47940

Mdulos
4, 5, 6 e 7
Andrea Thompson Da Poian

Debora Foguel
Marlvia Dansa Petretski
Olga Lima Tavares Machado
Bioqumica II
Volume
2 edio
Bioqumica II
Volume 2 - Mdulos 4, 5, 6 e 7
2a edio

Debora Foguel
Apoio:
Fundao Cecierj / Consrcio Cederj

Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001
Tel.: (21) 2299-4565 Fax: (21) 2568-0725
Presidente
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Coordenao do Curso de Biologia
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UFRJ - Masako Oya Masuda
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Material Didtico
Departamento de Produo
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Debora Foguel
EDITORA
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COORDENAO E REVISO
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DESIGN INSTRUCIONAL E REVISO
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COORDENAO DE
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eletrnico, mecnico, por fotocpia e outros, sem a prvia autorizao, por escrito, da Fundao.
D111b
Da Poian, Andrea Thompson.

Bioqumica II. v. 2 / Andrea Thompson Da Poian. -- 2.ed.
Rio de Janeiro : Fundao CECIERJ, 2007.
270p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-89200-46-9
1. Respirao celular. 2. Ciclo de Krebs. 3. Metabolismo de aminocidos. 4. Uria. 5.
Metabolismo de carboidratos. 6. Degradao. Sintese de cidos. 7. Glicose. 8. Biossintese.
9. Insulina. 10. Glicocorticides. I. Foguel, Debora. II. Petretski, Marlvia Dansa. III.
Machado, Olga Tavares. IV. Ttulo.
CDD: 572
2007/2
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Governo do Estado do Rio de Janeiro
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Bioqumica II
SUMRIO
Volume 2 - Mdulos 4, 5, 6 e 7
Mdulo 4
Aula 12 - Respirao celular ____________________________________ 7
Aula 13 - Ciclo de Krebs - Parte 1 ______________________________ 17
Aula 14 - Ciclo de Krebs - Parte 2 ______________________________ 29
Aula 15 - Metabolismo de carboidratos I _________________________ 51
Aula 16 - Metabolismo de carboidratos II ________________________ 65
Mdulo 5
Aula 17 - A oxidao dos aminocidos e a produo de uria _________ 83
Aula 18 - Ciclo da uria______________________________________ 95
Aula 19 - Metabolismo de aminocidos ________________________ 103
Mdulo 6
Aulas 20 / 21 - Degradao de lipdeos _______________________ 115
Aulas 22 / 23 - Sntese de cidos graxos _______________________ 135
Mdulo 7
Aula 24 - Via das pentoses-fosfato ____________________________ 149
Aula 25 - Degradao do glicognio ___________________________ 159
Aula 26 - Biossntese do glicognio ___________________________ 167
Aula 27 - Regulao do metabolismo do glicognio _______________ 175
Aula 28 - Introduo gliconeognese _________________________ 187
Aula 29 - A via gliconeognica _______________________________ 199
Aula 30 - Regulao da gliconeognese ________________________ 211
Aula 31 - Introduo aos hormnios ___________________________ 223
Aula 32 - Glucagon e adrenalina _____________________________ 235
Aula 33 - Insulina e glicocorticides ___________________________ 249
Gabarito _______________________________________________ 265
AULA
Respirao celular
12
BIOQUMICA II | Respirao celular
DA ANTIGUIDADE AO INCIO DA MODERNIDADE

A Qumica da Antiguidade essencialmente uma tcnica:
fabricao de cores, de bebidas fermentadas, de preparao de metais
etc. Alguns produtos, como a cal e o enxofre, j eram conhecidos. Nessa
poca, os homens assumiam que a natureza era composta por quatro
elementos fundamentais: fogo, ar, terra e gua (os quatro elementos
de Aristteles); estes quatro elementos estavam associados a quatro
qualidades: calor, frio, secura e umidade.
No fim da Antiguidade surge a Alquimia (sculo IX). O grande
Figura 12.1: Smbolo
alqumico. Uma cobra
devorando a prpria
cauda. O crculo formado simboliza o
infinito.
objetivo dos alquimistas era a busca do ouro, a transmutao dos

metais. A interpretao das reaes qumicas acontecia atravs de um
pensamento mgico. Apesar do seu misticismo, a Alquimia teve um
papel central no progresso da Qumica.
Figura 12.2: Um laboratrio alqumico.
A vontade de experimentar se acentua em meados do sculo XVII.

A noo de cido (chamado spiritus salis por Livabius) um pouco mais
bem definida por Robert Boyle. O antagonismo entre cidos e bases
mais bem estudado. A existncia dos gases revelada (chamado spiritus
sylvestris ou esprito indomvel por Van Helmont). Torricelli e Pascal
demonstram a existncia do vcuo.
Os qumicos dessa poca comearam a duvidar se as substncias
seriam compostas apenas pelos quatro elementos e tentaram explicar por
que quando um corpo queimava suas propriedades fsicas e qumicas
se alteravam.
8 CEDERJ
12 MDULO 4
AULA
Surgiu, ento, em 1760, a Teoria do Flogstico ou Princpio do

Fogo, postulada por Georg Ernst Sthal, que unificava o pensamento da
poca. Esta teoria propunha que todo corpo suscetvel combusto
contm um princpio de inflamabilidade (flogstico) que era liberado
durante a queima.
Assim, o flogstico existia no s na matria inanimada como
tambm nos seres vivos. Neste caso, o flogstico ou alma da matria
seria liberado durante a respirao no decorrer da vida, levando ao
envelhecimento.
TERRA (Pobre em flogstico)
METAL (Rico em flogstico)
FOGO (Flogiston)
Figura 12.3: Representao resumida da Teoria do Flogstico. A Terra
era considerada um elemento pobre em flogstico, enquanto o metal
era um elemento rico em flogstico.
Outra verdade da poca era a concepo de que o ar era nico.

Contudo, j se faziam referncias quanto qualidade do ar, atribuindo-se
caractersticas de ar bom (deflogisticado) e ar ruim (flogisticado), encontrados
nas montanhas e em ambientes confinados, respectivamente.
CEDERJ 9
LAVOISIER
Nesse contexto, o francs, economista e servidor pblico, Antoine
Laurent Lavoisier, iniciou, como hobby, seus estudos na rea da Chymica.
Tido como conservador e metdico, introduziu mtodos de trabalho
que lanaram as bases para a qumica moderna. Graas ao seu poder
econmico, pde montar um laboratrio, com instrumentos de preciso
bastante sofisticados para a poca e, at ento, nunca utilizados em
pesquisa.
Lavoisier, interessado em entender os mecanismos da combusto
de diferentes substncias, realizou diversos experimentos, entre os quais
um chamou particularmente sua ateno, conforme o enunciado que se
segue:
Por volta de oito dias atrs, eu descobri que o enxofre, ao ser
queimado, em vez de perder peso, ao contrrio, ganha peso; o
mesmo acontece com o fsforo; este aumento de peso se deve a
uma prodigiosa quantidade de ar que fixado durante a combusto
e se combina com os vapores.
Esta descoberta, que eu tenho estabelecido por experimentos que

eu considero como decisivos, tem me levado a pensar que o que
observado na combusto do enxofre e fsforo pode acontecer
no caso de todas as substncias que ganham peso por combusto
e calcinao; e eu estou convencido de que o aumento no peso de
calxes metlicos devido mesma causa.
Nota selada depositada na Secretaria da Academia Francesa
em 1 de novembro de 1772.
Para saber mais, acesse:

Teoria do Flogstico - http://www.hcc.hawaii.edu/hccinfo/instruct/
div5/sci/sci122/atomic/skepchem/phloggen.html
Lavoisier: Principais contribuies para a Cincia Moderna - http:
//www.lucknow.com/horus/guide/ec109.html#ec1092
Alquimia - http://143.107.237.20/~edsonro/index.htm
10 CEDERJ
Figura 12.4: Antoine Laurent

Lavoisier, cientista francs
considerado o pai da qumica
moderna. Lavoisier foi guilhotinado durante a Revoluo
Francesa.
Para saber mais consulte:
http://scienceworld.
wolfram.com/biography/
lavoisier.html
obtidos, pense sobre o que esses resultados indicam em relao Teoria

do Flogstico.
Intrigado com a Teoria do Flogstico, Lavoisier resolve estudla mais profundamente. Realiza experimentos com velas acesas e
camundongos confinados em campnulas separadas e hermeticamente
fechadas. Observa que os camundongos em pouco tempo morriam e que
as velas rapidamente se apagavam.
Figura 12.5: Experimento inicial de Lavoisier. Campnulas so cubas

de vidro que no deixam passar ar do meio externo para o ambiente
onde esto a vela e o rato.
Pense
sobre isso!
A que concluses voc acredita que Lavoisier deve ter chegado?

Intrigado com a funo qumica do ar ruim, Lavoisier
convidado para participar de uma Reunio Anual da Academia de
Cincias da Frana. Durante o encontro com o professor e presbtero
ingls Joseph Priestley, ele ficou bastante interessado nos experimentos
do colega, que apresentamos a seguir.
CEDERJ 11
12 MDULO 4
Conhecendo o contexto em que os resultados de Lavoisier foram
AULA
Pense
sobre isso!
Experimentos de Priestley
1. Calcinao
Hg
metal de
O2
2HgO
xido de
oxignio
mercrio
mercrio
2. Decomposio do xido
2HgO
2Hg
xido de
metal de
mercrio
mercrio
O2
oxignio
3. Reduo com adio de carvo

(tambm chamada de reduo com phogistoal)
2HgO
2Hg
xido de
carvo
metal de
dixido de carbono
mercrio
(carbono)
mercrio
ou ar fixado
Smbolo utilizado
para representar
aquecimento
brando.
12 CEDERJ
Smbolo utilizado
para representar
aquecimento
intenso.
CO2
12 MDULO 4
O que voc faria se fosse Lavoisier?

Paralelamente s experincias de caracterizao do ar bom e do
ar ruim, Lavoisier observou que a queima de velas de tamanhos iguais
originava velas menores e de tamanhos diferentes quando aprisionadas
em campnulas de dimenses variadas.
Esse resultado despertou no cientista o interesse em relacionar o
tamanho da vela com a liberao do flogiston. Assim, percebeu que o
critrio de pesar a vela poderia ser de grande utilidade.
Com balana de alta preciso, pde realizar diversos experimentos
de medidas de peso e obteve a seguinte tabela:
Tabela 12.1: Resultados do peso do sistema vela + ar + campnula antes e aps a
queima da vela.
Peso antes da queima
Peso depois da queima
CONJUNTO
VELA + AR*
< Y (perde peso)
CAMPNULA
> W (ganha peso)
* ar antes = deflogisticado; ar depois = flogisticado

Pense
sobre isso!
Que fenmeno deve estar ocorrendo?

A partir desse resultado, Lavoisier formula a seguinte reao:
matria orgnica + ar respirvel
CO2 + gua + calor
Lavoisier, dessa forma, postula que Na natureza nada se cria, nada

se perde, tudo se transforma ou a energia no pode ser criada nem
destruda, a vida se mantm graas transformao de energia.
Posteriormente, esta idia firmada cientificamente como a Teoria
da Conservao das Massas.
Nessa poca, Lavoisier trabalha com seu aplicado aluno La Place.
Nos meses que se seguiram, ambos dedicaram-se a comprovar a idia
de que a combusto da vela e a respirao eram na realidade o mesmo
fenmeno.
Pense
sobre isso!
Considerando a reao descrita acima, que componente faltava ser

verificado para que Lavoisier e La Place resolvessem esse problema?
CEDERJ 13
AULA
Pense
sobre isso!
Aps diversas tentativas de observar o calor na forma de luz nos

rgos respiratrios de camundongos e moribundos, Lavoisier percebe
que o calor liberado pela respirao no poderia ser medido com os
aparelhos que possua, e resolve construir o equipamento abaixo:
1
2
3
Figura 12.6: Calormetro de Lavoisier e La Place. O aparelho apresenta trs cmaras: a mais interna (1) a cmara que abriga a vela ou a cobaia; a do meio (2)
preenchida por gelo e contm uma sada (a) por onde escoa o gelo derretido pelo
calor liberado pela queima ou pela respirao; a cmara mais externa (3), tambm
preenchida por gelo e apresenta uma sada (b) para escoar o gelo derretido.
Este o calormetro de gelo de Lavoisier e La Place (Figura 12.6);

aparelho utilizado para obter medidas quantitativas do calor produzido
durante a queima de uma vela e da respirao de uma cobaia (geralmente
utilizavam porquinho-da-ndia).
Aps realizar diversos experimentos com tempos de queima e de
respirao fixos, os cientistas obtiveram o seguinte resultado (Tabela 12.2):
Tabela 12.2: Relao entre produo de CO2 e peso derretido aps a queima de
matria orgnica e a respirao de uma cobaia.
14 CEDERJ
Produo de CO2
Gelo derretido
Gelo/ CO2
Matria orgnica
112,35g
2998g
26,69g
Cobaia
11,87g
330,30g
27,80g
em relao combusto e respirao?
12 MDULO 4
Pense
sobre isso!
AULA
Esses resultados foram capazes de esclarecer a dvida que restava

Descreva sua opinio sobre os dois fenmenos, baseada nos
resultados mostrados at aqui.
Esta aula foi baseada no material organizado pelo Departamento de Bioqumica Mdica, CCS, UFRJ.
RESUMO
Nesta aula voc acompanhou como Lavoisier chegou equao geral da respirao
celular, aceita at hoje (matria orgnica + ar respirvel
CO2 + gua + calor).
INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA

Na prxima aula, ns continuamos a histria. Falaremos mais especificamente
do ciclo do cido ctrico e como ele foi sendo elucidado. Com as informaes
apresentadas na Aula 13, voc mesmo construir o ciclo, antes de ser apresentado
a ele, o que ocorrer na Aula 14. Foi o que Krebs fez e, por isso, o ciclo do cido
ctrico chamado ciclo de Krebs. Ento, vamos l...
CEDERJ 15
AULA
Ciclo de Krebs - Parte 1
13
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
INTRODUO
Como vimos na aula anterior, o resultado da genialidade de Lavoisier, somada

ao trabalho de Laplace e Priestley, resultou na seguinte equao geral da
respirao celular:
Matria orgnica + O2
CO2 + H2O + ENERGIA
Mas a histria no parou por a. A partir de agora voc conhecer outros

personagens da histria da Bioqumica. Eles contriburam para a descoberta
dos passos da respirao celular.
A HISTRIA DO CICLO DO CIDO CTRICO

Comecemos com O TTO W ARBURG , um eminente bioqumico
alemo durante a primeira metade do sculo XX. Filho de militar da
mais alta patente do exrcito, era possuidor de uma disciplina rgida e
personalidade forte. Alguns relatos contam que, para dar continuidade
a seus experimentos no perodo recessivo da Primeira Grande Guerra,
dividia boa parte de seus ganhos com a alimentao de suas cobaias.
Estava interessado em entender as etapas da equao de Lavoisier,
OTTO HEINRICH
WARBURG
Prmio Nobel de
Fisiologia e Medicina
em 1931, por suas
descobertas a respeito
da natureza e do
modo de ao das
enzimas respiratrias.
em diferentes tecidos. Para esta finalidade, desenvolveu, por volta de

1918, um mtodo manomtrico (baseado em medidas de presso) para
medir o consumo de oxignio e a produo de CO2. Este aparelho foi,
mais tarde, batizado de respirmetro de Warburg, em sua homenagem
(Figura 13.1).
O respirmetro de Warburg teve ampla aplicao na Bioqumica e,
ainda hoje, utilizado na determinao de CO2 produzido por diferentes
preparaes biolgicas.
Em 1935, Albert Szent-Gyrgyi, um pesquisador hngaro,
comeou a publicar uma srie de importantes trabalhos sobre a
respirao de suspenses de msculo de peito de pombo. Sendo um
msculo muito solicitado no vo, ele requer muita energia e possui uma
capacidade oxidante excepcionalmente alta. Szent-Gyrgyi estudou, em
particular, o comportamento metablico dos cidos dicarboxlicos C4
(cidos com quatro carbonos que possuem dois grupos carboxlicos). Ele
tambm estava interessado em estabelecer a conexo entre fermentao
e oxidao, como fica claro na seguinte passagem:
18 CEDERJ
13 MDULO 4
AULA
OXIDAO E FERMENTAO
Tomemos como exemplo a fermentao lctica em clulas
musculares. Neste processo, a molcula de hexose fragmentada
em duas molculas de cido lctico. Juntas, estas duas molculas
ALBERT SZENTGYRGYI
Nasceu em Budapeste.
Em 1937 recebeu
o Prmio Nobel
em Fisiologia e
Medicina por suas
descobertas na rea
dos processos de
combusto biolgica,
particularmente com
respeito vitamina C e
ao cido fumrico. Ele
no uma gracinha?
o meu favorito.
de cido lctico contm menos energia que a molcula de hexose

original. Esta pequena diferena de energia o ganho da clula.
Alternativamente a molcula de hexose pode ser submetida
combusto, gerando CO2 e H2O. No ltimo caso, grande
quantidade de energia livre desperdiada.
A fermentao o mais simples dos dois processos. Ao mesmo
tempo ele pouco econmico, pois a maior parte da energia da
molcula de hexose permanece nas molculas de cido lctico.
Por volta de 30 vezes mais energia liberada por oxidao.
Conseqentemente, a fermentao pode manter somente as formas
de vida mais simples. Nesse ponto, pode existir uma pequena dvida
de que a fermentao no somente o mais simples, mas tambm
o processo mais antigo, precedendo a oxidao na histria da vida.
O desenvolvimento de formas de vida mais complexas tornou-se
possvel somente depois que a oxidao pelo oxignio molecular foi
inventada pela natureza. Esta seqncia de eventos se reflete em
nossas clulas, nas quais ns encontramos oxidao e fermentao
intimamente misturadas e entrelaadas em um sistema produtor
de energia.
A ntima relao entre os dois processos tem ocupado muitos
bioqumicos, como Pasteur, a descobrir suas interdependncias
quantitativas, agora conhecidas como Reao de Pasteur. Pasteur
descobriu que existe algum tipo de equilbrio entre oxidao e
fermentao. Se a oxidao suprimida por remoo do oxignio,
a fermentao se inicia. Se ns promovemos outra vez a oxidao,
a fermentao cessa. O mecanismo desta relao tem sido um dos
mais atraentes quebra-cabeas da Bioqumica desde ento.
ALBERT VON SZENT-GYRGYI, Ph. D., M.D.

Professor de Qumica Orgnica e Biolgica,
Universidade de Szeged, Hungria.
CEDERJ 19
HANS ADOLF KREBS, um bioqumico alemo, testou os mesmos cidos

orgnicos que Szent-Gyrgyi (cidos dicarboxlicos C4) em fatias de
crtex de rim e obteve o seguinte resultado (veja a Tabela 13.1):
Tabela 13.1: Oxidao e formao de bicarbonato a partir de cidos orgnicos em

lminas de rins de porquinho-da-ndia.
Substrato adicionado
SIR HANS ADOLF

KREBS
Nasceu em
Hildesheim,
Alemanha. Prmio
Nobel de Fisiologia e
Medicina em 1953.
Consumo de O2
(mols/g de peso seco)
Bicarbonato formado
(mols/g de peso seco)
Sem adio
670
Acetato
1340
393
Succinato
1520
555
Fumarato
1290
705
Malato
1340
756
Piruvato
1070
318
Note que Krebs usou o respirmetro de Warburg e mediu tanto o

consumo de O2, pela diminuio da presso e conseqente deslocamento
da coluna do respirmetro, quanto a formao de CO2, pela medida da
!
O que sugere este
experimento?
quantidade de bicarbonato formada no poo central do respirmetro.

Desta forma, Krebs mostrou que qualquer um dos substratos utilizados
aumentava a taxa de respirao em relao ao controle (sem adio do
substrato). Como nos msculos de pombo de Szent-Gyrgyi, Krebs viu
que o rim tambm era capaz de respirar, utilizando como substratos
cidos dicarboxlicos de quatro carbonos (succinato, fumarato e malato),
alm de acetato (dois carbonos) e piruvato (trs carbonos).
Enquanto isso, no laboratrio de Warburg, aps um acidente
experimental com um de seus respirmetros, os tecidos de msculo foram
carbonizados e, por descuido do seu tcnico, o mesmo respirmetro foi
utilizado em um outro experimento. Qual no foi a surpresa de Otto
Warburg, quando constatou um grande aumento na respirao do tecido.
Anlises do material contido nas paredes do respirmetro mostraram
altos nveis de um composto orgnico associado ao ferro. Warburg
prosseguiu seus estudos com a inteno de identificar este fator, que
chamou Atmungsferment (enzima), pois, uma vez inativado, todo o
processo de respirao cessava.
20 CEDERJ
13 MDULO 4
Keilin, em 1925, que redescobriu uma substncia que ele denominou

cytochrome (CITOCROMO). Esta substncia, como o Atmungsferment,
CITOCROMOS
estava intimamente ligada aos processos oxidativos. Segundo Keilin, o
Os citocromos foram
primeiro descritos
como mio-hematina
e histo-hematina
por MacMunn. Essa
histria voc ver
com mais detalhes na
Aula 15.
citocromo era diretamente oxidado na sua forma divalente para a forma

trivalente (frrica). Os dois sistemas, Atmungsferment e Cytochrome,
foram denominados sistemas W.K. (sistema Warburg-Keilin).
Szent-Gyrgyi sabia do envolvimento do O2 nos processos
oxidativos e ficou intrigado com o fato de que a oxidao do succinato
era especialmente bloqueada por um cido dicarboxlico (C3), o cido
malnico. Resolveu, ento, investigar o que aconteceria com a respirao
em duas situaes: 1) ao bloquear a oxidao do succinato; 2) ao incluir
pequenas quantidades de fumarato, normalmente presente no tecido.
Assim Szent-Gyrgyi descreveu seus resultados:
Os resultados foram surpreendentes. Pequenas quantidades de
malonato envenenam a respirao quase como o cianeto. cido
fumrico estimula fortemente a respirao. A respirao rapidamente
declinante dos tecidos in vitro pode ser mantida constante por
longos perodos pelo cido fumrico. Como Baumann & Stare tm
mostrado no Laboratrio de Keilin, igualmente alguns poucos de
fumarato ( = uma milionsima parte do grama) foram ativos.
Foram consumidos vrios anos de trabalho pesado para ajustar as
observaes contraditrias em uma teoria. A teoria esta: os cidos
dicarboxlicos C4 so uma ligao na cadeia respiratria entre o
alimento e o sistema W.K. Sua funo transferir o hidrognio
do alimento ao citocromo e reduzir por este hidrognio seu ferro
trivalente forma divalente. Falando mais precisamente, o citocromo
oxida dois tomos de hidrognio da molcula de cido succnico.
Pela perda de dois tomos de hidrognio, o cido succnico
convertido a cido fumrico. Estes dois tomos de H perdidos so
recolocados novamente por hidrognios oriundos do alimento. O
alimento, entretanto, no cede seus dois hidrognios imediatamente
ao cido fumrico. Ele cede seus 2 tomos de hidrognio para o
cido oxaloactico, que tambm um cido dicarboxlico (C4). Por
tomar 2H, o cido oxaloactico volta a cido mlico. cido mlico,
ento, cede seus dois hidrognios ao cido fumrico, e, assim, o
cido fumrico convertido a cido succnico. Este pode ser outra
vez oxidado por citocromo, enquanto o cido mlico, aps ceder
seus 2Hs, torna-se cido oxaloactico, que pode tomar hidrognio
do alimento novamente, e assim o jogo recomea, hidrognios
sendo transmitidos todo o tempo do alimento via oxaloactico
mlico fumrico succnico ao sistema W.K.
CEDERJ 21
AULA
A prxima etapa desse quebra-cabea foi resolvida por David
O resumo esquemtico da histria est a seguir:
Fermentao
cido lctico
HCOH
Esquema 13.1: Esse esquema geral voc j conhece.
Respirao
Esquema 13.2
!
Levando em conta o esquema proposto por Szent-Gyrgyi, que transformaes voc verifica em cada
etapa desta seqncia de reaes?
Qual o papel das trioses nos processos fermentativos e oxidativos propostos por Szent-Gyrgyi?
O que ocorreria nesta seqncia de reaes na presena e na ausncia de O2?
22 CEDERJ
13 MDULO 4
AULA
Chegamos ento ao primeiro esquema que tentava explicar como

ocorre a respirao celular (ver Esquema 13.2). O prximo passo foi a
observao de que a adio de pequenas quantidades de cidos orgnicos
ativava tremendamente essa via. Este efeito, chamado efeito cataltico, j
havia sido observado por Krebs durante a descoberta do ciclo da uria
(que voc conhecer na Aula 18).
A respeito da oxidao dos cidos orgnicos e o efeito cataltico
do cido succnico, Krebs escreveu:
Szent-Gyrgyi reportou experimentos em 1935 e 1936 que sugeriam
que o cido succnico e seus derivados cido fumrico, cido mlico
e cido oxaloactico cataliticamente promovem oxidao em
tecidos musculares. Provas conclusivas deste efeito cataltico foram
apresentadas por Stare & Baumann em dezembro de 1936. Estes
autores mostraram que pequenas quantidades destas substncias
eram suficientes para provocar um aumento na respirao e que o
aumento um mltiplo da quantidade de oxignio necessria para
a oxidao das substncias adicionadas. Alm disso, a substncia
adicionada no foi usada, mas pode ser subseqentemente
detectada no meio. Assim, no permanece nenhuma dvida de
que o cido succnico e substncias relacionadas podem atuar como
catalisadores na respirao.
Fonte: KREBS H. A.; CAMBRIDGE, M. A.; HAMBURG M. D.
The intermediate metabolism of carbohidrates.
!
De acordo com esta passagem, tal efeito cataltico exercido pelos cidos orgnicos C4 pode ser explicado
com a seqncia de reaes proposta por Szent-Gyrgyi?
A seqncia de reaes de Szent-Gyrgyi explica convenientemente a equao de Lavoisier?
EFEITO CATALTICO DO CIDO CTRICO

O passo seguinte foi a descoberta de que o cido ctrico tambm
atua como ativador cataltico (Krebs e Johnson, 1937). Adicionado ao
msculo em pequenas quantidades, ele acelera a oxidao de carboidratos
da mesma maneira que o cido succnico. A anlise experimental deste
efeito revelou no somente o mecanismo da ao cataltica do cido
ctrico, mas tambm do cido succnico e compostos relacionados. Em
adio, isto levou elucidao dos principais passos na degradao
oxidativa de carboidratos.
CEDERJ 23
O DESTINO DO CIDO CTRICO

O cido ctrico, por longo tempo, foi conhecido como sendo
facilmente oxidvel em tecidos vivos, embora os detalhes de seu
metabolismo intermedirio tenham permanecido obscuros at maro de
1937, quando Martius e Knoop descobriram que o cido -cetoglutrico
um produto da oxidao do cido ctrico.
O destino do cido no corpo j era bem conhecido. Esta substncia

tinha grande interesse fisiolgico, j que apareceu como um intermedirio
na degradao de cido glutmico, de prolina e de histidina. J se sabia
que ele forma, na oxidao, cido succnico e dixido de carbono.
24 CEDERJ
possvel passar do cido ctrico ao cido succnico, e esta reao pode

CIDO
MALNICO
Ou malonato um
inibidor da respirao
celular, no passo
de formao do
succinato no ciclo do
cido ctrico.
ser diretamente demonstrada se cido malnico adicionado. CIDO

MALNICO
inibe especificamente a oxidao do cido succnico, mas no
inibe a degradao do cido ctrico e cido -cetoglutrico.
!
Qual a relao entre tais reaes e a seqncia
de reaes de Szent-Gyrgyi?
Krebs sabia que a sntese de cido ctrico, a partir de cido

oxaloactico, era conduzida pela condensao com uma segunda
substncia, cuja natureza qumica no era ainda conhecida. Supunha-se
que a segunda substncia fosse derivada de um carboidrato e apostava-se
que seria o cido pirvico. A condensao desta segunda substncia com
o acido oxaloactico para formar cido ctrico foi formulada da seguinte
maneira por Krebs (veja reao a seguir):
PS. A nomenclatura das molculas apresentadas aquela utilizada nos trabalhos da poca.
CEDERJ 25
13 MDULO 4
AULA
Considerando a juno das duas reaes imediatamente anteriores,
Este esquema, ainda que suportado por evidncia experimental,

, em parte, hipottico e, por esta razo, vamos abster-nos da
discusso de detalhes; mas deve ser enfatizado que o efeito final,
que a sntese de cido ctrico na presena de cido oxaloactico,
um fato experimental.
Martius e Knoop
!
Baseado nos resultados mostrados acima e nas
citaes, proponha um esquema de reaes que
explique o efeito cataltico do cido ctrico e
do -cetoglutarato, integrando as trioses nesta
seqncia.
A SUBSEQENTE ELABORAO DO CICLO DOS CIDOS

TRICARBOXLICOS
O esquema bsico de 1937 tem resistido ao teste do tempo.
Existem evidentemente grandes vazios em relao ao mecanismo da
formao do citrato a partir de oxaloacetato e piruvato.
Citado em H. Krebs (1970) The history of the tricarboxylic acid

cycle. Perspect. Biol. Med. 14: 151-170
A soluo deste problema esperou pela descoberta da coenzima A

(CoA) por Lipmann, na dcada de 1940. No mesmo perodo, Ochoa e
Lynem mostraram que a acetil- coenzima A (acetil-CoA) o intermedirio
que reage com o oxaloacetato para formar citrato.
26 CEDERJ
13 MDULO 4
Alm disso, a coenzima A foi tambm encontrada como
AULA
participante na formao de succinato a partir de -cetoglutarato,

formando succinil coenzima A (succinil-CoA) como intermedirio.
!
Com base nessas informaes, construa o seu esquema representando o ciclo
do cido ctrico.
Se voc acompanhou o texto e conseguiu construir seu ciclo

com base nas informaes apresentadas, parabns. Isso no fcil. Se
voc no conseguiu, consulte os tutores de Bioqumica e discuta suas
dificuldades com eles. Ao chegar ao final desta aula, voc j conhece o
ciclo do cido ctrico ou grande parte dele. Neste caso, a prxima aula
ser apenas para detalhar o que voc j sabe. Nela voc ver cada reao,
o nome das enzimas, co-fatores e outros papis metablicos que o ciclo
apresenta. No esquea que os exerccios viro no final do mdulo.
RESUMO
Nesta aula ns vimos a histria do ciclo do cido ctrico, seus principais personagens
e as etapas iniciais de elucidao dessa via. A evoluo do conceito de Lavoisier
at chegar aos principais intermedirios e reaes do ciclo.
CEDERJ 27
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de:

Conhecer a origem da molcula de acetato,
na forma de acetil-CoA, a qual inicia o Ciclo
de Krebs.
Aprender a importncia das vitaminas
hidrossolveis como formadoras de
coenzimas, importantes para a atividade de
complexos multienzimticos.
Conhecer as reaes do Ciclo de Krebs.
Caracterizar as enzimas envolvidas nessas
reaes.
Identificar as etapas de conservao da
energia gerada durante as reaes do Ciclo
de Krebs.
Conhecer as vias de reposio de
componentes do ciclo.
AULA
Ciclo de Krebs - Parte 2
14
INTRODUO
Como voc viu na Aula 12 o ciclo do cido ctrico foi descoberto por Hans
Krebs e, portanto, tambm denominado de Ciclo de Krebs.
Voc viu nas Aulas 9 e 10 que algumas clulas obtm energia por processos
fermentativos em que a molcula de glicose quebrada na ausncia de
oxignio. Para a maioria das clulas eucariticas e para algumas bactrias, sob
condies aerbicas, seus combustveis orgnicos so transformados em CO2
mais gua, sendo a gliclise o primeiro estgio da degradao completa da
glicose. Aps esse estgio, voc viu que a molcula de piruvato poderia seguir
diversos caminhos metablicos; entre eles, podia ser convertida em etanol e em
lactato, se a clula estivesse na ausncia de oxignio. No entanto, a molcula
de piruvato pode tambm ser convertida a acetil-CoA. Na realidade, o grupo
acetil, na forma de acetil-CoA, um intermedirio comum ao metabolismo de
quase todos os compostos biolgicos. Ele pode ser formado a partir de glicdios,
lipdeos e protenas (veja a Figura 14.1).
Figura 14.1: Esquema de formao de acetil-CoA.
Lembre-se de que o metabolismo pode ser dividido em trs estgios. Voc

ver que o Ciclo de Krebs um desses estgios. No se preocupe ainda com
os nomes das molculas que aparecero no estgio 2 (Figura 14.2), ou seja,
no Ciclo de Krebs, pois sobre isso que falaremos nesta aula. O estgio 3 ser
estudado nas Aulas 15 e 16.
30 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
graxos
Figura 14.2: Estgios do metabolismo.
CEDERJ 31
A oxidao de grupos acetila um dos principais processos metablicos, e mais

de dois teros dos ATPs utilizados pelas clulas so produzidos como resultado
da transferncia de eltrons de grupos acetila para o oxignio molecular na
mitocndria.
Durante o metabolismo, os grupos acetila so ligados como tioster coenzima
A, um tiol que tem como funo transportar grupos acetil dentro da clula.
Qualquer que seja a fonte, grande parte da molcula de acetil convertida
em CO2 mais gua, mas qualquer excesso pode ser utilizado para a sntese de
cidos graxos, corpos cetnicos e colesterol.
A oxidao completa de acetil-CoA para CO2 e gua ocorre em uma srie de
reaes conhecidas como ciclo do cido ctrico, ciclo do cido tricarboxlico ou
Ciclo de Krebs. sobre essas transformaes que falaremos nesta aula, que
comea com a converso da molcula de piruvato em acetil-CoA e pela entrada
dos grupos acetil no Ciclo de Krebs. Ns ento analisaremos as reaes do Ciclo
de Krebs e as enzimas que as catalisam. Como alguns desses intermedirios
podem tambm ser usados por outras vias, ns falaremos de algumas vias de
reposio desses intermedirios.
PRODUO DE ACETATO FORMAO DA MOLCULA DE

ACETIL-COA
Em organismos aerbicos, glicose e outros acares, cidos
graxos e muitos aminocidos so oxidados em CO2 e gua via ciclo do
cido ctrico e cadeia respiratria. Antes de entrar no Ciclo de Krebs
os esqueletos dessas molculas so degradados aos grupos de acetil da
molcula de acetil-CoA, a forma por que o ciclo aceita a maioria do seu
combustvel.
Os aminocidos podem entrar no Ciclo de Krebs atravs de outros
intermedirios do Krebs, como veremos mais adiante.
A estrutura da coenzima A e o processo de formao da
molcula de acetil-CoA so mostrados na Figura 14.3. Essa coenzima
complexa abreviada como CoA ou CoASH. Ela composta por mercaptoetanolamina, pela vitamina cido pantotnico, pela adenosina
difosfato (ADP). A coenzima A existe na forma reduzida (CoASH) e atua
como transportadora de grupos acil.
32 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
- Mercaptoe
tanolamina
Coenzima A (CoA ou CoASH)
Figura 14.3: Estrutura da coenzima e formao da molcula de acetil-CoA.
Ns vamos inicialmente enfocar nossa ateno na molcula de

piruvato, derivado de glicose e de outros acares. Ela oxidada em acetilCoA pelo complexo enzimtico piruvato desidrogenase. Esse complexo
enzimtico est localizado exclusivamente na matriz mitocondrial. Est
presente em altas concentraes em tecidos como o msculo cardaco e
os rins. Nas condies fisiolgicas o Go muito negativo e portanto a
reao irreversvel.
A reao catalisada pelo complexo piruvato desidrogenase
esquematizada abaixo.
Piruvato + NAD + CoASH
piruvato desidrogenase
Acetil-CoA + CO2 + NADH + H +

(Go= - 8kcal\mol)
Esta reao uma descarboxilao oxidativa, um processo

irreversvel no qual o grupo carboxila removido do piruvato como
uma molcula de CO2 e os dois carbonos, remanescentes formam o
grupo acetil da molcula de acetil-CoA.
Como vimos, nessa reao ocorre a formao de uma molcula de
NADH. Os eltrons transportados por essa molcula sero transferidos
para o oxignio na cadeia transportadora de eltrons, levando formao
de ATP. Esse assunto voc estudar nas Aulas 14 e 15.
A desidrogenao combinada com a descarboxilao da molcula
de piruvato em acetil-CoA requer a ao seqencial de trs enzimas e
cinco coenzimas diferentes ou grupos prostticos, que so: 1) tiamina
pirofosfato (TPP); 2) flavino adenino dinucleotdeo (FAD); 3) coenzima
A (CoA); 4) nicotinamida adenina dinucleotdeo (NAD); 5) cido lipico.
Veja a Figura 14.4.
CEDERJ 33
Quatro vitaminas hidrossolveis diferentes so necessrias na

nutrio humana e so componentes vitais neste sistema. Essas vitaminas
so: 1) tiamina na TPP; 2) riboflavina no FAD; 3) niacina no NAD; 4)
pantotenato na CoA.
NAD e FAD so transportadoras de hidrognios, a tiamina tem um
papel importante na clivagem de ligaes adjacentes a grupos carbonila.
A coenzima A contm pantotenato, que possui um grupamento tiol
reativo. Esse grupamento crtico na formao de um tioster com
grupamentos acila. atravs dessa associao que os grupamentos
acila so transportados. A energia de hidrlise da ligao tioster
relativamente alta, permitindo a doao de grupamentos acila para
diversos compostos. Assim, podemos dizer que a molcula de coenzima
A associada com grupamentos acila atua como uma molcula ativada
para transferncia desses grupos.
O quinto co-fator da piruvato desidrogenase, o lipoato, possui
dois grupos tiis (SH) que so importantes na oxidao reversvel de uma
ponte de enxofre, semelhante quelas das cistenas em protenas.
Assim, o complexo piruvato desidrogenase contm trs enzimas, a
piruvato desidrogenase (E1), a diidrolipoil transacetilase (E2) a diidrolipoil
desidrogenase (E3). Cada uma delas est presente em mltiplas cpias.
A Figura 14.5 mostra esquematicamente como o complexo piruvato
desidrogenase conduz as cinco reaes consecutivas na descarboxilao
e desidrogenao da molcula de piruvato. Na etapa 1 o piruvato
descarboxilado e, na forma de aldedo, ligado ao grupamento hidroxila
da tiamina. Na etapa 2 o grupamento aldedo oxidado em acetato. Os
dois eltrons removidos nessa oxidao reduzem o grupamento SS de
um grupo lipoil na enzima E2 a dois grupamentos tiis (-SH). O acetato
produzido nessa reao de xido-reduo esterificado em um grupo SH
do lipoil e ento transesterificado em coenzima A para formar o acetilCoA (etapa 3). A energia de oxidao leva formao de um tioster
de alta energia do acetato. As reaes remanescentes catalisadas pelo
complexo piruvato desidrogenase (etapas 4 e 5) so de transferncias de
eltrons necessrias para regenerar a forma oxidada do grupo lipoil da
enzima E2 e assim preparar a enzima do complexo para um novo ciclo
de oxidao. Os eltrons removidos do grupo hidxil-etil derivado do
piruvato passa atravs do FAD para o NADH.
34 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Acetaldedo
ativado
Figura 14.4: Co-fatores do complexo piruvato desidrogenase.
CEDERJ 35
Figura 14.5: Representao do complexo piruvato desidrogenase e das etapas de descarboxilao da molcula
de piruvato.
36 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
AS REAES DO CICLO DE KREBS

Para comear a primeira volta do ciclo, a molcula de acetilCoA doa seu grupo acetil para um composto de quatro carbonos, o
oxaloacetato, para formar a molcula de citrato com seis carbonos.
Citrato ento transformado em isocitrato, uma molcula tambm com
seis carbonos. Essa molcula desidrogenada, com perda de CO2 para
produzir um composto com cinco carbonos, o -cetoglutarato. Essa
molcula perde CO2, produzindo um composto com quatro carbonos,
chamado succinato. O succinato ento convertido enzimaticamente, em
trs etapas, regenerando a molcula de oxaloacetato, a qual est pronta
para reagir novamente com outra molcula de acetil-CoA. Como voc
pde ver, duas molculas de CO2 foram formadas e sero eliminadas.
Uma molcula de oxaloacetato foi utilizada, mas foi regenerada ao final
do processo. Assim, em teoria, uma molcula de oxaloacetato poderia
ser utilizada infinitamente no ciclo; de fato, oxaloacetato est presente
nas clulas em baixssimas concentraes. Quatro das oito etapas desse
ciclo so oxidaes nas quais a energia de oxidao conservada na
forma das coenzimas reduzidas NADH e FADH2. Um resumo dessas
etapas apresentado na Figura 14.6.
succinil-CoA
Figura 14.6: Etapas do

Ciclo de Krebs.
CEDERJ 37
Embora o Ciclo de Krebs possua um papel fundamental nas vias

metablicas produtoras de energia, alguns intermedirios com quatro
e cinco carbonos podem ser utilizados como precursores de outras
molculas. Para repor compostos do ciclo, as clulas empregam reaes
anaplerticas (reposio) que sero apresentadas no final desta aula.
Agora, ns vamos examinar cada uma das oito etapas do ciclo com
maior detalhe, dando nfase s transformaes qumicas, observando as
etapas de oxidao com formao de CO2 e de coenzimas reduzidas.
Etapa 1 Formao do citrato

A primeira etapa ou reao do ciclo a condensao do acetil-CoA
com oxaloacetato para formar citrato, catalisada pela citrato sintase.
Nesta reao, o grupamento metil (CH3) do grupo acetil ligado ao grupo
carbonila do oxaloacetato, formando um intermedirio instvel, o citroil
CoA, que permanece ligado ao stio ativo da enzima. Esse intermedirio
rapidamente hidrolisado, liberando a coenzima A e uma molcula de
citrato. A hidrlise desse tioster de alta energia torna a reao altamente
exergnica. A grande variao de energia livre nesta reao essencial
para o funcionamento do ciclo, pois, como vimos anteriormente, a
concentrao de oxaloacetato muito baixa. A coenzima A liberada
nessa etapa reciclada para participar de outra reao de descarboxilao
oxidativa de uma molcula de piruvato. Veja a Figura 14.7:
Figura 14.7: Primeira etapa do Ciclo Reao de formao do citrato.
Etapa 2 Formao do isocitrato via cis-aconitato

O citrato contm um lcool tercirio que muito difcil de ser
oxidado, por isso essa molcula convertida no seu ismero, isocitrato,
pela enzima aconitase. Essa enzima catalisa a transformao reversvel
do citrato em isocitrato, que mais fcil de ser oxidado.
38 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
A reao envolve sucessiva desidratao e hidratao, atravs da

formao de um intermedirio, o cis-aconitato, que normalmente no
se dissocia do stio ativo da enzima.
Essa reao impulsionada no sentido de formao do isocitrato,
pois essa molcula constantemente consumida na etapa seguinte do
ciclo. Veja Figura 14.8.
Figura 14.8: Reao de formao do isocitrato.
Etapa 3 Oxidao do isocitrato a -cetoglutarato e CO2

Nesta etapa, a isocitrato desidrogenase catalisa a descarboxilao
oxidativa do isocitrato para formar -cetoglutarato. Existem duas
diferenas entre a piruvato desidrogenase e a isocitrato desidrogenase:
a primeira requer NAD como aceptor de eltrons e a segunda pode
utilizar tanto NAD como NADP; a piruvato desidrogenase, dependente
de NAD, ocorre somente na matriz mitocondrial, enquanto a isocitrato
desidrogenase ocorre na matriz e no citosol. Na matriz ela atende ao
Ciclo de Krebs e no citosol ela importante para regenerar a molcula
de NADPH, que essencial para as reaes redutivas anablicas. Veja
a Figura 14.9.
Figura 14.9: Reao de formao do -cetoglutarato.
CEDERJ 39
Etapa 4 Oxidao do -cetoglutarato a succinil-CoA e CO2

Nesta etapa, ocorre uma outra descarboxilao oxidativa, na
qual o -cetoglutarato convertido em succnil CoA e CO2, pela ao
do complexo -cetoglutarato desidrogenase. Nessa reao o NAD serve
como aceptor de eltrons e a coenzima A como um carreador do grupo
succinil. A energia de oxidao do -cetoglutarato conservada na
formao do tioster da molcula de succinil-CoA.
Essa reao semelhante reao catalisada pelo complexo
piruvato desidrogenase, tanto na estrutura quanto na funo. Ele inclui
enzimas e coenzimas homlogas s do complexo piruvato desidrogenase
(Figura 14.10).
Figura 14.10: Reao de formao do succinil-CoA.
Etapa 5 Converso do succnil-CoA a succinato fosforilao

em nvel de substrato
A molcula de succinil-CoA tem uma ligao tioster semelhante
da molcula de acetil-CoA, ou seja, uma ligao com uma forte energia
livre padro de hidrlise (Go = -36kJ/mol) . A energia liberada na quebra
desta ligao utilizada para a sntese de uma ligao fosfoanidrido de
uma molcula de ATP ou de GTP (guanosino trifosfato), liberando ainda
2,9 kJ/mol. O succinato formado nesse processo. A enzima que catalisa
essa reao a succinil CoA sintetase.
A formao de ATP ou de GTP custa da energia liberada na
descarboxilao oxidativa do -cetoglutarato uma fosforilao em
nvel de substrato, semelhante s reaes de sntese de ATP que voc viu
na via glicoltica. O GTP formado nessa reao perde seu grupamento
fosforil terminal para uma molcula de ADP, formando uma molcula
de ATP. Veja as Figuras 14.11 e 14.12.
40 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Figura 14.11: Reao de formao do succinato.
Succinato
Figura 14.12: Esquema representativo da reao onde ocorre a fosforilao em

nvel de substrato.
CEDERJ 41
Etapa 6 Oxidao do succinato a fumarato desidrogenao

flavino-dependente
O succinato oxidado em fumarato pela flavoprotena succinato
desidrogenase (Figura 14.13). Em eucariticos, a succinato desidrogenase
est fortemente associada membrana interna mitocondrial. Em
procariticos, est associada membrana plasmtica. Ela a nica enzima
do Ciclo de Krebs associada membrana. Ela possui uma flavino adenino
dinucleotdeo (FAD) ligada covalentemente. A estrutura dessa coenzima
nos estados reduzido e oxidado apresentada na Figura 14.14.
Os eltrons passam do succinato atravs do FAD por centros ferroenxofre (Fe S) antes de entrar na cadeia de transporte de eltrons. Voc
ver o funcionamento da cadeia de transporte de eltrons e a formao
de ATPs decorrentes da fosforilao oxidativa nas prximas aulas.
Figura 14.13: Reao de formao do fumarato.
Figura 14.14: Estrutura da coenzima FAD reduzida e oxidada.

