrenado para este mtodo. No
todos los gatos machos pueden ser entrenados exitosamente [1]. Si se coloca al macho en un ambiente extrao para la
recoleccin del semen, que es lo que ocurre habitualmente en la prctica clnica, es difcil que este mtodo funcione an en un
macho entrenado. En colonias de gatos de investigacin, la recoleccin con una vagina artificial puede, sin embargo, ser un

mtodo muy til. La vagina artificial se hace fcilmente con un bulbo de goma para pipeta Pasteur y un tubo de ensayo
pequeo (Fig. 1). Se permite al gato montar a una hembra en estro y la vagina artificial se desliza sobre el glande del pene del
macho mientras este empuja buscando la abertura de la vulva (Fig. 2).
Electroeyaculacin - Para colectar semen por electroeyaculacin se necesita un estimulador elctrico y una sonda rectal (Fig.
3) y el gato macho tiene que ser anestesiado durante el procedimiento. El mtodo es confiable y seguro y por lo tanto exitoso
para la recoleccin de semen en gatos de propietarios particulares. Para anestesiar a los gatos los autores utilizan
medetomidina (Domitor vet.) 80 mg/Kg de peso corporal subcutaneo, en combinacin con clorhidrato de ketamina
(Ketalar) 5 mg/Kg de peso corporal intramuscular. La anestesia dura el tiempo suficiente para permitir la terminacin del
protocolo descrito abajo, y usualmente tambin bastante tiempo para repetir la recoleccin de semen despus de 5 a 10
minutos si se desea. Se puede utilizar atipamezol para revertir la anestesia. El electroeyaculador puede hacerse por encargo
pero tambin se puede comprar de varios fabricantes. La sonda rectal tiene tres electrodos longitudinales. Esta es lubricada e
introducida 7 - 9 cm en el recto con los electrodos dirigidos ventralmente [5]. Debe tenerse la precaucin de evacuar las heces
del recto. Una corriente elctrica dbil estimula los nervios que inervan los rganos reproductivos. Los estmulos elctricos se
aplican intermitentemente y son de frecuencia baja. Se han descrito diversos protocolos de estimulacin pero muchos estn
utilizando el de Howard y col., [6], que consiste en un total de 80 estmulos elctricos a partir de 2 - 5 voltios aplicados en tres
series (30, 30 y 20 estmulos). Cada estmulo es aplicado de modo que le tome aproximadamente 1 segundo ir de 0 V al
voltaje deseado, luego se mantiene durante 2 - 3 segundos en el voltaje deseado para descender abruptamente a 0 V donde
permanecer por 2 - 3 segundos. La primer serie consiste en 10 estmulos de 2 V, seguidos de 10 de 3 V y finalmente de 10 de
4 V. Se deja descansar al gato durante 2 - 3 min. La serie siguiente consiste en 10 estmulos de 3 V, 10 de 4 V y finalmente 10
de 5 V, dejando descansar al gato nuevamente durante 2 - 3 minutos. La serie siguiente consiste en 10 estmulos de 4 V
seguidos por 10 de 5 V. En cada estimulacin el gato responde con la extensin rgida de las patas traseras. Si esta reaccin
no se observa a 2 V con un estmulo ms fuerte, esto indica que los electrodos no estn en la posicin correcta en el recto,
que hay interferencia por heces. Para colectar el semen, el pene del gato es extrado aplicando una presin suave en su base, y
el eyaculado se recoge en el tubo de ensayo precalentado que se ha colocado sobre el glande del pene (Fig. 4).
Figura 3. Electroeyaculador hecho por encargo. El aparato est equipado con un ampermetro y un
voltmetro, y est conectado a una sonda rectal que tiene 3 electrodos longitudinales. - Para ver esta
imagen en su tamao completo, dirjase al sitio www.ivis.org . -

Figura 4. Recoleccin de semen en un gato macho mostrando la exposicin del pene y la utilizacin de
un vial colector. Ntese el pequeo volmen del eyaculado del gato en la extremidad del tubo de
ensayo. - Para ver esta imagen en su tamao completo, dirjase al sitio www.ivis.org . Otros mtodos para recolectar espermatozoides de gatos machos - Los espermatozoides tambin pueden obtenerse de los
epiddimos luego de la castracin, pos-mortem. La cola del epiddimo es separada de los testculos y colocada en un buffer
apropiado (por ejemplo, Hams F-10 PBS) a 37C y los espermatozoides son liberados cortando la cola del epiddimo en
rebanadas finas [7]. El lavado vaginal, por ejemplo con solucin fisiolgica usando una jeringuilla con un extremo
redondeado, puede utilizarse despus del servicio para descubrir si el gato macho produce espermatozoides, pero este mtodo
es menos confiable para la evaluacin la preservacin del semen, ya que muchos espermatozoides se pierden y los que se
recuperan son afectados por las secreciones vaginales y los medios utilizados para el lavado.
El efecto del mtodo de recoleccin en la calidad del semen
El eyaculado recolectado por electroeyaculacin tiene generalmente un volmen mayor, una concentracin y un nmero total
de espermatozoides ms bajos, y un pH ms alto que las muestras recogidas por vagina artificial [8,9]. Se cree que los
volmenes ms grandes obtenidos por electroeyaculacin son debidos a sobreestimulacin de las glndulas sexuales
accesorias [5]. Dooley y Pineda [9] no pudieron encontrar ninguna diferencia significativa en la osmolalidad entre los
eyaculados recogidos por vagina artificial y aquellos recogidos por electroeyaculacin; sin embargo, encontraron que la
osmolalidad del semen colectado aplicando 6 V era ms alta que la del semen recogido aplicando 1 V, lo que demuestra un
efecto del voltaje en la osmolalidad del eyaculado. Platz y col., [8] hallaron un efecto significativo del mtodo de recoleccin
en la motilidad de los espermatozoides con una motilidad ms baja al usar electroeyaculacin, mientras que Dooley y Pineda
[9] no encontraron tal efecto.

