PENGERTIAN SENTRIFUS Sentrifus merupakan alat yang digunakan untuk memisahkan sampel berdasarkan massa jenisnya melalui proses pengendapan. Dalam
prosesnya,
perputaran
tabung
sentrifus yang
menggunakan
berisi
larutan
prinsip
agar
rotasi
dapat
atau
dipisahkan
berdasarkan massa jenisnya. Larutan akan terbagi menjadi dua fase
yaitu supernatant yang berupa cairan dan pellet atau organel yang mengendap. Peralatan sentrifus terdiri dari sebuah rotor atau tempat untuk meletakan larutan yang akan dipisahkan. Rotor ini nantinya akan berputar dengan cepat yang akan mengakibatkan larutan akan terpisah menjadi dua fase. Semakin cepat perputaran yang dilakukan, semakin banyak pula organel sel yang dapat diendapkan begitu juga sebaliknya. 2. Centrifuge biasa/dahulu
SPESIFIKASI ALAT Nama alat Merk series Produksi Buatan Tegangan
Model biasanya adalah tabletop (bisa diletakkan di atas meja) yang
dirancang untuk pemisahan sampel urine, serum atau cairan lain dari bahan padat yang tidak larut. Centrifuge ini biasanya berkecepatan 03000 rpm, dan bisa menampung sampel dari 5-100 ml Micro Centrifuge
Micro CentrifugeAtau disebut juga microfuges, memutar microtubes
khusus pada kecepatan tinggi. Volume micotubes berkisar 0.5-2.0 ml. Speciality Centrifuge Merupakan
centrifuge
yang
dipakai
untuk
keperluanyang
lebih
spesifik.Seperti microhematokrit centrifuges dan blood bank centrifuges,
yang dirancang untuk pemakaian spesifik di laboratorium klinik.
Microhematokrit centrifuge adalah merupakan variasi dari
microcentrifuge yang dapat menampung sampel kapiler untuk pengukuran volume hematokrit pack cell.
Blood bank Centrifuge adalah centrifuge yang dipakai dibank
darah dan serologi yang dirancang untuk memisahkan sampel serologis dalam tabung.
Centrifuge Berkecepatan Tinggi
a) Ultracentrifuge yaitu centrifuge berkecepatan tinggi yang berputar dengan kecepatan diatas 50.000 rpm. Centrifuge ini dilengkapi dengan system pendinginan untuk menjaga agar sampel tetap
dingin
selama
sentrifuges.
Centrifuge
ini
lazim
dipakai
dilaboratorium penelitian. Gambar:
b) Refrigerated centrifuge adalah centrifuge berkecepatan tinggi yang
berputar dengan kecepatan 0-20.000 rpm. Centrifuge ini dilengkapi dengan system pendinginan untuk menjaga agar sampel tetap dingin
selama
sentrifuges.
Centrifuge
ini
lazim
dipakai
dilaboratorium penelitian. Gambar:
Adapun bagian-bagian dari centrifuge yaitu:
Motor : kecepatan motor yang tinggi akan menghasilkan gaya sentrifugal yang tinggi Jenis-jenis rotor pada centrifuge : 1. Swing Out / Horizontal Rotor - Keuntungan Menghasilkan butiran endapan yang terdistribusi merata Dapat disesuaikan dengan berbagai tabung Bisa untuk volume tunggal yang besar - Kerugian Kecepatannya terbatas Menimbulkan gesekan yang tinggi (bunyi,panas, kecepatannya lambat) Ada bagian bergerak yang lebih banyak 2. Fixed Angle Rotor Keuntungan : Bisa berkecepatan tinggi Memberikan jalur pemisahan yang lebih pendek Memberikan dukungan tube yang lebih maksimum Menghasilkan gesekan dan panas yang lebih sedikit - Kerugian Menghasilkan butiran endapan yang tidak rata Memiliki kapasitas yang lebih terbatas
Membuat tube menerima tekanan yang tinggi
Tips tube, tube tanpa tutup tidak bisa diisi penuh. 3. Drum Rotor - Keuntungan Menghasilkan butiran endapan yang terdistribusi merata Memiliki kapasitas besar - Kerugian Terbatas pada micro-volume tube Tidak dapat menghasilkan tenaga yang sama dengan angle rotor 4. Winshield Rotor - Keuntungan Mengurangi tingkat gesekan dan panas Meningkatkan kecepatan potensial dari swing-out rotor - Kerugian Meningkatkan cost rotor Meningkatkan berat rotor Memerlukan tempatyang lebih besar untuk menampung winshield Speed Control
: untuk mengatur kecepatan motor agar sesuai
dengan kebutuhan tanpa speed control motor akan berputar dengan
kecepatan maksimum Timer : berfungsi untuk mengatur lamanya alat bekerja Break system : pengereman motor diperlukan agar putaran motor dapat dengan segera dihentikan. Prinsip kerja centrifuge Proses pengendapan dengan memberikan gaya sentrifugal pada partikel. Sentrifugal menggunakan prinsip dimana objek diputar secara horizontal. Apabila objek berotasi di dalam tabung/silinder yang berisi campuran cairan dan partikel, maka campuran tersebut dapat bergerak menuju pusat rotasi. Namun hal tersebut tidak terjadi karena adanya gaya yang berlawanan yang menuju kearah dinding luar silinder