42 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Etapa 7 Hidratao do fumarato a malato

A hidratao do fumarato que resulta em malato catalisada pela
enzima fumarase (Figura 14.15).
Figura 14.15: Reao de formao do malato.
Etapa 8 Regenerao do oxaloacetato

Na ltima reao do ciclo, a enzima malato desidrogenase, ligada
ao NAD, catalisa a oxidao do malato em oxaloacetato.
O equilbrio dessa reao fica muito longe das condies de
equilbrio termodinmico, mas como nas clulas intactas o oxaloacetato
constantemente removido, pela reao seguinte, catalisada pela citrato
sintase e altamente exergnica (etapa 1), as concentraes de oxaloacetato
permanecem muito baixas, impulsionando a reao catalisada pela
malato desidrogenase no sentido de formao do oxaloacetato. Veja a
Figura 14.16.
L-malato
oxaloacetato
Figura 14.16: Reao de formao do oxaloacetato.
CEDERJ 43
A energia de oxidao do ciclo conservada de modo

muito eficiente
A Figura 14.17 apresenta as oito etapas do Ciclo de Krebs
ressaltando as estruturas dos compostos formados. Podemos verificar
que um grupo com dois carbonos, na forma de acetil-CoA, entra no ciclo
por combinao com o oxaloacetato. Os dois carbonos emergem do ciclo,
na forma de CO2, na descarboxilao do isocitrato e do -cetoglutarato.
A energia liberada dessas descarboxilaes foi conservada na reduo de
trs NAD+ e um FAD e na produo de um ATP ou GTP. No final do
ciclo uma molcula de oxaloacetato foi regenerada. Embora somente um
ATP tenha sido formado em nvel de substrato, as coenzimas reduzidas,
trs NADH e um FADH, fornecem um grande fluxo de eltrons na cadeia
de transporte de eltrons, formando um grande nmero de molculas de
ATP durante a fosforilao oxidativa.
Um processo cclico, com oito etapas, parece, primeira vista,
ser uma via muito complexa para a oxidao de uma molcula de dois
carbonos em CO2. No entanto, o papel do ciclo do cido ctrico no est
confinado oxidao do acetato. Essa via desempenha um papel central
no metabolismo intermedirio; seus produtos de quatro e cinco carbonos
em determinadas circunstncias metablicas servem como combustveis
para outras vias. Podem, por outro lado, ser pontos de entrada de
intermedirios formados em outras vias de degradao; por exemplo,
oxaloacetato e -cetoglutarato so produzidos a partir do aspartato e do
glutamato, respectivamente, quando protenas so degradadas.
O ciclo do cido ctrico, como outras vias metablicas,
produto da evoluo onde uma boa parte ocorreu antes do advento
dos organismos aerbicos. Ele no representa o caminho mais curto do
acetato at CO2, mas a via que confere maior vantagem seletiva. Alguns
seres anaerbicos usaram algumas das reaes dessa via em processos
biossintticos; alguns microorganismos modernos ainda usam o Ciclo
de Krebs de modo incompleto no como fonte de energia, mas como
precursor biossinttico. Tais microorganismos usam as trs primeiras
reaes do ciclo para produzirem -cetoglutarato, mas no tm a enzima
-cetoglutarato desidrogenase e, portanto, no do prosseguimento ao
ciclo. Eles usam o composto formado para vias biossintticas. Eles
possuem as enzimas que catalisam as etapas reversveis de converso de
oxaloacetato a succinil-CoA.
44 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Condensao
acetil
succinil-CoA
Figura 14.17: Etapas do Ciclo de Krebs e estrutura dos componentes formados.
REAES ANAPLERTICAS
So reaes para a reposio de intermedirios do ciclo que so
removidos para vias biossintticas.
Em mamferos, a reao mais importante para reposio de
intermedirios do Krebs a reao catalisada pela piruvato carboxilase.
Ela ocorre no fgado e nos rins.
Em organismos aerbicos, o ciclo do cido ctrico uma via
anfiblica, ou seja, serve tanto para processos catablicos como para
processos anfiblicos. Alm de seu papel no catabolismo oxidativo de
carboidratos, cidos graxos e aminocidos, o ciclo fornece precursores
para muitas vias biossintticas. Como podemos observar na Figura 14.19,
-cetoglutarato e oxaloacetato servem como precursores dos aminocidos
glutamato e aspartato. Esses aminocidos podem ser usados para sntese
de outros aminocidos ou para sntese de bases nitrogenadas, purinas e
CEDERJ 45
pirimidinas. Oxaloacetato pode ser convertido a glicose, em processos

gliconeognicos (formao de glicose) quando os nveis de glicose
esto abaixo daqueles considerados normais. Esse aspecto ser mais
bem estudado nas ltimas aulas desta disciplina. O succinil-CoA o
intermedirio central na sntese do anel porfirnico de grupos heme que
atuam como transportadores de oxignio. Grupos heme fazem parte das
molculas de hemoglobina, da mioglobina e de carreadores de eltrons,
como os citocromos.
Figura 14.18: Principais papis biossintticos do ciclo de Krebs.
46 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Regulao do ciclo do cido ctrico

A regulao das enzimas-chave em vias metablicas, por
efetores alostricos e por modulao covalente, assegura a produo de
intermedirios e de produtos na velocidade requerida para manter a clula
em um estado estvel, evitando a superproduo de um intermedirio. O
fluxo de tomos de carbono do piruvato finamente regulado em dois
nveis: em nvel de formao do acetil-CoA e em nvel de formao de
citrato. O ciclo tambm regulado em nvel das reaes catalisadas pelas
enzimas isocitrato desidrogenase e da -cetoglutarato desidrogenase.
Veja a Figura 14.20.
O complexo piruvato desidrogenase modulado por dois tipos de
regulao. Primeiro, dois produtos da reao da piruvato desidrogenase,
acetil-CoA e NADH, inibem o complexo (Figura 14.21). Segundo, o
complexo piruvato desidrogenase existe de duas formas: 1) um ativo,
desfosforilado; 2) um inativo, fosforilado (Figura 14.21). A inativao
do complexo feita por uma protena quinase que est fortemente ligada
ao complexo. A reativao catalisada por uma protena fosfatase que
desfosforila o complexo (Figura 14.21).
Resumindo esse processo de regulao, podemos dizer que quando
a situao energtica da clula alta, ou seja, quando os nveis de ATP,
acetil-CoA e NADH so altos, os produtos de reao catalisados por esse
complexo enzimtico, o complexo enzimtico inibido. O que tambm
ocorre quando os nveis de cidos graxos esto aumentados. Essa inibio
ocorre porque cidos graxos podem ser convertidos em acetil-CoA no
processo de -oxidao que voc ir estudar na Aula 22 desta disciplina.
Por outro lado, quando os nveis energticos da clula esto baixos, ou
seja, quando os nveis de AMP (adenosina monofosfato), NAD+ e CoA
esto reduzidos, ocorre uma ativao alostrica do complexo piruvato
desidrogenase.
CEDERJ 47
Figura 14.19: Principais fatores reguladores do ciclo do cido ctrico.
48 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Figura 14.20: Regulao do complexo piruvato desidrogenase por fosforilao e por desfosforilao.
CEDERJ 49
Ciclo do glioxalato uma variante anablica do ciclo

Metabolicamente, clulas vegetais e microorganismos diferem em
muitos aspectos importantes. De interesse neste momento que as clulas
vegetais e microorganismos no podem sintetizar carboidratos a partir de
gorduras. Essa converso crucial para o desenvolvimento das sementes,
pois estas apresentam reservas de triacilgliceris. Quando as sementes
germinam, triacilgliceris so quebrados para serem convertidos em
acares, para servir de fonte de energia para o crescimento da planta. As
plantas sintetizam acares usando o ciclo do glioxalato, o qual pode ser
considerado um variante anablico do Ciclo de Krebs (Figura 14.21).
Figura 14.21: Ciclo do glioxalato.
50 CEDERJ
AULA
Metabolismo de
carboidratos I
15
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
RESPIRAO CELULAR
Agora, que voc conhece o ciclo do cido ctrico, sua histria e o
conhecimento atual, vamos acompanhar um pouco da descoberta dos
citocromos e da cadeia transportadora de eltrons mitocondrial. Esta
etapa fundamental para entender o processo completo da respirao
celular, uma forma mais eficiente de extrao de energia utilizada pelos
organismos aerbicos. nesta etapa que os NADHs e os FADH2s
reduzidos no ciclo do cido ctrico se reoxidam gerando energia para a
sntese de aproximadamente 30 molculas de ATP.
O conhecimento de como isto acontece, veio aos poucos.
Acompanhe nesta aula os passos histricos fundamentais e, na
prxima, acompanhe o processo completo, tal como entendido
hoje. Nesta aula, voc ir encontrar questes que no tem uma
resposta correta, que pode ser mais ou menos elaborada e, por isso,
no apresentamos gabarito. A aula no essencial para entender o
tema (respirao celular), mas importante que voc tente entender a
histria, mergulhando nela. Discuta com seu tutor e seus colegas. Fica
muito mais interessante.
A DESCOBERTA DOS CITOCROMOS

No final do sculo passado, um pesquisador ingls chamado
MacMunn descreveu, sob os nomes mio-hematina e histo-hematina,
um tipo de pigmento respiratrio, identificado em msculos e outros
tecidos de animais das mais diferentes espcies. Ele observou que este
ESPECTRO
pigmento, no estado reduzido, apresentava um
Ver na aula de
fotossntese (Aula 6) o
espectro de luz visvel.
composto por quatro bandas de absoro. No estado oxidado, o
ESPECTRO
caracterstico
mesmo no apresentava as mesmas bandas. Em 1889, Levy reproduziu

cuidadosamente os experimentos de MacMunn, obtendo os mesmos
resultados. Entretanto, Levy interpretou o pigmento encontrado por
MacMunn como uma hemoglobina. Esta interpretao dos resultados
de Levy foi apoiada por Hoope Seyler que observou a presena de CO
na preparao de derivados de hemoglobina. Apesar de insistentes
rplicas e argumentos de MacMunn, a discusso foi encerrada e o
pigmento respiratrio de MacMunn foi gradualmente esquecido.
52 CEDERJ
15 MDULO 4
No lugar de MacMunn, o que voc faria para ratificar sua descoberta frente s crticas sobre uma provvel
contaminao dos tecidos analisados, com derivados da hemoglobina?
Espectro de
absoro
Prisma
Lente
Lente
Objeto
Estgio do
microscpio
Fonte de luz
Figura 15.1: As observaes de MacMunn se basearam no espectro observado

quando um feixe de luz visvel atravessa o material biolgico e decomposto por
um prisma.
Na segunda dcada do sculo XX, David Keilin, durante seus

estudos sobre a respirao em vermes e insetos parasitas, mostrou
que o pigmento mio-hematina ou histo-hematina no s existia, como
tambm possua distribuio e importncia bem maiores que as supostas
anteriormente por MacMunn!
Aps meticuloso estudo de microespectroscopia em clulas e
tecidos de insetos, vermes, aracndeos, moluscos, levedura e vegetais
superiores, Keilin props o nome Cytochrome (que significa pigmento
celular), para definir o ubquo composto que representava claramente um
caracterstico espectro de absoro composto por quatro bandas, as quais
denominou a, b, c e d, correspondentes ao estado reduzido do citocromo.
O espectro do pigmento no estado oxidado no apresentava bandas
distintas de absoro. A Figura 15.1 mostra, de forma esquemtica,
o dispositivo experimental de Keilin, usando um microespectroscpio
ocular de Zeiss para estudar o espectro nos msculos torcicos de um
inseto (abelha). Na Figura 15.2 voc vai encontrar o resultado observado
por Keilin.
CEDERJ 53
AULA
Figura 15.2: Espectro de absoro da luz visvel de msculos de abelha (a). As linhas
mais escuras so as linhas de absoro que aparecem sobre um espectro de luz visvel
de fundo caracterstico (b).
!
Sabendo-se da propriedade oxirredutora dos citocromos e do possvel envolvimento com o fenmeno da
respirao, o que voc espera que acontea com o espectro de absoro quando a abelha movimenta as
asas e quando esta permanece quieta?
Keilin tambm trabalhou com suspenso de levedura. O que voc espera ter acontecido quando Keilin
borbulhou ar na cubeta contendo uma suspenso de levedura?
Keilin verificou ainda que o aparecimento ou no das bandas

era grandemente afetado pela presena de agentes como o monxido
de carbono e o cianeto. Alguns anos mais tarde, Keilin e Hartree, um
de seus colaboradores, utilizando estes inibidores observaram que cada
conjunto de faixas do espectro de absoro no surgia ou desaparecia
ao mesmo tempo. Perceberam que aps a adio de cianeto existia uma
ordem seqencial para o aparecimento das bandas que sempre se repetia:
d, a, c e b.
!
No lugar de Keilin e Hartree, o que voc concluiria a partir destas
observaes?
Qual o destino final dos eltrons aps o ltimo citocromo?
O envolvimento dos citocromos no processo de oxidao dos

acares e consumo de oxignio comeava a ser desvendado. Os
citocromos foram designados posteriormente, na ordem de sua seqncia
no processo de transporte de eltrons como: citocromo b, citocromo c,
citocromo a e citocromo a3 (ou citocromo oxidase).
54 CEDERJ
15 MDULO 4
AULA
Pouco tempo depois, o ciclo dos cidos tricarboxlicos (ciclo

do cido ctrico) foi elucidado por Sir Hans Krebs, mas ainda havia
muita discusso sobre os mecanismos que acoplavam as oxidaes ao
fornecimento de energia para os seres vivos.
Neste contexto, dois pesquisadores russos, Belitser e Tsybakova,
em 1939, estabeleceram uma possvel relao entre a gliclise e as reaes
de oxidao e reduo associadas fosforilao. Suas descobertas foram
assim descritas:
O MECANISMO DE FOSFORILAO ASSOCIADO RESPIRAO
V. A. Belitser e E. T. Trybakova
Laboratrio de Qumica Fisiolgica, Universidade de Moscou,

U.S.S.R. (Submetido em 10 de junho de 1939)
A sntese de adenosinatrifosfato e fosfagen (fosfocreatina) ocorre no

msculo custa da energia derivada da gliclise ou da respirao
celular. Entretanto, atravs de algumas descobertas indiretas,
parece que alguns processos oxidativos podem estar ligados com
a fosforilao sem ter qualquer conexo direta com a gliclise.
Braunshteyn e Severin mostraram que a oxidao do cido pirvico,
cetobutrico e cido glutmico, bem como de alanina, causa uma
estabilizao da adenosina trifosfato em eritrcitos nucleados.
Grimlund encontrou que a oxidao do cido ltico, cido pirvico
e cido succnico aumenta a capacidade de trabalho de um msculo
no qual a gliclise foi obliterada. Isto tambm foi encontrado por
Meyerhof e seus colaboradores para o caso do cido ltico e
tambm declarou que a oxidao ltica causa a estabilizao do
fosfagen em msculos envenenados por iodoacetato.
!
Levando em considerao estes achados em que etapa est ocorrendo
o armazenamento de energia na forma de fosfagen (steres de
fosfato)?
CEDERJ 55
Assim, Belitser e Tsybakova interessados em investigar a sntese

de steres de fosfato (fosfagen) realizaram o seguinte experimento:
incubaram preparaes de msculos de pombo na presena ou ausncia de
cido pirvico (o substrato respiratrio) e mediram fosfagen sintetizado
e taxa respiratria (Figura 15.3).
Fosfagen, mgP2O5
6,0
5,0
4,0
3,0
2,0
Respirao, LO2
1,0
100,0
II
III
V
200,0
300,0
400,0
IV
500,0
Figura 15.3: Sntese de Fosfagen na presena de cido pirvico (msculo de pombo).

I: antes da incubao; II: em N2 sem cido pirvico; III: o mesmo com cido pirvico;
IV: in O2 com cido pirvico; V: o mesmo sem cido pirvico. Nesta e nas ilustraes
seguintes, o fosfagen sintetizado expresso em mg de P2O5 e a taxa respiratria
expressa em L de O2 por 30 minutos, por grama de tecido.
!
O que sugere este resultado?
Observe que na presena de cido pirvico e O2 (IV) tanto a sntese

de fosfagen quanto a taxa de respirao celular so maiores que nas
outras situaes experimentais e, alm disso, so proporcionais.
Os mesmos autores tambm mostraram, no mesmo trabalho, que
praticamente todo o cido pirvico era oxidado durante a respirao.
Alm disso, eles investigaram o efeito de outros substratos
respiratrios (cido ctrico, cido fumrico, -cetoglutarato e cido
succnico) na sntese de fosfagem e no consumo de oxignio, como
mostrado abaixo (Tabela 15.1).
56 CEDERJ
Datas dos
Experimentos
Tecido
Substrato
15 MDULO 4
Respirao em L O2 Aumento de
por 1 g de tecido por fosfagem em mg de
30 minutos
P3O2 por g de tecido
Sem
Com
Sem
Com
substrato substrato substrato substrato
1939
1 de abril
Corao de coelho cido ctrico
19 de abril
263
399
4,00
7,25
Corao de coelho cido Fumrico
95
386
0,20
5,62*
05 de maio
Corao de coelho - cetoglutarato
120
540
0,45
3,40*
07 de abril
Corao de coelho cido Succnico
206
956
2,30
4,26
03 de junho
Msculo de pombo cido mlico
280
420
1,84
16 de maio
Msculo de pombo cido ltico
252
387
1,56
26 de outubro Msculo de pombo cido pirvico
214
420
2,34
10 maio
170
153
1938
Msculo de pombo cido actico
* na presena de 0,02 de NaF
Que concluses voc tiraria deste experimento?

Repare que na presena do substrato h um aumento na sntese de
fosfagen e na taxa respiratria. Apenas quando o substrato respiratrio
era o cido actico no foi observado um aumento significativo na
presena do substrato.
Cerca de dois anos mais tarde, 1941, Fritz Lipmann postulava o
conceito de ligao fosfato rica em energia, como descreveu a seguir.
CEDERJ 57
AULA
Tabela 15.1: Sntese de fosfagen ligada oxidao de vrios substratos.
GERAO METABLICA E UTILIZAO DA ENERGIA

LIGADA AO FOSFATO
Fritz Lipmann
Laboratrio de Pesquisa Bioqumica, Hospital Geral de

Massachusetts e Departamento de Qumica Biolgica Escola
Mdica de Harvard, Boston, Massachusetts
I- Introduo Histrica
Por um longo perodo a descoberta de Harden e Young, a

fosforilao de hexose na fermentao alcolica, foi considerada
com significado apenas como uma forma de modelar a molcula
de hexose para ajusta-l quebra fermentativa. Entretanto, como
resultado de um estudo intensivo das reaes intermedirias da
fermentao e a relao entre ao muscular e metabolismo,
tornou-se evidente que a ligao ster fosfato primria da hexose
transforma-se metabolicamente em um novo tipo de ligao
fosfato de alta energia. (...) Durante vrios processos metablicos
o fosfato introduzido em compostos no meramente, ou no
mnimo no somente, para facilitar sua quebra, mas como um
provvel carreador de energia. Resumir a gerao metablica e
a circulao deste peculiar tipo de energia qumica a proposta
primria deste trabalho.
!
Logo foi reconhecido o papel do ATP como um carreador de energia nos
processos metablicos. Mas, qual o stio de sntese de ATP na clula? O que
voc faria para responder a esta questo?
Em 1949, devido ao desenvolvimento tecnolgico propiciado

pela Segunda Grande Guerra, E. P. Kennedy e A. L. Lehninger utilizam
centrfugas refrigeradas e submetem variando de 1.500 X g (1g = 9,8m/s2,
acelerao da gravidade) at 20.000 g.
58 CEDERJ
1.000 X g:
Precipita clulas ntegras e ncleo.
15 MDULO 4
FRAO CELULAR
AULA
ACELERAO
de 5.000 at 15.000 X g:Precipita grandes vacolos, cloroplastos e mitocndrias.

de 50.000 at 150.000 X g:
Precipita microssomas de retculo endoplasmtico.
Acima de 500.000 X g:
Precipita algumas protenas solveis.
Desta forma, Kennedy e Lehninger isolam diferentes fraes e

obtm o seguinte resultado (Tabela 15.2):
Tabela 15.2: Atividade das fraes subcelulares de fgado de rato na oxidao de

compostos intermedirios do ciclo de Krebs.
Frao
Mitocndria
Substrato
Citrato
7,1
-cetoglutarato
6,3
Piruvato + oxaloacetato
7,1
Nada
0,18
Precipitado Nuclear Citrato
Sobrenadante
Consumo de
oxignio (M)
1,9
-cetoglutarato
1,7
0,98
Nada
0,0
Citrato
0,54
-cetoglutarato
0,0
1,4
Nada
0,31
!
Comparando a taxa respiratria (consumo de oxignio) das trs fraes obtidas (mitocndria, precipitado
nuclear e sobrenadante), qual das fraes celulares est envolvida com a respirao, e como voc integraria
os resultados obtidos por Keilin e Belitser & Tsybakova?
Como voc comprovaria o seu esquema?
CEDERJ 59
Kennedy e Lehninger mediram paralelamente o consumo de

oxignio e o fosfato esterificado, utilizando vrios substratos respiratrios.
A Tabela 15.3 apresenta estes resultados. Observe que, em comparao
com o controle (sem adio de substrato), existe um aumento tanto na
taxa respiratria quanto no fosfato esterificado quando so utilizados
citrato, alfa-cetoglutarato, piruvato + oxaloacetato ou octanoato como
substratos.
Tabela 15.3: Esterificao de fosfato acoplado oxidao na mitocndria.
Consumo de
oxignio
Fosfato
esterificado
32
Pi
esterificado
Nada
0,18
24,2
0,67
Citrato
7,1
106
31,3
cetoglutarato
6,3
113
39,3
7,1
113
32,6
Nada (0,0001 M malato presente)
0,5
37
3,2
Octanoato
4,5
121
27,8
Experimento
Substrato
Anos mais tarde, no laboratrio de A.L. Lehninger, foi verificado

que nucleotdeos de diidro-difosfopiridina (DNPH2 na nomenclatura
antiga, atualmente conhecido como NADH) aumentavam a incorporao
de 32Pi (fosfato inorgnico radioativo) em um composto com a propriedade
como a adenosina trifosfato (ATP). Tal incorporao no
CIDO LBIL
CIDO LBIL
Propriedade cido
lbil significa que o
composto sensvel a
meios cidos. Usa-se
lbil em contraposio
a resistente. Temos
ainda termolbil
em contraposio a
termorresistente.
ocorria na presena de N2 ou na ausncia de ons Mg2+.
60 CEDERJ
Consumo de O2 por DPNH2

Utilizando preparao mitocondrial de fgado de rato, Lehninger
fez os experimentos mostrados nas Figuras 15.4 e 15.5. No primeiro
experimento (Figura 15.4), ele testou o efeito da concentrao de
citocromo c na velocidade de consumo. (lembre que NADH).
15 MDULO 4
Microtomos de oxignio consumido
2 adio de 5 x 10-6 M
AULA
1 sem adio de citocromo

3 1,0 x 105 M
4 5 x 105 M
5 1,5 x 10-4 M
10
20
30
40
tempo em minutos
50
Figura 15.4: Efeito da concentrao de citocromo c na velocidade de oxidao de DPNH2.
!
O que sugere o experimento da Figura 15.4?
Os resultados mostram que, na ausncia de citocromo, o consumo

de oxignio basal e que a adio de citocromos preparao de
mitocndria de fgado de rato aumenta a taxa respiratria.
No segundo experimento (Figura 15.5), ele testou o efeito da
concentrao de citocromo c na velocidade de oxidao de DPNH2
(lembre que NADH).
Microtomos de O2 consumido
Micromols DPN formado ou DPNH2
desaparecido
Consumo de O2 / DNPH2 adicionado
10
15
20
tempo em minutos
25
30
Figura 15.5: Correlao entre o consumo de oxignio, o desaparecimento de DNPH2

e o aparecimento de DPN durante a oxidao do DNPH2.
CEDERJ 61
!
Qual a relao entre o desaparecimento de NADH2 e o
consumo de oxignio na Figura 15.5?
A seguir, Lehninger mediu simultaneamente a relao entre DPNH2

e fosfato (orto-fosfato) no ensaio de respirao (Tabela 15.4).
Tabela 15.4: Medidas da razo Pi/DPNH2.
Experimento
nmero
2
Tipo de
enzima
Tempo
Orto-fosfato DPNH2 P/DPNH2
Citocromo
(minutos)
c (M)
(M)
(M)
0
4,72
4,94
2,81
3,92
1,89
0,003M
15
1,96
3,13
1,52
DPN
7,43
17
7,27
H2O
4 X 10-4
Tubos duplicados contendo 0,005M de MgCl2, 0,005M de KCl, 0,002M a 0,004M de ADP, 0,02M de
tampo glicil-glicina pH 7,4, citocromo c, ortofosfato, DPNH2, na concentrao indicada na tabela e
0,03M de NaF. Cada tubo recebeu 0,30 ml da suspenso da partcula indicada (partculas derivadas
de 50 mg de fgado de rato) para um volume total de 2,0 mL. A temperatura nos diferentes experimentos variou de 17 24o C.
!
Observando as medidas de A.L. Lehninger na Tabela 15.4,
sugira o papel do NADH2 durante a oxidao da glicose e
relacione com a sntese de ATP.
Observe que a concentrao de DPNH 2 cai e a de fosfato

tambm, conforme aumenta o tempo de ensaio. Entretanto, a relao
fosfato e DPNH2 parece no ser muito alterada, o que sugere que
a utilizao do fosfato (provavelmente para a sntese de ATP) e a
diminuio na concentrao de DPNH2 (provavelmente oxidado a
DPN) so eventos acoplados.
62 CEDERJ
15 MDULO 4
investigando o acoplamento entre o consumo de oxignio e
a fosforilao, com o efeito do 2,4-dinitrofenol (DNP):
Figura 15.6: A estrutura do 2,4-dinitrofenol
(DNP), um veneno metablico.
Tabela 15.5: Efeito do DNP no consumo de oxignio e fosfato em homogenatos de

rim de coelhos.
Adies
Consumo de Consumo
de fosfato
oxignio
Razo
Pi: O
Nenhuma
8,0
17,5
2,2
8 X 10 -4 MDNP
7,9
1,3
0,2
Todas as amostras contm 10 ml da preparao de uma enzima similar quela de

Green et al., preparada por centrifugao de homogenato de rim de coelho em
tampo KCl-NaHCO3 e lavagem do resduo 2 vezes com o tampo fresco. A isto foi
adicionado 0,1 ml de hexoquinase de levedura e 0,0067M de MgCl2.
Clinon foi o primeiro a mostrar que o dinitrofenol em baixas

concentraes bloqueia completamente as reaes sintticas sem
interferir na oxidao. Outros autores tm mostrado que esta droga
inibe a assimilao de nitrognio, crescimento e diferenciao, a
formao de enzimas adaptativas, e Hotchkiss tem reportado
dados prelimirares mostrando que o DNP previne consumo de
fosfato durante a respirao de clulas de levedura. Estes resultados
parecem indicar que DNP atua no mecanismo bsico da clula
pelo qual a gerao de ligaes fosfato est acoplada a reaes de
oxidao.
Loomis & Lipman, 1948
!
Que concluses voc tiraria destes dados?
CEDERJ 63
AULA
Em 1948, Loomis e Lipmann publicam um trabalho
interessante que o DNP (Tabela 15.5) no afeta o consumo de

oxignio, mas inibe drasticamente o consumo de fosfato. Isso significa
que, embora os dois processos estejam acoplados, eles so independentes
(ver hipteses de acoplamento de energia na prxima aula).
!
Durante muitos anos, o DNP foi prescrito para uso em tratamento da obesidade, pois os pacientes que o
utilizavam mostravam uma rpida diminuio em seu peso. Como voc explicaria este fenmeno do ponto
de vista bioqumico? Voc acharia adequado tal tratamento?
Os resultados mostrados at aqui do uma idia do que ocorre

na mitocndria e que resulta em transformao da energia qumica do
alimento em energia qumica da molcula de ATP. Este processo vital
para os organismos aerbicos. Na aula seguinte, vamos mostrar como
isso acontece. No esquea que o que sabemos resultado desta histria
e de muitas outras que no caberiam aqui. Muita gente trabalhou e
continua trabalhando para entender como este processo ocorre.
64 CEDERJ
objetivos

Entender os processos de oxirreduo dos
componentes da cadeia transportadora de eltrons.
Compreender o processo de sntese de ATP.
AULA
Metabolismo de
carboidratos II
16
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
INTRODUO
Da histria contada na aula anterior podemos extrair as idias fundamentais

que explicam como a energia contida no alimento pode ser transformada
em ATP nas clulas, na presena de oxignio. O pigmento respiratrio
de MacMunn ou os citocromos de Keilin; o processo de transferncia de
eltrons; a relao entre a oxidao de hexoses e a fosforilao de Belitser
e Tsybakova; o conceito de ligaes fosfato de alta energia de Lipmann; a
esterificao de fosfato acoplado oxidao na mitocndria de Kennedy
e Lehninger; o papel do NADH de Lehninger: esses so apenas alguns
personagens importantes e essas pistas nos do uma idia do que acontece
nas nossas clulas. Agora vamos passo a passo mostrar com mais detalhes
esse processo conhecido como cadeia transportadora de eltrons.
CONCEITOS INICIAIS
A cadeia transportadora de eltrons (CTE) um conjunto de
reaes que ocorre nas cristas mitocondriais (ver Aula 14) e fornece
energia para outro processo, a fosforilao oxidativa.
Alimento
Cadeia transportadora de eltrons e fosforilao oxidativa

so, portanto, eventos relacionados, ou melhor, acoplados.
Entretanto, cada um deles pode ocorrer independentemente e
tem componentes e produtos diferentes.
A cadeia transportadora de eltrons resulta na sntese de gua
A fosforilao oxidativa resulta na sntese de ATP
Energia para
o corpo
Figura 16.1: O fluxograma

mostra que a energia
usada pelo corpo em suas
diversas atividades , em
ltima anlise, energia
qumica do alimento.
Esta energia primeiro
convertida em NADH e
FADH 2 e, posteriormente,convertida em ATP.
ATP energia qumica
disponvel e acessvel para
as atividades celulares.
A cadeia transportadora de eltrons utiliza os aceptores (NADH

e FADH2) reduzidos em outras vias metablicas tais como gliclise
ou ciclo do cido ctrico. A sntese de ATP por fosforilao oxidativa
dependente da energia gerada durante o transporte de eltrons da
cadeia mitocondrial.
Antes de comear a explicar como isso acontece, vamos calcular
o saldo de NADHs, FADH2 e ATPs que temos no processo de respirao
celular aps a quebra total de uma molcula de glicose (gliclise e ciclo
do cido ctrico). Tente fazer isso, olhando as aulas anteriores de
gliclise (Aulas 10 e 11) e ciclo do cido ctrico (Aula 14).
66 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
E agora confira o resultado que voc encontrou.

Durante a gliclise saldo de 2 ATPs e 2 NADHs.
No ciclo do cido ctrico saldo de 2 ATPs (1 para cada volta
no ciclo), 6 NADHs (3 para cada volta no ciclo) e 2 FADH2 (1 para
cada volta no ciclo).
O que foi gerado no ciclo do cido ctrico encontra-se na matriz
mitocondrial, onde ele acontece. O que foi gerado na gliclise est no
citoplasma da clula. Portanto, para que o NADH, reduzido durante a
gliclise, possa estar disponvel para a cadeia transportadora de eltrons,
ele precisa atravessar as membranas mitocondriais, particularmente
a interna, que menos permevel. Para isso, existem transportadores
especficos na membrana interna mitocondrial. O NADH glicoltico pode
entrar na mitocndria por dois caminhos diferentes, ou seja, existem dois
transportadores capazes de carregar esta molcula do citoplasma para
a matriz mitocondrial. Estes transportadores so chamados lanadeira
malato-aspartato e lanadeira do glicerofosfato.
AS LANADEIRAS
A lanadeira malato-aspartato
Este sistema usa as molculas de malato e aspartato para
transportar os hidrognios que esto associados ao NADH no citoplasma
da clula. Envolve tambm outras molculas normalmente presentes na
matriz mitocondrial e no citoplasma. Um hidrognio ligado ao NADH
transferido para o oxaloacetato (que voc j conhece), formando
malato no citoplasma da clula. A membrana interna mitocondrial tem
que leva o malato do
A N T I P O R TA
citoplasma para dentro da mitocndria e, simultaneamente, transporta
Reveja as aulas de
transporte atravs
de membranas em
Biologia Celular I.
um transportador de malato do tipo
ANTIPORTA
- cetoglutarato da matriz mitocondrial para o citoplasma. Na matriz

mitocondrial, o malato volta a oxaloacetato, transferindo o hidrognio
para o NAD+ mitocondrial, formando novamente NADH. Note que
apenas os hidrognios foram transportados. O NAD+ citoplasmtico no
capaz de atravessar a membrana interna mitocondrial. Como resultado
da transferncia do hidrognio para formar NADH, o malato volta a
ser oxaloacetato na matriz mitocondrial. Este oxaloacetato convertido
em aspartato, que pode ento sair da mitocndria por um transportador
(antiporta) que, em troca, transfere glutamato do citoplasma para a
matriz mitocondrial (o resumo do mecanismo de transporte pode ser
CEDERJ 67
visto na Figura 16.2). Assim, todo NADH reduzido na gliclise (dois

NADH) pode estar disponvel na matriz mitocondrial para participar
da cadeia transportadora de eltrons.
Figura 16.2: Lanadeira

malato-aspartato.
A lanadeira do glicerofosfato
O segundo caminho para entrada dos eltrons na matriz
mitocondrial a lanadeira do glicerofosfato ou fosfoglicerol. Nesse
caso, os hidrognios associados ao NADH reduzido na gliclise so
transferidos para a diidroxiacetona-fosfato (DHAP) formando o 3fosfoglicerol no citoplasma. A enzima que catalisa esta reao a
3-fosfoglicerol desidrogenase. A enzima flavoprotena desidrogenase
catalisa a transferncia deste hidrognio para o FADH2 (o resumo do
mecanismo de transporte est na Figura 16.3).
Diidroxiacetona
fosfato
Figura 16.3: Lanadeira

do glicerolfosfato.
68 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
Assim, cada NADH reduzido na gliclise ser transformado em

FADH2 para participar da CTE na mitocndria. Neste caso, portanto,
temos uma diferena essencial quanto ao saldo de ATPs aps a CTE.
Lembre que cada NADH gera energia suficiente para a sntese de 3 ATPs,
enquanto o FADH2 apenas para 2 ATPs.
Agora temos todo NADH na matriz mitocondrial. Alm do
FADH2, claro. Estes aceptores so o ponto de partida para a sntese
de ATP. Cada NADH que transfere seus hidrognios para a cadeia
transportadora gera energia suficiente para a sntese de 3 molculas de
ATP. Cada FADH2 gera energia para a sntese de apenas 2 molculas
de ATP.
Agora faa os clculos... quando uma molcula de glicose
sofre oxidao completa, quantas molculas de ATP podem ser
geradas por fosforilao oxidativa?
Quantas molculas foram geradas por fosforilao no nvel
do substrato, na gliclise e no ciclo do cido ctrico?
Qual o total de molculas de ATP sintetizado por molcula
de glicose durante o processo completo de respirao celular?
Se voc chegou a 38 molculas de ATP, timo (veja Tabela 16.1).
Tabela 16.1: Balano energtico da respirao celular em cada uma das etapas a partir da
oxidao completa de uma molcula de glicose.
Etapa da respirao celular

Gliclise
Piruvato
Fosforilao
substrato
2 ATP
Acetil-CoA
Ciclo do cido ctrico

Total = 38
2 ATP
4
Fosforilao oxidativa
2NADHx3= 6 ATP
2NADHx3= 6ATP
6NADHx3 = 18 ATP
2FADH2x2 = 4 ATP
34
Voc j sabe que se o NADH gerado durante a gliclise for

transportado pela lanadeira do glicerofosfato, uma molcula de ATP
ter que ser utilizada para o transporte. Assim, dois ATPs sero gastos
para levar as duas molculas de NADH reduzidas na gliclise para
a matriz mitocondrial. Neste caso, do total de 38 molculas de ATP
teremos apenas 36 molculas de ATP, aps a degradao completa de
uma molcula de glicose. Voc encontrar em alguns livros 36 ATPs e
CEDERJ 69
em outros 38 ATPs, como produto final da respirao celular. Agora,

voc j sabe de onde vem esta aparente discrepncia. Alm disso, aps
1991, verificou-se que a relao de 3 ATPs por NADH e 2 ATPs por
FADH2 no exata. Alguns trabalhos mostraram que a relao de 2,5
molculas de ATP para cada NADH reoxidado na cadeia transportadora
de eltrons e de 1,5 molcula de ATP para cada FADH2.
A CADEIA TRANSPORTADORA DE ELTRONS (CTE)

Agora vamos cadeia transportadora de eltrons mitocondrial.
Sua organizao e seu mecanismo de funcionamento se assemelham
cadeia transportadora de eltrons presente no cloroplasto que vimos
nas aulas de fotossntese (Aula 6). Na membrana interna mitocondrial
existem partculas organizadas em uma seqncia definida. Esta organizao
obedece a um padro baseado no potencial redox de cada um dos
componentes. Alguns componentes so complexos proticos integrais
de membrana, outros so componentes mveis.
Os componentes da cadeia transportadora de eltrons

Como j vimos anteriormente, a membrana interna mitocondrial
rica em protenas. A maior parte dessas protenas componente da
cadeia transportadora de eltrons. As protenas esto organizadas em
quatro complexos proticos responsveis pelas reaes de oxirreduo
que ocorrem nesta membrana. So eles:
Complexo I tambm chamado NADH desidrogenase ou
NADH: CoQ oxidorredutase.
Complexo II tambm chamado succinato desidrogenase ou
succinato: CoQ oxidorredutase.
Complexo III tambm chamado citocromo bc1.
Complexo IV tambm chamado citocromo oxidase.
Alm desses complexos proticos, existem dois componentes
mveis da cadeia: a ubiquinona (tambm chamada coenzima Q e
representada como UQ ou CoQ) e o citocromo c.
70 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
A seqncia de transporte de eltrons

Vejamos agora mais detalhadamente cada um dos complexos
proticos e o papel que eles desempenham na cadeia transportadora de
eltrons.
O complexo I - NADH desidrogenase ou NADH: CoQ oxidorredutase

O complexo I tem atividade NADH desidrogenase, ou seja,
usa NADH como substrato para uma reao de desidrogenao. Este
complexo apresenta, como co-fator, flavina mononucleotdeo (FMN),
alm de centros ferro-enxofre. Sua estrutura protica composta
por mais de 30 subunidades totalizando uma massa molecular de
aproximadamente 850 kDa. No complexo o percurso dos eltrons :
NADH
FMN
Fe-S
UQ
FeS
UQ
O alvo final dos eltrons a ubiquinona (UQ). O complexo

transporta dois eltrons para a ubiquinona e quatro prtons da matriz
mitocondrial para o espao intermembranar.
Figura 16.4: O complexo I da cadeia transportadora de eltrons. Os eltrons so transferidos

do NADH para o FMN, formando FMNH2. Dois eltrons percorrem ainda os centros ferroenxofre at atingirem a ubiquinona. Quatro prtons so bombeados da matriz mitocondrial
para o espao entre as membranas interna e externa.
Fonte: Garret & Grisham. Biochemistry. 2 ed. fig. 21.6. Saunders College Publishing.
Disponvel online em: http://www.people.virignia.edu/~cmg/slides_download.html
CEDERJ 71
O complexo II - succinato desidrogenase ou succinato: CoQ oxidorredutase

O complexo II um complexo independente, que aceita eltrons
apenas do FADH2 e os transfere tambm para a ubiquinona.
O complexo est presente na membrana interna mitocondrial
e tambm participa do ciclo de Krebs atravs de sua atividade
succinato desidrogenase. Na sua estrutura esto presentes quatro cadeias
polipeptdicas, incluindo duas protenas ferro-enxofre e flavoprotenas
2 (FP2) onde o FAD (flavina dinucleotdeo) encontra-se covalentemente
ligado. Voc j sabe, das aulas de fotossntese, que existem diferentes
tipos de centros ferro-enxofre ligados a protenas. Estes podem ser do
tipo 4Fe-4S, 3Fe-4S ou 2Fe-2S (ver ferredoxina, na Aula 6 do mdulo
fotossntese), dependendo do nmero de tomos de ferro e de enxofre
presentes nos complexos.
A reao que ocorre no complexo a seguinte:
Succinato + UQ
Fumarato + UQH2
O percurso dos eltrons o seguinte:

Succinato
FADH2
2Fe2+
UQH2
Figura 16.5: O complexo II da CTE.

Este complexo recebe os eltrons
do FADH2 reduzido no ciclo do
cido ctrico e os transfere para a
ubiquinona atravs de seu centro
ferro-enxofre.
Fonte: Garret & Grisham.
Biochemistry. 2 ed. fig. 21.6.
Saunders College Publishing.
Disponvel online em:
http://www.people.virginia.edu/
cmg/slides_download.html
Entretanto, a ubiquinona (UQ) pode ser parcialmente reduzida

e formar um radical semiquinona (UQH*). A reduo deste radical
leva formao de ubiquinol (UQH2). Em condies fisiolgicas,
a quantidade de semiquinona formada muito pequena, pois toda
semiquinona rapidamente convertida a ubiquinol (veja Figura 16.6).
72 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
Em situaes especiais pode haver um acmulo de semiquinona, que

considerado um radical livre e, portanto, capaz de reagir fortemente
com vrias biomolculas, causando danos sua estrutura. A cadeia
transportadora de eltrons , em potencial, um dos caminhos pelos
quais os radicais livres so gerados.
Figura 16.6: Ubiquinona parcialmente reduzida formando

um radical semiquinona que
novamente reduzido, formando
ubiquinol.
O complexo III - citocromo bc1

O principal componente do complexo III uma protena
transmembrana chamada citocromo b. Voc conheceu a histria
dos citocromos na aula anterior. Este citocromo se caracteriza por
apresentar como grupo prosttico um grupamento heme bL e outro
!
Se voc no se lembra
do conceito de grupo
prosttico, volte s
aulas de protenas,
em Bioqumica I.
grupamento heme bh. Estas molculas so apresentadas na Figura 16.7

e distinguem-se pelos diferentes tipos de citocromo apenas nas cadeias
laterais (ver Figura 16.7).
A
Figura 16.7: O grupamento heme ou ferro-protoporfirina IX o grupo

prosttico dos citocromos.
A) molcula encontrada no citocromo b;
B) a molcula encontrada no citocromo c;
C) a molcula encontrada no citocromo.
CEDERJ 73
O ciclo Q
A coenzima Q (CoQ) ou ubiquinona (Q ou UQ) passa seus
eltrons para o citocromo c (e bombeia prtons) num ciclo redox nico
!
Para relembrar o conceito
de unidades isoprenides,
veja aula de outros lipdeos
em Bioqumica I.
chamado ciclo Q. A coenzima Q uma benzoquinona ligada a vrias

unidades isoprenides (normalmente 10 em clulas de mamferos e 6
em bactrias). A cauda isoprenide d molcula seu carter apolar,
que permite CoQ difundir-se rapidamente pela membrana interna
mitocondrial. A CoQ tem a habilidade de aceitar um par de eltrons
(aceptor dieletrnico) e pass-los, um de cada vez, atravs de um
intermedirio semiquinona at o complexo III. Isso ocorre em duas
etapas: a primeira etapa a migrao do ubiquinol (UQ2) para o stio
Qp da citocromo c redutase. Dois eltrons e dois prtons so liberados,
resultando em uma oxidao a um intermedirio semiquinona (UQH*)
e, finalmente, ubiquinona (UQ), que pode deixar o stio e entrar no
pool da membrana. Um eltron passado a uma protena ferro-enxofre
atravs do citocromo c1 e, finalmente, ao citocromo c mvel no espao
intermembranas. O outro eltron passa atravs dos citocromos bL e
bH, reduzindo a ubiquinona a semiquinona no stio Qn da enzima.
A primeira etapa do ciclo Q pode ser resumida atravs da
seguinte equao:
UQH2 + CITOCROMO C (oxidado)
UQH* + 2H + CITOCROMO C (reduzido)
Na segunda etapa do ciclo, outro ubiquinol (UQ2) entra no

stio Qp e oxidado a ubiquinona, doando um novo par de eltrons
para o citocromo c. Entretanto, desta vez o segundo eltron usado
para reduzir o intermedirio semiquinona a ubiquinol, bombeando
dois prtons da matriz para o espao intermembranas e retornando
ubiquinol para o pool da membrana. O resultado final dessas reaes
o bombeamento de quatro prtons para cada molcula de ubiquinol
que oxidada. A razo para a complexidade deste processo que a
cadeia precisa transferir dois eltrons do ubiquinol para duas molculas
carreadoras de um eltron (aceptor monoeletrnico), o citocromo c.
A segunda etapa do ciclo Q pode ser resumida na equao a seguir:
UQH2 + UQH*+ 2H+ + CITOCROMO (oxidado)
74 CEDERJ
UQH2 + 2H+ + UQ + CITOCROMO (reduzido)
UQH2 + CITOCROMO C (ox.)
16 MDULO 4
AULA
O resumo do ciclo est no Esquema 16.1, a seguir:

UQH* + 2H+fora + CITOCROMO C (reduz.)
UQH2 + UQH* + 2H+dentro+ CITOCROMO C (ox.)

UQH2 + 2H+dentro+ 2 CITOCROMO C (ox.)
2e-
UQH2 + 2H+fora + UQ + CITOCROMO C (reduz.)

