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DEFINIO DOS TERMOS

Antes de discutir a natureza. o modo de ao e as aplicaes prticas de cada agente qumico


antimicrobiano individual, importante compreender os termos gerais utilizados para descrever estes
agentes e suas atividades.
Os agentes antimicrobianos podem ser divididos naqueles que matam os Microrganismos (agente
microbicida) e naqueles que meramente inibem seu crescimento (agente microbiosttico)
Como isto avaliado varia entre os principais tipos de agentes qumicos que so descritos nos
pargrafos a seguir.
Estes agentes podem ser adquiridos no comrcio local ou de representantes diretos de indstrias, como
aqueles que servem as companhias de limpeza de hospitais.

TERMOS MAIS IMPORTANTES


a) Antimicrobiano - substncias qumicas que matam os microrganismos ou previnem o seu
crescimento.
b) Anti-sptico - composto qumico usualmente aplicado na superficie do corpo humano, que previne a
multiplicao dos microrganismos. Isto ocorre em funo da morte do microrganismo ou pela inibio
do seu crescimento e da sua atividade metablica. Os Anti-spticos so utilizados em feridas e cortes
para evitar uma infeco e as prateleiras das farmcias esto cheias de cremes. sprays e lquidos antispticos.
c) Anti-sepsia - mtodo qumico de desinfeco da pele, membranas mucosas ou outros tecidos vivos.
d) Assepsia - condio de ausncia de contaminao por microrganismos indesejados.
e) Assptico - adjetivo de assepsia, ou seja, local livre de patgenos.
f) Degerminao - remoo mecnica de microrganismos a rea de rea limitada. Ex Na aplicao de
uma injeo a pele esfregada usualmente por um algodo com lcool.
g) Desinfetante - substncia qumica que mata as formas vegetativas de microrganismos patognicos.
mas no necessariamente suas formas esporuladas. O termo normalmente refere-se a substncias
utilizadas em objetos inanimados.
h) Desinfeco - processo que utiliza um agente para destruir microrganismos infecciosos.
i) Esterilizao - processo de destruio e remoo de todas as formas de vida microscpica um objeto
ou espcime. Desta forma, um objeto estril, no sentido microbiolgico, est completamente livre de
microrganismos vivos. Esteril um termo absoluto - um material est estril ou no. No pode ser
parcialmente estril" ou "quase estril".
j) Esterilizante - composto qumico que realiza uma esterilizao.
k) Esterilizao Comercial - tratamento limitado de calor suficiente para destruir os esporos do
Clostridium botulinum, que pode produzir uma toxina mortal.

k) Germicida. um agente qumico que mata as formas vegetativas de microrganismos. mas no


necessariamente suas formas esporuladas. denominado germicida. Na prtica, sinnimo de um
desinfetante; entretanto os microrganismos mortos por um germicida no so necessariamente
patognicos. Termos mais especficos como fungicida, bactericida, viricida, so algumas vezes
utilizados para indicar o tipo de microrganismo afetado.
l) Microbicida - agentes antimicrobianos que matam os microrganismos.
m)Microbiosttico agentes antimicrobianos que apenas inibem o crescimento dos microrganismos.
Termos mais especficos como fungisttico, bacteriosttico, so algumas vezes utilizados para indicar
o tipo de microrganismo afetado
n) Pasteurizao processo que consiste no aquecimento, a temperaturas controladas, de alimentos
lquidos ou bebidas, a fim de garantir sua qualidade e destruir microrganismos nocivos.
o) Saneador - As normas da sade pblica determinam que em certos lugares, a populao microbiana
no deve exceder um numero especfico. Em atendimento a estas determinaes, utiliza-se um
saneador, um agente que mata 99,9% dos microrganismos contaminantes de uma rea. Saneadores so
normalmente aplicados em objetos inanimados, como copos, pratos, talheres e utenslios em
restaurantes. Eles tambm so utilizados diariamente na limpeza de equipamentos de laticnios e
indstrias de alimento.
p) Sanificante - Agente que reduz a nveis considerveis, garantidos pelas autoridades de Sade Pblica,
a flora microbiana presente em materiais ou artigos como utenslios de restaurantes.
q) Sanitizao - Processo que leva a reduo dos microrganismos, a nveis seguros, de acordo com os
padres de Sade Pblica (elimina 99,9% das formas vegetativas) minimizando as chances de
transmisso de doenas de um usurio para outro. Exemplo: lavar loua e utenslios com gua fervente
ou com desinfetante
r) Sepse condio txica resultante do crescimento e disseminao de bactrias nos sangue e tecidos
Termo grego que significa estragado, podre.
Cuidados na classificao desses agentes qumicos antimicrobianos so importantes porque seu uso
pode ter implicaes legais, Nos Estados Unidos, h uma deciso judicial sobre os alimentos e a ao
das drogas que afirma:
"A linguagem utilizada na classificao deve transmitir o significado ordinrio para aqueles a que foi
endereada". Em outras palavras, os produtores e os consumidores devem interpretar a classificao de
um produto da mesma maneira e tambm da mesma forma compreender a terminologia utilizada.
O U. S. Food and Drug Admmistration e o U. S. Environmental Protection Agency regulamentam os
produtos qumicos antimicrobianos.

