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2009.1
1. Cada aula prtica ter um roteiro que dever ser seguido e preenchido durante a aula pelo aluno.
2. O aluno dever ter todos os roteiros para serem entregues ao professor da disciplina, na primeira aula
prtica, encadernados, pois esses permanecero no laboratrio e sero utilizados de acordo com o tema
proposto em cada aula.
3. No ser permitido que o estudante saia com os roteiros ou deixe para finalizar a tarefa fora do
laboratrio. No final de cada aula o professor recolher o material escrito de cada aluno para correes.
4. Estes roteiros tero como objetivo elevar a qualidade das aulas prticas e facilitar a vida acadmica do
aluno na disciplina de Biologia, no curso de Enfermagem da FASB.
5. Para que as aulas prticas sejam efetuadas de maneira segura e eficiente, os alunos devem
OBRIGATORIAMENTE:
-Comparecer pontualmente no horrio de sua prtica, trazendo consigo o material proposto pela
professora. A tolerncia mxima para o atraso do aluno ser de 10 minutos. Aps este perodo, a
participao do aluno na prtica ficar comprometida. O aluno no poder responder o roteiro da aula que
ele esteve ausente.
-Uso obrigatrio de jaleco branco. O aluno no poder participar da aula prtica sem o jaleco.
- Oaluno dever tambm usar roupa branca, sapato fechado, cabelos presos. Deve-se evitar o uso de
adornos (pulseiras, colares, brincos compridos) que possam atrapalhar o andamento das aulas.
-Todos os alunos devem participar ativamente da aula, o que no impede que haja intercmbio de idias e
materiais.
-Limpar a sua bancada ao trmino de cada aula, desligar os microscpios, deix-los na posio de
descanso e cobri-los. Descartar os materiais utilizados nos locais indicados.
As dimenses das estruturas biolgicas podem agrupar-se em dois grandes grupos, macroscpicas, isto
, visveis ao olho nu e microscpicas, isto , invisveis ao olho nu, tendo como fronteira o poder de
resoluo do olho humano. As unidades de medida utilizadas nestas dimenses esto, assim, adaptadas
sendo as mais freqentemente utilizadas o micrmetro (m) para a microscopia ptica e o nanmetro
(nm) e o angstrom () para a microscopia eletrnica. A sua relao com a unidade fundamental do
sistema mtrico, o metro (m) e com o milmetro (mm) a seguinte:
1 m = 10-6 m = 10-3 mm (0,001mm)
1 nm = 10-9 m = 10-6 mm = 10-3 m (0,001 m)
1 = 10-10 m = 10-7 mm = 10-4m (0,0001 m)
1- Introduo
O microscpio ptico (ou microscpio de luz) um aparelho utilizado para observao de objetos muito
pequenos, impossveis de serem examinados em detalhes a olho nu. O tipo de microscpio mais utilizado
nos estudos citolgicos o composto, que constitudo basicamente por duas lentes convergentes. A luz
atravessa o objeto observado e o conjunto de lentes, antes de atingir o olho, formando uma imagem
bidimensional. Assim, o objeto deve ser delgado o suficiente para que a luz possa atravess-lo. O
microscpio de luz utiliza como fonte de iluminao a luz branca comum para permitir a observao de
materiais. Esse instrumento fornece uma imagem consideravelmente aumentada, geralmente invertida
verticalmente (de cima para baixo) e invertida horizontalmente (da esquerda para a direita). O aparelho
constitudo basicamente por uma parte mecnica que serve de suporte, e uma parte ptica, constituda
por trs sistemas de lentes: o condensador, as objetivas e as oculares.
1- Parte mecnica
c) Platina: pea de formato retangular que serve de apoio para a lmina de vidro. No centro possui um
orifcio para passagem da luz.
d) Charriot: pea ligada platina para movimentar a lmina no plano horizontal. Possui uma presilha que
prende a lmina platina. Dois parafusoslaterais promovem a movimentao do charriot, da esquerda
para direita e vice-versa e de trs para frente e vice-versa.
e) Parafuso macromtrico: localizam-se em ambos os lados da coluna e serve para ajustar o foco.