4 H+fora + 2 CITOCROMO C (reduz.) + UQ
Na Figura 16.8, apresentamos um esquema do ciclo Q.
Figura 16.8: O ciclo Q.

Em A, a primeira etapa do
ciclo com a transferncia de
dois eltrons do ubiquinol
para o citocromo c e a formao do intermedirio
semiquinona.
Em B, a segunda etapa do
ciclo com a transferncia
de eltrons de outro ubiquinol, formando ubiquinona.
Quatro prtons so bombeados da matriz para o
espao intermembranas.
Cyt c = citocromo c.
O complexo IV - citocromo oxidase

Na seqncia da cadeia transportadora temos at agora dois
citocromos reduzidos. Eles so componentes mveis da cadeia que,
em seguida, sofrero oxidao, enquanto passam seus eltrons para
o prximo componente, o complexo IV, tambm chamado citocromo
oxidase. Essa enzima composta de dez subunidades, mas grande parte
da sua estrutura ainda hoje desconhecida. Sabe-se que a citocromo
oxidase utiliza dois hemes (a e a3) e dois stios de cobre. O papel da
citocromo oxidase aceitar eltrons do citocromo c e us-los para reduzir
o oxignio, formando duas molculas de gua. O complexo responsvel
tambm pelo ltimo ponto de bombeamento de prtons da cadeia.
4 CITOCROMO C (red.) + 4H+ + O2
4CITOCROMO (ox.) + 2H2O
CEDERJ 75
Figura 16.9.a: A organizao

molecular do heme e tomos
de cobre no complexo IV.
Figura 16.9.b: O complexo IV ou

citocromo oxidase ou citocromo a, a
3.
A reduo de uma molcula de oxignio para formar duas

molculas de gua requer quatro eltrons. Entretanto, o citocromo
c, como vimos anteriormente, transporta apenas um eltron de cada
vez. A reduo incompleta do oxignio pode gerar perxidos ou radicais
livres de oxignio, espcies altamente reativas. O funcionamento eficiente
da citocromo oxidase impede a formao desses radicais pela incompleta
reduo do oxignio.
Figura 16.10: A funo do citocromo oxidase.
Em resumo:
O oxignio o aceptor final dos eltrons na cadeia transportadora.
A reduo do oxignio resulta na sntese de gua.
76 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
A FOSFORILAO OXIDATIVA
O COMPLEXO V - ATP SINTASE
O complexo V - ATP sintase
A ATP sintase uma enzima que catalisa a sntese de ATP. Voc
j viu uma enzima parecida na fotossntese (veja fase clara, Aula 6).
No processo de respirao celular, esta enzima responsvel pela etapa
chamada FOSFORILAO OXIDATIVA. Nesta etapa, a energia do
fluxo de eltrons convertida em ATP.
At o complexo IV, o resultado da cadeia transportadora de
eltrons a sntese de duas molculas de gua e um aumento da
concentrao de prtons no espao intermembranas. Lembre que esses
prtons foram bombeados pelos complexos I, III e IV. O bombeamento
de prtons estabelece um gradiente de prtons atravs da membrana
mitocondrial interna (veja na Figura 16.11).
Figura 16.11: Os pontos de bombeamento de prtons da matriz para o espao

intermembranas durante a cadeia transportadora de eltrons.
Este gradiente protnico tambm um gradiente eletroqumico,

pois ocorre uma diferena de potencial (ddp) entre um lado e outro da
membrana mitocondrial interna (Figura 16.12). Em outras palavras, a
P ETER D. M ITCHELL
concentrao de prtons em um lado da membrana determina que este
Prmio Nobel de
Qumica de 1978,
por sua contribuio
ao entendimento
dos processos de
transferncia de
energia em sistemas
biolgicos atravs da
formulao da Teoria
Quimiosmtica.
http://www.nobel.se/
chemistry/laureates/
1978/mitchellbio.html
lado seja mais positivo que o outro.
Figura 16.12: O gradiente dos prtons formado durante a cadeia transportadora de eltrons.
CEDERJ 77
A membrana mitocondrial interna no permevel a prtons

e, portanto, qualquer movimento deles requer um transportador
especfico. O complexo ATP sintase tem uma estrutura complexa: parte
da enzima funciona como um canal de prtons e por ali que estes
retornaro matriz mitocondrial, desfazendo o gradiente. Segundo
Peter Mitchell, a ATP sintase usa a energia do gradiente de prtons
para sintetizar ATP, a partir de ADP e Pi. Esta teoria chamada Teoria
Quimiosmtica, e a mais aceita nos dias de hoje.
Voc lembra de quando dissemos, no incio da aula, que a cadeia
transportadora de eltrons e a fosforilao oxidativa eram eventos
acoplados? Pois bem, veja um esquema completo, representando tal
acoplamento na Figura 16.13.
Figura 16.13: Acoplamento entre a cadeia transportadora de eltrons e a fosforilao oxidativa.
A ATP sintase uma enzima constituda por duas partes com

atividades distintas, chamadas F1 e F0. Por este motivo ela tambm
chamada F1- F0 ATPase. A estrutura tridimensional da protena pode
ser vista na Figura 16.14.
Figura 16.14: Estrutura tridimensional da ATP sintase. Em (a) uma vista lateral e em (b) uma viso frontal da
estrutura da protena. Note o arranjo das subunidades.
Fonte: Biochemistry. 2a ed. Garrett e Grisham, Saunders College Publishing.
Disponvel online em: http://www.people.virginia.edu/~cmg/slides_download.html
78 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
A SEQNCIA DA CADEIA DE TRANSPORTE DE ELTRONS

REFLETE OS POTENCIAIS REDOX DE SEUS COMPONENTES
Os componentes da cadeia transportadora de eltrons esto
organizados segundo seu potencial de oxirreduo (Figura 16.15). O
potencial de reduo padro dos diferentes componentes da membrana
interna mitocondrial permite a progressiva passagem dos eltrons do
NADH e do FADH2 do menor ao maior potencial de reduo padro.
Conforme os eltrons atravessam sucessivamente os complexos I, II e
IV, gerada energia livre suficiente para a sntese de uma molcula
de ATP. No caso do FADH2, o complexo II no capaz de bombear
prtons. Assim, a energia livre gerada na reoxidao desta molcula
menor, e portanto menos ATP gerado por molcula de FADH2.
Figura 16.15: O potencial de reduo padro dos componentes mveis e dos complexos
indicado pela escala esquerda. Tambm esto indicados os pontos onde a energia
liberada suficiente para sintetizar ATP e os stios dos vrios inibidores respiratrios
(rotenona, amital, antimiciana A e cianeto). Os complexos I, II e IV no sintetizam
diretamente ATP, mas capturam a energia livre necessria para a sntese de ATP pelo
bombeamento de prtons que gera o gradiente utilizado como fora eletromotriz
pela ATP sintase.
CEDERJ 79
A REGULAO DA CADEIA TRANSPORTADORA DE

ELTRONS E FOSFORILAO OXIDATIVA
A cadeia transportadora de eltrons regulada pela disponibilidade
dos substratos, NADH, FADH2, ADP, Pi e oxignio. Assim, ela e a
fosforilao oxidativa estaro inibidas nas seguintes situaes:
a) NADH/NAD+ baixa nesta situao o poder redutor baixo
e existe uma baixa concentrao de doadores de eltrons para a CTE.
ATP/ADP alta nesta situao a carga energtica da clula
alta, e, portanto, a sntese de ATP no precisa ser estimulada.
O2 baixo o oxignio o aceptor final dos eltrons e, na
ausncia dele, os transportadores ficam saturados e no so mais
capazes de aceitar novos eltrons, paralisando a cadeia transportadora.
por isso que precisamos respirar oxignio.
DESACOPLAMENTO
Voc j sabe que a CTE e a fosforilao oxidativa so eventos
acoplados, interdependentes. Para que a mitocndria sintetize ATP,
necessrio que os eltrons passem atravs dos componentes da cadeia e
que os prtons sejam bombeados.
Entretanto, em alguns casos possvel desacoplar os dois processos.
Isso pode ocorrer com a utilizao de substncias qumicas chamadas
desacopladores, como o 2,4-dinitrofenol (DNP) ou o carbonilcianeto-p-trif
luorometoxifenilhidrazona (FCCP) (ver Figura 16.16). Estas molculas, por
serem capazes de atravessar facilmente a membrana interna mitocondrial
por difuso, podem levar os prtons do espao intermembranas de volta
para a matriz, desfazendo o gradiente eletroqumico. Na presena dessas
substncias, ento, a cadeia transportadora de eltrons funciona sem que
haja sntese de ATP.
Figura 16.16: Mecanismo de ao

dos desacopladores DNP e FCCP.
80 CEDERJ
16 MDULO 4
AULA
O DNA foi utilizado, por algum tempo, no tratamento da

obesidade. Voc pode imaginar por qu?
Voc acha que este tipo de tratamento no eficiente para
o que ele se prope? Por qu?
Por outro lado, existem situaes fisiolgicas especiais em que
o desacoplamento ocorre. Esse o caso do tecido adiposo marrom de
recm-nascidos e organismos hibernadores, nos quais o desacoplamento
um importante mecanismo para manter o corpo aquecido. Nesses
tecidos, a membrana interna mitocondrial apresenta uma protena
desacopladora conhecida como termogenina. Esta protena um canal
de prtons que, como os desacopladores qumicos, deixa passar os
prtons de volta para a matriz mitocondrial, desfazendo o gradiente
eletroqumico. A energia, neste caso, dissipada em forma de calor.
Figura 16.17: A termogenina, protena

desacopladora presente na membrana
interna mitocondrial do tecido adiposo
marrom.
CEDERJ 81
RESUMO
A respirao celular o processo pelo qual uma molcula de glicose quebrada

totalmente em CO2 e H2O na presena de O2. Este processo resulta na converso
da energia contida nas molculas de glicose em ATP. A sntese de ATP ocorre nas
mitocndrias por fosforilao oxidativa e um evento dirigido pela energia do
gradiente de prtons formado na cadeia transportadora de eltrons mitocondrial.
A cadeia transportadora de eltrons (CTE) tem como substrato NADH e FADH2,
gerados no ciclo de Krebs e na gliclise. Os eltrons passam atravs dos componentes
da CTE, que esto organizados segundo seu potencial de oxirreduo. O aceptor
final desses eltrons o oxignio, formando gua. Os complexos I, III e IV da CTE
so tambm bombas de prtons. Estes complexos retiram os prtons da matriz
mitocondrial e jogam para o espao intermembranas, gerando um gradiente
eletroqumico. A ATP sintase, presente na membrana interna mitocondrial,
capaz de utilizar a energia deste gradiente eletroqumico e convert-la em ATP. O
processo regulado pela disponibilidade do substrato (ADP, Pi, NADH e FADH2).
EXERCCIOS
1. Descreva a rota seguida pelos eltrons da glicose at o O2.
2. Explique como se d o acoplamento entre cadeia transportadora de eltrons
e fosforilao oxidativa.
3. Como os dois processos podem ser desacoplados?
4. Explique o caminho percorrido pelo NADH reduzido na gliclise at a cadeia
transportadora de eltrons.
5. Quais as vantagens e desvantagens do metabolismo baseado no oxignio?
6. Faa um paralelo entre o metabolismo oxidativo de carboidratos (gliclise,
ciclo do cido ctrico, cadeia transportadora de eltrons e fosforilao oxidativa)
e a fotossntese, destacando diferenas e semelhanas. A que concluses voc
chegou a respeito dos princpios bsicos que norteiam os mecanismos utilizados
pelos organismos para obteno de energia?
7. Explique por que a mitocndria de uma clula heptica contm menos cristas do
que a mitocndria da clula do msculo cardaco.
82 CEDERJ
objetivos
AULA
A oxidao dos
aminocidos
e a produo de uria
17

Identificar as situaes metablicas nas quais
ocorre o catabolismo dos aminocidos.
Conhecer o destino do grupamento amino
(NH3) presente nos aminocidos.
Conhecer o destino do esqueleto de carbonos
dos aminocidos.
Conhecer as principais vias de modificao do
grupamento amino, formado em tecidos extrahepticos, e de seu transporte para o fgado.
Pr-requisitos
Conhecimento da estrutura e da simbologia dos
aminocidos obtido em Bioqumica I
(Mdulo 2, Aulas 8 a 10).
Conhecimento do ciclo de Krebs obtido nas
Aulas 13 e 14 desta disciplina.
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
INTRODUO
Agora, ns voltaremos nossa ateno para o processo de obteno de energia

a partir da oxidao dos aminocidos. A frao de energia metablica que
pode ser obtida dos aminocidos provenientes das protenas da dieta ou das
protenas musculares varia consideravelmente com o tipo do organismo e com
as condies metablicas do mesmo. Carnvoros, logo aps a alimentao,
podem obter at 90% dos seus requerimentos energticos da oxidao dos
aminocidos, enquanto os herbvoros podem obter pouca energia dessa rota
metablica. Microorganismos podem obter aminocidos do meio e aproveit-los, j
as plantas raramente oxidam aminocidos para obter energia; a maior parte da
sua energia metablica obtida da degradao de carboidratos. A concentrao
dos aminocidos nas plantas ajustada para atender sntese de protenas, de
cidos nuclicos e de outras molculas necessrias ao seu crescimento.
Em animais, os aminocidos sofrem o processo oxidativo em trs diferentes
circunstncias metablicas:
1. Durante a sntese e degradao normal das protenas, que recebe o nome
de turnover de protenas, alguns aminocidos obtidos pela degradao so
utilizados para a sntese de novas protenas.
2. Quando a dieta rica em protenas, e a ingesto excede as necessidades
do corpo para a sntese de suas prprias protenas (aps um churrasco, por
exemplo), tal excesso degradado, visto que os aminocidos no podem
ser estocados.
3. Durante o jejum ou em doenas como a diabetes melito, quando os
carboidratos j no esto mais disponveis ou no podem ser utilizados, as
protenas celulares so utilizadas como combustvel.
Em todas essas condies metablicas, os aminocidos perdem seus
grupamentos amino para formar alfa-cetocidos (molculas como aquelas
que voc aprendeu ao estudar o ciclo de Krebs, Aula 14). Os esqueletos de
carbonos, ou seja, a cadeia carbnica dos aminocidos, formam os -cetocidos.
Como voc aprendeu (Aula 14), os alfa-cetocidos podem ser degradados a
CO2 e H2O ou, com maior freqncia, podem fornecer esqueletos com trs ou
quatro unidades de carbono que sero convertidos em molculas de glicose,
combustvel necessrio ao crebro, msculo e outros tecidos. Esse processo
feito atravs de uma rota metablica, denominada gliconeognese, que voc
aprender na Aula 30. As vias de degradao dos aminocidos so muito
parecidas em diversos organismos; o foco desta aula ser o catabolismo que
ocorre em vertebrados. De um modo geral, as vias de degradao convergem
para vias metablicas centrais.
84 CEDERJ
17 MDULO 5
AULA
Voc pde observar, nas Aulas de 9 a 11, que a degradao dos carboidratos
forneceu piruvato, que, por sua vez, foi convertido a acetil-CoA; a degradao
de cidos graxos tambm gerou molculas de acetil-CoA que foi oxidada no
ciclo de Krebs.
Um ponto importante para distinguir o metabolismo dos aminocidos
do processo de degradao dos cidos graxos e dos carboidratos que
todos os aminocidos contm grupamento amino; logo, seu processo
de degradao inclui uma etapa chave, na qual o grupamento amino
separado do esqueleto de carbonos e desviado para vias especficas de
utilizao de aminocidos. Veja um resumo esquemtico da transformao
dos aminocidos na Figura 17.1. Nela, podemos observar que os aminocidos
podem vir tanto da dieta quanto de outras protenas intracelulares. A cadeia
de carbonos utilizada em rotas metablicas que voc j conhece, enquanto a
parte nitrogenada dos aminocidos, na forma de amnia, processada
em uma via denominada ciclo da uria, que ser abordada em detalhes
na Aula 18.
Figura 17.1: Viso geral

do catabolismo dos aminocidos em mamferos.
CEDERJ 85
DESTINO METABLICO DOS GRUPAMENTOS AMINO

AMINOCIDOS
ESSENCIAIS
So aqueles que
devem ser ingeridos
na dieta. As clulas
no possuem enzimas
para sintetizar seu
esqueleto carbnico.
Em mamferos so:
isoleucina, leucina,
valina, lisina,
treonina, triptofano,
fenilalanina, metionina
e histidina.
DESTINO
DO
O nitrognio molecular existe na natureza, em bastante quantidade;

no entanto, antes de ser utilizado pelos animais, ele deve ser fixado,
isto , reduzido da forma de N2 para NH3 por microorganismos e plantas.
A amnia ento incorporada, por esses organismos, em aminocidos
e protenas.
Voc aprendeu em Bioqumica 1 que alguns
AMINOCIDOS
considerados ESSENCIAIS, pois no podem ser sintetizados pelo organismo,

e, portanto, devem ser ingeridos na dieta. Os no-essenciais podem ser
produzidos no nosso organismo a partir dos essenciais. Humanos no
podem sintetizar 11 dos 20 aminocidos necessrios sntese de protenas
endgenas. Os carbonos dos aminocidos entram no metabolismo
ESQUELETO DE
intermedirio em um dos pontos apresentados a seguir:
CARBONOS DOS
denominados
AMINOCIDOS
Os aminocidos,
quando desaminados,
produzem cetocidos que,
diretamente ou
atravs de reaes
adicionais, rendem
componentes do
ciclo de Krebs. Os
aminocidos podem
ser agrupados
em duas classes:
glicognicos e
cetognicos.
Figura 17.2: Pontos de

entrada dos aminocidos
no ciclo de Krebs. Nas
caixas esto registrados
os pontos de entrada
dos aminocidos glicognicos. Aminocidos
cetognicos produzem
acetil-CoA ou aceto-acetil-CoA. Em negrito esto
destacados os aminocidos essenciais.
86 CEDERJ
so
GLICOGNICOS
AMINOCIDOS
(podero formar glicose) so metabolizados
em piruvato, 3-fosfoglicerato, -cetoglutarato, oxaloacetato, fumarato

ou succinil-CoA;
AMINOCIDOS CETOGNICOS
(que podem formar corpos
cetnicos) produzem acetil-CoA ou acetoacetato. O metabolismo de

alguns aminocidos resulta em mais de um dos pontos apresentados e,
assim, alguns aminocidos podem ser tanto glicognicos como cetognicos.
Veja, na Figura 17.2, os pontos de entrada dos aminocidos glicognicos
e cetognicos nas rotas metablicas.
serem utilizados como fonte de energia, perdem seus grupamentos amino

e so convertidos em intermedirios do ciclo de Krebs e que a amnia
pode ser convertida em uria para ser eliminada. Na realidade, a amnia
pode ser eliminada como amnia nos animais aquticos, como cido
rico em aves e rpteis e como uria em muitos vertebrados terrestres.
Assim, daremos prosseguimento nossa aula, apresentando inicialmente
as formas de transferncia do grupamento amnia (NH3) e em seguida o
processo de formao da uria, que ser aprofundado na Aula 18.
Os aminocidos da dieta so a principal fonte de grupos amino;
a maioria metabolizada no fgado. Alguma amnia gerada nesse
processo reciclada e usada em diversas vias biossintticas. O excesso
eliminado como uria, amnia ou cido rico. O excesso de amnia
gerado em outros tecidos tambm transportado para o fgado para ser
convertido em sua forma de excreo. Para entendermos o mecanismo
de oxidao dos aminocidos, devemos considerar alguns aspectos
importantes que sero abordados de forma integrada; no entanto, voc
dever ler com ateno os tpicos destacados nas caixas laterais, para
fix-los separadamente. Abordaremos os seguintes pontos:
1. A importncia das transaminases e a formao do glutamato.
2. O papel da glutamina no processo de desintoxicao.
3. A importncia da alanina para o transporte de grupamentos amino
gerados pelo catabolismo dos aminocidos em tecidos extra-hepticos,
como os msculos.
Glutamato e glutamina tm um papel crtico no metabolismo
do nitrognio. A maioria dos grupamentos NH3 dos aminocidos
GLICOGNICOS
Os esqueletos
carbnicos dos
aminocidos
glicognicos
so degradados
em piruvato ou
intermedirios, de
4 e 5 carbonos,
do ciclo de Krebs.
Os aminocidos
glicognicos so as
principais fontes
de carbono da
gliconeognese
quando os nveis de
glicose caem. Eles
podem ser degradados
para produzir energia
ou ser convertidos em
glicognio ou cidos
graxos para estocar
energia.
AMINOCIDOS
CETOGNICOS
Os esqueletos
de carbonos dos
aminocidos
cetognicos so
degradados em acetilCoA e acetoacetato.
O esqueleto carbnico
dos aminocidos
cetognicos pode ser
catabolizado para a
produo de energia
ou ser convertido a
corpos cetnicos ou
cidos graxos.
transferida para o alfa-cetoglutarato, formando o on glutamato. O on

glutamato ento transportado para a mitocndria, onde o grupamento amino removido para
formar o on amnio (NH4+).
O excesso de amnia gerado em outros tecidos convertido em grupamento amida da
glutamina, a qual passa para o citosol dos hepatcitos e desse para a mitocndria do hepatcito.
Na maioria dos tecidos, glutamina ou glutamato ou ambos esto presentes em concentraes
maiores do que qualquer outro aminocido.
No msculo, o excesso de grupamentos amino gerado transferido para o piruvato,
formando alanina, uma outra molcula importante para o transporte de grupamentos amino
para o fgado. A transferncia de grupamentos amino catalisada por enzimas denominadas
aminotransferases ou transaminases. Observe um exemplo genrico dessas reaes na Figura 17.3.
As transaminases apresentam outros papis, que so destacados na caixa lateral.
CEDERJ 87
17 MDULO 5
AMINOCIDOS
AULA
At este ponto da aula voc aprendeu que os aminocidos, para
DESAMINAO
DE AMINOCIDOS
Alm de equilibrar os
grupamentos amino
entre -cetocidos,
as transaminases
recolhem o
grupamento amino
do excesso de
aminocidos da dieta
e transferem para
aqueles aminocidos
que podem ser
desaminados, como
por exemplo o
glutamato.
O esqueleto de
carbonos dos
aminocidos,
que podem ser
desaminados, pode
ser catabolizado para
obter energia ou ser
usado para a sntese
de glicose ou cidos
graxos para estocar
energia.
Somente alguns
aminocidos podem
ser desaminados
diretamente.
Figura 17.3: Reao catalisada por uma transaminase ou

aminotransferase enzimas que catalisam a transferncia
reversvel de um grupo amino entre dois -cetocidos.
Transaminases so enzimas que transferem grupamentos amino de

aminocidos para -cetocidos.
Essas enzimas equilibram os grupamentos amino entre os -cetocidos.
Elas permitem a sntese de aminocidos no-essenciais a partir de outros
aminocidos. Assim, o balano entre diferentes aminocidos mantido, e
vrias protenas podem ser sintetizadas.
A Figura 17.4 mostra como os amino grupos da alanina e do cido

asprtico so transferidos para o -cetoglutarato para formar glutamato.
Nessa reao, o piruvato produzido fornece carbonos para formar glicose
(gliconeognese, voc ver na Aula 30) ou pode ser descarboxilado a
acetil-CoA (Aula 14) para entrar no ciclo de
Krebs e gerar energia. A transaminao a

reao mais comum envolvendo aminocidos;
somente dois aminocidos, lisina e treonina,
no participam de reaes de transaminao.
Observe novamente a Figura 17.4 e note que
o par -cetoglutarato e glutamato est sempre
presente; o que muda o aminocido a ser
transformado e, conseqentemente, o novo -
cetocido formado.
Figura 17.4: A) Reao catalisada pela alanina
aminotransferase; B) Reao catalisada pela aspartato
aminotransferase. Observe em A que a alanina
doa seu grupamento amino sendo convertida no
-cetocido, o piruvato; em B o aspartato doa seu
grupamento amino sendo convertido no -cetocido,
o oxaloacetato; em ambas as reaes o -cetoglutarato recebe o grupamento amino, tornando-se o
aminocido glutamato.
88 CEDERJ
17 MDULO 5
AULA
Assim, por exemplo, no caso da alanina o produto formado o piruvato;

se o aminocido for o cido asprtico, na forma de aspartato, o produto
gerado ser o oxaloacetato.
As transaminases so enzimas que apresentam como co-fator
o grupamento piridoxal fosfato, a forma funcional da vitamina B6. O
stio ativo das transaminases contm piridoxal fosfato associado, por uma
ligao covalente, ao grupo -amino do aminocido lisina, denominado
base de Schiff. esse grupamento que se encarrega de transportar o
grupamento NH3 dos aminocidos. A Figura 17.5 (letras AaD)
apresenta o esquema de formao da base de Schiff e do mecanismo de
reao catalisado por transaminases, o primeiro passo para o catabolismo
da maioria dos aminocidos.
B
A
Figura 17.5: A) Estrutura do piridoxal
fosfato O grupo prosttico das
transaminases o piridoxal fosfato
(PLP), um derivado da vitamina B6.
Figura 17.5: B) Enzima (Lys) PLP No

estado de repouso, o grupamento aldedo
do piridoxalfosfato est ligado ao grupamento -amino do resduo de lisina da
transaminase.
Figura 17. 5: Aminocido PLP na forma de uma base de Schiff C) O -amino grupo do
substrato aminocido desloca lisina da enzima, para formar uma base de Schiff com o PLP.
D) Esse tipo de ligao promove a posterior hidrlise, liberando o -cetocido derivado do
aminocido, o piridoxal fosfato convertido em uma piridoxaminafosfato.
CEDERJ 89
FUNO
Como vimos at aqui, o glutamato atua como o transportador da

DA
ENZIMA
amnia de muitos aminocidos para o fgado. Como os amino grupos
L - G L U TA M AT O
do glutamato so removidos para serem excretados?
DESIDROGENASE
Retirar do
aminocido glutamato
o on amnio (NH3),
proveniente de
diversos aminocidos,
para que amnia
txica seja utilizada
na formao da uria.
Nos hepatcitos, o glutamato transportado do citosol para

as mitocndrias, onde sofre uma desaminao oxidativa (retirada do
grupamento amnia com perda de hidrognios), catalisada pela ENZIMA
L-GLUTAMATO
+
DESIDROGENASE.
Em mamferos, essa enzima pode utilizar

+
tanto NAD como NADP como aceptor de equivalentes redutores.

A reao catalisada pela L-glutamato desidrogenase apresentada na
Figura 17.6.
MECANISMOS
POSTULADOS
PA R A A
TOXICIDADE DA
AMNIA
1 - Altas
concentraes de
amnia deslocam o
equilbrio da reao
catalisada pela
glutamina sintetase no
sentido de formao
de glutamina. Isso
leva a um consumo
aumentado do
glutamato, um
neurotransmissor
e precursor para a
sntese de um outro
neurotransmissor, o
cido gama-amino
butrico (GABA).
2 - O consumo de
glutamato e altas
concentraes de
amnia poderiam
deslocar o equilbrio
da reao catalisada
pela glutamato
desidrogenase no
sentido reverso,
ou seja, no sentido
de consumir cetoglutarato, um
intermedirio essencial
para o ciclo de
Krebs. Isso limita o
metabolismo
energtico do crebro.
90 CEDERJ
Figura 17.6: Reao catalisada pela glutamato desidrogenase. A glutamato desidrogenase remove os grupamentos N do pool de aminocidos.
Ela uma das poucas enzimas que podem utilizar tanto NAD+ como
NADP+ como aceptor de eltrons.
A amnia muito txica para o tecido animal. Em muitos animais

ela convertida em componentes no-txicos antes de ser exportada dos
tecidos extra-hepticos para o sangue, para ser levada para os rins ou
fgado. Novamente o glutamato crtico nessa etapa. Ele recebe mais
um grupamento amino, sendo convertido em glutamina, a qual exerce
essa funo de transporte. Observe que, nesse caso, houve a formao
de uma amida. Vale ressaltar que a amnia, gerada em muitos tecidos,
como o crebro, por exemplo, pode ser produzida pelo metabolismo de
outras molculas, como os nucleotdeos. A enzima que combina a amnia
livre com o glutamato para formar a glutamina a glutamina sintetase.
Essa reao requer ATP (j que uma reao de sntese, onde ligaes
qumicas so formadas) e ocorre em duas etapas. Veja a Figura 17.7.
17 MDULO 5
AULA
glutamato
Figura 17.7: Reao catalisada pelas enzimas glutamina sintetase e glutaminase. As duas primeiras
etapas so catalisadas pela enzima glutamina sintetase. Observe que h consumo de ATP na primeira.
A terceira etapa catalisada pela enzima glutaminase.
CEDERJ 91
FUNO
DA
A glutamina no s transporta a amnia para ser eliminada como
ENZIMA
tambm pode ser usada como fonte de amnia para reaes biossintticas.
G L U TA M I N A
O nitrognio na forma de amida liberado como amnia por uma enzima
S I N T E TA S E
Introduzir um
grupamento NH3 no
aminocido glutamato
para sintetizar o
aminocido glutamina.
Esta reao ocorre para
reduzir a concentrao
da amnia livre.
FUNO
DA
ENZIMA
G L U TA M I N A S E
Retirar a amnia
que estava sendo
transportada pela
glutamina. Essa reao
ocorre para alimentar
vias biossintticas e para
alimentar o ciclo da
uria.
denominada glutaminase (Figura 17.7), que est presente somente no

fgado e no rim. No fgado, essa enzima fornecer o on amnio (NH4+)
para alimentar o ciclo da uria. O on amnio liberado nos rins pela
ao da glutaminase no transportado pelo sangue nem convertido
em uria, ele eliminado diretamente na urina.
Devemos ressaltar ainda a importncia do aminocido alanina
no transporte de grupamentos NH3. O msculo, ao degradar uma de
suas reservas energticas, o glicognio, produz glicose. Esta por sua vez
degradada a piruvato para produzir energia. Esse assunto foi abordado
nas Aulas de 9 a 11. O piruvato uma molcula que pode ser utilizada
para regenerar glicose. Esse processo ocorre no fgado. Por outro lado,
o msculo degrada tambm protenas, gerando aminocidos. Uma
soluo econmica, para transportar tanto o piruvato quanto a amnia
dos aminocidos gerados nos msculos para o fgado, sintetizar o
aminocido alanina a partir desses componentes. Veja um resumo dessas
informaes no ciclo glicose-alanina, apresentado na Figura 17.8.
92 CEDERJ
17 MDULO 5
AULA
Figura 17.8: Ciclo glicose-alanina. A alanina atua como um carreador de amnia e de esqueletos de carbonos do
piruvato dos msculos para o fgado. A amnia excretada e o piruvato reutilizado para formar glicose, a qual
retorna ao msculo.
RESUMO
A amnia extremamente txica para o organismo e, portanto, deve ser

eliminada.
A amnia, apesar de solvel em meio aquoso, por ser txica para o organismo,
no pode ser transportada livremente pelo sangue.
Para ter sua toxicidade reduzida, o grupamento NH3 dos aminocidos
transportado associado ao -cetoglutarato, formando o glutamato. Essa etapa
catalisada por enzimas denominadas transaminases.
O excesso de ons amnio associado ao on glutamato, formando o aminocido
glutamina pela ao da enzima glutamino sintetase.
CEDERJ 93
Os grupamentos NH3 provenientes do catabolismo dos aminocidos das

protenas musculares podem ser transferidos para o piruvato, composto gerado
pela degradao de glicose, formando o aminocido alanina. A alanina ento
transportada para o fgado e l pode liberar o on amnio, que ser convertido
em uria e eliminado na urina, enquanto o esqueleto de carbonos poder ser
reutilizado para formar glicose.
EXERCCIOS
1. Faa uma distino entre aminocidos essenciais e aminocidos no-essenciais.
Indique os principais pontos de entrada desses aminocidos no ciclo de Krebs.
2. O que so aminocidos glicognicos e cetognicos? D exemplos.
3. Represente reaes catalisadas por transaminases, glutamato desidrogenase,
glutamina sintetase. Escreva sobre a importncia de cada uma dessas enzimas.
4. Pesquise, em outras fontes, razes que expliquem a toxicidade dos ons amnia.
5. Pense no tipo de alimento e no ambiente em que vivem os peixes, aves e
mamferos e procure responder: por que esses animais eliminam a amnia de
diversas maneiras, ou seja, peixes como amnia; aves como cido rico; mamferos
como uria?
INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA

Na prxima aula, ns detalharemos o processo de desintoxicao da amnia que
ocorre em mamferos e em muitos outros animais vertebrados; ns estudaremos
a formao da uria que ocorre em um processo cclico e, portanto, denominado
ciclo da uria.
94 CEDERJ
objetivo
AULA
Ciclo da uria
18

Entender as etapas de formao da uria.
Pr-requisito
Conhecimentos adquiridos na Aula 17.
BIOQUMICA II | Ciclo da uria
INTRODUO
Na Aula 17, voc aprendeu que a amnia um composto txico e que precisa
ser eliminada pelo organismo. Vimos que em vrios animais o produto de
excreo a uria. Na aula anterior, foram apresentadas algumas reaes
para a canalizao de ons amnio, de diversos aminocidos, at o fgado,
local onde o processo de desintoxicao ocorre. Falamos da importncia das
reaes de transaminao, desaminao oxidativa e do transporte da amnia
na forma de alanina e glutamina. Nesta aula, discutiremos sobre as reaes de
formao da uria, o principal produto final do catabolismo do nitrognio, no
homem. Um indivduo humano consome em torno de 300g de carboidratos,
100g de gordura e 100g de protenas, diariamente; excreta cerca de 16,5g
de nitrognio, sendo 95% na urina e 5% nas fezes. A uria pode constituir
cerca de 90% do nitrognio excretado. O ciclo da uria e o ciclo dos cidos
tricarboxlicos (TCA) foram descobertos por Hans Krebs e colaboradores. De
fato, o ciclo da uria foi descrito antes do ciclo TCA. Em mamferos, o ciclo da
Figura 18.1: Estrutura da

uria.
uria o mecanismo de escolha para a excreo de amnia. Veja a estrutura

da uria na Figura 18.1.
VISO GERAL DO PROCESSO DE SNTESE DA URIA

A sntese de 1 mol de uria requer 4 moles de ATP. Os dois
nitrognios de uma molcula de uria (Figura 18.1) so derivados de duas
fontes: amnia livre e amino grupo do aspartato. Cinco enzimas catalisam
o processo de formao da uria. Seis aminocidos so intermedirios
do ciclo. Alguns deles voc j conhece: arginina e aspartato. Citrulina,
ornitina e argino-succinato no so aminocidos proticos; existem
somente como aminocidos livres no organismo. N-acetil glutamato
funciona somente como um ativador enzimtico. Os outros funcionam
como carreadores dos tomos que finalmente formam a uria.
A amnia, primeira fonte de nitrognio, entra no ciclo aps a
condensao com o bicarbonato para formar carbamoil-fosfato, o qual
reage com a ornitina para formar citrulina. O aspartato, segundo doador
de nitrognio para formar uria, reage com a citrulina para formar arginosuccinato, o qual clivado para formar arginina e fumarato. A arginina
hidrolisada para formar uria e regenerar a ornitina. Como veremos,
a biossntese da uria um processo cclico, ou seja, um dos compostos (a
ornitina) consumido em uma reao e regenerado em outra (reaes 2
e 5, respectivamente, conforme apresentaremos mais adiante, nesta aula).
96 CEDERJ
18 MDULO 5
AULA
No h perda ou ganho efetivo de ornitina, de citrulina, argino-succinato

e arginina. Todavia, on amnio, CO2, aspartato e ATP so consumidos.
Algumas reaes da sntese da uria ocorrem na mitocndria, enquanto
outras ocorrem no citosol. A uria ento transportada para o rim e
eliminada na urina.
REAES DO CICLO DA URIA

1a reao: sntese do carbamoil-fosfato
A biossntese da uria comea com a condensao do dixido de
carbono, com a amnia, utilizando ATP para formar carbamoil-fosfato.
Tal reao catalisada pela carbamoil-fosfato sintase I (Figura 18.2).
A formao de carbamoil-fosfato requer dois moles de ATP.
Um ATP ativa o bicarbonato e o outro doa o grupo fosfato para formar
o carbamoil-fosfato. A carbamoil-fosfato sintase I ocorre na matriz
mitocondrial, usa amnia como doador de nitrognio e absolutamente
dependente de N-acetil glutamato para a sua atividade.
A ao conjugada da glutamato desidrogenase e da carbamoil-
!
Se voc tiver dvidas sobre
composto rico em energia,
releia as Aulas 1 e 2.
fosfato sintase I forma um intermedirio com alto potencial de

transferncia de grupo, ou seja, um composto rico em energia.
A sntese do carbamoil-fosfato, aparentemente
complexa, ocorre em etapas, como descrito a seguir. Na
primeira etapa, ocorre a reao do bicarbonato com o
ATP formando o carbonil-fosfato e ADP. Na segunda
etapa, a amnia desloca o ADP, formando carbamato
e ortofosfato. Finalmente, ocorre a fosforilao do
carbamato pelo segundo ATP, formando o carbamoilfosfato. A carbamoil-fosfato sintase I a enzima do
ciclo da uria, limitante da velocidade, ou marcapasso.
Essa enzima regulatria ativa somente na presena do
ativador alostrico N-acetil-glutamato, cuja ligao induz
uma mudana conformacional, que aumenta a afinidade
da enzima pelo ATP. Veja a Figura 18.2.
Figura 18.2: Reao catalisada pela carbamoil-fosfato sintase tipo I. A enzima

catalisa a reao em trs etapas.
CEDERJ 97
2a reao: carbamoil-fosfato mais ornitina formam a citrulina

A sntese da citrulina ocorre na mitocndria e catalisada pela
L-ornitina transcarbamoilase. Esta enzima catalisa a transferncia do
grupo carbamoil-fosfato para a ornitina, e com isso forma a citrulina.
Nesta reao, ocorre a liberao de fosfato inorgnico (Pi). Observe a
etapa 2 da Figura 18.3. A citrulina transportada da mitocndria para o
citosol, onde ocorrem as outras reaes do ciclo. A citrulina, o composto
utilizado nesta reao, foi formada no citosol e de l foi transportada para
a mitocndria. Tanto a entrada da ornitina para a mitocndria quanto a
sada da citrulina da mesma mitocndria, portanto, envolvem sistemas
de transporte pela membrana interna mitocondrial (Figura 18.4).
Figura 18.3: Ciclo da uria.

A reao 1, catalisada pela carbamoil-fosfato sintase I, foi apresentada na figura
anterior. As outras reaes encontram-se enumeradas de 2 a 5; a reao 2 ocorre
na mitocndria e catalisada pela ornitina transcarbamilase; as reaes de 3 a
5 ocorrem no citosol e so catalisadas pelas enzimas do citosol: respectivamente
arginino-succinato sintase; arginino succinase; arginase.
98 CEDERJ
3a reao: citrulina mais aspartato formam argino-succinato

A 3a reao catalisada pela argino-succinato sintase, que liga
o aspartato citrulina, via aminogrupo do aspartato (Figura 18.3),
e fornece o segundo nitrognio. Tal reao requer ATP e envolve a
formao intermediria de citrulil-AMP. O deslocamento subseqente
do AMP pelo aspartato, ento, forma o argino-succinato. Esta uma
reao de condensao, onde a argino-succinato sintase requer a hidrlise
de um ATP, o qual hidrolisado em adenosina monofosfato (AMP) mais
pirofosfato inorgnico (Ppi).
4a reao: a clivagem do argino-succinato forma arginina

e fumarato
A clivagem do argino-succinato, catalisada pela argino-succinase,
retm nitrognio no produto arginina e libera o esqueleto aspartato
como fumarato (Figura 18.3). A adio de gua ao fumarato forma
o L-malato, e a oxidao subseqente do malato, uma reao NAD+
dependente, forma o oxaloacetato. Essas duas reaes, embora anlogas
s do ciclo de Krebs (Aula 14), so catalisadas pela fumarase e pela
malato desidrogenase citoslicas. A transaminao do oxaloacetato pelo
glutamato, ento, forma novamente o aspartato. O esqueleto carbnico,
tanto de aspartato como de fumarato, atua como um carreador no
transporte de nitrognio do glutamato para um precursor da uria.
CEDERJ 99
18 MDULO 5
AULA
Figura 18.4:
Transporte de citrulina e de ornitina.
Em cada ciclo, a citrulina deixa a
mitocndria e a ornitina entra na
matriz mitocondrial. Protenas carreadoras presentes na membrana interna
mitocondrial facilitam o fluxo transmembrana de citrulina e de ornitina.
5a reao: a clivagem da arginina libera uria e regenera

ornitina
A reao final do ciclo da uria, a clivagem hidroltica do grupo
guanidino da arginina, catalisada pela arginase heptica, libera uria.
O outro produto, a ornitina, torna a penetrar na mitocndria heptica,
para participar das etapas adicionais do ciclo da uria. Veja a etapa 5
da Figura 18.3. Quantidades menores de arginase tambm ocorrem no
tecido renal, no crebro, nas glndulas mamrias e na pele.
Regulao da sntese de uria

A carbamoil-fosfato sintetase requer N-acetil glutamato como
ativador alostrico. Este composto sintetizado a partir do glutamato
e do acetil-CoA, pela enzima N-acetil glutamato sintetase, a qual, por
sua vez, ativada por arginina. Acetil-CoA, glutamato e arginina so
necessrios para fornecer intermedirios ou energia para o ciclo da
uria, e a presena de N-acetil-glutamato indica que todos eles esto
disponveis.
A induo das enzimas do ciclo da uria ocorre (10 a 20
vezes) quando a liberao de amnia ou de aminocidos para o
fgado aumenta. A concentrao dos intermedirios tambm tem um
papel importante nessa regulao. Um alto teor de protenas na dieta
(excesso de fornecimento de aminocidos), bem como situaes de
jejum (aumento da degradao de protenas endgenas) resultam na
induo de enzimas do ciclo da uria.
100 CEDERJ
18 MDULO 5
AULA
RESUMO
A maioria dos animais terrestres converte o excesso de nitrognio em uria

antes de excret-lo.
A uria menos txica do que a amnia.
O ciclo da uria ocorre principalmente no fgado.
Os dois tomos de nitrognio entram no ciclo da uria como NH3, produzido
principalmente pela glutamato desidrogenase e como N do aspartato.
A amnia (NH3) e o bicarbonato (HCO3-) que iro formar a uria so incorporados
inicialmente ao carbamoil-fosfato.
O ciclo da uria composto por cinco reaes.
A biossntese da uria um processo cclico, ou seja, um dos compostos (a ornitina)
consumido no incio do processo e regenerado na ltima reao. No h perda
ou ganhos efetivos de ornitina, de citrulina, argino-succinato e arginina.
O on amnio, o CO2, o aspartato e ATPs so consumidos.
Algumas reaes da sntese da uria ocorrem na mitocndria, enquanto outras
ocorrem no citosol.
A uria formada no fgado, transportada para o rim e eliminada na urina.
EXERCCIOS
1. Que composto formado no ciclo da uria pode ser utilizado no ciclo de Krebs?
2. Explique a razo pela qual so consumidas molculas de ATP no processo de
formao da uria.
3. Pesquise algumas explicaes para que os animais tenham escolhido diferentes
compostos para eliminar o nitrognio txico: amnia em animais aquticos;
uria em vertebrados e na maioria dos animais terrestres; cido rico em aves.
4. Faa um resumo das reaes do ciclo da uria.
CEDERJ 101
objetivos

Conhecer alguns erros do metabolismo geral
dos aminocidos e suas conseqncias.
Conhecer experincias que permitam
demonstrar que a uria sintetizada no fgado,
que os aminocidos fornecem nitrognio
para a molcula de uria, que a partir dos
aminocidos se forma a amnia e a partir da
amnia sintetizada a uria.
Analisar criticamente os resultados obtidos
em experincias realizadas ao longo do sculo
passado sobre o ciclo da uria, relacionando-os.
Explicar mudanas na atividade das
transaminases no soro, relacionando-as com
possveis leses celulares hepticas, cardacas e
erros metablicos.
AULA
Metabolismo
de aminocidos
19
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
INTRODUO
Na ltima aula, vimos os principais caminhos pelos quais o esqueleto

carbonado de aminocidos pode ser obtido e como o nitrognio excretado
em mamferos. Agora, conheceremos alguns defeitos metablicos relacionados
ao ciclo da uria e suas conseqncias. Ao final, apresentaremos uma srie
de temas para discusso. Estes temas so importantes, pois reproduzem
vrios experimentos cientficos a partir dos quais voc entender como o
ciclo da uria foi descoberto e por que o metabolismo de aminocidos to
importante. Como em aulas anteriores, o contedo das discusses no
Figura 19.1: Voc sabe o

que o teste do pezinho
e o que ele tem a ver com
o metabolismo de aminocidos? Veja em: http:
//www.yourgenesyourh
ealth.org/ygyh/mason/
gyh.html.syndrome=pku
essencial para se entender o ciclo da uria ou os erros inatos do metabolismo.

apenas uma oportunidade de refletir e pensar sobre o universo cientfico,
sua lgica e suas histrias.
ERROS INATOS DO METABOLISMO DE AMINOCIDOS E

SUAS CONSEQNCIAS
Desordens do ciclo da uria
A ausncia completa de qualquer uma das enzimas do ciclo da
uria resulta na morte do indivduo pouco tempo aps o seu nascimento.
Entretanto, em indivduos vivos, tm sido identificados quadros clnicos
Figura 19.2: Recm-nascidos so vtimas preferenciais das desordens
do ciclo da uria, que
podem acarretar danos
cerebrais ou mesmo levar
morte.
que resultam da deficincia dessas enzimas, quer seja por uma reduo
no nvel de expresso, quer seja por uma alterao na atividade. Essas
deficincias so chamadas desordens do ciclo da uria ou simplesmente
DCUs, erros inatos do metabolismo. Em geral esses erros so doenas
raras, mas representam causa substancial de danos cerebrais e morte entre
recm-nascidos e crianas. A estimativa exata da incidncia de DCUs
desconhecida e, provavelmente, subestimada, pois ainda hoje existe
grande dificuldade em diagnosticar tais desordens, e muitas crianas
morrem antes de um diagnstico definitivo.
104 CEDERJ
19 MDULO 5
AULA
Os sintomas aparecem nas primeiras 24 horas de vida. O recmnascido mostra-se inicialmente irritado e, a seguir, aparecem vmitos
e um aumento da letargia. Logo depois, observa-se hipotonia (tnus
muscular deficiente) e angstia respiratria que podem levar ao coma.
Em alguns casos, os sintomas podem aparecer tardiamente durante a
infncia ou mesmo durante a vida adulta.
Existem sete principais DCUs. Cada uma delas recebe uma
denominao relacionada s iniciais da enzima deficiente. Assim:
CPS- deficincia na carbamoil-fosfato sintetase.
NAGS- deficincia na N-acetilglutamato sintetase.
OTC- deficincia na ornitina transcarbamilase.
AS- deficincia na cido arginino-succnico sintetase (citrulinemia).
AL/ASA- deficincia na arginino-succinato liase (arginino-succnico
aciduria).
AG- deficincia na arginase.
AO- deficincia na ornitina aminotransferase.
As deficincias so, quase todas, conhecidas como hiperamonemias, porque o diagnstico detecta um alto nvel de amnia no sangue.
Isso no ocorre apenas no caso da deficincia de ornitina aminotransferase.
Na pgina http://www3.ncbi.nlm.nih.gov/Omim/searchomim.html voc
pode entrar com o nome da doena gentica (em ingls) e ver sintomas,
caractersticas metablicas e diagnstico laboratorial. Esse um banco de
dados do National Center for Biotechnology Information. Neste centro
de informaes, voc pode acessar o Online Mendelian Inheritance in
Man da Johns Hopkins University. D uma olhada quando puder.
CEDERJ 105
Veja na Tabela 19.1, um resumo de algumas dessas desordens.
Tabela 19.1: Principais DCUs.

DCU
Enzima Deficincia
Sintomas/Comentrios
Hiperamonemia do
tipo I - CPS
Carbamoil-fosfato
sintetase I
24h - 72h aps o nascimento o recm-nascido torna-se letrgico,

necessitando de estmulo para comer, apresentando vmito,
aumento da letargia, hipotermia e hiperventilao; o recmnascido ir morrer caso no ocorra o diagnstico por medidas
do nvel de amnia srica e interveno apropriada: tratamento
com arginina que ativa N-acetilglutamato sintetase.
Deficincia de Nacetilglutamato
sintetase - NAGS
N-acetilglutamato
sintetase
Hiperamonemia severa; hiperamonemia suave associada com

coma profundo, acidose, diarria recorrente, ataxia, hipoglicemia, hiperornitinemia. Tratamento inclui administrao de
carbamoil-glutamato para ativar a CPS.
Hiperamonemia do
Tipo 2 - CPS
Ornitina transcarbamilase
A DCU mais comum ligada ao cromossomo X. Nveis de amnia

e aminocidos elevados no soro; aumento do cido ortico no
soro devido ao carbamoil-fosfato mitocondrial ser liberado no
citoplasma e incorporado em nucleotdeos do tipo pirimidina,
o que leva a um excesso de produo de produtos catablicos.
Tratamento com dieta rica em carboidratos e pobre em protenas; detoxificao de amnia com fenilacetato de sdio ou
benzoato de sdio.
Citrulinemia
clssica - AS
Arginino-succinato
sintetase
Hiperamonemia episdica, vmito, letargia, ataxia, convulso,

coma eventual. Tratamento com administrao de arginina para
aumentar a excreo de citrulina e tambm com benzoato de
sdio para detoxificao de amnia.
Arginino-succnico
acidria - AL/ASA
Arginino-succinato
liase (argininosuccinase)
Sintomas episdicos similares citrulinemia clssica; nveis de

argino-succinato elevados no plasma e fluido espinhal cerebral.
Tratamento com arginina e benzoato de sdio.
HiperargininemiaAG
Arginase
DCU rara, quadriplegia progressiva e retardo mental; alto

nvel de amnia e arginina no fluido espinhal e no soro; altos
nveis de arginina, lisina e ornitina na urina. Tratamento inclui
dieta de aminocidos essenciais, excluindo arginina e dieta
pobre em protenas.
Neurotoxicidade associada amnia
Os efeitos do aumento dos nveis de amnia circulante so vrios.