PADRO DE MORTE MICROBIANA


Da mesma forma que no crescimento, a morte microbiana um evento que ocorre de forma exponencial.
Assim, aps uma rpida reduo do nmero, a taxa de morte pode tornar-se mais lenta, devido
sobrevivncia de clulas mais resistentes.
Condies que afetam a atividade de um agente antimicrobiano, especialmente se tal agente de natureza
qumica.
1. Tamanho da populao: Quanto maior a populao, maior o tempo necessrio sua eliminao.
2. Natureza da populao: Se nesta populao de microrganismos existirem endosporos, os quais so
muito mais resistente que formas vegetativas, sua eliminao no ocorrer to facilmente. No caso de
clulas em diferentes estgios de crescimento - clulas mais jovens tendem a ser mais suscetveis que
clulas em fase estacionria. Havendo a presena de membros do gnero Mycobacterium, sua eliminao
mais difcil que de outras bactrias no esporuladas, etc.
3. Concentrao do agente: Geralmente, quanto mais concentrado, melhor (exceto lcool). A relao
entre a concentrao e a eficincia via de regra no linear.
4. Tempo de exposio: De acordo com normas da OMS, o tempo mnimo de exposio deve ser de 30
minutos. Em casos de agentes esterilizantes, a exposio deve ser tal que a chance de haver sobreviventes
de 1 em 106.
5. Temperatura: Dentro de limites, o aumento da temperatura torna o processo mais eficiente. Para
agentes qumicos, geralmente o aumento de 1C da temperatura aumenta em 10 vezes a eficincia do
processo, o que tambm permite a diluio do agente.
6. Condies "ambientais": pH do meio - quando cido, favorece a eliminao trmica; presena de
matria orgnica - dificulta a ao do produto (necessidade de lavagens dos materiais antes do controle
por agentes qumicos), seja por proteger o microrganismo ou competir pelo produto em uso. Altas
concentraes de acar, protenas ou lipdeos diminuem a penetrabilidade do calor, enquanto o sal pode
aumentar ou diminuir a resistncia ao calor. A consistncia do material ou soluo tambm interfere.
CONTROLE MICROBIANO POR AGENTES FSICOS
Os principais agentes fsicos que promovem o controle microbiano so: Calor, Filtrao e Radiaes.
Eventualmente, outros agentes, tais como as baixas temperaturas, dessecao, podem ser utilizados.
CALOR - Uso disseminado desde pocas remotas, correspondendo ainda um dos agentes fsicos mais
prticos e eficientes para a esterilizao e/ou desinfeco. O calor pode ser empregado sob duas formas:
seco e mido, tendo a vantagem de apresentar, basicamente, apenas 2 parmetros a serem controlados:
tempo e temperatura.
Para todos os organismos so definidas as temperaturas cardeais, ou seja, as temperaturas mnima,
mxima e tima de crescimento. Assim, quando estes so submetidos a temperaturas superiores
temperatura mxima de crescimento, os efeitos letais tornam-se aparentes. A morte um fenmeno que
ocorre de forma exponencial, sendo proporcional apenas concentrao inicial da populao. J o tempo
para uma determinada frao da populao a ser morta independente da populao inicial.
Processos empregando calor:
A morte se d pela oxidao de constituintes celulares e desnaturao de protenas e cidos nuclicos.
No a melhor maneira de utilizao do calor, uma vez que o ar menos condutor da temperatura que a
gua.

Calor seco
Incinerao (E): processo drstico de eliminao de microrganismos, que destri o produto.
Ao rubro (E): processo onde os materiais levados incadescncia, promovendo a destruio de todos os
microrganismos.
Flambagem (D): processo onde o material submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em
lcool. Bastante utilizado na desinfeco de alas de vidro.
Estufa esterilizante (E: 160C/2 hs ou 180C/1 h). Amplamente utilizado para vidrarias e outros
materiais.
Calor mido
Como mencionado anteriormente, um processo mais eficiente devido ao maior poder de penetrao do
vapor dgua. A morte decorrente da desnaturao de cidos nuclicos e protenas, podendo tambm
romper membranas. Alm disso, o vapor tem maior capacidade de romper as pontes de hidrognio.
Autoclave (E - 121C/20 min./1 atm) - Destri esporos, em um pequeno volume, em 10 a 12 minutos.
Com volumes maiores, o tempo maior (5 litros => 70 minutos). Frequentemente so utilizados
indicadores da eficincia de esterilizao, por exemplo, ampolas contendo esporos de B.
stearotermophilus ou de Clostridium PA3679, os quais so inoculados em meios de cultura aps o
processo de esterilizao. Caso haja o desenvolvimento de clulas vegetativas, o processo no foi
realizado adequadamente, uma vez que no houve a esterilzao.
gua em ebulio (D - 100C/30 min.)
A ttulo de comparao, a eliminao de esporos de C. botulinum pela fervura, requer cerca de 5,5 horas.
Por outro lado, a 120C, estes esporos so eliminados aps 4 a 5 minutos.
Pasteurizao (D - 62,8C/30 min - pasteurizao lenta, ou 71,7C/15 seg - pasteurizao rpida)
UHT (E): 141C/2 segundos - processo bastante utilizado para o leite e outros alimentos lquidos.
FILTRAO - Processo muito til na esterilizao de materiais termolbeis, sendo empregado para
lquidos e gases. Estes filtros so geralmente compostos por celulose, acetato, policarbonato, teflon, ou
outro material sinttico. Embora o dimetro dos poros possa variar, os mais utilizados so aqueles de 0,2
m, que removem os microrganismos (exceto vrus) das solues e do ar.
Dentre os principais tipos de filtros podemos citar:
Filtros de profundidade: Correspondem aos filtros mais antigos, constitudos de malha fibrosa ou
granular, base de papel, asbestos ou fibra de vidro, arranjados de forma a criar uma srie de camadas
aleatrias sobrepostas, formando pequenos canais sinuosos. Assim, os microrganismos ficam retidos nas
malhas e/ou adsorvidos superfcie do material. Estes filtros so feitos tambm de terra de diatomceas
(Berkefield) ou porcelana (Chamberlain). Na prtica, so usados como pr-filtros, para a remoo de
partculas maiores. Muitas vezes so tambm usados na filtrao de ar.
Membranas Filtrantes: Correspondem ao tipo mais comum de filtro esterilizante, em microbiologia. So
membranas porosas de acetato de celulose, nitrocelulose ou policarbonato, tendo espessura de 0,2 mm,
contendo poros variando de 0,1 a 0,5 m de dimetro, que ocupam cerca de 80 a 85% da membrana.