Mtodos para evaluar el semen del gato

Volmen - El volmen del eyaculado del gato domstico es muy pequeo (Tabla 1). Esto limita el nmero de evaluaciones
que se pueden realizar en una muestra. El volmen se mide lo mejor posible con una micropipeta regulable. Si el volmen es
muy pequeo puede ser necesario diluir la muestra antes del procesamiento. La dilucin puede, sin embargo, inducir la
flexin enrrollamiento de las colas de los espermatozoides debido a las diferencias osmticas entre los lquidos seminales y
los medios de dilucin [6,7].
Motilidad epermtica - Para fines de rutina, la motilidad espermtica puede, a, determinarse subjetivamente al microscopio de
contraste de fase. Debe ser evaluada a 38C sobre platina trmica en un portaobjetos precalentado. La motilidad se
determina como el porcentaje de espermatozoides que se mueven progresivamente. Tambin se puede calificar la calidad del
movimiento usando una escala de 0 a 5, donde 0 representa inmovilidad y 5 un movimiento rpido progresivo [5]. La
motilidad puede variar mucho entre una recoleccin y otra, an de un mismo gato [10].
Color - Una muestra de semen con una alta concentracin de espermatozoides es de un color ms blanquecino que una con
una concentracin ms baja. Una coloracin amarillenta revela contaminacin de la muestra con orina, y puede encontrarse
ocasionalmente en muestras recogidas por electroeyaculacin, especialmente si se utilizan voltajes altos [11]. A diferencia del
perro, la coloracin anormal del eyaculado debido a enfermedad prosttica es extremadamente rara nunca vista en el gato.
Concentracin y nmero total de espermatozoides - Una alcuota de la muestra de semen se diluye en por ejemplo formolsalina en 1:40 a 1:100 dependiendo de la concentracin de espermatozoides y se evala al microscopio en una cmara cuentalbulos (por ejemplo, cmara de Brker cmara de Makler). El nmero total de espermatozoides se calcula a partir del
volmen y de la concentracin espermtica.
Morfologa espermtica - Se han descrito diversos mtodos para la fijacin de los espermatozoides y tambin se describi la
clasificacin de los defectos de los mismos. Es mejor determinar la morfologa espermtica tanto de extendidos teidos como
de preparaciones en fresco. Las anormalidades en las cabezas de los espermatozoides se visualizan mejor en extendidos
teidos, mientras que las gotas citoplasmticas se visualizan ms fcilmente en los extendidos en fresco [12]. En la evaluacin
del semen de varias especies incluido el gato, se han utilizado en forma combinada frotis teidos con carbol-fucsina para la
evaluacin de la morfologa de la cabeza con la observacin de preparados de semen fresco fijado en solucin fisiolgica con
formol. En la mayora de los estudios realizados en el gato, sin embargo, ha sido utilizado solamente un mtodo de fijacin
para la evaluacin de todas las anormalidades espermticas. Ejemplos de mtodos que se han utilizado para evaluar
morfologa espermtica en el gato son la fijacin en gluteraldedo solucin Hancocks, la tincin de extendidos con
Papanicolau eosina-nigrosina [6,15-17]. Cuando se combina la observacin de frotis teidos con carbol-fucsina y de semen
fresco fijado en solucin fisiolgica con formol, las anormalidades espermticas se clasifican como sigue:
-Frotis teidos: Las anormalidades de la cabeza de los espermatozoides que se pueden ver en los extendidos teidos son
cabezas en forma de pera, cabezas estrechas en la base, cabezas con contornos anormales, cabezas poco desarrolladas,
cabezas estrechas y cabezas de un tamao anormal (ms grande ms pequea respecto del normal) [13] (Fig. 5).
-Preparados en fresco: Las anormalidades espermticas que se pueden ver en los preparados en fresco son defectos
acrosomales tales como acrosomas con prominencias, acrosomas hinchados con bordes anormales, y gotas citoplasmticas
proximales y distales. La pieza intermedia del espermatozoide puede exhibir diversas anormalidades tales como
irregularidades de la envoltura mitocondrial y doble pieza intermedia. Las anormalidades de la cola de los espermatozoides se
pueden clasificar como cola en ansa, cola enrollada cola en espiral. Otras anormalidades que se pueden determinar en frotis
frescos son cabezas mltiples, defectos de la porcin terminal de la cola y cabezas separadas. Si un espermatozoide tiene ms
de una anormalidad, todas las anormalidades deben ser contadas puesto que diversas anormalidades pueden tener diversas
etiologas y no se sabe qu anormalidades son las ms serias en el gato. Los espermatozoides sin anormalidades visibles
tambin se cuentan y se clasifican como "normal". En cada preparado se deben contar y clasificar por lo menos 100 a 200
espermatozoides.
Figura 5. Figura esquemtica de diversas formas de la cabeza de los espermatozoides que se pueden
encontrar en extendidos teidos. a) en forma de pera b) estrecha en la base c) contorno anormal d) no
desarrollada e) estrecha f) macroceflica g) normal. - Para ver esta imagen en su tamao completo,
dirjase al sitio www.ivis.org . Fosfatasa alcalina - La fosfatasa alcalina (FAL) se origina en los epiddimos. Si se recolecta un eyaculado azoosprmico la
medicin de la FAL en el plasma seminal se puede hacer usando el mismo equipo que para el plasma sanguneo, y
proporciona una informacin valiosa: se encuentran altas concentraciones de FAL en los eyaculados completos que incluyen
el lquido epididimal (Tabla 1). Una baja concentracin de FAL en el eyaculado indica eyaculacin incompleta u obstruccin
bilateral del epiddimo de los vasos deferentes.