A alterao do pH do sangue apenas um deles. Mas, o mais importante
que a amnia pode atravessar a barreira hematoenceflica (BHE).
No crebro, ela pode ser convertida em glutamato, por ao da enzima
Figura 19.3: A barreira
hematoenceflica (BHE).
glutamato desidrogenase. Entretanto, essa ao depleta, ou seja, faz

com que o crebro perca substncias importantes como -cetoglutamato,
o substrato da enzima. Como conseqncia deste fato, h uma diminuio
dos nveis de oxaloacetato e uma queda drstica na atividade do ciclo do
cido ctrico. Voc pode imaginar o que isso significa para o crebro?...
A queda da atividade respiratria causa srios e irreparveis danos aos
tecidos neurais, levando-os morte. Alm disso, o excesso de glutamato
106 CEDERJ
19 MDULO 5
AULA
posteriormente ativa a formao de glutamina. Isso resulta numa queda

da concentrao dos estoques de glutamato. O glutamato , no tecido
neural, um neurotransmissor e tambm um substrato para a sntese de
outro neurotransmissor, o -aminobutirato.
Fenilcetonria (PKU)
Alm dos erros inatos ligados diretamente s enzimas do ciclo da
uria, algumas outras doenas genticas so conseqncias de outras
Figura 19.4: Fenilcetonria a incapacidade

de converter fenilalanina
em tirosina.
alteraes no metabolismo de aminocidos. A fenilcetonria (PKU)

uma delas, que se caracteriza por uma inabilidade do corpo de utilizar
o aminocido essencial, fenilalanina. A PKU ocorre quando a criana
herda dois genes mutantes para a enzima fenilalanina hidroxilase
(PAH). Essa enzima, normalmente, converte molculas de fenilalanina
em tirosina. Tal reao usa O2 como substrato e requer o co-fator tetrahidrobiopterina (THB) como agente redutor. Fenilalanina hidroxilada
produzindo tirosina, enquanto o THB transfere tomos de hidrognio
Figura 19.5: A estrutura

da fenilalanina hidroxilase (PAH).
para reduzir um segundo tomo de hidrognio em gua. No processo,

o THB oxidado a diidrobiopterina (DHB).
Sem esta enzima, a fenilalanina e os produtos de sua
Uma das causas do autismo

a PKU no tratada!
Para saber mais sobre
autismo, ver
h t t p : / / w w w. a u t i s m society.org
quebra por outra rota enzimtica se acumulam no sangue

e nos tecidos do corpo. Um aumento na concentrao
de fenilalanina no sangue leva sua transaminao em
fenilpiruvato ou descarboxilao a feniltilamina.
Figura 19.6: Estrutura da

biopterina, co-fator da PAH.
CEDERJ 107
Uma deficincia da fenilalanina hidroxilase causa acmulo de

fenilalanina, de cido fenilpirvico, de fenilacetato e outros derivados. Um
excesso de fenilalanina bloqueia o
seqestro de outros aminocidos
no crebro. O cido fenilpirvico
inibe a piruvato descarboxilase no
crebro e interfere na formao
de mielina.
A inabilidade de remover
o excesso de fenilalanina do
sangue, e o conseqente acmulo
daqueles produtos durante a infncia, produz uma variedade de problemas, incluindo o retardo
mental. Felizmente, um teste simples (o teste do pezinho) feito logo aps o nascimento pode
identificar esse defeito gentico e, com muita ateno quantidade de fenilalanina em sua dieta,
a criana pode desenvolver-se normalmente.
Fenilalanina
Figura 19.7: Produtos catablicos da fenilalanina que

so acumulados na fenilcetonria.
108 CEDERJ
A seguir apresentaremos alguns temas para voc pensar em

casa e discutir com seus colegas ou com seu tutor no plo. Vrios
dos experimentos que sero apresentados so parte da histria que
nos levou ao conhecimento mostrado, nas aulas anteriores, sobre o
metabolismo de aminocidos. A idia dessas discusses, como voc j
sabe, desenvolver a lgica e o pensamento cientfico. Encare como
um quebra-cabea e ento, divirta-se...
Figura 19.8: Ces foram

e so at hoje utilizados
para experimentos como
este apresentado na
questo.
Tema 1. Suponha uma populao de animais que requerem fenilalanina

na dieta, mas no requerem tirosina para o seu crescimento normal. Antes
do incio da experincia, eles foram mantidos com uma dieta carente em
tirosina e fenilalanina.
1.1. Desenhe as curvas que voc esperaria encontrar, mostrando a
evoluo do peso mdio da populao de animais, nos seguintes
casos:
a) Administrao de uma dieta de tirosina e uma semana aps uma dieta
de fenilalanina.
Para lembrar
Bioqumica I...
Sabendo-se que o cido
glutmico um aminocido e o cido pirvico
no, identifique quem
quem nas duas figuras
abaixo.
b) Administrao de uma dieta de fenilalanina e uma semana aps,

supresso dessa dieta e administrao de uma dieta de tirosina.
c) Administrao dos dois aminocidos juntos e supresso de ambos
aps uma semana.
d) Administrao dos dois aminocidos juntos e supresso de fenilalanina
aps uma semana.
e) Administrao dos dois aminocidos juntos e supresso de tirosina
aps uma semana.
1.2. Discuta os conceitos de aminocidos essenciais e no-essenciais,
lembrando as aulas de Bioqumica I e com base nas informaes
dadas no incio da questo.
CEDERJ 109
19 MDULO 5
Pense
sobre isso!
AULA
Temas para reflexo e discusso e um pouco da histria
Tema 2. Incubando-se homogeneizados de diferentes tecidos com os

cidos glutmico e pirvico, observa-se que:
a) O cido glutmico desaparece em parte, e aparece o aminocido
alanina.
b) O cido pirvico tambm desaparece em parte, e aparece o cido
-cetoglutarato. A velocidade desta reao aumentada aps a adio
de fosfato de piridoxal (vitamina B6), que no consumido durante a
reao.
2.1. Monte o esquema de reao que os dados sugerem e analise o
provvel papel da vitamina B6.
2.2. A constante de equilbrio desta reao prxima de 1. Qual seria
a conseqncia deste fato?
Tema 3. A enzima L-glutamato desidrogenase apresenta um comportamento
alostrico, existindo em duas formas (monomrica menos ativa, e
polimrica mais ativa) e sendo regulada por ATP, GTP, ADP e GDP. Dois
desses moduladores so ativadores e induzem a polimerizao da enzima.
3.1. Diga quais e por qu.
3.2. Faa um grfico de velocidade enzimtica, em funo da concentrao
de cido glutmico na presena e na ausncia de ativador. Discutir
o papel dessa enzima na economia metablica.
Tema 4. Qual o significado da elevao do nvel de transaminases no
Figura 19.9: Estrutura
tridimensional da aspartato aminotransferase.
http://cwx.prenhall.com/
horton/medialib/media_
portfolio/17.html
soro? Faa um grfico mostrando a evoluo do nvel de GTP no soro de

um paciente com hepatite, que primeiro vai melhorando e aps um ms
sofre uma recada. Discuta o papel das transaminases no metabolismo
geral dos aminocidos.
Tema 5. Quando o fgado de um cachorro extirpado, ele pode viver alguns
dias, desde que alimentado com uma dieta sem protenas. No entanto,
morre rapidamente se a carne incorporada dieta. Na hora da morte,
ele apresenta elevadas concentraes de NH4+ no sangue e na urina e,
praticamente, nada de uria nos mesmos lquidos biolgicos. O que sugerem
estes dados? Que experincias voc proporia para testar sua hiptese?
110 CEDERJ
19 MDULO 5
AULA
Tema 6. Observe a seqncia de resultados abaixo:

a) Entre 1894-1897, CHARLES RICHET verificou que o fgado que foi
macerado e deixado para apodrecer formava uria, cuja quantidade
aumentava medida que o tempo transcorria, com simultnea e notvel
liberao de arginina.
b) Em 1904, Kossel e Darkin mostraram a existncia de um fermento obtido
a partir de contedo intestinal, capaz de catalisar a reao a seguir:
c) Na mesma poca, Antnio Clementi mostrou que esse fermento

(enzima) estava presente no fgado de mamferos (nos quais a uria
a principal forma de excreo de nitrognio) e ausente em pssaros e
rpteis (que eliminam nitrognio sob forma de cido rico).
d) Em 1917, Wilhelm Loffler mostrou que a produo de uria estava
associada ao consumo de oxignio no fgado.
e) Em 1931, Kase no teve xito quando tentou produzir uria numa
preparao acelular de fgado.
6.1. Que concluses voc tiraria dessas experincias?
Na poca, embora o papel e a relevncia da arginase na formao de
uria fossem evidentes, no era quantitativamente possvel acreditar que
a grande formao de uria no fgado se processasse somente atravs da
hidrlise da arginina presente nas protenas. Por outro lado, existiam
dados que indicavam que outros aminocidos eram a fonte de uria e
que esta podia ser sintetizada a partir de amnia.
CHARLES RICHET
Nasceu em Paris em
1850. Tornou-se
doutor em Medicina
em 1869, doutor em
Cincias em 1878 e
professor de Fisiologia
da Faculdade de
Medicina em 1887.
Ganhou o prmio
Nobel de Medicina
em 1913.
medicine/laureates/
1913/richet-bio.html
6.2. Discuta esses dados e sugira uma hiptese.
Figura 19.10: A estrutura

do cido rico, principal
forma de excreo de
nitrognio em pssaros
e rpteis.
CEDERJ 111
Tema 7. Em 1932, Hans Krebs e Kurt Henseleit fizeram um conjunto

de experincias memorveis para testar essa hiptese. Eles incubaram
fatias de fgado num aparelho de Warburg, na presena de lactato e de
tampo bicarbonato a pH 7,4 e adicionaram quantidades conhecidas de
diferentes aminocidos. Observaram que a produo de uria ocorria,
como esperado, de acordo com o contedo de N da molcula dos
diferentes aminocidos. No caso da arginina, no entanto, a produo
ESTEQUIOMETRIA
A palavra
estequiometria deriva
do grego stoicheon,
que significa a
medida dos elementos
qumicos, ou seja,
as quantidades
envolvidas de cada
substncia em uma
reao qumica. Veja
a discusso da pgina
http://www.cdcc.sc.
usp.br/quimica/
experimentos/
estequi.html
de uria era superior quela observada pela ESTEQUIOMETRIA da reao.

O que sugerem esses dados? Que experincia voc faria? Pense
bem antes de passar ao ponto seguinte.
Tema 8. Numa outra experincia, o resultado foi mais surpreendente
ainda. Incubando fatias de fgado na presena de lactato, e adicionando
12mg/ml de amnia, eles encontraram uma produo de uria de
1,94mm3 de uria-CO2 por mg de tecido seco por hora (determinada
manometricamente aps hidrlise com urease que libera CO2 e NH3).
Quando adicionaram ornitina (2mg/ml) a produo de uria subiu para
9,32mm3.
8.1. Por que este resultado era inesperado? O que voc postularia ento?
8.2. Olhe agora para as molculas de arginina e ornitina, cujas estruturas
esto na atividade 6b. Como encaixar esses resultados com os j
discutidos at agora?
8.3. Torne a olhar as molculas de arginina e ornitina. O que voc
procuraria agora? Por qu?
112 CEDERJ
19 MDULO 5
AULA
Tema 9. Em 1930, Mitsouri Tada chegou frmula de um composto

chamado citrulina, que j havia sido isolado do suco da melancia em
1924.
9.1. O que, nesta estrutura, chama a ateno?

9.2. O que voc faria com esta informao, ou seja, com aquilo que lhe
chamou a ateno?
9.3. Proponha uma experincia predizendo seu resultado.
9.4. Compare agora as frmulas da citrulina e da arginina e tire uma
nova concluso.
9.5. Descreva o processo de formao de uria no fgado, empregando
apenas os conhecimentos obtidos at aqui.
Tema 10. Continuando a histria... Em 1954, Sarah Rathner mostrou
que, na converso de citrulina em arginina, o nitrognio adicionado no
era proveniente diretamente do NH4, mas de uma transferncia catalisada
enzimaticamente. O grupo amino do cido asprtico era exclusivamente
responsvel por um dos nitrognios da molcula, numa reao que
requeria ATP. Nesta reao, forma-se um composto intermedirio no
fosforilado, AMP e pirofosfato (PPi), que rapidamente hidrolisado por
uma pirofosfatase.
Em 1955, Mary Ellen Jones, Leonard Spector e FRITZ LIPMANN
mostraram que a ornitina no reagia diretamente com NH3 e CO2 para
dar citrulina, mas com o carbamil-fosfato, um intermedirio fosforilado
formado a partir de NH3,CO2 e ATP.
Utilize o conhecimento adquirido at agora, para descrever
todo o processo.
FRITZ ALBERT
LIPMANN
Nasceu na Alemanha
em 1899. Cientista
e mdico ganhador
do prmio Nobel de
Fisiologia e Medicina
de 1953.
medicine/laureates/
1953/lipmannbio.html
CEDERJ 113
RESUMO
Voc viu nesta aula alguns dos erros inatos do metabolismo de aminocidos que
levam a doenas que, em muitos casos, acarretam a morte de recm-nascidos,
crianas e adultos. A maior parte dos danos provocados por estas desordens
do ciclo da uria conseqncia da toxicidade dos altos nveis de amnia
(hiperamonemias), principalmente no crebro. Nesta aula, pudemos tambm
discutir aspectos experimentais do ciclo da uria, mostrando os principais pontos
da histria da elucidao desta via metablica.
Nesta aula no apresentaremos exerccios: voc j usou neurnios suficientes
por ora.
114 CEDERJ
objetivo
AULAS
Degradao
de lipdeos
20/21

Conhecer os mecanismos e as reaes envolvidas
na degradao dos cidos graxos, em especial do
palmitato.
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
INTRODUO
Vimos em Bioqumica I como extenso o grupo dos lipdeos. Existem vitaminas

de natureza lipdica, como as vitaminas A, D; existem o colesterol e outros
fosfolipdeos que formam as membranas das clulas; existe a testosterona, as
ceras, os sais biliares, enfim, uma enorme variedade de lipdeos.
Nesta aula, vamos conhecer como os lipdeos so degradados quando nosso
organismo precisa de energia. Entretanto, ao contrrio do que era de se esperar,
no so todos os lipdeos que so metabolizados com o intuito de fornecer
energia para o nosso organismo, mas sim um grupo particular de lipdeos
denominado cidos graxos. Os cidos graxos (AG) ficam acumulados no tecido
adiposo. L esto aquelas gordurinhas ou pneuzinhos que tanto incomodam
a gente! Quando fazemos regime e, portanto, comemos menos calorias do
que precisamos, nosso organismo vai buscar energia nas suas reservas, isto ,
nas gorduras do tecido adiposo. Estas gorduras so quebradas e utilizadas
como fonte de energia. Nesse caso, a gente at emagrece!
Funciona igualzinho a uma caderneta de poupana. Quando nosso salrio
menor do que nossas contas a pagar, precisamos usar nossas reservas de
dinheiro para saldar nossas dvidas. O organismo faz o mesmo: se comemos
menos do que o necessrio para nos mantermos funcionando, no tenha
dvida! Utilizamos nossas reservas de energia e a que entram os lipdeos,
mais especificamente os cidos graxos!
Agora vamos mergulhar nas nossas clulas e ver como a coisa acontece!
116 CEDERJ
MDULO 6
20/21
OS CIDOS GRAXOS SO ESTOCADOS NOS ADIPCITOS
AULAS
O tecido adiposo formado por clulas que se chamam adipcitos.

Estas clulas so curiosas, ao microscpio eletrnico, pois possuem
uma enorme vescula cheia de gordura dentro do seu citoplasma. Veja
a figura abaixo:
Figura 20.1: Adipcito.
Nestas gotas fica armazenado o triacil glicerol (TAG). Voc j

estudou esta molcula em Bioqumica I, na Aula 27. Se estiver esquecido,
d uma olhada rpida nessa aula.
O TAG nada mais do que trs molculas de cido graxo unidas
a uma molcula de glicerol. O prprio nome j diz isso para a gente:
triacil glicerol! Veja na figura abaixo o TAG.
Figura 20.2: Triacil glicerol.
CEDERJ 117
Quando precisamos de energia, nosso organismo libera um

hormnio chamado glucagon. Este hormnio age como uma espcie
de maestro sinalizando para o organismo que a hora de utilizar suas
reservas. Nesta situao, o glicognio e os lipdeos devem passar a ser
utilizados como combustvel. Poderamos dizer, ento, que o glucagon
o hormnio da fome, isto , ele liberado quando nosso organismo
est com fome. Mas no se preocupe com isto agora, pois, mais frente,
voc estudar melhor este hormnio e o que ele faz no nosso organismo
quando liberado pelo pncreas e cai na corrente sangnea. No momento,
precisamos saber que esse hormnio liberado to logo a glicemia (taxa
de acar no sangue) cai.
O glucagon circulante no sangue, ento, se liga a um receptor
(protena) presente na membrana do adipcito e dispara uma srie de
reaes que levam ativao de uma enzima chamada lipase, que est
dentro do adipcito. Tambm veremos em aulas mais frente que reaes
so essas disparadas pelo glucagon. Aguarde!
Mas o que ento acontece quando esta lipase ativada pelo glucagon? A lipase uma enzima que degrada os TAG. Em outras palavras,
poderamos dizer que a lipase uma espcie de tesoura que corta o TAG
em pedaos. Veja:
triacil glicerol lipase
3 cidos graxos + 1 glicerol
Conforme vimos na aula de lipdeos em Bioqumica I (Aula 26),

os AG tambm so um grupo muito grande de molculas, podendo ter
4, 5, 6, 7, 8,... 22, 23, 24... tomos de carbono. Alm disto, eles podem
possuir apenas ligaes simples (AG saturados) ou podem possuir dupla
ligao (AG insaturados). No caso da espcie humana, o AG majoritrio
estocado como reserva o palmitato. O palmitato um AG que possui
16 tomos de carbono e nenhuma dupla ligao. Passaremos a utilizar
o palmitato como exemplo a partir daqui, pois ele que degradado na
espcie humana quando precisamos de energia.
118 CEDERJ
MDULO 6
20/21
AULAS
Veja a Figura 20.3, que resume o at ento descrito:
Figura 20.3: O glucagon

se liga a um receptor
de membrana e ativa a
lipase. Veja a molcula
do palmitato.
Agora, o palmitato livre sai dos adipcitos e cai na corrente sangnea.

Como os AG de um modo geral so insolveis em soluo aquosa (e o
sangue uma soluo aquosa), eles no podem viajar livremente pela
corrente sangnea. Existe uma protena chamada albumina que possui
uma espcie de bolso que aloja o palmitato, de modo que eles se escondem
da gua e viajam tranqilamente pelo sangue. Poderamos dizer que a
albumina funciona como uma espcie de nibus para o palmitato.
O palmitato , ento, distribudo por todos os tecidos do corpo.
Vamos agora tomar como exemplos o fgado e o msculo para
estudar o destino do palmitato que l chega.
CEDERJ 119
Os AG chegam aos hepatcitos e aos micitos

Depois de passar pela membrana dos hepatcitos (clula heptica)
e dos micitos (clula muscular), o palmitato levado para a mitocndria,
que o local da clula onde ele ser degradado. Nas mitocndrias, esto as
enzimas responsveis pelo processo de quebra ou degradao dos AG.
Entretanto, a entrada do palmitato para dentro das mitocndrias
ocorre de maneira curiosa. Vejamos: ainda fora da mitocndria, o palmitato sofre ativao recebendo uma molcula de coenzima A. Quem pendura esta molcula de coenzima A (CoA) no palmitato uma protena
chamada acil-CoA sintase. Entretanto, esta reao ocorre com o consumo
simultneo de uma molcula de ATP, ou seja, pendurar a coenzima A no
palmitato no de graa, no! A clula precisa pagar um preo para isso
e, nesse caso, utiliza um ATP. O palmitato com a coenzima A pendurada
passa a se chamar palmitoil-CoA. Veja como a reao:
Acil-CoA sintase
palmitato + CoA + ATP
palmitoil-CoA + AMP + PPi
Observe que o ATP quebrado em AMP e PPi (pirofosfato), o que

indica que duas ligaes de alta energia so consumidas para pendurar a CoA
no palmitato. (O ATP tem trs ligaes de alta energia. Se uma for utilizada,
forma-se ADP + Pi. Se duas forem utilizadas, forma-se AMP + PPi).
Embora o palmitato j esteja ativado, ou seja, na forma de
palmitoil-CoA, ele ainda necessita passar por outras reaes antes de
entrar, de fato, na matriz mitocondrial.
Existe uma outra enzima que fica prxima membrana interna
da mitocndria que se chama carnitina-acil transferase I (CAT I). Essa
enzima reconhece o palmitoil-CoA e troca a CoA, que est pendurada
no palmitoil, por carnitina. Forma-se, ento, palmitato-carnitina e a
CoA liberada no citoplasma da clula, podendo ser usada outra vez
pela acil-CoA sintase. Veja.
CAT I
palmitoil-CoA + carnitina
palmitato-carnitina + CoA
Agora, temos o palmitato ligado carnitina. A carnitina

uma pequena molcula conforme mostrado ao lado. Este complexo
(palmitatocarnitina) reconhecido por um translocador, que est presente
na membrana interna da mitocndria.
120 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Esse translocador, como o prprio nome diz, transloca o palmitato-
AULAS
carnitina para dentro da mitocndria, colocando, ao mesmo tempo,

carnitina livre para fora da mitocndria.
Ufa!!! Aps esta seqncia de reaes, o palmitato-carnitina finalmente chega dentro da mitocndria. Vale a pena lembrar que isto ocorre
porque a mitocndria possui duas membranas e, portanto, o palmitato
precisa cruzar essas duas membranas antes de chegar matriz mitocondrial e se encontrar com as enzimas responsveis pela sua degradao.
Dentro da mitocndria, o palmitato-carnitina que chega precisa
ser reconvertido em palmitoil-CoA de novo e, para isso, precisa perder
a carnitina e ganhar novamente uma coenzima A (CoA).
Dentro da mitocndria existe uma enzima chamada carnitina
acil transferase II (CAT II) que faz essa reao. Veja:
CAT II
palmitato-carnitina + coenzima A
palmitoil-CoA + carnitina
Veja a figura abaixo que traduz o at ento descrito.
Figura 20.4: Entrada do palmitato para dentro da mitocndria.
Para tentar compreender melhor a entrada do palmitato na

mitocndria, poderamos imaginar que, para fazer isso, a molcula
precise comprar um passaporte, da mesma forma que ns precisamos
desse documento para viajar para o exterior. Assim, primeiro o palmitato
ativado, e para isso a clula gasta energia na forma de ATP. Em
seguida, o palmitato recebe o passaporte, ou seja, a carnitina, que
permite sua entrada na mitocndria, j que a Polcia Federal (no caso
o translocador) s permite que molculas entrem na mitocndria se
possurem passaporte.
CEDERJ 121
Obviamente, a pergunta que no quer calar : por que o palmitato no

entra na mitocndria ligado CoA, j que l dentro ele vai se ligar
novamente a essa coenzima? Se olharmos a molcula de coenzima A,
veremos como ela enorme! Seu tamanho faz com que ela no atravesse
as membranas biolgicas. Logo, o palmitoil-CoA que se forma fora da
mitocndria no poderia jamais entrar nessa organela devido ao tamanho
da coenzima A. Alm disso, veremos, com o passar das aulas, a importncia da coenzima A nas reaes metablicas da clula. Existe uma
populao de coenzima A no citoplasma e outra dentro da mitcondria.
A clula no mistura essas duas populaes para no prejudicar as
reaes que l ocorrem. Se o palmitoil-CoA entrasse na mitocndria
na forma de palmitoil-CoA, levaria consigo a CoA do citoplasma para
dentro da mitocndria, misturando as populaes de CoA. Sendo assim,
a CoA pendurada na molcula do palmitato apenas para que a CAT I
possa troc-la por carnitina, despejando de volta a CoA do citoplasma
no citoplasma.
Agora temos palmitoil-CoA dentro da mitocndria pronto para
seguir seu destino. Vejamos.
122 CEDERJ
MDULO 6
20/21
AULAS
O destino do palmitoil-CoA dentro da mitocndria:

a -oxidao
Uma vez na matriz mitocondrial, o palmitoil-CoA passar por
uma seqncia de quatro reaes, conhecida como -oxidao, conforme
Figura 20.5:
Figura 20.5: A -oxidao.

Em cada reao, preste
ateno na caixa em torno
do pedao da molcula que
sofre transformao.
CEDERJ 123
Na primeira reao, uma enzima chamada acil-CoA desidrogenase

retira dois H da molcula do palmitoil-CoA e os entrega para o FAD (flavina
adenina dinucleotdeo), formando FADH2. Dizemos que a molcula que
perde os H sofre oxidao, ao passo que a molcula que recebe esses H
sofre reduo. Assim, o palmitoil-CoA se oxida enquanto o FAD se reduz.
Como produto desta primeira reao, forma-se o trans-2-enoil-CoA.
Este indica que se forma uma dupla ligao entre os carbonos 2 e 3
da molcula do palmitoil-CoA.
Na segunda reao, a enzima enoil-CoA hidratase, conforme seu prprio nome sugere, hidrata o enoil-CoA formando o L-3-hidroxiacil-CoA.
Observe que nesta hidratao, a molcula de gua inserida de modo que
a hidroxila (OH) fica pendurada no carbono 3 e o H no carbono 2. Assim,
a dupla ligao se desfaz. Veja com ateno a Figura 21.5.
Na terceira reao da -oxidao, a enzima L-3-hidroxiacil-CoA
desidrogenase oxida mais uma vez a molcula, mas, neste caso, utiliza NAD+,
que, ao receber os H da molcula do hidroxiacil-CoA, passa a NADH + H+.
Observe que se forma uma nova dupla ligao na molcula, agora entre o
carbono 3 e o oxignio. Este composto se chama 3-cetoacil-CoA.
At agora, aps estas trs reaes, o palmitoil-CoA continua com
seus 16 carbonos, no tendo sofrido nenhuma quebra em sua molcula.
justamente na quarta e ltima reao da -oxidao que se d a quebra
da molcula propriamente dita. Esta reao catalisada pela -ceto tiolase
ou tiolase. Como produtos desta reao temos o miristoil-CoA (cido
graxo com 14 tomos de carbono) e o acetil-CoA, que tem dois tomos
de carbono. Observe que a tiolase, ao introduzir uma nova coenzima
A na molcula, capaz de quebrar a molcula do 3-cetoacil CoA, que
tem 16 tomos de carbono. Esta enzima recebe esse nome porque ela
capaz de fazer uma lise (quebra) atravs da insero de um grupamento
tiol (no caso, a CoA). Lembre-se que uma hidrolase , por analogia, uma
enzima capaz de fazer uma lise pela entrada de uma molcula de gua,
assim como uma fosforilase uma enzima capaz de fazer uma lise pela
entrada de um grupamento fosforil.
Poderamos resumir as quatro reaes da -oxidao da seguinte
maneira:
1o oxidao mediada pelo FAD
2o hidratao
3o oxidao mediada pelo NAD+
4o tilise
124 CEDERJ
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E agora? O que fazemos com o novo cido graxo formado, que
AULAS
tem 14 tomos de carbono (miristoil-CoA)? Ele passa por uma nova

seqncia de quatro reaes, idnticas s que acabamos de descrever, e,
no final, forma-se uma nova molcula de acetil-CoA (que possui dois carbonos) e um cido graxo com 12 tomos de carbono. E agora? A mesma
coisa! Esse cido graxo com 12 carbonos passa por uma nova rodada
de -oxidao, gerando uma nova acetil-CoA e um outro cido graxo
com 10 carbonos e assim sucessivamente at que todo o palmitoil-CoA
vire uma sopa de acetil-CoA. Uma vez que o palmitoil-CoA apresenta
16 carbonos, podemos dizer que a sua completa oxidao atravs da
-oxidao gera 8 molculas de acetil-CoA (8 x 2 =16); 7 molculas de
FADH2 e 7 molculas de NADH + H+. Em suma temos:
Palmitoil-CoA + 7 FAD + 7 NAD+ + 7 CoA + 7 H2O
8 acetil-CoA + 7 FADH2 + 7 NADH + 7 H+
DESTINOS DOS PRODUTOS DA -OXIDAO

Podemos dizer que os produtos da -oxidao so todos os
compostos que esto escritos no lado direito da equao acima. Vejamos
agora o destino de cada uma dessas molculas:
Acetil-CoA: conforme voc j viu na aula sobre metabolismo de
acares, o acetil-CoA uma molcula central no metabolismo celular. O
acetil-CoA a porta de entrada do ciclo de Krebs, juntando-se ao oxalacetato (que tem 4 carbonos) para formar o citrato (que tem 6 carbonos).
Esta a primeira reao deste ciclo. Desta forma, o acetil-CoA formado
a partir da -oxidao pode entrar no ciclo de Krebs, mas para que isto
ocorra necessrio que haja oxalacetato disponvel. Esta informao
muito importante, conforme veremos a seguir.
Vamos agora investigar o que acontece com o acetil- CoA que se
forma no msculo e no fgado a partir da -oxidao. Lembre-se que
estes tecidos so capazes de degradar cidos graxos no jejum ou em
intenso exerccio, quando a demanda de energia muito grande, como
no caso do msculo.
CEDERJ 125
Nesse caso, todo o acetil-CoA formado a partir do palmitoil-CoA

jogado no ciclo de Krebs, uma vez que a concentrao de oxalacetato
l presente permite que isto ocorra. A entrada do acetil-CoA no ciclo
de Krebs vai gerar NADH+ + H+ e FADH2, que vo para a cadeia de
transporte de eltrons transferir seus eltrons gerando ATP, conforme
j vimos em aulas anteriores.
No fgado, acontece uma situao muito particular, j que este
rgo, no momento de jejum, utiliza o oxalacetato para produzir glicose,
conforme veremos na aula sobre gliconeognese mais frente. Desta
forma, o acetil-CoA que vem da oxidao do palmitato no fgado no
pode ser jogado no ciclo de Krebs, j que, conforme vimos, para que
isso ocorra necessrio que haja oxalacetato disponvel. O que fazer,
ento, com este acetil-CoA formado? O acetil-CoA transformado em
corpos cetnicos, conforme veremos logo a seguir.
FADH2 e NADH: antes de vermos como se formam os corpos
cetnicos no fgado, vamos analisar o destino dos 7 FADH2 e 7 NADH
formados durante a -oxidao. Voc teria alguma sugesto para esta
questo? Ou seja, qual ser o destino destas duas coenzimas, o FADH2
e o NADH? A resposta simples. Essas coenzimas, na forma reduzida,
so direcionadas para a cadeia de transporte de eltrons, onde entregaro
seus eltrons para formar ATP, ou seja energia para a clula.
126 CEDERJ
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FORMAO DOS CORPOS CETNICOS
AULAS
Uma vez que no fgado a concentrao de oxalacetato muito baixa,

j que esta molcula utilizada na produo de glicose, o acetil-CoA vindo
da -oxidao tem outro destino: a formao de corpos cetnicos.
Corpos cetnicos (CC) so compostos solveis em gua e consistem
basicamente de acetoacetato e -hidroxibutirato. Veja essas duas molculas
na figura abaixo.
Figura 20.6: Acetoacetato e -hidroxibutirato.
A formao dos CC tambm ocorre dentro da mitocndria e se

d da seguinte forma.
Primeiro, duas molculas de acetil-CoA se condensam (juntam)
e formam acetoacil-CoA (contm 4 carbonos). A enzima que catalisa
esta reao a -cetotiolase. O acetoacil-CoA se condensa com uma
nova molcula de acetil-CoA, formando -hidroxi--metilglutaril-CoA
(HMG-CoA) atravs da enzima HMG-CoA sintase. Este composto
sofre clivagem pela enzima HMG-CoA liase formando acetil-CoA e
acetoacetato. O acetoacetato sofre reduo gerando -hidroxibutirato
atravs da enzima -hidroxibutirato desidrogenase. Parte do acetoacetato
sofre descarboxilao espontnea, gerando acetona. A Figura 20.7
resume o que foi descrito.
CEDERJ 127
Figura 20.7: Formao de corpos cetnicos.
Tanto o acetoacetato quanto o -hidroxibutirato so lanados

na corrente sangnea, viajando livremente pelo sangue, j que so
altamente solveis. Os tecidos famintos, incluindo msculo cardaco
e esqueltico, pulmo e tecido nervoso, captam esses compostos e os
transformam de volta em acetil-CoA, que , ento, lanado no ciclo de
Krebs, gerando energia para esses tecidos famintos.
128 CEDERJ
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Estamos aqui chamando os tecidos de famintos pois estamos numa
AULAS
situao de fome, ou seja, baixa de energia nas clulas e no organismo

como um todo. Veja as reaes de transformao do acetoacetato em
acetil-CoA na Figura 20.8.
Figura 20.8: Transformao do acetoacetato em acetil-CoA nos tecidos famintos.
CEDERJ 129
DEGRADAO DOS DEMAIS CIDOS GRAXOS

At agora estudamos como o palmitato, que um cido graxo com
16 tomos de carbono, degradado. Entretanto, existem outros cidos
graxos maiores e menores que o palmitato, ou que possuem dupla ligao
e que tambm precisam ser degradados. O que acontece nesses casos?
A maioria dos cidos graxos insaturados de origem biolgica
contm apenas ligaes duplas nas posies entre os carbonos 9 e 10.
Um exemplo de cidos graxos insaturados o cido olico. Veja este
cido na Figura 20.9.
Figura 20.9: cido olico.
Esses cidos tambm so oxidados atravs da -oxidao.

Entretanto, para que isto ocorra, a dupla ligao precisa ser removida.
Para tal, existem enzimas, como a enoil-CoA-isomerase, que modificam
estas duplas ligaes transformando as molculas em substratos naturais
para as enzimas da -oxidao que vimos anteriormente.
Alm dos cidos graxos com dupla ligao (cidos insaturados),
ainda temos os cidos graxos com nmero mpar de tomos de carbono.
Esses cidos so freqentes em plantas e organismos marinhos, por
exemplo. E neste caso? Ser que esses cidos tambm podem ser
quebrados atravs da -oxidao? A resposta positiva. Todos os cidos
graxos so oxidados nas clulas pela -oxidao.
130 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Entretanto, o que vai diferir neste caso o produto da ltima volta da
AULAS
-oxidao. Vejamos. Tomemos como exemplo um cido graxo com 15

tomos de carbonos. Depois da primeira rodada de -oxidao (que
envolve as quatro reaes mencionadas anteriormente), o cido graxo
passa a ter 13 tomos de carbono (pois haver perdido uma molcula de
acetil-CoA). Esse cido com 13 tomos de carbono vai passar por uma
nova rodada de -oxidao, gerando um cido graxo com 11 tomos de
carbono e assim por diante, at que se formar um cido com 5 tomos de
carbono. Agora que temos a diferena. Esse composto com 5 tomos de
carbono quebrado em acetil-CoA (2 carbonos) e propionil-CoA (3 tomos
de carbono). O propionil-CoA, no entanto, no pode mais passar por uma
nova rodada de -oxidao. O propionil-CoA convertido a succinil-CoA
(4 carbonos), conforme reaes mostradas na Figura 20.10.
Figura 20.10: Converso de propionil-CoA em succinil-Col-A. Observe que h gasto

de ATP na primeira reao catalisada pela propionil-CoA-carboxilase.
CEDERJ 131
Se nos recordarmos da aula sobre ciclo de Krebs, veremos que o

succinil-CoA um intermedirio deste ciclo. Logo, quando se forma
o succinil-CoA a partir do propionil-CoA, temos um aumento da
concentrao dos intermedirios do ciclo de Krebs e, por conseguinte, de
oxalacetato. Agora temos a seguinte situao: um cido graxo de nmero
mpar sendo quebrado pela -oxidao que gera acetil-CoA. Alm disso,
a quebra desse cido graxo gera propionil-CoA, que se transforma em
succinil-CoA, que se transforma em oxalacetato. Em suma, temos a
formao de acetil-CoA e a formao em ltima instncia de oxalacetato.
O que ocorre, ento, com a produo de corpos cetnicos? Vimos que
os corpos cetnicos so produzidos quando falta oxalacetato. Se h um
excesso de oxalacetato, h um grande decrscimo na produo de corpos
cetnicos quando um cido graxo de nmero mpar metabolizado. Veja
a Figura 20.11 que resume o que acabamos de descrever.
Figura 20.11: O acetil-CoA tem duas portas de entrada: o ciclo de Krebs (porta 1) e a
formao de corpos cetnicos (porta 2). A porta 1 ficar fechada se falta oxalacetato.
Neste caso, o acetil-CoA entrar pela porta 2 formando corpos cetnicos. Se houver
grande disponibilidade de oxalacetato, a porta preferencial ser a 1 e, com isso, a
produo de corpos cetnicos diminui. Isso ocorre, por exemplo, quando o fgado
oxida cidos graxos com nmero mpar de tomos de carbono.
132 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Na aula de hoje vimos as reaes envolvidas na oxidao do palmitato. Lembre-se

que oxidar um composto significa quebr-lo em compostos menores. No caso
do palmitato, vimos que este composto quebrado em 8 molculas de acetil-CoA
gerando, durante esta quebra, 7 molculas de FADH2 e 7 molculas de NADH. Essas
coenzimas reduzidas vo para a cadeia de transporte de eltrons entregar seus eltrons
para formar ATP. O acetil-CoA (2 carbonos), ao se juntar ao oxalacetato (4 carbonos)
forma o citrato (6 carbonos), que roda no ciclo de Krebs, gerando mais FADH2 e NADH,
que tambm vo formar mais ATP na cadeia de transporte de eltrons. Entretanto, no
fgado, devido ausncia de oxalacetato (ir formar glicose na gliconeognense), o
acetil-CoA formado na -oxidao transformado em corpos cetnicos (acetoacetato
e -hidroxibutirato). Esses compostos, por serem altamente solveis, viajam pelo
sangue, sendo captados pelos demais tecidos. L, eles so reconvertidos em acetil-CoA,
que roda, ento, no ciclo de Krebs, gerando energia. Quando cidos graxos de nmero
mpar de tomos de carbono so quebrados no fgado, h uma menor produo de
corpos cetnicos, j que temos a formao de oxalacetato que acaba por consumir o
acetil-CoA que seria utilizado na formao dos corpos cetnicos.
EXERCCIOS
Reflita e responda:
1. Vimos que, no fgado, o acetil-CoA formado pela -oxidao do palmitato forma
corpos cetnicos e no entra no ciclo de Krebs, conforme o esperado para o acetil-CoA.
Se o ciclo de Krebs no est funcionando no fgado, neste momento, como o
fgado consegue energia para se manter vivo no momento do jejum?
2. Por que o fgado no manda para os tecidos famintos o acetil-CoA formado
na -oxidao, mas sim acetoacetato e -hidroxibutirato?
3. Explique com suas palavras por que os cidos graxos com nmero mpar geram
menos corpos cetnicos que os cidos graxos de nmero par?
4. Na sua opinio, qual a importncia, do ponto de vista energtico, da ltima
volta da -oxidao, ou seja, da tilise? Compare a reao catalisada pela tiolase
com a reao catalisada pela acil-CoA sintase, que a enzima que pendura CoA
no palmitato quando este precisa entrar na mitocndria.
CEDERJ 133
AULAS
RESUMO
objetivo
AULAS
Sntese de
cidos graxos
22/23

Conhecer as principais reaes envolvidas na sntese
de cidos graxos, em especial, do palmitato.
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
ASPECTOS HISTRICOS
A sntese de cidos graxos foi desvendada depois que as principais
reaes da -oxidao haviam sido descritas. S para lembrar, atravs da
-oxidao que o palmitato quebrado em acetil-CoA. A oxidao
composta por quatro reaes: desidrogenao dependente de FAD; hidratao;
desidrogenao dependente de NAD+ e tilise. Voc se lembra?
Os pesquisadores interessados em conhecer a sntese de cidos
graxos acreditavam que esta via era o reverso da -oxidao, ou seja,
eles acreditavam que havia um nico conjunto de enzimas que era capaz
de quebrar o palmitato em determinadas situaes, ou fazer o palmitato
em outras. Essa crena baseava-se no fato de que as quatro enzimas
envolvidas na degradao do palmitato mostraram-se reversveis quando
purificadas. Logo, parecia simples: se as enzimas da -oxidao podem
catalisar reaes reversveis (substrato
produto), ento, elas tambm
deveriam ser capazes de sintetizar o palmitato. Entretanto, embora se

tenha tentado sintetizar palmitato incubando-se o acetato (composto
com 2 carbonos) com as mitocndrias (lembre-se que na mitocndria
que ocorre a -oxidao), nunca se observou o aparecimento deste cido
graxo. Logo, havia algo de errado com aquela crena inicial.
O impasse foi resolvido quando Stadman & Barker e Brady & Gurin,
na dcada de 1950, observaram a sntese de palmitato em uma frao solvel
da clula, ou seja, no citoplasma das clulas. Pde-se, ento, concluir que a
sntese de palmitato ocorria no citoplasma, ao passo que a degradao do
palmitato (-oxidao) ocorria nas mitocndrias. O que demonstrava que
a sntese e a degradao eram vias totalmente distintas!
Agora que j vimos um pouco o aspecto histrico da descoberta
da sntese, vamos responder seguinte pergunta: em que situao o
nosso organismo vai sintetizar cido graxo (palmitato)? Se pararmos para
pensar, os cidos graxos so as reservas do nosso organismo, junto com
o glicognio. Se fizermos uma analogia com a caderneta de poupana,
concluiremos que nosso organismo vai sintetizar suas reservas quando
houver excesso de nutriente. Ns tambm s guardamos dinheiro na
caderneta de poupana depois que pagamos todas as nossas contas do
ms. Ningum deposita dinheiro na poupana se estiver devendo alguma
coisa. O organismo assim tambm. Vai produzir suas reservas depois
que a demanda de energia das clulas j estiver suprida. E por isso que
a gente engorda!
136 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Quando comemos mais do que o necessrio, o excesso convertido em
AULAS
cidos graxos (palmitato) que se acumulam no tecido adiposo, formando

aqueles pneuzinhos na barriga que a gente tanto detesta...
Vamos estudar agora como ocorre a sntese do palmitato (e a
formao dos tais pneuzinhos...). Ento, mos obra!
SNTESE DO PALMITATO
O citrato
A sntese do palmitato ocorre a partir do acetil-CoA (2 tomos
de carbono). Entretanto, o acetil-CoA uma molcula mitocondrial e,
conforme acabamos de ver, a sntese do palmitato ocorre no citoplasma
das clulas. Logo, o acetil-CoA precisa chegar ao citoplasma para que
haja a sntese do palmitato.
Conforme discutimos na aula passada, a coenzima A muito
grande para atravessar as membranas biolgicas e, por isso, o acetilCoA no pode cruzar as membranas da mitocndria para chegar ao
citoplasma. Como, ento, o acetil-CoA chega ao citoplasma para dar
incio sntese do palmitato? Vejamos.
Quando comemos muito acar, a taxa de glicose do nosso sangue fica
elevada. A glicose (6 tomos de carbono) entra nas clulas e degradada
pela gliclise, dando origem a duas molculas de piruvato (3 tomos de
carbono). Se voc no se recorda bem de como ocorre a gliclise, reveja
a aula sobre esse assunto.
O piruvato formado no citoplasma entra na mitocndria atravs
de um translocador localizado na membrana interna mitocondrial.
Na mitocndria, o piruvato convertido em acetil-CoA atravs da
piruvato desidrogenase. O acetil-CoA (2 tomos de carbono) se junta
ao oxalacetato (4 tomos de carbono) para formar o citrato (6 tomos
de carbono) que segue pelo ciclo de Krebs.
Quando h excesso de glicose, todas essas reaes aqui descritas
ocorrem em grande abundncia, j que h excesso e fartura de glicose.
Nesta situao, h uma grande formao de citrato, que se acumula
dentro da mitocndria. A concentrao de citrato aumenta tanto que o
citrato acaba vazando da mitocndria, caindo no citoplasma.
CEDERJ 137
A sada do citrato da mitocndria se d atravs de um translocador de

citrato localizado na membrana mitocondrial interna.
No citoplasma, o citrato quebrado em acetil-CoA e oxalacetato
pela ao da citrato liase. Veja:
citrato + ATP + CoA
acetil-CoA + oxalacetato + ADP + Pi
Agora sim! Temos acetil-CoA no citoplasma para ser utilizado

na sntese do palmitato. Podemos, ento, concluir que o acetil-CoA sai
da mitocndria disfarado de citrato. O citrato, quando chega no
citoplasma, quebrado formando o acetil-CoA e o oxalacetato (lembre
que o citrato formado pelo unio do acetil-CoA com o oxalacetato.
Logo, a quebra do citrato gera acetil-CoA e oxalacetato).
O destino do acetil-CoA
Agora, temos o acetil-CoA no citoplasma! Entretanto, a sntese do
palmitato utiliza o malonil-CoA (composto com 3 tomos de carbono).
Desta forma, o acetil-CoA ser convertido em malonil-CoA
pela ao da enzima acetil-CoA carboxilase. Essa a primeira enzima
envolvida na sntese do palmitato. Como o prprio nome diz, a
acetil-CoA carboxilase pendura um CO2 no acetil-CoA, isto ,
ela carboxila o acetil-CoA, que passa a formar malonil-CoA, um
composto com 3 tomos de carbono. Veja:
acetil-CoA + CO2 + ATP
malonil-CoA + ADP + Pi
A acetil-CoA carboxilase uma enzima dependente de biotina.