Permite grandes avanos ou recuos da platina em relao objetiva.
g) Canho: parte superior do microscpio constituda por pea semi-esfrica ligada um tubo oco.
Internamente abriga um prisma e sustenta as lentes objetivas e oculares.
h) Revlver: pea em que se encaixam as lentes objetivas. Nela existe um disco por onde se faz o giro do
revlver para a mudana das objetivas.
2 - Parte ptica:
a) Sistema de Iluminao: todos os elementos esto situados abaixo da platina.
a2. Condensador : Conjunto de lentes situado abaixo da platina. Concentra a luz e fornece iluminao
uniforme preparao biolgica. Fornece tambm a possibilidade de contraste imagem, principalmente
no caso de preparao fresco.
a3. Diafragma: regula a intensidade da luz que atinge a preparao, atravs de uma alavanca que
comanda a abertura e fechamento da pea, localizada no condensador.
c) Ocular: a lente superior do microscpio que seencaixa no tubo, o qual pode sustentar 1 ou 2 oculares
(microscpios mono ou binoculares, respectivamente). So duas lentes convergentes que ampliam e
corrigem defeitos da imagem dada pela objetiva. Essa lente tambm traz gravado o aumento que
proporciona a imagem do objeto observado.
2- Objetivos:
- Aprender a manusear corretamente para focalizao no microscpio ptico.
- Identificar e compreender a funo de cada componente do microscpio ptico.
3- Procedimento:
1- Introduo
O estudo dos seres vivos ao nvel citolgico limitado pelos seguintes fatores: as pequenas dimenses
da maioria das clulas, a falta de contraste entre as estruturas celulares, a espessura e o tamanho dos
rgos que se pretende estudar. Em conseqncia, a anlise da estrutura e a organizao celular no
dependem somente do uso do microscpio, mas tambm de tcnicas bsicas de preparo do material
biolgico.
Para poder ser observado ao microscpio, o material biolgico tem de ser previamente preparado,
passando por processos ou tcnicas citolgicas. Na utilizao do microscpio ptico, a lmina de vidro
serve como um suporte para o material.
Veremos a seguir algumas tcnicas de preparao de clulas para a observao microscpica.
1. Observao vital tambm conhecida como exame a fresco coloca-se o material biolgico sobre
uma lmina retangular de vidro, eventualmente cobrindo-a com uma fina lamnula de vidro, e observamse suas clulas enquanto ainda esto vivas. Como exemplos destas preparaes podemos citar:
esfregao de lquidos corporais, cortes feitos a mo livre em tecidos vegetais, entre outros.
2. Fixao Consiste em matar rapidamente as clulas, mantendo inalterada sua estrutura interna, como
se fosse uma espcie de mumificao. Para a fixao, geralmente as clulas so mergulhadas em
lquidos que contm substncias fixadoras, entre as quais as mais usadas so o formol, cido actico,
lcool etc.
3. Colorao as estruturas presentes no interior das clulas vivas apresentam pouco contraste, o que
torna difcil observ-las. Parasuperar essas dificuldades usa-se a colorao, que consiste em tratar o
material biolgico com corantes que realam estruturas internas da clula. A hematoxilina, por exemplo,
um corante azul com grande afinidade pelo ncleo celular, mas com pouca afinidade pelo citoplasma. J a
eosina um corante cor-de-rosa com grande afinidade pelo citoplasma celular, mas que no colore o
ncleo. A mesma preparao pode ser submetida ao tratamento com dois ou mais corantes, o que
aumenta a diferenciao entre as estruturas celulares.
4. Esfregao Se o material biolgico constitudo por clulas isoladas ou fracamente unidas entre si,
podemos simplesmente espalh-lo sobre a lmina de vidro, processo conhecido por esfregao. Por
exemplo, para preparar lminas de um material lquido como o sangue, pinga-se uma gota sobre a lmina
e espalha-se bem, formando uma camada fina. Isso evitar que as clulas se empilhem e assim ser
possvel observ-las individualmente. Essa tcnica tambm utilizada para preparar as clulas de
revestimento interno da boca. Basta passar levemente um palito na parte interna da bochecha para fazer
dezenas de clulas se soltarem. Em seguida, passa-se o palito sobre uma lmina, de modo a obter o
esfregao.