Parmetros del Semen en el gato

Los parmetros del semen en el gato domstico se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1. Parmetros del semen en el gato domstico macho

Parmetro

Volmen del eyaculado

Concentracin
espermtica
Nmero total de
espermatozoides en el
eyaculado

Morfologa espermtica

Motilidad
pH
Osmolaridad

Fosfatasa Alcalina (FAL)

Valor
Por vagina artificial Promedio de 0.034 a 0.04 ml (rango 0.01 - 0.12)
Por electroeyaculacin Promedio 0.076 a 0.22 ml (rango 0.019 - 0.74 ml)
Por vagina artificial Promedio 1730 x 106/ml (rango 96 - 5101 x 106/ml)
Por electroeyaculacin Promedio 168 - 361 x 106/ml
Por vagina artificial Promedio 57 - 61 x 106 (rango 3 - 117 x 106)
Por electroeyaculacin Promedio 12 - 30 x 106 (9 - 153 x 106)
Gran variacin individual. Promedio 38.2% a ms del 90% de
espermatozoides normales. Este promedio difiere entre estudios
probablemente debido a diferencias en los mtodos de fijacin y
clasificacin.
Altamente variable
Promedio 56% a 84%
6.6 - 8.8
320 - 339 mOsm/Kg
(rango 274 - 390 mOsm/Kg)
En todo el semen 160 355 u/l a 480 000 u/l
En las secreciones del fluido prosttico y de las glndulas bulbouretrales 228 a 445 u/l
En el fluido prosttico 281 u/l

Referencias

[1,5,8,9,18]

[1,6,8]

[1,5,18]

[1,10,19]

[6,9,10]
[1,9,20]
[9,21]

[20] (Axner y col.,

observaciones no
publicadas)

Relacin entre la calidad del semen y la fertilidad

Se sabe muy poco sobre la correlacin entre los diversos parmetros del semen y la fertilidad en condiciones naturales en el
gato. Se ha demostrado que los espermatozoides de los gatos machos con elevada proporcin de espermatozoides anormales
tienen menor capacidad de penetrar oocitos in vitro que los espermatozoides de machos con bajas proporciones de
espermatozoides anormales [22]. Sin embargo, se han utilizado para la reproduccin machos con alta proporcin de
espermatozoides anormales en sus eyaculados con buenos resultados [10] (Axner y col., observaciones no publicadas). En los
espermiogramas de machos que han sido examinados por no haber producido cachorros luego de varios servicios se han
encontrado usualmente cambios tan serios, que han dejado pocas dudas acerca de su incapacidad para producir gatitos. La
azoospermia (ausencia total de espermatozoides), oligozoospermia severa (concentraciones muy bajas de espermatozoides),
teratozoospermia (alta proporcin de espermatozoides anormales) y la astenozoospermia (espermatozoides inmviles) son
ejemplos de los parmetros que se han encontrado en el semen de gatos infrtiles [23].
La subfertilidad es ms difcil de diagnosticar que la infertilidad total casi total. Las proporciones de diversas anormalidades
espermticas y la proporcin de espermatozoides normales pueden variar entre las recolecciones de semen del mismo gato.
Cuando se recogieron dos eyaculados consecutivos, se observ una disminucin de la proporcin de espermatozoides con
gota distal y con anormalidades de la cola [10]. Las anormalidades de las cabezas, acrosomas y piezas intermedias de los
espermatozoides se originan en los testculos y la proporcin de espermatozoides con estos defectos disminuye durante el
paso a travs del epiddimo, mientras que las anormalidades de la cola se originan en el epiddimo y la proporcin aumenta
levemente durante su paso epididimal. Muchas anormalidades de la cola de los espermatozoides, sin embargo, se inducen en
despus de la eyaculacin cuando los espermatozoides se mezclan con los fluidos seminales [7]. Es probable que las
anormalidades espermticas que tienen su origen en los testculos sean causadas por disfunciones testiculares y tengan
probablemente una influencia negativa ms fuerte en fertilidad que otras anormalidades espermticas. Durante la
espermatognesis, cuando los espematozoides salen de los testculos y entran en la cabeza del epiddimo, la mayora tiene
gotas citoplasmticas en una posicin proximal respecto de la cola del espermatozoide. Durante el paso del espermatozoide a