Filtros Isopore (nucleopore): Correspondem a filmes extremamente delgados de policarbonato (10 m


de espessura) que so tratados com radiao nuclear, seguida de cauterizao (marcao) qumica. A
radiao provoca danos localizados na membrana e o tratamento qumico aumenta essas falhas, formando
orifcios, cujo tamanho pode ser controlado pela fora da soluo cauterizadora e pelo tempo de
tratamento. Estes filtros funcionam como verdadeiras peneiras, removendo todas as partculas maiores
que os orifcios. Tm, entretanto, baixa porosidade, sendo muito usados na preparao de amostras para a
microscopia de varredura, onde os organismos so retidos no filtro, sendo mantidos em um plano
uniforme, no topo do filtro.
O ar tambm pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo filtros HEPA (High Efficiency Particulate
Air filters), que removem 99,97% de partculas de 0,3 m.

Bactrias retidas na superfcie de um filtro do tipo Isopore


(Adaptado de Prescott et al., Microbiology, 1997)
RADIAES - Ionizante e no ionizante
Radiao No-Ionizante: A radiao ultravioleta (de 4 a 400 nm - sendo 260 nm o comprimento mais
eficiente) bastante letal, mas exibe baixa penetrabilidade, no atravessando vidros, filmes sujos e outro
materiais. Assim, a radiao UV extremamente eficiente na eliminao de microrganismos presentes em
superfcies. Como sua maior eficincia se d a 260 nm, que corresponde ao comprimento de onda onde se
d a maior absoro pelo DNA, a radiao UV afeta primariamente este tipo de molcula. Sua ao
principalmente decorrente da formao de dmeros de pirimidinas (timina), efeito este que pode ser
revertido por sistemas de fotorreativao (enzima de reparo ativada pela luz) ou por sistema de reativao
independente da luz (polimerase).
Por outro lado, no podem ser descartados outros efeitos deletrios do UV, uma vez que quando a 340
nm, observa-se dano celular, sem estar primariamente relacionado s mutaes, uma vez que neste
comprimento de onda os cidos nuclicos no tm mais uma grande capacidade de absorver este tipo de
radiao.
Radiao Ionizante: Radiaes de pequeno comprimento de onda, portanto, de altssima energia e
penetrabilidade. Os dois principais tipos so a radiao gama e os Raios X. Estas, so bastante eficientes,
uma vez que promovem a ionizao de tomos, fazendo-os perderem eltrons. Como consequncia so
gerados radicais livres extremamente reativos, que podem destruir pontes de hidrognio, duplas ligaes,
estruturas em anel. Quando na presena de oxignio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente
txicos para as clulas.
A radiao gama originada geralmente a partir de fontes de 60Co ou 137Ce.
Estas radiaes vm sendo amplamente utilizadas em produtos termolbeis, tais como plsticos e alguns
tipos de alimentos (frutas, vegetais, alimentos marinhos). Nos alimentos seu uso interessante, uma vez
que inativam enzimas autocatalticas que participam do processo de degradao natural.
Outros agentes Fsicos de controle

Baixas temperaturas: A refrigerao ou o congelamento so amplamente utilizados no controle


microbiano de alimentos e produtos biolgicos, pois levam a uma diminuio ou interrupo do
metabolismo. Como, na maioria dos casos, os microrganismos patognicos ao homem so mesoflicos,
estas baixas temperaturas so eficientes no controle. Entretanto, deve-se ter cuidado porque clulas de
Clostridium botulinum, quando incubadas a 5C, so ainda capazes de produzir e secretar a toxina do tipo
E.
Dessecao: Liofilizao ou dessecamento natural, que atua diferentemente nos organismos, dependendo
do tipo de meio, do material dessecado e da intensidade do processo. Via de regra, os cocos Gram
negativos so mais sensveis que os Gram positivos, sendo M. tuberculosis um dos exemplos clssicos de
organismo resistente dessecao (vrias semanas em escarro seco).
Presso osmtica: conservas com altos teores de sal ou acar.

CARACTERSTICAS DE UM AGENTE QUMICO IDEAL


Um agente qumico antimicrobiano "ideal" deve ter caractersticas que apresentam eficincia sob todas
as condies.
No existe um composto qumico que possua todas essas caractersticas desejveis.
importante conhecer as principais caractersticas que seriam encontradas em um agente.
Esses conhecimentos ajudam a selecionar os melhores produtos para uma aplicao especifica.
Tambm servem como um guia para os pesquisadores formularem produtos melhores.
As especificaes de um agente qumico ideal podem ser resumidas como:
1) Atividade antimicrobiana - A capacidade de uma substncia de inibir ou preferencialmente matar os
microrganismos a primeira exigncia. O composto qumico, em baixas concentraes, deve ter um
amplo espectro de atividade antimicrobiana, o que significa que ele deve inibir ou matar muitos tipos
diferentes de microrganismos.
2)

Solubilidade - A substncia deve ser solvel em gua ou em outros solventes (como o lcool) em
quantidade necessria ao seu uso efetivo.

3) Estabilidade - O armazenamento da substncia durante um perodo razovel no deve resultar em uma


perda significativa de ao antimicrobiana.
4) Ausncia de toxicidade - No deve prejudicar o homem ou os animais.
5)

Homogeneidade - As preparaes devem ser uniformes em sua composio, de modo que os


componentes ativos estejam presentes em cada aplicao. Por exemplo, os componentes no devem se
agregar ou depositar-se na superfcie do recipiente.