5. Esmagamento no caso de clulas frouxamente associadas, como as de partes moles de animais ou
de vegetais, pode-se preparar o material por meio da tcnica de esmagamento. O material, geralmente j
fixado e corado, colocado entre uma lmina e uma lamnula de vidro e esmagado por uma leve presso
do dedo polegar. Em alguns casos, o material pode ser aquecido para fazer com que suasclulas se
separem mais facilmente.
6. Corte manual quando possui clulas firmemente unidas entre si, o material biolgico precisa ser
cortado em fatias finas para poder ser observado. Essas fatias so chamadas de cortes biolgicos. Certos
materiais vegetais relativamente rgidos (caules, razes, folhas etc) podem ser cortados manualmente,
com uma lmina de bisturi bem afiada, e observados a fresco, com uma pequena gota de gua entre a
lmina e a lamnula. As estruturas vegetais, geralmente mais rgidas que as dos animais, permitem fazer
cortes suficientemente finos para uma observao vital satisfatria.
7. Incluso e corte com micrtomo a maioria dos materiais biolgicos no tem rigidez para serem
cortados em fatias realmente finas, necessrias a uma boa observao. Por isso, preciso submet-los a
tratamentos especiais que endurecem as clulas, o que permite cort-las mais facilmente. O mtodo mais
comum de endurecer os materiais biolgicos a incluso, que consiste em impregnar o material com uma
substncia que o torna mais rgido, facilitando os cortes. Para preparaes destinadas ao microscpio
ptico, geralmente a incluso consiste em embeber o material j fixado em parafina derretida pelo calor,
deixando-a esfriar e solidificar. O material fica, assim, includo dentro de um bloco de parafina
solidificada, e pode ser cortado em fatias bem finas, em torno de 5 m de espessura. Para obter cortes
to finos, emprega-se um aparelho denominado micrtomo.
2- Objetivos
Compreender como o desenvolvimento das tcnicas citolgicas contribuiu para o avano do
conhecimento sobre asclulas.
Aprender a manipular o microscpio ptico.
Observar clulas da mucosa bucal e clulas mortas da cortia
3- Materiais: microscpio, lminas, lamnulas, esptula de madeira, corante azul de metileno, cortia,
lmina de barbear ou bisturi.
4- Procedimento:
B) Corte manual:
- Cortar um fragmento extremamente delgado de um pedao de cortia.
- Colocar a fatia sobre uma lmina, adicionar uma gota de gua e cobrir com lamnula.
- Focalizar nas margens do fragmento e observar as paredes suberificadas
- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe no local indicado
abaixo.
1- Introduo
Embora as clulas procariticas se diferenciem das eucariticas por vrias caractersticas estruturais e
funcionais, apenas a principal diferena entre elas pode ser detectada pela microscopia ptica: o
tamanho. J entre as clulas eucariontes encontram-se muitas caractersticas morfolgicas diferenciais
detectveis, principalmente entre as clulas animais e vegetais. No entanto, para que sejam identificadas
ao microscpio ptico, as estruturas de qualquer tipo celular devem ter cor prpria ou devem ser coradas
com substncias corantes que lhes conferem diferentes graus de absoro de luz, acentuando os
contrastes.
2- Objetivo: detectar, ao microscpio ptico, caractersticas diferenciais entre os dois tipos celulares:
animais e vegetais.
3- Materiais e Procedimentos
- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe.
- Retire, raspando suavemente com uma esptula estril, um pouco de clulas da mucosa bucal.
- Para coletar o material, force a bochecha para dentro, com auxlio do polegar, para que sua parte interna
fique exposta, facilitando a raspagem.
-Apie a esptula contendo o material, sobre uma lmina limpa, formando um ngulo de 45.
- Faa-a deslizar sobre a lmina limpa, na qual est apoiada, de maneira que o material seja deixado na
poro central da mesma. Prepara-se assim um esfregao.
- Pingue uma gota do corante azul de metileno sobre o material.
- Cubra o material com uma lamnula limpa, procurando evitar a formao de bolhas de ar.