travs de la cabeza y cuerpo del epiddimo, la gota citoplasmtica se mueve desde una posicin proximal a una distal respecto
de la pieza intermedia del espermatozoide. La mayora de los espermatozoides que estn situados en la cola del epiddimo
tienen gota distal que se desprende durante la eyaculacin [7,24]. La gota citoplasmtica permanece a veces en una posicin
proximal distal respecto a la pieza intermedia del espermatozoide incluso despus de la eyaculacin. Los espermatozoides
con gota proximal remanente carecen probablemente de capacidad de fertilizacin, mientras que la presencia de gota distal se
considera de menor importancia [25].
No hay, segn el conocimiento de los autores, ningn estudio que demuestre el valor mnimo de diversos parmetros del
semen necesarios para una fertilidad normal bajo condiciones naturales en el gato. Por lo tanto, es importante no aventurar
conclusiones demasiado arriesgadas acerca de la fertilidad del gato macho a partir de una nica muestra de semen. Sin
embargo es, razonable asumir que cuanto ms alto sea el nmero de espermatozoides morfolgicamente normales que
exhiban buena motilidad, tanto mejor ser la fertilidad.
Preservacin del semen del gato
El semen de gato puede ser inseminado tanto fresco como no diluido si se utiliza inmediatamente despus de la recoleccin,
como con diluido enfriado en caso de que el almacenamiento sea por corto tiempo, congelado y descongelado si se va a
almacenar por un perodo de tiempo ms largo. En la literatura se han descrito diversos protocolos de criopreservacin tanto
para espermatozoides de eyaculados como para espermatozoides obtenidos de los epiddimos [8,16,26]. Los autores utilizan
un protocolo que fue desarrollado originalmente para la criopreservacin de semen de perro [27]. La composicin de los
diluyentes se puede observar en la Tabla 2.

Tabla 2. Diluyentes para la criopreservacin de espermatozoides de gato. [27]

Tris
cido ctrico
Glucosa
Sodio bencil penicilina
Sulfato de estreptomicina
Yema de Huevo
Glicerol
Pasta Equex STM*
Agua Destilada

Uppsala Equex
Diluyente 1
2,4 g
1,4 g
0,8 g
0,06 g
0,1 g
20 ml
3 ml
para 100 ml

Uppsala Equex
Diluyente 2
2,4 g
1,4 g
0,8 g
0,06 g
0,1 g
20 ml
7 ml
1 ml
para 100 ml

Uppsala Equex
Medio de Descongelado
2,4 g
1,4 g
0,8 g
0,06 g
0,1 g
20 ml
para 100 ml

* La Pasta Equex STM descrita en la receta antedicha es producida por Nova Chemical Sales Inc., Scituate, MA, USA. Note
que la frmula de la Pasta Equex producida por Minitb es diferente.
La muestra de semen es centrifugada a 700 G por 6 min y el pellet de esperma resuspendido en diluyente Equex Uppsala 1
hasta alcanzar dos veces la concentracin espermtica final deseada. La mejor concentracin para la criopreservacin de
espermatozoides de gato an no se ha determinado. Despus de 1 hora de enfriarse desde la temperatura ambiente a 4C se
adiciona un volmen igual de diluyente 2 de Equex Uppsala. Entonces el semen se carga en pajuelas de 0,25 ml y se congela.
La pajuela se coloca en un gobelette ubicado en la parte superior de un portagobelette que a su vez se pone en un canastillo.
Este se baja en 3 pasos en un termo de nitrgeno Apolo SX-18 LN2 (MVE Cryogenetics, New Prague, MN, USA). El
termo debe contener 16 - 18 centmetros de nitrgeno lquido y el canastillo es mantenido durante 2, 2 y 1 min a 7, 13 y 20
cm debajo de la abertura del termo [27].
Tabla 3. Diluyente de lactosa yema de huevo para la criopreservacin de
espermatozoides de gato. [8]
Lactosa
Glicerol
Sulfato de estreptomicina
Penicilina G
Yema de huevo
Agua destilada

