INTRODUCCIN
2
Las aplicaciones medicinales de los ingredientes activos de
Psidium guajava L., son: los flavonoides, carotenoides y terpenoides; que se
emplean en la medicina herbolaria para combatir diferentes enfermedades
como antibacteriano, antisptico, astringente, antidisentrico. A los flavonoides
se le atribuye la propiedad antibacteriana. Con esta investigacin se requiere
averiguar Cul es la efectividad del extracto etanlico de la hoja de guayaba
(Psidium guajava L.), en el control de los agentes etiolgicos de la mastitis en
el Alto Huallaga?. Por el alto contenido de flavonoides el extracto etanlico de
las hojas maduras de guayaba (Psidium guajava L.), produce alta mortalidad de
los agentes etiolgicos de la mastitis (Staphylococcus aureus, Streptococcus
agalactiae, Escherichia coli).
Objetivos:
II.
2.1.
REVISIN DE LITERATURA
Generalidades de la mastitis
Streptococcus
agalactiae,
Staphylococcus
aureus,
uberis,
Escherichia
coli,
Enterococcus
faecalis,
Patgenos
Oportunistas,
Staphylococcus
hycus,
Staphylococcus
4
2.1.2. Epidemiologa
5
2.1.3. Patogenia
pezn
daado
puede
permanecer
parcialmente
7
movindose entre el tejido secretor de leche daado. Los fluidos,
minerales y factores de coagulacin tambin se mueven dentro del
rea infectada. La leche coagulada tambin puede cerrar
conductos
y,
en
efecto,
aislar
las
regiones
infectadas
(INFOCARNE, 2006).
una
destruccin
completa
de
las
estructuras
2.1.5. Diagnstico
9
pruebas especiales, a fin de confirmar la presencia de un proceso
inflamatorio (SCARAMELLI y GONZLEZ, 2000).
C. Cultivo Microbiolgico.
10
pueden
obtenerse
en
cualquier
momento,
pero
se
11
2.1.7. Tratamiento
La forma clnica aguda debe ser tratada con antibitico del tipo
de la penicilina, estreptomicina, vicarpen o espiromicina UNIMAST,
aplicado por va intramuscular y repetir la aplicacin a las 24 horas. Segn
su gravedad por tres a cuatro das seguidos, debe hacerse nfasis en el
aseo y vaciado previo de cada cuarto, antes del tratamiento. En la forma
crnica inyectar intramamariamente durante 3 das seguidos oxitetraciclina,
vicarpen, panamicina L.A o UNIMAST en dosis de 10 ml y secar el cuarto
afectado. Si la vaca sufre de fiebre, es necesario aplicar en dosis altas
vicarpen, panamicina L.A u oxitetraciclina asociada con antiinflamatorio
antiprostaglandnico como el fadyne A4 va intramuscular, durante 2 das
(CEBA, 1998).
12
2.2.
2.2.1.
Taxonoma
2.2.2.
Distribucin y origen
13
Psidium guajava L., tiene su origen en Mesoamrica. Fue
propagada por los espaoles y portugueses a todos los trpicos del mundo
donde se ha naturalizado con ayuda de los pjaros. Actualmente se
extiende desde Mxico y Centroamrica, hasta Sudamrica, en especfico
Brasil y Per, en las Antillas y el sur de Florida. Su rea ecolgica se
encuentra en la franja paralela al Ecuador, con lmites que no van ms all
de los 30 de cada hemisferio. Siglos atrs fue llevada a frica, Asia y la
India y actualmente se le encuentra en ms de 50 pases con clima tropical.
En Hawai, la guayaba crece en franjas desrticas con precipitaciones
menores a 250 mm (RODRGUEZ et al., 1991).
2.2.3.
Habitad
14
de 4.5 a 9.4), Se presenta principalmente en suelos con problemas de
drenaje, tanto de origen calizo como metamrfico e gneo (RODRGUEZ et
al., 1991).
2.3.
2.3.1. Farmacologa
15
80 cras porcinas entre las edades de 7 - 33 das y con un peso entre 2 5
kg dividido en 6 grupos; estando afectadas por colibacilosis y candidiasis.
Estas fueron sometidos a diferentes tratamientos con antibioterapia por va
parenteral y medicina tradicional (tintura de guayaba y manzanilla) por va
oral, obtenindose la recuperacin del 87.5% contra la cndida y el 75.0%
contra la E. coli.
16
La actividad antibacteriana se atribuye a los flavonoides (ECHEMENDA Y
MORN, 2004).