6) Inativao mnima por material estranho - Algums compostos qumicos antimicrobianos combinam-se
facilmente com protenas ou outros materiais orgnicos encontrados no material que esta sendo tratado.
Isto diminui a quantidade de substncia qumca disponvel para agir contra os microrganismos.
7) Atividade em temperaturas ambiente ou corporal - No deve ser necessrio aumentar a temperatura
alm daquela normalmente encontrada no ambiente onde o composto qumico utilizado.
8)

Poder de penetrao - A menos que uma substncia possa penetrar atravs da superfcie, a ao
antimicrobiana limitada ao local de aplicao (Entretanto, a ao na superfcie algumas vezes
necessria).

9) Ausncia de poderes corrosivos e tintoriais - Os compostos no devem corroer ou desfigurar metais


nem corar ou danificar os tecidos.
10)

Poder desodorizante - O desinfetante ideal deve ser inodoro ou apresentar um odor agradvel. A
capacidade desodorizante e uma caracterstica desejvel.

11) Capacidade detergente - Um agente antimicrobiano que tem propriedades detergentes tem a vantagem
de ser capaz de remover mecanicamente os microrganismos da superfcie que est sendo tratada.
12) Disponibilidade e baixo custo - O produto deve ser facilmente encontrado e de baixo custo.

PRINCIPAIS GRUPOS DE DESINFETANTES E ANTI-SPTICOS


Relatos histricos indicam que desinfetantes e anti-spticos foram utilizados durante o incio do Sculo
XIX. Ignaz Semmelweis, um mdico hngaro, utilizou compostos clorados em 1846 na enfermaria do
hospital obsttrico para reduzir a incidncia da febre puerperal,uma doena ps parto freqentemente fatal
para as parturientes. Estudantes de medicina do hospital foram instrudos a lavar as mos com gua e
sabo e em seguida imergi-Ias em uma soluo de hipoclorito antes de examinar as pacientes. Este
procedimento simples provou ser muito eficiente. Estas observaes levaram ao desenvolvimento de
muitos compostos qumicos antimicrobianos atualmente disponveis. Substncias qumicas utilizadas para
desinfeco ou anti-sepsia so divididas em vrios grupos principais: fenol e compostos fenlicos,
lcoois, halognios (iodo e cloro), metais pesados e seus compostos detergentes.
1) FENOL E COMPOSTOS FENLICOS
Fenol, tambm chamado de cido carblico, tem importncia por ter sido um dos primeiros agentes
qumicos utilizados como anti-sptico. Em meados de 1800,um cirurgio ingls, Joseph Lister utilizou
fenol para reduzir infeco em incises cirrgicas. Lister tomou conhecimento dos estudos de Pasteur
sobre a teoria microbiana das doenas. Assim ele iniciou a prtica de aplicar uma soluo de fenol nas
incises cirrgicas para matar os microrganismos suspeitos de causarem infeco. Isso resultou em uma
extraordinria reduo na incidncia de infeces ps-operatrias. O fenol tambm um composto
padro com o qual outros desinfetantes so comparados.
Aplicaes prticas do Fenol e seus Derivados
Uma soluo aquosa de fenol 5% mata rapidamente as formas vegetativas dos
microrganismos, porm os esporos so muito mais resistentes. O fenol, por ser txico e
apresentar um odor desagradvel, no muito utilizado como desinfetante ou anti-sptico. Ele tem sido
substitudo por vrios derivados qumicos ou compostos qumicos relacionados que so menos txicos
para o tecido e mais ativos contra os microrganismos.
Lysol um desifentante produzido a partir de uma soluo de sabo contendo substncias derivadas do
fenol (o-fenilfenol, o-benzil-p-clorofenoL xilenol). O lysol utilizado para desinfetar objetos inanimados
como assoalhos, paredes e superfcies de mesas, objetos hospitalares contaminado, como termmetro
retal, e excretas e secrees de pacientes com doenas infecciosas.
Hexaclorofeno atua como um bacteriosttico em bactrias Gram-positivas, particularmente em
estafilococos. Foi anteriormente incorporado a uma grande variedade de produtos de consumo (em uma
concentrao de 3%, como sabonetes, xampus. desodorantes, pasta de dentes, unguentos e cosmticos.
Entretanto, aplicaes prolongadas do hexaclorofeno so txicas e, portanto, a sua utilizao prtica
restrita.
de Ao do Fenol e Seus Derivados
Mecanismo. O fenol e seus derivados lesam as clulas microbianas pela alterao da permeabilidade
seletiva da membrana citoplasmtica, causando uma perda das substncias citoplasmtica intracelulares
vitais. Estes compostos tambm desnaturam e inativam protenas como enzimas. Dependendo da
concentrao utilizada, eles podem ser bacteriostticos ou bactericidas.
2) ALCOOIS
Em concentraes entre 70 e 90%, as solues de lcool etlico (etanol), CH 3CH20H, so eficientes contra
as formas vegetativas dos microrganismos. Porm, o lcool etlico no pode ser utilizado para esterilizar
um objeto pois no mata os endsporos bacterianos. Por exemplo, os endsporos do Bacillus anthracis,
agente etiolgico do carbnculo, podem sobreviver no lcool durante 20 anos.
O lcool metlico ou metanol (CH30H) no utilizado como agente antimicrobiano. Algumas vezes