A biotina (veja ao lado) est presente em todas as carboxilases, pois o
grupo que se especializou na carboxilao de determinadas molculas.
A Figura 22.1 mostra a sada do citrato da mitocndria e a
formao de acetil-CoA e oxalacetato. Alguns detalhes desta figura
sero descritos mais frente.
138 CEDERJ
MDULO 6
22/23
AULAS
Citosol
oxalacetato
oxalacetato
Figura 22.1: Sada do citrato na mitocndria e formao de acetil-CoA no citoplasma.
O complexo do cido graxo sintase

A segunda enzima que participa da sntese de lipdeos o complexo
do cido graxo sintase (AGS). Esta enzima bastante grande, sendo capaz
de desempenhar diversas funes, conforme veremos a seguir.
A AGS possui dois grupamentos funcionais: uma fosfopantotena
e uma cistena. A fosfopantotena fica ligada protena carreadora de
acilas (PCA). Veja a Figura 22.2.
Figura 22.2: Complexo do cido graxo

sintase e a fosfopantotena.
CEDERJ 139
A fosfopantotena e a cistena possuem grupamentos SH que servem

para ligar os diversos substratos dessa enzima. O funcionamento dessa
enzima sensacional! Vejamos.
Primeiro, um acetil-CoA se liga cistena. Em seguida, o malonil-CoA
se liga fosfopantotena. Vale ressaltar que, no momento da ligao, tanto
o acetil-CoA quanto o malonil-CoA perdem a CoA antes de se ligar
AGS e se ligam como acetato e malonato. Nesse momento, a enzima est
carregada com seus dois substratos principais: o acetato (ligado cistena)
e o malonato (ligado fosfopantotena). Em seguida, o acetato pula
para cima do malonato com a ajuda de um componente do complexo
chamado enzima de condensao. O produto desta condensao seria um
composto com 5 tomos de carbono, j que o acetato possui 2 tomos de
carbono e o malonato possui 3 tomos de carbono. Entretanto, ao mesmo
tempo que ocorre essa condensao, ocorre uma descarboxilao e, com
isso, o produto formado possui 4 tomos de carbono (2 + 3 = 5 1 = 4).
Vale ressaltar que este produto se forma sobre a fosfopantotena e, por
isso, se chama acetoacetil-PCA.
Em seguida, o acetoacetil-PCA sofre uma reduo dependente
de NADPH (veja o NADPH ao lado). Quem catalisa essa reao uma
redutase presente no complexo da AGS. O NADPH cede seus H para o
acetoacetil formando NADP+. E o produto formado se chama hidroxibutiril-PCA (j que ainda est ligado fosfopantotena da PCA).
Agora, o hidroxibutiril sofre uma desidratao tambm catalisada
por uma desidratase presente no complexo da AGS. O produto desta
reao o butenenoil-PCA.
A quarta reao uma nova reduo catalisada por uma outra
redutase presente no complexo. Esta redutase tambm utiliza NADPH,
formando NADP+ e butiril-PCA.
Todas essas quatro reaes ocorrem com o composto de quatro
carbonos ligado fosfopantotena. Entretanto, at agora, o composto
tem apenas 4 tomos de carbono e, conforme sabemos, o palmitato
tem 16 tomos de carbono. Falta, portanto, que o butiril cresa at
formar o palmitato.
Desta forma, o butiril-PCA transferido para a cistena, deixando a
fosfopantotena livre para a entrada de uma nova molcula de malonato.
140 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Na segunda rodada do complexo, a situao a seguinte: o butiril
AULAS
(composto com 4 tomos de carbono) se encontra ligado cistena e o

malonil-CoA perde seu CoA e se liga como malonato fosfopantotena.
Em seguida, o butiril pula para cima do malonato com a
ajuda da enzima de condensao. Ocorre uma nova descarboxilao
do malonato dando origem a um composto com 6 tomos de carbono
(4 + 3 = 7 1 = 6).
Da mesma forma que descrito anteriormente, esse composto vai
sofrer uma reduo dependente de NADPH, uma desidratao e uma
nova reduo dependente de NADPH.
Tudo isso ocorre sobre a fosfopantotena. Agora, esse composto
com 6 tomos de carbono transferido de volta para cistena deixando
a fosfopantotena livre para a entrada de um novo malonil-CoA.
Esse processo se repete 7 vezes, at que o palmitato se forma dentro
do complexo da AGS. Como o palmitato uma molcula muito grande
(16 tomos de carbono), a afinidade do complexo AGS por ele muito
pequena e, com isso, o complexo libera o palmitato. Esse palmitato pode
ser transportado para o tecido adiposo onde permanecer at que seja
necessria a sua utilizao como reserva energtica.
CEDERJ 141
Veja a Figura 22.3 que resume o que foi descrito.
Figura 22.3: A sntese do palmitato no complexo do cido graxo sintase.
Conforme vimos, a primeira reao catalisada pelo complexo da AGS

a unio de um acetil-CoA com um malonil-CoA. A partir da, em cada
rodada do complexo, uma nova molcula de malonil-CoA consumida,
fazendo o composto crescer at ficar com 16 tomos de carbono.
Podemos concluir, ento, que para haver sntese de palmitato
necessrio que haja muito malonil-CoA disponvel. a que entra a acetilCoA carboxilase. Conforme vimos anteriormente, a acetil-CoA carboxilase
uma fbrica de malonil-CoA. Esse malonil-CoA utilizado pelo complexo da AGS. Se faltar malonil-CoA, no h sntese de palmitato!
142 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Desta forma, o produto da acetil-CoA carboxilase (malonil-CoA)
Acetil-CoA carboxilase
AULAS
substrato da AGS. Veja.

complexo AGS
Acetil-CoA
malonil-CoA
substrato
produto
substrato
palmitato
produto
No podemos deixar de mencionar, mais uma vez, que o

complexo da AGS utiliza acetil-CoA apenas na primeira reao.
Logo, o acetil-CoA que vem da quebra do citrato serve tanto como
substrato da acetil-CoA carboxilase quanto como substrato do
complexo da AGS.
Em resumo, a sntese do palmitato, a partir do acetil-CoA e do
malonil-CoA, envolve as seguintes reaes:
1- condensao
2- reduo dependente de NADPH
3- desidratao
4- reduo dependente de NADPH
Regulao da sntese de palmitato

Conforme mencionado anteriormente, a sntese de palmitato
ocorre quando h fartura de nutrientes. Vimos acima que a glicose
excedente convertida em piruvato, que se transforma em citrato, que,
por sua vez, convertido em acetil-CoA, que serve de matria-prima
para a sntese de palmitato. Fica claro, ento, por que quando comemos
muito acar engordamos. O acar excedente se transforma em gordura
(palmitato) que se acumula no tecido adiposo.
Conforme podemos prever, a sntese de palmitato precisa ocorrer
na hora correta. Obviamente, s podemos sintetizar palmitato quando
existem nutrientes em excesso, e por isso, a clula precisa controlar
precisamente as enzimas envolvidas com a sntese.
A acetil-CoA carboxilase altamente controlada, j que ela
que vai gerar o malonil-CoA, que o principal substrato para a sntese
de palmitato.
CEDERJ 143
A acetil-CoA carboxilase sofre dois controles. O primeiro

exercido pelo prprio citrato, que atua como um modulador da atividade
desta enzima. A acetil-CoA carboxilase possui um stio de ligao ao
citrato (stio alostrico). Quando o citrato ocupa este stio, a acetilCoA carboxilase sofre uma mudana conformacional que resulta na sua
polimerizao. Na verdade, a acetil-CoA carboxilase existe na forma de
monmeros isolados, quando no h citrato no citoplasma da clula.
Mediante ligao ao citrato, esses monmeros do as mos, formando
um filamento longo, conforme visto na Figura 22.4. A polimerizao
funciona exatamente como se fosse um colar de prolas: as prolas
isoladas seriam os monmeros de acetil-CoA carboxilase e o colar
de prola inteiro seria o filamento.
Figura 22.4: Microscopia eletrnica dos filamentos da acetilCoA carboxilase obtidos na

presena de citrato.
Entretanto, curiosamente, a acetil-CoA carboxilase, na forma

filamentosa, apresenta uma atividade bem maior do que a acetil-CoA
carboxilase na forma de monmeros.
Dessa forma, podemos concluir, que o citrato capaz de ativar
a acetil-CoA carboxilase ao induzir sua polimerizao. Quando, ento,
o citrato chega ao citoplasma, uma pequena parte dele se liga acetilCoA carboxilase, ocasionando a polimerizao da enzima com a sua
concomitante ativao.
citrato
monmeros da acetil-CoA
filamento
carboxilase
(muito ativo)
(pouco ativos)
144 CEDERJ
MDULO 6
22/23
O segundo controle da acetil-CoA carboxilase a fosforilao
AULAS
induzida pelo hormnio glucagon. Conforme voc ver nas aulas de regulao hormonal, o glucagon, um hormnio que liberado no momento do
jejum, ativa uma protena cinase que fosforila (pendura um grupamento
fosfato) diversas enzimas, dentre as quais a acetil-CoA carboxilase.
Quando fosforilada, a acetil-CoA carboxilase passa a ficar inibida.
Desta forma, quando estamos em jejum sob a ao do glucagon, a acetil-CoA
carboxilase est completamente inibida, j que se encontra fosforilada.
enzima defosforilada
-P
enzima fosforilada
ativa
inibida
Em resumo, podemos dizer que a acetil-CoA carboxilase possui

dois controles: o citrato, que ativa a enzima, e a fosforilao induzida
por glucagon, que leva sua inativao.
NADPH
Antes de terminarmos, falta compreender de onde vem tanto NADPH
que necessrio para manter a sntese do palmitato. Lembre-se de que em
cada rodada do complexo da AGS h consumo de duas molculas
de NADPH.
Vimos anteriormente que, quando a concentrao de citrato
est muito aumentada na mitocndria, o citrato vaza, alcanando o
citoplasma.
Esse citrato convertido em acetil-CoA e oxalacetato pela ao
da citrato liase. O acetil-CoA ou ser convertido em malonil-CoA pela
acetil-CoA carboxilase ou ser utilizado na primeira rodada do complexo
da AGS para formar palmitato.
E o oxalacetato (OA)? Qual o destino desta molcula?
O
OA pode ser convertido em malato pela malato
desidrogenase, que utiliza NADH. O malato formado pode ser

convertido em piruvato por uma enzima chamada enzima mlica.
Na converso de OA em piruvato, h formao de NADPH. Veja:
OA + NADP+
piruvato + CO2 + NADPH
CEDERJ 145
Este NADPH formado a partir da enzima mlica pode ser

utilizado na sntese do palmitato. Entretanto, esse NADPH no
suficiente para manter a sntese, havendo necessidade de mais NADPH.
Conforme veremos em aulas mais frente, existe uma via chamada via
das pentoses fosfato, que ocorre junto com a sntese de palmitato, e
que forma NADPH para manter a sntese do palmitato. Desta forma,
parte do NADPH necessrio para a sntese do palmitato vem da enzima
mlica, e outra parte, da via das pentoses fosfato.
Tanto o piruvato quanto o malato podem voltar para a mitocndria
atravs de transportadores especficos, sendo reconvertidos em OA. Veja
a Figura 22.5.
Citosol
oxalacetato
oxalacetato
Figura 22.5: O transporte de citrato para fora da mitocndria gera OA, que, ao
retornar para a mitocndria na forma de piruvato, gera poder redutor (NADPH)
para a sntese do palmitato.
146 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Sntese de palmitato x degradao do palmitato
AULAS
Antes de terminarmos, vale a pena comparar a sntese de palmitato

com a sua degradao (-oxidao).
Tabela 22.1: Comparao da sntese do palmitato e sua degradao.
-oxidao
Sntese do palmitato
1. oxidao dependente de FAD
1. condensao
2. hidratao
2. reduo dependente de NADPH
3. oxidao dependente de NAD+
3. desidratao
4. tilise (quebra)
4. reduo dependente de NADPH
Se pararmos para pensar, podemos concluir que a sntese do palmitato

envolve reaes qumicas que so o contrrio das reaes da -oxidao.
No estamos dizendo que a sntese o reverso da -oxidao, mas apenas
que essas duas vias so quimicamente o reverso uma da outra.
No poderia ser diferente, pois, quando sintetizamos o palmitato, que
uma molcula com vrios grupos CH2, utilizamos o malonato, que uma
molcula que possui carbono ligado ao oxignio. Esse oxignio precisa sair
da molcula para a entrada de H e formao do CH2. por isso que ocorrem
redues com o uso de NADPH, que cede seus H gerando NADP+.
Na -oxidao a situao o contrrio. Temos o palmitato,
rico em grupos CH2, e queremos formar o acetil-CoA, uma molcula
que possui oxignio ligado ao carbono. Logo, neste caso, precisamos
inserir oxignio na molcula, ou seja, precisamos oxidar a molcula.
por isso que precisamos de FAD e NAD+, que recebem os H vindos
do palmitato formando FADH2 e NADH. Alm disto, na sntese do
palmitato h uma reao de desidratao que remove o oxignio da
molcula, ao passo que na -oxidao h uma etapa de hidratao que
insere oxignio na molcula. Por fim, enquanto na -oxidao temos a
tilise, ou seja, a quebra do palmitato em unidades de dois carbonos
(acetil-CoA), na sntese do palmitato temos a condensao de molculas
pequenas, como o malonil-CoA, visando formar uma molcula grande
como o palmitato.
CEDERJ 147
RESUMO
Nesta aula, vimos como o palmitato sintetizado a partir de precursores pequenos

como o acetil-CoA e o malonil-CoA. Existem duas enzimas-chave que participam
do processo de sntese do palmitato: a acetil-CoA carboxilase e o complexo da
cido graxo sintase (AGS). A acetil-CoA carboxilase sintetiza malonil-CoA com
gasto de ATP. O complexo da AGS possui dois grupamentos muito importantes,
que so a fosfopantotena e uma cistena. O acetil-CoA se liga como acetato
cistena, ao passo que o malonil-CoA se liga como malonato fosfopantotena.
H uma reao de condensao que acompanhada de uma descarboxilao, o
que resulta na formao de um composto com quatro tomos de carbono. Esse
composto sofre reduo dependente de NADPH, desidratao, e uma nova reduo
dependente de NADPH.
Em seguida o composto, j reduzido na forma de butiril, passa para a cistena,
deixando livre a fosfopantotena para a entrada de um novo malonil-CoA. Esse
ciclo se repete at que o palmitato se forme dentro do complexo da AGS, sendo,
em seguida, liberado para o meio.
EXERCCIOS
1. Descreva com suas prprias palavras o processo de sntese de palmitato a partir
do acetil-CoA.
2. Como o acetil-CoA chega ao citoplasma, local onde ocorre a sntese de
lipdeos?
3. Quais so os controles da sntese de lipdeos?
148 CEDERJ
objetivos
AULA
Via das pentoses-fosfato
24
Nesta aula, voc vai conhecer a via das

pentoses-fosfato, um desvio da via glicoltica
necessrio s clulas que realizam reaes de
biossntese redutoras. Voc vai ser apresentado
a todas as reaes que fazem parte desta via,
mas o mais importante que voc aprenda
como o poder redutor garantido nos
momentos de biossntese, como sintetizado o
NADPH e como pentoses so fornecidas para a
formao de nucleotdeos.
Pr-requisitos
Seria interessante que voc relesse as aulas sobre
gliclise, ciclo de Krebs e sntese de cidos graxos
antes de comear. Vamos retomar alguns pontos
dessas vias metablicas nesta aula.
BIOQUMICA II | Via das pentoses-fosfato
INTRODUO
O ATP considerado a moeda energtica da clula. A incorporao do fosfato

molcula de ADP, formando o ATP, se d s custas da energia liberada na
oxidao dos nutrientes, enquanto a sntese das biomolculas muitas vezes
depende da hidrlise do ATP. Entretanto, como vimos quando estudamos a
sntese de cidos graxos, nem sempre apenas o ATP suficiente para as reaes
de biossntese. Uma outra moeda tambm necessria: o poder redutor.
Muitas reaes celulares, como a sntese de cidos graxos e de colesterol,
requerem NADPH alm do ATP.
Ateno! Voc no deve confundir NADH com NADPH. Estas duas coenzimas
diferem apenas pela presena de um grupamento fosfato a mais na molcula
de NADPH. Entretanto, elas desempenham papis bastante diferentes na clula.
O NADH participa indiretamente da sntese do ATP, transferindo os eltrons
liberados nas reaes de oxidao dos nutrientes para a cadeia transportadora
de eltrons. O NADPH est envolvido na utilizao da energia livre das reaes
de oxidao para as reaes de biossntese redutivas. Esta diferenciao
possvel graas especificidade das enzimas por suas coenzimas.
Para relembrar
como so as reaes
catalisadas pelas
desidrogenases, voc
pode retornar s
aulas que trataram
das reaes da
gliclise e do ciclo de
Krebs, e observar as
reaes catalisadas
pelas enzimas
gliceraldedo-3fosfato desidrogenase,
isocitrato
desidrogenase,
-cetoglutarato
desidrogenase, ou
malato desidrogenase.
Bem, voltando s reaes de biossntese, estvamos dizendo que elas

requerem, alm da energia armazenada na molcula de ATP, o poder
redutor do NADPH.
Na aula de hoje, voc vai aprender como o NADPH formado

nas clulas.
Voc j aprendeu que o NAD+ reduzido a NADH em uma
srie de reaes de oxidao catalisadas por enzimas chamadas
desidrogenases. O NADPH tambm reduzido em reaes de oxidao
catalisadas por desidrogenases; neste caso, outras desidrogenases que
usam como coenzima o NADP+ e no o NAD+. Vamos, agora, conhecer
estas reaes, que fazem parte da via metablica que chamamos via das
pentoses-fosfato.
Para simplificar, vamos

substituir a palavra
fosfato pela letra P
nas nomenclaturas
usadas a partir de
agora. Assim, glicose6-fosfato passa a ser
denominada glicose-6P,
frutose-6-fosfato passa
a ser frutose-6P, ribose5-fosfato passa a ser
ribose-5P e assim por
diante.
A via das pentoses-fosfato pode ser dividida em duas etapas, o ramo

oxidativo e o ramo no-oxidativo. O ramo oxidativo comea com a glicose6-fosfato (glicose-6P), que desviada da via glicoltica, sendo convertida a
uma pentose-fosfato. Como o nome diz, pentoses so acares contendo
5 carbonos. Voc j sabe que a glicose-6P possui 6 carbonos. Ento, tente
responder: que tipo de reao deve ocorrer no ramo oxidativo da via das
pentoses de forma a gerar um acar de 5 carbonos?
A glicose-6P deve perder 1 carbono, o que ocorre atravs de uma
reao de descarboxilao.
150 CEDERJ
24 MDULO 7
AULA
O RAMO OXIDATIVO DA VIA DAS PENTOSES-FOSFATO

Observe, em seguida, as reaes que compem o ramo oxidativo
da via das pentoses-fosfato na Figura 24.1:
Como voc pode observar, no ramo oxidativo ocorrem duas
reaes de oxidao, cujas enzimas usam o NADP+ como coenzima,
sendo a ltima uma reao de descarboxilao tambm.
6-fosfogluconato
Figura 24.1: Reaes do ramo oxidativo da via das pentoses-fosfato.
A primeira reao catalisada pela enzima glicose-6P desidrogenase,

que converte a glicose-6P em 6-fosfoglucono--lactona. Esta enzima
especfica para NADP+ e esta reao a etapa mais regulada da via, como
veremos mais frente. Em seguida, na segunda reao do ramo oxidativo,
a 6-fosfoglucono--lactona hidrolisada, formando 6-fosfogluconato.
Esta reao catalisada pela enzima 6-fosfogluconolactanase. A ltima
reao do ramo oxidativo uma descarboxilao oxidativa catalisada
pela enzima fosfogluconato desidrogenase, levando reduo de NADP+,
liberao de CO2 e formao da pentose ribulose-5P. Esta reao
irreversvel em condies fisiolgicas (no ambiente intracelular, a
converso de ribulose-5P de volta a 6-fosfogluconato no ocorre).
Assim, o ramo oxidativo da via das pentoses gera duas molculas
A descarboxilao
oxidativa catalisada
pela enzima
fosfogluconato
desidrogenase
semelhante
reao catalisada
pela isocitrato
desidrogenase, enzima
do ciclo de Krebs.
de NADPH para cada molcula de glicose-6P.
CEDERJ 151
O RAMO NO-OXIDATIVO DA VIA DAS PENTOSESFOSFATO

O ramo no-oxidativo composto por uma srie de reaes, todas
elas reversveis. Ele comea com a converso de molculas de ribulose-5P
em duas outras pentoses: a ribose-5P ou a xilulose-5P, como mostrado
na Figura 24.2:
isomerase
Figura 24.2: Converso de ribulose-5P em ribose-5P e xilulose-5P.
A ribose-5P um componente dos nucleotdeos, podendo ser usada

na formao destes compostos. Entretanto, nem sempre o requerimento
de poder redutor para as reaes de biossntese coincide com a necessidade
de ribose-5P. Assim, as reaes do ramo no-oxidativo so responsveis
pela converso das pentoses formadas em intermedirios comuns do
metabolismo, que podem ser usados em outras vias metablicas.
Mas como isso ocorre?
As pentoses-fosfato so convertidas em intermedirios da via
glicoltica atravs de uma srie de reaes de rearranjo. Essas reaes
consistem na clivagem e na formao de ligaes C C, como veremos a
seguir. Em ltima anlise, duas molculas de xilulose-5P e uma molcula
de ribose-5P so convertidas em duas molculas de frutose-6P e uma
molcula de gliceraldedo-3P, ambos intermedirios da gliclise.
152 CEDERJ
24 MDULO 7
AULA
Assim, os 15 carbonos presentes nas trs pentoses so rearranjados

como duas molculas de 6 carbonos (2 frutose-6P) e uma molcula de 3
carbonos (o gliceraldedo-3P), somando 15 carbonos. Estas reaes so
catalisadas por dois tipos de enzimas, as transaldolases e as transcetolases.
As transaldolases transferem fragmentos de 3 carbonos e as transcetolases
transferem fragmentos de 2 carbonos. Acompanhe a srie de reaes
mostradas na Figura 24.3:
gluconolactona
ribulose P
isomerase
sedoheptulose
gliceraldedo 3P
Figura 24.3: Reaes do

ramo no-oxidativo da
via das pentoses-fosfato.
4P
CEDERJ 153
primeira vista, este conjunto de reaes assusta, pois parece muito

complicado. Mas se voc prestar ateno, o que ocorre nada mais do que
a troca de pedaos entre uma molcula e outra. Primeiro, um fragmento de
2 carbonos transferido da xilulose-5P para a ribose-5P. Esta transferncia
resulta em uma molcula de 7 carbonos, a sedoheptulose-7P, e uma
molcula de 3 carbonos, o gliceraldedo-3P. Ento, um fragmento de
3 carbonos transferido da sedoheptulose-7P para o gliceraldedo-3P,
formando uma molcula de 4 carbonos, a eritrose-4P, e uma molcula
de 6 carbonos, a frutose-6P. Finalmente, o fragmento de 2 carbonos
transferido de outra molcula de xilulose-5P para a eritrose-4P, formada
na reao anterior, gerando mais uma molcula de gliceraldedo-3P e mais
uma molcula de frutose-6P. O resultado final, como j mencionamos,
a converso de 3 pentoses-fosfato em duas molculas de frutose-6P e uma
molcula de gliceraldedo-3P, que podem seguir pela via glicoltica.
Veja, agora, o esquema geral de como isso ocorre dentro da clula
na Figura 24.4.
Figura 24.4: Viso esquemtica da via das pentoses-fosfato na clula.
154 CEDERJ
24 MDULO 7
AULA
REGULAO DA VIA DAS PENTOSES-FOSFATO

O fluxo atravs da via das pentoses-fosfato e, conseqentemente, a
taxa de reduo de NADP+ a NADPH so regulados essencialmente pela
atividade da glicose-6P desidrogenase. Esta enzima regulada pelos nveis
de NADP+, um de seus substratos. Quando a clula consome NADPH,
quando comea a sintetizar lipdeos, por exemplo, a concentrao de
NADP+ aumenta, favorecendo a atividade da glicose-6P desidrogenase,
regenerando o NADPH.
Um outro aspecto importante da regulao desta via requer uma
viso mais integrada do metabolismo. Vamos relembrar o que ocorre
durante a sntese de cidos graxos. O citrato, em excesso na mitocndria,
transportado para o citoplasma, onde ir fornecer acetil-CoA para o
incio da sntese de cidos graxos. Ao mesmo tempo, o citrato funciona
tambm como um regulador da atividade de duas enzimas citoplasmticas:
Se voc tiver
dificuldade de
acompanhar esta parte,
volte aula que trata
da sntese de cidos
graxos e relembre
os principais pontos
abordados.
a acetil-CoA carboxilase, que se polimeriza na presena de citrato, se

tornando ativa; e a fosfofrutocinase (PFK), enzima da gliclise, que
inibida por citrato. A inibio da PFK permite o acmulo de glicose-6P,
que pode, ento, seguir pela via das pentoses-fosfato. Para compreender e
integrar melhor todas estas informaes, observe com cuidado o esquema
mostrado na Figura 24.5.
Figura 24.5: Integrao

da via das pentoses-fosfato gliclise e sntese
de cidos graxos.
CEDERJ 155
A VIA DAS PENTOSES EM DIFERENTES TECIDOS E

DIFERENTES SITUAES FISIOLGICAS
Os principais produtos da via das pentoses-fosfato so NADPH e
ribose-5P. As reaes das enzimas transaldolases e transcetolases servem
para converter o excesso de ribose-5P em intermedirios da gliclise, quando
h mais requerimento de NADPH do que de ribose-5P. A frutose-6P e
o gliceraldedo-3P podem seguir a via glicoltica, sendo completamente
oxidados. Isto ocorre quando h predominncia da sntese de cidos
graxos na clula em relao ao requerimento de nucleotdeos, nos
principais tecidos que realizam a sntese de cidos graxos, como o
fgado, as glndulas mamrias em lactao e tecido adiposo, ou em
tecidos que sintetizam hormnios esterides (que so lipdeos), como
os testculos ou o crtex da glndula adrenal. Por outro lado, o msculo,
por exemplo, no realiza sntese de lipdeos, e no necessita, portanto de
NADPH. Neste tecido, a ribose-5P necessria para a sntese de nucleotdeos
formada a partir de frutose-6P e gliceraldedo-3P, atravs das reaes
do ramo no-oxidativo da via das pentoses-fosfato, que ocorrem no
sentido inverso.
Um outro tipo celular precisa muito da via das pentoses-fosfato:
as hemcias. Estas clulas apresentam altos nveis de glutationa, um
antioxidante fundamental para a proteo dos fosfolipdios de sua
membrana frente a danos oxidativos. A sntese de glutationa depende
de NADPH, fornecido pela vias das pentoses. Por isso, a via das pentoses
muito ativa nas hemcias, garantindo a integridade destas clulas.
DEFICINCIA NA GLICOSE-6P DESIDROGENASE

Quando algumas drogas aparentemente no perigosas, como drogas
antimalria, antipirticos ou antibiticos de sulfa, so administradas em
alguns pacientes, uma anemia hemoltica aguda pode ocorrer aps 48
a 96 horas. Isso pode acontecer devido a uma deficincia gentica na
enzima glicose-6P desidrogenase. Estas drogas atacam a membrana das
hemcias, cuja integridade depende da manuteno da glutationa reduzida,
que, por sua vez, depende do NADPH produzido na via das pentoses,
como comentamos anteriormente. Assim, as hemcias de indivduos com
deficincia na glicose-6P desidrogenase no so capazes de se proteger da
hemlise causada pelas drogas em questo.
156 CEDERJ
24 MDULO 7
AULA
RESUMO
As clulas usam NAD+ nas reaes oxidativas e NADPH nas biossnteses redutivas.
O NADPH sintetizado atravs de um caminho alternativo de oxidao da
glicose, a via das pentoses-fosfato. Esta via pode ser dividida em duas fases: o
ramo oxidativo e o ramo no-oxidativo. O ramo oxidativo tem como funo a
reduo de NADPH para as reaes de biossntese, assim como a formao de
pentoses-fosfato para a sntese de nucleotdeos, atravs da oxidao da glicose6P. A velocidade desta via determinada pela atividade da enzima glicose-6P
desidrogenase, controlada basicamente pelos nveis de NADP+. A capacidade das
enzimas de distinguirem NADH (que essencialmente utilizado no metabolismo
energtico) de NADPH (utilizado essencialmente como poder redutor das reaes
biossintticas) permite que as reaes de sntese e de degradao sejam reguladas
independentemente. O ramo no-oxidativo permite a converso das pentoses
formadas em intermedirios da via glicoltica, possibilitando sua utilizao em
outras vias do metabolismo da clula.
EXERCCIOS
1. Em que tecidos a via das pentoses-fosfato pode ocorrer?

2. Imagine um hepatcito sintetizando cidos graxos ativamente. De que maneira
a via das pentoses-fosfato contribui para este processo e quais os produtos por
ela gerados nesta situao?
3. As clulas musculares no realizam a sntese de cidos graxos, mas podem
precisar de nucleotdeos. A ribose-5P, um dos produtos da via das pentoses,
um dos componentes dos nucleotdeos. Explique como a ribose-5P formada no
msculo sem que haja produo concomitante de NADPH.
4. Qual a importncia da via das pentoses-fosfato nas hemcias?
CEDERJ 157
objetivo
AULA
Degradao do glicognio
25

Compreender as vias de degradao do
glicognio.
Pr-requisitos
Ter compreendido a estrutura da clula vegetal
(Aula 5) e ter pleno conhecimento da organizao
dos meristemas primrios e secundrios (Aula 6),
bem como dos sistemas fundamental (Aula 8) e
vascular xilema (Aula 9).
BIOQUMICA II | Degradao do glicognio
INTRODUO
A degradao do glicognio em glicose ou glicose-1P denomina-se

glicogenlise e a glicognese refere-se sntese do glicognio. Esses
processos so de extrema importncia em quase todos os tecidos, mas
especialmente no fgado e nos msculos.
O fgado o principal rgo para estocar o glicognio. Em humanos bem
alimentados, o contedo de glicognio do fgado pode contribuir para cerca de
6% a 10% do peso seco deste rgo. Os msculos estocam uma quantidade
menor, em torno de 1 a 2% do seu peso seco. Entretanto, como a massa
muscular maior do que a massa heptica, na maioria das pessoas o teor
de glicognio muscular pode corresponder a cerca de duas a quatro vezes o
teor de glicognio heptico. Veja a Tabela 25.1.
Tabela 25.1: Armazenamento de carboidratos em homens adultos normais (70 kg)
(MURRAY, Robert K. et al. Haper : Bioqumica. 8. ed. So Paulo: Atheneu, 1998.)
Glicognio heptico
4,0 %
72g1
Glicognio muscular
0,7 %
245g2
Glicognio extracelular
0,1%
10g3
Peso do fgado = 1800g

Massa muscular = 35 kg
3
Volume total = 10l
2
Os estoques de glicognio heptico e muscular apresentam papis diferentes.

No msculo, o glicognio serve como combustvel para a sntese de ATP,
enquanto o glicognio do fgado funciona como uma reserva de glicose para
a manuteno dos nveis sangneos desta substncia. Os nveis de glicognio
heptico variam com a ingesto de alimento, acumulando altos nveis logo aps
a alimentao. Aps 12 a 18 horas de jejum, o fgado torna-se quase totalmente
desprovido de glicognio (veja a Figura 25.1), j o glicognio do msculo s
diminui aps exerccio vigoroso prolongado. As reservas de glicognio heptico
so, portanto, teis para o intervalo entre as refeies.
Elas mantm-se um pouco mais elevadas para atender o jejum noturno.
160 CEDERJ
25 MDULO 7
AULA
O glicognio do msculo uma fonte de ATP para aumentar a atividade

muscular. A maioria da glicose do glicognio muscular consumida dentro
das clulas musculares sem a formao de glicose livre como intermedirio.
O glicognio do fgado convertido em glicose para que esta alcance
a corrente sangnea no momento de jejum. A converso de glicose em
glicognio no msculo mais importante do que a glicognese heptica para
diminuir os nveis de glicose sangnea aps as refeies.
Os grnulos de glicognio so abundantes no fgado de animais bem
alimentados, mas so bem reduzidos no fgado de animais aps 24 horas
de jejum. Veja a Figura 25.1. Exerccios intensos causam a mesma perda de
glicognio muscular. Os grnulos de glicognio correspondem a agregados de
molculas de glicognio e possuem massa molecular em torno de 2x107 Da.
Figura 25.1: Micrografia eletrnica mostrando grnulos de glicognio (pontos

pretos) no fgado de um rato bem alimentado (a) e a ausncia relativa de
tais grnulos no fgado de um rato em jejum por 24 horas (b).
(DEVLIN, Thomas M. Textbook of Biochemistry : with clinical correlations.
4.ed. New York: Wiley-Liss, 1997.)
A figura foi originalmente fornecida pelo Dr. Robert R. Cardell do Department of Anatomy at the University of Cincinnati.
CEDERJ 161
GLICOGENLISE
A glicognio fosforilase catalisa a primeira etapa da degradao
do glicognio
A glicognio fosforilase catalisa a fosforlise (clivagem pela entrada
de um fosfato) do glicognio, uma reao na qual um Pi usado na
clivagem de uma ligao -1,4-glicosdica para render glicose 1-fosfato
(Figura 25.2). Essa clivagem sempre ocorre no terminal no-redutor da
molcula de glicognio.
no-redutor
Glicognio fosforilase
Figura 25.2: Reao catalisada pela glicognio fosforilase.
A prxima etapa da degradao do glicognio catalisada pela

enzima fosfoglicomutase, uma enzima que transfere o fosfato da posio 1 da
molcula de glicose1-P para a posio 6, formando uma molcula de glicose
6-P. Essa reao permanece prxima ao equilbrio em condies celulares,
permitindo que ela ocorra tanto no sentido de formao de glicose 1-P
(quando a sntese de glicognio necessria) ou no sentido de formao de
glicose 6-P quando h necessidade glicose na corrente sangnea ou quando
a gliclise para a produo de energia necessria (Figura 25.3).
162 CEDERJ
25 MDULO 7
AULA
Figura 25.3: Reao catalisada pela enzima fosfo-glicomutase.
A prxima enzima envolvida na glicogenlise depende do tecido

em considerao, veja a Figura 25.4. No fgado, a glicose-6-fosfato
hidrolisada em glicose e Pi. Desse modo a glicose liberada pode ser
transportada da clula heptica para a corrente sangnea e ser conduzida
para diversos tecidos extra-hepticos. O msculo no possui a enzima
glicose-6-fosfatase; por isso a glicose-6-P formada
utilizada pela prpria clula muscular. A
Figura 25.4 mostra um esquema da glicogenlise,
destacando o destino dos produtos de degradao
do glicognio no fgado e nos tecidos perifricos.
Note que o piruvato formado pode ser degradado
em CO2 + H2O (o que ocorre nos msculos
que operam em aerobiose como o corao,
por exemplo) ou em lactato, o que ocorre nos
msculos que recebem menos oxignio.
Como voc deve
se lembrar, pois foi visto
em Bioqumica I, o glicognio uma molcula
ramificada. A primeira
enzima envolvida na
de gra dao do glicognio, a glicognio fosforilase, especfica para
ligaes glicosdicas -1,4. Entretanto ela deixa de
atuar quando se aproxima (4 resduos antes) dos
pontos de ramificao (ligaes glicosdicas -1,6).
A molcula residual da hidrlise do glicognio
pela enzima glicognio fosforilase denominada
dextrina limite.
Figura 25.4: Glicogenlise

no fgado e em tecidos
perifricos.
CEDERJ 163
Para que a clivagem dessa dextrina limite ocorra, faz-se necessria a ao

de uma enzima desramificadora. A enzima desramificadora uma enzima
bifuncional, que catalisa duas reaes necessrias para desramificar o
glicognio. A primeira ao uma atividade 4--D-glicanotransferase
na qual uma fita com trs resduos glicosil removida do quarto resduo
a partir da ramificao da molcula de glicognio (Figura 25.5). A fita
permanece covalentemente ligada enzima at que ela seja transferida
para o grupo 4-hidroxil de um resduo glicosil do terminal da mesma
molcula de glicognio ou de uma molcula adjacente. O resultado
a formao de uma cadeia maior de amilose com somente um resduo
glicosil permanecendo em uma ligao -1,4. Essa ligao
clivada pela segunda ao da enzima desramificadora,
que uma atividade amilo--1,6 glicosidase. A
ao cooperativa entre a glicognio fosforilase
e a enzima desramificadora resulta em
completa fosforlise e hidrlise do
glicognio. As doenas de
estoque de glicognio
ocorrem quando
uma dessas
enzimas
deficiente.
Figura 25.5: Ao da enzima desramificadora.
164 CEDERJ
25 MDULO 7
AULA
RESUMO
A degradao dos estoques de glicognio (glicogenlise) ocorre atravs da ao

da glicognio fosforilase. A ao desta enzima remover fosforoliticamente
um resduo de glicose a partir da quebra de uma ligao 1,4 da molcula de
glicognio. O produto desta reao a glicose-1-fosfato.
A glicose-1-fosfato produzida pela ao da fosforilase convertida em glicose-6fosfato pela fosfoglicomutase.
A converso de glicose-6-fosfato em glicose, que ocorre no fgado, rim e intestinos,
pela ao da glicose 6-fosfatase, no acontece no msculo esqueltico devido
falta desta enzima. No fgado, a ao desta enzima conduz a glicogenlise para
gerao de glicose livre e a manuteno da concentrao desta no sangue.
A fosforilase no remove resduos de glicose a partir das ligaes 1,6 do
glicognio. A atividade da fosforilase cessa a quatro resduos de glicose do
ponto de ramificao. Para a remoo de glicose destes pontos necessria a
ao da enzima desramificadora (tambm conhecida por glucan transferase), que
contm duas atividades: glicotransferase e glicosidase. A atividade de transferase
remove um bloco de trs grupamentos glicosil de uma ramificao para outra. A
glicose em uma ligao 1,6 da ramificao removida pela ao da glicosidase.
Teoricamente, a glicogenlise ocorre no msculo esqueltico e pode gerar alguma
glicose livre para entrar na corrente sangnea. No entanto, a glicose livre
imediatamente fosforilada e entra na via glicoltica para produzir ATP quando a
demanda energtica baixa.
Os exerccios referentes s Aulas 25, 26 e 27 sero propostos aps a Aula 27.
CEDERJ 165
objetivo
AULA
Biossntese do glicognio
26

Compreender as vias de biossntese do
glicognio.
Pr-requisito
fundamental rever os assuntos ligados
estrutura e funo dos carboidratos, abordados
nas Aulas 32, 33 e 34 de Bioqumica I.
BIOQUMICA II | Biossntese do glicognio
INTRODUO
Em diversos organismos, o excesso de glicose convertido em formas polimricas

para fins de estoque e em dissacardeos para fins de transporte. Como voc
aprendeu em Bioqumica I, a principal forma de estoque de glicose em
vertebrados e em microorganismos o glicognio, enquanto em plantas
o amido. Em vertebrados, a prpria glicose transportada no sangue; em
plantas, a forma de transporte a sacarose; e em insetos a trealose.
Muitas das reaes nas quais as hexoses so transformadas ou polimerizadas
envolvem nucleotdeos ligados a acares, compostos nos quais o carbono
anomrico do acar ativado pela ligao do nucleotdeo, atravs de uma
ligao fosfo-dister. Assim, os acares-nucleotdeo so os substratos para a
polimerizao dos monossacardeos em dissacardeos e polissacardeos.
168 CEDERJ
26 MDULO 7
AULA
A BIOSSNTESE DO GLICOGNIO ENVOLVE UM

NUCLEOTDEO ESPECIAL DA GLICOSE
A glicose fosforilada a glicose 6-fosfato (=glicose 6-P), uma
reao que comum primeira reao da via glicoltica. Esta reao
catalisada pela hexoquinase no msculo e pela glicoquinase no fgado.
Ento a glicose 6-P convertida em glicose-1-P na reao catalisada pela
fosfoglicomutase. Esta enzima, a fosfoglimutase, fosforilada e o grupo
fosfato participa na reao reversvel em que a glicose-1,6-bifosfato
um intermedirio da reao. Veja a reao abaixo:
P
ENZ-P + Glicose-6-P
ENZ + Glicose-1,6-biP
Enz-P + glicose-1-P
A seguir, a glicose 1-P reage com a uridinatrifosfato (UTP) para

formar o nucleotdeo ativo, a uridina-difosfato-glicose (UDPGlicose, ou
UDPGlc). Essa reao catalisada pela enzima UDP-Glc-pirofosforilase.
Veja a estrutura da UDPGlicose na Figura 26.1. Observe a reao:
UTP + Glicose-1P
UDP Glicose + PPi
Figura 26.1: Estrutura da UDP glicose (Uridina difosfato glicose).
CEDERJ 169
A hidrlise subseqente do pirofosfato inorgnico (PPi) pela

pirofosfatase inorgnica desloca o equilbrio da reao para a direita
da equao.
Pela enzima glicognio sintase, o carbono 1 da glicose ativada,
UDPGlc, forma uma ligao glicosdica com o carbono 4 da glicose
terminal do glicognio que est sendo formado, liberando uma uridina
difosfato (UDP). Um resumo da via de sntese do glicognio apresentado
na Figura 26.2. Uma molcula de glicognio preexistente, ou primer de
glicognio, deve estar presente para iniciar a reao.
Figura 26.2: Via de sntese do glicognio.
170 CEDERJ
26 MDULO 7
AULA
At recentemente, a fonte da primeira molcula de glicognio

que podia atuar como um primer na sua sntese era desconhecida.
Recentemente, foi descoberto que uma protena conhecida como
glicogenina e que est localizada no centro da molcula de glicognio,
pode ajudar nesta questo. A glicogenina tem uma propriedade
incomum: a de catalisar a sua prpria glicosilao, fixando o carbono-1
da UDP glicose a um resduo de tirosina na enzima. A glicose fixada
pode servir como um primer requerido pela glicose sintase.
UDPGlicose
(C6)n
UDP
(primer do glicognio)
(C6)n+1
(glicognio)
CRESCIMENTO DA RAMIFICAO DA CADEIA DE

GLICOGNIO
A adio de um resduo de glicose em uma cadeia de glicognio
preexistente, ou primer, ocorre na extremidade no redutora da molcula,
de modo que as ramificaes da rvore de glicognio tornam-se alongadas
pela formao de ligaes de glicose 1
4 sucessivas (veja Figura
26.3). Quando a cadeia for alongada em 11 resduos de glicose, uma outra

enzima, a enzima de ramificao, isto , a (amido [1
transglicosidase) transfere parte da cadeia 1
6]
4 (mnimo de seis resduos
de glicose) para uma cadeia adjacente, para formar uma ligao 1
6,
estabelecendo assim um ponto de ramificao na molcula. As ramificaes

crescem por novas adies de unidades de glicose 1
4 e formam-se
novas ramificaes. Como aumenta o nmero de resduos terminais no

redutores, tambm aumenta o numero total de stios reativos da molcula,
acelerando tanto a glicognese como a glicogenlise.
A glicogenlise e a glicognese ocorrem no citosol das clulas
hepticas e musculares. Assim, como o intermedirio glicose-1P
gerado na glicogenlise e este mesmo intermedirio pode ser usado para
a glicognese, h necessidade de um mecanismo de regulao muito
ajustado para que stios fteis (degradao e biossntese de glicognio
simultaneamente) no ocorram em uma mesma clula. sobre esse
processo de regulao que falaremos na Aula 27.
CEDERJ 171
(7) UDP glicose
Figura 26.3: Ao da enzima ramificadora.
172 CEDERJ
26 MDULO 7
AULA
RESUMO
A sntese do glicognio a partir da glicose executada pela glicognio sintase.