2.3.3. Farmacognosia
17
hay flavonoides como quercetina, aviculatina y guaijaverina a los que se les
atribuye el efecto antimicrobiano (LUTTERODIT, 1992).
2.4.
constitutivas
periplsmicas.
Tambin
hay
enzimas
18
enzimtico amplio, comn y eficiente de resistencia frecuentemente
producida por bacterias gram negativas (LEZ, 1998).
que
excluyen
el
antibitico
por
tamao
molecular;
19
En este mecanismo de resistencia bacteriana se modifican
algunos sitios especficos de la anatoma celular, como pared celular. De
esta manera la modificacin de enzimas catalizadoras en la produccin de
proteoglicanos celulares, conferirn resistencia al -lactmicos dado que es
esta enzima su sitio de accin. Respecto a las dems estructuras
ribosomales encontramos modificaciones a nivel de mltiples subunidades
como 30s, 50s. Sitios de accin de aminoglucsidos, lincosamidas, y
tetraciclinas. El mecanismo de resistencia (ribosomal) a gentamicina,
tobramicina y amikacina es poco frecuente y consiste en la mutacin del
pptido 12s de la subunidad 30s (GOLD y MOELLERING, 1996).
20
III.
3.1.
MATERIALES Y MTODOS
21
El presente trabajo de investigacin tuvo una duracin de 3 meses;
agosto, septiembre y octubre del 2008.
3.2.
Tipo de investigacin
3.3.
Poblacin y muestra
3.4.
Cepas bacterianas
22
mastitis clnica y subclnica, siendo las bacterias: Staphylococcus aureus,
Streptococcus agalactiae y Escherichia coli.
3.5.
Medios de cultivo.
Controles.
3.7.
Material vegetal
23
seleccionadas por su ubicacin en la rama: las ms cercanas al tallo, por su
coloracin verde oscura, por su sanidad fisiolgica e integridad de la hoja.
3.8.
3.9.
24
crecimiento en csped con una alta concentracin de bacteria/ml. Luego de
la inoculacin en el medio, se coloc 6 perforaciones dobles de papel filtro
de 6 mm de dimetro, donde se verti las disoluciones del extracto etanlico
a evaluar, igual fue para los controles negativos; los discos de sensibilidad
para Los controles positivos fueron adquiridos del laboratorio clnico UNAS.
Las placas con dimetro de 12 cm fueron incubadas a 37 oC durante 24
horas y despus fueron evaluados los resultados mediante la lectura en
milmetros del dimetro del halo de inhibicin del crecimiento del
microorganismo y el clculo del porcentaje del efecto inhibitorio relativo
respecto al control positivo, se realiz con la formula siguiente, (MARTNEZ;
MOLINA y BOUCOURT, 1997).
3.11. Tratamientos
25
Yij = + Ti + Eij
Donde:
Yij = Observacin del j-simo cultivo, en la i-sima dilucin
= Media poblacional
Ti = Efecto de la i- sima dilucin
Eij = Error experimental
Se utiliz la prueba de comparacion media de cuadrados minimos y
regresin cuadrtica para evaluar la significancia de las diferencias entre los
tratamientos.
26
Staphylococcus aureus
Streptococcus agalactiae
Escherichia coli.
Resistencia bacteriana
IV.
4.1.
RESULTADOS
extracto etanlico de las hojas del Psidium guajava L., aparecen en el Cuadro
1. Como puede apreciarse, se evidencia una respuesta de inhibicin en todos
los casos con Staphylococcus aureus, se obtuvo hasta una efectividad del 53%
respecto al control positivo con la concentracin 30 y 40%, en cuanto a la
respuesta de inhibicin para Streptococcus agalactiae fue mayor, se obtuvo
hasta una efectividad del 83% respecto al control positivo con la concentracin
27
30 y 40%. Y en relacin con la bacteria gram negativa, se apreci una carencia
total de actividad inhibitoria con todas las concentraciones evaluadas.
Cuadro 1.
microorganism
control
10
20
30
40
(+)1
A
B
0
0
0
0
0
0
0
0
23
100
S. aureus
A
B
7
47
7
47
8
53
8
53
15
100
S. agalactiae
A
B
6
63
7.3
76
8
83
8
83
9.6
100
o
E. coli
Disoluciones
Estreptomicina (10 mg/ml para las bacterias gram positivas) y levofloxacina (4 mg/mL para E coli).
28
4.2.
29
Cuadro 2.