denominados lcool de madeira, menos bactericida do que o lcool etlico e altamente txico.
Inclusve, o vapor deste composto pode produzir seqelas permanentes nos olhos.
As propriedades bactericidas do lcool aumentam quanto maior for sua cadeia de carbono. Entretanto,
lcoois com cadeias de carbono maiores do que o lcool proplico e isoproplico so menos solveis em
gua do que o lcool etlico e, assim, so pouco utilizados como desinfetantes. Os lcoois proplico e
isoproplico em concentraes de 40 a 80% so bactericidas para as clulas vegetativas e so
freqentemente utilizados no lugar do lcool etlico.
Aplicaes Prticas dos lcoois
lcool etlico (70%) e lcool isoproplico (90%) so utilizados como anti-spticos de pele e como
desinfetantes de termmetros clnicos de uso oral e de certos instrumentos cirrgicos. O tratamento com lcool o mtodo mais utilizado para limpar a pele antes de coletar amostra de sangue. Comparado com
outras solues anti-spticas, o lcool etlico o mais eficiente na destruio das bactrias. O lcool em
concentraes entre 60 e 90% eficiente contra vrus. Entretanto, a presena de outras protenas diminui
a. eficincia contra os vrus, porque o lcool combina-se com elas impedindo a ao sobre as protenas
virais.
Mecanismo de Ao dos Alcoois.
A atividade antimicrobiana dos lcoois deve-se principalmente sua capacidade de desnaturar protenas.
Os lcoois so tambm solventes lipdeos, lesando assim as estruturas lipdicas da membrana das clulas
microbianas. Alem disso, parte de sua eficincia como desinfetante de superfcie pode ser atribudo ao
detergente e de limpeza, que auxilia na remoo mecnica dos microrgamsmos.
3) HALOGNIOS
Os elementos qumicos do grupo dos halognios, particularmente o iodo, o cloro e em menor extenso o
bromo, so componentes de muitos agentes qumicos antimicrobianos.
Os halognios so fortes agentes oxidantes e, em virtude dessa propriedade, so altamente reativos e
destroem os componentes vitais da clula microbiana.
Iodo e Compostos Iodados
O iodo um dos mais antigos e eficientes agentes antimicrobianos. Foi reconhecido pela Farmacopia
Norte Americana no incio de 1830 e utilizado para tratar ferimentos durante a guerra civil americana. O
lodo puro um elemento cristalino preto-azulado com brilho metlico. pouco solvel em gua pura
porm altamente solvel em lcool etlico e em soluo aquosa de iodeto de potssio (KI) ou iodeto de
sdio (NaI). _tradicionalmente utilizado como agente anti-sptico na forma de tintura de iodo. O termo
tintura refere-se a uma soluo alolica de uma substncia medicinal. Vrias preparaes so utilizadas:
iodo 2% com iodeto de sdio 2% diludo em lcool 70%; iodo 7% com iodeto de potssio 5% em lcool
83%; e iodo 5% com soluo aquosa iodeto de potssio 10% .
O iodo tambm utilizado na forma de substncias denominadas iodforos, que so complexos de iodo
com compostos que atuam como carreadores e agentes solubilizadores do iodo Por exemplo, povidineioso um complexo de iodo e polivinilpirrolidona. Iodforos so germicidas como o iodo, com a
vantagem de no corar e no ser irritante pele.

Aplicaes Prticas do Iodo e Seus Compostos.


O iodo um agente microbicida de alta eficincia contra todas as espcies de bactrias. Ele tambm
esporicida, fungicida, viricida e amebicida. Entretanto, a velocidade pela qual os endosporos bacterianos
so mortos pelo iodo pode ser diminuda pela presena de material orgnico.
Preparaes de iodo so utilizadas principalmente para a anti-sepsia da pele, em que so freqentemente
os agentes mais efetivos O iodo nas suas vrias formas tambm usado para desinfetar pequenas,
quantidades de gua e para sanificar utenslios de alimentao. Os vapores de iodo podem ser utilizados
tambm para desinfetar o ar.
Mecanismo de Ao do Iodo e Seus Compostos
Por ser um forte agente oxidante o iodo pode destruir metablitos essenciais dos microrganismos por
meio da oxidao. A habilidade do iodo em combinar-se com o aminocido tirosina resulta na inativao
das enzimas e de outras protenas.
4) CLORO E COMPOSTOS CLORADOS
O cloro, na forma gasosa (Cl 2) ou em combinaes qumicas, representa um dos desinfetantes mais
largamente utilizados. O gs comprimido em forma lquida , com poucas excees, a escolha universal
para a purificao das guas de abastecimento pblico e piscinas. O cloro gasoso difcil de ser
manipulado, a menos que se disponha de equipamento especializado, o que torna sua aplicao limitada
em operaes de larga escala, como o tratamento de guas em estaes municipais.
Existem muitos compostos clorados que podem ser manuseados mais convenientemente do que o cloro
gasoso. Entre eles esto os compostos inorgnicos clorados denominados hipocloritos, que contm o
grupo qumico -OCI. Os hipocloritos mais utilizados so o hipoclorito de clcio Ca(OCl2) e hipoclorito de
Sdio, NaOCl, que so utilizados como alvejantes domsticos As cloraminas so compostos orgnicos
clorados nos quais um ou mais tomos de hidrognio da amnia (NH 3) ou do grupamento amina (-NH2)
so substitudos pelo cloro. Os mais simples entre esses compostos a monocloramina, NH 2Cl. A
cloramina- T e a azocloramida apresentam estruturas qumicas mais complexas.
Uma das vantagens das cloraminas a estabilidade; o cloro liberado por um perodo maior do que nos
hipocloritos.
Aplicao Prtica do Cloro e Seus Compostos
O cloro gasoso liquefeito o agente de escolha para a desinfeco de gua potvel e guas de piscinas e,
nas estaes de tratamento de gua de esgoto. Para ser efetivo, a concentrao de cloro deve atingir um
nvel de 0,5 a 1,0 parte por milho - ppm (miligramas por litro). Produtos contendo hipoclorito de clcio
so usados para a sanificaco de utenslios em restaurantes e equipamentos de laticnios. Uma soluo de
hipoclorito a 1% usado para a higiene pessoal e como desinfetante domstico. Concentraes mais
elevadas, tais como 5 a 12% so empregadas como alvejantes e desinfetantes domsticos e como
sanificantes em instalaes de laticnios e indstrias de alimentos.
Mecanismo de Ao do Cloro e Seus Compostos.
O cido hipocloroso (HCIO) formado quando o cloro livre adicionado gua e responsvel pela ao
antimicrobiana do cloro e seus compostos:
Cl2 + H2O