- Retire o excesso de corante das bordas com papel de filtro.
- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe.
( Relate as diferenas que puderam ser observadas entre os dois tipos celulares.
( Quais diferenas voc sabe que existem, porm no foi possvel observar?
MOVIMENTOS CELULARES
1- Introduo
4- Procedimento:
A) Observao de Elodea
B) Observao de espermatozides
- Coloque luvas.
- Adicione uma gota de smen sobre a lmina, e coloque a lamnula.
- Observe ao microscpio nos aumentos de 40x, 100x e 400x.
- Desenhe no aumento de 400 X.
1- Introduo
A clula consegue manter uma composio qumica extremamente diferente do meio que a rodeia graas
a uma fina membrana (a membrana plasmtica) que controla a entrada e a sada de molculas e ons,
apresentando uma permeabilidade diferencial ou seletiva.
Esta seletividade , na verdade, o reflexo de sua estrutura e composio qumica lipoproteica.
Determinadas substncias, como gases, gua e alguns ons, tm passagem livre atravs damembrana
(difuso pasiva) e o sentido de sua movimentao determinado, basicamente, por diferentas de
concentrao, gradientes eltricos e/ou pH. Nesse caso, essas substncias se difundem em direo ao
meio menos concentrado, tendendo a equilibrar as concentraes. Todavia, a concentrao intracelular
de certos ons ou molculas pode ser mantida diferente da concentrao extracelular, graas ao
transporte ativo executado por molculas transportadoras presentes na membrana. Portanto, a
manuteno de determinadas substncias dentro ou fora da clula, contra um gradiente de concentrao,
s pode ocorrer se as membranas plasmticas permanecerem ntegras.
A membrana plasmtica constituda por uma bicamada lipdica a qual se associam protenas globulares.
Essa bicamada mantida pela insolubilidade dos radicais apolares dos lipdios no meio aquoso
circundante. Tratamentos com solventes orgnicos (acetona por ex.), que dissolvem lipdios, alteram a
3- Materiais
- 5 tubos de ensaio
- etiquetas e caneta
- pissete com gua
- acetona
- beterraba em cubos de aproximadamente 1cm3
- 5 pipetas Pasteur
- suspenso de levdo
- corante vermelho congo (0,2%)
- banho-maria a100C
- lmina e lamnulas
4- Procedimento
( Responda:
a) O que se pode concluir quando se compara os resultados dos tubos 1 e 2 que contm a beterraba?
Explique.
OSMOSE
QUESTO PRVIA:
possvel introduzir ou retirar matria de um ovo sem quebr-lo ou perfur-lo?
1- Introduo
Para observar os efeitos da osmose nos ovos preciso primeiro remover a casca calcria, o que pode ser
feito atravs da dissoluo do carbonato de clcio da casca pelo cido actico presente no vinagre.
2 H3 C COOH + CaCO3 [Ca ++] [ H3 COO - ]2 + H2O + CO2
cido actico Carbonato cido actico gua Gs
de Clcio de clcio carbnico
3- Materiais
- 2 ovos de codorna
- 2 copos descartveis
- gua destilada (aproximadamente 150 mL)
- vinagre
- soluo saturada de sacarose (aproximadamente 150 mL)
- etiquetas de papel
4- Procedimento
Preparo da soluo supersaturada de sacarose: adicione 250g de acar a cerca de 250mL de gua
quente e continue aquecendo e mexendo at que a dissoluo seja completa. A soluo ficar amarelada
e viscosa.
DISCUSSO:
Na primeira parte deste experimento, aps o consumo da casca do ovo na reao com o cido, o ovo fica
envolvido apenas por uma membrana. Essa membrana semipermevel, pois permite a passagem da
gua de uma soluo mais diluda (meio hipotnico) para uma mais concentrada (meio hipertnico): esse
processo de transferncia da gua atravs da membrana semipermevel conhecido como osmose.