X 1
Microorganismo
Disoluciones
s
E. coli
S. aureus
S. agalactiae
7.4
7.3
10
20
30
40
1a
6.93e
8g h i
1a b
6.93e f
8.78666667j
1a b c
7.35e f g
9.16j k
1a b c d
7.35e f g h
9.16666667j k
7.2
7.1
Mortalidad
S. aureus
Linear (S. aureus)
6.9
6.8
6.7
5 10 15 20 25 30 35 40 45
concentraciones
Figura 1.
30
9.4
9.2
9
8.8
8.6
S. agalactiae
8.4
Polynomial (S.
agalactiae)
8.2
8
7.8
7.6
7.4
5
Figura 2.
10
15
20
25
30
35
40
45
31
V.
5.1.
DISCUSIN
32
mutacin en un gen cromosmico y por introduccin de un plsmido R de
resistencia (LEZ, 1998).
5.2.
33
En cuanto al Streptococcus agalactiae se presencio una
respuesta inhibitoria del 85% con la concentracin 35.84%, siendo muy
eficiente en el control de este microorganismo muy similar a lo encontrado
en un experimento, donde se evaluo un extracto metanlico de Verbesina
encelioides; hallando buenos resultados frente a gram positivas (TORIBIO et
al., 2005). Ademas, una efectividad del 85% con respecto al control positivo,
nos
muestra
una
buena
fuente
como
producto
potencial
como
VI.
CONCLUSIN
34
poder antibacteriana de 85% respecto al control positivo y frente a E. coli el
extracto carece de actividad antibacteriana.
VII.
RECOMENDACIONES
35
mastitis, en el Alto Huallaga, aplicando in vivo, con la mejor disolucin obtenida
que fue el 30%.
VIII.
ABSTRACT
36
EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF LEAVES OF GUAVA (PSIDIUM
GUAJAVA L.) IN THE CONTROL OF THE ETIOLOGIC AGENT OF MASTITIS,
IN THE ALTO HUALLAGA
37
IX.
BIBLIOGRAFA
38
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completa/0,1421,SCID%253D7798%2526ISID%253D414,00.html,
articulo 26 enero 2009).
41
X.
ANEXOS
42
Cuadro 3.
Microorganism
Repeticiones
Diluciones
o
E. coli
S. aureus
S. agalactiae
Cuadro 4.
(-)
(+)
10%
20%
30%
40%
(-)
(+)
10%
20%
30%
40%
(-)
(+)
10%
20%
30%
40%
0
24
0
0
0
0
0
14
7
7
8
8
0
9
6
7
8
8
0
22
0
0
0
0
0
15
7
7
8
8
0
10
6
8
8
9
0
0
0
0
0
16
7
7
8
8
0
10
6
7
8
7
Promedio
0
23
0
0
0
0
0
15
7
7
8
8
0
9 .6
6
7.3
8
8
Microorganismo
Diluciones
E. coli
10%
20%
Repeticiones
x
y
z
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
Promedio
1.00000000
1.00000000
43
30%
40%
10%
20%
30%
40%
10%
20%
30%
40%
S. aureus
S. agalactiae
Cuadro 5.
1.00
1.00
6.93
6.93
7.35
7.35
8.00
8.60
9.16
8.60
1.00
1.00
6.93
6.93
7.35
7.35
8.00
8.60
9.16
9.16
1.00
1.00
6.93
6.93
7.35
7.35
8.00
9.16
9.16
9.74
1.00000000
1.00000000
6.93000000
6.93000000
7.35000000
7.35000000
8.00000000
8.78666667
9.16000000
9.16666667
F. V
Modelo
Error
Total correcto
G.L
3
8
11
S.C
2.69130000
0.00000000
2.69130000
C.M
0.89710000
0.00000000
F -Valor Pr > F
Infin
<.0001
Cuadro 6.
i/j
1
2
3
4
1
1.0000
0.0120
0.0120
2
1.0000
0.0120
0.0120
Conclusin
1
2
3
4
a
a b
a b c
a b c d
3
0.0120
0.0120
1.0000
4
0.0120
0.0120
1.0000
44
Cuadro 7.
F. V
G.L
A
ERROR
Total correcto
3
8
11
S.C
2.69130000
0.00000000
2.69130000
C.M
0.89710000
0.00000000
F -Valor
Pr > F
Infin
<.0001
Cuadro 8.
i/j
1
2
3
4
2
<.0001
<.0001
<.0001
<.0001
0.0236
0.0215
3
<.0001
0.0236
4
<.0001
0.021
0.9659
0.9659
Conclusin
1
2
3
4
a
b
b c
b c d
45
Y 6.385 0.1362 X 0.0019 X 2
Y 0.1362 2 0.0019 X
Y 0.1362 0.0038 X
0.1362 0.0038 X
0.1362
0.0038
X 35.84 %
X