Esta enzima utiliza como substratos: a UDP glicose e o estado final no reduzido
do glicognio com outro substrato.
A ativao de glicose, para ser usada pela sntese de glicognio, executada
pela UDP glicose-pirofosforilase. Esta enzima troca o fosfato do carbono-1 da
glicose-1-fosfato por UDP. A energia da ligao fosfoglicosil da UDP glicose
utilizada pela glicognio-sintase para catalisar a incorporao de glicose em uma
molcula preexistente do glicognio. A molcula de UDP subseqentemente
liberada da enzima. As ramificaes -(1,6) na glicose so formadas pela ao da
amilo-(1,4-1,6)-transglicosilase, tambm designada por enzima de ramificao.
Esta transfere um fragmento terminal dos resduos 6-7 da glicose (de um
polmero de no mnimo 11 resduos de glicose) para um resduo interno na
posio hidroxil C-6.
A glicogenina, uma protena de 37 kDa, atua como um primer para a sntese
do glicognio.
Detalhes sobre as Aulas 25 e 26 podem ser obtidos no site:

http://www.icb.ufmg.br/~lbcd/prodabi3/grupos/grupo5/grupo5.html
CEDERJ 173
objetivos
AULA
Regulao do metabolismo
do glicognio
27

Aprender sobre as vias de regulao do
metabolismo de glicognio.
Reforar os conceitos adquiridos sobre
regulao alostrica, regulao por
modulao covalente e regulao hormonal.
Pr-requisito
Conhecimentos adquiridos nas
Aulas 2, 3, 25 e 26 de Bioqumica II.
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
INTRODUO
Na Aula 25 voc viu uma figura (25.1) que comparava os grnulos de glicognio,
presentes no citosol de um hepatcito de rato bem alimentado, com os grnulos
existentes em um hepatcito de um rato em jejum. Voc aprendeu, nas Aulas
25 e 26, que a degradao do glicognio e a sua sntese ocorrem prximo a
estes grnulos, e, portanto, no citosol. Assim, podemos deduzir que as duas
enzimas chaves do metabolismo do glicognio, a glicognio fosforilase e a
glicognio sintase, estejam distribudas no citosol.
Agora pensemos juntos...
Durante a degradao do glicognio liberamos glicose-1-fosfato pela ao
da glicognio fosforilase; esta molcula usada na sntese do glicognio,
pela ao da glicognio sintase. Uma clula precisa, portanto, de sistemas de
regulao muito aprimorados para impedir a realizao de ciclos fteis, ou
seja, reaes que aparentemente no conduziriam a lugar algum. Neste caso,
a glicose 1-P gerada na degradao do glicognio para atender a necessidade
de aumento dos nveis de glicose sangnea ou para alimentar a via glicoltica
poderia ser imediatamente utilizada para repor as reservas de glicognio. Para
impedir tal ciclo ftil, nosso organismo desenvolveu mecanismos de controle
simultneos para cada uma destas duas enzimas. So estes mecanismos que
sero abordados nesta aula.
176 CEDERJ
27 MDULO 7
AULA
REGULAO DA GLICOGNIO FOSFORILASE

Como voc deve ter aprendido na Aula 25, a glicognio fosforilase
degrada glicognio para gerar glicose quando os nveis desta, na corrente
sangnea, esto baixos. Assim, utilizamos glicognio durante o jejum
(como, por exemplo, no intervalo entre as refeies) ou ainda quando
necessitamos de energia. Um indicativo para a clula de que a demanda
energtica est baixa pode ser visualizado por aumentos nos nveis de
AMP ou por decrscimo na concentrao de ATP. Em funo destas
observaes, fcil compreendermos que a glicognio fosforilase esteja
sujeita ativao alostrica por AMP cclico e inibio por glicose e
ATP. Alm da regulao alostrica, a glicognio fosforilase est sujeita
tambm a uma regulao por modulao covalente.
A glicognio fosforilase existe em uma forma a, ativa, e
em uma forma b que inativa. Estas formas so interconvertidas
pela ao das enzimas glicognio fosforilase quinase e fosfo protena
fosfatase. A primeira enzima catalisa a adio de um fosfato na enzima
glicognio fosforilase (lembre-se de que toda enzima classificada como
quinase catalisa reaes de fosforilao), enquanto a fosfo-protena
fosfatase retira este fosfato adicionado. Voc pode ento observar
que a glicognio fosforilase quinase ativa a glicognio fosforilase, e a
fosfo-protena fosfatase inibe a glicognio fosforilase. Essas reaes de
fosforilao ou de desfosforilao (um tipo particular de modulao
covalente) promovem mudanas conformacionais na glicognio
fosforilase, que tm como conseqncias a transformao da enzima
para um estgio cataltico mais ativo, quando fosforilada, ou um estgio
!
Se voc teve dvida sobre o
que regulao alostrica
e regulao por modulao
covalente, leia novamente
a Aula 3.
cataltico menos ativo, quando desfosforilada. Observe um resumo

destas informaes na Figura 27.1.
CEDERJ 177
Figura 27.1: Regulao da glicognio fosforilase e da glicognio fosforilase quinase por

modulao covalente.
A fosforilao converte as enzimas glicognio
fosforilase e glicognio fosforilase quinase em
suas formas ativas: glicognio fosforilase (a) e
glicognio fosforilase quinase (a).
A enzima glicognio fosforilase quinase catalisa a reao de

adio de um fosfato, doado pelo ATP, enzima glicognio fosforilase,
sendo, portanto, responsvel pela ativao desta ultima enzima.
Entretanto, a glicognio fosforilase quinase est tambm sujeita
regulao por uma protena quinase A. Olhe novamente para a Figura
27.1 e observe estas afirmaes. Voc pde reparar que a glicognio
fosforilase quinase tambm existe nas formas (a) e (b). A mudana da
forma (b) para a forma (a) ocorreu aps a fosforilao catalisada pela
protena quinase. Novamente o fosfato inorgnico (Pi) adicionado
veio de uma molcula de ATP.
Agora pense comigo: Se a protena quinase A estivesse sempre
ativa na clula, provavelmente ela ativaria a glicognio fosforilase
quinase, que por sua vez ativaria a glicognio fosforilase. Com a
glicognio fosforilase ativa seria praticamente impossvel estocar
glicognio. Logo, com certeza, deve haver um mecanismo para
regular a protena quinase A, a enzima responsvel por disparar o
processo de regulao das duas outras enzimas; este o mecanismo
que estudaremos agora.
178 CEDERJ
27 MDULO 7
AULA
REGULAO DA PROTENA QUINASE A

A protena quinase A formada por quatro cadeias polipeptdicas,
ou seja, um tetrmero com duas subunidades reguladoras e duas
subunidades catalticas que se encontram associadas, quando a enzima
est na forma inativa. Quatro molculas de AMP cclico (adenosina
mono-fosfato cclica cAMP) se ligam s subunidades reguladoras,
sendo duas por subunidade. Aps a associao das molculas de AMP
cclico s subunidades reguladoras, as duas subunidades catalticas so
liberadas, expondo seus stios ativos. Neste caso dizemos que a protena
quinase foi ento ativada. Veja a Figura 27.2.
Figura 27. 2: Ativao da protena quinase.
Todo o processo de ativao estaria resolvido se voc soubesse quem

a molcula AMP cclico e como ela formada. Vamos ento conhecer
o processo de formao do AMP cclico, uma molcula conhecida como
um segundo mensageiro celular.
CEDERJ 179
FORMAO DO AMP CCLICO

Antes de falarmos exatamente sobre a formao do AMP cclico
importante que voc relembre as situaes metablicas nas quais um
organismo necessita utilizar suas reservas de glicognio. Duas so as
principais situaes: a primeira no intervalo entre as refeies, onde
o glicognio heptico consumido para manter os nveis da glicose
sangnea em valores normais; a segunda ocorre nos momentos em que
o organismo precisa de energia para movimentos, como por exemplo
durante o exerccio, ou em uma situao de alerta. No primeiro caso,
normalmente o sinal endgeno queda nos nveis de glicose sangnea,
situao qual o organismo responde liberando o hormnio glucagon; no
segundo caso o hormnio adrenalina liberado. Os hormnios glucagon
e adrenalina so, portanto, os primeiros mensageiros. Estes hormnios
so liberados na circulao, se dirigem aos rgos- alvos, mas no podem
atravessar a membrana celular. Assim, glucagon e adrenalina se ligam aos
receptores presentes no fgado, no caso do glucagon, e no msculo, no
caso da adrenalina. Os receptores de membrana esto associados a uma
protena que pode se ligar ao nucleotdeo guanosina trifosfato (protena
G). Aps esta ligao, a protena G se desloca atravs da membrana e
ativa uma enzima, a adenilato ciclase, que se encontra associada a esta
membrana. A adenilato ciclase converte ATP em AMP cclico no citosol
das clulas hepticas e musculares. Veja a estrutura do AMP cclico na
Figura 27.3 e o seu processo de formao na Figura 27.4.
Figura 27.3: Estrutura da adenosina monofosfato (AMP Cclico).
180 CEDERJ
27 MDULO 7
AULA
Figura 27.4: Processo de formao do AMP cclico.
CEDERJ 181
Para dar prosseguimento s reaes catalisadas pela protena

quinase A, uma molcula de ATP se associa ao stio cataltico que foi
exposto em cada uma das duas subunidades, permitindo que a protena
a ser fosforilada receba um fosfato desta molcula de ATP. A protena
quinase fosforilada se dissocia da subunidade cataltica e est pronta
para ativar outras protenas no interior da clula. No caso em anlise,
a protena a ser fosforilada para ser ativada a glicognio fosforilase
quinase. Esta enzima catalisa a ativao da glicognio fosforilase que
atua diretamente sobre o glicognio. Observe esta cascata de ativaes
na Figura 27.5.
Figura 27.5: Cascata de ativao da

glicognio fosforilase.
182 CEDERJ
27 MDULO 7
AULA
REGULAO DA GLICOGNIO SINTASE

Bem, voc j sabe que a glicognio sintase catalisa a sntese da
molcula de glicognio e que usa os componentes que so gerados na
degradao. Assim, a glicognio sintase deve ser ativada no mesmo
momento em que a glicognio fosforilase for inativada para que ciclos
de reao fteis no ocorram na clula. Veja a forma eficiente que a
clula adotou para solucionar esta situao: a mesma protena quinase
que fosforila a glicognio fosforilase quinase, ativando-a, fosforila a
glicognio sintase, tornando-a inativa.
Podemos concluir ento que os hormnios que dispararam o
processo de ativao das enzimas envolvidas nas etapas de degradao
do glicognio, no caso o glucagon e a adrenalina, so capazes de inibir
a enzima-chave do processo de biossntese.
Se voc observar cuidadosamente a parte inferior das Figuras 27.1
e 27.6, notar que o hormnio insulina ativa a fosfoprotena fosfatase,
uma enzima que catalisa a hidrlise da ligao ster-fosfato de protenas
que foram fosforiladas, tanto glicognio sintase quanto glicognio
fosforilase. Assim, a insulina um hormnio que possui uma
ao sobre o metabolismo do glicognio, antagnica ao
glucagon e adrenalina. Ou seja, ela estimula os
processos que levem sntese do glicognio.
Este hormnio liberado pelo nosso
organismo logo aps as refeies para
que os estoques de glicognio sejam
repostos. Este assunto ser tambm
abordado nas Aulas 30, 31 e 32.
Figura 27.6: Regulao da glicognio sintase

por modulao covalente.
A fosforilao converte glicognio sintase a
(ativa) em glicognio sintase b (inativa).
CEDERJ 183
RESUMO
A degradao do glicognio muscular ocorre quando a situao energtica da

clula baixa, ou seja, quando os nveis de ATP esto baixos e os nveis de AMP
esto elevados.
O glicognio heptico utilizado no intervalo entre as refeies.
A enzima chave do processo de glicogenlise a glicognio fosforilase. Esta
enzima regulada por efetores alostricos, por modulao covalente do tipo
fosforilao e por regulao hormonal.
O AMP um efetor positivo (ativador) da glicognio fosforilase; j a glicose e
o ATP so efetores negativos.
A glicognio fosforilase existe em duas conformaes: uma inativa, desfosforilada,
a forma b; uma forma ativa, fosforilada, a forma a. A enzima responsvel por esta
fosforilao a glicognio fosforilase quinase.
A enzima glicognio fosforilase quinase ativada por uma cascata de reaes
disparada pelo aumento dos nveis de AMP cclico dentro da clula.
Os hormnios glucagon e adrenalina apresentam um mecanismo de ao
mediado por AMP cclico. So hormnios cuja ao final acelerar o processo de
glicogenlise.
A insulina um hormnio que ativa a fosfo-protena fosfatase, a enzima que
catalisa a reao de retirada de um fosfato da enzima glicognio fosforilase,
inativando-a. A insulina , portanto, um hormnio que interrompe o processo de
glicogenlise e ativa o processo de glicognese.
A enzima chave do processo de glicognese a glicognio sintase, a qual
regulada tambm por fosforilao. No entanto, de maneira oposta glicognio
fosforilase, a glicognio sintase inibida por fosforilao. Ambas as enzimas esto
presentes no citosol e necessitam da protena quinase A para serem fosforiladas.
Assim, o fato de a glicognio fosforilase ser ativada por um mesmo processo que
inativa a glicognio sintase permitiu clula coordenar processos de degradao e
biossntese do glicognio, passando por intermedirios comuns, dentro do mesmo
compartimento celular.
184 CEDERJ
27 MDULO 7
1. Explique como as seguintes observaes identificam o ponto de regulao da

sntese de glicognio no msculo esqueltico.
a) A medida da atividade da glicognio sintase no msculo em repouso, expressa
em micromoles de UDP glicose usada por grama por minuto, menor do que a
atividade da fosfo glicomutase medida tambm como micromoles de substrato
transformada por grama por minuto.
b) O estmulo da sntese de glicognio leva a um decrscimo na concentrao de
glicose 6-fosfato, a um grande decrscimo na concentrao de UDP glicose e a
um substancial aumento de UDP.
Relacione as seguintes enzimas s situaes apresentadas nas questes 2 a 5
(justifique cada resposta).
A- Glicognio fosforilase
B- Enzima desramificadora
C- Protena quinase
D- Adenilato ciclase
E- Glicose 6-fosfatase
2. Quando os nveis de glucagon sangneo aumentam, quais enzimas aumentam?
3. Qual enzima bifuncional?
4. Qual enzima no est presente nos msculos mas est presente no fgado?
CEDERJ 185
AULA
EXERCCIOS REFERENTES S AULAS 25, 26 E 27
5. Qual enzima catalisa a retirada de uma molcula de glicose1-P do glicognio?
6. Quando os nveis de glicose so diminudos h uma ativao da glicognio

fosforilase. Faa um esquema desse processo.
7. Discuta sobre o processo que permite a sntese do glicognio.
8. A fosforilao ativa quais das seguintes enzimas?

(justifique cada resposta)
A- Glicognio fosforilase.
B- Protena quinase.
C- Fosforilase quinase.
D- Glicognio sintase.
186 CEDERJ
objetivo
AULA
Introduo
gliconeognese
28

Conhecer uma importante via metablica
que tem como funo a manuteno dos
nveis sangneos de glicose. Entretanto, o
objetivo mais importante desta aula no
ser estudarmos em detalhe as reaes que
fazem parte desta via, mas sim comearmos a
entender o metabolismo de nosso organismo
de forma mais integrada.
Pr-requisito
Voc deve ter acompanhado bem a matria at
agora, pois vai ser necessrio retornar a vrios
pontos explorados anteriormente.
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
INTRODUO
At agora, voc conheceu diversos caminhos metablicos responsveis tanto

pela degradao dos nutrientes com conseqente sntese de ATP, como
tambm pela sntese de macromolculas fundamentais para o funcionamento
das clulas e do organismo. Para terminarmos nosso curso, ainda precisamos
estudar mais uma via metablica, chamada gliconeognese, que o tema
de nossas prximas aulas. Entretanto, faremos isso de uma forma um pouco
diferente, pois usaremos o estudo desta via para comearmos a integrar todo
o conhecimento adquirido at agora, de forma que voc consiga construir
uma viso de como funciona nosso corpo. Por isso, talvez, muitas vezes seja
necessrio voltar s aulas anteriores para consultas, o que voc deve fazer
sempre que sentir necessidade. Assim, esta parte da matria tambm permitir
que voc revise e sedimente vrios pontos anteriormente estudados.
Vamos comear com uma atividade que servir para voc relembrar os principais
aspectos relacionados utilizao de nutrientes pelo organismo e tambm para
introduzir o tema da aula.
ESTUDOS SOBRE O JEJUM PROLONGADO

Na dcada de 1960, uma corrente da Medicina pregava que a
melhor forma de tratar a obesidade era submeter os pacientes obesos a um
jejum prolongado assistido. Com isso, muitos indivduos se internaram
por cerca de seis semanas, as quais passaram sem se alimentar. Alm de
promover de fato o emagrecimento dos pacientes, esse tipo de tratamento
permitiu a obteno de uma srie de dados a respeito do comportamento
do organismo em decorrncia da falta de alimentao. Desta forma, o
estudo do metabolismo durante o jejum possibilitou a compreenso
de uma srie de regulaes e adaptaes metablicas essenciais para
o entendimento do funcionamento do nosso corpo, mesmo em outras
situaes bem mais freqentes.
188 CEDERJ
28 MDULO 7
AULA
Vamos, agora, observar a Tabela 28.1. Ela mostra algumas

medidas obtidas a partir do acompanhamento dos pacientes obesos
em tratamento.
Tabela 28.1: Variaes das concentraes plasmticas de glicose e cidos graxos e do contedo de glicognio
heptico de um paciente em jejum prolongado.
0
5,5
glicose] (mM)
0,3
[cidos graxos] (mM)
Glicognio heptico (g) 97
2h
4h
5,4
0,35
84
5,0
0,4
70
1 dia 3 dias 7 dias 8 dias 10 dias 28 dias

4,4
0,5
14
3,8
1,18
3
3,6
1,15
--
3,5
1,58
--
3,8
1,36
--
3,6
1,44
--
Tente construir, a partir dos dados apresentados na tabela, um

grfico que relacione o tempo em jejum com a concentrao sangnea de
Contedo de glicognio heptico

(g)
heptico (g)
glicose e de cidos graxos e com a quantidade de glicognio no fgado.
CEDERJ 189
Confira se o grfico construdo por voc ficou igual ao grfico
Contedo de glicognio heptico (g)
Figura 28.1: Variaes das concentraes plasmticas de glicose e cidos graxos e do

contedo de glicognio heptico de um paciente em jejum prolongado.
VARIAES NA CONCENTRAO SANGNEA DE CIDOS

GRAXOS DURANTE O JEJUM
Vamos comear analisando o que ocorre com a concentrao de
cidos graxos circulantes. Observando o grfico, vemos que ocorre um
aumento da concentrao sangnea dessas molculas logo no incio
do jejum. Isso se d, como j vimos na aula que trata da degradao
dos cidos graxos, devido ativao da liplise no tecido adiposo,
resultando na hidrlise dos triacilgliceris armazenados e na liberao,
para a corrente sangnea, de glicerol e cidos graxos. Estes ltimos
passam a ser utilizados como fonte energtica exclusiva pela maioria dos
rgos e tecidos, incluindo o fgado, os msculos e os rins. O aumento
da liplise ocorre pela ativao da enzima lipase sensvel a hormnio
(LHS) no tecido adiposo.
At o momento ficou claro o motivo do aumento da concentrao
de cidos graxos circulantes no incio do jejum.
190 CEDERJ
28 MDULO 7
AULA
Mas, e aps alguns dias? Vemos no grfico que os nveis dessas molculas se
estabilizam, permanecendo constantes ao longo de todo o jejum. Como voc
explicaria essa observao? Ser que o organismo de repente pra de usar os
cidos graxos?
No. O motivo da estabilizao que, ao mesmo tempo em que

est ocorrendo a hidrlise dos triacilgliceris e a liberao de cidos
graxos do tecido adiposo, vrios rgos e tecidos esto consumindo esses
nutrientes como fonte de energia. o caso do fgado, dos msculos, do
prprio tecido adiposo, dos rins etc. Por isso, ao longo de todo o jejum,
os triacilgliceris vo sendo consumidos, de forma que o tecido adiposo
vai diminuindo e o indivduo vai emagrecendo. Observe na Tabela 28.2
a perda de peso de vrios indivduos submetidos ao jejum como forma
de tratamento da obesidade na dcada de 1960.
Tabela 28.2: Caracterizao dos indivduos submetidos ao jejum prolongado.
Indivduo Idade (anos)
1
2
3
4
5
19
21
28
16
20
Sexo
M
M
M
F
F
Peso (kg)
Inicial
Final
Diferena
125,2
160,6
178,6
104,1
108,9
101,8
138,2
159,6
88,4
93,0
23,4
22,4
15,7
15,7
15,9
Lembre-se de que as
reaes da -oxidao
dos cidos graxos
levam produo de
1 NADH e 1 FADH2
por cada dois carbonos
retirados da cadeia
do cido graxo. Essas
coenzimas reduzidas
levam eltrons para
a cadeia respiratria,
contribuindo para
a sntese de ATP.
Alm disso, as
vrias molculas de
acetil-CoA formadas
tambm podem
ser completamente
oxidadas no ciclo de
Krebs, gerando mais
ATPs.
Agora que voc entendeu bem a utilizao dos cidos graxos ao

longo do jejum, podemos levantar uma outra questo.
Ser que todas as nossas clulas esto usando os cidos graxos como fonte de
energia nessa situao?
CEDERJ 191
Para responder a essa pergunta, voc precisa primeiro relembrar

mais alguns aspectos relacionados -oxidao dos cidos graxos.
As enzimas que catalisam as reaes dessa via se localizam na matriz
mitocondrial, onde se encontra todo o aparato oxidativo da clula.
Entretanto, nem todas as nossas clulas possuem mitocndrias. O exemplo
mais conhecido o das hemcias, que perdem todas as suas organelas ao
longo de seu amadurecimento. Podemos citar tambm algumas clulas
do olho, que, por estarem envolvidas com a captao de luz, no podem
conter muitas molculas que absorvem luz na faixa do visvel, como os
citocromos, uma vez que estes poderiam interferir no processo da viso.
Assim, estas clulas possuem pouqussimas mitocndrias.
Logo, essas clulas, por no possurem mitocndrias, no podem
Para tirar qualquer
duvida sobre
fermentao
consulte as Aulas
10 e 11.
realizar a -oxidao nem o metabolismo oxidativo, e sintetizam suas

molculas de ATP atravs do processo de fermentao lctica, cujo
substrato a glicose.
Mas no so apenas as clulas sem
Como voc aprendeu em Bioqumica I, os
mitocndrias que realizam o metabolismo
lipdeos, por serem molculas apolares, e,
anaerbico, que so incapazes de utilizar
portanto, no solveis em meio aquoso, circulam
os cidos graxos como fonte de energia. As
no sangue associados a protenas, formando
clulas do tecido nervoso se encontram isoladas
as lipoprotenas plasmticas. Diferentes

lipoprotenas so responsveis pelo transporte
por um tecido especializado, chamado barreira
dos lipdeos, dependendo da origem do lipdeo.
hemato-enceflica, que filtra o sangue antes que
Os lipdeos obtidos da alimentao circulam
este atinja o crebro. Os cidos graxos, que
associados aos quilomcrons; os lipdeos

sintetizados no fgado circulam associados s
circulam associados albumina, no conseguem
LDL ou VLDL (lipoprotena de densidade baixa
atravessar essa barreira, e, por isso, no chegam
ou muito baixa, respectivamente); os cidos
ao crebro. Assim, o nutriente disponvel para

o metabolismo cerebral a glicose.
192 CEDERJ
graxos liberados do tecido adiposo circulam

associados albumina.
28 MDULO 7
AULA
VARIAES NA CONCENTRAO SANGNEA DE GLICOSE

DURANTE O JEJUM
Vamos voltar ao nosso grfico.
Agora que voc j sabe que existem alguns tipos celulares que,
por serem incapazes de usar os cidos graxos, requerem a glicose como
fonte de energia, tente explicar a curva de variao da concentrao de
glicose no sangue dos indivduos em jejum.
Observe que, no incio, a GLICEMIA cai um pouco. Entretanto, logo
GLICEMIA
aps esse perodo inicial de jejum, a concentrao sangnea de glicose
Concentrao de
glicose no sangue.
se mantm estvel.
De fato, a concentrao sangnea de glicose sempre mantida
dentro de limites bastante estreitos, independentemente de qual seja o
consumo deste nutriente pelo organismo. Essa homeostase de glicose se
d devido a uma srie de mecanismos reguladores, que vamos estudar
em aulas mais frente. Estes mecanismos so extremamente importantes,
j que disfunes na capacidade de manter a glicemia levam a graves
conseqncias: a diminuio acentuada dos nveis de glicose no sangue,
mesmo que por perodos curtos, pode causar graves distrbios no crebro,
e, se for prolongada, pode levar at morte. E no s durante o
jejum que a glicemia mantida constante. A hiperglicemia por longos
perodos tambm provoca vrios problemas metablicos, como aqueles
observados em quadros de diabetes. Estudaremos tambm este aspecto
da homeostase de glicose em aulas mais frente.
Mas como a glicemia mantida?

Voc j aprendeu que possumos uma
reserva de glicose armazenada no fgado:
o
GLICOGNIO ,
um polmero de glicose. A
degradao do glicognio heptico leva

liberao de glicose na corrente sangnea.
Poderamos pensar, ento, que a degradao
Para tirar qualquer

dvida consulte
a aula sobre a
degradao de
GLICOGNIO.
do glicognio heptico seria o mecanismo

responsvel pela manuteno da glicemia
durante o jejum.
Ser que isso verdade?
CEDERJ 193
VARIAES NA QUANTIDADE DE GLICOGNIO HEPTICO

AO LONGO DO JEJUM
Observe outra vez o grfico que voc construiu. O que ocorre

com o glicognio heptico do paciente em jejum?
Como voc pode observar, a quantidade de glicognio no fgado
No confunda
as palavras
GLICONEOGNESE, que
quer dizer sntese
(gnese) da nova
(neo) glicose, com
glicogenlise, que
significa quebra ou
degradao (lise) do
glicognio.
diminui rapidamente, se esgotando no primeiro dia do jejum. Assim,

embora o glicognio contribua para a manuteno da glicemia logo
nos primeiros momentos, uma outra via necessria aps perodos
maiores nos quais carboidratos no so ingeridos. Esta via chamada
GLICONEOGNESE, que significa sntese da nova glicose, e, nos mamferos,
ocorre no fgado e no crtex renal.
A VIA GLICONEOGNICA
Na dcada de 1930, um casal de pesquisadores chamados Carl e

Gerti Cori, conhecidos como o casal Cori, comeou a estudar a sntese
de glicose por clulas hepticas. Eles prepararam um homogeneizado de
fgado, ou seja, bateram um fgado em uma espcie de liquidificador, de
forma que todas as clulas eram rompidas, obtendo-se uma suspenso
contendo todo o meio intracelular: organelas, enzimas, metablitos etc.
Colocaram esse homogeneizado em um tubo de ensaio e adicionaram
lactato marcado radioativamente. Aps um tempo, identificaram os
compostos radioativos presentes no tubo de ensaio com o objetivo de
determinar qual era o destino metablico do lactato nas clulas hepticas.
Observaram que a radioatividade estava presente principalmente em
molculas de glicose. A concluso desta experincia foi que o lactato
podia ser transformado em glicose no fgado.
194 CEDERJ
J se sabia, na poca, que o lactato podia ser convertido em

piruvato atravs de reao reversvel catalisada pela enzima lactato
desidrogenase, presente em vrios tipos celulares, inclusive no fgado.
Veja a reao na Figura 28.2:
Figura 28.2: Reao catalisada pela enzima lactato desidrogenase.
Logo, o que estava de fato ocorrendo no homogeneizado preparado pelo casal Cori era a transformao de piruvato em glicose.
Esses achados levantavam a hiptese de que a via de formao de
glicose, ou seja, a gliconeognese, seria a inverso da via glicoltica, que, como
(levando a diferentes
afinidades) para
seus substratos. Por
exemplo, a isoforma
presente no msculo
esqueltico possui mais
afinidade pelo piruvato
do que pelo lactato.
Por isso, quando o
msculo entra em
alta atividade, logo
aps um pequeno
acmulo de piruvato,
que no pode ser
completamente
oxidado devido a um
aporte insuficiente de
oxignio, o lactato
produzido. Por outro
lado, a isoforma
heptica tem maior
afinidade pelo lactato,
transformando este
em piruvato quando
sua disponibilidade
aumenta.
voc j sabe, converte a glicose em duas molculas de piruvato. Entretanto, se

observamos atentamente as reaes da gliclise, podemos encontrar algumas
que so irreversveis nas condies fisiolgicas. Veja a Figura 28.3, que
contm as variaes de energia livre de Gibbs (G) envolvidas em cada
reao da gliclise. Lembre-se de que quanto mais negativo forem os valores
de G, mais energia liberada na reao, e, conseqentemente, mais difcil
ser a sua inverso nas condies da medida.
CEDERJ 195
28 MDULO 7
A lactato desidrogenase
apresenta isoformas
expressas nos
diferentes tecidos.
Estas isoformas se
diferenciam com
relao ao seu KM
AULA
E como isso ocorria?
Piruvato
Figura 28.3: Resumo esquemtico da via glicoltica mostrando os valores de G
(Kcal/mol) para cada uma das reaes.
Analisando a Figura 28.3, podemos concluir que trs reaes da

gliclise no podem ser revertidas nas condies fisiolgicas: a converso
de glicose em glicose-6P, catalisada pela enzima hexocinase; a converso de
frutose em frutose-6P, catalisada pela enzima fosfofrutocinase-1 (PFK-1);
e a converso de fosfoenolpiruvato (PEP) em piruvato, catalisada pela
enzima piruvato cinase. Portanto, essas etapas devem ser contornadas por
outras reaes para que a gliconeognese possa ocorrer. E exatamente
isso que ocorre! A glicose sintetizada atravs das mesmas reaes da
gliclise, exceto pelas reaes irreversveis, que so contornadas por
outras reaes, como veremos na prxima aula.
196 CEDERJ
28 MDULO 7
AULA
RESUMO
Embora muitos rgos e tecidos possam manter seus nveis de ATP essencialmente
atravs da oxidao de cidos graxos, alguns tipos celulares dependem
exclusivamente ou preferencialmente da glicose como nutriente. Este o caso
do crebro, das hemcias e de algumas outras clulas em menor nmero no
organismo. Para a sobrevivncia dessas clulas em situaes nas quais a ingesto de
carboidratos baixa ou nula, necessria a sntese de glicose a partir de precursores
no-glicdicos, atravs de uma via metablica chamada gliconeognese.
A gliconeognese pode ser considerada uma reverso parcial da via glicoltica,
uma vez que vrias reaes da gliclise so usadas na sntese de glicose. As reaes
irreversveis da gliclise, catalisadas pelas enzimas hexocinase, PFK-1 e piruvato
cinase, so substitudas por reaes diferentes, catalisadas por outras enzimas,
na gliconeognese.
EXERCCIOS
1. A homeostase de glicose extremamente importante para nosso organismo.
Um dos motivos a existncia de alguns tipos celulares que requerem
exclusivamente ou preferencialmente a glicose como nutriente. D exemplos
de clulas que se comportam assim e justifique a dependncia que elas tm
da glicose.
2. Justifique o emagrecimento de um indivduo mantido em jejum.
3. Por que a gliconeognese no pode ser uma simples reverso da glicose?
CEDERJ 197
objetivo
AULA
A via gliconeognica
29
Na aula passada, voc aprendeu que a

manuteno da glicemia extremamente
importante para a nossa sobrevivncia.
Voc aprendeu, tambm, que isso possvel
graas gliconeognese, uma via metablica
responsvel pela sntese de glicose a partir
de precursores no glicdios. Essa via uma
reverso parcial da via glicoltica, j que as
reaes reversveis da gliclise so usadas
no sentido inverso para a sntese de glicose.
Entretanto, reaes adicionais so necessrias
para que as reaes irreversveis da gliclise
sejam contornadas. Hoje aprenderemos que
reaes so essas.
Pr-requisito
Para seguir bem esta aula, voc deve estar
com uma boa viso geral das seguintes vias
metablicas: gliclise, ciclo de Krebs,
degradao de aminocidos, sntese e
degradao de cidos graxos.
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
A CONVERSO DE PIRUVATO A FOSFOENOLPIRUVATO (PEP)

A primeira reao da gliclise que deve ser contornada a
converso de fosfoenolpiruvato (PEP) a piruvato, catalisada pela enzima
piruvato cinase. A formao de PEP a partir de piruvato envolve uma
grande barreira energtica, que para que seja superada necessita de duas
etapas. Na primeira, o piruvato convertido em oxalacetato, atravs
da sua carboxilao, catalisada pela enzima piruvato carboxilase. Na
segunda, o oxalacetato convertido a PEP, atravs de reao catalisada
pela enzima PEP carboxicinase (PEPCK).
Veja um esquema dessas duas reaes na Figura 29.1:
Figura 29.1: Converso de piruvato em oxalacetato e, ento, em PEP.
Assim como ocorre

com a acetil-CoA
carboxilase, a piruvato
carboxilase contm
biotina como grupo
prosttico. A biotina
funciona como um
carreador de CO2 nessas
reaes.
Repare que o CO2 usado na formao de oxalacetato , em seguida,

eliminado na formao de PEP. Isso parece um desperdcio primeira
vista, mas, na verdade, uma forma de ativao do piruvato para que
seja possvel sua converso em um composto de mais alta energia, o PEP.
Essa ativao se d custa da hidrlise de um ATP, como mostrado na
Figura 29.1. A reao da piruvato carboxilase bastante semelhante a
uma outra reao de carboxilao j estudada por voc: a reao da
A converso de
piruvato em PEP na
gliconeognese custa
para a clula duas
molculas de ATP,
enquanto a converso
de PEP em piruvato
durante a gliclise gera
apenas uma molcula
de ATP.
200 CEDERJ
acetil-CoA carboxilase, na sntese de cidos graxos.

A converso de oxalacetato em PEP requer a hidrlise de um
GTP, com incorporao do fosfato molcula do PEP. A hidrlise de
um GTP equivale hidrlise de um ATP, uma vez que essas molculas
se interconvertem. Dessa forma, para que seja contornada a reao da
piruvato cinase so gastas duas molculas de ATP.
29 MDULO 7
AULA
A LOCALIZAO INTRACELULAR DAS DUAS PRIMEIRAS

ETAPAS DA GLICONEOGNESE
A piruvato carboxilase uma enzima de localizao essencialmente
mitocondrial, de modo que a formao de oxalacetato a partir de piruvato
ocorre dentro da mitocndria.
A localizao da PEPCK varia entre as diferentes espcies.
No fgado de camundongos e ratos, ela se localiza exclusivamente
no citosol, enquanto em fgado de coelhos e pombos essa enzima
mitocondrial. J em humanos, a PEPCK igualmente distribuda no
citosol e na mitocndria das clulas hepticas.
Quando a PEPCK usada a isoforma mitocondrial, o oxalacetato
pode ser diretamente convertido a PEP dentro da mitocndria, sendo
este transportado para o citosol atravs de uma protena transportadora
presente na membrana mitocondrial. O PEP, ento, segue pelas reaes
reversveis da via glicoltica, cujas enzimas se localizam no citosol, at
formar frutose-1,6-bisfosfato (frutose-1,6-BP).
Quando a PEPCK usada a isoforma citoplasmtica, o oxalacetato,
primeiramente, deve ser transportado para o citosol. Entretanto, no
existe transportador de oxalacetato na membrana mitocondrial. Assim,
neste caso, o que acontece um pouco mais complicado. O oxalacetato
deve ser convertido em outra molcula, antes de ser transportado para o
lado de fora da mitocndria. Isso pode ocorrer de duas maneiras, como
CEDERJ 201
Figura 29.2: Transporte do oxalacetato da mitocndria para o citosol. O oxalacetato pode ser transportado
atravs de sua converso em aspartato (1) ou em malato (2). O caso 2 envolve oxidao de NADH mitocondrial
com concomitante reduo de NAD+ citoplasmtico, levando ao transporte simultneo de equivalente de NADH
da mitocndria para o citosol.
Voc j aprendeu esta

reao na aula que
tratou do metabolismo
dos aminocidos.
As transaminases so
enzimas amplamente
distribudas nos
diversos tipos celulares,
ocorrendo tanto no
citoplasma como na
mitocndria. Assim,
se torna possvel o
transporte indireto
do oxalacetato da
mitocndria para o
citosol.
Uma possibilidade a converso do oxalacetato em aminocido

aspartato pela ao da enzima aspartato aminotransferase. O aspartato
, ento, transportado para o citosol, onde reconvertido em oxalacetato
pela mesma enzima, podendo finalmente ser convertido a PEP.
A outra forma de o oxalacetato ser transportado para o
citosol requer sua converso em malato, atravs da ao da enzima
malato desidrogenase. Essa reao envolve a oxidao de um NADH
mitocondrial, formando NAD+, alm de malato. O malato pode ser
transportado para o citosol, onde reconvertido a oxalacetato. Nesse
momento, ocorre reduo de NAD+ citoplasmtico. Analise atentamente
a Figura 29.2 para compreender bem todas essas etapas.
A reao da malato desidrogenase uma das reaes

do ciclo de Krebs, j estudada por voc. Nesse caso,
entretanto, ela ocorre no sentido inverso. Isso
possvel graas ao aumento da concentrao de
oxalacetato em decorrncia da ativao da reao
piruvato carboxilase.
202 CEDERJ
29 MDULO 7
AULA
OS PRECURSORES PARA A GLICONEOGNESE

Vamos montar um esquema com o que j sabemos at agora para
que fique mais fcil a visualizao da gliconeognese, tornando possvel
a identificao dos precursores no glicdios usados na sntese de glicose.
Observe a Figura 29.3. Com base nos conhecimentos que voc j adquiriu
nas aulas anteriores desta disciplina, tente sugerir possveis precursores que
poderiam entrar na via gliconeognica. Pense um pouco e tente responder
sozinho antes de prosseguir a leitura.
Fosfoenolpiruvato
Oxalacetato
Oxalacetato
Figura 29.3: Esquema das etapas da gliconeognese estudadas at o momento.
Se voc se lembrou da experincia realizada pelo casal Cori (descrita

na aula passada), voc foi capaz de identificar o lactato como um dos
precursores. A enzima lactato desidrogenase, presente no citosol das clulas
hepticas, converte o lactato em piruvato (veja a reao na Aula 28), e este
pode seguir o caminho metablico discutido ao longo desta aula. Mas, de
onde vem esse lactato?
CEDERJ 203
O lactato produzido no metabolismo anaerbico da glicose.

Na ausncia de oxignio, o piruvato no pode ser completamente
oxidado. Alm disso, o NADH produzido na reao catalisada pela
gliceraldedo-3P desidrogenase, na gliclise, precisa ser reoxidado para
que esta via no pare por falta de NAD+. Assim, a reao da lactato
desidrogenase promove a reoxidao dos NADHs e produz lactato,
que secretado pela clula (Figura 29.4). Este tipo de metabolizao
da glicose ocorre nas clulas que no possuem mitocndrias, como as
hemcias, ou quando o aporte de oxignio no suficiente para sustentar
o metabolismo aerbico, como nos msculos em intensa atividade.
Figura 29.4: Esquema resumido da fermentao lctica.
Olhando para nosso esquema, podemos perceber que a formao

de oxalacetato uma etapa crucial da gliconeognese. Ento, molculas
que possam gerar oxalacetato no seu metabolismo seriam inevitavelmente
precursoras para a sntese de glicose.
204 CEDERJ
29 MDULO 7
AULA
Voc j aprendeu que a maioria dos aminocidos gera intermedirios

do ciclo de Krebs quando transaminados. Esses intermedirios podem ser
convertidos em oxalacetato se seguirem pelas reaes do ciclo de Krebs.
Assim, todos os aminocidos que gerem intermedirios do ciclo de Krebs,
ou piruvato, aps sua transaminao, so precursores para a sntese de
glicose. As nicas excees so a leucina e a lisina, cujo metabolismo gera
acetil-CoA. Veja um esquema mostrando os produtos da transaminao
dos aminocidos na Figura 29.5. Os aminocidos usados na sntese de
glicose podem ser provenientes da alimentao, ou mobilizados a partir
da degradao das protenas musculares.
Figura 29.5: Transaminao dos aminocidos.
CEDERJ 205
Quando o cido
graxo oxidado,
os carbonos so
retirados de dois em
dois, gerando vrias
molculas de acetilCoA. Se o cido
graxo possui nmero
mpar de carbonos,
uma molcula de trs
carbonos, o propionilCoA, sobra ao final.
Alm dos aminocidos, uma outra molcula tambm pode ser

convertida em um intermedirio do ciclo de Krebs, e conseqentemente
formar oxalacetato: o propionil-CoA proveniente da -oxidao de
cidos graxos de cadeia mpar. O propionil-CoA convertido a succinilCoA dentro da mitocndria, entrando no ciclo de Krebs.
Por ltimo, temos o glicerol. Essa molcula liberada do tecido
adiposo durante a hidrlise dos triacilgliceris e segue para o fgado,
onde transformada em di-hidroxiacetona-P (DHAP), um intermedirio
da gliclise, que pode seguir a via gliconeognica.
Antes de prosseguir a leitura, copie, em uma folha parte, o esquema
metablico apresentado na Figura 29.3, e tente acrescentar a ele as reaes
de entrada dos precursores na via gliconeognica recm-discutidas. Agora,
compare o seu esquema com o mostrado na Figura 29.6.
Figura 29.6: Esquema da entrada dos precursores na via gliconeognica.
206 CEDERJ
29 MDULO 7
AULA
VOLTANDO AO TRANSPORTE DO OXALACETATO PARA

O CITOSOL
Agora que voc j descobriu quais so as molculas que podem
ser usadas como precursoras para a sntese de glicose, vamos voltar ao
ponto onde estvamos quando discutamos a Figura 29.2.
bem provvel que naquele momento voc tenha pensado: Isso

tudo parece muito complicado! Por que haveria necessidade de
termos duas maneiras diferentes de transportar o oxalacetato
para o citosol?
Vamos, agora, tentar responder a essa questo.

Observe novamente a Figura 29.6. Se voc prestar ateno, ver que
para que a reao catalisada pela enzima gliceraldedo-3P desidrogenase
seja revertida, necessrio que haja tanto 1,3-bisfosfoglicerato como
tambm NADH. Porm, lembre-se de que a maioria das reaes de
oxidao, que levam reduo de NAD+ formando NADH, ocorre
na mitocndria. A principal reao que reduz NAD+ no citoplasma
justamente a reao catalisada pela gliceraldedo-3P desidrogenase
durante a gliclise. Para ser possvel reverter esta reao, necessrio,
ento, que exista uma outra fonte de NADH no citoplasma.
NADH pode ser formado no citoplasma durante a reao de
converso do lactato em piruvato. Ento, quando o lactato o precursor
para a sntese de glicose, o problema est resolvido. Entretanto, quando
outros precursores so usados, no haveria maneira de se obter NADH no
citoplasma. Esse problema resolvido justamente atravs do transporte
do oxalacetato para o citosol. Preste ateno na Figura 29.2 e veja que,
quando o oxalacetato transportado via formao de malato, um NAD+
reduzido no citosol.
CEDERJ 207
Concluindo: quando o precursor para a gliconeognese o lactato,

o PEP pode ser formado pela PEPCK mitocondrial e ser transportado
diretamente para o citosol, ou o oxalacetato pode ser transportado via
formao de aspartato. Por outro lado, quando os precursores so os
aminocidos, o propionil-CoA ou o glicerol, o oxalacetato deve ser
transportado por intermdio da formao de malato, garantindo a
reduo de NAD+ no citosol. Veja o esquema na Figura 29.7.
Figura 29.7: O transporte do oxalacetato e o balano dos NADs.
208 CEDERJ
29 MDULO 7
AULA
AS OUTRAS REAES CONTORNADAS: AS CONVERSES

DE FRUTOSE-1,6-BP EM FRUTOSE-6P E DE GLICOSE-6P
EM GLICOSE
Agora que voc entendeu

a via gliconeognica at este
ponto, ficou faltando aprender
como outras reaes irreversveis
da gliclise, catalisadas pela
PFK e pela hexocinase, so
contornadas. Em vez de estas
duas reaes serem revertidas
gerando ATP, o que seria
energeticamente desfavorvel,
ocorre apenas a hidrlise
dos grupos fosfato, como
mostrado na Figura 29.8. As
enzimas que catalisam essas
reaes so chamadas frutose1,6-bisfosfatase (FBPase) e
glicose-6-fosfatase (G6Pase),
respectivamente. Veja um
esquema da via gliconeognica
completa na Figura 29.8.
contornada
Figura 29.8: A via gliconeognica.
CEDERJ 209
RESUMO
Alguns precursores, como lactato, glicerol e aminocidos glicognicos, podem

ser usados para sintetizar glicose atravs da via gliconeognica, que ocorre, nos
mamferos, no fgado e no rim. Esses precursores so convertidos em oxalacetato,
que ento convertido em fosfoenolpiruvato (PEP). A formao de glicose a partir
de PEP se d atravs de uma srie de reaes, muitas delas consistindo na reverso
das reaes da via glicoltica. Apenas as reaes da gliclise, que so irreversveis
em condies fisiolgicas, aquelas catalisadas pela PFK e pela hexocinase, so
substitudas por reaes de hidrlise, catalisadas pela frutose-1,6-bisfosfatase
(FBPase) e pela glicose-6-fosfatase (G6Pase), respectivamente.
EXERCCIO
1. O consumo de lcool, especialmente por um indivduo mal alimentado, pode

causar hipoglicemia. O lcool ingerido convertido em acetaldedo no citoplasma
do hepatcito, em reao catalisada pela lcool desidrogenase:
NAD+
NADH
CH3CH2OH
CH3COH
Utilizando seus conhecimentos sobre a gliconeognese, tente justificar a

hipoglicemia causada pela ingesto de lcool.
210 CEDERJ
objetivo
AULA
Regulao da
gliconeognese
30
Nesta aula, voc vai compreender como

regulada a sntese de glicose no organismo,
que funciona para garantir a produo de
glicose em situaes nas quais seus nveis, no
sangue, estejam diminudos.
Pr-requisitos
Para seguir esta aula, voc deve ter
compreendido bem as aulas sobre gliclise e as
aulas sobre gliconeognese. Tenha-as em mos
para eventuais consultas ao longo da leitura.
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
A REGULAO DA GLICONEOGNESE NECESSRIA?