atau
tabung,
gaya
yang
berlawanan
ini
adalah
gaya
sentrifugal. Gaya inilah yang menyebabkan partikel partikel menuju
dinding atau dasar tabung dan terakumulasi membentuk endapan Centrifuge adalah suatu alat yang dirancang untuk membangkitkan gaya sentrifugal yang jauh lebih tinggi dari gaya gravitasi, karena
tenaga yang tinggi akan mempercepat proses pemisahan dan
mengakibatkan pemisahan yang tidak akan terjadi pada kondisi biasa. laju pengendapan suatu partikel yang tersuspensi tersebut dapat diatur dengan meningkatkan atau menurunkan pengaruh gravitasional terhadap partikel. Pengaturan laju pengendapan tersebut dapat dilakukan dengan cara menempatkan wadah yang berisi suspensi partikel kemesin sentrifugasi tepatnya pada bagian rotor yang kemudian akan berputar dengan kecepatan tertentu. Hal tersebut tergantung pada ukuran dan bobot jenis dari suspensi. Teknik ini dapat digunakan untuk mengisolasi dan mengkarakterisasi molekul biologi dan komponen selular. Hasil sentrifugasi terbagi menjadi dua, yaitu supernatan dan pelet. Supernatan adalah substansi hasil sentrifugasi yang memiliki bobot jenis yang lebih rendah. Posisi dari substansi ini berada pada lapisan atas dan warnanya lebih jernih. Sementara pelet adalah substansi hasil sentrifugasi yang memiliki bobot jenis yang lebih tinggi. Langkah kerja centrifuge a) Untuk mengoperasikan colokkan alat pada tegangan PLN 220 V ( hati-hati !pastikan tangan/badan dalam keadaan kering, untuk menghindari sengatan listrik ). b) Siapkan sample yang akan diputar dan letakkan pada tempatnya secara simetris dan seimbang. Sampel yang dimasukkan pada setiap tabung haruslah sama ukurannya. Untuk meletakkan gelas tabung harus diletakkan secara bersilang dan berlawanan. Namun hal ini tidak perlu dilakukan jika semua lubang pada sentrifus terisi penuh oleh tabung sampel yang akan dimurnikan. c) Jika persiapan sample telah selesai tekan tombol POWER pada posisi ON, maka alat akan langsung menyala d) Kemudian set TIMER pada waktu yang dikehendaki dengan memutar knob,timer akan berhenti dengan sendirinya sesuai dgn capaian waktunya. e) Pilih kecepatan dengan memutar SPEED LEVEL1. kecepatan 1300 rpm2. kecepatan 1800 rpm3. kecepatan 2300 rpm4. kecepatan 3000 rpm f) Alat akan langsung berputar ditandai dengan lampu operation menyala. g) Jika selesai digunakan kembalikan tombol SPEED pada posisi 0 h) Untuk mematikan tekan POWER pada posisi OFF
i) Ambil semua sampel tabung dengan cara berseling berlawanan.
Cara perawatan alat Centrifuge : a) Centrifuge harus berada di tempat yang datar air. b) Bersihkan dinding dalam dengan larutan antiseptic setiap minggu atau bila ada tumpahan atau tabung yang pecah. c) Periksa kebersihan ruang centrifuge, segera bersihkan semua tumpahan. d) Periksa bantalan pada wadah centrifuge. e) Gunakan hanya tube yang diperuntukkan untuk centrifuge tersebut f) Sebelum memulai centrifuge, pastikan bahwa tutupnya terpasang dengan baik dan terkunci. g) Setimbangkan muatan centrifuge sebelum pemakaian. Gunakan shield dan tube yang benar. h) Jangan pernah membuka tutup selama centrifuge berlangsung i) SELALU Melakukan Tindakan Pengamanan Universal (Biohazard) j) Amati dan lakukan tindakan yang sesuai jika ada bunyi atau getaran yang tidak lazim selama pemakaian k) Putar sampel dengan tutup terpasang l) Spillage shield / cup / tabung centrifuge m) Bersihkan dari pecahan tabung, serum dan lakukan desinfeksi setiap saat n) Bersihkan bagian luar dan dalam setiap hari, o) Timer: Lakukan pemantauan timer sesuai
penggunaan atau
lakukan pemantauan setiap satu minggu sekali
p) Kalibrasi : Mengukur kecepatan putaran dengan menggunakan tachometer terkalibrasi dan lakukan 1 bulan sekali q) Braking system : Selalu mengikuti anjuran pabrik, Pengambilan tabung centrifuge dilakukan setelah posisi putaran benar-benar berhenti r) Power suply: Pengecekan kabel, steker dan stop kontak (pengecekan grounding dan kebocoran arus listrik dari kabel), steker dan stop kontak s) Lakukan pengecekan terhadap motor dan minyak bila perlu t) Terjadinya getaran yang tidak biasa perlu melakukan pengecekan rotor balance dan mengikuti rekomendasi pabrik u) Pemeriksaan terhadap komponen lainnya, apabila
ditemukan
kerusakan atau cacat produk, maka komponen dapat diganti oleh