11 g
4 ml
1000 mg/ml
1000 IU/ml
20 ml
para 100 ml

Las pajuelas se descongelan en un bao Mara a 37C durante 15 s y se vacan en un tubo que contiene el mismo volmen del
medio de descongelacin Equex Uppsala a 37C donde se le permite al semen equilibrarse a esta temperatura y en la
oscuridad por 5 min antes de realizar la evaluacin y la IA. Ejemplos de otros diluyentes que se han utilizado para el
almacenamiento de semen de gato enfriado y criopreservado son los diluyentes de lactosa y yema de huevo (Tabla 3) y TesTyema de huevo (Tabla 4).
Tabla 4. TesT-buffer para enfriar congelar espermatozoides de gato. 325 Mosm Tes se dosifica por comparacin con 325
Mosm Tris a pH 7.4. Se adicionan Yema de Huevo, glicerol y antibiticos. [21,28-30]
N-Trishidroxymetil-metil-2-aminometano- cido sulfonico (Tes)
Trishidroximetil-aminometano (Tris)
Yema de huevo
Glicerol (puede ser omitido para el enfriado)
Penicilina G
Estreptomicina

11,2 g en 150 ml de agua destilada

2,9 g en 75 ml de agua destilada
15 - 20%
7 - 7.5%
1000 UI/ml
1 mg/ml

Inseminacin artificial
Anatoma del tracto Genital de la hembra flina - para la inseminacin artificial vaginal y especialmente para la transcervical,
es necesario un conocimiento preciso de la anatoma genital de la hembra felina. La distancia entre la vulva y el crvix est
entre 45 y 60 mm [31]. La vagina craneal es estrecha. El fornix est localizado ventrolateral a la orificio cervical externo. El
canal cervical est orientado oblicuamente entre el cuerpo uterino y la vagina. (Fig. 6a y Fig. 6b)

Figura 6a. Esquema de la anatoma del tracto genital de la hembra felina [44]. - Para ver esta imagen en
su tamao completo, dirjase al sitio www.ivis.org . -

Figura 6b. Vista cercana de la regin paracervical en el gato. Modificado de Crouch, 1969 [45]. - Para
ver esta imagen en su tamao completo, dirjase al sitio www.ivis.org . Momento de la inseminacin artificial - La citologa vaginal se puede utilizar para confirmar el estro. Se humedece un hisopo
de algodn pequeo (por ejemplo, un hisopo uretral usado en hombres) con salina, se inserta en la vagina y se rota contra la
mucosa para obtener clulas epiteliales de la pared vaginal. Se rota la punta de algodn sobre un porta-objetos y el frotis se
tie por ejemplo, tincin de Giemsa. Cuando la gata est en estro ms del 80% de las clulas vaginales estn cornificadas y el
fondo es limpio [32] (Fig. 7 y Fig. 8).

Figura 7. Frotis vaginal de una hembra felina que no est en estro. - Para ver esta imagen en su tamao
completo, dirjase al sitio www.ivis.org . -

Figura 8. Frotis vaginal de una hembra felina en estro. - Para ver esta imagen en su tamao completo,
dirjase al sitio www.ivis.org . -

Es importante recordar que este procedimiento puede inducir la ovulacin. Los espermatozoides de gato tienen una vida frtil
que es por lo menos tan larga como el tiempo transcurrido entre la induccin de la ovulacin y la ovulacin (26 a 29 horas)
puesto que la ovulacin es inducida por el acoplamiento y la preez puede resultar despus de un solo servicio [1]. La preez
puede resultar despus del servicio de la IA hasta 49 horas despus de la induccin de la ovulacin [1]. La cervix est