HCl
+
cido clordrico

HClO
cido Hipocloroso

Quando adicionados a gua, os hipocloritos e as cloraminas sofrem hidrlise, dando origem ao cido
hipocloroso. Este cido sofre nova reao, originando o oxignio nascente (O):
HClO

HCl

O
Oxignio nascente

O oxignio nascente liberado nesta reao um poderoso agente oxidante que pode destruir substncias
celulares vitais. O cloro pode tambm combinar diretamente com protenas, celulares e destruir as suas
atividades biolgicas.
5) METAIS PESADOS E SEUS COMPOSTOS
O termo metais pesados refere-se a metais tais como mercrio, chumbo, zinco, prata e cobre
Antigamente a gua era armazenada em recipientes de prata e cobre porque as pessoas notaram que os
vasilhames de metal conservavam gua para beber. O mercrio e os compostos mercuriais tm uma longa
histria no controle de infecces, incluindo a sfilis. O cloreto de mercrio (HgCl 2) era amplamente usado
no incio do sculo XX como desinfetante geral, mas desde ento tem sido substitudo por outros agentes
menos txicos e corrosivos.
A capacidade de quantidades extremamentes pequenas de certos metais, particularmente a prata, de
exercer efeito legal sobre as bactrias conhecida sob a denominao de ao oligodinmica, termo que
se origina do grego oligos (pequeno) e dinamiks (poder). Este fenmeno pode ser demonstrado no
laboratrio, colocando-se uma moeda de prata (previamente limpa) sobre a superficie de um meio
solidificado previamente inoculado. Aps a incubao uma zona de inibio (sem crescimento)
verificada ao redor da moeda. A quantidade de meta! dissolvido, responsvel pelo efeito de inibio,
extremamente diminuta e pode ser expressa como parte por milho.Acredita-se que a atividade desses
ons metlicos se deve inativao de certas enzimas que se combinam com o metal.
Aplicaes Prticas dos Metais Pesados e Seus Compostos.
Alguns compostos contendo mercrio orgnico possuem maior atividade antimicrobiana e menor
toxicidade do que os compostos mercuriais inorgnicos. Entre os compostos orgnicos esto o
merbromim (mercrio cromo), timerosal (mertiolate) e nitromersol (metafenl) , que so utilizados para o
tratamento de pequenos cortes, feridas e infeces de pele,
Uma soluo a 1 % de nitrato de prata (AgNO3) era amplamente empregada para prevenir infecces
oculares por gonococos em recm-nascidos; atualmente, o nitrato de prata tem sido substitudo por
antibiticos, tais como penicilina ou eritromicina. Compressas (esponjas ou camadas de gaze)
impregnadas com nitrato de prata a 0,5% tm sido utilizadas para prevenir infeces em queimaduras.
O sulfato de cobre (CUS04) efetivo como um algicida em reservatrios abertos de gua e piscinas. O
sulfato de cobre tem tambm ao fungicida e utilizado na forma de mistura de Bordeaux no controle de
infeces em plantas. Compostos de zinco so tambm fungicidas e so usados em ungntos e ps para o
tratamento do p-de-atleta.
Mecanismo de Ao dos Metais Pesados e Seus Compostos
Os metais pesados inativam as protenas celulares combinando.-se com algum componente da protena.
Por exemplo, o cloreto de mercrio inativa enzimas que contm grupos sulfidrilas (-SH ).

6) DETERGENTES
Os detergentes so compostos que diminuem a tenso superficial e so utilizados para limpar superfcies.
So tambm denominados surfactantes. A ao umectante deve-se ao fato de serem compostos
anfipticos. Quando uma substncia apolaar, como as gorduras, colocada em uma soluo aquosa de
detergente, os grupos hidrofbicos do detergente ligam-se s substncias, enquanto os grupos hidroflicos
criam uma superfcie que pode ser encharcada com a gua.
Sabes so exemplos de detergentes Eles so sais de sdio ou potssio de cidos graxos de cadeia longa
solveis em gua (por exemplo, oleato de sdio). Os sabes so produzidos quando as gorduras so
aquecidas com bases fortes como o hidrxido de sdio ou o hidrxido de potssio. Porm, os sabes tm
a desvantagem de precipitar facilmente na presena de gua alcalina ou cida. Por esta razo, novos
agentes de limpeza mais eficientes denominados detergentes sintticos tm sido desenvolvidos. Eles
diferem estruturalmente dos sabes e no formam precipitados.
Quimicamente, os detergentes so classificados em trs grupos principais:
a) Detergentes aninicos so aqueles em que a propriedade detergente do composto reside na poro
aninica ou no on da molcula carregado negativamente
b) Detergentes catinicos so aqueles em que a propriedade detergente do composto reside na poro
catinica da molcula (carregada positivamente)
c) Detergentes no-inicoss so aqueles que no ionizam quando dissolvidos em gua. Exemplos so o
polissorbato 80 e octoxinol.
Os detergentes no-inicos no so antimicrobiano, Muitos detergentes antimicrobianos pertencem ao
grupo catinico, dos quais os compostos quaternrios de amnio so mais largamente utilizados.
6.1) COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIO
As estruturas dos compostos quaternrios de amnio esto relacionadas a do cloreto de amnio, NH4Cl.
Na molcula de um composto quaternrio de amnio, os grupos R 1, R2, R3 e R4 so grupamentos
qumicos orgnicos ligados a um tomo de nitrognio central. Um dos compostos mais utilizados o
Cloreto de Benzalcnico.
Os compostos quaternrios so bactericidas para bactrias Gram-positivas e Gram-negativas, mesmo em
concentraes muito baixas. As concentraes bactericidas variam de diluies de uma parte do composto
quaternrio para poucos milhares a centenas de milhares de partes de gua. Outro aspecto importante
destes compostos que apresentam atividade bacteriosttica em concentraes muito abaixas daquela em
que so bactericidas. Por exemplo o limite na ao bactericida de um composto quaternrio pode ser igual
a uma diluio de 1:30.000, mas o composto pode ser bacteriosttico em diluies to altas quanto
1:200.000. Portanto, a ao desses compostos demonstra a necessidade de se distinguir atividade
bacteriosttica e bactericida nos testes de avaliao dos desinfetantes.
Aplicaes Prticas dos Compostos Quaternrio
Alm de sua atividade germicida e ao detergente os compostos quaternrios de amnio caracterizam-se
pela baixa toxicidade, alta solubilidade em gua, alta estabilidade em soluo e por no serem corrosivos.
Esta combinao de propriedades faz dos compostos quaternrios um excelente agente anti-sptico,
desinfetante e sanificante. So largamente aplicados em assoalhos paredes e outras superfcies em
hospitais, enfermarias e outros estabelecimentos pblicos. So tambm utilizados como agentes
sanificantes utenslios de restaurantes, assim como de superfcies e equipamentos em instalaes de
processamentos de alimentos.

