CARACTERSTICAS MORFOLGICAS

Y AISLAMIENTOS DE Cercospora sojina

Dra. Alicia Luque
CEREMIC
(Centro de Referencia de Micologa)
Fac. Cs. Bioq. y Farm. UNR
E-mail: agluquear@yahoo.com.ar

Taxonoma de Cercospora sojina Hara

Dentro del gnero Cercospora se han nombrado ms de 3000

especies (Pollack, 1987). Recientemente ese nmero fue
reducido a 659 especies (Crous & Braun 2003), con 281
especies consideradas morfolgicamente indistinguibles de
Cercospora apii

El gnero Cercospora es reconocido como uno de los

gneros ms grandes dentro de los Hyphomycetes

Taxonoma de Cercospora sojina Hara

Cercospora gnero de hongos anamrficos (asexuados) vinculado
con ascomicetes teleomorfos (sexuados) relacionados a
Mycosphaerella
CLASIFICACIN TAXONMICA:
Phylum : Ascomycota.
Clase: Dothideomycetes.
Orden: Capnodiales.
Familia: Mycosphaerellaceae.
Gnero: Cercospora .
Especie: sojina.
El estado sexuado de este hongo hasta el momento es desconocido.

Taxonoma de Cercospora sojina Hara

Cercospora sojina presenta gran nmero de razas que difieren en
su capacidad de causar enfermedad en un amplio rango de
genotipos de soja
Es un hongo genticamente muy variable

Esto nos indica la posible existencia de reproduccin sexuada

en C. sojina
Los estudios genticos realizados en Cercospora beticola
sugieren que algunas poblaciones se reproducen sexualmente
(Groenewald et al., 2007)

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Macromorfologa
APG

AZ

Temperatura: 25C 1C
Luz

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Micromorfologa
Conidiforos: 52-120 x 4-6 m

Conidios: 0-10 septos,

24-108 x 3-9 m
Rango ms frecuente:
40-60 x 6-8 m

Tamao y forma de los conidios y

conidiforos puede variar
dependiendo del sustrato

Chupp, 1953

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Micromorfologa: Conidios
Cercospora sojina

Conidios: 0-10 septos,

24-108 x 3-9 m

Cercospora kikuchii

Conidios: 0-22 septos, 50-375 x 2.5-5 m

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Lesiones foliares- Micromorfologa: Conidiforos

Conidiforos: 110 a 203 m.

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Lesiones foliares- Micromorfologa: Conidios

Conidios: 1-9 septos, 26-111

(47,3 14,7)5,2-7,4 m (6,1 0,7)

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojina

Aislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas

Transferencia directa de conidios, a medios de cultivo agarizados:
1. Se seleccionan las lesiones ms esporuladas de C. sojina y con el menor grado
de microorganismos contaminantes, observados bajo microscopio esterescpico.
2. Posteriormente se toman conidios con la aguja histolgica con un trocito de
medio de cultivo, dentro de una cmara de flujo laminar.

3. Se distribuye el trocito agarizado en forma de estras en una placa de APGS. Se

incuban a 25C 2C, con 12 hs de luz fluorescente y 12 hs de oscuridad.

Este mtodo ha demostrado ser el ms exitoso

Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojina

Aislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas

Trocitos de tejidos previamente desinfestados superficialmente :
I.

Aislar en medios de cultivo: APG 2% acidificado, Agar Extracto de

Tomate (AET) y Agar Caldo de Verduras (ACV).
Incubar a 26C 3C durante 48 hs en oscuridad y luego en
condiciones de mesada de laboratorio durante 10 das.

II.

Los trocitos de tejido vegetal se pueden colocar en cmara hmeda

para lograr fructificaciones del hongo a las 48 horas y transferir las
estructuras a medio de cultivo.

Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojina

Aislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas
Debido a que Cercospora sojina crece ms lentamente que otros
microorganismos contaminantes

Observar los cultivos cada 2 das, durante 10 das para detectar

colonias sospechosas de Cercospora sojina, las cuales deben ser
repicadas en forma inmediata

Mtodo de dilucin en placa

Cultivos puros
Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

Mtodos de conservacin de Cercospora sojina

Subcultivos peridicos
Crecimiento en medios de cultivo apropiados y transferencia peridica
a medio de cultivo fresco

En agar

En agua

Agar V8 a 25C en oscuridad transferido cada 30 da s,

para mantener la esporulacin

bloques de agar sumergidos

en agua estril
a temperatura ambiente

En agar bajo capa de aceite

columna de agar con

capa de aceite mineral

Luque, Tartabini, Lo Piccolo

Aislamientos argentinos de Cercospora sojina

depositados en la Coleccin de Cultivos del CEREMIC
147 aislamientos
Aislados de semillas: 9
Aislados de hojas: 138

4 2
28
63 19
31

Tucumn

Sgo. Del Estero

E. Ros

Sta. Fe

Crdoba
Bs. As.
Luque, Tartabini, Lo Piccolo

Aislamientos argentinos de Cercospora sojina

Caracteres morfolgicos
Condiciones de incubacin:

Medios de cultivo: Agar papa glucosa, Agar harina de avena, Agar zanahoria,
Agar hojas de zanahoria, Agar V8, Agar plantas senescentes de soja.

Temperatura: 25C 1C

Iluminacin: Luz continua, Luz oscuridad alternados, Oscuridad continua.

Obtener cultivos esporulados

 Mejorar la conservacin de los aislamientos

 Realizar ensayos de patogenicidad
 Estudiar el comportamiento de los genotipos de soja
 Realizar pruebas de fungitoxicidad para controlar al patgeno
La transferencia de conidios en lugar de micelio produce
cultivos ms esporulados
Luque, Tartabini

Aislamientos argentinos de Cercospora sojina

Caracteres macromorfolgicos
AZ

AV8

APG

Luz
Mayor velocidad
de crecimiento

Oscuridad

Aislamientos seleccionados de las distintas provincias

presentaron caracteres macromorfolgicos similares
Luque, Tartabini

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojina

Cultivos- Micromorfologa: Conidios
Conidios: 1-9 septos,
20-125 x 3-8 m
AZ AV8

Luque, Tartabini

Aislamientos argentinos de Cercospora sojina

Caracteres morfolgicos: micromorfologa
Temperatura: 25C 1C

Medios de cultivo
Cantidad de conidios
(Esporulacin)
Iluminacin

AZ
AV8
APG

Luz continua
Oscuridad continua

Longitud media: 48,8-62,7m

Conidios
Ancho medio: 5,0-6,4m
Aislamientos seleccionados de las distintas provincias
presentaron caracteres micromorfolgicos similares
Luque, Tartabini

Aislamientos argentinos de Cercospora sojina

Caracteres morfolgicos
SNA

Temperatura: 25C 1C
Luz

Luque, Tartabini

CARACTERSTICAS
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
MORFOLGICAS Y
Y AISLAMIENTOS
AISLAMIENTOS DE
DE
Cercospora
Cercospora sojina
sojina

Observacin:
Lupa estereoscpica
Microscopio

Reconocimiento de
caracteres morfolgicos de
Cercospora sojina

Aislamiento:
Obtencin de cultivos
puros y esporulados
Medios de cultivo
T. de incubacin
Iluminacin

Conservacin
adecuada

CARACTERSTICAS
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
MORFOLGICAS Y
Y AISLAMIENTOS
AISLAMIENTOS DE
DE
Cercospora
Cercospora sojina
sojina
Aislamientos de Cercospora sojina
Estudios taxonmicos

Taxonoma clsica
Taxonoma molecular

Ensayos de patogenicidad
Estudios del comportamiento de los genotipos de soja
Pruebas de fungitoxicidad

Realizacin de investigaciones con aislamientos locales

para dar soluciones concretas a nuestros problemas