O processo de osmose est presente em muitos mecanismos de transporte celular. No caso dos vegetais
ocorre o transporte de gua do solo mido (meio hipotnico) para o interior da raiz (meio hipertnico). Em
fisiologia animal est relacionada, por exemplo, com os processos de troca de substncias entre as
clulas e o ambiente intercelular (como a que ocorre na regio dos capilares sangneos) e com a
filtrao renal. No caso de microrganismos unicelulares, geralmente comconcentraes de solutos bem
maiores que o meio externo (gua doce), ocorre transporte contnuo de gua para o seu interior; para no
estourar, o microrganismo precisa bombear para fora o excesso de gua. O contrrio ocorre em
microrganismos unicelulares de gua salgada, havendo gasto de energia para repor a perda de gua para
o meio exterior mais concentrado, impedindo que o microrganismo murche.
1- Introduo
A membrana plasmtica normalmente mais permevel gua que aos solutos nelas dissolvidos.
Quando essa membrana separa duas solues aquosas com diferentes concentraes de soluto, h uma
tendncia da gua movimentar-se, preferencialmente no sentido da soluo mais concentrada. Essa
difuso da gua corresponde a um tipo de transporte passivo denominado osmose.
A osmose cria problemas gerais do balano de gua para as clulas. Uma clula em um meio mais
diludo do que a sua prpria concentrao de soluto (meio hipotnico) tende a se intumescer devido
absoro osmtica da gua, enquanto que, em meio mais concentrado que seu interior (meio
hipertnico), tende a perder volume, devido ao movimento de sada da gua. Portanto, dizemos que a
gua passa, por osmose, do meio hipotnico para o hipertnico (onde j maior concentrao de soluto).
As clulas vegetais so adaptadas a viver em um ambiente hipotnico, do qual tm constantemente a
tendncia de absorver gua por osmose, mas so impedidas de intumescer atse romperem devido
resistncia da parede celular. Quando colocadas em meio hipertnico, as clulas perdem gua e sofrem
uma retrao alterando sua forma original. Essa modificao chamada, no caso de clulas vegetais, de
plasmlise, sendo o resultado de uma retrao do grande vacolo e do afastamento do protoplasma e da
membrana plasmtica, em relao parede celular. O fato de o protoplasma retrair-se, e no a parede,
mostra que as membranas celulares plasmtica e vacuolar so seletivamente permeveis e esto
envolvidas no processo de osmose. A parede celular bastante permevel aos solutos e, portanto, no
age como membrana osmtica.
A plasmlise temporria no destrutiva para a clula. Esta pode recuperar rapidamente a sua condio
de turgidez normal, se a colocarmos em um meio diludo ou em gua pura. A essa recuperao da forma
normal, damos o nome de desplasmlise.
2- Objetivo: Relacionar as mudanas de forma das clulas com a concentrao do meio extracelular e o
fenmeno da osmose.
3- Materiais: microscpio, lminas, lamnulas, soluo de sacarose hipertnica, cebola, gua destilada
4- Procedimento:
- Coloque sobre uma lmina uma gota de soluo de sacarose hipertnica. Retire a pelcula fina que
recobre as camadas da cebola, coloque-a sobre a gota na lmina e cubra com uma lamnula. Leve ao
microscpio e observe o que vai acontecer. Faa um desenho no aumento de 100x.
- Substitua a soluo hipertnica por gua destilada, procedendo da seguinte maneira: Coloque uma gota
de gua destilada em uma das extremidades da lamnula. Encoste um pedao de papel absorvente na
outraextremidade, de forma a absorver a soluo existente entre a lmina e a lamnula. Faa um desenho
no aumento de 100x.
plasmlise desplasmlise
( Responda:
2- O que ocorreu com o ovo mergulhado na gua destilada? Explique o porqu deste processo.
3- O que ocorreu com o ovo mergulhado na soluo de sacarose? Explique o porqu deste processo.
NCLEO E NUCLOLO
1. Introduo
Na clula eucaritica possvel reconhecer uma regio delimitada por membrana que contm,
basicamente, DNA, RNA e protenas. Essa regio d-se o nome de ncleo. No DNA esto as informaes
necessrias para o controle do metabolismo e da diferenciao celular.
