SEPARACIN DE UNA MEZCLA DE AZUL

DE METILENO Y FLUORESCENA
USANDO CROMATOGRAFIA POR
ADSORCION

4IM1
Seccin 1
Profesora: Rosa Martha Cabrera
Martnez

Objetivos:

Separacin de una mezcla de colorantes mediante cromatografa por

adsorcin
Observar si la separacin se llev a cabo mediante un perfil de elucin

Fundamento:
Se basa en el diferente grado de adsorcin de cada compuesto orgnico sobre
la superficie de una sustancia qumicamente inerte, denominada adsorbente,
de modo que el compuesto se ve atrado a zonas polares de la superficie del
adsorbente por fuerzas electrostticas, quedando reversiblemente ligado a la
misma. Para que el proceso ocurra es necesaria la presencia de un disolvente,
o mezcla de disolventes, que interaccionan con el adsorbente y los compuestos
de la mezcla; esa interaccin triple entre soluto, disolvente, y adsorbente,
establece las proporciones relativas que se fijan y migran, a travs del
adsorbente, los diferentes solutos, y por tanto, determina la separacin entre
los mismos.
Pesar 10 g de
alumina acida e
hidratalra

Aforar 30 tubos a
3 ml

Empaquetar la
columna

Recolectar
volumenes de
agua hasta que
el primer
colorante salga

Agregar mezcla
de colorantes

Regular la
velocidad de
flujo de 32 a 40
gotas por minuto

Cambiar la la
fase movil por
regulador de
fosfatos acido

Recolectar
segundo
colorante

Datos experimentales

Discusin:
Durante la cromatografa, el primer colorante en salir fue el azul de metileno,
seguido de varias recolecciones incoloras, recolectamos tubos con fluorescena,
esto se debe a que la almina era de tipo acida (carga positiva) y el complejo
de el azul de metileno de igual forma tiene carga positiva. Las cargas se
repelen impidiendo la fijacin de este colorante en la almina.
Ya que la fluorescena es polar, tiene carga contraria a la almina, esto la fija a
ella (puede formar puentes de hidrogeno), y no la permite salir con la primera
fase mvil (agua), pero cuando cambiamos la fase mvil por regulador de
fosfatos bsico, alcalinizamos la almina, rompiendo las fuerzas que formo con
la fluorescena, permitindola fluir .
En la grfica podemos observar cual es la longitud de onda a la que cada
colorante tiene su mayor absorbancia (668nm para azul de metileno / 493nm
para fluorescena)
Sin embargo se observa un pico ms pequeo a 493; a pesar de que el azul de
metileno tiene mayor absorbancia a 668nm, en la grfica observamos que
est absorbiendo una fraccin ms pequea de radiacin electromagntica a
493.
Ambos picos correspondientes a azul de metileno, se observan en los primeros
volmenes recolectados, esto nos indica la presencia nicamente de azul de
metileno, obteniendo as una completa separacin de ambos colorantes.

Conclusin:
Se obtuvo una completa separacin de los colorantes.
Preguntas extra:
1. Especifique y defina los elementos del sistema cromatogrfico para esta
separacin:
Fase mvil 1: agua
Fase mvil 2: regulador de fosfatos bsico
Fase estacionaria: almina acida
Soporte: columna
2. Defina el termino adsorcin y empleando formulas esquematice que
fuerzas intermoleculares participan en el proceso de separacin de los
solutos
La adsorcin puede definirse como la tendencia de un componente del sistema
a concentrarse en la superficie de otro. El adsorbato y la superficie estn
sujetos a fuerzas intermoleculares de van der Waals.

3.

Considerando las propiedades de solubilidad de los colorantes, indique

que modificaciones hara para invertir el orden de elucin.

Usar almina bsica

Bibliografa:
P. Molina Buenda. Prcticas de qumica orgnica. p.22
By J M Costa. Diccionario de qumica fsica. p.11