ADN ligasas son enzimas dependiente de cationes metalicos divalentes que

utilizan ATP o NAD +, dependiendo de la ligasa, para catalizar la formacin de

enlaces fosfodister entre los extremos adyacentes de doble cadena de
polinucletido que posee un 3'-hidroxilo y un 5'-fosfato DNA (Shuman S 2009)
El rol que cumplen las enzimas ADN ligasa en los procesos de replicacin y
reparacin del material gentico es muy conocido, una de las enzimas ms
utilizadas en laboratorio es la ligasa ADN T4, la cual es extrada del bacterifago
T4 y al parecer no tiene ningn papel en el metabolismo del cido nucleico del
mismo pero parece ser necesario para la fijacin de la fibras de la cola del
bacterifago a su placa base durante el proceso infeccioso. (Wood, W.B. et al.
1978)
La ligasa ADN T4 es la ms comnmente utilizada en la construccin de
molculas de ADN recombinante para aplicaciones en biologa molecular. Es
capaz de ligar los fragmentos de ADN que posean extremos cohesivos o romos
complementarios, adems usa como fuente de energa el ATP. (Zimmerman, S.B.
and Pheiffer, B.H. 1983)
La purificacin de esta enzima fue descrita originalmente por Weiss y Richardson,
partiendo de clulas infectadas por el fago T4, tipo salvaje. (Weiss y Richardson,
1967; Weiss et al. 1968)
Ademas se ha reportado la obtencin de ligasa ADN T4 a partir de mutantes de
fagos defectivos en la replicacin del ADN ( Knopff, 1977)
La ligasa ADN T4 se usa rutinariamente en la clonacin molecular para la
reparacin de ambos extremos cohesivos y romos. Cuanto menor sea la
estructura de dos dominios de ADN ligasa de T4 tiene menor afinidad por el ADN
de las ligasas multidominio. (Mueser et al, 2010)

Bibliografa

Wood, W.B. et al. (1978). Attachment of Tail Fibers in Bacteriophage T4 Assembly

J. Biol. Chem.253, 2437.
Zimmerman, S.B. and Pheiffer, B.H. (1983). Macromolecular crowding allows
blunt-end ligation by DNA ligases from rat liver or Escherichia coli.Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 80, 5852.
Weiss, B., Jacquemin-Sablon, A., Live, T. R., Fareed, G. C., and Richardson, C. C.
Enzymatic Breakage and Joining of Deoxyribonucleic Acid. VI. Further Purification
and Properties of Polynucleotide Ligase from Escherichia coli Infected with
Bacteriophage T4 (1968) J. Biol. Chem. 243, 4543 4555
Weiss, B., and Richardson, C. C. (1967) Enzymatic breakage and joining of
deoxyribonucleic acid, III. An enzyme-adenylate intermediate in the polynucleotide
ligase reaction. J. Biol. Chem. 242, 4270-4272.
Shuman S J Biol Chem. 2009 Jun 26; DNA ligases: progress and
prospects.284(26):17365-9.

Knopf KW. Simple isolation method and assay for T4 DNA ligase and
characterization of the purified enzyme. Eur J Biochem. 1977 Feb 15;73(1):3338

Mueser, T. C., Hinerman, J. M., Devos, J. M., Boyer, R. A., & Williams, K. J. (2010).
Structural analysis of bacteriophage T4 DNA replication: a review in the Virology
Journal series on bacteriophage T4 and its relatives. Virology Journal,7, 359.
doi:10.1186/1743-422X-7-359