O ncleo apresenta um envoltrio que separa o seu contedo (cromatina, nuclolo e nucleoplasma) do
restante do citoplasma. A membrana externa apresenta ribossomos aderidos a sua face citoplasmtica e
a membrana interna apresenta cromatina associada a sua face nuclear. Essa associao possibilita a
visualizao do contorno nuclear ao nvel da microscopia de luz. O envoltrio nuclear no contnuo,
apresenta poros que permitem a passagem de macromolculas como, por exemplo, as molculas de
RNA, que so sintetizadas no interior do ncleo e agem ao nvel do citoplasma.
Existem evidncias de que h relao entre o grau de condensao da cromatina e sua atividade gnica.
Clulas com uma alta taxametablica, ou seja, intensa sntese protica, apresentam cromatina
descondensada devido atividade de transcrio, que resulta na formao de diferentes tipos de RNA.
Por outro lado, clulas com baixa atividade metablica apresentam pouca cromatina descondensada. Isto
pode ser evidenciado na microscopia de luz, pela intensidade de colorao do ncleo.
Os nuclolos so estruturas basfilas tendo, portanto, afinidade por corantes bsicos. Em alguns casos,
os nuclolos no so vistos, por estarem mascarados pela presena de cromatina densa. O tamanho e a
quantidade de nuclolos variam em diferentes tipos celulares e de acordo com o estado funcional da
clula. Geralmente, os nuclolos so mais evidentes e/ou numerosos em clulas com alta atividade de
sntese protica, por serem o local de sntese de RNAr e organizao inicial dos ribossomos. Possuem
tambm, uma pequena quantidade de DNA, correspondente regio organizadora nucleolar, alm de
protenas.
O nucleoplasma corresponde a uma soluo contendo gua, protenas, ons e metablitos, na qual se
encontram a cromatina e os nuclolos.
As clulas apresentam uma variedade muito grande, quanto ao nmero, tamanho, forma e posio de
seus ncleos. Em geral o nmero e tamanho dos ncleos esto relacionados atividade metablica da
clula. Clulas que apresentam alta taxa de sntese protica e clulas muito grandes, podem ter mais
ncleos e/ou ncleos maiores.
Certos tipos celulares apresentam a cromatina altamente condensada, como a maioria dos leuccitos de
mamferos,outras clulas altamente especializadas, como as hemcias de mamferos (eritrcitos) so
anucleadas quando caem na corrente sangunea. A formao das hemcias ocorre na medula ssea, a
partir de clulas nucleadas eritroblastos. O ncleo do eritroblasto inicial apresenta cromatina
descondensada e nuclolo evidente. O ncleo eliminado durante o processo de maturao da hemcia.
Os ncleos dos diferentes tipos celulares, em geral, ocupam uma posio central. No entanto, em certos
casos o ncleo deslocado do centro, em conseqncia do acmulo de materiais no citoplasma. Por
exemplo, em clulas secretoras de glicoprotenas os ncleos so basais, em clulas musculares
esquelticas estriadas, devido a grande quantidade de microfilamentos, os numerosos ncleos ovides
so perifricos e em adipcitos, o acmulo de gordura desloca o ncleo para a periferia.
Normalmente a forma do ncleo acompanha a forma da clula. Clulas com formato cbico apresentam
ncleo esfrico e clulas cilndricas tm ncleo alongado. Entre os leuccitos observamos ncleos
multiformes e irregulares. Por exemplo, os neutrfilos apresentam ncleos polimrficos, com 2 a 5 lbulos
ligados entre si por finas pontes cromatnicas. Em moncitos, os ncleos variam de ovide a reniforme, de
acordo com o estgio de maturao da clula.
3. Materiais:
- Microscpio ptico
- lminas permanentes: 1) Tecido adiposo unilocular
2) Esfregao sanguneo3) Tireide
4. Procedimento:
Para cada lmina indicada focalize inicialmente usando a lente objetiva de 4X, e escolha um campo onde
as clulas estejam adequadamente visveis.