Imagine se a gliclise e a gliconeognese ocorressem de uma forma
incontrolada. Uma das conseqncias seria um gasto desnecessrio
As enzimas hexoquinase
e fosfofrutoquinase
catalisam duas etapas
da gliclise.
de ATP. Os ATPs utilizados nas reaes catalisadas pelas enzimas

hexoquinase (a converso de glicose em glicose-6P) e fosfofrutoquinase
(a converso de frutose-6P em frutose-1,6BP) no seriam ressintetizados
durante a gliconeognese. Isto porque as reaes que revertem estas etapas
Em todo este trecho,

estamos comparando as
reaes da gliclise com
as da gliconeognese,
principalmente
com relao ao
requerimento
energtico de cada
etapa. Tenha as duas
vias em mos para
compreender o que est
sendo discutido.
(as duas converses), e que so catalisadas pela G6Pase (converso de

glicose-6P em glicose) e pela FBPase (converso de frutose-1,6BP em
frutose-6P), no levam sntese de ATP. O ATP sintetizado durante a
reao da fosfoglicerato quinase na gliclise seria gasto quando esta
reao fosse revertida na gliconeognese. A sntese de PEP a partir de
piruvato gasta um ATP e um GTP, enquanto a reao da piruvato quinase
na gliclise leva sntese de apenas um ATP. Assim, a ausncia de um
controle sobre a gliclise e a gliconeognese poderia levar a grandes
desperdcios de energia.
De fato, isso no ocorre. Ao contrrio: a gliclise e a gliconeognese
so reguladas reciprocamente, de acordo com as necessidades do
organismo.
Logo aps a alimentao, os nveis de glicose no sangue se encontram
elevados, e nossas clulas metabolizam esse nutriente atravs da gliclise,
garantindo os nveis adequados de ATP e armazenando o excesso de
energia a partir da sntese de nossas reservas. No fgado, o glicognio
sintetizado, a gliclise ativada, e o excesso de acetil-CoA produzido
segue, atravs da formao de citrato, para a sntese de cidos graxos.
Por outro lado, quando no ingerimos carboidratos, o fgado
mantm os nveis sangneos de glicose, tanto atravs da degradao do
glicognio como pela produo de glicose, graas inibio da gliclise
e ativao da gliconeognese.
212 CEDERJ
30 MDULO 7
AULA
PRINCIPAIS PONTOS DE REGULAO DA GLICONEOGNESE

Regulao da piruvato carboxilase
importante assinalar: o controle da gliconeognese comea com
a definio do destino do piruvato dentro da mitocndria.
Voc j aprendeu que a completa oxidao do piruvato comea
com sua converso em acetil-CoA, catalisada pela PIRUVATO DESIDROGENASE.
Por outro lado, o direcionamento do piruvato para a formao de glicose
pela via gliconeognica depende, inicialmente, de sua converso em
Se voc se esqueceu da
reao catalisada pela
PIRUVATO DESIDROGENASE,
consulte a aula de ciclo
de Krebs.
oxalacetato, catalisada pela piruvato carboxilase, como vimos na aula

passada. Veja o esquema mostrado na Figura 30.1.
Oxalacetato
Figura 30.1: Destinos do piruvato no interior da mitocndria.
As duas enzimas, a piruvato desidrogenase e a piruvato carboxilase,

so reguladas pelo mesmo modulador: acetil-CoA. De forma a construir
um esquema metablico coerente, procure determinar qual das enzimas
deve ser ativada e qual deve ser inibida por essa molcula. Reflita um
pouco antes de prosseguir a leitura.
A piruvato desidrogenase inibida por acetil-CoA e a piruvato
carboxilase depende inteiramente da presena deste modulador para
funcionar. Vamos ver se isso faz sentido.
CEDERJ 213
Quando a glicose est disponvel e entra em uma clula capaz de

realizar o metabolismo oxidativo, ela segue pela via glicoltica at ser
convertida em piruvato. Este entra na mitocndria, onde se transforma
em acetil-CoA, que entra no ciclo de Krebs, sendo condensado com o
oxalacetato, formando citrato, e assim por diante, como voc j estudou.
Enquanto o ciclo de Krebs funcionar, os nveis mitocondriais de acetilCoA estaro baixos, e, conseqentemente, a piruvato desidrogenase
continuar ativa e a piruvato carboxilase estar inibida (Figura 30.2).
Figura 30.2: Esquema da regulao do destino do piruvato durante o metabolismo

oxidativo da glicose.
Quando os nveis de glicose no sangue comeam a diminuir, uma

das primeiras respostas do organismo o incio da mobilizao dos cidos
graxos, que esto armazenados no tecido adiposo. Os cidos graxos entram
nas diversas clulas e so transportados para o interior da mitocndria,
onde so -oxidados, formando acetil-CoA. No fgado, o oxalacetato est
sendo desviado, nessa situao, para a via gliconeognica, de forma que o
acetil-CoA proveniente da -oxidao no pode seguir pelo ciclo de Krebs
e, ento, acumula-se no interior da mitocndria.
214 CEDERJ
30 MDULO 7
AULA
Assim, a piruvato desidrogenase fica inibida e a piruvato carboxilase fica

ativa, possibilitando a sntese de mais oxalacetato para a gliconeognese
(Figura 30.3).
Oxalacetato
Oxalacetato
Figura 30.3: Esquema da regulao do destino do piruvato durante situaes de baixa glicemia.
Destino do acetil-CoA no fgado: formao dos corpos cetnicos

Como acabamos de discutir, o desvio
do oxalacetato para a sntese de glicose leva
a um acmulo de acetil-CoA na mitocndria
dos hepatcitos. O excesso de acetil-CoA
, ento, convertido nos chamados corpos
cetnicos acetoacetato, -hidroxibutirato
e acetona, que so secretados pelo fgado,
caindo na circulao. Veja, na Figura
30.4, como os nveis sangneos de corpos
cetnicos aumentam em um indivduo
mantido em jejum.
Voc estudou as reaes de formao dos corpos
cetnicos na aula de oxidao dos cidos graxos.
Figura 30.4: Variao da concentrao plasmtica de corpos

cetnicos em um paciente em jejum prolongado.
CEDERJ 215
Os corpos cetnicos so compostos cidos, de forma que, caso eles

atinjam concentraes acima da capacidade tamponante do sangue, podem
levar a uma diminuio do pH sangneo, levando ao que chamamos
acidose metablica. A acidose metablica pode se tornar bastante grave,
levando a srias conseqncias, especialmente em casos de diabetes, nos
quais o quadro pode evoluir para o bito do paciente.
Regulao da PFK e da FBPase

O principal ponto de controle da gliclise e da gliconeognese se d
sobre as enzimas PFK e FBPase. Vamos ver como isso foi descoberto.
Em 1980, um pesquisador chamado van Schaftingen e seus
colaboradores descobriram uma substncia capaz de modificar a atividade
da PFK isolada de fgado, como mostra a Figura 30.5.
Mais frente voc vai

saber que substncia
esta. Por enquanto,
preste ateno apenas
em seus efeitos.
Figura 30.5: Efeito do modulador isolado por van Schaftingen e colaboradores

sobre a atividade da PFK.
Veja que, em concentraes baixas de frutose-6P, que o substrato

da PFK, a presena da substncia descoberta alterava dramaticamente a
velocidade da reao catalisada pela PFK, levando a uma grande ativao
desta enzima.
216 CEDERJ
30 MDULO 7
AULA
Eles descobriram que essa substncia formada no fgado e

pode atingir concentraes bem altas em animais bem alimentados.
Por outro lado, ela destruda aps dietas pobres em
carboidratos. Observou-se ainda que esta mesma substncia era
capaz de inibir a FBPase, quando em concentraes semelhantes
quelas necessrias para levar ativao da PFK.
Assim, esta substncia capaz de regular antagonicamente
a gliclise e a gliconeognese, ou seja, enquanto uma via est
ativada, a outra est inibida e vice-versa.
Depois de muito tempo tentando identificar esta
molcula ativadora da PFK, o grupo de van Schaftingen
conseguiu mostrar que era frutose-2,6-bisfosfato, que a partir
de agora vamos designar por F2,6BP.
Cuidado, agora, para no fazer confuso! Esta molcula
diferente do intermedirio frutose-1,6-bisfosfato e no participa
diretamente nem da gliclise nem da gliconeognese. A diferena
entre estas duas molculas est apenas no carbono ao qual est
associado o grupamento fosfato.
Analise esses dados e procure integr-los a um esquema
metablico mais geral. Depois de refletir um pouco sozinho,
observe o esquema mostrado na Figura 30.6.
Figura 30.6: Papel da frutose-2,6-bisfosfato na regulao recproca da gliclise e da gliconeognese.
CEDERJ 217
Agora que voc entendeu o papel da F2,6BP no controle das enzimas

PFK e FBPase, voc deve estar se perguntando: como essa substncia
sintetizada ou degradada?
Os mesmos pesquisadores descobriram, em 1981, uma enzima
capaz de sintetizar F2,6BP a partir de frutose-6P custa de ATP,
semelhana do que ocorria na reao catalisada pela PFK anteriormente
conhecida. Para evitar confuso, as enzimas foram denominadas a partir
da fosfofrutoquinase-1 (PFK-1), a clssica, e fosfofrutoquinase-2 (PFK-2),
a que sintetiza F2,6BP.
Alm disso, o mesmo grupo de trabalho, em 1982, purificou, de
fgado de rato, uma enzima capaz de transformar F2,6BP em frutose-6P
e denominaram-na enzima frutose-2,6-bisfosfatase (F2,6B Pase). Assim,
ficou claro que a ao coordenada das enzimas PFK-2 e F2,6BPase
determinava o nvel de F2,6BP na clula e, conseqentemente, direcionava
o fluxo metablico no sentido da gliclise ou da gliconeognese.
Por muitos anos tentou-se isolar as duas enzimas, mas, finalmente,
descobriu-se que se tratava de uma nica cadeia polipeptdica que
A atividade das enzimas
pode ser regulada por
moduladores alostricos
ou por modificao
covalente reversvel. Os
moduladores alostricos
se associam a regies
da enzima diferentes do
stio ativo, provocando
uma mudana em sua
estrutura que resulta
na modificao da sua
atividade. A regulao
por modificao
covalente reversvel se
d pela ligao covalente
de determinados
grupamentos s cadeias
laterais de alguns
aminocidos, resultando
tambm na mudana
conformacional da
enzima e na modificao
de sua atividade.
Dentre as modificaes
covalentes mais comuns
est a fosforilao
e defosforilao de
enzimas.
continha dois stios ativos diferentes, um com atividade PFK-2 e outro

com atividade F2,6B Pase. Esta enzima bifuncional era capaz de catalisar
uma ou outra reao.
Surge, ento, a pergunta: o que vai determinar se esta enzima vai
apresentar atividade PFK-2 ou F2,6BPase em um determinado momento?
Para compreender a aula a partir daqui, voc vai ter que relembrar
o mecanismo de controle do metabolismo do glicognio. Vamos fazer
uma pequena recapitulao do que vai ser importante agora.
Voc aprendeu que as enzimas do metabolismo do glicognio
so reguladas atravs de um mecanismo conhecido como modificao
covalente. Da mesma forma que ocorre com as enzimas do metabolismo
do glicognio, a ligao covalente de um grupamento fosfato na enzima
bifuncional leva a uma modificao de sua atividade: a enzima fosforilada
apresenta atividade F2,6BPase, uma vez que a fosforilao provoca uma
mudana estrutural na enzima, expondo seu stio fosfatsico e escondendo
seu stio quinsico. J a defosforilao da enzima bifuncional expe o
stio quinsico e esconde seu stio fosfatsico.
Assim, a atividade da PFK2/F2,6BPase depende do seu estado
de fosforilao.
218 CEDERJ
30 MDULO 7
AULA
A fosforilao da enzima bifuncional PFK-2/F2,6BPase catalisada

por uma importante protena quinase, a protena quinase dependente de
AMPc (PKA). Como seu nome diz, esta protena quinase regulada por
AMPc. Os nveis de AMPc aumentam dentro da clula em funo de
um estmulo hormonal. Esse modulador, ento, se liga s subunidades
regulatrias da PKA, liberando as subunidades catalticas que fosforilam
uma srie de protenas, dentre as quais a PFK2/F2,6BPase.
Dentre os hormnios que regulam os nveis de AMPc dentro da
clula, podemos citar o GLUCAGON. Este hormnio liberado pelo pncreas
em decorrncia da diminuio da concentrao sangnea de glicose.
Voc vai aprender mais

sobre o GLUCAGON na
Aula 31.
Com esses novos dados, procure analisar o quadro metablico quando a

gliconeognese se encontra ativada ou inibida, levando em considerao
todas as informaes fornecidas. Faa um resumo e mostre ao tutor. Essa
uma boa maneira de estudar! Na prxima aula, quando estivermos
falando de glucagon, voltaremos a esse ponto.
Regulao da piruvato quinase

A piruvato quinase, enzima que catalisa a converso de PEP em
piruvato na gliclise, tambm regulada por fosforilao pela PKA. Tente
atribuir, antes de prosseguir a leitura, um papel ativador ou inibitrio
fosforilao. Depois de refletir um pouco, continue.
Observe a Figura 30.7 para relembrar como
o piruvato convertido em PEP na
gliconeognese.
Figura 30.7: Converso

de piruvato em PEP na
gliconeognese.
CEDERJ 219
Como voc viu na Aula 29, para que a reverso da reao da

piruvato quinase ocorra, so necessrias duas reaes e so gastos
dois equivalentes de ATPs. O PEP formado no citoplasma poderia ser
reconvertido em piruvato pela ao da piruvato quinase se esta enzima
no estivesse inibida nesse momento. Assim, a inibio da piruvato
quinase atravs da sua fosforilao garante que todo o PEP formado
seja realmente convertido em glicose.
RESUMO
Nesta aula, voc aprendeu como a gliclise e a gliconeognese so reguladas,

garantindo que no haja desperdcios energticos nas clulas capazes de realizar
essas duas vias metablicas. Os principais pontos de regulao so as reaes
catalisadas pelas enzimas piruvato carboxilase, PFK e FBPase, e piruvato quinase.
A piruvato carboxilase ativada alostericamente por acetil-CoA. PFK e FBPase
so reciprocamente reguladas por frutose-2,6BP, que ativa a primeira e inibe a
segunda. Frutose-2,6BP sintetizada e degradada por uma enzima bifuncional,
a PFK-2/F2,6B Pase, cujas atividades so reguladas por fosforilao desencadeada
pela ao de hormnios. A atividade da piruvato quinase tambm est sob controle
hormonal, sendo inibida por fosforilao.
220 CEDERJ
30 MDULO 7
1. Indique ao lado do nome de cada enzima listada seu regulador alostrico e o

efeito promovido por ele na atividade enzimtica (inibio ou ativao):
piruvato carboxilase
piruvato desidrogenase
PFK
FBPase
2. Correlacione a presena do composto frutose-2,6BP regulao das vias
glicoltica e gliconeognica. Agora explique como essa substncia formada e
degradada.
3. A figura abaixo foi retirada de um artigo cientfico publicado por Hue e
colaboradores, em 1981. Eles estudaram os efeitos do hormnio glucagon no
metabolismo de glicdeos em clulas isoladas de fgado de rato. Verificaram alteraes
dose-dependentes nos nveis de frutose-2,6BP e na atividade da enzima que catalisa
a degradao do glicognio, a fosforilase a. Interprete a figura, ressaltando os efeitos
metablicos no fgado em funo dos resultados observados.
CEDERJ 221
AULA
EXERCCIOS
objetivo
AULA
Introduo aos hormnios
31
Na ltima parte de nosso curso, vamos

conhecer melhor os hormnios, importantes
substncias responsveis pela comunicao
entre os diferentes tipos celulares de um
organismo.
Pr-requisitos
As Aulas 13 e 14 de Biologia Celular I tratam de
temas complementares aos que vamos abordar
aqui. Seria interessante que voc relesse essas
aulas antes de comear.
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
INTRODUO
Vamos comear esta aula com uma apresentao dos hormnios e de suas
caractersticas. Nas prximas duas aulas, vamos falar especificamente dos quatro
hormnios que so os principais reguladores do metabolismo energtico:
o glucagon, a adrenalina, a insulina e os glicocorticides.
Uma caracterstica essencial dos organismos multicelulares a diferenciao
celular, que resulta na diviso de atividades entre seus rgos e tecidos, que
desta forma desempenham funes especializadas. Para entendermos o papel
das diferentes vias metablicas e de sua regulao, preciso consider-las
durante o funcionamento do organismo como um todo. A capacidade de os
tecidos especializados funcionarem de uma maneira integrada foi possvel,
em grande parte, pelo aparecimento do sistema endcrino, que, juntamente
com o sistema nervoso, promove a coordenao das atividades metablicas
dos organismos complexos, otimizando a distribuio de nutrientes e de
precursores para os diferentes rgos e tecidos. Essa integrao mediada
H ORMNIOS
Esta terminologia foi
utilizada inicialmente
para definir apenas
as substncias
sintetizadas pelas
glndulas endcrinas
e secretadas
na circulao,
levando a respostas
especficas de um
ou mais tecidosalvo. Atualmente,
o termo se refere a
qualquer molcula
sinalizadora, capaz
de gerar uma resposta
em determinada
clula. Assim,
podemos classificar os
hormnios como: (a)
endcrinos aqueles
que circulam pelo
corpo at atingirem
o rgo-alvo; (b)
parcrinos aqueles
que interagem com
clulas vizinhas;
e (c) autcrinos
aqueles que atuam
sobre a prpria
clula secretora. Ou
seja, os hormnios
so classificados de
acordo com seu raio
de ao.
por uma importante classe de mensageiros qumicos, os HORMNIOS.
NATUREZA QUMICA DOS HORMNIOS

Os hormnios podem ser peptdeos, lipdeos ou derivados de
aminocidos.
Os hormnios peptdicos so assim denominados por apresentarem
de 3 at 2.000 resduos de aminocidos. Variam com relao a tamanho,
composio, nmero de cadeias e grupos modificados. Podemos citar
como exemplo o glucagon, que apresenta uma nica cadeia polipeptdica,
e a insulina, formada por duas cadeias polipeptdicas derivadas do
processamento proteoltico de um nico produto gnico (pr-insulina)
(Figura 31.1).
Insulina
Glucagon
Figura 31.1: Exemplos de hormnios peptdicos: glucagon e insulina.
224 CEDERJ
31 MDULO 7
AULA
Os hormnios esterides e as prostaglandinas so derivados dos

lipdeos colesterol e cido aracdnico, respectivamente. Veja na Figura
31.2 alguns exemplos de esterides derivados do colesterol.
CH3
CH3
Colestanos: 27 carbonos
ex: colesterol
CH3
CH3
cidos clicos: 24 carbonos

COOH
CH3
Pregnanos: 21 carbonos
ex: progesterona
CH3
CH3
Andranos: 19 carbonos
ex: testosterona
CH3
CH3
Estranos: 18 carbonos
ex: estradiol
CH3
Figura 31.2: Exemplos de hormnios esterides.
Os derivados de aminocidos incluem a adrenalina, a noradrenalina, a dopamina e os hormnios da tireide, todos formados a partir
da tirosina (Figura 31.3).
Adrenalina
Noradrenalina
OH
OH
OH
OH
CH
CH
OH
OH
CH2
CH2
NH
NH2
CH3
Hormnios da tireide
I
HO
B
I
5
A
H2N
CO2H
O
HO
Tiroxina (T4)
H2N
CO2H
Triiodotironina (T3)
Figura 31.3: Exemplos de hormnios derivados de aminocidos.

CEDERJ 225
SNTESE, LIBERAO E DEGRADAO DOS HORMNIOS

A liberao dos hormnios na circulao depende, muitas vezes,
apenas da sua produo. Esse o caso dos esterides, cuja liberao ocorre
imediatamente aps sua sntese. Por outro lado, algumas glndulas possuem a
capacidade de armazenar quantidades considerveis de hormnios, servindo
como reservatrios dessas molculas. As clulas do pncreas, por exemplo,
podem armazenar insulina por vrios dias.
!
Os hormnios da tireide (T3 e T4), que no sero estudados no nosso curso,
tambm so armazenados. Eles so produzidos a partir da clivagem de uma
protena, a tireoglobulina. Essa protena possui vrios resduos de tirosina que
so modificados pela adio de iodo, formando T3 e T4. Grandes quantidades
de tireoglobulina podem ser armazenadas na tireide, garantindo a produo
de T4 mesmo em longos perodos de falta de iodo.
Os hormnios liberados podem circular livres ou associados a

protenas transportadoras. Hormnios solveis em gua, em princpio,
podem circular sem necessitar de um sistema transportador especfico,
j que o sangue um meio aquoso. Os insolveis em gua circulam
associados a protenas plasmticas, que garantem o acesso dessas
P ROTENAS
molculas a todas as clulas. Algumas
TRANSPORTADORAS
especficas para determinados hormnios, enquanto outros hormnios
DE HORMNIOS
Especficas:
globulina ligadora de
tiroxina (TBG)
globulina ligadora de
corticosterides (CBG)
No-especficas:
albumina
transtirretina
PROTENAS TRANSPORTADORAS
so
se ligam a sistemas gerais de transporte.

A frao ligada dos hormnios est sempre em equilbrio dinmico
com pequenas quantidades de hormnio livre, que, na maior parte dos
casos, a frao biologicamente ativa. Dessa forma, as protenas
transportadoras podem muitas vezes ser encaradas como reservatrios
circulantes de hormnios.
A degradao dos hormnios liberados na circulao crtica para
a regulao de seus nveis em resposta s vrias necessidades. A meia-vida
dos hormnios pode variar de poucos minutos (como nos casos da insulina,
do hormnio adrenocorticotrfico (ACTH) e da adrenalina), a horas (como
ocorre com os hormnios esterides), ou a dias (como a tiroxina).
226 CEDERJ
Para atuar, os hormnios devem interagir com stios especficos,

altamente seletivos, presentes nas clulas-alvo: os receptores. Estes
devem desempenhar pelo menos duas funes: ter a capacidade de ligar
os hormnios com alta afinidade e especificidade, distinguindo essas
molculas entre as outras substncias presentes; e tambm transmitir a
informao, levando ao desencadeamento da resposta celular. Entretanto,
a resposta a um determinado hormnio no depende apenas da presena
do receptor, mas tambm da presena dos sistemas de TRANSDUO DO SINAL
hormonal na clula-alvo.
A ao hormonal em tecidos especficos pode ser direcionada ou
amplificada por vrios mecanismos. A distribuio dos receptores pode
variar consideravelmente: enquanto o receptor da insulina est presente
em todos os tipos celulares, os receptores para mineralocorticides so
DE SINAL
Para que uma

clula responda a
um determinado
hormnio,
necessrio que a
ligao do hormnio
a seu receptor
desencadeie uma
srie de reaes
intracelulares que
levem modificao
do metabolismo da
clula. Os eritrcitos,
por exemplo, possuem
receptores para
insulina, mas, pela
falta de molculas
necessrias sua
ao, no exibem
respostas tpicas a esse
hormnio.
encontrados apenas em clulas renais. A liberao de hormnios dentro

de um sistema de circulao restrita consiste em um outro mecanismo de
direcionamento hormonal. O fgado recebe mais insulina que os demais
tecidos, uma vez que a quantidade desse hormnio que chega ao tecido
heptico pelo SISTEMA PORTA bem maior do que a que atinge os tecidos
extra-hepticos pela circulao sistmica.
Receptores hormonais podem ser subdivididos em dois grupos
principais: aqueles que se encontram na superfcie celular, que vo mediar
respostas citoplasmticas, e aqueles de localizao intracelular, que vo
atuar geralmente no ncleo da clula-alvo (Figura 31.4).
Hormnios esterides
Hormnios tireoideanos
Vitamina D
Receptor de
membrana
AMPc
Receptor
citoplasmtico
Receptor
nuclear
Transmissores
Hormnios peptdeos
O sangue proveniente
do trato gastrointestinal chega ao
fgado pela veia
porta-heptica, cujas
ramificaes banham
os lbulos hepticos.
Assim, os nutrientes
provenientes da
alimentao so
filtrados pelo fgado
antes de atingirem a
circulao sistmica.
O mesmo ocorre
com o hormnio
insulina, que tambm
liberado do pncreas
na veia portaheptica.
Ca2+
Fosforilao
RNAm
Sntese de protena
SISTEMA
P O R TA - H E P T I C O
Regulao
enzimtica
Figura 31.4: Mecanismos de ativao de uma clulaalvo pelos hormnios. Receptores de membrana
para hormnios hidrossolveis transmitem o sinal
hormonal atravs de mensageiros intracelulares,
como o AMPc ou o clcio. Isso resulta na ativao
de protenas quinases que catalisam a fosforilao
de diversas enzimas do metabolismo, regulando sua
atividade. Hormnios lipossolveis ativam receptores
intracelulares que se ligam ao DNA, regulando a
expresso gnica.
CEDERJ 227
31 MDULO 7
TRANSDUO
AULA
MECANISMOS DE AO DOS HORMNIOS
Os hormnios peptdicos, as catecolaminas e as prostaglandinas

se ligam a receptores na superfcie da clula-alvo, e a transmisso dessa
informao se d atravs de mediadores intracelulares. J os hormnios
da tireide e os esterides, devido sua natureza hidrofbica, so capazes
de atravessar a membrana plasmtica, encontrando seus receptores no
interior da clula-alvo, onde o complexo hormnio-receptor interage
com elementos especficos do DNA, induzindo mudanas na expresso
de determinados genes.
Hormnios que interagem com a superfcie celular

Os experimentos de E. Sutherland foram importantssimos para
!
Earl W. Sutherland Jr. (19151974) e sua equipe isolaram
o AMPc em 1958, e assim o
chamaram porque os tomos
do nico grupo fosfato da
molcula de AMPc esto
arranjados sob a forma de
um anel. Sutherland Jr. foi
agraciado com o Prmio
Nobel em Fisiologia e Medicina em 1971.
a compreenso do mecanismo de ao de hormnios que atuam na

superfcie celular. Esse pesquisador, ao descobrir o AMPc e seu papel
mediador da resposta dos hormnios glucagon e adrenalina, desenvolveu
o conceito de segundo mensageiro. O segundo mensageiro funciona
como um mediador intracelular do sinal extracelular, transmitindo o
sinal hormonal para a maquinaria enzimtica celular.
Inicialmente, acreditava-se que o segundo mensageiro era sempre
uma pequena molcula orgnica, como AMPc, GMPc ou inositol fosfato,
mas atualmente sabe-se que pode ser um on, como clcio ou hidrognio,
ou mesmo uma enzima que catalisa a fosforilao de protenas, ou seja,
uma protena cinase.
Muitas estruturas de receptores hormonais de membrana j foram
elucidadas, revelando quatro tipos bsicos de receptores:
(a) receptores acoplados protena G;
(b) receptores que funcionam como canais inicos;
(c) receptores com atividade enzimtica intrnseca;
(d) receptores que interagem diretamente com enzimas intra-celulares.
Veja o esquema mostrado na Figura 31.5. Em todos os casos,

a ao do hormnio depende de segundos mensageiros.
228 CEDERJ
Ligantes
Receptores associados
a cinases
Receptores acoplados
protena G
Receptores associados
a canais inicos
Insulina, fatores
de crescimento
Hormnio do
crescimento,
prolactina, citocinas
Insulina, fatores
de crescimento
Neurotransmissores,
aminocidos
Estrutura
Protena tirosina ou
serina cinase
Tirosina cinase
associada ao receptor
Segundo mensageiro
(AMPC IP3 on)
on
Protenas cinases
citoplasmticas
Efeitos mediados por fosforilao
Efeitos no-mediados por fosforilao
Figura 31.5: Principais classes de receptores de membrana para hormnios e neurotransmissores. A insulina e
muitos fatores de crescimento se ligam a receptores de membrana que atuam como tirosinas cinases, catalisando a
fosforilao de protenas em seus resduos de tirosina; o hormnio do crescimento, a prolactina e muitas citocinas
se ligam a receptores que se associam a tirosinas cinases citoplasmticas; uma terceira classe de agonistas se liga
a receptores (R) que se acoplam a um efetor (geralmente enzimas que produziro segundos mensageiros) (E)
atravs de protenas G (G); a quarta classe de receptores inclui aqueles associados a canais inicos.
Como a concentrao dos hormnios peptdicos na circulao est

em torno de 10-12 a 10-9 M, as clulas-alvo devem no s reconhecer o
hormnio com alta afinidade e especificidade como tambm devem ser
capazes de amplificar o sinal hormonal, j que os processos metablicos
operam na faixa de concentrao milimolar (10-3 M). As cascatas de
mediadores intracelulares possibilitam essa enorme amplificao do sinal
extracelular, como exemplificado na Figura 31.6.
CEDERJ 229
31 MDULO 7
Receptor com
atividade cinsica
AULA
Classe
1 molcula
do sinalizador
Cada receptor ativa
muitas protenas G, que
podem ativar muitas
adenilato ciclases
GTP
Receptor
Amplificao
Adenilato ciclase ativada
GTP
Cada adenilato ciclase

forma muitas molculas
de AMPC
Protena G
ATP
GTP
Amplificao
AMPC
Cada AMPC ativa uma

protena cinase
Protenacinase
Cada cinase fosforila
muitas cpias de uma
enzima
Amplificao
Enzima X
Cada enzima fosforilada

catalisa a formao de
muitas molculas do
produto
Amplificao
Produtos da
enzima X
Figura 31.6: Amplificao do sinal aps o estmulo de um receptor associado

protena G.
A Figura 31.6 mostra o mecanismo de ao de um ligante cujo

receptor promove indiretamente o aumento dos nveis intracelulares de
AMPc, como, por exemplo, o glucagon ou a adrenalina. As protenas
intermedirias que acoplam esses receptores a seus sistemas efetores so
chamadas protenas G, por dependerem de GTP para sua ao regulatria.
As protenas G so heterotrmeros compostos por subunidades , e .
A ligao da molcula sinalizadora promove uma mudana
conformacional no receptor que, por sua vez, induz a ligao de GTP
subunidade da protena G, que se dissocia das outras subunidades.
A subunidade , ento, migra atravs da membrana e interage com uma
enzima, a adenilato ciclase, ativando-a. A adenilato ciclase catalisa a
converso de ATP em AMPc. Dessa forma, molculas como o glucagon
ou a adrenalina promovem um grande aumento na concentrao de
AMPc no interior de clulas que apresentem seus respectivos receptores.
230 CEDERJ
31 MDULO 7
AULA
A subunidade apresenta atividade GTPsica,

convertendo o GTP em GDP, tornando-se
inativa e dissociando-se da adenilato ciclase.
Cada receptor pode interagir e ativar muitas
ATP
molculas de protena G, cada qual podendo

ativar uma molcula de adenilato ciclase.
Como cada molcula de protena G permanece
na forma ativa por alguns segundos antes de
Adenilato ciclase
hidrolisar o GTP e voltar forma inativa, a

adenilato ciclase tambm permanece ativa por
alguns segundos, o que permite a produo de
um grande nmero de molculas de AMPc.
AMPC
O AMPc se liga s subunidades regulatrias de

uma importante protena quinase, a protena
quinase AMPc dependente (PKA). Esta enzima
um tetrmero formado por duas subunidades
Fosfodiesterase
catalticas e duas regulatrias que, quando

ligadas ao AMPc, se dissociam das subunidades
catalticas, ativando-as. A PKA catalisa a
fosforilao de um grande nmero de enzimas,
AMP
estando, dessa forma, envolvida no controle de

diversas vias metablicas. Assim, uma nica
molcula sinalizadora extracelular pode causar
a alterao da atividade de milhares de enzimas nas clulas-alvo. Quando
o estmulo cessa, os nveis de AMPc diminuem em funo da atividade da
enzima fosfodiesterase, que catalisa a hidrlise do AMPc, convertendo-o
em 5-AMP.
!
Voc j viu exemplos de enzimas reguladas atravs de fosforilao catalisada
pela PKA em aulas anteriores.
Hormnios que afetam a expresso gnica

Os hormnios de natureza qumica apolar ou hidrofbica como,
por exemplo, os hormnios esterides, hormnios da tireide, a vitamina
D e o cido retinico, atuam de forma bastante diferente da daqueles
descritos at agora. Eles funcionam como fatores de regulao da
expresso gnica (Figura 31.7).
CEDERJ 231
PT
R
R
R
R
R
RNAm
Protena
hsp
Efeitos fisiolgicos
Figura 31.7: Mecanismo de ao de hormnios esterides. O esteride () chega clula-alvo associado a uma
protena transportadora (PT). Os receptores (R) so protenas intracelulares presentes no ncleo ou no citoplasma
associados a protenas de choque trmico (heat shock proteins, hsp), quando no ligados ao hormnio. O complexo
hormnio-receptor se liga ao DNA em regies especficas, modulando a expresso gnica.
Esses hormnios atravessam a membrana plasmtica da maioria

das clulas por difuso, embora mecanismos ativos de captao possam
ocorrer em alguns sistemas. Nas clulas-alvo, ou seja, clulas sensveis
a esses hormnios, eles se ligam a receptores especficos intracelulares,
localizados no citoplasma ou no ncleo. A ligao do hormnio promove
mudanas conformacionais no receptor, resultando na formao de um
complexo ativado, com alta afinidade por determinados stios do DNA.
Geralmente, a ligao do complexo hormnio-receptor a esses elementos
regulatrios afeta a expresso gnica, induzindo ou reprimindo a iniciao
da transcrio de genes especficos. Os produtos da traduo dos RNA
mensageiros de sntese regulada por esses hormnios promovero efeitos
metablicos nas clulas-alvo como, por exemplo, o aumento dos nveis de
determinadas enzimas, como ocorre com a expresso dos genes de algumas
enzimas gliconeognicas em clulas tratadas com glicocorticides, levando,
neste caso, a um aumento da produo de glicose por essas clulas.
232 CEDERJ
31 MDULO 7
AULA
RESUMO
Nesta aula, voc aprendeu que a comunicao entre as diferentes clulas de um

organismo, para que ele funcione de forma integrada, se d graas aos hormnios.
Estas molculas podem ser peptdeos, como o caso da insulina e do glucagon;
lipdeos, como os hormnios esterides; ou derivados de aminocidos, como, por
exemplo, a adrenalina e os hormnios da tireide. Voc viu, tambm, que os
mecanismos de sntese, secreo e degradao dos hormnios podem ser muito
variados. Para fins didticos, os hormnios podem ser agrupados em duas grandes
classes, de acordo com seu mecanismo de ao: aqueles cuja ao se d a partir de
sua ligao superfcie celular e aqueles que se ligam a receptores intracelulares
e atuam sobre a expresso gnica.
EXERCCIOS
Os exerccios referentes s Aulas 31, 32 e 33 sero apresentados em conjunto ao
final da Aula 33.
CEDERJ 233
objetivos
AULA
Glucagon e adrenalina
32

Apresentar dois hormnios: glucagon e
adrenalina.
Conhecer o mecanismo de ao desses
hormnios.
Estudar seus efeitos nos diferentes tecidos.
Pr-requisitos
Esta aula e a prxima vo explorar a
integrao hormonal do metabolismo. Por
isso, ser importante que voc tenha uma
viso geral bem clara do metabolismo e das
vrias vias que o compem. Aproveite para
adiantar o estudo de toda a matria antes
de comear a ler estas aulas. Assim, elas
serviro para reforar seus conhecimentos e
podero fornecer uma viso mais ampla do
funcionamento do nosso organismo.
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
INTRODUO
Nesta aula, vamos falar especificamente de dois hormnios: o glucagon e a

adrenalina. Agrupamos estes dois hormnios na mesma aula, porque ambos
compartilham o mesmo mecanismo de ao. Entretanto, voc vai ver que
estes hormnios vo atuar em resposta a situaes diferentes, algumas vezes
em tecidos distintos.
GLUCAGON
Natureza qumica, sntese e secreo do glucagon
O glucagon um hormnio peptdico secretado pelo
PNCREAS
PNCREAS,
Para fins didticos,

o pncreas pode ser
estudado em duas
pores:
glndula de fundamental importncia para a digesto dos alimentos e
Pncreas exgeno:
sintetiza e secreta
enzimas responsveis
pela digesto de
protenas (tripsina,
quimotripsina e
carboxipeptidase),
carboidratos (amilase)
e lipdeos (lipase)
provenientes da dieta,
alm de secretar
bicarbonato de sdio.
de Langerhans. Nas Ilhotas de Langerhans, existem trs subpopulaes
para a regulao do metabolismo de macronutrientes.

O pncreas contm um grupo de clulas especializadas, as Ilhotas
de clulas distintas, as clulas , as clulas e as clulas , que so
responsveis pela sntese e secreo dos hormnios glucagon, insulina e
somatostatina, respectivamente.
Uma vez sintetizado, o glucagon pode ser secretado diretamente ou ficar
estocado dentro de vesculas secretrias no interior das clulas . Os principais
controladores fisiolgicos da liberao de glucagon so a hipoglicemia, a
hiperaminoacidemia (aumento dos nveis de aminocidos no sangue; neste
Pncreas endgeno:
sintetiza e secreta
os hormnios
glucagon, insulina e
somatostatina.
caso, principalmente aumento de arginina), baixos nveis circulantes de cidos

graxos e estmulo do sistema adrenal (estresse ou exerccio).
O receptor de glucagon
O glucagon, assim como os demais hormnios peptdicos, exerce
seus efeitos atravs da ligao a um receptor localizado na membrana
plasmtica das clulas-alvo. O receptor de glucagon pertence
superfamlia dos receptores acoplados protena G (Figura 32.1).
!
Voc aprendeu sobre receptores acoplados protena G na Aula 31 de
Bioqumica II e na Aula 14 de Biologia Celular I.
236 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
Figura 32.1: Representao esquemtica do receptor de glucagon. As sete hlices

transmembrana so exemplificadas na figura. A regio superior corresponde s
regies extracelulares do receptor, enquanto a regio inferior representa a poro
intracelular. Associadas ao receptor esto esquematizadas as trs subunidades da
protena G.
Ainda no temos uma definio exata de que tecidos apresentam

receptores de glucagon. Diversos trabalhos cientficos vm mostrando que
os maiores nveis de expresso do receptor de glucagon so encontrados
no fgado, nos rins e nas ilhotas pancreticas. Nveis intermedirios de
expresso podem ser detectados no corao, tecido adiposo, duodeno
e estmago.
Mecanismo de ao do glucagon
Os principais efeitos conhecidos do glucagon so mediados por
um aumento dos nveis intracelulares de AMPc. Isso ocorre porque
o receptor de glucagon encontra-se associado a uma famlia muito
particular de protenas, conhecida como famlia das protenas G, como
j comentamos anteriormente.
!
Para relembrar o que so as protenas G e como os nveis intracelulares de
AMPc so controlados por elas, releia o final da Aula 31 de Bioqumica II e a
Aula 14 de Biologia Celular I.
A Figura 32.2 mostra a seqncia de eventos desencadeados pela

ligao do glucagon a seu receptor presente na superfcie celular.
CEDERJ 237
Adenilato ciclase
ATP
Protena G
AMPc
PKA
Figura 32.2: Eventos desencadeados pela ligao do glucagon a seu receptor presente na superfcie celular.
Mas como o aumento da concentrao intracelular de AMPc vai

promover a alterao do metabolismo celular?
O AMPc se liga a uma importante protena cinase, a protena
cinase dependente de AMPc (PKA). Esta protena composta por quatro
subunidades: duas regulatrias, onde esto os stios de ligao do AMPc,
e duas catalticas, que podem fosforilar vrias
enzimas do metabolismo. Quando a PKA est
R
na sua forma tetramrica, as subunidades

PKA inativa
regulatrias impedem a atividade das

subunidades catalticas. Quando o AMPc se
liga, as subunidades regulatrias se dissociam

4 AMPC
4 AMPC
das subunidades catalticas, levando ativao

dessa enzima. Veja o esquema na Figura 32.3.
Uma vez ativada, a PKA poder catalisar
a fosforilao de diversas protenas no interior
da clula, levando assim ativao/inativao

de enzimas.
PKA ativa
Figura 32.3: Esquema da regulao da PKA pelo AMPc.
238 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
Agora voc deve estar se perguntando: afinal, que enzimas so

essas e quais so os efeitos do glucagon no metabolismo energtico?
Vamos responder a essa pergunta a seguir.
Ao do glucagon sobre o fgado

Sem dvida, o principal rgo a sofrer os efeitos da liberao
de glucagon o fgado. Em resposta a elevaes bastante sutis nas
concentraes sanguneas de glucagon, esse rgo modifica seu
metabolismo drasticamente. Graas a isso, o organismo capaz de adaptarse a diferentes situaes metablicas, principalmente hipoglicemia. As
principais vias metablicas afetadas pelo glucagon no fgado so:
O metabolismo de glicognio
Aps uma refeio balanceada, cerca de 25% da glicose ingerida
convertida em glicognio no fgado. Os nveis de glicognio no interior
de um hepatcito podem variar entre 1 e 100mg/g de tecido heptico
durante um ciclo normal de jejum/alimentao.
!
Antes de ser batizado com seu nome atual, o glucagon era conhecido como fator hiperglicemiante
glicogenoltico. Isso se deveu a algumas experincias realizadas entre 1921 e 1938, que mostraram que
extratos pancreticos injetados em animais sem pncreas provocavam rapidamente hiperglicemia, em
decorrncia da mobilizao do glicognio heptico. De fato, o primeiro efeito conhecido do glucagon foi
o estmulo da degradao do glicognio.
Como vimos anteriormente, a
SNTESE E DEGRADAO DE GLICOGNIO
devem ser conjuntamente reguladas, de modo a evitar desperdcios de

energia decorrentes da realizao de ciclos fteis.
Atravs da ativao da PKA, um dos primeiros efeitos do glucagon
sobre a sntese de glicognio a inativao da enzima glicognio sintase.
Aparentemente, tanto a prpria PKA quanto as cinases ativadas por ela,
principalmente a glicognio sintase cinase 3 (GSK-3), so capazes de
SNTESE
DEGRADAO DE
GLICOGNIO
Se precisar, reveja
as vias de sntese
e de degradao
do glicognio, assim
como sua regulao,
nas Aulas 25, 26 e 27.
fosforilar esta enzima. Essa fosforilao faz com que a glicognio sintase
passe de sua forma a (ativa) para a forma b (inativa).
A fosforilase cinase tambm fosforilada pela PKA, tornando-se
ativa. Essa enzima catalisa a fosforilao da glicognio fosforilase, a
enzima-chave da degradao do glicognio. Quando fosforilada, a
glicognio fosforilase sofre uma mudana conformacional, passando
da forma b (inativa) para a forma a (ativa).
Veja um esquema da regulao da sntese e da degradao do
glicognio na Figura 32.4.
CEDERJ 239
Glicognio sintase
a (ativa)
Glicognio
fosforilase b
(inativa)
Protena cinase
Fosfoprotena fosfatase
P
Glicognio
fosforilase b
(inativa)
P
P
Glicognio
fosforilase a (ativa)
P
Figura 32.4: Esquema da regulao das enzimas-chave da sntese (glicognio sintase) e da degradao (glicognio
fosforilase) em resposta ao do glucagon.
Assim, quando os nveis sanguneos de glucagon aumentam,

a sntese de glicognio drasticamente diminuda e sua degradao
muito aumentada.
A degradao do glicognio gera glicose-1-fosfato que, pela
ao da enzima fosfoglucomutase, convertida em glicose-6-fosfato,
que por sua vez substrato para a glicose-6-fosfatase presente no retculo
endoplasmtico dos hepatcitos, formando, assim, glicose livre que pode
ser enviada para a corrente sangnea.
Alterao da relao gliclise/gliconeognese
Voc j aprendeu que o fgado o principal rgo dos mamferos a
!
Reveja as reaes e
a regulao da via
gliconeognica nas
Aulas 29 e 30.
realizar a gliconeognese. Por isso, importante a existncia, nesse rgo,

de um controle integrado da relao gliclise/gliconeognese, de forma a
minimizar a ocorrncia de ciclos fteis e a perda de energia. O glucagon
desempenha um papel extremamente importante nessa regulao.
240 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
O principal efeito do glucagon sobre a gliclise/gliconeognese acontece

sobre a enzima bifuncional fosfofrutocinase-2/frutose-2,6-bisfosfatase.
Como voc j aprendeu na Aula 30, essa enzima catalisa duas reaes distintas:
a converso de frutose-6-fosfato (frutose-6P) em frutose-2,6-bisfosfato
(F2,6BP) e a reao reversa, a converso de F2,6BP em frutose-6P.
A fosforilao da enzima bifuncional pela PKA leva a uma
modificao de sua atividade. A enzima fosforilada apresenta atividade
F2,6BPase, enquanto sua defosforilao inibe essa atividade fosfatsica
e ativa a poro PFK2 da enzima.
Mas o que faz F2,6BP? Tente lembrar e confira se sua resposta
estava correta lendo o texto a seguir.
F2,6BP um potente ativador da fosfofrutocinase-1 (PFK-1),
enzima-chave da gliclise. Ao mesmo tempo, essa substncia tambm
inibe a frutose-1,6-bisfosfatase, enzima da gliconeognese.
Assim, quando a PKA ativada devido ao do glucagon, os
nveis intracelulares de F2,6BP diminuem, levando inibio da PFK-1
e, conseqentemente, da gliclise, e ativao da frutose-1,6-bisfosfatase e,
conseqentemente, da gliconeognese.
Outro efeito importante do glucagon sobre a gliclise a regulao
da enzima piruvato cinase (PK). Essa enzima catalisa a ltima reao
da gliclise, a converso de fosfoenolpiruvato (PEP) em piruvato com
concomitante sntese de uma molcula de ATP. A fosforilao da PK
heptica catalisada pela PKA e leva a uma drstica reduo de sua
atividade. Com isso, a gliclise fica inibida. Essa regulao tambm
importante para garantir que o PEP, formado na primeira etapa da
gliconeognese, no seja reconvertido em piruvato (voc j viu isso em
mais detalhes na Aula 30; se achar necessrio, volte at l).
O metabolismo dos cidos graxos
Os cidos graxos derivados dos triacilglicerdeos e estocados nos
adipcitos so a fonte de energia mais importante para os mamferos.
O glucagon exerce um importante papel na regulao do metabolismo
de cidos graxos, como veremos a seguir.
A primeira etapa da
SNTESE DE CIDOS GRAXOS
o transporte das
unidades de acetil-CoA, derivadas da oxidao da glicose ou dos

aminocidos, da mitocndria para o citoplasma. Estas unidades de
acetil-CoA saem da mitocndria na forma de citrato, que no citoplasma
SNTESE
DE
CIDOS GRAXOS
Reveja a sntese de
cidos graxos em
detalhes nas
Aulas 22 e 23.
convertido a oxaloacetato e acetil-CoA novamente.

CEDERJ 241
Uma vez no citoplasma, a etapa seguinte da sntese de cidos

graxos seria a converso de acetil-CoA em malonil-CoA, catalisada pela
acetil-CoA carboxilase. Esta enzima-chave da biossntese de cidos graxos
inibida por glucagon atravs de um mecanismo tambm dependente
de PKA, que catalisa a fosforilao dessa enzima, mantendo-a na sua
forma protomrica inativa.
Ao do glucagon sobre o adipcito

A mobilizao das reservas de triacilgliceris estocadas nos adipcitos
se d atravs da ativao da lipase sensvel a hormnio. Esta enzima catalisa
a hidrlise das ligaes ster dos triacilgliceris, gerando glicerol e cidos
graxos, que seguiro pela corrente sangnea associados albumina at o
fgado ou outros tecidos capazes de realizar a -oxidao.
A lipase sensvel a hormnio ativada por fosforilao catalisada
pela PKA. Embora ainda exista certa controvrsia na literatura cientfica a
respeito da presena ou no de receptores de glucagon no tecido adiposo,
uma srie de dados vm sustentando que, quando os nveis sanguneos
de glucagon aumentam, a cascata de sinalizao desencadeada por esse
hormnio promove a hidrlise dos triacilgliceris, com conseqente
liberao de glicerol e cidos graxos por estas clulas.
Desta forma, podemos concluir que a liberao do glucagon na corrente
sangunea promove a mobilizao dos cidos graxos, que passam a servir
como fonte de energia para a maioria dos tecidos. Por outro lado, o glucagon
tambm vai promover a liberao heptica de glicose, seja proveniente da
degradao do glicognio, seja produzida pela via gliconeognica. Veja, na
Figura 32.5, um esquema da integrao do metabolismo dos vrios tecidos
do nosso corpo durante uma situao de hipoglicemia.
242 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
Pncreas
(clulas )
Glucagon
Protena
Intestino
Fgado
Aminocido
Glicerol
Veia porta
Glicose
Entercitos
Lactato
Alanina
Uria
Corpos
cetnicos
Alanina
Crebro
Glicerol
CO2 + H2O
Alanina
cidos graxos
Lactato
Lipdeos
Hemcias
Glutamina
Tecido adiposo
Aminocido
CO2 + H2O
Protena
Tecido muscular
Figura 32.5: Esquema do metabolismo em resposta liberao de glucagon durante a hipoglicemia.
ADRENALINA
Natureza qumica e secreo da adrenalina
A adrenalina faz parte de um grupo de substncias denominadas
catecolaminas, por suas estruturas derivarem do catecol (Figura 32.6).
CEDERJ 243
Dopamina
Catecol
Norepinefrina
Epinefrina
Figura 32.6: Estrutura do catecol e das catecolaminas.
A adrenalina secretada pela glndula ADRENAL (de onde vem seu
ADRENAL
A adrenal pode
ser dividida em
duas partes: o
crtex, que secreta
glicocorticides e
mineralocorticides
(falaremos desses
hormnios na Aula
33); e a medula, cujo
principal produto
de secreo a
adrenalina.
nome), que se localiza acima dos rins e, por isso, tambm conhecida
como glndula supra-renal.
Em resposta a situaes de estresse agudo (estresse psicolgico,
cansao fsico, jejum prolongado ou hipoglicemia, perda sangnea e
diversas condies patolgicas), ocorre ativao do sistema nervoso
simptico, que parte integrante do sistema nervoso autnomo.
Como parte dessa resposta adaptativa, h aumento da liberao de
catecolaminas pela adrenal. A liberao dessas substncias no sangue e
sua atuao em rgos perifricos, principalmente no caso da adrenalina,
promovem as conhecidas reaes de fuga ou luta. Essas reaes so
caracterizadas por dilatao pupilar, taquicardia, sudorese, tremores,
aumento da glicemia.
!
As aes dos produtos secretados pela adrenal tm grande correlao com as
funes do sistema nervoso simptico. Dessa forma, freqentemente usamos
o termo sistema simptico-adrenal para ressaltar as inter-relaes existentes
entre o sistema nervoso autnomo e o sistema endcrino representado pela
adrenal.
244 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
Receptores adrenrgicos
A adrenalina uma molcula polar e solvel em meio aquoso e,
portanto, incapaz de atravessar a membrana plasmtica das clulas.
Assim, uma vez liberada na circulao, a adrenalina exerce seus efeitos
intracelulares por intermdio da ao de receptores de membrana,
os chamados receptores e -adrenrgicos. Os receptores adrenrgicos,
assim como os receptores de glucagon, se encontram associados
protena G. Como voc j deve estar suspeitando, a seqncia de eventos
que ocorrem a partir da ligao da adrenalina a seu receptor semelhante
quela descrita para a ao do glucagon.
isso mesmo! Entretanto, a distribuio dos receptores
adrenrgicos entre os tecidos diferente da distribuio dos receptores
de glucagon, de forma que os efeitos gerais sobre o metabolismo tambm
vo ser diferentes frente a um estmulo de adrenalina ou de glucagon.
Efeitos da adrenalina sobre o metabolismo heptico

Os principais efeitos da adrenalina no fgado so o resultado de
-ADRENRGICOS, com conseqente aumento das
RECEPTORES
concentraes intracelulares de AMPc e a regulao de processos como
ADRENRGICOS
sua ligao a
RECEPTORES
o metabolismo de glicognio e o fluxo gliclise/gliconeognese.

