Controle Microbiano

Microrganismos no meio ambiente e no organismo

INTRODUO
A aplicao de procedimentos que visam o controle ambiental de
microrganismos tem como objetivos:
Prevenir a transmisso de doenas e infeces;
Prevenir a contaminao ou crescimento de microrganismos nocivos.
Alguns termos utilizados no controle de microrganismos devem ser bem
entendidos:
Esterilizao: destruio de todas as formas de vida presentes em um
material;
Desinfeco: destruio, remoo ou reduo dos microrganismos em
material inanimado;
Assepsia: desinfeco de tecidos vivos, como pele e mucosas.
O controle de microrganismos pode ser feito atravs de agentes fsicos e/ou
qumicos, que podem ser bacteriostticos (causam parada metablica reversvel)
ou bactericidas (causam a morte dos microrganismos).
Agentes fsicos
AGENTE
Temperatura

Radiaes
Filtrao

MTODO
Calor seco
Calor mido
Temperatura baixa
UV
Radiao ionizante
Fluxo laminar
Membrana filtrante

EXEMPLOS
Forno, incinerao
Autoclave, fervura,
pasteurizao
Congelamento, N2 lquido
Esterilizao de ar e
ambientes
Plsticos, linhas de sutura
Ar de locais restritos
Filtros Seitz e Millipore

Agentes qumicos
Modo de ao
Coagulao de protenas
Dano s membranas
Oxidantes
Inativao de enzimas

Agentes
Fenis, cresis, lcool, iodo, metais
pesados
Fenis, lcool, detergentes, quaternrio
de amnio
Iodo, cloro, oznio, H2O2
Formol, xido de etileno

OBJETIVOS

Observar o grau de contaminao do ar e sua importncia como veculo de

transmisso de microrganismos;
Observar a presena de diferentes microrganismos no jaleco, cabelo e
mos;
Avaliar a eficincia de diferentes substncias utilizadas na assepsia das
mos;
Observar os diferentes tipos morfolgicos de colnias de microrganismos e
analisar a morfologia celular atravs da colorao de Gram.

Experimento 1: Microrganismos no ar
Procedimento: Abrir Placas de Petri contendo meio de cultura Agar Simples
durante 5, 10, 15 e 20 minutos e deix-las expostas ao ar. Fechar as placas,
identificar o material e incubar a 37 C por 24 horas.
Resultados: As bactrias esto em suspenso no ar, em partculas de
poeira que ao sedimentarem sobre a superfcie do meio de cultura agem como
veculo destes microrganismos. Estes, ao serem incubados em condies
favorveis, multiplicam-se formando colnias caractersticas.
O grau de contaminao proporcional ao tempo que as placas ficarem
abertas.
Deve-se ter em mente que todo o material esterilizado exposto ao ar
facilmente se contamina.
Experimento 2: Pesquisa de microrganismos no organismo e em superfcies
Procedimento A: Na zona de segurana do bico de Bunsen, pressionar a
superfcie de Placas de Petri contendo o meio de cultura Agar simples com o
jaleco, utilizando um carimbo de madeira. Fechar a placa e incubar 37C por 24
horas.
Procedimento B: Esfregar um swab estril na superfcie do couro
cabeludo ou da pele do rosto. Semear em movimentos de zigue-zague a superfcie
do meio de cultura Agar Simples. Incubar a placa a 37 C por 24 horas.
Procedimento C: Marcar a Placa de Petri contendo o meio de cultura Agar
Simples (fundo da base) dividindo-a em 4 partes e numerar cada parte.

Tocar a superfcie do meio de cultura com o dedo indicador, seguindo o

seguinte procedimento:
Local 1: mo sem lavar
Local 2: mo lavada com gua e sabo
Local 3: mo lavada com gua + sabo + lcool a 70 %
Local 4: mo lavada com gua + sabo + lcool iodado
OBS: Aps cada procedimento deixar secar a mo sem tocar em nenhum
material. Trabalhar na zona de segurana do bico de Bunsen. Identificar a placa e
incubar a 37C por 24 horas.
Resultados: Observar o crescimento de colnias na superfcie do meio de
cultura. As mos freqentemente se apresentam contaminadas por uma
quantidade varivel de microrganismos. A microbiota da pele varia com as regies
anatmicas do corpo, entretanto, alguns gneros de bactrias so comumente
encontrados na superfcie da pele:
Staphylococcus, Streptococcus,
Corynebacterium, etc.
A lavagem das mos com produtos anti-spticos elimina temporariamente a
maioria das bactrias, mas os microrganismos retidos nos folculos pilosos e nas
glndulas sudorparas logo restabelecem a microbiota da pele.
O sabo fraco como anti-sptico e tem mais ao na remoo mecnica
de microrganismos pela diminuio da tenso superficial e lavagem. O lcool etlico
eficaz contra as clulas bacterianas, entretanto no age sobre esporos. Quando
associado ao iodo constitui-se em um dos melhores anti-spticos.
Experimento 3: Avaliao da eficcia
desinfetantes sobre microrganismos

de

solues

anti-spticas

Procedimento: Semear toda a superfcie de uma placa contendo meio de

cultura Agar Simples com uma suspenso bacteriana (Escherichia coli, Serratia
marcescens, Staphylococcus aureus). Na zona de segurana do bico de Bunsen,
colocar sobre o meio, discos esterilizados de papel de filtro embebidos com
solues anti-spticas e desinfetantes (hipoclorito puro, hipoclorito 1:50, lisofrmio,
lcool etlico). Incubar a 37C por 24 horas.
Resultados: Os anti-spticos e desinfetantes que possurem ao sobre o
microrganismo semeado devero apresentar halos de inibio de crescimento ao
redor dos discos de papel de filtro, que sero tanto maiores quanto for a atividade
antimicrobiana da soluo.
OBS: Todas as placas devero ser semeadas com swab esterilizado, de
modo a ser obtido um crescimento contnuo (e no colnias isoladas) empregandose cultura ativa (crescida previamente durante 24 horas em meio lquido).