1. Tecido adiposo unilocular Aps escolha do campo adequado, focalize agora a preparao com a
objetiva de 10X e observe os adipcitos, cujo conjunto apresenta o aspecto de uma rede. O uso do xilol,
durante o processo de incluso do material em parafina, promove a extrao dos lipdios dos adipcitos
da o seu citoplasma se apresentar vazio e descolorido. Os adipcitos possuem um s ncleo, localizado
na periferia da clula, devido ao acmulo de gordura no citoplasma. Escolha uma clula representativa e
2. Esfregao sanguneo Escolha um campo onde as clulas estejam bem separadas. Com a lente
objetiva de 10X possvel distinguir os dois tipos celulares bsicos hemcias e leuccitos. As hemcias
so as clulas predominantes e se apresentam como um disco bicncavo anucleado. Os leuccitos so
facilmente distinguveis das hemcias por serem maiores e apresentarem ncleos que se encontram
fortemente corados. Estas clulas so esfricas e seus ncleos tm formas variadas para cada tipo de
leuccito. Assim, nos moncitos e linfcitos a forma do ncleo varia de arredondada a reniforme,
enquanto que os neutrfilos eosinfilos e basfilos apresentam ncleos segmentados (lobulados).
Escolha cada um dos tipos celulares - hemcia e leuccito - e utilizando o leo de imerso (cedido pelo
professor ou pelo tcnico) focalize apreparao usando a lente objetiva de 100X. Desenhe o observado
indicando cada tipo celular.
3. Tireide - Aps escolha do campo adequado, focalize agora a preparao com a objetiva de 10X e
observe o tecido glandular constitudo de folculos ou vesculas com dimenses variadas. Identifique as
clulas que constituem os folculos, que possuem em geral forma cbica e ncleo central arredondado. O
epitlio formado pelas clulas delimita as cavidades foliculares que contm o colide (tireoglobulina) se
apresentando na cor rosa vivo, quando usada a HE. Desenhe as clulas observadas no aumento de
400X, identificando seus ncleos.
o do volume nuclear, sendo o nompanhada de redu descondensada e nuclmo a maioria dos leuc
EXTRAO DE DNA
1- Introduo
As substncias qumicas presentes no interior das clulas interferem em toda a organizao e
funcionamento do organismo dos seres vivos. A substncia central nesse processo o cido
desoxirribonuclico, ou simplesmente DNA.
A extrao de cidos nuclicos (DNA e/ou RNA) geralmente a primeira de vrias etapas para o estudo
da biologia molecular de qualquer organismo. A partir do isolamento (extrao) da substncia qumica
DNA, possvel, por meio de diferentes mtodos qumicos, identificar e isolar genes, fazer o
seqenciamento de nucleotdeos que compem esse DNA e localizar seqncias homlogas (iguais
ousimilares) a seqncias encontradas em outros seres vivos.
2- Objetivo: Extrair e visualizar macroscopicamente o DNA obtido a partir de clulas vegetais e animais.
3- Materiais
4- Procedimento
esbranquiados, que so aglomerados de molculas de DNA. Colete esses fios com auxlio de um palito
ou basto de vidro, fazendo movimentos circulares lentamente.
( Responda:
MITOSE
1. Introduo
fuso;
Telfase fase em que se observa a descompactao da cromatina, reorganizao do invlucro nuclear e
a citocinese.
2. Objetivo: observar clulas vegetais em diviso celular e interpretar as distintas fases da mitose.
3. Materiais
Microscpio, lminas e lamnulas
Vrtices vegetativos de raiz de cebola
Soluo corante orcena actica (1% de orcena em cido actico a 70%)
Tubos de ensaio, Placas de Petri
Bisturis, pinas, pregadores para tubos, pipetas Pasteur
Bico de Bunsen
Papel toalha
Esmalte incolor
4. Procedimento
- Obteno das razes: Retire os catafilos secos de uma cebola e coloque em um frasco escuro com
gua, mergulhando somente a sua parte inferior. Aps trs ou quatro dias,ser observado o crescimento
de razes.
- Corte as razes a 2 ou 3 mm das extremidades inferiores, colocando-as em um tubo de ensaio com uma
soluo do corante orcena actica.
- Aquece-se ao fogo a lateral do tubo, um pouco acima do nvel do corante, at que a soluo de orcena
comece a ferver.