Mecanismo de Ao dos Compostos Quaternrios


Os efeitos antimicrobianos dos compostos quaternrios de amnio devem-se a desnaturao de protenas
das clulas, interferncia com os processos metablicos e leso da membrana citoplasmtica.
Um resumo dos principais grupos de anti-spticos e desinfetantes e suas aplicaes mostrado na tabela
abaixo:

AVALIAAO DO PODER ANTIMICROBIANO DOS DESINFETANTES E ANTl-SPTICOS


Tcnicas laboratoriais so utilizadas para determinar o potencial antimicrobiano dos agentes qumicos,
possibilitando a escolha de desinfetantes e anti-spticos apropriados_ Entretanto, necessrio enfatizar
que um nico mtodo laboratorial no pode avaliar todos os compostos qumicos microbicidas_ Um
microbiologista deve escolher um mtodo para um agente qumico especfico que assegure resultados
significativos e reprodutveis.
Os trs procedimentos amplamente utilizados no laboratrio so a tcnica de diluio em tubo, a tcnica
de inoculao em placas e a tcnica do coeficiente fenlico. Em cada procedimento, o agente qumico
testado contra um microrganismo especfico denominado organismo-teste (usualmente Staphylococcus
aureus ou Salmonella typhi, que so representativos de bactrias patognicas Gram-positivas e Gramnegativas, respectivamente
1) Tcnica da Diluio em Tubo
Neste mtodo, o microbiologista faz vrias diluies do agente qumico e distribui um volume igual (por
exemplo, 5,0 ml) de cada diluio em tubos de ensaios esterilizados. Uma quantidade especfica (por
exemplo, 0,1 ml) da suspenso do organismo-teste adicionada em cada tubo. Em intervalos de tempo
definidos, transfere-se o material desses tubos para outros tubos contendo caldo nutriente estril. Os tubos
inoculados so incubados por 24-48 horas e, ento, examinados quanto ao crescimento microbiano
(turvao) Nenhum crescimento (caldo lmpido) indica a diluio na qual o agente qumico matou o
organismo no perodo de tempo em que foi exposto.
2) Tcnica da Inoculao em Placa
Em vez de utilizar meios lquidos em tubos, voc pode medir o potencial antimicrobiano com meios
solidificados que claramente mostram as reas de inibio de crescimento_ Uma placa de gar nutriente
inoculada com o organismo-teste, e o agente qumico colocado no centro da placa_ Se o agente qumico
for lquido, um disco de papel de filtro impregnado com a soluo pode ser colocado no meio, ou um
pequeno volume da soluo colocado em um cilindro oco depositado na superfcie do gar. Aps a
incubao de 24-48 h, a placa observada buscando-se uma zona de inibio (ausncia de crescimento)
ao redor do agente testado. Ungentos ou pomadas podem ser testados com esta tcnica.
Pode-se realizar uma modificao da tcnica de inoculao em placas por meio da qual, inicialmente, o
agente qumico incorporado ao gar nutriente, que ento distribudo na placa. O meio inoculado com
o organismo-teste, incubado e ento examinado para avaliar o crescimento microbiano
3) Tcnica do Coeficiente Fenlico
O mtodo do coeficiente fenlico uma tcnica de diluio em tubo modificada, altamente padronizada.
Este procedimento adotado pela Association of Official Analyticai Chemists e U. S. Food and Drug
Administration. O coeficiente fenlico pode ser definido como o poder de um desinfetante-teste em matar
um microrganismo comparado com aquele apresentado pelo fenol. Utilizado extensivamente e para testar
desinfetantes, esta tcnica utiliza cepas especficas de Salmollella typhi ou Staphylococcus aureus. O
procedimento pode ser resumido como:
a) preparada uma srie de tubos de ensaio contendo 5,0 ml de diferentes diluies do desinfetante a ser
testado.
b) Tambm preparada uma srie de tubos de ensaio contendo vrias diluies do fenol.
c) Os tubos de ambas as sries so inoculados com 0,5ml de uma cultura da bactria-teste de 24 horas de
cultivo.
d) Em intervalos de 5, 10 e 15 min, uma amostra de cada tubo retirada com uma ala de semeadura
calibrada e transferida para outros tubos de ensaio contendo meio de cultura estril

e) Os tubos da sub-cultura so incubados por 24-48 h e examinados quanto ao seu crescimento .


f) A maior diluio do desinfetante que matar o organismo-teste em 10 minutos, mas no em 5 min,
dividida pela maior diluio do fenol que apresenta o mesmo resultado O nmero obtido o
coeficiente fenlico para o desinfetante em questo. A tabela abaixo mostra um exemplo dos
resultados obtidos neste teste
Tabela: Um exemplo do tipo de resultado obtido com o mtodo do coeficiente fenlico na avaliao de
um desinfetante - organismo teste Salmonela typhi
Crescimento nos tubos
de subcultivo
Desinfetante
Desinfetante X