solamente abierta para el paso de medio de contraste durante cierto perodo durante el estro [31]. En la mayora de las gatas la
cervix est abierta durante mediados y fines del estro, con una cierta variacin individual. El momento en que la cervix est
abierta coincide generalmente con el momento en que los frotis vaginales estn cornificados [31]. Por lo tanto, la IA se debe
realizar a mediados o fines del estro y dentro de las 49 horas posteriores a la induccin de la ovulacin. El frotis vaginal debe
tener un aspecto tpico de estro. Probablemente sea beneficioso repetir la inseminacin vaginal en dos das consecutivos
realizando la segunda inseminacin dos das despus de la primera. Esto incrementar la probabilidad que la cervix est
abierta en por lo menos una ocasin [31].
Induccin de la ovulacin - La gata es una ovuladora inducida. Cuando se realiza IA en la gata no hay ningn estmulo
copulatorio que induzca la ovulacin y, por lo tanto, la ovulacin tiene que ser inducida artificialmente. Una dosis de 100 uI
de hCG es generalmente efectiva para inducir la ovulacin cuando se administra en el tercer da del estro. La aplicacin de
hCG en el da 1 2 del estro es menos eficaz [33]. La ovulacin ocurre generalmente en el plazo de 26 a 29 horas despus del
tratamiento [1,34]. La ovulacin puede tambin ser inducida administrando 25 mg de GnRH, mediante la estmulacin
mecnica de la vagina con un hisopo de algodn [35,36].
Tcnica de inseminacin - La inseminacin artificial puede ser realizada depositando el semen en la vagina en el tero. En
el perro y el gato se obtienen tasas de preez ms altas cuando el semen se deposita en el tero comparado con la deposicin
vaginal del semen, y se necesitan menos espermatozoides [37-39]. La deposicin intrauterina de semen se puede lograr por la
cateterizacin transcervical por ciruga. La IA quirrgica no se permite en todos los pases. Se ha desarrollado un catter
transcervical para uso en gatos. Consiste en un catter externo que se introduce dentro del fornix ventral y un catter interno
que se dirije dorsalmente dentro del canal cervical [40,41] (Fig. 9 y Fig. 10). Se ha reportado que un catter externo con un
dimetro mximo de 2,7 mm sirve para el lumen vaginal de la mayora de las hembras [40]. Sin embargo, Zambelli y col.,
[42], encontraron que fue necesario un catter ms fino en algunas gatas y utilizaron un catter de 1 mm de dimetro que fue
insertado a travs de la cervix con la ayuda de la palpacin rectal. El mtodo de cateterizacin transcervical necesita
probablemente ser desarrollado ms a fondo antes de que pueda ser utilizado rutinariamente en la prctica clnica [31]. Si el
semen va a ser depositado en la vagina, se deben hacer esfuerzos para colocar el catter de IA tan cerca de la cervix como sea
posible. Un catter tomcat Francs de 3,5 mm es bastante estrecho para pasar a travs de la vagina anterior y alcanzar el os
cervical [31]. Chatdarong y col., [31] encontr que ubicando a la gata sedada en decbito dorsal con los cuartos traseros
elevados en ngulo de 30 facilit la infusin del medio de contraste depositado vaginalmente a travs de la cervix en el tero
durante estro.

Figura 9. Un catter de IA para gatos [42]. - Para ver esta imagen en su tamao completo, dirjase al sitio
www.ivis.org . Figura 10. El catter vaginal externo (a) entra en el fornix vaginal ventral (f) y alinea el catter
transcervical (b) con el canal cervical (g), permitiendo la deposicin intrauterina del semen, a travs del
catter interno (c), en el tero (h). Pliegue dorsal medio poscervical (d), vagina (e) [41]. - Para ver esta
imagen en su tamao completo, dirjase al sitio www.ivis.org . Sedacin vs. no sedacin - La sedacin no es siempre necesaria para la inseminacin vaginal pero facilita la manipulacin del
catter en una posicin apropiada. La insercin del catter a travs de la vagina anterior induce generalmente reaccin poscoital en gatas no sedadas. Howard y col., [43] encontraron que la anestesia compromete la ovulacin. Es por eso que ellos
recomiendan que cuando se requiere la anestesia para la IA la inseminacin, esta debe ser realizada despus de que haya
ocurrido la ovulacin. Tsutsui y col., [39] no encontraron un efecto de la anestesia en tasa de ovulacin cuando usaron el
mismo protocolo de anestesia que Howard y col., [43]. Al contrario, obtuvieron mejores resultados de preez inseminando
quirrgicamente antes de la ovulacin que despus de la ovulacin. La diferencia entre estos dos estudios pudo ser que
Tsutsui y col., [39] usaron una dosis ms alta de hCG para inducir la ovulacin. Otra diferencia es que Tsutsui y col., [39]
inseminaron gatas que estaban en estro natural mientras que Howard y col., [43] usaron PMSG (eCG) para inducir el estro.
Nmero de espermatozoides por IA - Sojka y col., [1] informaron que para obtener resultados consistentes de preez de entre
40 y 67%, despus de la inseminacin vaginal con semen fresco de gato, se necesitaban por lo menos 5 - 50 x 106
espermatozoides. Cuando las gatas se inseminaron a dos veces en dos das consecutivos con 5 x 106 espermatozoides la tasa
de concepcin fue del 75% (6/8 gatas) [1]. Tanaka y col., [38] demostraron que se necesitaban 80 x 106 espermatozoides para
obtener un resultado de preez del 77,8% (7/9 gatas) con la deposicin vaginal de semen fresco. Con la inseminacin