Os efeitos da adrenalina sobre a sntese e a degradao do glicognio
no fgado so muito semelhantes aos j descritos para a ao do glucagon.
Na verdade, o papel de ambos os hormnios foi elucidado na mesma srie
de trabalhos, desenvolvidos ao longo da dcada de 1950 por Sutherland
e diversos colaboradores. Nesses trabalhos, os pesquisadores, utilizando
fatias de fgado de coelho, demonstraram que tanto o chamado fator
hiperglicemiante (glucagon) quanto a adrenalina eram capazes de causar
um aumento na atividade glicogenoltica heptica, in vivo e in vitro.
Os efeitos sobre a gliclise e a gliconeognese, assim como sobre
a sntese de lipdeos, tambm so semelhantes queles desencadeados
pelo glucagon.
So divididos em
vrios subtipos.
Primeiramente, so
divididos em dois
grandes grupos:
os receptores e
-adrenrgicos.
Os receptores se
dividem nos subtipos
1, 2, 3, este
ltimo exclusivo
do tecido adiposo.
Os receptores so
divididos em 1 ou
2. Os receptores
1 podem ainda
ser subdivididos
em vrios outros
subtipos: 1A,
1B etc.
Assim, podemos concluir que, no fgado, adrenalina e glucagon

causam os mesmos efeitos metablicos.
CEDERJ 245
Efeitos da adrenalina sobre o msculo esqueltico

Efeitos sobre o metabolismo do glicognio
Nas clulas do msculo esqueltico, assim como no tecido muscular
cardaco, a adrenalina tambm exerce seus efeitos sobre o metabolismo
do glicognio. Como j vimos no caso do fgado, a adrenalina promove
a ativao da glicognio fosforilase muscular atravs da sua fosforilao.
A principal diferena entre os dois tecidos reside no destino da glicose-1fosfato produzida na fosforlise do glicognio. As clulas musculares no
apresentam a enzima glicose-6-fosfatase, resultando no aprisionamento
da glicose-6-fosfato produzida pela reao da fosfoglicomutase. Esta
uma importante adaptao funcional, uma vez que o corao e os
msculos, ao contrrio do fgado, necessitam da glicose para a produo
de ATP para contrao, em resposta a situaes de estresse ou risco
iminente (que disparam o estmulo adrenrgico), e no tm papel na
manuteno da glicose plasmtica. Assim, a glicose-6-fostato resultante
da degradao do glicognio no msculo segue a via glicoltica, como
veremos a seguir.
Ao sobre o fluxo glicoltico
Uma diferena fundamental ocorre entre o tecido muscular e o
tecido heptico, com relao ao papel da adrenalina sobre a gliclise.
No msculo, a enzima bifuncional PFK-2/F2,6BPase responde de maneira
totalmente inversa fosforilao
promovida pela PKA; ou seja, no
Lipdeos
msculo, a PFK-2 estar ativa quando

Tecido adiposo
Glicognio
Fgado
a enzima estiver fosforilada, enquanto

a atividade da F2,6BPase fica inibida.
cidos
graxos
Isso resulta em efeitos inversos da

adrenalina sobre as vias glicolticas
Corpos
cetnicos
Glicose
Glicose
muscular e heptica (Figura 32.7).
CO2
CO2
Lactato
Tecido muscular
Glicognio
246 CEDERJ
Figura 32.7: Ao da adrenalina sobre o

metabolismo do glicognio e sobre o fluxo
glicoltico muscular e heptico.
32 MDULO 7
AULA
Efeitos da adrenalina sobre o msculo cardaco

A adrenalina exerce efeitos bem caractersticos no msculo
cardaco. Como j comentamos, situaes de estresse muitas vezes
tornam necessrio o aumento da freqncia cardaca, o aumento da fora
de contrao e, por conseguinte, maior efetividade no bombeamento
de sangue, com oxignio e nutrientes para todo o organismo. Isso s
possvel se ocorrer um aumento na taxa de metabolismo basal do
cardiomicito, ou seja, aumento no consumo de oxignio e aumento na
produo de ATP. Torna-se bvio ento que, nessa situao, ao contrrio
do que ocorre em nvel heptico, necessrio que a adrenalina promova
um aumento da gliclise cardaca, a fim de maximizar a produo de
energia para a contrao muscular.
No cardiomicito, a adrenalina tambm age via receptor
-adrenrgico, com ativao da adenilato ciclase e de todos os outros
efeitos atrelados ao aumento nos nveis de AMPc, resultando na ativao
da PFK-1 pela F2,6BP, como ocorre no msculo esqueltico.
Estudos recentes mostraram que, no tecido muscular cardaco
sob influncia de adrenalina, o glicognio utilizado preferencialmente,
seguido pela glicose exgena e, finalmente, pela oxidao de cidos
graxos, que ocorre em nveis muito inferiores. Entretanto, a oxidao de
cidos graxos continua sendo muito importante no suprimento energtico
de outros tecidos, principalmente durante o jejum.
Efeitos da adrenalina sobre o tecido adiposo

No tecido adiposo, a adrenalina apresenta um importante papel
no processo de degradao dos triacilgliceris armazenados. Como
comentamos anteriormente, a enzima lipase sensvel a hormnio pode ser
substrato da fosforilao catalisada pela PKA. Essa fosforilao promove
a ativao da enzima. O resultado final da sinalizao da adrenalina a
liberao de glicerol e de cidos graxos dos adipcitos para o plasma.
Esses cidos graxos sero transportados para utilizao em diversos
tecidos, como importante fonte energtica.
Outra enzima encontrada em adipcitos, que responde aos efeitos
da adrenalina, a acetil-CoA carboxilase. Essa enzima catalisa o primeiro
passo comprometido da biossntese de cidos graxos, sendo regulada
tanto por efetores alostricos (citrato), como pela inativao induzida
por fosforilao.
CEDERJ 247
Assim, podemos concluir que a adrenalina estimula a liplise no

tecido adiposo, a glicogenlise e a gliclise muscular, alm de aumentar
as concentraes plasmticas de glicose, ao estimular a glicogenlise e
a gliconeognese no fgado.
RESUMO
Nesta aula, abordamos os principais aspectos relacionados aos hormnios glucagon

e adrenalina. Embora sejam secretados por glndulas diferentes, em resposta a
estmulos distintos, esses dois hormnios compartilham o mesmo mecanismo de
ao. Ambos se ligam a receptores associados protena G, ativando a produo
intracelular de AMPc, que, por sua vez, ativa a PKA. Essa protena cinase vai catalisar
a fosforilao de uma srie de enzimas, levando modificao de sua atividade.
O glucagon secretado pelas clulas das Ilhotas de Langerhans do pncreas,
em resposta diminuio da glicemia. Ele age principalmente sobre o fgado
e tambm sobre o tecido adiposo. No fgado, os principais efeitos metablicos
so: a ativao da degradao do glicognio e da gliconeognese, resultando na
produo de glicose, que liberada na circulao sangnea. No tecido adiposo,
a fosforilao da lipase leva hidrlise dos triacilgliceris, liberando cidos graxos
e glicerol na circulao.
A adrenalina secretada pela medula da glndula adrenal, em resposta a
estmulos do sistema nervoso. Os principais tecidos-alvo so o fgado, o msculo
e o tecido adiposo. No fgado e no tecido adiposo, os efeitos so semelhantes aos
do glucagon. No msculo, que no responde ao glucagon devido ausncia de
receptores, a adrenalina provoca a degradao do glicognio e ativa a gliclise,
permitindo que as clulas musculares sintetizem ATP em anaerobiose.
EXERCCIOS
Os exerccios referentes s Aulas 31, 32 e 33 sero apresentados em conjunto ao
final da Aula 33.
248 CEDERJ
objetivo
AULA
Insulina e glicocorticides
33
Chegamos ao final do nosso curso.

Nesta aula, vamos terminar o estudo
do metabolismo, falando especificamente
de outros dois hormnios importantes
na regulao do metabolismo energtico:
a insulina e os glicocorticides. Com isso,
acreditamos que voc ter uma viso bem
ampla do funcionamento do nosso organismo.
Pr-requisito
Esta aula tambm vai explorar a integrao
hormonal do metabolismo. Por isso, ser
importante, novamente, adiantar o estudo de
toda a matria antes de comear a ler a aula, de
forma que voc tenha uma boa viso geral do
metabolismo e das vrias vias que o compem.
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
INSULINA
Caractersticas qumicas da insulina
A insulina uma pequena protena com 51 resduos de aminocidos,
secretada pelas clulas das Ilhotas de Langerhans do pncreas. Ela
sintetizada como uma forma inativa, chamada pr-pr-insulina. Essa
protena apresenta uma nica cadeia polipeptdica, tendo em sua poro
Na Aula 32, falamos sobre

as clulas que compem
as Ilhotas de Langerhans
do pncreas.
N-terminal uma seqncia de sinalizao (Figura 33.1). Quando essa

seqncia clivada devido ao de proteases, h formao de trs pontes
dissulfeto, dando origem pr-insulina. Essa, ento, direcionada para
o Complexo de Golgi, onde ser armazenada em vesculas.
Quando h estmulo para a secreo de insulina, enzimas especficas,
denominadas pr-hormnios convertases 1, 2 e 3 (PC 1, 2 e 3), promovem
a hidrlise de duas ligaes peptdicas na cadeia da pr-insulina, dando
origem insulina madura e ao peptdeo C (Figura 33.1).
A forma ativa do hormnio, agora, apresenta duas cadeias peptdicas
unidas por pontes dissulfeto, e transportada pelas vesculas secretrias
atravs do Complexo de Golgi, que extremamente desenvolvido nas
Ilhotas de Langerhans, at a membrana plasmtica onde ser exocitada.
Pr-insulina
Pr-pr-insulina
Insulina madura
+
NH3
+
NH3
Seqncia
de sinalizao
S
C
SS
+
H3N
+
NH3
S
Cadeia A
S S
SS
COO-
Cadeia B
S
S S
COO-
COO-
OOC
Seqncia de sinalizao
Peptdeo C
Figura 33.1: Processo de formao da insulina. A insulina madura formada a partir de seu precursor pr-pr-insulina
atravs de sucessivas reaes de protelise. A remoo de 23 aminocidos (seqncia de sinalizao) na regio
animo-terminal da pr-pr-insulina e a formao de trs pontes dissulfeto produzem a pr-insulina. Posteriormente,
nova protelise remove o peptdeo C, formando a insulina madura, composta por duas cadeias A e B.
250 CEDERJ
33 MDULO 7
AULA
Secreo de insulina pelas clulas

As clulas do pncreas secretam quantidades precisas de insulina
em resposta a sutis aumentos na concentrao basal de glicose plasmtica.
O principal estmulo fisiolgico para a secreo de insulina , portanto,
a glicose.
Quando nos alimentamos, a absoro dos nutrientes um processo
gradual e contnuo, que se inicia aproximadamente 20 minutos aps o
incio da refeio. Os nveis plasmticos de glicose aps uma refeio
podem chegar a mais de 10mM, ou seja, o dobro dos nveis basais.
!
Existem algumas drogas,
utilizadas no tratamento
do diabetes, denominadas
hipoglicemiantes orais,
que tambm estimulam
a secreo de insulina
(estmulo clnico).
Portanto, de suma importncia que a secreo de insulina seja um

processo tambm gradual, acompanhando as oscilaes dos nveis
plasmticos de glicose.
Receptor e mecanismos de ao
O receptor de insulina faz parte da grande famlia dos receptores
tirosina cinase. uma glicoprotena composta de duas subunidades
, que contm stios de ligao para a insulina, e duas subunidades ,
que atravessam a membrana plasmtica da clula e apresentam atividade
tirosina cinase em seus domnios citoslicos (Figura 33.2).
Insulina ligada
ATP
Tyr
Tyr
P
Protena-alvo
Domnio Tyr
tirosina cinase
Stio de autofosforilao
ADP
Tyr
Efeitos intracelulares
Figura 33.2: Diagrama esquemtico do receptor da insulina. Os stios de ligao da

insulina esto mostrados na subunidade e os stios de fosforilao na subunidade .
CEDERJ 251
As subunidades e encontram-se unidas atravs de pontes

dissulfeto. Aps a ligao da insulina no stio das subunidades , uma
rpida mudana conformacional se segue, provocando a autofosforilao
de vrios resduos de tirosina na poro citoslica das subunidades .
A autofosforilao resulta no aumento da atividade tirosina
cinsica do receptor de insulina, iniciando a propagao de sinal atravs
de interaes protena-protena.
Atualmente, a insulina um dos hormnios mais bem estudados.
Entretanto, seu mecanismo de ao ainda est longe de ser completamente
esclarecido. Sabe-se que a cascata de sinalizao da insulina muito
complexa e cada vez mais novas protenas so descritas.
!
Os estudos referentes ao mecanismo de ao da insulina tm grande
importncia face alta prevalncia de diabetes mellitus em todo o mundo.
O diabetes a terceira maior enfermidade, que acomete pelo menos 3% da
populao europia e norte-americana e 100 milhes de pessoas em todo o
mundo.
Uma classe de protenas, conhecidas como IRS (Insulin Receptor

Substrate, ou Substrato para o Receptor de Insulina), diretamente
!
Voc aprendeu as caractersticas e a importncia dos
fosfolipdeos na disciplina
Bioqumica I.
fosforilada pelo receptor em seus resduos de tirosina. Quando essas

protenas so fosforiladas, elas se associam a uma srie de outras protenas
presentes na clula, modificando sua atividade. Uma das principais enzimas
cuja atividade modificada pela ligao ao IRS-1 a fosfatidilinositol-3cinase (PI3K). Essa enzima introduz um grupamento fosfato na posio 3
do anel inositol dos fosfoinositdeos, que so fosfolipdeos localizados nas
membranas plasmticas ou de organelas. A PI3K apresenta uma subunidade
Insulina
regulatria (mais bem descrita) de 85kDa (p85),

e uma subunidade cataltica de 110kDa (p110).
Membrana plasmtica
Receptor
de insulina
A subunidade p85 associa-se ao IRS-1 e

tambm p110. A subunidade cataltica p110
estimulada pela ligao p85 e, ainda mais,
ATP
quando esta ltima est associada ao IRS-1

Fosforilao nos resduos de tirosina
p110
p85
Fosfoditil
inositol-3-cinase
Citoplasma
252 CEDERJ
IRS-1
(Figura 33.3).
Figura 33.3: Esquema da transduo de sinal da insulina.
O receptor da insulina ativo se liga temporariamente
IRS-1, fosforilando-a, e esta ltima se liga
subunidade regulatria p85 da PI3K. O complexo
IRS-1/PI3K transloca-se para membranas, promovendo
a fosforilao do fosfatidilinositol.
33 MDULO 7
AULA
Efeitos da insulina sobre a captao de glicose

Um dos principais efeitos promovidos pela PI3K o aumento da
captao de glicose por determinadas clulas, principalmente clulas
musculares e clulas do tecido adiposo. Isso evita um aumento indesejvel
da concentrao plasmtica desse acar. Mas como isso ocorre?
A entrada de glicose nas clulas se d atravs de protenas
transportadoras de glicose, que so chamadas GLUT (Glucose
Transporter, ou seja, transportador de glicose). Os diferentes tecidos
expressam diferentes tipos de GLUT (Tabela 33.1).
Tabela 33.1: Caractersticas dos transportadores de glicose
Transportador
KM aproximado
para glicose (mM)
Distribuio
Caractersticas
SGLT-1
0,2-0,5
Intestino e rim
Transporte dependente de Na+; concentra glicose atravs da membrana

epitelial apical
GLUT-1
10
Ampla distribuio, alta concentrao nos eritrcitos e no endotlio
Transportador constitutivo de glicose
GLUT-2
20-42
Fgado, clulas do pncreas, rim e

intestino delgado
Transportador de baixa afinidade

e alta capacidade de transporte;
funciona como um sensor de glicose
GLUT-3
1-5
Neurnios, placenta
Transportador de alta afinidade
GLUT-4
2-10
Msculo esqueltico e cardaco,

tecido adiposo
Transportador dependente de
insulina
GLUT-5
---
Intestino delgado, esperma, rim,

crebro, adipcitos e msculo
Transportador de frutose; afinidade

muito baixa para glicose
GLUT-7
---
Hepatcitos
Transporta glicose atravs da membrana do retculo endoplasmtico

durante a gliconeognese
Dentre os transportadores de glicose conhecidos, os GLUTs 4, que

so expressos nas clulas do tecido adiposo e do msculo esqueltico,
so dependentes de insulina para captarem glicose. Isso se d da seguinte
forma: em clulas no estimuladas com insulina, esses transportadores encontram-se confinados em vesculas, localizadas no citosol.
CEDERJ 253
A estimulao celular pela insulina promove a exocitose e translocao

das vesculas contendo GLUT4 para a membrana plasmtica, resultando
em um aumento de at 30 vezes na captao de glicose por essas
clulas. Ainda no est muito bem esclarecido como esse mecanismo
ocorre. Alguns estudos mostraram que a associao da p110 da PI3K
s vesculas uma possvel resposta (Figura 33.4). Como os tecidos
adiposo e muscular correspondem, juntos, a aproximadamente 60%
da massa corporal, o controle exercido pela insulina sobre a captao
e utilizao de glicose pelas clulas desses tecidos fundamental para a
normalizao da glicemia no perodo absortivo.
Estimulao do
tranporte de glicose
Exerccio
GLUT-4
Membrana
plasmtica
Insulina
Receptor
de insulina
ATP
Cinase ativada
por AMP
Protenas
cinase B
(Akt)
Fosforilao nos resduos de tirosina

Cinases
dependentes de
fosfatidil inositol
Translocao
para
membrana
plasmtica
?
Protenas
cinase C
atpica
p110
p85
Fosfoditil
inositol-3-cinase
IRS-1
Domnios SH2
Citoplasma
Vesculas contendo
GLUT-4 (responsivos
ao exerccio)
Vesculas contendo
GLUT-4 (responsivos
insulina)
Figura 33.4: Efeito da insulina sobre os GLUT4. A ligao da insulina a seu receptor induz um aumento da atividade
tirosina cinsica deste ltimo. Um dos principais substratos desse receptor a protena IRS-1 que, fosforilada, vai ativar
a PI3K. A fosforilao do fosfatidilinositol na posio 3, catalisada por essa enzima, levar migrao das vesculas
contendo GLUT4 para a superfcie das clulas adiposas e musculares. Quando a insulina se desliga dos receptores, os
transportadores de glicose GLUT4 so internalizados por endocitose e armazenados em vesculas citoplasmticas.
Outros efeitos da insulina no metabolismo

Alm de estimular a captao de glicose pelo msculo e pelo
tecido adiposo, a insulina provoca uma srie de outros efeitos sobre
o metabolismo de diversos tipos celulares. Os mecanismos envolvidos
nesses efeitos no esto todos completamente elucidados. Optamos,
ento, por listar apenas os efeitos finais, sem descrever as etapas
enzimticas diretamente envolvidas na regulao pela insulina. Cabe
ressaltar que grande parte desses efeitos resulta da ativao de fosfatases
que defosforilam as enzimas que so fosforiladas pela PKA. Segue a lista
com os principais efeitos da insulina em diferentes tecidos:
254 CEDERJ
33 MDULO 7
AULA
Fgado:
Ativao da gliclise e inibio da gliconeognese;
Ativao da sntese de glicognio e inibio da sua degradao;
Ativao da sntese de cidos graxos;
Ativao da via das pentoses.
Msculo:
Aumento da captao de glicose;
Ativao da sntese de glicognio e inibio da sua degradao.
Tecido adiposo:
Aumento da captao de glicose;
Ativao da sntese de cidos graxos;
Ativao da via das pentoses.
Repare que todos os resultados da ao da insulina sobre as vias
metablicas resultam em uma maior utilizao da glicose, permitindo
uma rpida reduo da glicemia e a produo de reservas energticas
com o excedente de glicose.
CRTEX
GLICOCORTICIDES
Os corticides so hormnios esterides sintetizados exclusivamente
no CRTEX das glndulas supra-renais (adrenais). Esses hormnios podem
ser divididos em duas classes principais, os mineralocorticides, assim
denominados por estarem envolvidos com a regulao do equilbrio de
ons, principalmente sdio e potssio, dos quais no falaremos nesta aula,
e os glicocorticides, assim denominados devido ao seu papel central
na regulao do metabolismo de carboidratos, mas que tambm esto
envolvidos na regulao de diversas outras vias metablicas, como a via
de sntese e degradao de cidos graxos, alm de desempenharem papel
central na mediao da resposta imunolgica.
Natureza qumica dos glicocorticides

Os glicocorticides so sintetizados a partir do colesterol por uma
srie de reaes qumicas complexas que no sero exploradas nesta
aula. Os glicocorticides naturais mais importantes so o cortisol e a
corticosterona (Figura 33.5). Um homem adulto produz diariamente de
10 a 30mg de cortisol e de 2 a 4mg de corticosterona.
Em um indivduo
adulto, o crtex
compreende 90%
do tamanho total da
glndula supra-renal,
sendo os outros 10%
constitudos pela
medula. Do ponto de
vista histolgico, o
crtex supra-renal pode
ser dividido em trs
zonas: (a) a zona mais
externa, chamada zona
glomerular, responsvel
pela sntese dos
mineralocorticides;
(b) a zona mdia,
chamada zona
fasciculada, que a
maior das trs zonas,
constituindo cerca de
75% do crtex suprarenal; e (c) a zona mais
interna, denominada
zona reticular.
As duas ltimas
so responsveis
pela sntese dos
glicocorticides,
dos andrognios
e dos estrognios
supra-renais.
CEDERJ 255
CH2OH
CH3
HO
O
OH
CH3
Figura 33.5: Estrutura qumica do cortisol.
Secreo de glicocorticides
A produo de glicocorticides regulada pelo hormnio
GLNDULA
PITUITRIA
A glndula pituitria,
tambm conhecida
como hipfise, s
vezes recebe tambm
o nome de glndula
mestra do sistema
endcrino, por
controlar as funes
das outras glndulas
endcrinas. A
glndula pituitria
est localizada na base
do crebro, unida
ao hipotlamo (uma
parte do crebro que
influi na glndula
pituitria) por meio
de fibras nervosas.
Vrios hormnios
so produzidos
pela hipfise,
como o hormnio
do crescimento,
a prolactina,
o hormnio
adrenocorticotrfico
(ACTH), o hormnio
estimulante da tireide
(TSH), o hormnio
folculo-estimulante
(FSH), o hormnio
luteinizante (LH),
o hormnio
estimulante dos
melancitos,
o hormnio
antidiurtico (ADH) e
a oxitocina.
256 CEDERJ
adrenocorticotrfico (ACTH), um hormnio peptdico produzido pela

GLNDULA PITUITRIA.
O controle da secreo de glicocorticides se d principalmente

em dois nveis. O primeiro nvel pode ser considerado constitutivo,
e determina o ritmo circadiano de secreo dos glicocorticides. Todos os
mamferos apresentam um pico de secreo de ACTH (e posteriormente
de glicocorticides) algumas horas antes do despertar. O horrio dessa
secreo pode ser reajustado em poucos dias, adaptando-se a mudanas
nos hbitos noturno e diurno do indivduo. Um segundo nvel de controle
de secreo de glicocorticides se relaciona resposta ao estresse. Sabe-se
que estresses de qualquer natureza, como alimentar, hdrico, choques e
traumas, dentre outros, disparam a secreo de glicocorticides.
A liberao de ACTH pela glndula pituitria, por sua vez, pode
ser regulada por um outro hormnio peptdico, o hormnio liberador de
corticotrofina (CRH) (corticotrophin releasing hormone). Esse hormnio
produzido no hipotlamo e levado adeno-hipfise por um sistema
de vasos do tipo porta. Assim, diz-se que a produo e a secreo dos
glicocorticides se encontram sob o controle do eixo hipotlamopituitria-adrenal.
33 MDULO 7
AULA
Mecanismo de ao dos glicocorticides

Ao contrrio dos hormnios peptdicos, os glicocorticides no
necessitam ligar-se a receptores na membrana celular para desempenhar
seus principais papis. Por serem lipdeos, esses hormnios apresentam
natureza hidrofbica, podendo assim atravessar a membrana e encontrar
receptores especficos intracelulares, localizados no citoplasma ou no
ncleo das clulas-alvo. A ligao do hormnio promove mudanas
conformacionais no receptor, resultando na formao de um complexo
ativado, com alta afinidade por determinados stios do DNA, chamados
elementos regulatrios. Geralmente, a ligao do complexo hormnioreceptor a esses elementos regulatrios afeta a expresso gnica,
induzindo ou reprimindo a iniciao da transcrio de genes especficos.
Os produtos da traduo dos RNA mensageiros de sntese regulada por
esses hormnios promovero efeitos metablicos nas clulas-alvo.
!
Lembre-se! Voc j aprendeu na Aula 31 que receptores hormonais podem ser
subdivididos em dois grupos principais: aqueles que se encontram na superfcie
celular e vo mediar respostas citoplasmticas e aqueles de localizao intracelular
e que vo atuar geralmente no ncleo da clula-alvo.
Efeitos dos glicocorticides no metabolismo

Um dos principais efeitos dos glicocorticides se d sobre a via gliconeognica. Analise os resultados experimentais descritos a seguir e tire suas
concluses sobre os efeitos dos glicocorticides sobre essa via metablica.
Nesta experincia, Viru e colaboradores mediram a concentrao
de glicose sangnea em ratos-controle e ratos adrenalectomizados (cuja
adrenal foi retirada), antes e aps um exerccio intenso, obtendo os
resultados mostrados na Tabela 33.2.
Tabela 33.2: Efeito do exerccio na glicemia de ratos-controle e adrenalectomizados.
Concentrao de glicose sangunea (mM)
Condio
controle
adrenalectomizado
Repouso
6,12 0,22
4,88 0,38
Ps-exerccio
5,63 0,29
2,95 0,41
CEDERJ 257
Esses resultados demonstram, de forma bastante clara, que a glicemia

significativamente menor nos ratos adrenalectomizados, sugerindo um
papel importante dos glicocorticides na ativao da via gliconeognica.
Mas quais seriam os mecanismos responsveis por esse aumento
da atividade gliconeognica induzida por glicocorticides?
Vamos analisar outros resultados experimentais. Em 1960, Weber
e colaboradores estudaram os efeitos dos corticides na atividade de
G L I C O S E -6-
duas enzimas-chave das gliconeognicas:
F O S F ATA S E E
1,6
F R U T O S E -1,6
BIFOSFATASE.
GLICOSE-6-FOSFATASE E FRUTOSE-
Aps administrao de um glicocorticide (dia sim,
dia no), eles sacrificavam animais de trs lotes (controle, tratados
B I F O S F ATA S E
Caso voc tenha

esquecido a
importncia das
enzimas glicose-6fosfatase e frutose1,6 bifosfatase na
gliconeognese, volte
s Aulas 29 e 30.
com glicocorticide e tratados com glicocorticide + actinomicina D,

um inibidor de transcrio). Extraam o fgado e faziam os ensaios da
atividade enzimtica no homogenato. Nos animais remanescentes,
continuavam a injetar cronicamente o glicocorticide at o fim da
experincia no 13 dia. Os resultados por eles obtidos podem ser
observados na Figura 33.6.
Glicose-6-fosfatase
Frutose-1,6-bifosfatase
300
% atividade
% atividade
300
200
100
200
100
0
0.0
2.5
5.0
7.5
Dias de tratamento
10.0
12.5
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
Dias de tratamento
Figura 33.6: Atividade das enzimas gliconeognicas durante tratamento com glicocorticides. 100%: atividades
obtidas nos animais controle; ( ) tratados com glicocorticide; ( o ) tratado com glicocorticide + actinomicina D.
Que concluses voc pode tirar dessa experincia?

Agora, observe os resultados obtidos em outra experincia.
Voc sabe que a gliconeognese uma via metablica para
sntese de glicose a partir de precursores no glicdicos que tm,
como uma de suas etapas limitantes, a converso de oxaloacetato em
fosfoenolpiruvato (PEP), catalisada pela enzima fosfoenolpiruvato
carboxicinase (PEPCK). Em 1986, Hoppner e colaboradores mediram
os nveis de RNA mensageiro para a PEPCK, em cultura de hepatcitos,
na presena ou ausncia de dexametasona (um glicocorticide sinttico),
obtendo os resultados mostrados na Tabela 33.3.
258 CEDERJ
Condio
RNA da PEPCK (% mRNA total)
Controle
0,023 0,005
Dexametasona
0,052 0,004
33 MDULO 7
AULA
Tabela 33.3: Nveis de RNA mensageiro para a PEPCK de hepatcitos em cultura,

mantidos na presena ou ausncia de glicocorticides.
Com este experimento, podemos compreender que os glicocorticides so capazes de ativar a gliconeognese atravs da induo da
transcrio e sntese da PEPCK, levando, assim, a um aumento dos nveis
celulares totais dessa enzima.
Alm de ativarem a gliconeognese, os glicocorticides tambm
agem sobre o metabolismo de aminocidos e protenas.
O tratamento de clulas musculares com glicocorticides aumenta
em, pelo menos, 20% a degradao de protenas. Imagina-se que os
aminocidos resultantes sejam secretados pelo msculo para a corrente
sangnea, ficando assim disponveis para outros rgos, principalmente
o fgado. Neste rgo, os aminocidos podem ser utilizados como
substrato para a gliconeognese ou como substratos para a sntese das
diversas protenas hepticas, cuja produo justamente estimulada
pelos glicocorticides.
A expresso de importantes enzimas relacionadas ao metabolismo
de aminocidos, as
TRANSAMINASES,
tambm pode ser estimulada pelos
TRANSAMINASES
glicocorticides. O aumento da sntese dessas enzimas pode ser observado
Voc aprendeu sobre

as transaminases nas
Aulas 17, 18 e 19.
em diversos tecidos, mas principalmente no msculo e no fgado.

No msculo, acredita-se que esse efeito esteja relacionado ao aumento da
secreo de alanina e glutamina. Uma vez no plasma, esses aminocidos
podem ser ento captados pelo fgado e, com a ajuda das transaminases
recm-sintetizadas, convertidos a piruvato ou a intermedirios do
ciclo de Krebs que podem ser utilizados como substratos para a
gliconeognese.
CEDERJ 259
RESUMO
Nesta aula, abordamos os principais aspectos relacionados aos hormnios insulina

e glicocorticides.
A insulina uma pequena protena secretada pelas clulas das Ilhotas de
Langerhans do pncreas, em resposta ao aumento da glicemia. O receptor da
insulina tem atividade tirosina cinase que ativada pela ligao da insulina.
O receptor se autofosforila e, ento, fosforila algumas protenas intracelulares em
seus resduos de tirosina. A principal protena fosforilada o IRS-1. Essa protena
se associa a vrias enzimas, modificando sua atividade. Uma das principais enzimas
com atividade modulada pela ligao do IRS-1 a PI3K. Os efeitos da insulina sobre
o metabolismo esto relacionados a um aumento na captao e utilizao da
glicose pelas diferentes clulas do organismo. A captao de glicose pelo msculo
e pelo tecido adiposo aumentada em muitas vezes. Esses tecidos passam a usar a
glicose e a produzir suas reservas, o glicognio e os triacilgliceris, respectivamente.
A utilizao da glicose tambm aumentada no fgado, que repe suas reservas
de glicognio e sintetiza cidos graxos.
Os glicocorticides so secretados pelo crtex da glndula adrenal em resposta
ao aumento nos nveis sangneos de ACTH, que, por sua vez, aumentam por um
estmulo do hipotlamo em decorrncia de vrios tipos de estresse. O principal
glicocorticide humano o cortisol. Por sua natureza lipdica, esses hormnios
atravessam a membrana da clula, ligam-se a receptores intracelulares e atuam
sobre a expresso gnica. As principais enzimas cujos genes so regulados pelos
glicocorticides so as transaminases e as enzimas gliconeognicas PEPCK, frutose1,6-bifosfatase e glicose-6-fosfatase. O resultado de sua ao , principalmente,
o aumento da produo de glicose pelo fgado, especialmente a partir de
aminocidos provenientes da degradao de protenas musculares.
260 CEDERJ
33 MDULO 7
1. A meia-vida da maioria dos hormnios no sangue relativamente curta. Por

exemplo, se injetarmos insulina marcada radioativamente em um animal, metade
do hormnio desaparecer do sangue aps 30min.
a) Qual a importncia dessa inativao relativamente rpida dos hormnios
circulantes?
b) Tendo em vista essa rpida inativao, como o nvel de hormnios circulantes
se mantm constante em condies normais?
c) De que maneira possvel a ocorrncia de mudanas nas concentraes de
hormnios circulantes?
2. Com base em suas propriedades qumicas, os hormnios podem ser classificados
em duas categorias: aqueles que so muito solveis em gua, mas relativamente insolveis em lipdeos (por exemplo, a adrenalina); e aqueles que so
relativamente insolveis em gua, mas muito solveis em lipdeos (por exemplo,
os hormnios esterides). Comente as implicaes entre as caractersticas qumicas
dessas duas classes de hormnios e seu mecanismo de ao.
3. Ramachandran e colaboradores, em 1983, perfundiram fgados de rato com
diferentes concentraes de glucagon e determinaram a atividade da glicognio
sintase, bem como o contedo de fosfato associado a ela. Os resultados esto
Aumento no contedo de
32
p (pmol/unidade)
Atividade da glicognio
sintase (%)
mostrados na figura a seguir:
50
40
30
20
0
10-9
10-8
10-7
10-6
120
80
40
0
0
10-9
Glucagon (M)
10-8
10-7
10-6
Glucagon (M)
a) Interprete a figura, correlacionando os resultados dos dois grficos.

b) Quais seriam os resultados obtidos se fossem medidos os nveis de frutose2,6-bifosfato e a atividade da glicognio fosforilase?
CEDERJ 261
AULA
EXERCCIOS REFERENTES S AULAS 31, 32 E 33
4. A adrenalina um hormnio sintetizado na medula da glndula adrenal a

partir do aminocido tirosina. Esse hormnio secretado em resposta a diferentes
tipos de estresse. Os grficos a seguir mostram o resultado de uma experincia na
qual clulas de msculo esqueltico de rato foram incubadas com concentraes
crescentes de adrenalina.
2,8
0,4
0,2
12
Frutose-2,6-bifosfato
2,4
10
2,0
nmoles/g
AMPc
nmoles/g
nmoles/g
0,6
1,6
1,2
Lactato
6
4
0,8
2
0,4
0,0
0,0
0
10 20 30 40 50 60 70 80
Adrenalina
10 20 30 40 50 60 70 80
Adrenalina
10 20 30 40 50 60 70 80
Adrenalina
a) Justifique as alteraes observadas nos nveis intracelulares dos diferentes

metablitos.
b) Quais seriam as variaes observadas, se essas clulas fossem incubadas com
glucagon? Justifique.
5. Durante situaes de fuga ou luta, a liberao de adrenalina promove a
degradao do glicognio no fgado, no msculo esqueltico e no corao.
O produto final da quebra do glicognio no fgado a glicose, enquanto no
msculo piruvato ou lactato.
a) Por que so observados diferentes produtos da degradao do glicognio
nos dois tecidos?
b) Para o organismo, qual a vantagem adaptativa de existirem esses dois
diferentes destinos do glicognio em situaes de fuga ou luta?
6. Com base nos conhecimentos adquiridos a respeito da ao da insulina sobre a
captao de glicose por alguns tipos celulares, explique os resultados obtidos no
experimento descrito a seguir:
Por volta de 1985, diversos pesquisadores fizeram culturas de diferentes tipos de
tecidos para estudar a captao de glicose por essas clulas. Os ensaios foram
realizados a partir da adio de 3-metil-glicose (um anlogo no metabolizado
da glicose) ao meio de cultura, contendo ou no insulina. Os resultados esto
dispostos na tabela seguinte:
262 CEDERJ
g/dia
mol/g
tecido/min
g/dia
mol/g
tecido/min
Fgado
107
0,3
104
0,3
Crebro
110
0,31
112
0,3
Msculo esqueltico
98
0,01
980
0,1
7. Descreva dois efeitos da insulina sobre o metabolismo energtico diferentes

daqueles descritos no exerccio anterior.
8. No grfico abaixo, a linha tracejada indica a administrao de um composto
hipoglicemiante (diminui a concentrao sangnea de glicose).
Concentro de Cortisol (mg/dl)
50,0
10,0
5,0
1,0
0,5
-80
-40
40
80
120
Tempo (min)
a) Relacione a hipoglicemia com a variao observada na concentrao de cortisol.

b) Descreva o mecanismo de ao dos glicocorticides, ressaltando seu papel
na utilizao de aminocidos para a reposio da glicose sangnea.
CEDERJ 263
33 MDULO 7
3-metil-glicose + insulina
AULA
3-metil-glicose
Tipo Celular
Gabarito
Bioqumica II
Aulas 31, 32 e 33
1. a) A inativao fornece uma maneira rpida de mudar a concentrao sangnea

do hormnio, permitindo um controle preciso de seus efeitos.
b) Os nveis dos hormnios podem ser mantidos constantes se suas taxas de sntese
e degradao so equivalentes.
c) Outras maneiras de variar a concentrao de hormnios no sangue so o controle
sobre as taxas de liberao dos estoques intracelulares, de transporte, e de
converso de um precursor do hormnio em sua forma ativa.
2. Os hormnios solveis em gua exercem seus efeitos a partir de sua ligao a
receptores presentes na superfcie externa da clula, desencadeando a formao
de um segundo mensageiro no interior da clula; geralmente levam modificao da
atividade de enzimas pr-existentes. Os hormnios lipossolveis atravessam a
membrana celular e agem sobre molculas-alvo ou receptores diretamente;
geralmente levam modificao da expresso gnica, modificando o nmero de
enzimas disponveis.
3. a) medida que a concentrao de glucagon no meio de perfuso aumenta, a
atividade da glicognio sintase diminui, e a quantidade de fosfato associado
essa enzima aumenta. Isso ocorre porque o glucagon, ao se ligar ao seu receptor
na superfcie dos hepatcitos, desencadeia uma srie de eventos que culminam
com a ativao da PKA. Esta enzima catalisa a fosforilao de diversas enzimas,
dentre as quais a glicognio sintase. Por isso, o contedo de fosfato associado
enzima aumenta. A fosforilao da glicognio sintase inibe sua atividade,
justificando o primeiro grfico.
b) A concentrao heptica de frutose-2,6-bifosfato diminuiria, j que a fosforilao
da enzima bifuncional fosfofrutocinase2/frutose-2,6-bifosfatase ativa sua
poro frutose-2,6-bifosfatase, levando converso de frutose-2,6-bifosfato
em frutose-6-fosfato. A atividade da glicognio fosforilase aumentaria, pois
esta enzima tambm substrato para a PKA, sendo o efeito da sua fosforilao
a sua ativao.
266 CEDERJ
4. a) Os nveis de AMPc aumentam em resposta ao aumento da concentrao de

adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque a ligao da adrenalina
ao seu receptor celular desencadeia mudanas conformacionais no receptor que
alteram sua interao com a protena G associada a ele, levando dissociao
da subunidade , que passa a interagir com a adenilato ciclase, ativando-a.
A adenilato ciclase catalisa a converso de ATP em AMPc, aumentando, assim,
os nveis intracelulares deste metablito.
Os nveis de F2,6BP aumentam em resposta ao aumento da concentrao
de adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque o AMPc se liga s
subunidades regulatrias da PKA, levando a sua dissociao das subunidades
catalticas. Estas ltimas passam a catalisar a fosforilao de uma srie de
protenas celulares, dentre as quais a enzima bifuncional PFK2/F2,6Bpase.
A fosforilao da isoforma muscular desta enzima promove a ativao de sua
atividade PFK e a inibio de sua atividade F2,6Bpase, levando converso de
F6P em F2,6BP.
Os nveis de lactato aumentam em resposta ao aumento da concentrao de
adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque F2,6BP um potente ativador
da enzima glicoltica PFK, aumentando, assim, o fluxo glicoltico. Como o aporte de
oxignio insuficiente para a completa oxidao da glicose, o excesso de piruvato
formado na via glicoltica convertido em lactato, permitindo a reoxidao dos
NADH formados na gliclise e a continuidade do metabolismo anaerbico.
b) No seria observado nenhum efeito j que as clulas musculares no possuem
receptores para glucagon.
5. a) As clulas do corao e do msculo esqueltico no possuem a enzima glicose6-fosfatase. Assim, a glicose-6-fosfato produzida entra na via glicoltica, e,
em condies de deficincia de oxignio, convertida a lactato via piruvato.
Cabe ressaltar, ainda, que a via glicoltica se torna bastante ativada pela
ao da adrenalina, uma vez que a isoforma muscular da enzima bifuncional
(fosfofrutocinase2/frutose-2,6-bifostase) passa a ter atividade fosfofrutocinase2
em decorrncia de sua fosforilao pela PKA, levando a um aumento da
concentrao de frutose-2,6-bifosfato, que, por sua vez, ativa a enzima-chave
da gliclise fosfofrutocinase1.
CEDERJ 267
b) Intermedirios fosforilados no podem sair da clula porque a membrana

no permevel a molculas carregadas. Em situaes de fuga ou luta,
a concentrao de precursores glicolticos devem ser altas para garantir a
atividade muscular em anaerobiose. O fgado, por outro lado, deve liberar a
glicose necessria para manter a glicemia. A glicose-6-fosfato formada no fgado
convertida em glicose pela enzima heptica glicose-6-fosfatase sendo, ento,
liberada na corrente sangnea.
6. A presena de insulina no meio de incubao promove um grande aumento
na captao de glicose pelas clulas musculares (~10 vezes), enquanto nenhuma
alterao observada na captao de glicose pelo fgado ou pelo crebro.
Os transportadores de glicose expressos nas clulas do msculo esqueltico, os GLUTs
4, so dependentes de insulina para captarem glicose. Isso se d da seguinte forma:
em clulas no estimuladas com insulina, esses transportadores encontram-se
confinados em vesculas, localizadas no citosol. A estimulao celular pela insulina
promove a autofosforilao do receptor da insulina, o que resulta no aumento da sua
atividade tirosina cinase. O receptor catalisa, ento, a fosforilao da protena IRS-1,
que, quando fosforilada, associa-se a vrias protenas celulares, dentre as quais, a
PI3K. Esta enzima se torna ativa e catalisa a fosforilao do fosfatidilinositol presente
em membranas celulares. Este sinal leva translocao das vesculas contendo GLUT4
para a membrana plasmtica, resultando em um aumento na captao de glicose
por essas clulas.
Os GLUTs presentes nas clulas heptica e cerebrais se encontram constantemente na
superfcie celular, possibilitando a captao de glicose mesmo na ausncia de insulina.
7. Grande parte dos efeitos resulta da ativao de fosfatases que defosforilam as
enzimas que so fosforiladas pela PKA. Uma das conseqncias a ativao da
glicognio sintase e inibio da glicognio fosforilase, resultando no aumento
da sntese de glicognio e inibio da sua degradao, tanto no fgado como no
msculo. Podemos citar tambm a ativao da acetil-CoA carboxilase devido sua
defosforilao. Isso resulta na ativao da sntese de cidos graxos, tanto no fgado
como no tecido adiposo. De uma maneira geral, os resultados da ao da insulina
sobre as vias metablicas resultam em uma maior utilizao da glicose, permitindo
uma rpida reduo da glicemia e a produo de reservas energticas com o excedente
de glicose.
268 CEDERJ
8. a) A secreo de glicocorticides pode se desencadeada em resposta a estresses

de diferentes naturezas, dentre os quais, a hipoglicemia. A baixa concentrao
sangunea de glicose percebida por uma regio especializada do hipotlamo,
induzindo a secreo de um hormnio peptdico, o hormnio liberador de
corticotrofina (CRH) (corticotrophin releasing hormone). Este hormnio induz a
liberao de ACTH pela glndula pituitria. O ACTH atua na glndula adrenal,
estimulando a produo de glicocorticides.
b) Os glicocorticides so hormnios lipdicos, podendo atravessar a membrana
da clula e ligar a receptores intracelulares. O complexo formado pelo glicocorticide associado ao seu receptor atua sobre a expresso gnica. Assim, esses
hormnios so capazes de induzir a expresso de uma srie de enzimas, dentre
as quais as transaminases, importantes enzimas relacionadas ao metabolismo
de aminocidos. Isso favorece a converso dos aminocidos a piruvato ou a
intermedirios do ciclo de Krebs, que podem ser utilizados como substratos
para a gliconeognese. Os glicocorticides tambm induzem a transcrio e a
sntese de vrias enzimas da gliconeognese, como a PEPCK, a F1,6BPase e a
G6Pase, levando, assim, a um aumento dos nveis celulares totais dessas enzimas.
Assim, o resultado da ao dos glicocorticides , principalmente, o aumento
da produo de glicose pelo fgado, especialmente a partir de aminocidos
provenientes da degradao de protenas musculares.
CEDERJ 269
I SBN 85 - 89200 - 46 - 9
cdigo
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BIOQUMICA II | Respirao celular

DA ANTIGUIDADE AO INCIO DA MODERNIDADE

objetivo dos alquimistas era a busca do ouro, a transmutao dos

Figura 12.2: Um laboratrio alqumico.

A vontade de experimentar se acentua em meados do sculo XVII.

Surgiu, ento, em 1760, a Teoria do Flogstico ou Princpio do

TERRA (Pobre em flogstico)

METAL (Rico em flogstico)

Outra verdade da poca era a concepo de que o ar era nico.

BIOQUMICA II | Respirao celular

Esta descoberta, que eu tenho estabelecido por experimentos que

Para saber mais, acesse:

Figura 12.4: Antoine Laurent

obtidos, pense sobre o que esses resultados indicam em relao Teoria

Figura 12.5: Experimento inicial de Lavoisier. Campnulas so cubas

A que concluses voc acredita que Lavoisier deve ter chegado?

Conhecendo o contexto em que os resultados de Lavoisier foram

BIOQUMICA II | Respirao celular

3. Reduo com adio de carvo

O que voc faria se fosse Lavoisier?

Peso depois da queima

< Y (perde peso)

> W (ganha peso)

* ar antes = deflogisticado; ar depois = flogisticado

Que fenmeno deve estar ocorrendo?

CO2 + gua + calor

Lavoisier, dessa forma, postula que Na natureza nada se cria, nada

Considerando a reao descrita acima, que componente faltava ser

BIOQUMICA II | Respirao celular

Aps diversas tentativas de observar o calor na forma de luz nos

Este o calormetro de gelo de Lavoisier e La Place (Figura 12.6);

em relao combusto e respirao?

Esses resultados foram capazes de esclarecer a dvida que restava

CO2 + gua + calor).

INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA

Ciclo de Krebs - Parte 1

BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1

Como vimos na aula anterior, o resultado da genialidade de Lavoisier, somada

CO2 + H2O + ENERGIA

Mas a histria no parou por a. A partir de agora voc conhecer outros

A HISTRIA DO CICLO DO CIDO CTRICO

em diferentes tecidos. Para esta finalidade, desenvolveu, por volta de

de cido lctico contm menos energia que a molcula de hexose

ALBERT VON SZENT-GYRGYI, Ph. D., M.D.

BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1

HANS ADOLF KREBS, um bioqumico alemo, testou os mesmos cidos