Diluio 5min
1: 100
1: 125
1:150
1: 175
1:200

+
+
+

10min

15 min

+
+

Fenol

1:90
+
1 100
+
+
+
Coeficiente fenlico do desinfetante X = 150/90 = 1.6
- ausncia de crescimento
+ presena se crescimento
ESTERILIZANTES QUMICOS
Esterilizantes qumicos so particularmente utilizados para a esterilizao de materiais mdicos sensveis
ao calor como bolsas de sangue para transfuso, seringas plsticas descartveis e equipamentos de
caterizao. Tambm so utilizados para esterilizar ambientes fechados, incluindo cmara asspticas,
utilizadas para procedimentos que devem ser livres de microrganismos. Os principais esterilizantes
qumicos utilizados so xido de etileno, -propiolactona, glutaraldedo e formaldedo.
1) XIDO DE ETILENO
O xido de etileno um composto orgnico com a seguinte estrutura cclica:
H2C
CH2
O
O xido de etileno lquido a temperaturas abaixo de 10,8C, mas acima desta temperatura torna-se um
gs. Seus vapores so altamente irritantes para os olhos e mucosas, e ele inflamvel mesmo em baixas
concentraes. Este problema de segurana tem sido superados pela preparao de misturas de xido de
etileno com dixido de carbono e Freon, que so gases no inflamveis. Esta mistura mantm a atividade
microbicida do xido de etileno, que mata no somente clulas vegetativas de microrganismos mas
tambm endsporos bacterianos.
Outra caracterstica importante e desejvel do xido de etileno o seu poder de penetrao. Ele atravessa
e esteriliza o interior de grandes pacotes com objetos, roupas e mesmo certos plsticos. Assim certos
materiais, como seringas, podem ser acondicionados e ento esterilizados. Entretanto, uma das
desvantagens do xido de etileno a baixa velocidade de ao contra microrganismos, necessitando de
vrias horas de exposio ( algumas vezes uma noite) para ser eficiente.
Aplicaes prticas do xido de Etileno

A utilizao eficiente do xido de etileno requer o controle preciso da concentrao, temperatura


umidade. Algumas autoclaves modernas so equipadas para manter condies timas para utilizao
xido de etileno. Alm de ser utilizado rotineiramente para esterilizao de materiais mdicos
laboratoriais, o xido de etileno tem sido utilizado no programa espacial pelos cientistas americanos
russos para a descontaminao dos componentes das naves espaciais.

e
o
e
e

Mecanismo de ao do xido de etileno


O xido de etileno inativa enzimas e outras protenas que tem tomos de hidrognio lbeis como em
grupos sulfidrilas. Esta reao denominada alquilao. O anel da molcula do xido de etileno se rompe
para formar CH2CH2O , que se insere entre os tomos de enxofre e hidrognio do grupo sulfidrila:
H2C

CH2

R SH

R - S CH2CH2O H

O
xido de Etileno

Enzima Ativa

Enzima Inativa

2) -PROPIOLACTONA
Este composto um lquido em temperatura ambiente, com pomo de ebulio de 155C. e tem a seguinte
estrutura:
CH2

CH2

C = O

A -propiolactona no inflamvel como o xido de etileno mas apresenta uma caracterstica indesejvel,
a de causar bolhas quando em contato com a pele e irritao nos olhos. bactericida, esporicida,
fungicida e viricida. No apresenta poder de penetrao demonstrado pelo xido de etileno, mas
consideravelmente mais ativa contra os microrganismos. Somente 2 a 5 mg/l de -propiolactona so
requeridos para fins de esterilizao dos materiais, enquanto so necessrios 400 a 800 mg/ml de xido de
etileno. Entretanto, em virtude do baixo poder de penetrao e de sua provvel propriedade carcinognica,
sua utilizao como agente esterilizante foi restringida.
3) GLUTARALDEDO
O glutaraldedo um lquido oleoso, incolor com a seguinte estrutura:

OHC - CH2 - CH2 - CH2 - CHO

Uma soluo aquosa de 2% deste agente qumico tem um largo espectro de atividade antimicrobiana.
efetivo contra vrus, clulas vegetativas e esporuladas de bactrias e fungos. utilizado na medicina para
esterilizar instrumentos urolgicos, lentes de instrumentos, e outros equipamentos especficos '
4) FORMALDEDO
O formaldedo tem uma estrutura qumica simples ( HCHO). um gs que se mostra estvel somente em
altas concentraes e em temperaturas elevadas. extremamente txico e seus vapores so intensamente
irritantes s mucosas. Em temperatura ambiente, o formaldedo gasoso polimeriza-se, formando uma
substncia slida incolor chamada paraformaldedo que rapidamente libera formaldedo pelo
aquecimento. O formaldedo tambm comercializado em soluo aquosa como formalina, que contm
37 a 40 % (p/v) da substncia. O metanol usualmente adicionado (10 a 15 %) para prevenir a
polimerizao do formaldedo.

O formaldedo em soluo utilizado para a esterilizao de certos instrumentos. Na forme gasosa pode
ser utilizado para desinfeco e esterilizao de reas fechadas. A umidade e a temperatura tm grande
influncia sobre a ao microbicida do formaldedo; a fim de esterilizar uma rea fechada, a temperatura
deve estar prxima de 22C e a umidade relativa do ar entre 60 a 80 %. Uma das desvantagens desse
processo a capacidade limitada de penetrao dos vapores de formaldedo em superficies cobertas.
O formaldedo um composto qumico extremamente reativo e sua atividade microbicida parece dever-se
capacidade de inativar constituintes celulares como protenas e cidos nuclicos. As clulas vegetativas
so destrudas mais rapidamente com o formaldedo do que as formas esporuladas.
A figura abaixo resume os stios e os mecanismos de ao dos vrios compostos qumicos
antimicrobianos.