- Aps 3 ou 4 fervuras da soluo despeja-se o contedo do tubo em uma placa. As pontas das razes so
transferidas para uma gota de orcena fria sobre uma lmina de vidro para microscopia.
- Coloca-se uma lamnula de vidro sobre a gota de orcena contendo a raiz.
- Coloca-se a lmina, com a lamnula para cima, entre duas metades de um pedao de papel dobrado,
pressionando-se com o polegar para esmagar os fragmentos de raiz e espalhar as clulas. Depois de
vedar as bordas da lamnula com esmalte incolor, a preparao est pronta para ser observada ao
microscpio ptico.
- Focalize as lminas com os aumentos de 40X, 100X e 400X seguidamente, e descreva o que foi
observado em cada fase da mitose.
1- Introduo
Caritipo a descrio clara e precisa das caractersticas do conjunto cromossmico de uma espcie,
sendo de fundamental importncia quando se deseja comparar citogeneticamente espcies diferentes;
quando se pretende examinar a variao entre indivduos de uma mesma espcie; nos estudos de
condies patolgicas associadas a alteraes numricas e estruturais dos cromossomos; no diagnstico
pr-natal, dentre outros.
Os cromossomos metafsicos constituem o melhor materialpara os estudos cariotpicos devido ao alto
grau de condensao que eles adquirem nessa fase, o que facilita a observao tanto de cromtides
como da posio dos centrmeros. Assim para se fazer um estudo cariotpico de uma determinada
espcie necessrio que se obtenha um tecido com alto ndice mittico para se conseguir um bom
nmero de metfases.
Na caracterizao cromossmica, a princpio as caractersticas mais evidentes do caritipo so a posio
do centrmero, o nmero e o tamanho dos cromossomos. O nmero cromossmico dentro de uma
espcie geralmente constante. Entre espcies diferentes h freqentemente uma variao muito
grande. Contudo possvel haver um mesmo nmero entre espcies diferentes. O tamanho mdio dos
cromossomos na metfase, na maioria das espcies, de aproximadamente 5 a 6 m. De acordo com a
posio do centrmero os cromossomos podem ser classificados em: metacntricos, submetacntricos,
acrocntricos e telocntricos.
Com o avano nos estudos dos cromossomos humanos e com o acmulo de novos dados, houve a
necessidade de se padronizar a representao cariotpica humana. No I Congresso Internacional de
Gentica Humana realizado em Denver (1960), os cromossomos autossmicos humanos foram
classificados em ordem decrescente de tamanho, sendo numerados de 1 a 22. O 23 par corresponderia
aos cromossomos sexuais (XX ou XY). Em 1961, Patau props que mantendo-se a ordem de tamanho e
levando-se em considerao a forma dos cromossomos, estes fossem distribudos em 7 grupos,
identificados pelas letras de A G.
4. Procedimento
Grupo A : Grupo B:
Grupo C:
Grupo D : Grupo E:
Grupo F : Grupo G:
1- Introduo
Antes de 1900, a administrao de sangue com o intuito de salvar vidas humanas era feita de uma
maneira aleatria e, na maioria das vezes resultava em insucessos. Somente a partir de 1900, quando
Landsteiner descobriu os grupos sangneos do sistema ABO que os acidentes ps-transfusionais
puderam ser interpretados como conseqncia da interao entre as hemcias do doador e de anticorpos
do receptor. Hoje sabe-se que, na superfcie das hemcias, existem centenas de substancias, chamadas
de antgenos, capazes de induzir a resposta imune em indivduos da mesma ou de outras espcies.
2. Objetivos: aprender a identificar os indivduos com relao aos grupos sangneos ABO e Rh.
3. Materiais:
- lancetas esterilizadas
- laminas de microscopia
- anticorpos (anti-soro) Anti-A, Anti-B e Anti-Rh (Anti-D)
- lcool iodado
- algodo
4. Procedimento
5. Resultados
( Responda:
b- possvel afirmar que o alelo IA se comporta como co-dominante em relao ao alelo IB (e vice-versa)
e que ambos se comportam como dominantes em relao ao alelo i? Neste exemplo, o que pode
significar ser dominante, co-dominante ou recessivo?