intrauterina quirrgica solamente se necesitaron 8 x 106 para obtener un resultado del preez del 80% (8/10 gatas) [26]. Los
resultados de preez despus de la inseminacin con semen congelado de gato han sido considerablemente ms bajas que las
reportadas usando semen fresco. Platz y col., [8] reportaron una tasa de preez de 10,7% (6/56 gatas) cuando usaron 50 - 100
x 106 espermatozoides congelados-descongelados para inseminacin vaginal en gatas a las que se indujo el estro con
gonadotrofinas. Tsutsui y col., [26] congelaron espermatozoides en un diluyente de yema de huevo Tris-fructosa cido ctrico
en solucin de citrato de sodio yema de huevo y reportaron una tasa de preez del 57,1% (8/14) cuando usaron 50 x 106
espermatozoides congelados-descongelados para inseminacin intrauterina en gatas en estro natural.
Conclusin
Con el aumento del conocimiento de la fisiologa reproductiva de la hembra y el macho felino, el mejoramiento de la
preservacin del semen y las tcnicas de IA, la conservacin del semen y la inseminacin artificial tienen el potencial de
convertirse en valiosas herramientas en la reproduccin del gato como lo son para la reproduccin de otras varias especies
domsticas.

Bibliografa
1. Sojka NJ, Jennings LL, Hamner CE. Artificial insemination in the cat (Felis catus). Lab Anim Care 1970; 20:198-204.
2. Goodrowe KL, Wall RJ, O'Brien SJ, et al. Developmental competence of domestic cat follicular oocytes after fertilization
in vitro. Biol Reprod 1988; 39:355-372.
3. Pope CE, Johnson, CA, McRae MA, et al. Development of embryos produced by intracytoplasmic sperm injection of cat
oocytes. Anim Reprod Sci 1998; 53:221-236.
4. Shin T, Kraemer D, Pryor J, et al. A cat cloned by nuclear transplantation. Nature 2002; 415(6874):859.
5. Platz CC, Seager SWJ. Semen collection by electroejaculation in the domestic cat. J Anim Vet Med Assoc 1978;
173:1353-1355.
6. Howard JG, Brown JL, Bush M, et al. Teratospermic and normospermic domestic cats: Ejaculate traits, pituitary-gonadal
hormones, and improvement of spermatozoal motility and morphology after swim-up processing. J Androl 1990; 11:204-215.
7. Axnr E, Strm Holst B, Linde-Forsberg C. Morphology of spermatozoa in the cauda epididymidis before and after
electroejaculation and a comparison with ejaculated spermatozoa in the domestic cat. Theriogenology 1998; 50:973-979.
8. Platz CC, Wildt DE, Seager SWJ. Pregnancy in the domestic cat after artificial insemination with previously frozen
spermatozoa. J Reprod Fertil 1978; 52:279-282.
9. Dooley MP, Pindeda MH. Effect of method of collection on seminal characteristics of the domestic cat. Am J Vet Res
1986; 47:286-292.
10. Axnr E, Strm B, Linde-Forsberg C. Sperm morphology is better in the second ejaculate than in the first in domestic
cats electroejaculated twice during the same period of anesthesia. Theriogenology 1997; 47:929-934.
11. Pineda MH, Dooley MP. Effects of voltage and order of voltage application on seminal characteristics of
electroejaculates of the domestic cat. Am J Vet Res 1984; 45: 1520-1525.
12. Sekoni VO, Gustafsson BK, Mather EC. Influence of wet fixation, staining techniques, and storage time on bull sperm
morphology. Nord Vet Med 1981; 33:161-166.
13. Williams WW. Technique of collecting semen for laboratory examination with a review of several diseased bulls. Cornell
Vet 1920; 10:87-94.
14. Bane A. Acrosomal abnormality associated with sterility in a boar. In: Proceedings of the 4th Int Congr Anim Reprod &
AI, IV 1961; 810-817.
15. Stachecki JJ, Ginsburg KA, Leach RE, et al. Computer-assisted semen analysis (CASA) of epididymal sperm from the
domestic cat. J Androl 1993; 14:60-65.
16. Hay MA, Goodrowe KL. Comparative cryopreseration and capacitation of spermatozoa from epididymides and vasa
deferentia of the domestic cat. J Reprod Fertil 1993; Suppl. 47:297-305.
17. Schfer S, Holzmann A. The use of transmigration and Spermac (tm) stain to evaluate epididymal cat spermatozoa. Anim
Reprod Sci 2000; 59:201-211.
18. Herron MA, Barton CL, Applegate B. A modified technique for semen collection by electroejaculation in the domestic
cat. Theriogenology 1986; 26;357-364.
19. Wildt DE, Bush M, Howard JG, et al. Unique seminal quality in the South African cheetah and a comparative evaluation
in the domestic cat. Biol Reprod 1983; 29:1019-1025.
20. Johnston SD, Osborne CA, Lipowitz AJ. Characterization of seminal plasma, prostatic fluid, and bulbourethral gland
secretions in the domestic cat. In: Proceedings of the 11th Int Congress Anim Reprod & AI 1988; IV:560.
21. Glover TE, Watson PF. The effect of buffer osmolality on the survival of cat (Felis catus) spermatozoa at 5C.
Theriogenology 1985; 5:449-456.

22. Howard JG, Donoghue AM, Johnston LA, et al. Zona pellucida filtration of structurally abnormal spermatozoa and
reduced fertilization in teratospermic cats. Biol Reprod 1993; 49:131-139.
23. Axnr E, Strm B, Linde-Forsberg C et al. Reproductive disorders in 10 domestic male cats. J Small Anim Pract 1996;
37:394-401.
24. Axnr E, Linde-Forsberg C, Einarsson S. Morphology and motility of spermatozoa from different regions of the
epididymal duct in the domestic cat. Theriogenology, 1999; 52:767-778.
25. Barth AD, Oko RJ. Defects of the sperm tail. In: Barth AD, Oko RJ eds. Abnormal morphology of bovine spermatozoa.
Iowa: Iowa State University Press, 1989; 214-270.
26. Tsutsui T, Tanaka A, Takagi Y et al. Unilateral intrauterine horn insemination of frozen semen in cats. J Vet Med Sci
2000b; 62:1247-1251.
27. Rota A, Strm B, Linde-Forsberg C et al. Effects of Equex STM paste on viability of frozen thawed dog spermatozoa
during in vitro incubation at 38C. Theriogenology 1997; 47: 1093-1101.
28. Graham EF, Crabo BG, Brown KI. Effect of some zwitter ion buffers on the freezing and storage of spermatozoa I. Bull.
J Dairy Sci 1972; 55:372-378.
29. Pope CE, Turner JL, Quatman SP et al. Semen storage in the domestic felid: A comparison of cryopreservation methods
and storage temperature. Biol Reprod 1991; 44 Suppl 1:117.
30. Lengwinat T, Blottner S. In vitro fertilization of follicular oocytes of domestic cat using fresh and cryopreserved
epididymal spermatozoa. Anim Reprod Sci 1994; 35:291-301.
31. Chatdarong K, Kampa N, Axnr E, Linde-Forsberg C. Investigation of cervical patency and uterine appearance in
domestic cats by fluoroscopy and scintigraphy. Reprod Dom Anim 2002; 37:1-8.
32. Shille VM, Lundstrm KE, Stabenfeldt GH. Follicular function in the domestic cat as determined by estradiol-17
concentrations in plasma: Relation to estrous behaviour and cornification of exfoliated vaginal epithelium. Biol Reprod 1979;
21:953-963.
33. Donoghue AM, Johnston LA, Goodrowe KL et al. Influence of day of oestrus on egg viability and comparative efficiency
of in vitro fertilization in domestic cats in natural or gonadotrophin-induced oestrus. J Reprod Fertil 1993; 98:85-90.
34. Shille VM, Munro C, Walker Farmer S et al. Ovarian and endocrine responses in the cat after coitus. J Reprod Fertil
1983; 68:29-39.
35. Goodrowe KL, Wildt DE. Ovarian response to human chorionic gonadotropin or gonadotropin releasing hormone in cats
in natural or induced estrus. Theriogenology 1987; 27:811-817.
36. Feldman EC, Nelson RW. Feline reproduction. In: Feldman EC, Nelson RW eds. Canine and Feline Endocrinology and
Reproduction. Philadelphia: WB Saunders Co, 1996; 741-768.
37. Linde-Forsberg C, Strm Holst B, Govette G. Comparison of fertility data from vaginal vs intrauterine insemination of
frozen-thawed dog semen: A retrospective study. Theriogenology 1999; 52:11-23.
38. Tanaka A, Takagi Y, Nakagawa K et al. Artificial intravaginal insemination using fresh semen in cats. J Vet Med Sci
2000; 62:1163-1167.
39. Tsutsui T, Tanaka A, Takagi Y et al. Unilateral intrauterine horn insemination of fresh semen in cats. J Vet Med Sci
2000a; 62:1241-1245.
40. Swanson WF, Godke RA. Transcervical embryo transfer in the domestic cat. Lab Anim Sci 1994; 44:288-291.
41. Chatdarong K, Lohachit C, Ponglowhapan S, Linde-Forsberg C. Transcervical catheterization and cervical patency
during the oestrus cycle in the domestic cat. J Reprod Fertil 2001; Suppl. 57:353-356.
42. Zambelli D, Buccioli M, Castagnetti C et al. Vaginal and cervical anatomic modifications during the oestrus cycle in
relation to transcervical catheterization in the domestic cat. In: Proceedings of the 3rd EVSSAR Congr 2002; 185.
43. Howard JG, Barone MA, Donoghue AM et al. The effect of pre-ovulatory anesthesia on ovulation in laparoscopically
inseminated domestic cats. J Reprod Fertil 1992; 96:175-186.
44. Ellenport CR. Carnivore urogenital apparatusIn: Sisson and Grossman: The Anatomy of the Domestic Animals. Robert
Getty. Philadelphia: WB Saunders Co, 1975; 1575-1589.
45. Crouch JE. Text-Atlas of Cat Anatomy. Philadelphia: Lea and Febiger, 1969; 180-181.
Derechos Reservados. Este documento est disponible en www.ivis.org. Documento No. A1228.0702.ES.